科技部公布科技期刊方阵名单《中国兽医学报》名列其中

传染性支气管炎病毒青岛腺胃分离株(SD/97/02)基质蛋白、5a、5b蛋白基因的克隆和序列分析

参考 Gen Bank上的传染性支气管炎病毒 (IBV)序列 ,自行设计合成了 3条引物 ,对 IBV青岛腺胃分离株 (SD/97/ 0 2 ) RNA进行 RT- PCR扩增 ,扩增含基质蛋白 (M)及 5 a、5 b蛋白基因的约 1.6 5 kb的片段 ,对 PCR产物进行克隆后测序。序列分析显示 ,M蛋白基因与其他 IBV相应的基因同源性在 90 .33%～ 92 .75 %之间 ,氨基酸序列比较 ,同源性在 89.82 %～ 94.2 5 %之间 ;5 a基因与其他 IBV的基因同源性在 84.34 %～ 87.37%之间 ,氨基酸同源性在 81%～82 %;5 b基因与其他 IBV的基因同源性在 91%～ 92 %之间 ,氨基酸同源性在 93%左右。

国际兽疫局成立动物健康信息部

国际口蹄疫防制大会在布鲁塞尔召开

传染性法氏囊病病毒VP2高表达毒株血清型分析与免疫试验

对 2个传染性法氏囊病病毒 (IBDV) VP2高表达毒株 0 0 ZB和 99TA3的血清亚型进行了分析 ,交叉中和试验表明 ,它们属不同的血清亚型。用这 2个毒株分别制备灭活疫苗进行免疫试验 ,试验保护率为 10 0 %,显示出良好的免疫效力。

蓝舌病病毒血清1型野毒株及疫苗株S10基因差异

蓝舌病病毒血清型 1型是主要致病血清型之一。为明确其流行规律的分子生物学基础 ,采用 RT- PCR扩增和序列测定技术分析了 15株野毒株及 1株弱毒疫苗株的 S10全基因片段 ,并对其核苷酸和氨基酸差异进行了比较。所有毒株 S10基因核苷酸长度均为 82 2 bp,含有 2个起始密码子 (核苷酸 2 0～ 2 2和 5 9～ 6 1)和 1个终止子 (核苷酸 70 7～70 9) ,预测编码 2种蛋白 (NS3和 NS3A)。不同毒株间 S10基因核苷酸差异为 0～ 138个 (同源性 10 0 %～ 82 %) ,NS3/NS3A蛋白氨基酸差异为 0～ 15个 (同源性 10 0 %～ 93%)。基于 S10基因序列分析 ,可将蓝舌病病毒野毒株及疫苗株分为 2个基因群 :12株野毒株及 1株疫苗株为基因 群 ,3株野毒株与澳大利亚 型毒株属于基因 群 ,两群间的核苷酸同源性为 79%。各基因群在地域分布及宿主来源上未发现有明显的特征性。基因群与毒株分离年代、对 BHK- 2 1细胞毒力等特征关系亦不明显。

美国提出加强农业生物安全的措施

tPA乳腺组织特异性表达载体构建及转基因小鼠建立

以 p KB、pc DNA 3和 p CPA为原始质粒 ,构建 BL G启动子调控的组织型纤溶酶原激活剂 (t PA)乳腺组织特异性表达载体 p BTA。以 Sal I酶切质粒 p BTA,回收 5 .45 kb基因片段 BL G- t PA- b GHpoly A,通过显微注射 ,导入昆明小鼠受精卵的雄原核内。共注 136 5枚 ,将存活的 10 5 3枚移植到 5 0只同期发情假孕母鼠的输卵管内。怀孕 2 4只 ,共产仔79只 ,上述仔鼠通过 PCR检测 ,结果 19只阳性。Southern blotting检测上述 19份 PCR阳性小鼠基因组 ,其中 4只为整合阳性 ,说明已获得了乳球蛋白启动子调控下的 t PA转基因小鼠 ,为 t PA在小鼠体内表达研究提供了必要条件。

联合国为克隆人立法 能否医疗性克隆成焦点

英国加强痒疫防制计划

腐蹄病节瘤拟杆菌纤毛蛋白与绵羊白细胞介素-2融合基因表达载体的构建及表达

根据腐蹄病节瘤拟杆菌纤毛蛋白基因 (Pili基因 )序列 ,在 Pili基因 6 19bp Ehe 酶切位点上插入绵羊白细胞介素 - 2基因 (Ovi IL- 2基因 ) ,构建了 Pili基因与 Ovi IL- 2基因的融合基因表达载体。先用 Eco R 、Bam H 双酶切p Bluescript- Ovi IL - 2重组质粒 ,获得两端具有 Eco R 、Bam H 位点的 Ovi IL - 2基因片段 ,用 Klenow补平后 ,与经Ehe 酶切后的重组质粒 PME2 90 - Pili进行平端连接 ;转化 JM10 5感受态细胞 ,筛选阳性克隆 ,分别用 Bam H 、Eco R 、Xba 、Bgl 、Pvu 等进行酶切鉴定。然后将阳性重组质粒转染 BL - 2 1表达宿主感受态细胞 ,用 0 .1m ol/ L Mg Cl2沉淀法和超声波裂解法提取 BL- 2 1表达 Pili基因与 Ovi IL- 2基因融合基因表达蛋白。对流免疫电泳对重组融合蛋白的特异性分析证明 ,融合蛋白主要在宿主菌体中表达 ;SDS- PAGE电泳结果表明 ,重组融合蛋白分子大小约为 330 0 0 ,表达产物的量约占菌体的 5 .49%。

中华绒螯蟹细菌性病原的分离与鉴定

对杭州地区患病的中华绒螯蟹进行了病原的分离和鉴定 ,从病蟹体内分离到 2株革兰氏阴性杆菌 ,单极生鞭毛 ,运动 ,兼性厌氧 ,发酵葡萄糖产酸产气 ,氧化酶、过氧化氢酶阳性 ,七叶苷、蔗糖、水杨素阴性 ,还原硝酸盐 ,对氨苄青霉素和羧苄青霉素敏感等 ,同易损气单胞菌的形态特征、生理生化特性基本相同 ,故将这 2株病原菌鉴定为易损气单胞菌 (Aeromonas trota)。人工注射感染健康蟹后 ,均在 2 d内死亡 ,死亡率为 10 0 %,从而证实易损气单胞菌为此次患病中华绒螯蟹的致病菌。

世界卫生组织决定延期销毁天花病毒毒种

一种新型粘膜免疫佐剂──氧化甘露聚糖

伪狂犬病病毒闽A株gE主要抗原表位基因在大肠杆菌中的克隆与表达

根据伪狂犬病病毒 Rise毒株 g E基因序列 ,设计合成 1对引物 ,采用 PCR方法 ,从伪狂犬病病毒闽 A株 DNA扩增出 5 5 8bp片段。将该片段克隆到 p UC19质粒中 ,测序正确后再将其克隆到表达质粒 p ET- 2 8a中 ,以 BL 2 1(DE3)为宿主菌 ,在 IPTG诱导下获得了高效表达。经 SDS- PAGE及 Western- blotting鉴定分析 ,表达蛋白大小约 2 30 0 0 ,蛋白薄层扫描分析表明 ,该蛋白约占菌体总蛋白的 30 %。

间接ELISA检测猪伪狂犬病血清抗体

用猪肾传代细胞 IBRS- 2增殖猪伪狂犬病病毒 (PRV)鄂 A株 ,病毒培养上清液经硫酸铵沉淀、聚乙二醇(Mr2 0 0 0 0 )浓缩后作为包被抗原。用纯化的猪血清 Ig G免疫家兔 ,HRP标记提取的兔抗猪 Ig G,制备出高效价的酶标抗体 ,酶标抗体工作浓度为 1∶ 5 0 0 0 0 ;经各种条件的选择 ,建立了检测猪伪狂犬病血清抗体的间接 EL ISA。所建立的间接 EL ISA抗原包被浓度为 39.2 mg/ L ,血清最佳稀释度为 1∶ 2 0 ,与猪细小病毒、猪瘟、O型口蹄疫、猪衣原体标准阳性血清呈阴性反应 ,与标准阴性血清和临床未感染 PRV的猪血清呈阴性反应 ;与猪伪狂犬病标准阳性血清、免疫猪血清和临床发病猪血清呈明显的阳性反应 ;与美国进口的 PRV抗体检测 EL ISA诊断试剂盒检测结果比较 ,45份猪血清的阴、阳性检出符合率均为 10 0 %。表明建立的间接 EL ISA具有敏感性高、特异性强、重复性好的优点 ,可用于猪伪狂犬病血清抗体的定性和定量检测。

用哺乳动物细胞表达可形成高强度纤维的蜘蛛牵引丝蛋白

苏云金杆菌晶体蛋白不同给药途径对小鼠体内日本血吸虫的作用

将小鼠人工感染日本血吸虫尾蚴 40条 /只 ,30 d后将苏云金杆菌伴胞晶体蛋白以不同的给药方式 (静脉注射、肌肉注射、灌胃、腹腔注射 )给药 ,用药后 15 d剖检查虫。结果发现 ,各种给药方式对小鼠体内的日本血吸虫成虫均有一定的效果 ,但以静脉注射效果最好 ,肌肉注射次之 ,灌胃和腹腔注射效果较差。这表明苏云金杆菌制剂作用于小鼠体内的日本血吸虫时 ,静脉注射是最佳给药途径。

半胱胺对高邮鸭增重及相关激素分泌和基因表达的影响

随机选取 5日龄体况良好的雄性高邮鸭 2 4只 ,分成对照组和半胱胺 (CS)试验组。试验组每周按体重在日粮中添加 1次 CS(10 0 mg/ kg) ,以观察半胱胺对高邮鸭增重及相关激素分泌和基因表达的影响。结果表明 ,前 3周平均日增重试验组比对照组提高 12 .86 %,料肉比下降 12 .82 %;整个试验期平均日增重提高 4.5 3%,料肉比下降 4.0 3%。血清 IGF- 1水平 ,试验组为 (2 2 9.88± 8.6 9) μg/ L,显著高于对照组 (2 0 2 .31± 7.10 ) μg/ L(P<0 .0 5 ,n=10 ) ;血清 GH水平 ,试验组为 (0 .5 4± 0 .0 3) μg/ L,显著高于对照组 (0 .45± 0 .0 2 ) μg/ L(P<0 .0 5 ,n=10 ) ;垂体 GH m RNA的净灰度(net intensity) ,试验组为 (2 .2 3× 10 5± 0 .19× 10 5) ,显著高于对照组 (1.6 5× 10 5± 0 .12× 10 5) (P<0 .0 5 ,n=9) ,而下丘脑生长抑素 (SS) m RNA的净灰度 ,试验组为 (1.33× 10 5± 0 .10× 10 5) ,比对照组 (2 .14× 10 5± 0 .5 7× 10 5)降低37.85 %(P=0 .0 97,n=8) ,提示半胱胺对 SS基因转录水平可能没有影响。半胱胺促进生长和提高饲料转化率的机制 ,可能与 GH基因表达的上调和血清 IGF- 1水平的提高有关。

沙拉沙星对实验性猪链球菌病及猪水肿病的药效学

将兽医专用氟喹诺酮类药物沙拉沙星以不同治疗方案分别对实验性猪链球菌病和猪水肿病进行药效学研究。在每天总剂量相同的情况下 ,每天 1次与每天 2次给药取得了较好而相似的疗效 (P>0 .0 5 ) :对猪链球菌病 ,每天总剂量为 10 m g/ kg时 ,肌注给药的治愈率分别为 10 0 %和 90 %,但在迅速改善临床症状方面 ,每天 1次给药优于每天 2次(P<0 .0 5 ) ;对猪水肿病 ,每天总剂量为 5 mg/ kg时 ,肌注给药的治愈率均为 10 0 %。结果表明 ,在总剂量相同时 ,以大剂量、长间隔与以较小剂量、短间隔治疗实验性猪链球菌病与猪水肿病 ,均取得相当的疗效。

各国均表示:不给克隆人发“准生证”

实验性鸡大肠杆菌病的超微动态病理变化

10～ 12日龄 SPF鸡 180只 ,随机分为 4组 ,分别气管内注射致病性大肠杆菌 O18分离株 (大肠杆菌接种组 )、低致病性禽流感病毒 (mildly pathogenic avian influenza virus,MPAIV) H9N2株 (MPAIV接种组 )、先接种 MPAIV再接种大肠杆菌 (混合接种组 ) ,并设健康对照组 ,分别于接种后不同时间 ,取气管、肺、气囊、胸腺、法氏囊、脾、肝和肾组织 ,制作超薄切片 ,电镜观察。结果表明 ,MPAIV与大肠杆菌混合接种组比大肠杆菌接种组出现病变的时间早、恢复慢 ;在大肠杆菌接种组 ,接种后 3h气囊上皮和间质细胞中都可见典型的大肠杆菌 ;在混合接种组 ,接种后 3h,气囊间质细胞的吞噬泡中可见多个 MPAIV粒子。由此认为 ,MPAIV可使鸡大肠杆菌病严重化 ,大肠杆菌对 MPAIV的入侵和在鸡体内的复制可能有促进作用。

《犬病药物手册》出版

高氟低营养对山羊牙齿发育影响的扫描电镜观察

为了探索高氟低蛋白对牙齿发育的影响 ,阐明牙齿过度磨损的机理 ,应用扫描电镜对第一、二切齿脱钙前的矿化及脱钙后的基质结构作了观察。结果表明 ,脱钙前对照组牙本质小管纵向排列整齐 ,走向一致 ;中毒组第一切齿牙本质小管纵向排列不齐 ,走向紊乱。脱钙后 ,对照组牙齿胶元纤维排列整齐致密 ,而中毒组胶元纤维排列较疏松 ;对照组横断面牙本质小管分布均匀 ,管径大小一致 ,管型规则 ,管壁与管间质密度一致 ;而中毒组小管口径不一 ,管型不规则。结论 :高氟低蛋白营养首先影响牙基质的发育 ,进一步影响矿化 ,从而使牙齿整体发育不良 ,过度磨损。

首次发现分解多氯化联苯(PCB)污染物的细菌

某些因素对牛和小鼠类胚胎干细胞分离与培养的影响

以荷斯坦牛胚胎和小鼠胚胎为材料 ,研究了犊牛血清、饲养层、培养液、添加物和消化液对牛胚胎干细胞和小鼠胚胎干细胞克隆效率的影响。结果表明 ,在 2 4h内使小鼠胚胎贴壁率达 86 %以上的犊牛血清可用于小鼠和牛胚胎干细胞的分离 ;在 ES细胞分离与克隆中 ,以 15 %～ 2 0 %犊牛血清为宜 ,在 DMEM(L)培养基中添加 0 .1μmol/LNa2 Se O3 +0 .1mmol/Lβ-巯基乙醇 +10 μg/L IGF+10 0 0 IU/m L L IF,能显著提高牛 ES细胞分离与克隆效率 ;在TCM199、DMEM(高糖 )和 DMEM(低糖 ) 3种培养基中 ,低糖 DMEM更适宜于牛 ES细胞的分离 ;优秀胚胎形成的团状 ICM更适宜于分离与克隆 ES细胞 ,在 37℃用低浓度消化液处理 ICM或 ES细胞集落 ,再以机械将其离散为细胞小块 ,ES细胞克隆效率最高。

小鼠体外受精及胚胎发育的影响因素

为了完善小鼠体外受精和胚胎的体外培养系统 ,以 M16为基础培养液 ,探讨了葡萄糖、磷酸盐、EDTA、谷氨酰胺及β-巯基乙醇等对小鼠体外受精和胚胎体外培养的影响。结果表明 ,在 M16液中添加 EDTA和 L -谷氨酰胺(m M16液 ) ,小鼠的体外受精率由 2 6 %提高到 5 1%;当在 m M16液中去掉磷酸盐 ,或添加 Hepes,或添加 β-巯基乙醇 ,体外受精率由 5 1%增至 6 2 %～ 74%;m M16液中添加 Hepes,或去掉磷酸盐 ,可阻碍胚胎的体外发育 ,囊胚的扩张率由 80 %降至 49%和 5 8%,而在无糖 m M16液中添加 β-巯基乙醇 ,可显著地提高扩张囊胚率 (91%)。以上结果表明 ,M16液中添加 EDTA、谷氨酰胺和 β-巯基乙醇后 ,适用于小鼠体外受精 ;同时去掉葡萄糖后 ,则适用于 2细胞胚的体外培养。

兔胚胎细胞核移植重组胚的发育力

以兔为模型 ,对影响胚胎细胞核移植重组胚发育力的电融合与激活参数、体外培养系统进行了探索性研究。结果表明 ,有利于重组胚发育力的适宜电融合与激活参数为 2 0 0 V/ m m的电场强度、10 0μs的脉冲宽度 ;在不同的体外培养系统中 ,TCM- 199培养液内于兔胎儿成纤维细胞饲养层 (REF feeder)上共同培养的重组胚获得了最高的 2～ 4-细胞发育率和桑椹胚或囊胚的发育率 ,分别为 6 5 .7%和 2 2 .9%;移植 111枚重组胚给 9只假孕母兔 ,其中 2只妊娠 ,1只完成足月妊娠产出 2只克隆仔兔 ,另 1只在妊娠 2 2 d流产 1只克隆死胎。

应用微卫星PCR对中国3个品系实验用小型猪的遗传检测

以 12个 STR(shord tandem repeat)座位的 PCR对中国 3个品系实验用小型猪进行了遗传检测。结果 ,3个座位品系间扩增结果相同 ;9个座位呈现品系间多态性 ,其中 2个座位在 3个品系间均具有差异。贵州小型香猪与西双版纳近交系小耳猪间有 6个座位有差异 ,其遗传距离为 0 .186 4;贵州小型香猪与广西巴马小型猪间有 3个座位有差异 ,其遗传距离为 0 .12 73;广西巴马小型猪与西双版纳近交系小耳猪间有 5个座位有差异 ,其遗传距离为 0 .1333。由此表明 ,3个品系小型猪间的遗传背景具有一定差异 ,同时表明这 9个座位可选择为小型猪遗传检测的多态性座位。

饲粮中添加半纤维素酶对生长猪的促生长作用及其内分泌机制

以“长嘉”二元生长猪为试验对象 ,研究了在稻谷基础饲粮中添加 0 .2 %半纤维素酶对其的促生长作用及内分泌机制。结果表明 ,饲粮中添加半纤维素酶 ,(1)可使生长猪日增重提高 8.78%(P<0 .0 5 ) ,饲料转化率提高 9.42 %(P<0 .0 5 ) ,与玉米饲粮组相比无差异 ;(2 )血清尿素氮水平降低 15 .0 5 %(P<0 .0 5 ) ,胆固醇、甘油三酯、血糖水平分别升高15 .2 1%(P<0 .0 5 )、16 2 .2 2 %(P<0 .0 1)和 32 .6 6 %(P<0 .0 1) ;与玉米饲粮组相比 ,甘油三酯水平升高 40 .48%(P<0 .0 1) ,其他指标则无显著差异 (P>0 .0 5 ) ;(3)血清中胃泌素、胰岛素、T3 、TSH水平分别升高 44 .2 7%(P<0 .0 1)、85 .48%(P<0 .0 5 )、47.0 6 %(P<0 .0 1)和 114.75 %(P<0 .0 5 ) ,对 T4和生长激素的影响不显著 (P>0 .0 5 ) ,与玉米饲粮组相比均差异不显著 (P>0 .0 5 )

哺乳动物抗菌肽的研究进展