• 20世纪生命科学的历史回顾与展望

    涂长春

    2003年03期 209-210+213页 [查看摘要][在线阅读][下载 86k]
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  • J亚群禽白血病病毒与禽网状内皮增生症病毒共感染对肉鸡生长和免疫功能的抑制作用

    王建新,崔治中,张纪元,王增福,陈本龙,王锡乐

    1日龄肉鸡感染 J亚群禽白血病病毒 (AL V- J)以及共感染禽网状内皮增生症病毒 (REV)后 ,肉鸡生长发育明显受阻 ,体重增重明显下降 (P<0 .0 5 ) ,法氏囊、胸腺明显萎缩 (P<0 .0 5 ) ,在用新城疫疫苗免疫后 ,感染组血清中新城疫抗体效价显著低于对照组 (P<0 .0 5 ) ;在 AL V- J和 REV共感染后 ,这种抑制作用更为明显 (P<0 .0 1 )。AL V- J单独感染后 ,鸡对传染性法氏囊病病毒 (IBDV)弱毒疫苗免疫后的抗体反应与对照组没有明显差别 ,但 AL V- J与 REV的共感染可明显延缓鸡对 IBDV弱毒疫苗免疫的抗体反应

    2003年03期 211-213页 [查看摘要][在线阅读][下载 103k]
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  • 共表达新城疫病毒F基因、传染性法氏囊病病毒VP_0基因的重组鸡痘病毒的抗原性和免疫原性

    夏志平,金宁一,金扩世,郭志儒,许凌峰,王宏,郑敏,张洪勇,赵怀龙

    以鸡痘病毒 (FPV) 2 82 E4 株 TK基因为侧翼 ,将 2个相同的复合启动子 ATI· p7.5× 2 0以反向方式连接 ,分别调控新城疫病毒 (NDV) F基因和传染性法氏囊病病毒 (IBDV) VP0 基因 ,得到重组转移质粒 p VP0 - 2 ATI· p7.5× 2 0 -F。然后将该重组转移质粒用脂质体转染预先感染 FPV 2 82 E4 株的鸡胚成纤维细胞 (CEF) ,在经 Brd U (5 -溴 -脱氧尿嘧啶 )加压处理后的 CEF上传代 ,用间接免疫荧光试验、Western blot检测 ,有 2株鸡痘病毒能同时表达 NDV F蛋白和IBDV VP0 蛋白。用这 2株重组鸡痘病毒刺种商品 L eghorn雏鸡 ,于刺种前及刺种后 1、2、3周对抗 NDV特异性抗体水平和淋巴细胞转化能力检测 ,结果发现 ,重组鸡痘病毒能激发机体产生良好的免疫反应。结果表明 ,重组鸡痘病毒可以作为疫苗备选株进行研究与开发

    2003年03期 214-217页 [查看摘要][在线阅读][下载 138k]
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  • 我国部分地区新城疫病毒的流行现状分析

    刘华雷,王永坤,严维巍,朱国强,陈溥言

    从近年来由我国不同地区、不同宿主分离到的新城疫病毒 (NDV)野外分离株中 ,选取其中具有代表性的 1 6株 ,用 RT- PCR技术扩增其 F基因重要的功能区片段 ,进一步进行克隆和序列测定。参照国内外已发表的部分毒株的 F基因序列 ,构建了 5 9株 NDV的遗传进化树 ,分析其毒株间的遗传进化关系。序列分析表明 ,所扩增的目的片段长度为 5 35 bp,所分离的毒株在分裂位点的氨基酸顺序为 1 1 2 R- R- Q/ R- K/ R- R- F1 1 7,均相当于 NDV的强毒株。通过遗传进化树分析表明 ,1 6株分离株中有 1 3株为基因 型 NDV,说明目前基因 型 NDV所引起的新城疫在国内呈流行趋势。

    2003年03期 218-221页 [查看摘要][在线阅读][下载 128k]
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  • 人类基因组序列图绘制完成

    2003年03期 221页 [查看摘要][在线阅读][下载 35k]
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  • 鸭疫里默氏杆菌血清7型的病原特性

    汪铭书,程安春,陈孝跃,刘兆宇,方鹏飞,郭宇飞

    1 994年 1月~ 2 0 0 0年 1 0月 ,从全国 2 3个省 (市、自治区 )不同代次 (原种、祖代、父母代和商品代 )的 5~ 90日龄患有典型鸭传染性浆膜炎的病死鸭分离到 87株血清 7型的鸭疫里默氏杆菌 (Riemerella anatipestifer,RA)。对其病原学特性研究的结果表明 ,血清 7型 RA在我国鸭群感染分布的范围极广 ,分离菌株对雏鸭具有很强的致病性 ,对小鼠无致病性 ,各地分离菌株表现出一致的形态特征和非常相似的生化特性 ;各地分离菌株耐药谱很广 ,但对头孢类药物(如头孢拉啶、头孢克洛等 )和利福平却普遍高度敏感。用分离菌株制备的灭活疫苗免疫雏鸭具有良好的免疫原性

    2003年03期 222-225页 [查看摘要][在线阅读][下载 135k]
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  • 首例人重组痘苗病毒实验室感染

    郭志儒

    2003年03期 225页 [查看摘要][在线阅读][下载 34k]
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  • 番鸭细小病毒和鹅细小病毒二联弱毒细胞苗的研究

    陈少莺,胡奇林,程晓霞,李怡英,程由铨,林天龙

    应用适应于番鸭胚成纤维细胞 (MDEFC)上繁殖 ,并产生细胞病变的鹅细小病毒 (GPV)弱毒疫苗株与番鸭细小病毒 (MPV)弱毒疫苗 ,按适当比例混合 ,试制了 MPV- GPV二联弱毒细胞苗 ,并测定了各项免疫指标。结果显示 :试制出的二联苗对 1日龄雏番鸭具有良好的安全性和遗传稳定性 ;免疫后 5 d和 7d攻击 GPV强毒 ,保护率分别为 75 %和 1 0 0 % ,同时免疫后 7d血清中 MPV-胶乳凝集抑制 (L PAI)抗体效价均大于 2 1 ,2 1~ 2 8d抗体达高峰 ,有效免疫期超过 6 0 d。疫苗于 - 2 0℃保存期大于 1 2个月。上述结果表明 ,二联弱毒细胞苗安全有效

    2003年03期 226-228页 [查看摘要][在线阅读][下载 80k]
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  • 犬冠状病毒核酸探针的制备及其基因序列的测定与比较

    胡桂学,夏咸柱,鲍志宏,黄海龙,高云航

    采用 RT- PCR方法扩增犬冠状病毒 (CCV) YS1、CI1和 NL- 1 8株 5′端部分 S基因序列 ,以随机插入 DNA法对CCV YS1株纯化的 PCR产物标记 32 P同位素 ,制备核酸探针 ,并与 3株 CCV反转录产物杂交。用平端连接法将 3株CCV PCR产物克隆于 p U C1 9Sma 位点或 p GEM- T载体中 ,经 PCR鉴定为正确重组质粒。以双脱氧末端终止法测定了重组质粒的 c DNA核苷酸序列 ,并用 DNASIS计算机软件进行多重比较分析 ,绘制系统树。结果表明 ,所制备的核酸探针可与 3株 CCV反转录产物杂交 ,其核苷酸序列与多株 CCV相应序列的同源性高达 91 .9%~ 99.1 % ,为CCV的保守区。由此说明 ,制备的核酸探针可用于犬 CCV感染的分子流行病学研究

    2003年03期 228-230页 [查看摘要][在线阅读][下载 114k]
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  • 犬瘟热病毒OP株囊膜糖蛋白F基因片段表达产物的免疫原性

    徐向明,吉荣,崔治中,李厚达,秦爱建,殷俊,杨玲,刘岳龙,金文杰

    根据已发表的犬瘟热病毒 OP株核酸序列设计 2对引物 ,以犬瘟热病毒 OP株感染 Vero细胞收获病毒提取的RNA为模板 ,应用 RT- PCR扩增出 F基因的 76 9、832 bp片段。将 PCR产物按正确的阅读框架定向克隆进 p GEX- 6 p-1载体中谷胱甘肽 - S-转移酶 (GST)基因的下游 ,再将重组质粒转化入宿主菌 BL2 1 中 ,在 37℃ 1 .0 mmol/ L IPTG诱导下 ,F基因 2个片段获得了良好的表达。表达产物经聚丙烯酰胺凝胶电泳鉴定 ,确定所表达的融合多肽大小分别为5 4 0 0 0、5 6 0 0 0。将表达产物回收后混合免疫小鼠 ,IFA显示 ,免疫小鼠血清能与病毒感染细胞呈现特异反应 ,并表现出 1∶ 1 6的中和抗体活性 ,表明体外表达的 F多肽保留了天然蛋白的部分抗原性

    2003年03期 231-233页 [查看摘要][在线阅读][下载 108k]
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  • 实验室人工感染诱发猪瘟野毒垂直传播

    赵耘,宁宜宝,王在时,王琴,宋立,张广川,秦玉明,沈青春,丘惠深

    利用 2头人工感染中等毒力猪瘟野毒耐过猪进行配种 ,诱发了猪瘟野毒垂直传播。带毒母猪于带毒后 1 71 d产下 9头仔猪 ,其中 3头为死胎 ,6头为木乃伊。直接免疫荧光抗体试验和 RT- PCR检测 ,9头均为阳性。测序结果表明 ,3头测序仔猪中 ,2头仔猪所分离病毒 E2基因主要抗原编码区序列与公猪所接种病毒的一致 ;另 1头仔猪所分离病毒E2基因主要抗原编码区序列与公猪所接种病毒的同源性高于与母猪所接种病毒的同源性。母猪在与公猪配种前后 ,其所分离病毒 E2基因主要抗原编码区序列发生了变化 ,配种后与公猪所分离病毒的一致 ,说明猪瘟病毒在猪体内的繁殖存在一定的优势选择现象

    2003年03期 234-236页 [查看摘要][在线阅读][下载 97k]
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  • 大肠杆菌K88ac-ST_1-LT_B三价基因工程菌株的构建

    卫广森,陆承平,陈溥言

    利用 PCR技术 ,从大肠杆菌 C8390 2质粒中扩增出 K88ac基因、ST1 突变基因和 L TB基因 ,通过分离、纯化、内切酶酶切、连接和转化 ,构建了含 K88ac- ST1 - L TB融合基因表达载体的重组菌株 BL 2 1 (DE3) (p XKST3L T5 )。经酶切鉴定和 DNA序列分析证实 ,构建的重组质粒 p XKST3L T5中含有 K88ac- ST1 - L TB融合基因 ,且基因序列和阅读框架均正确。免疫试验结果表明 ,K88ac- ST1 - L TB融合蛋白能够诱发机体产生抗体 ,该抗体具有中和天然 ST1 肠毒素毒性的作用。用从 IPTG诱导的工程菌中提取的包涵体或经甲醛灭活的工程菌制成抗原免疫小鼠 ,结果免疫小鼠至少能抵抗2 ML D的大肠杆菌强毒株 C8390 2 (K88ac,ST+ ,L T+ )的攻击。由此表明 ,构建的工程菌株 BL 2 1 (DE3) (p XKST3L T5 )可以作为预防幼畜大肠杆菌性腹泻的基因工程菌苗的候选株

    2003年03期 237-239页 [查看摘要][在线阅读][下载 134k]
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  • 黄鳝温和气单胞菌病病原的分离鉴定及免疫应答

    徐海圣,舒妙安

    从患病黄鳝苗种的肝脏、消化道、血液中分离到 2株细菌 ,经腹腔人工注射及浸浴感染试验均出现与自然病例相似的症状 ,并从病鳝体内重新分离到生理生化特性与原菌株相同的细菌。经多项形态、生理生化测试 ,此 2株细菌均鉴定为温和气单胞菌 (Aeromonas sobria)。该菌对先锋霉素 、复达欣、头孢呋肟、菌必治、氟嗪酸等药物高度敏感 ,可选用这些药物拌饵投喂黄鳝苗种 ,来防治黄鳝苗种的温和气单胞菌病。免疫试验表明 ,黄鳝在免疫后 7d可以检测到抗体 ,滴度为 2 5(32 ) ,以后逐渐上升 ,2 1 d达最大值 2 1 2 ,随后下降 ,免疫保护率较对照组有明显提高

    2003年03期 240-242页 [查看摘要][在线阅读][下载 76k]
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  • 鸡毒霉形体HS株pMGA多基因族序列分析

    沈青春,毕丁仁,翁长江,李自力,石德时,许青荣,程峰

    用限制性核酸内切酶对鸡毒霉形体 (MG) HS株基因文库中经初步估测可能含有的 4个鸡毒霉形体粘附蛋白(protein of Mycoplasma gallisepticumadhesin,p MGA)基因的 Mg W1 7重组质粒进行了不同组合的酶消化 ,根据消化片段的大小及酶切位点绘制了 7.5 kb外源片段的物理图谱 ;然后根据所得的物理图谱 ,选用 Pst 和 Eco R 将Mg W1 7外源片段酶解成 1 .3、2 .0、4 .2 kb3个部分 ,将它们分别亚克隆到 SK( + ) 质粒上 ,得到了 3个亚克隆子SGp1 0 0、SGp2 0 0、SGp30 0。使用核酸外切酶 缺失法构建缺失子系列 ,经序列分析后得到 Mg W1 7外源片段的全部序列。序列全长 74 34bp,中间含有 2个完整的 p MGA基因和另 2个不完整的 p MGA基因的首部和尾部 ,分别将它们顺次命名为 H- p MGA1 .1、H- p MGA1 .2、H- p MGA1 .3和 H- p MGA1 .4。 2个完整的 p MGA基因的阅读框长度分别为1 96 7bp(1 .2 )和 2 0 39bp(1 .3) ;H- p MGA1 .1首部不完整的阅读框的长度为 72 0 bp,尾部不完整的 H- p MGA1 .4的长度为 1 75 2 bp。将 H- p MGA基因与已报道的 MG.S6株、F株的 p MGA基因进行了比较 ,探讨了 p MGA基因在不同MG菌株中的相似性、基因启动子结构的差异、间隔区内 GAA重复序列对转录调控的影响等

    2003年03期 243-246页 [查看摘要][在线阅读][下载 134k]
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  • 附红细胞体自然感染猪血液流变学

    马海利,黄美生,任家琰,郑明学,李宏全

    选择临床健康的 2月龄附红细胞体自然感染仔猪 1 5头 ,每周采血 1次 ,连续 4次 ,检测血样的 RBC、PCV、ηb1 0s- 1 、ηb1 5 0 s- 1 、ηp、ηre1 0 s- 1 、ηre1 5 0 s- 1 、AI、RI、TK。检测结果如下 :随着猪附红细胞体感染强度的增强 ,ηb1 0 s- 1 、ηre1 0 s- 1、ηre1 5 0 s- 1、AI、RI、TK明显增高 ,而 RBC、PCV、ηb1 5 0 s- 1、ηp无明显变化 ,表明猪感染附红细胞体后 ,血液粘度增高 ,红细胞聚集性增高 ,红细胞变形能力降低 ,进而影响脏器组织的血液灌注和微循环功能。这些血液流变学改变 ,构成了血栓、炎症、变性、水肿、坏死等的病理学基础

    2003年03期 247-249页 [查看摘要][在线阅读][下载 92k]
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  • 伪狂犬病病毒IE180基因的克隆及其在大肠杆菌中的表达

    肖少波,方六荣,徐建祥,洪文洲,陈焕春

    提取伪狂犬病病毒国内地方分离株 Ea株基因组 DNA,Bam H 酶切后回收 4 .8kb左右的片段 ,克隆到 p UC1 8中 ,酶切分析和部分序列测定筛选到含 IE1 80基因的重组质粒 p UCIE。进一步将长约 1 .8kb的 IE1 80基因 5′端部分编码区亚片段克隆到原核表达载体 p ET- 2 8a中 ,使其置于 p ET- 2 8a的 T7启动子下游并同 6× His(多聚组氨酸标签 ) -Tag融合 ,重组表达质粒 p ET1 .8转化 BL2 1 (DE3) ,在 IPTG诱导下获得高效表达 ,表达产物以包涵体形式存在 ,相对分子质量为 6 2 0 0 0 ,同预期大小相当 ,并能同抗 6× His的抗体发生特异性反应

    2003年03期 249-251页 [查看摘要][在线阅读][下载 122k]
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  • 伪狂犬病病毒弱毒株LY株的分离鉴定

    马凤龙,王文成,李尚波,马振宇,丁建民,卫广森,王铁东,宣华

    从辽阳某猪场的 1 0日龄仔猪中分离到 1株病毒 ,经纯化后测得其毒价为 1 0 7.2 9TCID50 / m L。细胞中和试验表明 ,该病毒能被猪伪狂犬病病毒标准阳性血清所中和。电镜下可见到典型的疱疹病毒粒子 ,具有囊膜及外周纤突。所分离的病毒对氯仿、胰蛋白酶、乙醚敏感 ,在 p H5 .0~ 9.0下稳定 ,5 6℃ 30 m in可以灭活。应用特异性引物 ,通过 PCR能扩增出伪狂犬病病毒 1 2 4 0 bp的 g D基因。分离病毒对 3日龄乳鼠有一定的致病力 ,但对家兔、3~ 5日龄仔猪及妊娠母猪都有很高的安全性。用不同剂量的病毒培养液肌肉注射于 3~ 5日龄仔猪 ,1 4 d后用 1 0 5.7TCID50 伪狂犬病病毒强毒攻击 ,所有试验仔猪均可得到有效保护。用分离毒免疫母猪 ,其后代可获高滴度的母源抗体 ,1 5日龄的仔猪能抵抗1 0 5.7TCID50 强毒的攻击。试验的结果初步说明 ,所分离的病毒为伪狂犬病病毒 (命名为 PRV L Y株 ) ,并可能是一株弱毒株 ,而且具有很好的免疫保护作用

    2003年03期 252-254页 [查看摘要][在线阅读][下载 91k]
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  • 日本脑炎病毒NS1基因在大肠杆菌中的高效表达

    金吉东,仇华吉,田志军,周艳君,张守发,童光志

    提取日本脑炎病毒弱毒株 SA1 4 - 1 4 - 2的基因组 RNA,用 RT- PCR扩增其 NS1基因 c DNA,将其克隆到原核表达载体 p ET- 30 b(+)中 ,转化大肠杆菌 BL - 2 1 (DE3) ,经 IPTG诱导 ,NS1基因获得高效表达。 SDS- PAGE分析显示 ,表达的融合蛋白表观相对分子质量约为 4 6 0 0 0 ,重组 NS1蛋白占菌体总蛋白的 30 .8%。 Western blotting分析表明 ,重组蛋白具有良好的免疫原性

    2003年03期 255-257页 [查看摘要][在线阅读][下载 108k]
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  • 荷兰暴发高致病性禽流感并出现人的感染

    郭志儒

    2003年03期 257页 [查看摘要][在线阅读][下载 42k]
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  • 双峰驼肾近曲小管和远曲小管的体视学研究

    陈秋生,刘仪

    应用光镜和电镜技术 ,测算了双峰驼肾近曲小管和远曲小管微细结构的体视学参数 ,并与黄牛进行了比较。结果显示 ,双峰驼肾近曲小管刷状缘体积、微绒毛表面积、吞饮小泡和溶酶体体积均显著大于黄牛 ;远曲小管上皮细胞的线粒体体密度、侧基底面质膜面密度和周界长度也明显大于黄牛。这些结构的差异表明 ,双峰驼肾脏重吸收水分的能力更强大

    2003年03期 258-260页 [查看摘要][在线阅读][下载 130k]
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  • 科学家发现迄今为止最大的一种病毒

    郭志儒

    2003年03期 260页 [查看摘要][在线阅读][下载 29k]
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  • 乌骨鸡肌肉肌苷酸含量

    张学余,李慧芳,耿拓宇,沈晓鹏,陈国宏

    以乌骨鸡 (泰和鸡 )为主要研究对象 ,以白耳鸡、罗曼蛋鸡、石歧杂、康达尔黄鸡、爱拔益加为对照 ,测定了其肌肉肌苷酸的含量。结果表明 ,在测定的鸡种中 ,乌骨鸡肌肉肌苷酸含量最高 ,爱拔益加最低 ;随着品种体重的增大 ,肌肉肌苷酸的含量有下降的趋势 ;各品种鸡体重与肌肉肌苷酸有一负相关的迹象

    2003年03期 261-262页 [查看摘要][在线阅读][下载 53k]
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  • λgt10 cDNA文库表达序列标签测定时模板处理方式

    赵志辉,李宁,樊宝良,冯继东,张玉静

    表达序列标签是揭示基因组容量的有效方法。在构建 c DNA文库的基础上 ,对以 λgt1 0为载体进行表达序列标签测定时模板的处理方法进行了探讨。结果表明 ,以λ噬菌体 DNA为模板直接测序比 PCR产物经回收后为模板进行测序 ,其目标克隆的平均插入片段长度要长 ,但反应成功率低。以 λ噬菌体浸提液为模板进行 PCR并在产物回收后进行测序反应 ,可能是以 λ噬菌体为载体构建文库的表达序列标签测定的最佳选择

    2003年03期 263-265页 [查看摘要][在线阅读][下载 98k]
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  • 猪肌生成抑制素C末端80氨基酸编码基因的合成及其原核表达

    吕文发,张英霞,欧阳红生,梁冠生,李树伟,张永亮

    将猪肌生成抑制素编码序列下游 883~ 1 1 2 6 bp按大肠杆菌嗜好密码子进行优化 ,将优化后序列双链分成 1 2个单链片段 (F1 、F2 、F3、R6 、R5、R4 、F4 、F5、F6 、R3、R2 、R1 ) ,采用化学合成方法合成 ,每对相邻互补片段之间有 2 0 bp序列交叉重叠。F1 长 38bp,R1 长 36 bp,其他片段均 4 0 bp长 ,F1 和 R1 片段两端分别加上限制性内切酶 Nco 和 Xho 的识别位点序列。经 PCR扩增出 2 5 4 bp片段 ,该片段与 p MD1 8- T载体连接 ,转化 JM1 0 9感受态细胞 ,所得阳性克隆进行测序分析 ,得到的克隆序列与设计的序列完全一致 ,表明成功地获得了猪肌生成抑制素下游编码序列克隆载体。从阳性细菌中提取质粒 ,经 Nco 和 Xho 酶切 ,回收 2 5 4 bp目的片段 ,定向克隆到 p ET2 8a中 ,转化 DH5α受体菌 ,提取质粒 ,再转化到 BL2 1 (DE3)中 ,成功筛选出阳性克隆。阳性菌经 IPTG诱导 ,通过 SDS- PAGE,检测出猪肌生成抑制素的表达

    2003年03期 265-267页 [查看摘要][在线阅读][下载 109k]
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  • 小鼠乳清酸蛋白上游调控序列的克隆及其指导下CAT基因在家兔乳腺中的表达

    杜卫华,赵君,张守峰,任文陟,扈荣良

    应用 PCR技术 ,从小鼠基因组中克隆了 1 .6 kb乳清酸蛋白 (WAP)基因 5′上游调控序列 ,经酶切和测序证实与已知序列基本一致。为了证实此调控序列能否指导外源基因在乳腺中的表达 ,将此序列与报告基因 CAT融合 ,构建了 p WAP- CAT- poly A乳腺定位表达载体 ,脂质体包裹后 ,经乳导管将其注入到妊娠中后期家兔乳腺中进行暂时表达。分别于家兔分娩后 1~ 1 0 d采奶 ,用 EL ISA检测乳汁中 CAT含量。结果表明 ,所构建的载体在家兔乳腺中能够表达 ,表达水平在家兔分娩后 1~ 5 d较高

    2003年03期 268-271页 [查看摘要][在线阅读][下载 173k]
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  • 自由基在鸭病毒性肝炎发病过程中的作用

    王丙云,计慧琴,赵海全,冯军,黄兴国,陈志胜,顾万军

    用不同毒力的鸭肝炎病毒株人工感染雏鸭 ,建立了鸭病毒性肝炎病理模型。于感染后 1、3、5、7d剖杀雏鸭 ,采集血液和肝脏样品 ,测定血浆和肝组织中的一氧化氮 (NO)、超氧化物歧化酶 (SOD)和丙二醛 (MDA) ,研究了自由基在鸭病毒性肝炎发病过程中的作用。结果表明 :雏鸭感染不同毒力株鸭肝炎病毒后 1 d,血浆 NO含量开始上升 ,3d显著或极显著高于对照组 ,并持续至试验结束 ;肝组织 NO含量在感染后 1 d便显著升高。不同毒力株感染组雏鸭血浆和肝组织中 SOD活性在感染后 1 d便低于或显著低于对照组 ,而不同毒力株感染组雏鸭血浆和肝组织中的 MDA却高于或显著高于对照组。提示 ,雏鸭感染鸭肝炎病毒后产生的自由基在鸭病毒性肝炎的发病过程中起重要作用

    2003年03期 271-273页 [查看摘要][在线阅读][下载 86k]
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  • 免疫亲和层析纯化EGF-PE40

    董冰,张国利,万忠海,吴广谋,岳玉环,朱平

    用 PEG融合法建立了分泌抗 EGF- PE4 0抗体的杂交瘤细胞株 ,并筛选了一杂交瘤细胞株 D7。用此细胞株制备了高抗体含量的腹水 ,用辛酸 -硫酸胺沉淀法纯化了抗体 Ig G,用 EL ISA法测定其与 EGF- PE4 0的亲和常数 2 .2 4×1 0 9L / mol,并鉴定其亚类为 Ig G1。将纯化后的单抗 Ig G与 CNBr活化的 Sepharose 4 B偶联 ,并用免疫亲和层析的方法纯化粗提物中的 EGF- PE4 0 ,得到了大于 80 %的纯化率 ,且产物显示了良好的生物学活性 ,这为 EGF- PE4 0的进一步纯化和大量生产提供了可能

    2003年03期 274-276页 [查看摘要][在线阅读][下载 98k]
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  • 高能微波对体外培养乳鼠心肌细胞生长活力的影响

    邓桦,刘杰,曹晓哲,高亚兵,吴小红,王德文

    2003年03期 277-280页 [查看摘要][在线阅读][下载 59k]
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  • 应用竞争PCR定量检测猪IFN-γ mRNA

    郭海龙,童光志,仇华吉,周艳君,兰文生,王云峰,吴东来

    运用 RT- PCR从经 Con A体外刺激培养的猪外周血单核细胞 (PBMC)提取的细胞总 RNA中扩增猪 γ-干扰素(IFN-γ)的部分片段 ,经酶切鉴定后双酶切缺失中间一小片段 ,将余下的 2个较大片段连接 ,并用相同的引物在相同条件下扩增连接产物 ,从而获得截短的同源性片段。将其纯化后克隆于 p MD1 8- T载体 ,重组质粒经酶切和 PCR鉴定后进行序列测定 ,验证无误后作为竞争性模板内对照 ,一定比例稀释后分别与等体积经刺激培养的 PBMC总 RNA反转录产物进行 PCR,产物电泳后经扫描分析获得各目标条带与竞争条带的溴化乙锭 (EB)嵌入光密度值 (IOD) ,经校正后取上述两者比值的对数值作为 Y轴 ,取已知竞争模板相应浓度的对数值作为 X轴 ,绘制成竞争曲线。应用建立的竞争 PCR对不同样品重复试验表明 ,本方法操作简单 ,结果可靠 ,稳定性高 ,适用于猪 IFN-γ m RNA的定量检测

    2003年03期 278-280页 [查看摘要][在线阅读][下载 117k]
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  • 实验性热应激对肉仔鸡免疫器官的影响

    刘思当,宁章勇,谭勋,王树迎

    对实验性热应激肉仔鸡的免疫器官的组织学变化、超微组织学变化进行了动态观察 ,对热应激造成的免疫器官的细胞凋亡及免疫反应能力进行了检测。结果表明 ,热应激可引起免疫器官胸腺、脾脏、法氏囊的发育分化不良 ,使法氏囊指数、脾脏指数明显下降 ,胸腺指数虽有下降 ,但幅度较小 ;热应激对免疫器官的组织结构有显著影响 ,尤其对法氏囊和脾脏的影响更明显 ,主要表现为实质细胞的萎缩、消失性病变 ,但无明显的实质细胞崩解坏死、炎性细胞浸润、炎性充血等病理变化 ,并随热应激时间的延长而逐渐加重 ,最后以实质细胞几乎完全消失、间质结缔组织增生而纤维化告终。热应激可显著影响试验鸡血清新城疫病毒抗体滴度 ,与对照相比 ,其抗体滴度的峰值低 ,维持时间短 ,下降速度快 ;通过电镜观察和细胞凋亡的原位检测 ,证实热应激时免疫器官的淋巴细胞和巨噬细胞有凋亡现象 ,这种凋亡现象在早期尤其显著

    2003年03期 281-283页 [查看摘要][在线阅读][下载 129k]
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  • 粘膜免疫对鸡十二指肠SSmRNA表达的影响

    杨倩,练高建

    应用鸡新城疫弱毒疫苗进行消化道粘膜免疫 ,或在肌肉注射生长抑素 (SS)亚单位疫苗的基础上应用鸡新城疫弱毒疫苗进行消化道粘膜免疫 ,通过 RT- PCR方法检测免疫鸡十二指肠中 SS基因的表达。结果表明 ,首免后第 3周 ,新城疫免疫组的 SS m RNA表达高于 SS亚单位苗组 ,但各试验组无显著差异 ;首免后第 4周 ,新城疫免疫组 SS m R-NA的表达显著高于 SS亚单位苗组 (P<0 .0 5 )并高于对照组。提示粘膜免疫可促进小肠粘膜 SS m RNA的表达 ,SS亚单位苗可在基因水平上降低 SS m RNA的表达

    2003年03期 284-286页 [查看摘要][在线阅读][下载 99k]
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  • 猪食用组织中喹喔啉-2-羧酸的高效液相色谱检测方法

    邱银生,袁宗辉,殷居易

    为了监测猪食用组织中卡巴氧 (carbadox)的残留 ,建立了检测猪肝脏、肾脏、肌肉等组织中卡巴氧的标示残留物喹喔啉 - 2 -羧酸 (Quinoxaline- 2 - carboxylic acid,QCA)的高效液相色谱法。组织样品经碱水解 ,液 -液分配提取 ,用离子交换色谱柱净化 ,洗脱液作浓缩后用甲醇溶解进行测定。色谱柱为 ODS C1 8柱 ;流动相为甲醇 -水 (体积比 4 0∶ 6 0 ) ,每 1L中加入 8m L冰乙酸 ,流速为 1 .0 m L / min;定量分析用紫外检测器 ,波长 32 0 nm,确证性分析用二极管阵列检测器 ,波长 2 5 0~ 5 0 0 nm。喹喔啉 - 2 -羧酸工作液质量浓度在 0 .0 3~ 0 .96 mg/ L 范围内 ,药物峰面积与浓度呈良好的线性关系 ,相关系数 r=0 .9999。组织中添加药物的质量分数为 0 .0 1 5、0 .0 3、0 .0 6μg/ g时 ,肝脏样品回收率分别为 (73.5 5±9.4 6 ) %、(80 .33± 1 4 .95 ) %、(75 .84± 7.4 2 ) % ;肾脏样品分别为 (70 .89± 1 0 .33) %、(74 .89± 7.1 9) %、(83.33±1 0 .6 8) % ;肌肉样品分别为 (6 9.4 9± 7.2 6 ) %、(6 6 .4 4± 5 .0 9) %、(6 2 .1 1± 6 .0 8) %。本方法条件下 ,3种组织中药物最低检出质量分数均为 0 .0 1 5 μg/ g,回收率测定的日内及日间相对偏差 (RSD)分别 <1 8%和 <2 0 %。当组织中药物质量分数达 0

    2003年03期 286-288页 [查看摘要][在线阅读][下载 90k]
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  • 动物蛋白饲料中动物源性成分的鉴别 1.同一PCR鉴别动物蛋白饲料中牛羊成分

    朱绍智,黄新民,薄清如,周志江,杨素,高彦生,赵君,徐海聂,潘文波,陈德镁,兰乃洪,冯家望,陈静静

    为了防止牛海绵状脑病 (俗称疯牛病 )和羊痒病传入我国 ,对来自疫区国家的动物源性饲料进行动物种类鉴别非常必要。本研究根据牛羊特异性卫星 DNA建立了同一 PCR体系同时检测羊、牛源性物质的方法。应用 DNA提取液制备模板 ,不但有效地缩短了试验时间 ,还大大降低了成本 ,有利于在生产实际中推广应用

    2003年03期 289-291页 [查看摘要][在线阅读][下载 84k]
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  • 朊病毒病治疗有希望?

    郭志儒

    2003年03期 291页 [查看摘要][在线阅读][下载 27k]
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  • 克隆动物的死亡可能与灭活的基因有关

    郭志儒

    2003年03期 291页 [查看摘要][在线阅读][下载 27k]
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  • 功能性低聚糖对断奶仔猪腹泻的防治及生产性能的影响

    车向荣,岳文斌,臧建军,吕文平

    在仔猪饲粮中分别添加低聚果糖 (FOS)、异麦芽低聚糖 (GOS)和甘露寡糖 (MOS) ,用 4 8头 35日龄杜×长断奶仔猪进行了为期 2 8d的饲养试验 ,观察了功能性低聚糖对断奶仔猪腹泻的防治作用及生产性能的影响。将试验猪随机分为 4组 ,即在基础日粮中分别添加 FOS3g/ kg、GOS2 g/ kg和 MOS3g/ kg的 3个处理组和 1个对照组 ,观察了仔猪的生长发育情况 ,记录了各组耗料量和体重 ,采集血清和全血以及粪样进行了分析测试。结果表明 ,FOS组仔猪腹泻频率降低了 6 6 % ;GOS组降低了 2 5 % ;MOS组降低了 5 4 % ;FOS、GOS和 MOS组的血清 SOD、GSH- Px活性均较对照组显著提高 (P<0 .0 5或 P<0 .0 1 ) ;3种低聚糖组仔猪的外周血 T淋巴细胞数 (CD3)、Ig G水平均较对照组显著提高 (P<0 .0 5或 P<0 .0 1 ) ;3种低聚糖组仔猪的日增重和饲料报酬均有明显的提高

    2003年03期 292-294页 [查看摘要][在线阅读][下载 92k]
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  • 大肠杆菌多药耐药基因AcrA的克隆及其原核表达

    马红霞,邓旭明,阎继业,张英霞,欧阳红生

    从大肠杆菌 Acr A的编码序列中设计引物 ,以大肠杆菌基因组为模板 ,扩增出 Acr A基因中约 6 91 bp的 c DNA片段 ,将所得片段与 p MD- 1 8T载体连接 ,转化到 DH5α大肠杆菌中 ,成功地筛选到阳性克隆 ,其质粒测序结果与文献报道一致。从阳性克隆中提取质粒 ,经 Hind 和 Bam H 酶解 ,回收 6 91 bp的目的片段 ,定向克隆到 p ET- 2 8a表达载体中 ,提取质粒 ,再次转化到 BL2 1 (DE3)中 ,成功地筛选出阳性克隆。经 IPTG诱导阳性菌 ,通过 SDS- PAGE检测出Acr A部分基因的表达

    2003年03期 294-296页 [查看摘要][在线阅读][下载 118k]
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  • 近交系大鼠DNA指纹图与微卫星DNA比较分析

    李瑞生,王承利,赵林山,陈振文

    为了建立一种对近交系大鼠遗传物质进行精确可靠、快速简便的监测方法 ,利用 DNA指纹技术对国内 6个品系 8个近交系大鼠群体进行了 DNA多态性的分析 ,并与 PCR扩增微卫星 DNA技术进行了比较。其结果显示 :(1 )不同品系之间 DNA指纹图差异较大 ,同一群体不同个体间 DNA指纹图带的相似系数和共有带率除 SHR(哈 )和 WKY(哈 )小于 0 .7外 ,其他均大于 0 .9。不同地区同一 SHR间和 WKY间 DNA指纹图也存在差异 ,相同 DNA不同次制作的 DNA指纹图谱基本一致。(2 )不同品系个体间微卫星 DNA具有显著多态性 ;同一群体不同个体之间除 SHR(哈 )的SMST位点和 WKY(哈 )的 AGT位点出现一定的差异外 ,其他均没有差异。DNA指纹图能更精确可靠地反映出动物个体间的遗传背景 ,而微卫星 DNA遗传监测方法比较简便快捷

    2003年03期 297-299页 [查看摘要][在线阅读][下载 107k]
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  • 发情周期中奶山羊下丘脑-垂体-卵巢轴催产素的免疫组化定位

    卿素珠,陈树林,沈霞芬

    用免疫组化 ABC法 ,对发情周期中奶山羊下丘脑 -垂体 -卵巢轴催产素 (OT)分布进行了观察研究。结果表明 ,下丘脑中分泌 OT的神经元主要分布在室旁核和视上核 ,在穹窿周核、腹内侧核、腹外侧核、交叉上核、背内侧核、乳头体、下丘脑外侧区、下丘脑前核等核团也有一定数量的阳性神经元 ;阳性神经纤维仅见于室旁核、下丘脑前核、视上核等少数核团 ,在正中隆起和第 3脑室室周可见到一定数量的阳性神经纤维。在垂体前叶未见到 OT免疫反应阳性产物 ,自垂体柄和正中隆起的一侧可见到平行排列的 OT阳性神经纤维断续地延伸至神经部。卵巢的卵泡及间质未见OT免疫阳性反应 ,,在黄体组织中存在数量较多的免疫反应阳性细胞 ,阳性细胞主要呈圆形、卵圆形 ,小梁两侧及黄体中央近腔区域的阳性细胞呈长梭形 ,有相当数量的阳性细胞具有突起。连续切片 HE染色对照观察显示 ,黄体中 OT主要由大黄体细胞产生 ,但小黄体细胞也存在 OT免疫阳性反应

    2003年03期 300-302页 [查看摘要][在线阅读][下载 112k]
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  • 浣熊、短吻鳄等动物可能在西尼罗病毒传播中起作用

    郭志儒

    2003年03期 302页 [查看摘要][在线阅读][下载 40k]
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  • 青年荷斯坦奶牛初次超数排卵试验

    安志兴,刘俊平,王超,张迎科,李向臣,张明波,张涌

    对影响荷斯坦青年奶牛超数排卵的因素进行了对比分析 ,并探索了青年奶牛超排的可行性方案。卵巢上有黄体存在的供体牛可以用于超排。青年奶牛在不同性周期阶段进行超排的结果不同 ,但差异不显著。用 FSH联合氯前列烯醇 ,采用常规逐日递减法肌肉注射进行超排 ,平均获得胚胎 7.0 7枚 ,可用胚胎 5 .98枚 ;在人工授精的同时注射促排卵素 3号 (L RH- A3) ,平均回收胚胎 8.6 4枚 ,可用胚胎为 5 .5枚。促排卵素 3号能提高胚胎的回收率 ,但可用胚胎率急剧下降

    2003年03期 303-304页 [查看摘要][在线阅读][下载 62k]
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  • 动物病毒分类新动态

    郭志儒

    2003年03期 305-308+312页 [查看摘要][在线阅读][下载 241k]
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  • 动物复合麻醉的研究进展

    刘焕奇,侯振中,王洪斌

    2003年03期 309-312页 [查看摘要][在线阅读][下载 121k]
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