• 聚合酶链反应检测4种猪源细胞系中的内源性反转录病毒(英文)

    吕茂民,金红,邓瑞春,王建国,杨姝,熊景峰,丁壮,章金刚

    为了建立检测猪内源性反转录病毒 (porcine endogenous retrovirus,PERV)的特异性方法 ,根据已发表的 PERV的序列 ,设计并合成了针对 PERV核心蛋白 (gag)、多聚酶 (pol)、囊膜蛋白 (env)基因的 3对引物 ,预期扩增片段分别为 36 1、15 0、2 6 5 bp。应用 PCR技术检测了 PERV在 4株猪源细胞中的整合情况。结果表明 ,在所有被检细胞的基因组中均存在有 PERV的前病毒序列 ;应用 RT- PCR检测上述 4株猪源细胞中 PERV特异性 m RNA的表达 ,结果均为阳性。试验还对建立的上述 2种方法的特异性进行了探讨 ,结果表明试验建立的 PERV检测法具有较高的特异性。该方法的建立为进一步研究 PERV奠定了基础 ,还可对异种移植动物模型及异种移植受体进行病原安全性监测。

    2003年01期 1-3页 [查看摘要][在线阅读][下载 174k]
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  • 伪狂犬病病毒gI/gE双缺失通用转移载体的构建与初步应用

    方六荣,陈焕春,肖少波,马相如,王革非

    对含伪狂犬病病毒 (pseudorabies virus,PRV) Ea株 g I、g E、11K全基因 ,g D、2 8K基因部分编码区的质粒p SK4.5进行改造 ,消除其中的 Bam H 和 Not 位点 ,将晚期基因 g G的启动子、多克隆位点以及 SV 40 poly(A)同时插入改造后的质粒 p SKBN的 Stu 和 Bst E 位点 ,取代 g I和 g E的部分编码区 ,构建了由 g G启动子驱动的 g I/ g E双缺失通用转移栽体 pg GIE- Uni。序列分析进一步证实 :至少有 8个单一酶切位点可供外源基因直接插入 ,上下游侧翼分别为 0 .8kb和 2 .4kb。将猪繁殖 -呼吸障碍综合征 (兰耳病 )主要抗原基因 ORF5插入 pg GIE- Uni的 Bam H 和 Not 位点之间 ,构建了含 ORF5的转移质粒 pg GIE- ORF5。上述结果为进一步研制猪伪狂犬病 -兰耳病的 2价基因工程疫苗奠定了基础。

    2003年01期 4-6页 [查看摘要][在线阅读][下载 106k]
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  • 犬2型腺病毒毒株纤突蛋白基因的比较分析

    范泉水,夏咸柱,邱薇,黄耕,何洪彬,余春,乔军,武银莲,殷震

    根据 Gen Bank中犬腺病毒 (canine adenovirus,CAV)纤突基因序列 ,设计合成 2对引物。用 PCR方法 ,对犬 2型腺病毒沈阳分离株 (CAV- 2 SY株 )第 5代强毒 (SY- V5 )、经蚀斑克隆驯化的第 6 0代毒弱毒 (SY- V6 0 )、SY- V6 0在易感犬体上传 5代的回收毒 (SY- CP5 )、美国疫苗毒 (U S- V2 0 )等 4个毒株的纤突基因进行了扩增 ,PCR产物经纯化后进行基因序列测定 ,测序结果经拼接后得到了 1个由 16 2 9个核苷酸组成的纤突蛋白全基因序列 ,编码 5 43个氨基酸。犬2型腺病毒与 Gen Bank中的标准的 CAV- 2强毒株 (Toronto A2 6 / 6 1)纤突蛋白基因序列的比较结果表明 :CAV- 2 SY株强毒株与 Toronto A2 6 / 6 1株相同 ;SY- V6 0株与 SY- CP5相同 ;与驯化前的 SY- V5相比 ,在 1134位发生碱基颠换 ,编码的氨基酸由原来的天冬酰氨 (N)变为赖氨酸 (K) ,并导致 N- X- S/ T潜在糖基化位点发生改变 ,US- V2 0该部位也发生同样的突变 ,本试验测定和比较的 CAV- 2强毒株有 5个潜在的 N-联糖基化位点 ,弱毒株仅有 4个位点 ;U S- V2 0与 Toronto A2 6 / 6 1差异较大 ,有 11个碱基发生变化 ,导致 8个氨基酸的变异。

    2003年01期 7-10页 [查看摘要][在线阅读][下载 197k]
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  • 科学家有望发明抑制艾滋病毒新方法

    冯立文

    2003年01期 10页 [查看摘要][在线阅读][下载 35k]
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  • 犬2型腺病毒E3区缺失性表达载体的构建及外源基因表达

    邱薇,扈荣良,夏咸柱,范泉水,黄耕,张守峰

    为构建可用于同源重组或体外重组的犬腺病毒 (canim e adenovirus,CAV) E3区缺失性表达载体 ,在克隆的 E3区两末端设计并合成了 2对突变引物 ,在引物中分别引入 1个 Bgl 酶切位点 ,以 p BE3质粒为模板 ,经 2次点突变后 ,得到含有 2个 Bgl 位点的重组质粒 p BE3M。该质粒经 Bgl 酶切后自连得到 E3区缺失的质粒 p BE3Δ。在 p BE3Δ质粒的 Bgl 位点加入接头后 ,产生含多个酶切位点的质粒 p BE3L,经相应的酶切鉴定 ,证明突变、缺失和接头连接正确后 ,利用 p BE3L 分别构建了带有和不带有外源性启动子的绿色荧光蛋白基因的重组表达质粒 ,并分别进行转染以检测其表达。结果显示 ,p BE3L CGFP质粒在转染 DK细胞后 ,于 36 h即可观察到荧光 ,72~ 96 h无明显差别 ,传 3代后仍可见表达荧光的细胞 ;而 p BE3L GFP质粒转染 DK细胞后经检测无表达。结果表明 ,构建的 E3区缺失性载体不能利用 E3区自身的启动子进行目的基因的表达 ,外源性启动子的加入是必要的。

    2003年01期 11-14页 [查看摘要][在线阅读][下载 145k]
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  • 猪瘟病毒E2蛋白抗原多肽与T4噬菌体SOC蛋白的融合表达

    吴健敏,任兆钧,余兴龙,马钢,李吉平,涂长春,张念祖

    利用 DNA重组技术将猪瘟病毒 (clascical swine fever virus,CSFV) E2蛋白主要抗原编码区基因 (m E2 )与 T4噬菌体 SOC基因融合 ,插入 T4噬菌体表达质粒 ,构建成 T4噬菌体 SOC位点表达 m E2的表达载体 p1Sm E2。将其转化至 BL2 1 (DE3 )菌 ,取经 IPTG诱导后表达的目的蛋白 SDC- m E2进行 SOS- PAGE、薄层凝胶扫描分析、Western blot及 EL ISA等方法检测。结果表明 ,表达的 SOC- m E2蛋白相对分子质量约 2 5 70 0 ,表达量占菌体总蛋白量的 36 .7%,并具有与 CSFV特异性抗体反应的活性。

    2003年01期 14-17页 [查看摘要][在线阅读][下载 152k]
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  • 重组杆状病毒表达的2株传染性支气管炎病毒S1蛋白的免疫原性评价

    戴亚斌,丁铲,刘梅,陈德胜,潘杰彦,芦银华,陈溥言,蔡宝祥

    利用 Bac- to- Bac杆状病毒表达系统构建了 2株重组杆状病毒 r Ac JS95 0 3S1和 r Ac SD970 1S1,分别表达了 2株致病性不同的传染性支气管炎病毒的 S1基因。用感染重组杆状病毒的昆虫细胞裂解液对 2周龄的伊莎公雏进行免疫 ,根据鸡免疫后的抗体水平动态变化和攻毒后鸡肾脏和气管的保护力判定它们的免疫原性。结果显示 ,重组杆状病毒表达的 IBV S1蛋白可以诱导抗体产生和免疫保护反应 ,2毒株间也存在着一定程度的交叉免疫保护反应。

    2003年01期 18-21页 [查看摘要][在线阅读][下载 150k]
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  • 新城疫3组基因亚单位疫苗的免疫原性试验

    秦智锋,贺东生,刘福安

    将 3个融合表达重组菌 p GHN/ DE3、p GF/ DE3和 p GF/ E.coli复苏后进行酶切鉴定 ,确认无误后均经 1m mol/L 的 IPTG诱导 ,然后分组 3次免疫鸡。试验鸡血清经血球凝集抑制试验 (HI)和微量细胞中和试验 (SN)来检测 HI抗体和 SN抗体。结果表明 :重组菌 p GHN/ DE3所生产的亚单位苗免疫鸡后 ,可激发较高的 HI抗体 ,但激发的中和抗体较弱。与 系 NDV常规疫苗相比 ,3个重组大肠杆菌基因工程苗所诱发的中和抗体效价较弱。对各组中起关键作用的中和抗体进行方差分析表明 ,3个基因工程菌所诱发的中和抗体与常规疫苗免疫组和基础免疫对照相比 ,差异显著。因此 ,尽管 3种基因工程苗产生了中和抗体 ,但中和抗体效价上升缓慢 ,HI抗体效价上升较快。

    2003年01期 22-24页 [查看摘要][在线阅读][下载 94k]
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  • 我国2000~2001年J亚群禽白血病病毒分离株gp85基因的序列比较

    张志,崔治中,赵宏坤

    以相当于 J亚群禽白血病病毒 (AL V- J)原型株 HPRS- 10 3基因组碱基 #5 394~ #5 416及 #7811~ #7794的 1对引物做 PCR,在 2 0 0 0~ 2 0 0 1年从山东、河南和宁夏分离的 8株 AL V- J中 ,有 6株可以扩增出含 gp85基因的 2 .2 kb左右的特异性片段。对其中 5株的扩增片段做了序列分析 ,结果表明 ,这 5个毒株的囊膜糖蛋白 gp85与原型株 HPRS-10 3有 93.4%~ 96 .8%的同源性 ,与我国最早的分离株 SD990 2有 93.7%~ 98.7%的同源性 ,它们相互之间的同源性为 91.2 %~ 98.7%。由此说明 ,我国 AL V- J的 gp85基因正在不断发生变异。

    2003年01期 25-27页 [查看摘要][在线阅读][下载 112k]
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  • 禽网状内皮组织增生症病毒囊膜糖蛋白gp90的原核表达

    吉荣,崔治中,丁家波,秦爱建,刘岳龙,金文杰

    根据禽网状内皮组织增生症病毒 (REV) SNV株的前病毒基因组 c DNA序列 ,设计并合成 1对引物 ,以 SNV株前病毒 c DNA全基因组克隆为模板 ,通过 PCR技术 ,扩增出该病毒囊膜糖蛋白 (env) gp90基因部分片段。将 PCR产物按正确的阅读框架定向克隆进 p GEX- 5 X- 3载体中谷胱甘肽 - S-转移酶 (GST)的下游 ,将重组质粒转化进宿主菌BL2 1 中 ,在 1.0 mm ol/ L IPTG(37℃ )诱导下 ,gp90基因部分片段以融合蛋白的形式获得了良好的表达。表达产物经聚丙烯酰胺凝胶电泳鉴定 ,确定其表达的融合蛋白相对分子质量为 6 40 0 0。将表达产物从凝胶中回收后免疫小鼠 ,所得的抗血清可与 REV野毒株感染的鸡胚成纤维细胞 (CEF)在免疫荧光试验中起反应。由此表明 ,体外表达的 SNV株gp90 - GST融合蛋白保留了天然蛋白所具有的抗原性。

    2003年01期 28-30页 [查看摘要][在线阅读][下载 110k]
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  • 鸡贫血病病毒VP_2基因在大肠杆菌中的表达及其特性

    刘岳龙,秦爱建,金文杰,叶建强,吉荣,崔治中,段玉友

    将鸡贫血病病毒 (chicken anaem ia virus,CAV) VP2 基因克隆入表达性载体 p GEX- 5 X- 3,在大肠杆菌以谷胱甘肽转移酶 (GST)融合蛋白的形式获得了表达。以此表达产物免疫小鼠 ,制备抗 CAV VP2 的多克隆抗体。通过对 CAV感染的 MSB1细胞作间接免疫荧光试验 (IFA)检测 ,结果为阳性 ,这表明表达产物保留了 CAV相关的抗原特性。本研究为进一步探索 CAV VP2 的生物学特性奠定了基础。

    2003年01期 30-32页 [查看摘要][在线阅读][下载 112k]
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  • 科学家发现鸟类可能是埃博拉病毒传播者

    冯立文

    2003年01期 32页 [查看摘要][在线阅读][下载 35k]
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  • 黑鲷幼鱼腹水病病原菌

    王国良,郑天伦,金珊,陆彤霞

    20 0 1年 9月自浙江省宁波市西沪港海区网箱养鱼场养殖黑鲷濒死鱼体内分离到 1株细菌 ,经人工感染试验证明是黑鲷幼鱼腹水病病原菌。其主要特征为 :革兰氏染色阴性 ,短杆状 ,极生单鞭毛 ,氧化酶阳性 ,发酵葡萄糖产酸不产气 ,经 SWF(A )系统鉴定为拟态弧菌。该菌株对磺胺甲基异恶唑、呋喃妥因、复方新诺明、氯霉素、头孢孟多、丙氟哌酸等药物敏感。

    2003年01期 33-35页 [查看摘要][在线阅读][下载 85k]
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  • 乳铁素参与乳房链球菌对乳腺上皮细胞的粘附

    方维焕,张晓峰,Stephen P. Oliver

    免疫印迹试验表明 ,试验用的 3株乳房链球菌 (Streptococcus uberis)菌株均可与乳铁素 (L actoferrin)结合。培养基中加入乳铁素或乳清可以显著促进细菌与乳腺上皮细胞之间的粘附 ,抗乳铁素抗体可以特异性地抑制乳铁素或乳清预处理细菌与乳腺上皮细胞的粘附。乳铁素在细菌和细胞之间起着桥梁分子作用 ,有助于细菌与乳腺上皮细胞之间的粘附和乳腺感染的建立。

    2003年01期 35-37页 [查看摘要][在线阅读][下载 112k]
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  • 鹿源多杀巴氏杆菌荚膜分型及免疫原性

    陈金山,闫新年,闫喜军,赵传芳,王长凤

    采用 Carter荚膜群鉴定法将分离于我国鹿的 38株多杀巴氏杆菌进行鉴定 ,结果显示 :B型占 6 8.4%(2 6 / 38) ,A型占 18.4%(7/ 38) ,D型占 5 .3%(2 / 38) ,3株未能确定型占 7.9%(3/ 38)。并从 2 6株荚膜 B型巴氏杆菌中选出荧光典型的 8株菌制备免疫原给健康兔注射 ,30 d后用间接血凝法测定各株菌抗体效价 ,选出效价最高的 2株菌 D1 PM和D2 PM用小鼠增毒 ,当毒力稳定后用兔测得 D1 PM ML D为 8个菌 ,D2 PM ML D为 17个菌 ,为疫苗的制造筛选出了优良的菌株。

    2003年01期 38-39页 [查看摘要][在线阅读][下载 55k]
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  • 2株柔嫩艾美耳球虫对5种抗球虫药的抗药性

    金光明,程从升,顾有方,陈会良,吴齐鸿

    选择 130只 2 1日龄雏鸡 ,研究了柔嫩艾美耳球虫 (E.tenella)南京株和凤阳株对地克珠利 (Diclazuril)、马杜霉素(Maduram icin)、氯羟吡啶 (Clopidol)、氯苯胍 (Robenidine)和氨丙啉 (Amprolium)的抗药性。试验鸡随机分成 13组 ,其中每株球虫均设 5个感染用药组、1个感染不用药组 ,另外设 1个不感染不用药组 ,每组 10只鸡。以 POAA、RL S、ROP、ACI作为指标。结果表明 ,2株柔嫩艾美耳球虫均对氨丙啉轻度抗药 ,对地克珠利敏感或轻度抗药 ,对氯羟吡啶中度抗药 ,对马杜霉素和氯苯胍中度抗药或完全抗药。提示 :目前在凤阳地区可合理地使用地克珠利和氨丙啉 ,对氯羟吡啶应慎用 ,对马杜霉素和氯苯胍须减少或暂停使用。

    2003年01期 40-42页 [查看摘要][在线阅读][下载 94k]
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  • 首次在我国蓝氏贾第虫(Giardia lambia)体内发现病毒粒子

    田宗成,张西臣

    2003年01期 42页 [查看摘要][在线阅读][下载 43k]
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  • 实验性蛔虫感染鸡空肠粘膜和胸腺髓质肥大细胞的数量变化

    欧德渊,高登慧,王开功,许乐仁

    对试验性蛔虫感染鸡的空肠粘膜和胸腺髓质肥大细胞的数量变化的研究表明 ,蛔虫感染鸡空肠粘膜肥大细胞较对照组有轻度增多 ,但无统计学显著差异性 (P>0 .0 5 )。然而 ,试验组鸡的胸腺髓质肥大细胞为 (136± 49)个 / m m2 ,较对照组的 (2 73± 5 6 )个 / mm2有极显著减少 (P<0 .0 0 1)。似乎试验感染鸡胸腺髓质肥大细胞的显著减少与空肠粘膜肥大细胞的相对增多之间存在某些相关性。

    2003年01期 43-46页 [查看摘要][在线阅读][下载 155k]
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  • 大肠杆菌不耐热肠毒素(LT)突变体LTR72的表达与鉴定

    郭学军,张锦霞,朱平

    将重组质粒 p L TR72和 p L T分别转化大肠杆菌 JM10 1、DH5 α 和 C6 0 0 ,并接种于 L B和 CAYE- 2中培养 ,用GM1- EL ISA法检测菌体裂解液中 2者的表达情况 ,将表达产物纯化后用 SDS- PAGE等方法鉴定。结果表明 ,3种大肠杆菌在 2种培养基中都可表达出 L T突变体和 L T,并可将产物分泌到大肠杆菌胞周质中 ,成为具有 GM1结合活性的突变体蛋白 ;鉴定纯化后的突变体的组成形式与野生型 L T相同 ,均是 1A∶ 5 B。

    2003年01期 46-48页 [查看摘要][在线阅读][下载 105k]
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  • 大肠杆菌vpr基因突变株的构建及其特性鉴定

    严亚贤,陆承平,Heather E.Allison

    将重组自杀性质粒 p YYvpr转化到含全 vpr基因的 E.coli MC10 6 1感受态细胞中 ,利用卡那霉素抗性筛选到 6个菌落 ,经 PCR和 Southern blot进一步验证 ,得到一个可靠的 vpr同源基因突变株 ,即 MC10 6 1△ vpr。该突变株与亲本 MC10 6 1具有相似的生长特征。噬菌体裂解试验表明 ,突变株对 VT2噬菌体 C43b不敏感 ,而 MC10 6 1敏感 ,可见大量的蚀菌斑。噬菌体溶原试验表明 ,MC10 6 1和突变株 MC10 6 1△vpr对噬菌体的敏感性无差别。所有这些表明 ,vpr基因与 VT2噬菌体的裂解性有关 ,可能是编码 VT2噬菌体受体蛋白的基因。

    2003年01期 49-51页 [查看摘要][在线阅读][下载 132k]
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  • 大肠杆菌O157 Z4182基因的克隆与表达

    秦晓冰,周志江,丁伟,赵玉龙,唐中伟,任家琰

    根据大肠杆菌 O15 7Z4182基因设计 1对引物 ,并在其 5′端分别加入 Nco 、Xho 酶切位点 ,用聚合酶链反应(PCR)从本试验用的大肠杆菌 O15 7及 1株产志贺毒素大肠杆菌 (STEC) O8、1株肠道聚集粘附大肠杆菌 (EAgg EC)和 1株产肠毒素性大肠杆菌 (ETEC)菌株中也扩增出了 80 3bp的 DNA片段。以大肠杆菌 O15 7菌株 94H的 DNA为模板 ,用上述引物做 PCR,将其产物连接到载体质粒 p ET2 8a(+) ,然后转化到宿主菌大肠杆菌 L E392 ,从该菌中提取重组质粒 ,再将其转化到表达宿主大肠杆菌 BL2 1(DE3) ,用 PCR、限制性内切酶位点分析及核苷酸序列测定法对克隆的重组质粒进行鉴定 ,表明 Z4182基因定向克隆到了载体质粒 p ET2 8a(+)。将转化子培养并经 IPTG诱导后 ,做SDS- PAGE电泳 ,表明该菌株可以表达 Z4182基因。本试验为阐明大肠杆菌 O15 7Z4182基因的分布及探讨该基因产物的功能和致病作用奠定了基础。

    2003年01期 52-55页 [查看摘要][在线阅读][下载 162k]
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  • 法国研究人员成功用胚胎干细胞修复老鼠缺损心脏

    冯立文

    2003年01期 55页 [查看摘要][在线阅读][下载 38k]
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  • 家兔肌肉组织表达外源性生长激素释放因子对增重的影响

    张永亮,连继勤,刘松财,冯立文

    用 Wicks法提取 pc DNA- GRF(1~ 32 )质粒并用 DNA Cacu L ator定量 ,同时制备原生质体。将 5 4只家兔随机分为 9组 ,分别注射质粒 pc DNA- GRF(1~ 32 ) 0 .4(用布比卡因处理 )、0 .4(含 10 %甘油 )、0 .4(含 2 5 %蔗糖 )、0 .2、0 .4、0 .6、0 .8mg及空质粒 0 .1mg和原生质体 1m L( ~ 组 )。分别于注射后 0、3、8、14、19、2 4、31d称重 ;于注射后 0、3、8、19、31d采血并分离血清 ,测定血清中 GH浓度 ,用 t检验进行统计学分析。结果表明 ,布比卡因处理组注射后 3d内GH浓度升高 6 5 %(P<0 .0 1) ,平均日增重 2 9g(P<0 .0 5 ) ;注射 0 .8mg组 31d平均日增重较对照组多 34 .6 2 %;注射原生质体组 31d平均日增重较对照组多 40 .5 7%(P<0 .0 5 )。 31d后将家兔屠宰 ,取注射部位肌肉提取 DNA和总RNA,用 PCR和 RT- PCR方法分别检测到了 GRF在肌肉中的存在和表达 ;用 EL ISA方法没能检测到血清中的 GRF抗体。

    2003年01期 56-58页 [查看摘要][在线阅读][下载 106k]
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  • 谷氨酰胺对早期断奶仔猪胰腺及小肠胰蛋白酶活性的影响

    王连娣,张军民,高振川,姜云侠,张琪

    选用大长北母猪所产仔猪 45头 ,2 1日龄断奶。断奶时宰杀 5头公仔猪作为哺乳对照 ,其余仔猪按公母各半随机分为 2组 ,试验组添加 1.2 %谷氨酰胺。断奶后 14d和 2 8d宰杀仔猪 ,以研究谷氨酰胺对早期断奶仔猪胰腺和小肠胰蛋白酶活性的影响。断奶后 14d,日粮中添加谷氨酰胺可极显著提高胰腺胰蛋白酶相对活性和总活性 (P<0 .0 0 1)以及比活 (P<0 .0 1) ,而对十二指肠、空肠和回肠食糜及粘膜中胰蛋白酶活性无显著影响 ;断奶后 2 8d时 ,日粮添加谷氨酰胺对胰腺、十二指肠、空肠和回肠食糜粘膜中胰蛋白酶活性均无显著影响。对照组仔猪胰腺、十二指肠和回肠胰蛋白酶活性在断奶后 14d已基本恢复到断奶时水平 ,空肠胰蛋白酶活性显著超过断奶时水平 (P<0 .0 5 ) ;断奶后 2 8d胰腺胰蛋白酶比活和总活性极显著高于断奶后 14d(P<0 .0 1) ,胰腺和回肠胰蛋白酶相对活性显著高于断奶后 14d(P<0 .0 5 )。试验组仔猪胰腺和空肠胰蛋白酶相对活性和比活在断奶后 14d极显著超过断奶时水平 (P<0 .0 1) ,达到了对照组断奶后 2 8d时酶活性水平 ;断奶后 2 8d胰腺胰蛋白酶相对活性、比活和总活性维持在断奶后 14d水平 ,而空肠胰蛋白酶相对活性和比活又降至断奶时水平。结果表明 ,早期断奶仔猪日粮中添加谷氨酰胺有助于缓解由于早期?

    2003年01期 59-61页 [查看摘要][在线阅读][下载 98k]
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  • 生物学成为纳米技术突破口

    冯立文

    2003年01期 61页 [查看摘要][在线阅读][下载 42k]
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  • 外源性谷氨酰胺和谷氨酸对早期断奶仔猪肠粘膜形态、结构和小肠吸收功能及骨骼肌中DNA、RNA浓度的影响

    刘涛,彭健,周诗其,程学慧,陈钢

    74头 2 8日龄健康二元杂交断奶仔猪分成 3组 ,用于研究外源性谷氨酰胺 (glutam ine,Gln)和谷氨酸 (glutamate,Glu)对断奶仔猪小肠粘膜形态、结构和功能及骨骼肌中 DNA、RNA合成的影响。结果表明 :与对照组相比 ,添加 1%谷氨酰胺或 1%谷氨酸可防止断奶后 1周内空肠绒毛萎缩 ,减少断奶后 2周内空肠固有膜内未成熟细胞数 ;显著改善断奶后 1周内小肠吸收功能 ,并促进肌肉中 RNA合成。这些结果为利用 Gln、Glu缓解仔猪断奶应激 ,改善生产性能提供了实验基础。

    2003年01期 62-65页 [查看摘要][在线阅读][下载 152k]
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  • 《科学》评出2002年十大科学成就

    郭志儒

    2003年01期 65页 [查看摘要][在线阅读][下载 48k]
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  • 端粒酶活性在哺乳动物细胞中的表达

    阮承迈,陈守义,吴东林,李鹏,马鹤雯,马永红,张玉静

    为研究端粒酶活性在哺乳动物细胞中的激活 ,构建了端粒酶催化亚基 (human telomerase reverse transcriptase,h TERT)和端粒酶 RNA组分 (h TR)基因的真核表达载体 ,分别在无端粒酶活性的 DK细胞株和人肝癌细胞中进行表达 ,以 TRAP-银染和 TRAP- EL ISA定量方法测定转染细胞。结果显示 ,在人肝癌细胞株中仅 h TERT表达即可使端粒酶活性显著增加 ,而 DK细胞中 h TERT必须和 h TR同时转染才有端粒酶活性表达。这一结果表明 ,端粒酶活性表达主要和 h TERT/ h TR有关 ,采用人的端粒酶 h TERT/ h TR在其他哺乳动物细胞中表达端粒酶活性是可行的。

    2003年01期 66-68页 [查看摘要][在线阅读][下载 97k]
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  • 寡果糖对肥育猪生长性能、肠道菌群和免疫功能的影响

    许梓荣,胡彩虹

    饲粮中添加 0 .2 5 %、0 .5 %和 0 .75 %寡果糖 ,观察了其对杜长加肥育猪生长性能、肠道菌群和免疫功能的影响。与对照组相比 ,肥育猪日粮中添加 0 .2 5 %、0 .5 %和 0 .75 %寡果糖 ,使日增重分别提高 4.0 0 %(P<0 .0 5 )、9.6 7%(P<0 .0 1)和 10 .6 7%(P<0 .0 1) ,添加 0 .5 %和 0 .75 %寡果糖 ,使料重比分别降低 8.19%(P<0 .0 1)和 7.6 0 %(P<0 .0 5 ) ;添加 0 .5 %和 0 .75 %寡果糖 ,使结肠中双歧杆菌、乳酸杆菌数分别增加 2 99.49%(P<0 .0 1)和 314.81%(P<0 .0 1) ,97.40 %(P<0 .0 5 )和 141.6 7%(P<0 .0 5 ) ,并使结肠内容物 p H值分别降低 0 .5 0 (P<0 .0 5 )和 0 .90 (P<0 .0 1) ;添加0 .2 5 %、 0 .5 %和 0 .75 %寡果糖 ,使结肠中大肠杆菌以及梭菌数分别下降 35 .6 5 %(P<0 .0 1)、86 %(P <0 .0 1)和82 .47%(P<0 .0 1)以及 37.91%(P<0 .0 5 )、98.5 3(P<0 .0 1)和 94.6 6 %(P<0 .0 1) ;添加 0 .2 5 %、0 .5 %和 0 .75 %寡果糖 ,使血清中 Ig A分别提高 11.74%(P<0 .0 5 )、2 4.88%(P<0 .0 1)和 30 .5 2 %(P<0 .0 1) ,添加 0 .5 %和 0 .75 %寡果糖 ,使血清 Ig G分别提高 13.0 5 %(P<0 .0 5 )和 11.42 %(P<0 .0 5 ) ,并使血液中 SOD活性分别提高 2 0 .10 %(P<0 .0 1)和 16 .36 %(P<0 .0 5 ) ,添加

    2003年01期 69-71页 [查看摘要][在线阅读][下载 103k]
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  • 单诺沙星(Danofloxacin)在雏鸡体内的组织动力学及残留

    张秀英,佟恒敏,郭文欣

    以高效液相色谱法为定量手段 ,研究了单诺沙星 (danofloxacin)在雏鸡体内的组织动力学特征 ,并采用回归分析法研究了血药浓度与组织药物浓度间的相关性。6 0只雏鸡口服单诺沙星 (5 m g/ kg)后 ,血浆的药时数据符合一级吸收二室模型。肝脏、肾脏、心脏、肺脏的药时数据符合一级吸收三项指数方程 ;心脏的药时数据符合一级吸收二项指数方程。血浆、肝脏、肾脏、心脏、肺脏及肌肉的主要动力学参数是 :t1 /2 ka分别为 0 .2 42 8、0 .35 2 4、0 .35 41、0 .2 6 43、0 .3377、0 .2 5 36 h、t1 /2α分别为 0 .8917、1.12 12、0 .7189、1.6 142、0 .44 37h(缺肌肉的 t1 /2α) ,t1 /2β分别为 8.7936、3.6 0 2 5、4.45 70、10 .2 940、4.32 83、5 .95 78h,Tp分别为 0 .9377、1.0 6 6 5、0 .936 2、0 .9993、0 .996 2、1.4381h,Cmax分别为0 .5 487、 2 .8419、 2 .42 95、 0 .2 6 6 8、 1.70 42、 0 .2 72 6 m g/ L ,AUC分别为 3.0 5 2 3、 13.5 86 0、 10 .4180、 2 .15 2 1、9.6 888、2 .715 7mg/ (L· h) ,Tcp分别为 12 .6 130、18.0 730、18.8790、8.0 5 5 7、19.6 930、13.86 0 0 h。研究结果表明 ,组织中的药物浓度以肝脏、肾脏最高 ,其次是肺脏 ,均显著高于血浆中的药物浓度 ,心脏、肌肉中的浓度最低 ,血浆?

    2003年01期 72-74页 [查看摘要][在线阅读][下载 103k]
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  • 原位杂交技术用于虹彩病毒对美国青蛙侵染的诊断

    谢简,张奇亚,李文鑫

    蛙虹彩病毒 (Rana grylio virus,RGV)能引起鱼类、两栖类和爬行类水生动物严重的系统性疾病 ,RGV是从我国患病蛙中分离到的一种虹彩病毒。体外扩增的 RGV经人工方法感染幼龄美国青蛙 (Rana grylio) ,运用原位杂交技术 ,分别对感染 1~ 3d后的蛙心、肺、肾、肠、脾、肝等 6种组织进行 RGV分子定位和检测。结果显示 ,在幼蛙的肺和肠中有较强的阳性信号 ,在其他组织中也检测到 RGV的存在。本试验探讨了 RGV感染早期在宿主体内的增殖及在不同组织中的分布状况 ,建立了一种蛙虹彩病毒的早期诊断方法 ,并为揭示 RGV的致病机制奠定了基础。

    2003年01期 75-77页 [查看摘要][在线阅读][下载 154k]
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  • 低温致肉鸡腹水综合征及用L-精氨酸的预防

    韩博,王小龙

    40 0只 1日龄 AA肉鸡 ,14日龄时保优淘弱 ,随机分群 ,其中 10 0只为正常温度 (2 0℃ )对照组 ,15 0只为低温(11℃ )试验组 ,10 0只为低温 (11℃ )试验鸡日粮添加 1%L -精氨酸组 ,用单因子低温诱发肉鸡腹水综合征 ,于不同时间分别用红细胞压积、心脏指数、腹水和心电图的各导联波幅变化判定肉鸡腹水综合征。结果表明 :环境温度为 11℃时 ,低温试验组肉鸡复制出腹水综合征模型 ,腹水综合征发生率为 9.33%、心脏指数 (RV/ TV)为 15 .3%(>0 .2 5 )、红细胞压积 (PCV)为 2 1.33%(>36 %)、心电图 导联 S波振幅为 0 .39m V和净增重为 0 .0 9kg,均显著地高 (低 )于正常对照组 (3%、4%、10 %、0 .0 8m V、0 .5 2 kg) (P<0 .0 1)。日粮添加 1%L-精氨酸的低温试验肉鸡腹水综合征发生率为 3%、心脏指数为 9%、PCV为 12 %、心电图 导联 S波振幅为 0 .17m V、净增重为 0 .5 2 kg,与低温试验组比较 ,差异显著 (P<0 .0 1) ;与对照组比较 ,差异不显著 (P>0 .0 5 ) ,说明 L -精氨酸能够增加肉鸡体重、降低腹水综合征的发生。

    2003年01期 78-81页 [查看摘要][在线阅读][下载 134k]
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  • 淮南麻黄鸡血清酯酶多态性与屠宰性能及肉质的关系

    耿照玉,姜润深

    采用不连续聚丙烯酰胺凝胶电泳方法 ,测定了淮南麻黄鸡的血清酯酶多态性 ,探讨其与屠宰性能和肉质的关系。结果表明 ,AA基因型鸡的活重、胸肌率和腿肌率均显著高于 AB、BB基因型鸡 (P<0 .0 5 ) ;腹脂率 AB基因型鸡极显著低于 AA、BB型鸡 (P<0 .0 1) ;血清酯酶各基因型鸡的肌肉品质无显著差异 ;AA基因型鸡的腿肌肌纤维直径显著高于 AB、BB型。

    2003年01期 82-83页 [查看摘要][在线阅读][下载 55k]
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  • 日粮铜对猪生长性能及血清GH、INS、IGF-Ⅰ、IGFBP_3水平的影响

    刘国文,周昌芳,王哲,张乃生,龚伟,张苏江,张光圣,冯海华,付世新

    选用 6 0头断乳“军牧 1号”白猪 ,分成 6组 ,每组 10头 ,分别饲以添加 0、10 0、15 0、2 0 0、2 5 0、30 0 mg/ kg铜 (硫酸铜 )的日粮 ,进行为期 80 d的饲养试验 ,定期称重、采血 ,观测铜对仔猪生长性能及血液 GH、INS、IGF- 、IGFBP3 的影响。结果表明 :基础日粮中添加 10 0~ 30 0 m g/ kg铜均能促进仔猪的生长 ,降低饲料消耗 ,其中以 2 5 0 m g/ kg铜和第40~ 6 0天最为显著 (P<0 .0 1)。高剂量铜能显著提高循环血液中 GH、INS、IGF- 、IGFBP3 的水平 ,其中以添加 2 5 0mg/ kg铜水平 ,于试验期第 2 0~ 40天最为明显 (P<0 .0 1)。高铜促生长作用显然是通过促进 GH、INS、IGF- 的合成和分泌而实现的。

    2003年01期 84-87页 [查看摘要][在线阅读][下载 144k]
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  • 饲粮中添加镧对猪生长的影响及安全性

    王敏奇,许梓荣

    6 0头“杜长大”生长猪分为 2组 (每组 3个重复 ) ,分别饲喂添加 0、10 0 mg/ kg镧 (lanthanum,L a)的相同饲粮 ,进行了为期 30 d的饲养试验 ,以研究稀土元素镧对猪生长性能的影响。采取血样分析了生长激素分泌模式 ,并通过对内脏器官中镧残留量的检测 ,对其饲用安全性进行了初步探讨。结果显示 ,添加镧使生长猪日增重、饲料转化效率分别提高了 13.0 6 %(P<0 .0 5 )和 6 .5 3%(P<0 .0 5 ) ;血清生长激素峰强度、基线水平、总体水平分别提高了 10 3.35 %(P<0 .0 5 )、89.88%(P<0 .0 5 )和 90 .91%(P<0 .0 5 ) ;各器官脏器中镧含量未发现有明显变化。

    2003年01期 88-90页 [查看摘要][在线阅读][下载 94k]
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  • CD58对妊娠早期山羊子宫局部细胞因子的调节

    马勇江,靳亚平,曹斌云,李引乾,沈文正

    采用 IL - 2的生物学测定方法 ,IL - 4、TGF-β1 、TGF-β2 试剂盒等方法 ,对正常妊娠组山羊妊娠早期 (15~ 19d)子宫局部细胞因子 IL- 2、IL- 4、TGF- β、TGF- β2 水平 (活性 )的变化规律进行了研究。结果发现 ,妊娠早期山羊子宫两侧局部细胞因子水平 (活性 )无显著性差异。 IL - 2活性先上升 ,后出现下降趋势 ;IL - 4水平一直呈上升趋势 ;TGF-β1 水平较高 ,但呈不规则曲线变化 ;TGF- β2 先上升 ,后趋于平稳 ,并保持在较高水平。证明妊娠早期山羊子宫局部细胞因子分泌及活性有一动态变化规律。对 CD5 8处理后山羊妊娠 16~ 18d子宫局部上述细胞因子水平 (活性 )与同期正常妊娠相比的变化情况的研究发现 ,CD5 8极显著抑制 IL- 2的产生 ,而明显促进 IL- 4的产生 ,对 TGF- β2 的产生具有一定促进作用 ,而对 TGF- β1 无影响。证明 CD5 8对妊娠早期山羊子宫局部细胞因子的产生具有调节作用。

    2003年01期 90-93页 [查看摘要][在线阅读][下载 141k]
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  • 蓝狐卵母细胞的体内外成熟

    刘国世,曾申明,吴中红,田见晖,朱士恩,张忠诚

    对蓝狐卵母细胞成熟时间和超数排卵后卵母细胞的发育阶段进行了研究。采集间情期 (11~ 12月份 )蓝狐卵巢 ,用切割法回收卵泡中的卵母细胞 ,每个卵巢平均获得 8个卵丘卵母细胞复合体 (COCs:cumulus oocyte complexes,480个卵 / 6 0个卵巢 )。COCs在成熟液 (TCMI99+10 %FCS+10 μg/ L EGF+10 IU/ m L PMSG+10 IU/ m L h CG)培养 ,并在不同时间将卵母细胞固定、染色观察其成熟阶段。结果表明 ,核网期卵母细胞在培养前的比例为 80 .70 %(P<0 .0 1) ;GV期卵母细胞在培养 2 4h比例最高 (34 .0 4%,P<0 .0 1) ;GVBD期卵母细胞也是在培养 2 4h比例较高(4 4.6 8%,P<0 .0 5 ) ;M 期卵母细胞在培养 48~ 12 0 h比例较高 (P<0 .0 5 ) ,48h最高 (30 .0 0 %) ;M 期卵细胞在培养 72~ 96 h比例较高 (P<0 .0 5 ) ,72 h比例最高 (2 9.41%) ;卵母细胞在培养 12 0 h退化比例最高 (2 2 .2 2 %,P<0 .0 1)。因此 ,间情期卵母细胞体外培养 72~ 96 h为最佳。对繁殖季节 (3月份 )蓝狐进行超排处理 ,回收卵巢卵泡中卵母细胞及输卵管、子宫角的卵母细胞 ,固定、染色 ,观察其所处的发育阶段。母狐皮下注射 5 0 0 IU PMSG,48h后皮下注射 2 5 0 IU h CG,一组在 72 h后屠宰 ,结果表明 ,母狐卵巢体积虽然有所增大 ,但没有排卵 ,将卵泡中

    2003年01期 94-97页 [查看摘要][在线阅读][下载 143k]
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  • 基因疫苗的免疫方法

    冯立文

    2003年01期 97页 [查看摘要][在线阅读][下载 41k]
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  • 不可小看RNA:是“遗传信使”又是基因“控制者”

    冯立文

    2003年01期 97页 [查看摘要][在线阅读][下载 41k]
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  • 巴斯德毕赤酵母(Pichia pastoris)表达系统及其在外源蛋白生产中的优势与应用前景

    马兴元,谭建华,朱平,孙曼霁

    2003年01期 98-101页 [查看摘要][在线阅读][下载 158k]
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  • 我国饲料卫生研究概述

    王建华

    2003年01期 102-104页 [查看摘要][在线阅读][下载 69k]
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  • 《科学》杂志预言2003年世界科技六大热点

    冯立文

    2003年01期 104页 [查看摘要][在线阅读][下载 21k]
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