• 张家口市区腹泻犊牛隐孢子虫感染情况调查

    秦建华,赵月兰,郝崇文,李成喜, 李东, 陈三合, 刘波

    张家口市区腹泻犊牛隐孢子虫感染情况调查以张家口市区3个奶牛场中1~5月龄具有腹泻临床症状的犊牛114头作为调查对象。收集腹泻犊牛粪便20g,加水60~80mL搅拌均匀,经200目铜网过滤,在1000×g下离心10min,弃去上清液,加饱和碘化钾溶液搅...

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  • 貉受精的细胞学和X射线微区分析研究

    冯怀亮, 陈大元, 秦鹏春,杨庆章,孙青原

    应用电子显微镜和X射线微分析技术,对貉受精过程和受精卵膜元素研究的结果表明,貉卵子的卵丘细胞具有吞噬和过滤功能;卵丘细胞间的精子顶体尚未发生囊泡化,而附着于透明带的精子发生了顶体反应,并以80°角穿入透明带,在其穿入的前方打开一个通道,最后穿过。穿过透明带的精子以赤道段或顶体后区同卵膜融合,并激发皮质颗粒释放,接着穿入卵内,最终发育成雌、雄原核。原核期受精卵质膜上具有高含量的钙,并呈集团分布,它在皮质颗粒胞吐释放中起着重要作用。

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  • 肌注狂犬病病毒糖蛋白cDNA小鼠产生抗糖蛋白抗体

    扈荣良,杜坚,涂长春,章金钢,侯世宽,殷震

    肌注狂犬病病毒糖蛋白cDNA小鼠产生抗糖蛋白抗体扈荣良,杜坚,涂长春,章金钢,侯世宽,殷震(农牧大学军事兽医研究所病毒室,长春130062)早在1979年,Israel等将感染性多瘤病毒基因组注入小鼠腹腔中,发现病毒基因组可在体内复制出感染性病毒颗粒...

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  • 水牛牛巴贝斯虫体外培养的研究Ⅱ.冷冻血清的应用和筛选

    赵俊龙,姚宝安,马丽华,刘钟灵

    应用冷冻血清对1株采自自然感染的水牛牛巴贝斯虫进行了长达72d的体外连续培养,共继代20次,培养72h红细胞染虫率最高达14.1%,平均为8%~10%。培养20d和30d的牛巴贝斯虫经液氮保存复苏后,接种于去脾水牛犊均引发了严重的牛巴贝斯虫病,从而说明已建立了水牛牛巴贝斯虫的体外连续培养,且经培养后的牛巴贝斯虫致病力没有改变。本试验利用6头份的冷冻健康水牛血清同时进行培养,结果发现,并非所有的健康水牛血清均适合于体外培养牛巴贝斯虫。这一发现对建立水牛牛巴贝斯虫的体外培养和研究水牛牛巴贝斯虫病均具有重要意义

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  • 牛烂蹄坏尾病致病弯角镰刀菌代谢产物分离鉴定

    蒋晓春, 张乃生,臧家仁,李毓义

    取金寨县耕牛烂蹄坏尾病致病弯角镰刀菌的玉米培养物,用丙酮提取,硅胶净化,制备型硅胶大板分离,得到无色针状结晶体,经质谱和红外光谱分析,并经相关谱图数据库联机检索、甄别,按其分子量、化学式及结构式确定为麦角甾醇,从而证实了致牛烂蹄坏尾病的弯角镰刀菌可产生麦角甾醇。

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  • 牛Y染色体特异DNA序列的体外扩增

    欧阳红生,张永亮,阮承迈,汪玉松,刘松财,张玉静,安铁洙

    本试验建立了用聚合酶链反应(Polymerasechainreaction,PCR)体外扩增牛Y染色体特异DNA序列的方法。在牛、山羊和绵羊Y染色体特异DNA同源序列高度保守区设计一对引物,两条引物均为20NT,对公牛Y染色体特异的307bp序列进行体外扩增。从屠宰的成年公牛、母牛肝提取DNA,用作PCR扩增的模板。PCR反应总体积为50μL,各成分含量为:25mmo1/LTris-HCI(pH8.2),25mmol/L(NH4)2SO4、2mmol/LMgCl2、0.1mg/mLgelatin、5%Formamide、lμg模板、引物各为25pmol、dNTP各为200μmol/L、DNA聚合酶2IU。反应在微机控制PCR仪上进行,采用92.5℃变性,55℃退火,72℃延伸,共35个循环。扩增产物在2%琼脂糖凝胶上电泳,用pGEM-7zf(+)Hae Ⅲ作分子量标准。电泳结果,公牛个体样品显示清晰可见的特异DNA扩增带,而母牛个体样品无扩增片段出现。扩增产物用PstⅠ酶解后出现3条区带,与预期结果一致。

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  • 犬瘟热荧光抗体技术的应用研究

    袁书智,夏咸柱

    用硫酸铵盐析法和蔗糖梯度离心法,从犬瘟热病毒人工感染犬的肝、脾中浓缩提纯犬瘟热病毒,以其免疫家兔,制备兔抗犬瘟热病毒免疫血清,再经硫酸铵沉淀与QAE-葡聚糖凝胶A50层析提取IgG,于4℃低速搅拌标记异硫氰酸荧光素,制成兔抗犬瘟热病毒抗原荧光抗体。用上述荧光抗体检测21只犬瘟热病毒人工感染犬和35只自然感染犬的116份白细胞,抗原阳性109份,而健康犬、传染性肝炎犬、犬细小病毒肠炎犬的37份血液白细胞,全部为抗原阴性。另外,用同样染色法检查了25份犬瘟热死亡犬脾细胞涂片,有23份为抗原阳性;而健康犬、传染性肝炎犬和犬细小病毒肠炎犬的17份脾细胞涂片无一为抗原阳性。对141份犬瘟热病犬标本,用电镜或病毒分离证明为犬瘟热病毒抗原阳性的有138份,直接FA染色法检查也为抗原阳性的有132份,敏感性为95.7%;经电镜检查或病毒分离证明为抗原阴性的57份标本,直接FA染色检查全部为阴性,特异性为100%。用直接FA染色法和以细胞病变(CPE)为感染指标的TCID50检测法对35份犬瘟热病毒鸡胚成纤维细胞(CEF)培养物的毒力进行检测,结果分别平均为4.85和4.72log10/0.1mL但直接FA染色法比CPE客观?

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  • 多杀性巴氏杆菌X73株与P1059株原生质体融合株的构建

    王兴龙,刘玉斌,冯来坤

    将多杀性巴氏杆菌X73株(PmR、TcS)与p1059株(TcR、PmS)作为亲本,在脱氧核糖核酸酶(DNase)存在的条件下,以PEG作为助融剂,进行原生质体融合,然后于高渗琼脂平板上再生细胞壁,再转种在含四环素(Tc)和多粘菌素B(Pm)的双抗培养基上检出融合株。获得的4个融合株,形态及染色特性、生化反应、毒力等均符合多杀性巴氏杆菌的特性;具有双抗药性和两亲本株的抗原组分,说明两种细菌细胞发生了融合和染色体重组。经多次传代证明融合株是稳定的。

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  • 东北细毛羊发情和排卵规律的研究

    谭景和,刘瑞祥,周琪,贺桂馨, 张秋明,徐丽滨,张春生,秦鹏春

    本实验系统观察了东北细毛羊的繁殖季节开始时间、发情周期长度、发情持续时间、排卵时间及早期胚胎发育进程等。结果表明:(1)在黑龙江地区大多数(70.3%)东北细毛羊于7月21日至8月9日开始发情季节,也即于夏至后1个月至50d内开始发情;(2)发情周期平均长度16.63±0.84d,80%的羊为16~17d,方差组分估计和F检验判断,发情周期长度在羊个体间和个体内的差异均不显著;(3)平均发情持续时间38.34±13.73h,85%的羊为24~48h,方差组分估计和F检验证明,发情持续时间的个体差异显著且个体间差异显著大于个体内差异;(4)发情开始后26~35h排卵;(5)发情51h胚胎处2.细胞期,66~72h处4~6细胞期,76~81h处8-细胞期。

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  • 对我国兽医科学研究的思考

    金家珍

    对我国兽医科学研究的思考金家珍(北京农业部畜牧兽医司科技处100026)兽医科学技术对促进畜牧业生产,保障人民健康,以及发展生命科学,都具有非常重要的作用。畜牧业生产越是发展,生产技术的现代化程度越高,兽医科学技术的重要性和必要性越加明显。兽医科学技...

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  • 用DIG-标记核酸探针鉴定传染性法氏囊病病毒

    王永山,周宗安,翟春生,王元伦,方元,顾志香

    用DIG-标记IBDVcDNA探针进行斑点杂交试验鉴定传染性法氏囊病病毒(IBDV)。实验结果证明,该探针能与试验的10株IBDV的RNA发生限性杂交反应,结果清晰稳定,无非特异性反应。本试验是一种新的敏感的IBDV鉴定方法。

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  • 竞争间接ELISA检测谷物饲料中的玉米赤霉烯酮

    王景琳,张志东,尹世兴

    应用抗玉米赤霉烯酮单克隆抗体(ZEN-McAb)建立了竞争间接ELISA,用以检测玉米、小麦、饲料中的玉米赤霉烯酮(ZEN),最低检出量为0.05ng/mL检测范围为0.05~500ng/mL。检测掺合ZEN(25~500ng/g)的小麦、饲料、玉米样品,平均回收率,玉米为105.8%、小麦为90%、饲料为103.9%;平均批内和批间变异系数,玉米为3.8%、5.8%,小麦为12.7%、28%,饲料为15.2%、6.8%。对玉米、小麦、饲料自然样品检测,竞争间接ELISA的检出率高于薄层色谱(TLC),检测程序简易快速。

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  • 颗粒细胞制备单层细胞时其浓度对牛早期胚胎体外发育的影响

    文国艺,卢克焕

    应用颗粒细胞制备单层细胞时,将其浓度分为8组:64×106、32×106、16×106、8×106、4×106、2×106、0.5×106、0个/mL,观察了不同浓度颗粒细胞对体外受精早期胚胎体外发育的影响。试验结果表明,制备单层细胞的适宜颗粒细胞浓度为(0.5~32)×106个/mL,其中16×106个/mL浓度组的囊胚率为42.3±8.0%,明显高于对照组(22.7±8.3%)及64×106个/mL浓度组(25.2±12.O%)(P<0.01)。就发育速度和胚胎质量而言,该组胚胎的发育较快且质量较好,而且标准差反映批与批之间结果较为稳定,是理想的做单层浓度。

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  • 鸡病毒性关节炎弱毒疫苗的研制Ⅰ.弱毒株的筛选及其对雏鸡的安全性

    唐雨德,周宗安,翟春生,王元伦,顾志香

    将鸡病毒性关节炎病毒(AVAV)鸡胚毒J─1株适应于鸡胚细胞和Vero细胞,经连续传代,通过40.5℃、37℃、32℃的交替升降培养温度培养,筛选出1株毒力较弱的克隆株,该克隆株蚀斑大小为2.7~3.1mm。以105.725TCID50注射于1日龄敏感雏鸡的足掌皮下和以104.725~106.725TCID50注射于1日龄敏感雏鸡胸部肌肉内,对雏鸡无致病性。该克隆株在敏感雏鸡内连传3代,无毒力返强现象。这一结果表明,本试验筛选出的AVAV弱毒株对雏鸡具有良好的安全性和遗传稳定性。

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  • 强啡肽A_(1-13)免疫反应神经元在鸡脑的定位──ABC法研究

    刘波,范业萍,赖良学,程怀江,杨维太

    取健康成鸡(星杂288)10只,经秋水仙素处理,灌流固定后取脑,作冰冻连续切片,ABC法显示,鸡脑强啡肽A1-13(DynA1-13)免疫反应神经元分布于端脑的上纹状体、新纹状体、旧纹状体、外纹状体、海马、旁嗅区和伏隔核;间脑的下丘脑外侧核、丘脑背内侧核后部、丘脑背外侧核后部、室旁核和视前大细胞核等;中脑和延髓的视峡核、中脑外侧核背侧部、峡核、视叶脑室室周灰质、螺旋外侧核、被盖背外侧核、三叉神经中脑核、动眼神经核、中脑中央灰质、前庭核和延髓背侧网状核等。在侧脑室、第三脑室、中脑导水管和视叶脑室的室管膜上有阳性细胞和纤维分布,与脑脊液接触。结果表明,鸡脑DynA1-13阳性神经元分布十分广泛,提示DynA1-13可通过侧脑室、第三脑室、中脑导水管和视叶脑室释放入脑脊液。

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  • 山羊黄体孕酮分泌的特点

    黄群山,张家骅,王建辰

    在山羊发情周期的第10d和第17d,分别给2只和1只山羊安置颈静脉导管和后腔静脉导管,以20min间隔连续采样24h。然后,将1只黄体中期羊卵巢摘除;给另1只黄体中期羊经静脉导管注射15-甲基PGF2a,每小时注射1次,每次240μg,连续7次。3只羊都继续采样。每次都同时采取颈静脉和后腔静脉血样,用RIA法测定血浆孕酮(P4)水平。结果表明,山羊血浆P4水平没有昼夜节律;后腔静脉血浆P4水平有明显的波动,并高于颈静脉血浆P4水平(P<0.0l);黄体溶解和卵巢摘除后,颈静脉和后腔静脉血浆的P4水平先后降到1ng/mL以下。由此证明,山羊P4是由黄体波动性地分泌的。

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  • 牛雄性特异性DNA片段的分子克隆

    许罕华,葛宝生,周鼎年,朱裕鼎,高昌恒, 沈孝宙,刘冬梅,剧冬红

    根据小牛胸腺DNA复性动力学原理,采用改进的“删除富集法”,对Y特异性DNA片段进行富集。以pUC18为宿主菌,构建成富集有Y特异性的部分Y染色体文库。分别以牛雄性和雌性基因组DNA为探针,对克隆子进行“差异筛选”,筛选到若干个雄性特异性信号。对其中1个克隆子进行分析鉴定,测得其插入片段大小约为1.4kb。将其标记成探针。命名为P-d。分别与20个公牛基因组DNA样品和8个母牛基因组DNA样品杂交,阳性信号符合率为85%,阴性信号符合率为87.5%。初步证明P-d具有雄性特异性。研究表明,用本实验方法所克隆到的雄性特异性DNA探针鉴别牛胚胎的性别是可能的。

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  • 人肿瘤坏死因子α逆转录病毒表达载体的构建

    黎诚耀,韩文瑜,高荣凯,王世若,费恩阁,陈文宫

    应用pBluescriptllks质粒构建了含人肿瘤坏死因子-α cDNA的过渡性载体pBT1和pBT2。用限制性内切酶BamHI与EcoRV消化pBT1DNA,分离出了TNF-α cDNA基因片段,并在其平末端加入了BamHI接头。进而将带有BamHI粘性末端的TNF-αcDNA克隆到了逆转录病毒载体pZIPNeoSV(X)15′-端长末端重复序列(LTR)下游的BamHI切点上,构建了重组质粒pZIPTNF。该重组质粒经琼脂糖凝胶电泳,限制性内切酶消化和核酸杂交鉴定分析,证明pZIPNeoSV(X)1中插入了TNF-α cDNA,并且方向正确。本研究为应用重组逆转录病毒介导TNF-α基因转移与治疗奠定了基础。

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  • 检测抗原抗体反应的新制剂──胶体金探针

    常国权,杨盛华

    检测抗原抗体反应的新制剂──胶体金探针常国权,杨盛华(长春农牧大学军事兽医研究所130062)胶体金作为透射电镜的特异性示踪物始于1971年[1];作为扫描电镜示踪物始于1975年[2]。后来,胶体金示踪系统又相继被用于光镜[3]、荧光显微镜[4]以...

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  • 受精用液种类对牛卵母细胞体外受精的影响

    谭世俭,卢克焕

    比较了应用改良Tyrode′s液(简称T,对照组)与0.6%BSA-TCM199(简称BT)作为受精液(实验1)、这两种受精液的不同配比作为受精液(T:BT分别为3:1、1:1和1:3;T为对照组,实验2)和在不同受精时间采用不同受精液(先用T,IVF24h后改用BT或TCM199+10%发情牛血清,实验3),对经体外成熟培养(IVM)后的牛卵母细胞体外受精(IVF)效果的影响。结果,应用成分复杂的BT作为受精液,可以提高受精卵体外囊胚发育率(55.2%,对照组为37.1%,P<0.01);但受精卵卵裂率(41.8%)却极显著地低于对照组(79.4%,P<0.001);当应用T:BT为3:1和1:1的混合液作为受精液时,受精卵仍保持较高的囊胚发育率(分别为53.1%和57.4%,对照组为42.2%);而受精卵卵裂率(分别为79.1%和67.0%)虽比对照组(84.5%)低,但明显高于单纯用BT组(41.8%),从而使总的囊胚率得到提高。而在IVF24h后用BT或TCM199+10%发情牛血清将原先受精用的T液更换,再继续进行20h或46h的受精培养,则对体外受精无任何改善作用。结果说明,在现行使用的、成分简?

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  • 乳糖不耐受症

    张乃生,李毓义

    乳糖不耐受症张乃生,李毓义(长春农牧大学兽医学院130062)乳糖不耐受症,即乳糖酶缺乏症(lac-tasedeficiency),又称乳糖吸收缺陷(de-fectivelactoseabsorption),是小肠粘膜乳糖酶活性低下所致的乳糖消化吸收...

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  • 鸡T淋巴细胞IL-2的体外诱生及活性检测

    李庆章,刘忠贵

    经L16(45)正交试验选择,并经实验验证,鸡脾脏T淋巴细胞白细胞介素2(IL-2)体外诱生和活性检测的最优水平组合及适宜条件为2.5μg/mL伴刀豆蛋白A(ConA)、IL-2体外诱生时间20h、1×107/mL淋巴细胞、10%小牛血清、靶细胞培养时间48h、4×106/mL靶细胞、靶细胞接触时间36h、5mg/mLMTT、MTT加入时间3h和甲溶解时间2h;胸腺T淋巴细胞IL-2体外诱生和活性检测的最优水平组合及适宜条件为5μg/mLConA、IL-2体外诱生时间48h,余同脾脏T淋巴细胞IL-2体外诱生及活性检测。比较试验表明,MTT比色分析法和3H-胸腺嘧啶核苷(3H-TdR)掺入法有显著的直线回归关系。

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  • 鸡传染性法氏囊病双抗体夹心Dot─ELISA诊断法的建立及应用

    张春杰,郑祥海,程相朝

    以醋酸纤维素膜作为固相载体,辣根过氧化物酶标记鸡抗传染性法氏囊病病毒抗体(IBD—IgG),饱和二氨基联苯胺为底物显色,建立了鸡传染性法氏囊病双抗体夹心Dot—ELISA诊断法。经方阵实验确定最佳反应条件为:IgG的包被液为0.05mol/L(pH9.6)碳酸盐缓冲液,包被浓度为1:50;酶标抗体的工作浓度为1:100;洗涤液为含0.05%吐温—80的0.02mol/L(pH7.4)磷酸盐缓冲液;封闭液为含0.2%明胶的洗涤液;封闭时间、抗原及酶标抗体的作用时间均为37℃30min。应用本方法和琼扩试验同步检测20份已知阳性病料、120份待检病料和胚毒尿囊液、10份正常鸡样品,结果表明,Dot—ELISA阳性率为90%,而琼扩试验为40%;凡琼扩试验阳性者,Dot—ELISA均呈强阳性,而在Dot—ELISA阳性样品中,只有44%呈琼扩试验阳性,Dot—ELISA的敏感度为琼扩试验的100倍。

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  • 兔脑炎原虫病脑组织的病理形态学观察

    潘耀谦,苏维萍,刘纯杰,李普霖

    兔患脑炎原虫病时脑组织的病损主要是特异性肉芽肿和非化脓性脑炎。肉芽肿有3种类型:即上皮细胞性、增生性和坏死性肉芽肿。非化脓性脑炎有局灶性和弥漫性之分。隐性感染病兔的肉芽肿主要位于脑白质,肉芽肿周围有局灶性非化性脑炎变化。有症状病兔的肉芽肿不仅存在于白质,而且累及灰质;非化脓性脑炎弥漫性发生。在脑血管的内皮细胞中发现假囊,小血管中有血栓形成;受累的神经细胞中发现有较多量的脑炎原虫。

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  • 流行性出血热病毒气溶胶感染乳鼠的免疫病理学研究

    遇秀玲,李劲松,郑振峰,田克恭,车风翔,鹿建春

    采用免疫组化BA法,对流行性出血热病毒(EHFV)气溶胶感染乳鼠脏器组织中的病毒动态分布进行了观察,并对其抗体消长进行了测定。结果表明:①BA法为病理诊断EHFV感染提供了一种准确的手段;②EHFV可通过气溶胶途径感染乳小鼠,乳小鼠感染EHFV的LD50值可作为环境浓度的参考值;③EHFV气溶胶途径感染乳鼠后,4h即可在心、肺,1d在嗅球部检出,并可在其组织细胞中增殖,经血循、嗅神经、单核巨噬细胞系统等多途径扩散,造成多组织脏器的泛发性感染。感染后12~14d,病毒检出率和病毒量均达峰值。动物自身免疫系统对EHFV有一定的清除能力;④感染乳鼠脑、肺、肾等脏器组织的病变与人类感染EHFV的病变有一定的相似性,提示可作为人EHFV的模型动物;⑤抗原检出率高于抗体检出率,ELISA法检出率高于IFA法检出率。

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  • 复合酶制剂对尼克蛋鸡蛋重影响的函数模型

    刘静波,牛淑玲,王遂秋,陈成功

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    1994年02期 [查看摘要][在线阅读][下载 97k]
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    1994年02期 [查看摘要][在线阅读][下载 222k]
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