我国部分地区猪瘟病毒流行株的基因差异

采用 RT-PCR方法 ,从我国 1 0个省、市、自治区收集的 2 3个猪瘟病毒 ( CSFV)流行毒株中 ,扩增了CSFV E2基因中主要抗原位点编码区。对各扩增片段进行了序列测定 ,通过计算机分析构建了系统发生树 ,并确定了它们间的遗传相关性。结果表明 ,2 3个流行毒株中的 1 8株属基因 群 ,占 78.2 6%;另外 5个流行株与传统石门强毒、兔化弱毒株属基因 群 ,占 2 1 .74 %。两群间测序区的核酸同源性只有 78.90 %。此外 ,根据序列差异程度 ,将基因 群流行株分为 3个亚群 ,各基因群 CSFV在地域分布上未发现有明显的特征性。本研究初步揭示了我国较大范围内流行的 CSFV毒株与传统的石门强毒和疫苗用兔化弱毒在抗原基因上存在较大的差异 ,以及我国猪瘟病毒流行株在地域分布上的多样性

IBDV VP2/VP243基因DNA疫苗表达质粒的构建与表达

将传染性法氏囊病病毒 ( IBDV) VP2 /VP2 4 3插入真核表达载体 pc DNA中 ,置于 CMV启动子的调控之下 ,构建成 DNA疫苗表达质粒 pc DNA VP2和 pc DNA VP0。分别转染 CEF细胞后 ,于 2 4、4 8、72 h取细胞裂解液进行 ELISA、SDS-PAGE和 Western blot检测 ,pc DNA VP2于转染后 2 4 h呈阳性反应 ,4 8h表达量高于 2 4 h;pc DNA VP0于转染后 4 8h呈阳性反应 ,72 h表达量高于 4 8h

新城疫病毒昌黎株与国外毒株HN蛋白基因核苷酸及氨基酸差异性分析

参考国外发表的新城疫病毒 ( NDV)的 HN基因序列设计了 1对特异性引物 ,应用 RT-PCR对 NDV昌黎株 (野毒 )的 HN基因进行了扩增 ,扩增产物克隆后测序。扩增出的 HN基因核苷酸长度为 1 74 2 bp,编码 571个氨基酸 ,序列中有 6个糖基化位点 ,1 3个半胱氨酸残基 ,与国外发表的强毒株序列相符。核苷酸同源性在 88.5%～ 92 .9%,推导的氨基酸序列同源性在 90 .0 %～ 94 .2 %之间。

SPF雏鸡感染REV后免疫器官免疫功能的动态变化

试验通过对 1日龄 SPF雏鸡人工感染网状内皮组织增殖病病毒 ( REV) ,观察了免疫器官胸腺、法氏囊和脾脏 T、B淋巴细胞增殖反应的动态变化。结果表明 ,雏鸡感染 REV后胸腺 T淋巴细胞的增殖反应于7、2 1、4 2和 4 9日龄明显降低 ( P<0 .0 5) ,于感染后 1 4、2 8和 3 5日龄极显著减弱 ( P<0 .0 1 ) ;脾脏 T淋巴细胞的增殖反应分别于感染后 1 4～ 2 8d和 3 5～ 4 9d较对照组雏鸡明显或极明显降低 ( P<0 .0 5,P<0 .0 1 )。法氏囊和脾脏 B淋巴细胞增殖反应分别在感染后 7～ 4 9d和 1 4～ 4 9d极显著减弱 ( P<0 .0 1 )。免疫器官胸腺重量和脾脏重量与体重比值及体重分别于感染后 7～ 4 9、7～ 3 5、7～ 4 9d明显降低 ( P<0 .0 5,P<0 .0 1 )。说明SPF雏鸡感染 REV后 ,免疫器官 (胸腺、法氏囊和脾脏 )淋巴细胞发生变性坏死、数量减少和功能降低 ,机体的细胞免疫和体液免疫功能均发生明显降低或抑制

抗猫泛白细胞减少症病毒单克隆抗体的制备及其生物学特性鉴定

用 PEG60 0 0沉淀和蔗糖密度梯度离心从细胞培养物中纯化猫泛白细胞减少症病毒 ( FPV) ,以纯化FPV免疫 BALB/c小鼠 ,运用淋巴细胞杂交瘤技术 ,获得了 4株抗 FPV的特异性单克隆抗体 ( Mc Ab)。其腹水 Mc Ab的 ELISA效价在 1 0 - 4～ 1 0 - 5之间 ,其中 1株具有血凝抑制能力。经 ELISA阻断试验及 ELISA交叉反应性试验测定 ,这 4株 Mc Ab可与 FPV、犬细小病毒 ( CPV)和水貂肠炎病毒 ( MEV)呈特异性反应 ,因此可作为检测 FPV、CPV和 MEV共同抗原的通用试剂

含第1内含子的猪生长激素cDNA基因的构建

以 PCR方法扩增了猪生长激素 ( p GH)基因的第 1内含子 ,经测序表明 ,扩增的 p GH基因第 1内含子的序列与 Vize发表的序列存在 6个碱基的差异 ,同源性达 97.5%,说明 p GH基因第 1内含子具有多态性。此外 ,还发现此内含子存在有转录因子 ATF的结合位点。利用第 2外显子的 Hinf 位点 ,采用将 3个 DNA片段一步连接的方法 ,将扩增的第 1内含子插入到 p GHc DNA的正确位置上 ,从而构建出含第 1内含子的p GHc DNA。

实验动物未来发展趋向

空肠弯曲菌共同抗原基因文库的建立与基因克隆

从鸡源空肠弯曲菌中提取共同抗原成分 ,用 SDS-PAGE和 Western blot进行分析。结果表明 ,抗空肠弯曲菌共同抗原的单克隆抗体 4 A7可与共同抗原中 62 0 0 0的蛋白带发生特异免疫反应。为获得编码这种蛋白的特异基因 ,从空肠弯曲菌中提取和纯化染色体基因组 DNA,用 Eco R 和 Hind 双酶切 ,从酶切产物的琼脂糖电泳中回收 1～ 2 kb的 DNA片段 ,与用相同酶切的 p Bluescript KS( +)质粒进行重组连接 ,共挑选出 4 2 0个插入外源片段大小较为适中的重组子 ,从而初步建立了可能含有编码空肠弯曲菌共同抗原 62 0 0 0蛋白成分基因片段的重组质粒基因文库。从该文库中用双酶切获取扩增的插入外源基因片段 ,与双酶切的p ET2 8a( +)质粒进行连接 ,转化受体菌后 ,以 IPTG诱导表达 ,用 4 A7单抗作探针进行免疫筛选 ,共筛选出 6个可与该单抗发生特异反应的阳性克隆。表明这些重组转化子表达了空肠弯曲菌的共同抗原成分

抗A型产气荚膜梭菌α毒素单链抗体基因的表达

将 2种抗 A型产气荚膜梭菌α毒素单链抗体 ( Sc Fv)基因 Sc Fv-2 E3和 Sc Fv-1 A8克隆至表达载体p UC1 1 9、p HOG2 1和 p ET2 0 b中 ,构建了重组质粒 p UC2 E3和 p UC1 A8、p HOG2 E3和 p HOG1 A8、p ET2 E3和 p ET1 A8后 ,分别转化至受体菌 JM1 0 5、JM1 0 9和 BL2 1 ( DE3 )中 ,得到重组菌株 JM1 0 5( p UC2 E3 )和JM1 0 5( p UC1 A8)、JM1 0 9( p HOG2 E3 )和 JM1 0 9( p HOG1 A8)及 BL2 1 ( DE3 ) ( p ET2 E3 )和 BL2 1 ( DE3 )( p ET1 A8)。 ELISA检测表明 ,经 IPTG诱导后所表达的目的蛋白存在于重组菌株 JM1 0 5( p UC2 E3 )和JM1 0 5( p UC1 A8)及 JM1 0 9( p HOG2 E3 )和 JM1 0 9( p HOG1 A8)的菌培养上清中 ,在重组菌株 BL 2 1 ( DE3 )( p ET2 E3 )和 BL2 1 ( DE3 ) ( p ET1 A8)的胞周质中检测到了 Sc Fv的存在。 SDS-PAGE和薄层扫描分析表明 ,重组菌株 BL2 1 ( DE3 ) ( p ET2 E3 )和 BL2 1 ( DE3 ) ( p ET1 A8)的蛋白表达产物分别占菌体可溶性蛋白的 0 .9%和 0 .7%,其大小约为 2 60 0 0 ,且表达的目的蛋白具有中和磷脂酶 C的活性。

人工诱发鸡大肠杆菌病的接种规律

采用鸡大肠杆菌 O2标准强毒株 ,对 4 80羽宝万斯 -高兰蛋雏鸡颈部皮下注射进行人工发病 ,研究了细菌培养时间、接种量与致病力之间的关系和规律。结果表明 ,在同一毒株条件下 ,细菌致病力强弱 ,主要取决于接种感染菌数 ,只要接种菌数适宜 ,4～ 2 4 h细菌培养液均可成功发病 ,不必受普遍采用 1 8h细菌培养液接种的时间约束。这一试验结果可为灵活、合理安排抗菌新兽药试验中人工病例复制提供参考

畜禽毛霉病主要病原真菌形态及生化特性

试验对国内首次从乳牛皱胃毛霉病病灶中分离的微小根毛霉 ( Rhizomucor pusillus)、足样根霉 ( Rhizo-pusrhizodiform)和伞枝犁头霉 ( Absidia corymbifera)的形态、生化特性、致病力及药敏试验进行了研究。结果表明 ,3种真菌与自然界 (如饲料等 )所获得的同种菌 ,其菌落与菌丝体结构的形态特征无显著差异 ,仅微小根毛霉的假根较罕见。 3种真菌在 3 7℃生长良好 ,在兔肾组织中用扫描电镜可观察到由菌丝裂殖而形成的形状各异的膨大细胞。 3种真菌的生化反应各有不同 ,可作为菌种鉴定的依据。 3种真菌实验感染家兔、豚鼠、小鼠、雏鸡、猪、羊均显示强烈的致死性和典型的病理变化 ,在组织切片中用光学显微镜可观察到菌丝侵透血管壁现象 ,显示致病力很强。采用中西医结合治疗畜禽毛霉病 ,疗效显著

附植前小鼠胚胎上H-Y抗原表达的研究

用 8～ 1 2周龄 BALB/c公鼠采取皮肤移植和脾细胞腹腔注射 2种方式免疫同日龄纯系 BALB/c母鼠 ,制备 H-Y抗血清。经精子微量细胞毒性试验 ,筛选的抗血清用于胚胎体外培养 ,以鉴定附植前小鼠胚胎上 H-Y抗原的表达。选用 8cell-早期囊胚进行体外培养 ,分别于 5～ 6、1 8和 2 4 h观察胚胎发育情况。 5～ 6h后 ,H-Y抗血清培养的胚胎退化率高达 4 0 %,且发育迟缓 ,与自然性比例差异不明显 ( P>0 .0 5)。正常血清培养的胚胎 2 4 h左右 ,仍可发育到桑椹胚和囊胚

淫羊藿-蜂胶佐剂的免疫调节作用

用微量全血 3H-Td R掺入法测定了淫羊藿 -蜂胶 (以下简称淫 -蜂 )佐剂对 4周龄和 8周龄小鼠外周血中 T淋巴细胞转化率的影响。结果 :4周龄小鼠 T淋巴细胞转化率 ,淫 -蜂佐剂 ( YF)组显著高于阴性对照( C)组、淫 -蜂 /环磷酰胺 ( YF/ Cy)组和环磷酰胺 ( Cy)组 ( P <0 .0 5) ;YF/ Cy组略低于 C组 ,但此 2组均显著高于 Cy组 ( P <0 .0 5)。对于 8周龄小鼠 ,除 YF组与 Cy组之间表现出明显差异 ( P <0 .0 5)外 ,其他各组间均无显著差异 ( P >0 .0 5)。表明 :淫 -蜂佐剂不仅能提高外周血 T淋巴细胞的转化率 ,而且可对抗环磷酰胺对 T淋巴细胞活性的抑制作用 ,使受抑制的 T淋巴细胞转化活性基本恢复正常。上述作用在幼鼠中表现尤其明显。以间接 ELISA检测了淫 -蜂佐剂对家兔血清特异性抗体水平的影响。结果 :淫 -蜂佐剂抗原组兔血清特异性抗体水平显著高于无佐剂抗原组 ,抗体高水平维持的时间也更长 ;与油佐剂组相比 ,抗体产生的时间亦更早。说明淫 -蜂佐剂作为佐剂配合抗原应用 ,能提高抗原的免疫原性 ,促进抗体的早日生成

家禽骨髓内红细胞、白细胞发生的显微和亚显微结构特点

利用光镜和电镜对鹅、鸭和鸡骨髓内红细胞和白细胞发生的显微和亚显微结构进行了研究。结果显示 :鹅骨髓内红细胞系的体积比鸭的略大。光镜下鸭、鹅异嗜性粒细胞 ,在早幼阶段胞质内出现少量圆形颗粒 ;在晚幼阶段出现较多暗红色的圆形、杆状、梭形颗粒。嗜酸性粒细胞在早幼阶段胞质内出现少量着桔红色的圆形颗粒 ;晚幼阶段颗粒多呈杆状 ,胞核轮廓清楚。嗜碱性粒细胞在各阶段胞质内散布紫红色的细小颗粒。电镜下鸡原始红细胞多附着在窦壁上 ,核周隙窄 ,核孔数量较多 ;而成熟红细胞多分布在近血窦中央处 ,核周隙宽 ,核孔数量较少。异嗜性颗粒在早幼阶段可分 A型和 B型。嗜碱性颗粒分为 型和 型 ,它们分别在中幼和晚幼阶段出现。嗜酸性颗粒呈均质的圆形

苏钟Ⅰ系和Ⅱ系猪的氟烷基因及其对产肉性能的影响(英文)

:对 3 0 1头瘦肉型新品系苏钟 系和 系仔猪进行氟烷测验 ,阳性率为 1 .3 3 %。随机抽取氟烷阴性猪 3 4头进行基因型检测 ,有 6头为杂合子 ,由此得知 NN、Nn和 nn3种基因型的频率分别为 81 .2 6%、1 7.4 1 %和 1 .3 3 %,N和 n2种基因的频率分别为 89.97%和 1 0 .0 3 %。对 3种基因型猪的肉质进行评定结果显示 ,4头氟烷阳性猪 ( nn)肉质最差 ,出现 3头严重 PSE肉和 1头轻度 PSE肉 ,而氟烷阴性猪 ( NN或 Nn)未发生 PSE肉。2 0头苏钟 系氟烷阴性猪用阳性公猪测交 ,对产出的 2 0 8头后代进行氟烷测验 ,共检出 4窝中的 2 1头阳性猪。对测交后代进行肥育性能和肉质测定 ,发现阳性猪的日增重和饲料报酬等较低 ,屠宰率、眼肌面积和瘦肉率较高 ,肉质较差

中国双低油菜饼粕与加拿大卡诺拉粕品质特性的化学评价

系统地评价了 3个中国双低油菜与加拿大卡诺拉的商品饼粕与脱脂种籽的蛋白质、氨基酸、蔗糖、寡聚糖、饲粮总纤维和灰分等化学特性 ,并对饲粮总纤维的构成成分及加工的影响进行了研究。饲粮总纤维由非淀粉多糖、木质素和多酚、细胞壁蛋白质和矿物质组成。 3个中国双低菜粕的粗蛋白、蔗糖及必需氨基酸含量均接近或高于卡诺拉帕 ,但饲粮总纤维含量显著不同 ,尤其是蛋白质含量由于加工方式不同变异极大。在试验室条件下加工的脱脂种籽样品与相应的饼粕样品相比 ,蔗糖、赖氨酸和饲粮纤维含量变化显著。因此 ,改进双低油菜的加工技术是提高饼粕质量的关键

禽大肠杆菌病防制研究进展