• 猪瘟兔化弱毒抗体对不同野毒株体内外中和保护试验的相关性研究

    宋立,王琴,涂长春,宁宜宝,王在时,赵耘,范学政,张广川,沈青春

    将猪瘟兔化弱毒疫苗阳性血清与猪瘟野毒株HeBZJK 1 9 5 、GZGD 1 9 5 、HeBHH 2 9 5 、BJXC 1 9 5 、HeNBY 1 9 6 、BJCY 1 9 6 、BJSY 2 9 6 、BGTX 3 9 6 、HeNXH 2 9 8 、FJFQ 1 9 9 、JL 1 9 4 和标准石门株在PK 1 5 单层细胞上进行中和试验 , 测定了猪瘟病毒抗体在体外对野毒株的中和作用能力。结果表明 , 阳性血清对HeBZJK 1 9 5 、GZGD 1 9 5 、BJSY 2 9 6 、JL 1 9 4 和石门株的中和效价为 1 ∶ 2 5 6 , 对BGTX 3 9 6 株为 1 ∶ 1 2 8 , 对HeBHH 2 9 5 、BJCY 1 9 6 、HeNXH 2 9 8株为 1 ∶ 6 4 , 对BJXC 1 9 5 株为 1 ∶ 1 6 , 对FJFQ 1 9 9 株为 1 ∶ 8 , 对HeNBY 1 9 6 株为 1 ∶ 4 。由此表明 , 对不同毒株血清中和效价不同。另外测定了猪体内免疫抗体与免疫保护力的关系。采用 1 头份猪瘟兔化弱毒疫苗主动免疫没有母源抗体的猪 , 免疫后 1 4 d和 1 9 2 d抗体滴度 < 1 ∶ 1 6 , 攻击野毒HeNXH 2 9 8 株 , 仔猪能够完全保护。采食初乳的 2 组仔猪 , 母源抗体滴度为 < 1 ∶ 1 6 ~ 1 ∶ 6 4 , 分别免疫 2 头份和 4 头份猪瘟兔化弱毒疫苗 ,

    2005年02期 113-115页 [查看摘要][在线阅读][下载 115k]
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  • 应用实时荧光定量TaqManRT-PCR检测口蹄疫病毒

    花群义,金宁一,周晓黎,董俊,杨云庆,徐自忠

    按照口蹄疫病毒 (FMDV )聚合酶 3D基因序列 ,设计合成了引物和探针 ,经各反应条件的优化 ,建立了实时荧光定量 RT- PCR技术 ,对细胞培养物、水泡液、水泡皮及分泌物、血液中的 FMDV进行了特异性检测和敏感性试验。结果 ,用 30 0 nmol/ L 的引物浓度和 2 0 0 nmol/ L 探针浓度 ,获得的 CT值较小 ,而 ΔRn最大 ;可检测到相当于 0 .1 TCID50 的病毒 RNA;与 VSV和其他水泡性病毒不发生交叉反应 ;制作的标准曲线中各浓度范围内有极好的线性关系 ,且线性范围宽 ,相关系数为 0 .984 ;组内和组间试验重复性的变异系数 (CV)分别为 5 .4 %和 6 .7% ;与常规 RT- PCR相比较 ,该方法具有快速、特异、敏感、可定量 ,并可同时检测大量样品等优点

    2005年02期 116-119页 [查看摘要][在线阅读][下载 146k]
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  • 口蹄疫病毒RNA复制酶基因3D的克隆、表达及纯化

    孙涛,陆苹

    利用 RT- PCR扩增了口蹄疫病毒 (FMDV )的 RNA复制酶基因 ,并将其克隆到原核表达载体 p ET- 32 a(+)中。重组质粒在大肠杆菌中表达后的目的蛋白为可溶性形式 ,纯化产物用感染 A型 FMDV的豚鼠康复血清进行 Western-blotting检测 ,结果表明 ,3D基因得到了正确的表达

    2005年02期 119-121页 [查看摘要][在线阅读][下载 108k]
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  • 用单抗介导的免疫荧光试验检测组织切片中的禽网状内皮组织增生病病毒

    张志,王锡乐,庄国庆,崔治中

    以禽网状内皮组织增生病病毒 (Reticuloendotheliosis virus,REV)的单克隆抗体 1 1B1 5 4作为一抗 ,建立了从组织病理切片中检测 REV的免疫荧光技术 (Mc- IFA)。运用该技术对人工接种 REV的肉鸡和疑似 REV病鸡的肝脏、脾脏、心脏和肾脏等器官的组织切片进行了检测 ,并与病毒分离和斑点杂交试验的敏感性和特异性进行了比较。结果表明 ,在人工接种的感染肉鸡中 ,3种方法均为阳性 ;在 30份疑似 REV的病料中 ,用 Mc- IFA可以检测出 1 0份阳性 ,而病毒分离只有 8份样品为阳性。由此表明 ,Mc- IFA的特异性和敏感性均较高 ,完全可以用于 REV的检测

    2005年02期 122-124页 [查看摘要][在线阅读][下载 98k]
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  • 广西猪瘟流行毒株全基因组的克隆与序列分析

    吴显实,罗廷荣*,廖素环,刘芳,陆芹章,黄伟坚,温荣辉,秦爱珍,余克伦

    参考已发表的猪瘟病毒 (CSFV) Shimen株、HCL V株、Paderborn株的核苷酸序列 ,设计并合成 1 1对引物 ,应用RT- PCR技术 ,成功地分 1 1个片段扩增了 CSFV广西流行毒株 GXWZ0 2的全基因组。将这 1 1个基因片段克隆 ,并测定了其核苷酸序列。应用计算机生物软件 Vector NTI将 1 1个基因片段进行拼接 ,确认 CSFV GXWZ0 2株全基因组序列的长度为 1 2 2 96个核苷酸 (Gen Bank收录号 AY3 6 776 7)。将 GXWZ0 2株与国内外已发表的 Shimen、HCL V、3 9、Brescia、Eystrup、Glentorf、Alfort1 87、Paderborn、CS、AL D、GPE- 、P97、L PC毒株进行全基因组核苷酸序列和推定的氨基酸序列比较 ,核苷酸同源性分别为 85 .4 %、 84 .6 %、88.7%、85 .7%、 85 .7%、 85 .3 %、85 .6 %、 95 .3 %、 85 .7%、85 .7%85 .4 %、83 .4 %、84 .3 % ,推定的氨基酸同源性分别为 92 .6 %、91 .7%、94 .2 %、 93 .1 %、92 .9%、92 .3 %、 93 .0 %、97.7%、92 .6 %、93 .0 %、92 .6 %、90 .5 %、90 .6 %。 GXWZ0 2与 Shimen、HCL V的全基因组序列及推定的氨基酸序列有明显差异 ,表明 GXWZ0 2株在遗传性和抗原性上发生了较明显的变化。系统发育树分析 ,所比较的 1 4株 CSFV被分为2个群 :GXWZ0 2、Paderborn和 3 9这 3个毒株被归为群 ,

    2005年02期 125-128页 [查看摘要][在线阅读][下载 178k]
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  • 应用间接ELISA检测鸡痘病毒抗体方法的建立

    张体银,李军伟,孙蕾,孙学辉,张如宽,刘秀梵*

    建立了检测鸡痘病毒抗体的间接 EL ISA方法。应用该方法检测鸡痘阳性血清 ,其灵敏度为琼脂扩散试验的 4 0 0~ 80 0倍 ,而且还具有特异性强、操作简便、快速等特点

    2005年02期 128-130页 [查看摘要][在线阅读][下载 101k]
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  • 不同基因型新城疫病毒株对鹅的致病性

    陈立功,万洪全,宋红芹,吴力力,王宝安,盛祖勋,王小波

    用不同基因型 ( Ⅳ、Ⅵb、Ⅵg、Ⅶd ( 鸡源 ) 、Ⅶd ( 鹅源 ) 、Ⅷ、Ⅸ ) 新城疫病毒 ( NDV ) 强毒株分别人工感染 2 3 日龄隆昌鹅 , 观察了其对鹅的致病性。结果 : 各株病毒均可使接种鹅感染、发病 , 发病率为 1 0 % ~ 1 0 0 % , 死亡率分别为 0 % 、 2 0 % 、3 0 % 、 7 0 % 、 5 0 % 、 4 0 % 、 5 0 % 。接种Ⅵg、Ⅶd、Ⅷ和Ⅸ型NDV强毒株可使鹅严重发病、死亡 , 症状和病变都与Ⅶd亚型鹅源毒株感染鹅相似 , 接种Ⅳ型 ( Herts 3 3 ) 及Ⅵb亚型 ( PB 9 6 0 1 ) 毒株的鹅轻微发病。免疫组化检测发现 , 攻毒鹅多种组织器官中都能检测到病毒抗原。在能检测到病毒抗原的器官中 , 病毒抗原主要定位于淋巴细胞、网状细胞、巨噬细胞、肝细胞及各种上皮细胞的胞浆内 ; 与Ⅵg、Ⅶd、Ⅷ和Ⅸ型NDV感染鹅组织相比 , Herts 3 3 、PB 9 6 0 1 感染鹅大部分组织内的阳性染色较弱。本试验结果表明 , 不同基因型NDV强毒株对鹅的致病性存在明显差异。

    2005年02期 131-134页 [查看摘要][在线阅读][下载 153k]
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  • 细菌CpG DNA对鸡接种禽流感病毒H9亚型灭活苗的免疫增强作用

    崔义邦,何孔旺,陆承平,郭爱珍

    为了探讨细菌核酸对 H9亚型禽流感病毒灭活疫苗的免疫增强作用 ,将 1 5日龄蛋用公鸡 1 2 0只随机分为 4组 ,即空白组、抗原组、细菌核酸佐剂组及白油佐剂组 ,每组 30只。于 2 8日龄时 ,细菌核酸佐剂组以灭活 H 9亚型禽流感病毒作为抗原 ,大肠杆菌牦牛株核酸作为佐剂 ,免疫接种于试验鸡 ,用 XTT法检测 T、B淋巴细胞增殖反应 ,并用血凝与血凝抑制法检测血清抗体水平。结果显示 ,在细菌核酸佐剂组 ,鸡的血凝抑制抗体水平和 T、B淋巴细胞增殖反应均显著高于抗原单独免疫组 (P<0 .0 5 ) ,而免疫组均显著高于空白组 (P<0 .0 5 ) ;细菌核酸佐剂组的抗体滴度峰值略高于白油佐剂组 (P>0 .0 5 ) ,但 T、B淋巴细胞增殖指数峰值显著高于白油佐剂组 (P<0 .0 1 )。结论认为 ,大肠杆菌牦牛株核酸可显著增强免疫鸡对禽流感病毒 H9亚型灭活疫苗的免疫反应 ,其免疫增强效果略高于常规油佐剂

    2005年02期 135-138页 [查看摘要][在线阅读][下载 130k]
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  • 不同佐剂对兔出血症灭活冻干疫苗免疫效果的影响

    张华,薛家宾,黄克和,陈兴祥,徐为中

    健康新西兰成年兔 2 0只 ,随机分成 4组 ,在接种兔出血症灭活冻干苗的同时 ,各组分别注射左旋咪唑 (L MS,2mg/ kg)、黄芪多糖 (APS,2 .4 mg/ kg)、亚硒酸钠 (Se,0 .1 mg/ kg)和生理盐水 ,于免疫后 8、1 4、2 1、2 8d无菌心脏采血 ,应用间接 EL ISA和 MTT比色法检测机体抗体水平和淋巴细胞转化功能。结果显示 ,L MS组抗体和淋巴细胞转化水平在 1周后即可明显上升 ,与对照组差异显著 (P<0 .0 5 ) ;APS组 ,第 2周抗体水平达到最高 ,淋巴细胞转化功能显著增高 ,与对照组比较差异显著 (P<0 .0 5 ) ;Se组 ,抗体上升的过程较慢 ,第 3周达到峰值 ,与对照组和 L MS组相比 ,差异显著 (P<0 .0 5 )。结论 :L MS短期效果明显 ,但持续时间短 ;Se的作用缓慢 ,第 2 1天抗体水平才明显上升 ;APS调节效果最好 ,免疫后 8d即迅速刺激体液免疫和细胞免疫 ,且可较长时间维持较高水平

    2005年02期 138-140页 [查看摘要][在线阅读][下载 93k]
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  • 实时定量RT-PCR检测马动脉炎病毒

    梁成珠,杨松,高宏伟,朱来华,蔡梅红,王谦滨,陈溥言

    选取马动脉炎病毒 (EAV )基因组中高度保守的开放阅读框 7(ORF7)序列 ,设计了特异性引物和 Taq Man探针 ,利用一步法的实时定量 RT- PCR来定量检测 EAV。使用含有选定检测序列的克隆标准品做标准曲线 ,证明该方法可以检测出含有 5 (4.77)个 RNA分子 ,即可从组织培养液 (TCF)中检出一般含有 5 PFU/μL 病毒拷贝。对猪生殖呼吸道综合征病毒、马疱疹病毒无交叉反应 ,特异性好。用疫苗用种毒 (Bucyrus标准株 )肌肉注射于马驹后 ,定量 RT- PCR比病毒分离试验更能灵敏地检出呼吸道排出的病毒。对 4 5 6份临床鼻腔分泌物样品检测 ,定量 RT- PCR检出 6份阳性 ,而病毒分离只检出 2份阳性。一步法实时定量 RT- PCR检测样品中的 EAV,在快捷、准确、方便和高通量方面优于细胞培养病毒分离的检测方法 ,可以作为检测马病毒性动脉炎 (EVA )病毒的快速方法

    2005年02期 141-144页 [查看摘要][在线阅读][下载 185k]
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  • 猪胸膜肺炎放线杆菌毒素蛋白的表达、纯化及其间接ELISA检测方法的建立与应用

    梁望旺,何启盖*,刘正飞,陈焕春,吴斌,徐晓娟,李涛

    将含有猪胸膜肺炎放线杆菌毒素 基因的质粒 p ET- Apx 转化到大肠杆菌 BL2 1 (DE3)。挑选出表达量最高的克隆子 ,于 37℃经 IPTG诱导表达。对表达条件进行优化 ,并对包涵体进行了提纯和复性。用复性后的蛋白作抗原 ,建立了检测猪传染性胸膜肺炎放线杆菌抗体的间接 EL ISA。试验的最佳反应条件为 :最佳抗原稀释度为 1∶ 1 6 0 ,抗原包被液用 Tris- HCl(p H8.0 ) ,封闭液用含 0 .4 %BSA的 PBST,血清稀释度为 1∶ 4 0 ,二抗稀释度为 1∶ 6 0 0 0 ,稀释液用含0 .4 %BSA的 PBST,血清反应时间为 30 min,二抗反应时间为 4 5 min,底物反应时间为 2 0 m in。与间接血凝 (IHA)检测结果比较 ,建立的 EL ISA诊断方法具有良好的稳定性和可重复性 ,并具有较高的特异性和敏感性。用建立的间接EL ISA对 2 5 0 3份临床送检血清进行了血清流行病学调查 ,结果表明 ,胸膜肺炎放线杆菌抗体的阳性率为 6 3%。

    2005年02期 145-147页 [查看摘要][在线阅读][下载 90k]
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  • 1株难以定型的鸭疫里默氏菌分离株

    张大丙,郭玉璞

    采用未经过吸收和经过吸收的抗血清 ,通过凝集试验和沉淀试验对 1 999年从河北某鸭场分离到的 1株鸭疫里默氏菌 (编号为 C5 1 5 )进行了研究。玻片凝集试验可将 C5 1 5鉴定为 1 9型 ,试管凝集试验表明 ,C5 1 5与 1 9型参考菌株只有单向低度交叉凝集反应 ;C5 1 5不在 1 0型抗血清中凝集 ,但 C5 1 5抗血清可与 1 0型参考菌株发生凝集反应 ;交互吸收可消除 C5 1 5与 1 0型和 1 9型之间的交叉凝集反应 ,但不影响同源凝集反应和同源沉淀反应。 C5 1 5与 1~ 1 9型中的其他1 7个型的参考菌株没有可见的凝集反应 ,C5 1 5与 1~ 1 9型参考菌株均不产生可见的沉淀反应。单独比较 C5 1 5与 1~1 9型参考菌株的关系 ,可将它鉴定为不同于 1~ 1 9型的血清型 ,但该菌株还与 1 0型的 4个亚型菌株存在不同程度的交叉反应 ,尤其与亚型 4 (代表菌株为 C5 98)存在高度交叉凝集反应和清晰的交叉沉淀反应 ;若将 C5 1 5定为 1 0型的亚型 ,又不符合 1 0型分离株的共性。因此 ,该菌株属于难以定型的一类 ,可将它暂时鉴定为 C5 98菌株的一个变异株

    2005年02期 148-151页 [查看摘要][在线阅读][下载 139k]
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  • 2003年畜牧兽医类期刊影响因子和总被引频次较高的20种期刊

    2005年02期 151页 [查看摘要][在线阅读][下载 41k]
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  • 鸭疫里默氏菌铝胶佐剂与铝胶复合佐剂4价灭活疫苗的比较

    程安春,汪铭书,郭宇飞,方鹏飞,刘兆宇,陈孝跃,周毅

    以血清 1、2、4、5型鸭疫里默氏菌 (Riemerella anatipestifer,RA)制备 4价铝胶佐剂和铝胶复合佐剂 2种灭活苗 ,经过无菌及安全检查合格后 ,对 3日龄樱桃谷鸭颈背部皮下注射 0 .5 m L/只。(1 )免疫后 1 0、1 3、1 6 d对同源 RA的攻击 ,铝胶佐剂苗表现出 5 %~ 2 0 %、75 %~ 90 %、1 0 0 %免疫保护 ,2 3~ 30 d免疫保护力开始下降 ;铝胶复合佐剂苗表现出1 0 %~ 35 %、80 %~ 1 0 0 %、1 0 0 %免疫保护 ,5 1~ 6 5 d免疫保护力开始下降。(2 ) 2种疫苗 1次免疫后 2 3d抗体水平均达高峰 ,至 93日龄时仍能检出抗体的存在 ,1 0日龄进行第 2次免疫后可产生更高的抗体水平 ,到 6 5 d时仍能保持较高抗体水平 ;其中 1 6~ 6 5 d进行 2次免疫的铝胶复合佐剂苗产生的抗体水平显著 (P<0 .0 5 )或极显著 (P<0 .0 1 )地高于铝胶佐剂苗。 (3) 2种疫苗免疫雏鸭后能够显著 (P<0 .0 5 )或极显著 (P<0 .0 1 )地增强 T细胞的免疫力 ,时间达 2周。对攻毒保护试验、抗体消长规律和细胞免疫测定结果综合分析表明 ,RA4价铝胶佐剂和铝胶复合佐剂 2种灭活苗免疫雏鸭后 ,免疫保护的形成是体液免疫与细胞免疫协同作用的结果。经实验室攻毒保护试验、EL ISA抗体消长规律测定、T细胞免疫水平测定和田间试验表明 ,研制的 2种疫苗均具有

    2005年02期 152-157页 [查看摘要][在线阅读][下载 201k]
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  • 8株嗜温气单胞菌的外膜蛋白型及其聚类分析

    吕爱军,李槿年,余为一,屈艾,温洪宇

    从送检病鳖、病鱼体内分离出 8株细菌 ,经形态学、生理生化特性、致病性和血清学鉴定 ,确定 3株 (BA1、BA3、BA6 )为嗜水气单胞菌 ,5株 (M1、BA 1 6、BA1 5、BA 1 0、XA2 3 )为温和气单胞菌。采用超声波破碎 - SI法提取其外膜蛋白(OMPs) ,进行 SDS- PAGE电泳 ,聚类分析 OMP型。结果表明 ,8株嗜温气单胞菌具有不同的 OMP型 ,与菌株来源、致病性及地域分布有关。 3株鳖源致病性温和气单胞菌 (BA1 6、BA1 5、BA1 0 )属同一 OMP型 ,鱼源非致病株 (M1 )与致病株 (XA2 3 )在 3 .2× 1 0 4 ~ 3 .5× 1 0 4 间有明显差异 ,鳖源非致病性嗜水气单胞菌 (BA6 )与致病株 (BA1、BA3 )的 OMP型相似 ,但蛋白带的迁移率及颜色深浅在菌株间仍有差异。根据 OMPs条带迁移率 ,通过类平均法对 8株嗜温气单胞菌进行系统聚类分析 ,结果显示了不同菌株间在分类学上的远近

    2005年02期 157-159页 [查看摘要][在线阅读][下载 110k]
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  • 淡水鱼类线虫病的病原及其扫描电镜观察

    金珊,王国良,赵青松,陆彤霞,华建权

    从浙江省的窖湖、灵湖、凤湖等水库捕捞的大银鱼、花鱼骨、乌鳢鱼、黄颡鱼、鲶鱼、沙塘鳢等 6种鱼类体内获得大量的红色线虫 ,对其进行光镜和扫描电镜察 ,根据其形态特征和流行病学资料 ,鉴定为膨结科胃瘤线虫未定种(Eustrongylides sp.)。此线虫在大银鱼、花鱼骨、沙塘鳢体内寄生国内尚属首次报道

    2005年02期 159-161页 [查看摘要][在线阅读][下载 115k]
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  • 乙脑病毒prM/E基因重组伪狂犬病病毒的构建

    李自力,陈焕春*,徐高原,肖少波,王祥,何启盖

    以乙型脑炎病毒 SA1 4 - 1 4 - 2株基因组 RNA为模板 ,采用RT- PCR一步法扩增 pr M/ E基因的全长 c DNA(约 2 kb) ,将其克隆至 p MD1 8- T载体 ,获得了克隆质粒 p Tpr M/ E,并对其进行了测序。序列分析结果表明 ,与已报道的 SA1 4 强毒株和 SA1 4 - 1 4 - 2疫苗株的核苷酸比较 ,pr M基因的序列同源性为 1 0 0 %,E发生了 4个点突变 ,其中 1个为回复突变 ,并导致了 3个氨基酸的改变。以伪狂犬病病毒 Ea株 TK- / g G- / L ac Z+突变株为载体 ,构建了 1株乙脑病毒 pr M/ E基因的重组伪狂犬病病毒 TK- / g G- / pr M/ E+。乙脑病毒 pr M/ E基因的克隆及重组伪狂犬病病毒的成功构建 ,为开展乙脑病毒分子生物学及猪伪狂犬病 -乙脑二价基因工程疫苗的研究打下了坚实基础

    2005年02期 162-165页 [查看摘要][在线阅读][下载 148k]
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  • EHECO157∶H7stx基因缺失突变株的构建及其特性

    孙洋,刘军,郭学军,常国权,尹铁勇,冯书章

    针对肠出血性大肠杆菌 (EHEC) O1 5 7∶H7的 stx基因 ,通过 PCR扩增出缺失了 1 83bp的 stx基因片段 ,将其克隆到自杀性载体 p CVD4 4 2中 ,然后通过接合性转导将重组自杀性质粒 p CVD4 4 2∷Δstx从大肠杆菌 SM1 0转到 O1 5 7∶ H7中 ,利用抗性标记和 PCR方法筛选出 O1 5 7∶ H7stx基因缺失突变菌株。Vero细胞毒性试验证实 ,该突变株不能产生完整的 Stx。动物试验表明 ,与强毒株相比该突变株的致病性明显降低。该突变株的构建为研究志贺毒素在 EHEC O1 5 7感染中所起的作用和研制 O1 5 7的基因工程减毒活菌苗奠定了基础

    2005年02期 166-169页 [查看摘要][在线阅读][下载 194k]
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  • 五重PCR检测大肠杆菌O157∶H7菌体抗原和毒素基因

    薄清如,周志江,吴小伦,徐海聂,黄云君,冯家望,王小玉,黄建珍,陈静静,潘文波,廖秀云

    针对 O1 5 7∶H7大肠杆菌 O抗原抗血清同多种细菌有交叉反应 ,而单一毒素基因并不是 O1 5 7∶ H7所独有这一特点 ,建立了五重和四重 PCR方法 ,同时检测大肠杆菌 O1 5 7∶ H7的 O抗原、H抗原和 4种毒素基因 ,可在较短的时间内检测、鉴定大肠杆菌 O1 5 7∶ H7,并有较高的特异性 ,解决了传统细菌检测方法耗时长、灵敏度低 ,并有交叉反应等问题

    2005年02期 169-172页 [查看摘要][在线阅读][下载 148k]
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  • 重组的Prion蛋白能够致病证明蛋白质的确具有传染性

    郭志儒

    2005年02期 172页 [查看摘要][在线阅读][下载 34k]
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  • 主动外排系统介导的大肠杆菌多重耐药性的确证

    张海旺,邓旭明,任晓慧,唐峰,褚秀玲

    为检测和证实主动外排系统 (外输泵 )在细菌多重耐药机制中的作用 ,用四环素和水杨酸钠对大肠杆菌质控株进行了体外人工诱导 ,筛选出多重耐药株 ,再用能量抑制剂 CCCP(Carbongl cyanide m- chloropheyhydrazone)对耐药株和质控株进行了环丙沙星摄取抑制试验。结果 :在耐药株 ,其菌体内环丙沙星稳态浓度明显低于质控株 ;多重耐药株在有 CCCP存在时 ,菌体内环丙沙星的浓度随时间的延长而递增 ,而无 CCCP的抑制时 ,菌体内环丙沙星的浓度递增缓慢 ;在质控株 ,不论有无 CCCP存在 ,菌体内环丙沙星的浓度都随时间的延长而呈递增趋势 ,且保持较耐药株明显高的水平。结论 :体外诱导多重耐药大肠杆菌多重耐药性的产生 ,可能主要依赖于菌体外输泵的激活

    2005年02期 173-175页 [查看摘要][在线阅读][下载 94k]
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  • 小球隐孢子虫(Cryptosporidium parvum)P15基因的克隆和表达

    张守发,鞠玉琳,贾洪林

    通过 PCR扩增出小球隐孢子虫 (Cryptosporidium parvum) P1 5基因片段。将该片段连接到克隆质粒载体 p U C1 9的 Bam H 酶切位点上 ,并对其序列进行了测定。结果表明 ,该基因长度为 4 79bp,编码的表面蛋白由 1 4 8个氨基酸残基组成。再将 P1 5蛋白基因片段分别在大肠杆菌和哺乳动物细胞中表达 ,经 SDS- PAGE分析和 Western blot检测 ,结果表明 ,小球隐孢子虫 P1 5蛋白基因在大肠杆菌内获得表达的融合蛋白相对分子质量为 5 0 0 0 0 ;在哺乳动物细胞中 ,重组痘病毒表达的蛋白相对分子质量为 1 80 0 0~ 2 2 0 0 0 ,与直接从自然感染牛小球隐孢子虫分离的 P1 5蛋白的相对分子质量相似

    2005年02期 175-177页 [查看摘要][在线阅读][下载 113k]
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  • 牛白细胞介素-2在毕赤酵母中的表达(英文)

    陈芳,孙红立,曹祥荣,李震,于瑞嵩

    将编码牛白细胞介素 - 2 (Bo IL2 )成熟肽的 c DNA克隆到巴斯德毕赤酵母 (Pichia pastoris)表达载体 p PICZB中 ,构建出含 Bo IL 2基因的重组质粒 Bo IL 2 - p PICZB。将经 Sac 酶切后线性化的 Bo IL 2 - p PICZB电转化到巴斯德毕赤酵母X- 33中 ,转化子经高浓度 Zeocin抗性筛选鉴定后 ,用 1 %甲醇诱导目的蛋白表达。经 SDS- PAGE及 Western blotting检测 ,表明 Bo IL2在酵母中获得了胞内表达 ;通过金属螯合亲和层析 (MCAC)获得纯化的重组蛋白 ;培养小鼠CTL L 2细胞进行活性检测 ,证实所表达的重组 Bo IL 2具有生物活性

    2005年02期 178-182页 [查看摘要][在线阅读][下载 245k]
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  • 生长激素释放肽 - 6缓释微球的制备及其对动物生长的影响

    任晓慧,张永亮,刘松财,史秋梅,戴建威,胡魁

    以生物降解材料乳酸乙醇酸共聚物 (PL GA,L A- GA 85∶ 1 5 )为载体 ,采用复乳 -液中蒸发法制备含生长激素释放肽 - 6的乳酸乙醇酸共聚物微球 ,并通过体外药物释放试验评价载药微球的释药特征。结果得到收率、粒径大小和分布及含药量均满意的微球 ,其中包封率为 1 0 0 %,平均体积径为 3 .4 5μm ,收率为 79%。在 3 7℃、p H 7.0的生理等渗缓冲液中 ,首日释药 1 9.1 9%,其后以平均日释药 3 .2 3 %的速度释药 2 5 d。小鼠肌肉注射微球 3 0 d后 ,累积增重比注射生长激素释放肽 - 6、生理盐水分别高 2 2 .5 6 %(P<0 .0 5 )和 5 3 .1 7%(P<0 .0 1 )。结果表明 ,生长激素释放肽 - 6乳酸乙醇酸共聚物微球有望发展成为新型长效制剂

    2005年02期 182-184页 [查看摘要][在线阅读][下载 97k]
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  • 抗猪脂肪细胞特异膜蛋白单克隆抗体的制备及生物学特性鉴定

    高士争,张曦,葛长荣,郝军元,汪磊,张玉静

    以纯化的猪脂肪细胞特异膜蛋白 (40 0 0 0 )为抗原免疫 BAL B/ c小鼠 ,制备了 2 A3、3 H7和 3 A6等 3株单克隆抗体 ,分别属于 Ig A、Ig M和 Ig G1亚类 ,其最佳稀释倍数分别为 1∶ 1 6 0 0、1∶ 3 2 0 0和 1∶ 6 4 0 0。经 Western blotting鉴定 ,3株单抗均能与 4 0 0 0 0的抗原结合 ,且具有较强的抗原亲和力 ,亲和常数分别为 4 .86× 1 0 8、1 .86× 1 0 9和 2 .4 6× 1 0 9;对皮下脂肪细胞具有很强的特异性 ,经 Western blotting鉴定仅与猪和人脂肪细胞的 4 0 0 0 0膜蛋白发生特异反应 ,而与牛、羊、兔、鸡、鼠等动物的脂肪细胞膜蛋白均无交叉反应 ;能与滇玉、滇昆、滇陆、长撒、长白、DL Y、约长撒和撒坝等品种猪皮下脂肪细胞的 4 0 0 0 0膜蛋白发生特异反应 ,而与皮下脂肪细胞的其他膜蛋白无交叉反应 ;仅与长撒猪皮下脂肪和腹部脂肪细胞的 4 0 0 0 0膜蛋白发生特异反应 ,与心、肝、脾、肺、肾、肌肉、肠系膜脂肪和肾周脂肪细胞膜蛋白均无交叉反应

    2005年02期 185-188页 [查看摘要][在线阅读][下载 149k]
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  • 雏鸡脑雌激素受体的表达及分布

    吴建云,范光丽,王鲜忠,张家骅

    采用免疫组化 SP法研究了雌激素受体在 1 0日龄雏鸡脑组织内的表达 ,着重观察了雌激素受体在小脑、中脑、下丘脑及端脑的分布。研究表明 ,雌激素受体主要存在于细胞核中 ,少数区域仅存于胞浆或胞膜。雌激素受体在脑内分布广泛。在小脑中部皮质的颗粒层、蒲肯野氏层 ,中脑的中央白质、外侧丘系腹侧核、视束、后连合等区域 ,雌激素受体免疫反应产物为高密度 ;在小脑前部皮质的颗粒层 ,中脑中央灰质、尾侧线形核 ,端脑副高纹状体等区域 ,雌激素受体免疫反应产物为中等密度 ;小脑前部皮质的蒲肯野氏细胞 ,下丘脑视上核 ,端脑原始旧纹状体等区域 ,雌激素受体免疫反应产物为低密度。结果揭示 ,在鸡脑早期发育过程中 ,雌激素起着广泛而重要的作用

    2005年02期 189-191页 [查看摘要][在线阅读][下载 91k]
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  • 鸡轮状病毒感染的病理形态学观察

    刁有祥,冯涛,陈庆普,刘悦竹,吕桂霞,郑福英,杨杰华,高晓伟

    为确定鸡轮状病毒感染的病理变化特点 ,对自然发病和人工发病轮状病毒感染鸡进行了病理学研究。结果表明 ,该病特征性的病理剖检变化为肠黏膜脱落出血 ,呈卡他性炎症表现。特征性组织学变化为小肠绒毛显著缩短 ,肠腺深度增加 ;除肠绒毛缩短外 ,肠上皮还变为扁平或立方形 ,并伴发坏死、脱落 ,黏膜充血、水肿与淋巴细胞浸润。电镜观察 ,肠黏膜上皮细胞的线粒体肿胀 ,嵴变粗 ,排列紊乱 ;粗面内质网及滑面内质网均扩张呈圆形 ,粗面内质网表面的核糖体部分脱落 ,胞浆内游离的核糖体减少

    2005年02期 192-194页 [查看摘要][在线阅读][下载 117k]
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  • 世界首例未经特异性免疫治疗而恢复的狂犬病病例

    郭志儒

    2005年02期 194页 [查看摘要][在线阅读][下载 38k]
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  • 恩诺沙星在眼斑拟石首鱼体内的药物代谢动力学

    简纪常,吴灶和,陈刚

    应用反相高效液相色谱法 (RP- HPL C)研究了恩诺沙星在眼斑拟石首鱼 (Sciaenops ocellatus)体内的药物代谢动力学。实验数据经 DAS药代动力学分析软件分析后得出 :腹腔注射组血浆的药时数据符合一级吸收二室模型 ,动力学方程为 :C =4 .92 5 e- 1 .4 52 t +2 .730 e- 0 .0 75t ,其主要药代动力学参数 :AU C37.5 33mg· L- 1· h、Cmax 4 .74 7mg/ L、Tmax0 .75 0 h、t α0 .4 77h、t β9.2 92 h、Vd/ F 1 .6 76 L / kg、t Ka0 .1 70 h、Ka 4 .0 81 / h、K 6 .71 4 / h、K1 0 0 .1 91 / h、K1 2 0 .76 9/h、K2 1 0 .5 6 6 / h;灌服组血浆的药时数据符合一级吸收一室模型 ,动力学方程为 :C =6 .4 82 (e- 7.0 92 t- e- 1 0 .356 t) ,其主要药代动力学参数 :AU C1 5 .80 5 mg· L- 1 · h、Cmax2 .770 mg/ L、Tmax1 .5 0 0 h、t α4 .989h、Vd/ F2 .0 72 L/ kg、Ka7.0 92 /h、K 1 0 .35 6 / h。结果表明 ,腹腔注射给药比灌服给药吸收快 ,血药浓度达峰时间短于灌服给药 ,但血药浓度峰值明显高于灌服给药 (P<0 .0 5 ) ,血浆中恩诺沙星的回收率为 94 .5 79%。

    2005年02期 195-197页 [查看摘要][在线阅读][下载 119k]
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  • 日粮铜源及其水平对猪下丘脑生长抑素分泌的影响

    杨连玉,杨文艳,李家奎,郑鑫,王哲,张乃生,王兴龙,欧阳红生,张永亮

    选用军牧 1号断乳仔猪 75头 ,随机分为 5组 ,采用完全随机化设计进行生长试验 ,研究了 2种铜源 (硫酸铜、蛋氨酸铜 )、3个添加水平 (5、12 5、2 5 0 mg/ kg)的日粮对猪生长及生长抑素分泌的影响 ,同时研究了下丘脑儿茶酚胺的变化与生长抑素的关系。结果表明 :日粮中添加 12 5 m g/ kg(P <0 .0 1)、2 5 0 mg/ kg(P<0 .0 5 )硫酸铜 ,12 5 mg/ kg(P<0 .0 1)、2 5 0 mg/ kg(P<0 .0 5 )蛋氨酸铜 ,可显著提高仔猪增重 ;而上述添加 5 mg/ kg硫酸铜组猪下丘脑生长抑素含量为 2 2 5 .74 ng/ g组织 ,显著高于 12 5 mg/ kg(P<0 .0 5 )、2 5 0 mg/ kg(P<0 .0 5 )硫酸铜组和 12 5 mg/ kg(P<0 .0 1)、2 5 0mg/ kg(P<0 .0 1)蛋氨酸铜组。下丘脑生长抑素含量与去甲肾上腺素、多巴胺含量呈负相关关系 (P<0 .0 5 )。据此认为 ,高剂量铜通过调节儿茶酚胺代谢抑制下丘脑生长抑素分泌 ,是其促生长调控的途径之一

    2005年02期 198-200页 [查看摘要][在线阅读][下载 110k]
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  • 不同锌源对断奶仔猪免疫和抗氧化作用的影响

    方洛云,邹晓庭,蒋林树,吴国娟

    选用 1 4 4头断奶仔猪 ,随机分成 4组 :一组为对照 ,饲喂添加氧化锌 1 0 0 mg/kg的日粮 ,另 3组分别饲喂添加氧化锌 30 0 0 m g/kg、蛋氨酸锌 1 0 0 m g/kg和纳米氧化锌 30 0 m g/kg的日粮 ,进行为期 5 2 d的饲养试验 ,以研究不同锌源对断奶仔猪消化和免疫功能的影响。结果表明 :高剂量氧化锌可提高血清中 Ig A的含量 5 .0 7%(P<0 .0 5 ) ,高剂量氧化锌和纳米氧化锌可使血清中免疫球蛋白 Ig M含量分别提高 2 .97%(P<0 .0 5 )和 5 .6 7%(P<0 .0 1 ) ;蛋氨酸锌可使血清中SOD活性比对照组提高 1 .36倍 (P<0 .0 1 ) ,高剂量氧化锌和蛋氨酸锌可分别使肝脏中 SOD活性提高 2 8.2 0 %(P<0 .0 5 )和 2 9.33%(P<0 .0 5 ) ;高剂量氧化锌、蛋氨酸锌和纳米氧化锌均可提高肝脏组织中金属硫蛋白 (MT)含量

    2005年02期 201-203页 [查看摘要][在线阅读][下载 90k]
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  • 高钙与高蛋白日粮诱发鸡痛风

    唐建霞,黄克和,郭小权,高建中

    将 1 2 0只 35日龄健康蛋仔鸡随机分为 3组 :对照组饲喂基础日粮 ,高钙组 (HC)在饲喂基础日粮的同时添加石粉(含钙 3.80 %) ,高钙高蛋白组 (HCHP)在饲喂基础日粮的同时添加石粉和豆粕 (含钙 3.5 5 %,粗蛋白 2 4 .5 8%) ,进行 30d的饲养试验。结果显示 :HC组鸡出现普遍的肾脏损害 ,但未见尿酸盐在内脏器官的沉积 ;HCHP组鸡出现尿酸盐在内脏器官表面广泛沉积 ,发生典型的内脏型痛风。与对照组相比 ,HC组血清无机磷和钾显著降低 ,血清尿酸和钠显著升高 ;HCHP组血清尿酸极显著升高 ,血清钙显著升高 ;HC和 HCHP组尿液中钠及钾浓度均显著降低 ,无机磷浓度均显著升高 ;HC组 2 4 h尿液中镁排出量显著升高 ,HCHP组 2 4 h尿液中镁与钾排出量显著升高 ,HC和 HCHP组 2 4 h尿液中尿酸、钙和无机磷排出量极显著升高 ,而钠排出量极显著降低

    2005年02期 203-205页 [查看摘要][在线阅读][下载 97k]
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  • 中药制剂防治肉鸡肾性传染性支气管炎的实验研究

    邓俊良,余树民,左之才,廖玉辉,陈俊杰,卓丽玲

    将某养殖场已确诊为肾性传染性支气管炎的 2 5日龄肉鸡 30 0只 ,随机分为 6组 ,应用研制的复方中药制剂——禽速康口服液按不同剂量组合进行治疗试验。结果表明 ,禽速康 (3m L/ kg)与肾舒宝 (40 m g/ kg)联合疗法 ,对肉鸡肾性传染性支气管炎有较好的疗效 ,用药 3d可控制发病鸡死亡 ,治愈率达 82 %。经大群推广试验表明 ,禽速康与肾舒宝联合防治肉鸡肾性传染性支气管炎 ,效果确实 ,防治有效率达 93.75 %。

    2005年02期 206-207页 [查看摘要][在线阅读][下载 61k]
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  • 归芪益母汤耐缺氧及抗氧化作用

    许小琴,韦旭斌,刘学忠,李金贵,胡仲明,柳巨雄,王治,张玉国

    归芪益母汤经水提醇沉制成注射液 ,给小鼠经腹腔注射给药 ,进行常压缺氧、减压缺氧、化学法缺氧和抗氧化试验 ,探讨了归芪益母汤对小鼠耐缺氧和抗氧化能力的影响。结果表明 ,归芪益母汤注射液显著延长了缺氧小鼠的存活时间 (P<0 .0 1 ) ,其中常压缺氧存活时间延长 1 1 0 .2 1 %,减压缺氧存活时间延长 76 .4 8%,化学法缺氧存活时间延长2 4 0 .87%,提示归芪益母汤能够提高小鼠的耐缺氧能力。抗氧化方面 ,体内试验表明 ,其能显著降低小鼠因急性缺氧再暴露所引起的 MDA的产生 (P<0 .0 1 ) ;体外试验表明 ,能拮抗 H2 O2 诱导的溶血 ,抑制超氧离子 (O- 2 )生成

    2005年02期 208-210页 [查看摘要][在线阅读][下载 87k]
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  • 延边黄牛卵母细胞激活及孤雌发育

    罗光彬,蔡春化,金花子,韩雪花,金庆国

    探讨了提高延边黄牛卵母细胞激活率及孤雌发育率的适宜方法。从屠宰场回收的卵巢中采集未成熟的卵母细胞 ,置于体外成熟培养液中 ,体外成熟培养 2 0~ 2 2 h。将体外成熟的卵母细胞 ,分别用不同浓度的乙醇或 Ca- ionophore进行单一激活处理。试验结果表明 ,用 5 %、7%、9%、1 1 %及 1 3 %乙醇激活卵子 ,激活率分别为 4 1 .2 %、4 7.2 %、5 3 .1 %、3 9.7%及 2 3 .4 %,7%和 9%乙醇处理组的卵子激活率显著高于其他组 (P<0 .0 5 ) ,但二者之间差异不显著 (P>0 .0 5 )。用 2 .5、5 .0、7.5μm ol/L Ca- ionophore激活卵子 ,激活率分别为 2 9.3 %、5 1 .8%、4 5 .4 %,5 .0、7.5μmol/L Ca- ionophore处理组的卵子激活率显著高于 2 .5 μmol/L 组 (P<0 .0 5 )。用 9%乙醇或 5 .0 μm ol/L Ca- ionophore分别与 1 0 m g/Lcyclohexim ide(CH)组合激活卵子 ,卵子的激活率分别为 77.3 %和 76 .8%,比单独用 9%乙醇 (48.8%)或 5 .0μmol/LCa- ionophore(43 .2 %)的激活率显著提高 (P<0 .0 5 ) ,二者卵子的卵裂率和发育到 8细胞期的孤雌发育率均无显著差异

    2005年02期 211-213页 [查看摘要][在线阅读][下载 97k]
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  • 尼克红鸡染色体性别鉴定的研究

    郑喜邦,何宝祥,张翊华

    以引进品种尼克红鸡为研究对象 ,用羽髓法和改进的骨髓法制备染色体并对其进行 C分带处理 ,依据 C带 W染色体的存在与否 ,对 32只尼克红鸡进行了性别鉴定。结果表明 :(1 )尼克红鸡染色体经 C分带处理 ,很多微小染色体均显出深染的 C带 ,W染色体则整条深染 ,而且重复性很强 ,但大型染色体没有或仅显示很浅的 C带 ;(2 )母鸡的中期分裂相中可见到 1条完全深染的 W染色体 ,公鸡的中期分裂相中则否 ;(3) C分带技术为禽类异染色质 W染色体的识别提供了简便易行的手段 ,依此对 4 4只尼克红鸡判定的性别与这些供体鸡表型性别的符合率为 1 0 0 %;(4)应用直接羽髓法或骨髓短期孵育法制备染色体 ,结合 C分带处理 ,是一种可望用于珍稀和濒危禽类性别鉴定的非侵害性方法

    2005年02期 213-216页 [查看摘要][在线阅读][下载 135k]
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  • 日本脑炎病毒及其疫苗的研究

    汤德元,郭万柱

    2005年02期 217-221页 [查看摘要][在线阅读][下载 180k]
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  • RNA干扰与基因沉默

    姜庆林,季从亮,周群兰,卢克伦,陈国宏*

    2005年02期 221-224页 [查看摘要][在线阅读][下载 176k]
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  • 传承百年历史 续写新的辉煌——军需大学隆重举行中国现代兽医教育百年庆典

    2005年02期 225-228页 [查看摘要][在线阅读][下载 662k]
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