• 鸡减蛋综合征病毒分离株AA-2基因组Hind Ⅲ酶切部分片段的分子克隆

    胡敬东,章金钢,陶全福,李红卫,扈荣良,金扩世,涂长春,殷震

    以非免疫鸭胚增殖的减蛋综合征病毒(EDSV),经差速离心法纯化,电镜下观察到病毒无囊膜,大小为70~85nm。以蛋白酶K法抽提病毒基因组,琼脂糖凝胶电泳只出现1条分子量约34kb、背景清晰的核酸带。HindⅢ酶切EDSVDNA可见10条片段,以pUC19质粒为载体,采用鸟枪法对病毒基因组的HindⅢ酶切片段进行分子克隆,获得17个重组质粒,通过酶切、斑点杂交鉴定,证实已经成功地克隆到EDSV的5.24kb、2.02kb、1.65kb、1.47kb、1.41kb等5个DNA片段。

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  • 用快中子辐照的碳纤维编织物诱发关节软骨再生

    董常生,高贵民,郭瑞英

    采用快中子辐照的碳纤维编织物,填充到实验兔膝关节软骨面缺损处,将实验兔分期分批剖杀,用肉眼、光学显微镜和扫描电子显微镜对再生的部分进行了观察。结果表明,碳纤维编织物可以诱发软骨组织再生,以其作为填充物是治疗因软骨损伤而导致的关节僵直的理想生物材料。

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  • 一种新的DNA回收方法

    王廷璞,薛双虎,吕武夫,孙春香

    一种新的DNA回收方法笔者用自制的DNA回收管,从琼脂糖凝胶中回收不同分子量的DNA片段,回收率在80%以上,操作简便,且可反复进行。回收的DNA片段,不论进行酶切分析还是重组克隆,其成功率均较高。1回收管的制作将100μL移液器吸头用刀片截去尖端部...

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  • 猪运输应激血液生化指标变化

    高得仪,韩博,王清兰,焦淑贤

    4月龄猪8头(24,早4),在最高气温30℃下,用汽车运输4h多(约160km)。运输前和运输后连续5d采集静脉血液,进行主要生化指标检验。结果:与运输前相比,血清总蛋白和球蛋白在运输停止时升高(P<0.01),运输停止后第1~5天降低(P<0.01);尿素氮和甘油三酯运输后第1~2天升高;血清钠运输后第1~3天降低,血清钾运输后第1~5天降低(P<0.01);血清CK和AST在运输停止时和运输停止后第1天活性升高,LDH只能保持1d活性升高;血清白蛋白、葡萄糖、胆固醇、无机磷、皮质醇和血乳酸运输后都有不同程度升高,但统计学检验差异不显著。

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  • 牛蛙爱德华氏菌病病理形态学研究

    肖克宇,舒新华,陈可毅,金燮理,黄志坚

    牛蛙爱德华氏菌病的主要眼观病变是病牛蛙全身肿胀,腹部膨大,腹腔积液,躯体或四肢有时可见充血或炎性反应。主要组织学所见是肝、肾、心等脏器实质细胞变性、坏死以及呈渗出性和纤维素性炎症变化。

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  • 我国药业发展道路的探讨

    淡伦

    我国药业发展道路的探讨淡伦(解放军农牧大学军事兽医研究所,长春130062)我国药业属仿制型。有资料统计表明,生产的3000多种西药99%是仿制的,1992年生产的783种西药仿制率为97.4%。根据1992年1月17日签署的“中美知识产权谅解备忘录...

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  • 鸡溶菌酶基因3'端MAR在同源细胞系对基因表达调控的研究

    许罕华

    用带有鸡溶菌酶基因增强子(E)和启动子(P)的编码细菌氯霉素乙酰基转移酶(CAT)的融合基因(EPC),在其上游区、下游区或在上游和下游区同时插入鸡溶菌酶基因3'端核基质附着区(MAR)的不同表达载体MEPC、EPCM和MEPCM,稳定转染鸡HD11Promacrophage同源细胞系,筛选不同表达载体稳定整合后的细胞株,检测CAT表达水平,确定其表达基因拷贝数,从而分析鸡溶菌酶基因3'端MAR对基因表达的影响。稳定整合表达和瞬时表达实验结果表明,鸡溶菌酶基因3'端MAR在同源细胞系对基因表达没有激活作用,与该基因5'端MAR在同源或异源细胞系中能激活基因表达形成鲜明对照,说明5'瑞MAR和3'端MAR在调节鸡溶菌酶基因表达上存在一种协调关系。

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  • 中国发现澳洲长尾小鹦鹉幼雏病

    吴延功,张子春,王玉东,蒋贻海,王永玲,李庆路,王树双,吴时友

    1994年7月以来,青岛地区爆发流行一种以15~30日龄幼雏鹦鹉呈腹泻、羽毛发育障碍为临床特征的急性、高度致死性传染病。病理组织学检查,可在呈大理石样病变的肝组织、肾病变组织和肠上皮细胞内看到核内包涵体。取病变内脏,经磨碎、超声波处理、离心等系列处理后,经负染于电镜下可看到直径45~55nm圆形病毒颗粒,病毒形态与乳多空病毒相似。将组织悬液接种于鹦鹉胚成纤维细胞,盲传4代后即可见到细胞病变(CPE)。CPE表现为细胞肿大、变圆、脱落,HE染色可见到病变细胞内有核内包涵体。将细胞培养物接种于1日龄鹦鹉,能复制出与自然病例相似的临床症状。初步研究结果表明,青岛地区目前流行的此种传染病为澳洲长尾小鹦鹉幼雏病,是由乳多空病毒科的多瘤病毒引起的。

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  • 鸡新城疫和减蛋综合征异源二联灭活疫苗研究

    姜平,陈溥言,朱琴亚,朱爱国

    将鸭源新城疫(ND)病毒D_(10)株和减蛋综合征(EDS-76)病毒GC_2株于同一鸭胚同时增殖,用甲醛灭活后加入10号白油制成ND和EDS-76异源二联灭活疫苗,简化了生产工艺,降低了成本,克服了鸡胚苗潜伏带毒的危险。经20余万只鸡试用,表明该疫苗可有效预防ND和DES-76。

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  • 伪狂犬病病毒糖蛋白gp50基因的克隆和表达

    娄高明,郭万柱,韩素文,张宏权,王新平,费恩阁

    从包含伪狂犬病病毒(PRV)闽A株BamHI-7片段的重组质粒pPR128中分离出含有完整糖蛋白gp50基因的2.1kbDNA片段,用KpnI和StuI酶切后,将其酶切片段分别克隆到pUC19载体中,构建了2.1kb片段完整测序用质粒。对其序列进行分析,发现与文献报道结果一致,证明分离的gp50基因是正确的。将包含gp50基因的2.1kb和1.6kbDNA片段分别插入带有痘苗病毒天坛株TK基因区段的pGJP-5质粒P7.5启动子的下游,构建了pGBT50-36和pGBT50-S22个嵌合载体。将嵌合载体通过磷酸钙共沉淀法转染预先感染TK+痘苗病毒天坛株的人TK-143细胞或CV-1细胞,进行体内同源重组。经蚀斑纯化,在BdUR选择压力下,通过光敏生物素标记的探针杂交,获得带有PRVgp50基因的重组痘苗病毒。用ELISA检测,重组痘苗病毒有特异性PRVgp50抗原存在。

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  • 鸡痘病毒282E_4株TK基因重组载体质粒的构建

    顾万钧,金宁一,殷震

    应用已克隆的鸡痘病毒(FPV)282E_4株基因组TK基因,在NcoⅠ部位引入痘苗病毒P7.5启动子和P11启动子控制下的大肠杆菌LacZ基因,经酶切鉴定,成功地构建了用于FPV重组的载体质粒。与亲本毒株在鸡胚成纤维细胞内共转染,产生了表达LacZ基因的重组鸡痘病毒。经传代筛选、纯化,重组病毒较稳定。实验结果表明,以TK基因构建的重组载体质粒可用于外源基因的重组表达研究。

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  • 禽源大肠杆菌O2、O78分离株外膜蛋白型的研究

    高菘,刘秀梵,张如宽

    从17个禽大肠杆菌病病例的O2、O78分离株提取的主要外膜蛋白(OMF),在SDS-pAGE中出现了2个OMP型。其中,9个O2分离株属2个OMP型,8个O78分离株均属其中的1个OMP型。结果表明,分离到的O2、O78大肠杆菌具有多样性的OMP型,而且两者存在着共同的OMP型。

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  • 多聚酶链反应区分血清Ⅰ型MDV强弱毒株

    卢春,陈溥言,蔡宝祥

    选用血清Ⅰ型马立克氏病病毒(MDV_1)基因组中位于132bp正向重复序列两侧的2段寡聚核苷酸为多聚酶链反应(PCR)的引物,分别对Ⅰ型MDV强毒株(京-1株)和弱毒株(Md11/75C株)的核酸进行基因扩增。结果显示:该弱毒株核酸基因中含6个或更多个拷贝数的132bp正向重复序列,而强毒株核酸基因中仅含2个,相同引物对Ⅱ型、Ⅲ型MDV(SB-1株,Fc126株)和禽网状内皮组织增生病病毒(REV)核酸作PCR扩增,未检出任何核酸片段。

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  • 用PCR检测副溶血性弧菌耐热溶血素基因

    周志江,刘纯杰,黄上媛,中野克重,佐藤久聪,齐藤博

    根据副溶血性弧菌的耐热溶血素基因(tdh)设计了2对引物,经聚合酶链式反应(PCR)检测,所有18株神奈川试验阳性副溶血性弧菌均呈阳性反应,而6株神奈川试验阴性副溶血性弧菌呈阴性反应,其他9种(34株)弧菌和8株其他革兰氏阴性菌也呈阴性反应。检测敏感性可达2CFU的副溶血性弧菌。

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  • 家兔胚源性特异蛋白-1的分离纯化及其理化性质

    杨在清,王建辰

    经SephadexG75和PAGE从家兔早孕期子宫液中分离纯化了一种胚源性特异蛋白质。分析表明,该蛋白质分子量为53800,pI为5.8,N-末端为赖氨酸,分子中不含糖、脂成分,但富含异亮氨酸、亮氨酸,缺乏半胱氨酸。

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  • 消炎痛抑制山羊黄体溶解

    黄群山,张家骅,王建辰

    在山羊发情周期第16~21天,每天给4只山羊按每公斤体重注射消炎痛12mg;另4只山羊注射相应体积的玉米油作为对照,用血浆孕酮水平来监视黄体溶解过程。将血浆孕酮水平降到每毫升1ng以下的时刻定为黄体完全溶解的时间。对照组山羊的黄体在周期的19.7d完全溶解;处理组山羊的血浆孕酮水平到周期的第22天时仍无明显的下降趋势。每天按每公斤体重注射12mg消炎痛完全阻止了山羊的黄体溶解。

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  • 雏鸡感染马立克氏病病毒后免疫器官组织抗体生成细胞的变化

    高荣,刘忠贵

    以马立克氏病病毒(MDV)感染1日龄肉用雏鸡,在感染后5、25、45d采取法氏囊、脾脏、盲肠扁桃体和哈德尔腺,用彩色免疫金银染色法检查免疫器官组织中IgG、IgM和IgA抗体生成细胞数量的动态变化。结果:MDV感染雏鸡的法氏囊、脾脏和哈德尔腺中以IgG抗体生成细胞居多,IgG、IgM和IgA抗体生成细胞均较正常对照鸡显著减少;盲肠扁桃体中以IgA抗体生成细胞居多,IgA、IgG和IgM抗体生成细胞数量显著低于正常对照鸡。由此表明,MDV感染鸡全身免疫器官和消化道、呼吸道局部粘膜体液免疫机能明显抑制。

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  • 感染鸡传染性贫血病毒雏鸡局部体液免疫球蛋白含量变化

    郑世民,刘忠贵

    1日龄雏鸡感染鸡传染性贫血病毒(CIAV)后,对其泪液、气管液、肠液和胆汁的IgG、lgM、IgA含量的动态变化进行了检测。结果发现,感染雏鸡泪液、气管液、肠液和胆汁的免疫球蛋白含量均程度不同地低于未感染CIAV的对照雏鸡,其中泪液的IgG、IgM、IgA含量分别在14~35日龄、7~28日龄、21~28日龄明显减少(P<0.05或P<0.01);气管液的IgG、lgM、IgA含量分别在14~35日龄、7~21日龄、14~21日龄明显减少;肠液的IgG、IgM、IgA含量分别在7~28日龄、7~14日龄、7~28日龄明显减少;胆汁的IgG、IgM、IgA含量分别在7~28日龄、7~28日龄、14~28日龄明显减少。由此表明,感染雏鸡眼部、呼吸道和消化道局部体液免疫功能呈现抑制状态。

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  • 硒增强雏鸡对IBD抵抗力机制的细胞免疫研究

    步志高,黄克和,陈万芳

    为了解硒对雏鸡传染性法氏囊病(IBD)抵抗大的影响及其细胞免疫机制,自1日龄起给雏鸡分别饲喂基础(含硒0.086mg/kg)、补硒0.3mg/kg和0.6mg/kg的不同日粮,于49日龄采用微量全血培养 ̄3H-TdR掺入法测定其中自然发生IBD后第10天和正常对照雏鸡的T淋巴细胞转化率,并计算IBD鸡死亡率。结果,两补硒组IBD雏鸡死亡率显著低于基础日粮组IBD雏鸡(P<0.01);IBD明显抑制雏鸡T淋巴细胞转化率(P<0.05;P<0.01);补硒的正常对照雏鸡和IBD雏鸡T淋巴细胞转化率分别高于各自基础日粮雏鸡(P<0.05;P<0.01)。结果显示补硒可提高雏鸡细胞免疫功能,从而增强雏鸡对IBD抵抗力,降低雏鸡死亡率。

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  • 细胞培养的脑炎原虫感染家兔实验

    潘耀谦,苏维萍,刘纯杰,李普霖,夏志平

    用在体外连续培养10代的兔脑炎原虫,接种于12只家兔,动态地观察了脑炎原虫对家免的感染情况。实验发现,肾脏产生的病变明显早于大脑,即感染3周后,用Gram's和Goodpasture's染色,即可在髓袢和远曲小管内脱落的上皮细胞中发现兔脑炎原虫。6周后即可见到间质性肾炎变化,而脑组织于感染9~12周时才见有细胞性肉芽肿的形成;脑炎原虫具有较强的抗原性,即在感染3周后,血液中的抗体含量足以进行诊断。

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  • 普氏野马头骨和牙齿研究

    肖方,张金国,黄世强,张成林,李辉

    研究了北京动物园保存的4例(♂2、♀2)普氏野马的头骨和牙齿,同时与9例(♂4、♀5)西藏野驴、4例(♂2、♀2)斑马的头骨和牙齿作了比较。结果:普氏野马在鼻骨、泪骨、腭正中缝、下颌骨腹缘面上,以及原尖、马刺、齿棱、齿槽等方面,都具有区别于西藏野驴、斑马的形态特征。

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  • 被毛突变无毛小鼠皮肤及毛结构观察

    遇秀玲,李善如,吴娜

    对国内首次发现并培育成群的BALB/c突变小鼠的3种表型(无毛、全毛、中间态)的皮肤组织及毛结构进行了观察。结果表明,无毛小鼠仅具有非常短(1~2mm)、细且弯曲的绒毛,其毛于中心为空泡状,缺乏髓质。无毛小鼠表皮、真皮、皮下组织结构基本与全毛、中间态小鼠相同,但其毛生长周期不健全;毛球位置浅表,数目少,排列不规则;皮脂腺异常增生。推测其被毛结构异常是由毛自身结构异常所致。该小鼠外观似裸鼠,能在普通条件下生长繁殖,可望成为某些皮肤病等研究的动物模型。

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  • 飞片法检测脑多头蚴细胞系(26N)染色体

    谭蓉芳,郭中敏,王光雷,玛利亚木,谭立新,努素甫·艾力,郭固

    飞片法检测脑多头蚴细胞系(26N)染色体谭蓉芳,郭中敏,王光雷,玛利亚木,谭立新,努素甫·艾力,郭固(新疆畜牧科学院兽医研究所,乌鲁木齐830008)我们以磨滤的绵羊脑多头蚴材料进行细胞初培养,并成功地将其进行了传代培养,截止1993年12月3日已传...

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  • 氟喹诺酮类抗菌药在动物上的应用

    王建元,刘玉年

    氟喹诺酮类抗菌药在动物上的应用王建元,刘玉年(西北农业大学,陕西杨陵712100)含4-喹诺酮母核的合成抗菌药称喹诺酮类(quinolones),萘啶酸和恶喹酸是最早应用的本类药。它们对革兰氏阴性菌有作用,对绿脓杆菌无作用,在体内分布容积有限,称一代...

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  • 动物毛霉菌病

    李国勤

    动物毛霉菌病李国勤(陕西省畜牧兽医研究所,陕西咸阳712039)毛霉菌病(mucormycosis)是由毛霉菌科(Mucoraceae)霉菌引起的真菌性疾病,世界各地均有发生。已见于人、马、牛、羊、猪、狗、猴、猫、鸟类以及实验动物小鼠、家兔等。1病原...

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