新城疫病毒(青岛株)F蛋白基因的克隆和序列分析

参考新城疫病毒 ( NDV)长春株的 F基因序列设计了 1对特异性引物 ,应用 RT-PCR对 NDV青岛株(野毒 )的 F基因进行了扩增 ,扩增产物克隆后测序。扩出的 F基因核苷酸长度为 792 bp,编码 2 6 1个氨基酸 ,包括完整的 F2片段和部分 F1片段。裂解位点区 ( 1 1 2～ 1 1 7aa)氨基酸序列为 Arg-Arg-Gln-Arg-Arg-Phe,与国外发表的强毒株序列相符 ,证明青岛株为强毒株。根据该基因推导的氨基酸序列 ,与国内外发表的 NDVF蛋白氨基酸序列相比 ,同源性为 88.1 %～ 94 .3%。

新城疫病毒(NDV)在免疫鸡胚中增殖条件的优化

新城疫病毒 ( NDV)在鸡胚中的增殖受母源抗体、接种日龄、培养时间、接种剂量、种毒及其稀释倍数、孵化温度、孵化湿度等因素的影响。通过对 NDV在免疫鸡胚中增殖条件的优化配置 ,得出如下结果 :1 0日龄的免疫鸡胚 ,在母源抗体较高的情况下 ( 7log2～ 9log2 ) ,接种种毒的稀释倍数为 1 0 0 0～ 50 0 0倍 ,经过一定孵育时段 ,尿囊液量与病毒的血凝效价均可出现一个极值

禽网状内皮组织增生病病毒感染引起的鸡群免疫抑制

1999年 8月 ,江苏省泰州市某 AA肉用型鸡父母代种鸡群呈现生长缓慢、鸡新城疫疫苗免疫注射后HI效价不高及多发性腹膜炎、心包炎等免疫抑制性症状。 55日龄时 ,随机从 4只患鸡采集血浆样品接种鸡胚成纤维细胞 ,7d后在间接荧光抗体反应中均对网状内皮增生病病毒 ( REV)的单克隆抗体 1 1 A2 5呈强阳性反应。结果表明 ,该鸡群的免疫抑制状态主要由 REV的早期感染及其持续的病毒血症所引起。

表达绿色荧光蛋白伪狂犬病病毒转移载体的构建及转移特性

对含伪狂犬病病毒 ( PRV)鄂 A株 g G全基因 ,PK、g D基因部分编码序列的质粒 p USK进行改造 ,消除其中的 Eco R 位点 ,将通过 PCR扩增的增强绿色荧光蛋白基因 ( EGFP)融合到 g G启动子下游 ,构建了由 g G启动子控制 EGFP表达的 PRV转移载体 pg G- /EGFP+。该转移载体单独转染或同 PRV基因组 DNA共转染 IBRS-2细胞 ,结果单独转染时 EGFP不能表达 ;共转染时 ,6 h就可在荧光显微镜下观察到明显的荧光。

人多形核白细胞杀灭类鼻疽杆菌的电镜观察

将类鼻疽杆菌纯培养物加入人脱纤血液中 ,置 37℃水浴中模仿菌血症条件 ,分离含菌多形核白细胞( PMN)并进行电镜观察。结果表明 ,细菌被吞入初期其形态完整 ,吞噬体和菌体大小一致 ,随着杀灭功能的进行 ,吞噬体变得很大 ,其内的细菌呈松散状 ,形态结构发生很大改变。在杀灭作用的后期 ,于吞噬体内仅见残留的细菌碎片。由此说明 ,健康人 PMN非但不是类鼻疽杆菌潜藏的场所 ,而且能将其杀灭

鹿源坏死梭杆菌毒力菌株FN(AB)94实验动物感染模型的建立

将坏死梭杆菌 FN( AB) 94分离株以 1 0 6、1 0 7、1 0 8、1 0 9个 /m L等不同菌量 ,于耳后根颈部皮下分别接种于 4组健康实验家兔 ,每组 3只 ,逐日观察感染家兔的发病情况。结果 ,1 0 8、1 0 9个 /m L菌量感染组家兔 ,在接种后 9～ 6 8d内先后死亡 ,6 8d死亡家兔的病理变化明显 ,并从死亡家兔内脏及脓汁中 ,应用触片及分离培养均检到长丝状及小杆状等多形态典型的坏死梭杆菌 ;1 0 7个 /m L感染家兔仅表现体重减轻 ,1 0 6个 /m L感染家兔无明显临床表现。由此表明 ,坏死梭杆菌 FN( AB) 94分离株具有很强的感染毒力 ,对家兔的最小致死量为 1 0 8个 /m L,耳后根颈部皮下接种是适宜的感染途径 ,从而建立了坏死梭杆菌分离株实验动物感染模型

鸡Th1样淋巴因子mRNA的体外表达

应用 RT-PCR技术研究了鸡脾细胞在体外受到有丝分裂原 Con A的刺激后 ,其 Th1样淋巴因子的体外表达动态。结果表明 ,鸡脾细胞在 Con A诱导培养 1、2、3、4、8、1 2、2 4、4 8h后 ,均表达α-干扰素 m RNA,且未经有丝分裂原刺激的脾细胞以及未诱导但培养了 3、8、4 8h的脾细胞 ,也表达α-干扰素 m RNA。γ-干扰素在上述诱导培养时 ,其 m RNA均发生表达 ;未经有丝分裂原刺激的脾细胞培养 3、8h时 ,也表达 γ-干扰素m RNA,但培养 4 8h时则未检测到 ;未受有丝分裂原刺激的脾细胞不表达 γ-干扰素 m RNA。鸡白细胞介素 -2m RNA仅在刺激 2、3、4、8、1 2、2 4、4 8h时表达 ,在其他情况下则未检测到。本研究还发现 1种与已报道的鸡α-干扰素序列不同的基因 ,但其体外的表达动态类似于鸡α-干扰素。上述研究表明 ,鸡 Th1样淋巴因子的体外表达类似于哺乳动物 ,但也存在一定的差异

驴肉孢子虫包囊的超微结构及其实验感染

对昆明地区的 2 6头驴进行肌肉检查 ,在 2 4头驴肌肉中发现了肉孢子虫包囊 ,其自然感染率为92 .3%。光镜下包囊呈梭形 ,具有锥状和棍棒状的突起。透射电镜下突起内的微管在顶端松散排列 ,向下延伸集结成束 ,斜伸入基质层 ,有的和母细胞的膜相连。用含有包囊的驴肉实验感染犬和猫各 2只 ,感染后在犬粪便中发现孢子囊和卵囊。潜隐期为 1 1～ 1 3d。剖检在 2只犬的小肠固有层中均查到孢子囊和卵囊。猫粪便中一直未检到孢子囊和卵囊 ,剖检亦未发现。表明驴肉孢子虫的终末宿主是犬 ,而不是猫。研究认为驴体内的肉孢子虫仅有 1种 ,鉴定为柏氏肉孢子虫 ( Sarcocystisbertrami)。

美国发布2000年狂犬病死亡病例报告——感染途径值得关注

山羊子宫内胆碱能神经分布及妊娠时的变化

采用乙酰胆碱酯酶组化法 ,研究了山羊子宫内胆碱能神经的分布。结果 ,山羊子宫颈部神经较丰富 ,在浆膜和肌层内有神经束伴血管而行并分支分布于血管壁 ,在粘膜及其皱褶上皮下、粘液腺上皮下有神经丛分布 ,妊娠时子宫颈部的神经分布与未妊娠时相比无明显变化 ;子宫角部神经密度均低于子宫颈部 ,其内环行肌层中及其与内膜交界处神经密度略高 ,神经束伴血管而行并分支分布于血管壁 ,在子宫腺上皮下及内膜上皮下无神经分布 ,妊娠时除胎盘内无神经分布外 ,仍有神经束伴血管而行并分支分布于血管壁 ,但分布于血管壁的神经纤维减少。结果提示 ,胆碱能神经主要支配山羊子宫内血管壁及颈部粘液腺上皮和粘膜上皮 ,妊娠时子宫颈部胆碱能神经无明显变化 ,而子宫角内支配血管壁的胆碱能神经纤维减少

小鼠精原干细胞体外培养的一般特性

将分离纯化的 7～ 8d小鼠精原干细胞进行体外培养 ,结果显示 ,精原干细胞 2 4 h后可完全贴壁 ,贴壁后呈规则的圆形或卵圆形 ,直径 ( 1 1± 1 ) μm,以链、团状或散在方式贴附于混杂其中的睾丸体细胞层上 ;睾丸体细胞为多突起细胞 ,胞质形成 2～ 4个突起 ;体外培养 50～ 6 0 h后 ,精原干细胞开始分裂。上述结果表明 ,在本试验培养基所提供的体外环境中 ,精原干细胞能够存活一定时间并发生贴壁、分裂增殖等行为

青霉菌毒素的某些毒性机理

用标准和从饲料中提取的青霉菌毒素 (桔青霉毒素和青霉酸 )对家兔、蟾蜍进行了某些毒性机理的研究。结果表明 ,青霉菌毒素具有促进胃肠蠕动 ,增强子宫收缩和减慢心率的毒性作用

早期断奶应激对仔猪某些血清激素水平及细胞免疫功能的影响

2窝 (每窝 8头 ) 2 1日龄健康仔猪 1 6头 ,随机分成吮乳组和断奶组 ,每组 8头 (每窝各 4头 )。断奶组仔猪 2 1日龄断奶后转栏 ,吮乳组仔猪留原栏继续哺乳。在断奶时 ( 2 1日龄 )和断奶后 1、3d( 2 2、2 4日龄 ) ,仰卧前腔静脉采血 ,进行血清皮质醇、生长激素、胰岛素、T3 、T4、FT3 、FT4水平及全血 PHA T-淋巴细胞转化率和白细胞吞噬率检测。结果表明 ,与断奶前相比 ,断奶组仔猪断奶后 1、3d血清皮质醇水平极显著升高 ( P<0 .0 1 ) ;断奶后 3d血清 T3 、FT3 、生长激素、胰岛素水平显著降低 ( P<0 .0 5) ;断奶后 PHA T-淋巴细胞转化率和白细胞吞噬率显著或极显著降低 ( P<0 .0 5或 P<0 .0 1 )。与 2 1日龄测定值相比 ,吮乳组仔猪在 2 2、2 4日龄时的上述血清激素水平及细胞免疫功能无显著变化 ( P>0 .0 5)。

间情期犬卵母细胞体外受精的影响因素

试验对间情期犬卵母细胞体外受精的影响因素进行了系统研究。结果表明 :1以 TALP液作为犬精子获能液 ,精子回收率 ( 6 4± 1 0 .5) %、顶体反应率 ( 4 1 .5± 4 .1 ) %高于 TCM1 99+ 2 0 % FCS液。2用 TCM1 99+2 0 % FCS作为受精液 ,卵母细胞单精受精率 ( 1 8.6 % )、原核形成率 ( 1 0 .4 % ) ,高于 TALP受精液 ,而退化率低于 TALP受精液 ( 4 .9%比 1 9.7% ,P <0 .0 1 )。 3犬精子与卵母细胞在受精液中共同孵育 1 2 h,单精受精率 ( 2 3.5% )、原核形成率 ( 1 2 .7% )高于共同孵育 8、1 6、2 0 h,而多精受精率 ( 1 5.7% )、退化率 ( 3.9% )低于共同孵育 1 6、2 0 h。 4犬精子为 2× 1 0 6个 / m L时 ,单精受精率 ( 2 6 .0 % )、原核形成率 ( 1 4 .6 % ) ,高于 0 .5× 1 0 6、1× 1 0 6、3× 1 0 6、5× 1 0 6个 / m L组。卵母细胞多精受精率和退化率随精子含量增加而增加。 5肝素为 2 9mg/ L时 ,卵母细胞单精受精率 ( 2 4 .4 % )、原核形成率 ( 1 2 .2 % )高于 0、1 0、2 0、4 0、50 mg/ L组。而犬精子获能 2 h后 ,顶体反应率和卵母细胞多精受精率随肝素质量浓度增加而增加

营养和低温对母牛乏情的影响及其机制

选择年龄 4～ 5岁 ,膘情、体况相当 ,冬季不发情的健康母牛 2 6头 ,分为 3组。试验 1组 9头 ,搭建塑膜暖棚改造传统牛舍 ,并每头牛每天补充 2 kg饲料 ;试验 2组 7头 ,只搭建塑膜暖棚 ,饲养管理与日常相同 ;对照组 1 0头 ,不采取任何措施 ,饲养管理与日常相同。试验日期从 1 998年 1 2月 1日至 1 999年 6月 1日。对 3组母牛每月颈静脉采血 1次并称重 ,分离出血清 ,用放射免疫分析法测定血清中促卵泡素 ( FSH)、促黄体素( LH)、雌激素 ( E2 )和孕酮 ( P4)的含量。结果表明 ,塑膜暖棚可提高畜舍温度 (平均 8.2℃ )。试验结束时 ,试验1组有 6头发情 ,发情率 6 / 9;试验 2组有 2头发情 ,发情率 2 / 7;对照组 1 0头全部未发情。试验初期 ,FSH、LH和 E2 3组间差异不显著 ;试验过程中 ,试验 1组 E2 显著高于试验 2组和对照组 ( P<0 .0 5) ,试验 2组与对照组之间差异不显著 ;FSH和 LH平均含量 ,3组间差异不显著

碘化酪蛋白对产蛋鸡脂肪代谢的影响

30 0日龄罗曼蛋鸡 76 8只 ,随机分为 2组 (每组设 4个重复 ,每个重复 96只 ) ,在自由采食、饮水和光照1 6 h的条件下 ,分别饲喂添加 0 (对照组 )、50 mg/kg碘化酪蛋白 (试验组 )的玉米 -豆粕型日粮 1 3周。结果表明 ,与对照组相比 ,试验组蛋鸡腹脂重、腹脂率、肝脏重、肝脏相对重、肝脂率分别下降了 2 5.71 % ( P<0 .0 1 )、2 4 .4 0 % ( P<0 .0 1 )、1 1 .4 6 % ( P<0 .0 5)、8.90 % ( P<0 .0 5)、1 5.53% ( P<0 .0 5) ;血清三碘甲状腺原氨酸( T3 )和甲状腺素 ( T4)水平分别升高了 2 9.37% ( P<0 .0 1 )和 56 .2 5% ( P<0 .0 1 ) ;血清脂肪酶活性和游离脂肪酸含量分别提高了 35.2 8% ( P<0 .0 5)和 32 .37% ( P <0 .0 5) ,而甘油三酯含量下降了 2 2 .38% ( P<0 .0 5) ;腹脂中激素敏感脂肪酶 ( HSL )活性和肝脏、腹脂中环腺苷酸 ( c AMP)含量分别升高了 4 8.54% ( P<0 .0 1 )、2 6 .95% ( P<0 .0 5)和 34 .34 % ( P<0 .0 5)。结果提示 ,碘化酪蛋白能降低产蛋后期蛋鸡腹脂和肝脏中脂肪的含量。

甜菜碱对猪不同阶段脂肪和蛋白质代谢的影响

对断奶仔猪、生长猪和肥育猪分别饲喂添加甜菜碱 80 0、1 0 0 0、1 750 mg/kg的饲粮 ,分别进行为期36、6 2、4 0 d的饲养试验 ,并进行屠宰取样和分析测定。结果表明 :甜菜碱使断奶仔猪、生长猪、肥育猪的日增重分别提高 8.71 % ( P <0 .0 5)、1 3.2 0 % ( P <0 .0 1 )、1 3.32 % ( P <0 .0 1 ) ;胴体脂肪率分别降低 1 2 .97%( P <0 .0 1 )、1 9.6 2 % ( P <0 .0 1 )、1 2 .4 9% ( P <0 .0 1 ) ;瘦肉率分别提高 4 .0 8% ( P <0 .0 5)、7.1 5% ( P <0 .0 5)、3.31 % ( P <0 .0 5) ;肝脏中游离肉碱含量分别增加 8.98% ( P <0 .0 5)、2 1 .36 % ( P <0 .0 5)、30 .1 8%( P<0 .0 1 ) ;血清中生长激素 ( GH)水平分别增高 4 6 .1 5% ( P<0 .0 1 )、1 0 2 .1 1 % ( P<0 .0 1 )、58.33% ( P<0 .0 5) ;胰岛素样生长因子 -1 ( IGF-1 )水平分别增高 38.74 % ( P<0 .0 5)、4 4.74 % ( P<0 .0 1 )、4 7.95% ( P<0 .0 1 )。生长猪和肥育猪皮下脂肪组织中苹果酸脱氢酶 ( MDH)的活性分别上升 1 3.6 0 % ( P <0 .0 5)和1 4 .59% ( P <0 .0 1 ) ,断奶仔猪有提高趋势 ,但差异不显著 ( P >0 .0 5)

2000年动物克隆及相关领域研究进展