• 口蹄疫病毒P12X3C3D多基因编码蛋白在昆虫细胞中的表达与检测

    冷青文;郭慧琛;刘在新;谢庆阁;张居农;

    利用杆状病毒表达系统构建了包含有口蹄疫病毒(FMDV)P12X3C3D多基因片段的重组杆状病毒。将该病毒感染Sf9细胞后,利用SDS-PAGE及夹心ELISA方法检测目的蛋白的表达。结果表明,重组杆状病毒能够表达FMDV目的蛋白,该表达产物能被FMDV阳性血清识别,具有一定的反应原性。

    2006年03期 229-231页 [查看摘要][在线阅读][下载 165K]
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  • 口蹄疫病毒结构蛋白VP2-3-1基因的克隆及原核表达

    李平花;刘在新;伏小平;吴润;郭建宏;谢庆阁;

    根据口蹄疫病毒(FMDV)China99流行毒株基因序列设计特异引物,以阳性质粒pGEM-p1为模板,扩增p1基因。p1片段经Nco和Xho酶消化后,得到目的基因VP2-3-1,将其与经相同酶消化的表达载体pProEx-HTb连接并转化BL21(DE3),经PCR、酶切鉴定和序列分析筛选阳性克隆,经IPTG诱导后SDS-PAGE检测,结果表明VP2-3-1基因得到表达;Westernblotting结果显示,该表达蛋白能被口蹄疫病毒阳性血清所识别。

    2006年03期 232-234页 [查看摘要][在线阅读][下载 275K]
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  • J亚群禽白血病病毒(ALV-J)ELISA检测方法的建立

    叶建强;秦爱建;邵红霞;金文杰;刘岳龙;

    利用抗J亚群禽白血病病毒(ALV-J)囊膜蛋白特异性单克隆抗体JE9,建立了检测ALV-Jenv抗原抗体免疫复合物的ELISA方法。应用该方法检测SPF鸡血清、鸡抗禽流感H9亚型阳性血清、鸡沙门氏菌阳性血清、鸡腺病毒阳性血清、鸡新城疫阳性血清,结果均为阴性,无交叉反应;抗ALV-J阳性血清与ALV-J特异性单克隆抗体JE9能相互阻断;ALV-J阳性血清经酸处理后,ELISA检测的D490差值明显下降。对部分攻毒鸡血清样本及田间ALV-J阳性血清样本进行电镜观察,可见ALV-J样病毒粒子及ALV-J样免疫复合物。经与间接免疫荧光(IFA)检测ALV-Jenv抗体结果比较表明,建立的ELISA方法与IFA方法两者具有较好的群体符合率,群体符合率为8/9。这些结果表明,本研究建立的ELISA方法在ALV-J的诊断中具有很好的应用前景。

    2006年03期 235-237页 [查看摘要][在线阅读][下载 148K]
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  • 猪瘟病毒Shimen株E2基因的克隆及其逆转录病毒表达载体的构建

    刘建玲;苏正元;许信刚;李谱华;张彦明;

    根据已发表的猪瘟病毒(classicalswinefevervirus,CSFV)Shimen株的全基因组序列,设计2对引物P1/P2和B1/B2,在B1和B2的5′端分别加上EcoR和BamH位点,以CSFV-Shimen株脾毒为材料,一步法提取总RNA,并以此为模板采用反转录PCR(RT-PCR)和套式PCR(nPCR),成功地扩增出约1.2kb的E2基因。将PCR产物回收后与pMD18-T载体连接并转化,经PCR和酶切鉴定获得重组质粒E2-T。将E2-T经EcoR和BamH酶切消化、回收目的基因后,与经BamH/EcoR酶切的逆转录病毒载体pBABE-puro连接并转化,经酶切鉴定获得重组质粒pBABE-puro-E2。序列测定表明,目的基因的插入位置、方向和读码框完全正确。

    2006年03期 238-239+242页 [查看摘要][在线阅读][下载 185K]
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  • 猪瘟合并猪繁殖与呼吸综合征病毒(PRRSV)和猪圆环病毒2型(PCV2)感染

    杨宗照;方维焕;

    2004年初以来,杭州地区的几个规模化猪场陆续发生仔猪腹泻、保育猪呼吸困难的疾病,剖检见肺部呈橡皮样,全身淋巴结水肿,部分猪脾脏边缘梗死等,发病率、死亡率较高。设计针对猪繁殖与呼吸综合征病毒(PRRSV)、猪圆环病毒2型(PCV2)的特异性引物,进行RT-PCR或PCR检测;运用伪狂犬病(PR)鉴别试剂盒检测PR,运用免疫荧光法检测猪瘟(HC),并进行了细菌分离培养,通过全面检查认为,这几个猪场发生了猪瘟合并猪PRRSV、PCV2感染。

    2006年03期 240-242页 [查看摘要][在线阅读][下载 125K]
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  • 鸭病毒性肠炎病毒的提纯及其结构蛋白SDS-PAGE分析

    文明;程安春;汪铭书;周毅;刘菲;袁桂萍;郭宇飞;贾仁勇;周伟光;陈孝跃;

    将鸭病毒性肠炎病毒(DEV)分离株SC-1经鸭胚成纤维细胞培养增殖后,采用差速离心结合蔗糖不连续密度梯度离心法进行提纯,获得多量、纯净的完整病毒粒子。病毒粒子主要位于40%~50%蔗糖层交界处,电镜下可观察到DEV具有典型的疱疹病毒特征,完整病毒粒子由囊膜、衣壳和核芯3个部分组成,直径为170~190nm。将纯化的DEV粒子经SDS-PAGE分析,发现其结构蛋白由11种多肽组成,即VP1(190000)、VP2(136000)、VP3(106000)、VP4(88000)、VP5(75000)、VP6(68000)、VP7(56000)、VP8(48000)、VP9(42000)、VP10(38000)和VP11(32000),其中VP1、VP2、VP3、VP6、VP8和VP9等6条蛋白区带的相对百分含量较高,约占病毒结构蛋白总量的89.04%,为DEV的主要结构多肽。

    2006年03期 243-246页 [查看摘要][在线阅读][下载 209K]
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  • 猪传染性胃肠炎病毒呼吸道途径侵染后在体内的动态分布

    严懿嘉;邹勇;崔立;钱永清;华修国;

    应用猪传染性胃肠炎病毒(TGEV)分别对25日龄和40日龄的SPF仔猪进行气管内注射攻毒。攻毒后每24h致死1头仔猪,用免疫荧光染色检测各脏器内病毒的消长情况,并采血检测抗体。结果,在25日龄的仔猪中,仅3头出现腹泻症状,且很快耐过;剖检可见不同程度的肺部病理变化;攻毒后24h气管和肺脏样品的IFA呈阳性,抗体效价随着时间的延长而增高。40日龄仔猪临床表现和剖检变化基本正常。所有的胃肠道样品的IFA均为阴性。结论气管内注射后,TGEV可在呼吸系统中增殖,但未能在消化道系统中检出。

    2006年03期 246-247+253页 [查看摘要][在线阅读][下载 90K]
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  • 猪圆环病毒2型荧光定量PCR检测方法的建立

    张福良;宋长绪;杨鸣琦;朱道中;蒋智勇;林志雄;刘燕玲;宋志军;

    通过条件优化,以定量的10倍系列稀释质粒pMD-ORF2(含PCV2-ORF2全基因)为标准品,进行荧光定量PCR扩增并制作标准曲线,建立了猪圆环病毒2型(PCV2)的荧光定量PCR检测方法。该方法检测灵敏度可达1.0×100拷贝/μL,线性范围为109~100,达10个数量级;对起始浓度为1.0×106、1.0×105、1.0×104拷贝/μL的标准品的最终实际测得值分别为1.000×106、0.935×105、0.987×104拷贝/μL,变异系数分别为2.527%、2.067%、2.092%。该方法的检测灵敏度与套式PCR(nPCR)相当,甚而高于常规PCR。

    2006年03期 248-250页 [查看摘要][在线阅读][下载 134K]
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  • 猪瘟荧光抗体的制备及其在自然感染病例中的应用

    张淑霞;杨增岐;张卫军;赵余放;

    用硫酸铵盐析法从抗猪瘟高免血清中提取免疫球蛋白,应用搅拌标记异硫氰酸荧光素(FITC),葡聚糖凝胶G-25层析除去标记物中游离的荧光素,制备出猪瘟荧光抗体(CSF-FA)。经测定,标记荧光抗体的染色效价为1∶4。用此浓度荧光抗体,结合常规诊断检测猪瘟,从33例采自陕西省不同地区自然发病猪的扁桃体中检出猪瘟阳性病例7份,阳性率21.3%(7/33)。结果表明,制备的荧光抗体诊断猪瘟敏感性高、特异性强;陕西省猪瘟自然感染发病率高。

    2006年03期 251-253页 [查看摘要][在线阅读][下载 80K]
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  • 新城疫病毒Ⅰ系毒株通过Caspase途径诱导鸡胚成纤维细胞凋亡

    崔玉东;冉旭华;宋佰芬;朴范泽;

    应用不同Caspases抑制剂研究了新城疫病毒(NDV)Ⅰ系毒株诱导鸡胚成纤维细胞(CEF)凋亡的途径。结果,用20μmol/L的Z-VAD.fmk、Z-IETD.fmk和Z-LEHD.fmk分别处理CEF后,均能抑制NDVⅠ系毒株诱导的CEF凋亡;而用20μmol/L的Z-DEVD.fmk和Z-AEVD.fmk分别处理CEF,则不能抑制NDVⅠ系毒株诱导的CEF凋亡。由此表明,NDVⅠ系毒株能通过Caspase依赖性途径诱导CEF凋亡,其中Caspase-8和Caspase-9在凋亡中发挥重要作用,而Caspase-3和Caspase-10在凋亡中不发挥作用。

    2006年03期 254-256页 [查看摘要][在线阅读][下载 344K]
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  • 猪传染性胸膜肺炎放线杆菌参考株抗血清的制备及野毒株血清型鉴定

    陈本龙;崔治中;刁有祥;姜世金;

    将猪传染性胸膜肺炎放线杆菌全部12个血清型的国际参考菌株接种于培养基大量培养,回收菌体、甲醛灭活后,加入蜂胶佐剂制成疫苗,分别免疫健康的试验用白兔,获得针对该菌单一血清型的抗血清。虽然不同血清型间有一定的交叉反应,但对同源菌株的菌体抗原的凝集效价最高,分别可达6~8个log2。用该套血清对2003年从山东省各地分离到的猪传染性胸膜肺炎放线杆菌野毒株11株进行了血清型鉴定,分别为3型(2株)、4型(1株)、5型(4株)和7型(4株)。

    2006年03期 257-258+261页 [查看摘要][在线阅读][下载 93K]
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  • 猪肺炎支原体MY-99株的致病性

    熊焰;石谦;邓均华;苟琳;

    将猪肺炎支原体MY-99株人工培养F100株经鼻腔接种于健康成华×大约克杂交猪,2周后60%的猪出现气喘,个别猪伴有轻微咳嗽;病理切片可见到支气管周围多量淋巴样细胞浸润、肺泡壁增厚等典型的间质性肺炎病变。试验猪平均日增重比对照猪显著降低,接种后0~14d期间降低了31.05%(P<0.01),15~28d期间降低了42.01%(P<0.01),29~42d期间降低了0.1%(P>0.05)。试验猪血清中的猪肺炎支原体抗体水平在2周后最高(1∶24.2),4周后降至1∶23.9,6周后最低(1∶22.5),显示猪肺炎支原体MY-99株诱发了急性猪地方流行性肺炎,同时从试验猪肺脏中分离出了猪肺炎支原体。超微切片显示,其菌体大小为0.33~0.48μm,并缺乏细胞壁;革兰氏染色为阴性类球形菌体,在压力下可以通过0.45μm的细菌滤膜,菌落呈现煎蛋状。

    2006年03期 259-261页 [查看摘要][在线阅读][下载 130K]
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  • 利用半套式PCR扩增16S rRNA基因检测牛和猪附红细胞体

    刘文强;胡敬东;梁成彪;栾婧婧;赵宏坤;高运东;仲跻峰;

    根据GenBank收录的猪和牛附红细胞体16SrRNA基因序列设计1对通用引物,在其上游引物内侧又设计1条分别针对猪和牛附红细胞体的特异性引物。以这4条引物对出现附红细胞体病典型症状及疑似症状的猪和牛的血样DNA进行半套式-PCR扩增。结果显示,该反应阳性率为58.3%,低于临床解剖和镜检结果。对该基因的序列测定结果进行分析,表明不同动物附红细胞体的16SrRNA基因同源性在80%以上。从该基因来看,附红细胞体与立克次氏体没有同源性,而与肺炎支原体和穿透支原体亲缘关系较近。

    2006年03期 262-264页 [查看摘要][在线阅读][下载 305K]
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  • 水泡性口炎病毒感染BHK-21细胞的超微结构改变

    褚秀玲;宋德光;苏建青;韦旭斌;高丰;

    应用超薄切片技术对水泡性口炎病毒(VSV)在BHK-21细胞上的形态发生和早期发育进行了观察。结果表明,VSV能导致BHK-21细胞圆缩,胞浆严重空泡化,线粒体嵴断裂及空泡化;病毒在细胞浆内复制、增殖,在细胞膜上以出芽方式获得囊膜而成熟。

    2006年03期 265-267页 [查看摘要][在线阅读][下载 529K]
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  • H5N2与H5N1禽流感油乳灭活疫苗免疫鹅群对H5N1流行株攻毒的保护效力及母源抗体对免疫效力的干扰

    张评浒;唐应华;薛峰;曹永忠;仇旭升;孙学辉;刘小文;高崧;刘秀梵;

    应用H5N2和H5N12种类型禽流感油乳灭活疫苗分别免疫鹅群,观察比较了二者对H5N1型高致病性禽流感病毒的攻毒保护效力。结果表明,在同等剂量免疫条件下,从发病率、死亡率和泄殖腔排毒规律3项指标综合评价来看,H5N1灭活苗水禽免疫组对高致病性禽流感H5N1流行株攻毒的保护效率较H5N2灭活苗理想,且水禽禽流感母源抗体对灭活苗免疫具有一定的干扰作用。

    2006年03期 268-270+274页 [查看摘要][在线阅读][下载 133K]
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  • 猪源D型产毒素多杀性巴氏杆菌toxA基因的克隆与表达

    王大鹏;吴斌;周锐;唐先春;陈焕春;

    皮肤坏死毒素(Dermonecrotictoxin,DNT)是产毒素多杀性巴氏杆菌(ToxigenicPasteurellamultocida,T+Pm)的主要毒力因子和保护性抗原。以猪源D型T+Pm的基因组DNA为模板,用PCR方法扩增得到了编码DNT的toxA全基因编码序列,共4019bp。将其克隆到pMD18-T载体并测序,结果表明,toxA基因序列与GenBank已报道的5个toxA基因序列的同源性达99.8%以上。将该基因亚克隆到原核表达载体pGEX-KG的GST基因下游,转化BL21(DE3)大肠杆菌,经IPTG诱导表达,获得大小约173000的融合蛋白。Westernblot结果表明,该融合蛋白具有良好的反应原性。动物试验表明,该重组蛋白可以诱导小鼠产生高水平的抗体,并可抵抗致死剂量的天然DNT毒素攻击。

    2006年03期 271-274页 [查看摘要][在线阅读][下载 250K]
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  • 肠出血性大肠杆菌O157∶H7主要保护性抗原单克隆抗体的研制及特性分析

    祝令伟;冯书章;刘军;陈萍;

    以基因重组技术构建工程菌株表达肠出血性大肠杆菌(EHEC)O157∶H7主要保护性抗原紧密素和志贺毒素的融合蛋白。融合蛋白采用凝胶分离电洗脱法回收纯化,用纯化的蛋白抗原免疫BALB/c小鼠,细胞融合后获得的3株杂交瘤细胞株1G2、3C6、1B10,能分别稳定分泌针对紧密素、志贺毒素Stx1和Stx2的单克隆抗体。3株单抗分别制备腹水并纯化,ELISA检测效价分别为1∶6.4×105、1∶1.2×106、1∶3200。Western-blot检测表明,3株单抗与融合蛋白发生特异性反应。应用3株单抗均可特异性检出EHECO157∶H7,而3株单抗与其他不产生紧密素和志贺毒素的大肠杆菌不反应。

    2006年03期 275-277页 [查看摘要][在线阅读][下载 212K]
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  • 2种猪源链球菌菌体细胞表面疏水性及体外结合纤连蛋白的检测

    孙理云;陆承平;

    采用盐析法测定了马链球菌兽疫亚种ATCC35246株(简称35246)和猪链球菌2型9801株(简称HA9801)的表面疏水性。35246在浓度为1.0mol/L的硫酸铵中2min内析出,HA9801在0.6mol/L的硫酸铵中析出。用不同浓度的人纤连蛋白(Fn)包被ELISA板,采用ELISA方法检测了对数生长后期的35246和HA9801体外结合固定Fn的情况。35246的D415随细菌浓度的升高而增大,而9801的D415与对照相比,经t检验差异不显著(P>0.05)。采用间接免疫荧光试验,对二者体外结合游离的人Fn的情况进行了检测,结果在2种细菌周围均见绿色荧光。结果表明,二菌均为表面疏水菌;35246株既可结合固定的Fn,又可结合游离的Fn;而HA9801株仅与游离的Fn结合。

    2006年03期 278-280页 [查看摘要][在线阅读][下载 188K]
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  • 嗜水气单胞菌体外粘附Caco-2细胞对细胞膜生物学特性的影响

    胡彩虹;夏枚生;熊莉;许梓荣;

    采用Caco-2细胞培养模型,研究了嗜水气单胞菌粘附Caco-2肠上皮细胞后对其活力、细胞膜磷脂酶A2(PLA2)、胞浆游离钙浓度、膜通透性和膜流动性的影响。结果显示,细菌粘附后1h,肠上皮细胞活力显著下降,PLA2活性和胞浆游离钙浓度显著增加,细胞外LDH含量和细胞损伤率显著升高(膜通透性异常增加),肠上皮细胞膜荧光偏振度、膜脂微粘度显著增加(膜流动性降低),且上述指标均随着粘附时间的延长而持续升高或降低。

    2006年03期 281-283+287页 [查看摘要][在线阅读][下载 139K]
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  • 旋毛虫新生幼虫期特异性基因N10的表达及鉴定

    高长玲;刘明远;郭恒;孙树民;付宝权;崔国祯;卢强;陈启军;P.Boireau;

    根据旋毛虫新生幼虫期特异性基因pBK-CMV-N10序列设计引物,利用PCR技术将基因N10的信号肽去除后,用T/A法克隆到pMD-18T载体,转化至大肠杆菌NovaBlue,经鉴定及序列测定,结果显示成功克隆到N10基因。将重组质粒pMD-18T-N10进行酶切后连接到原核表达载体pET-28a中,重组质粒经鉴定后转化大肠杆菌BL21star(DE3),用IPTG诱导表达出与理论相符的融合蛋白,相对分子质量为38700,诱导4h的表达量占菌体总蛋白量的15%。从N10重组蛋白提取可溶性融合蛋白,对其生物学特性初步鉴定结果表明,具有类似脱氧核糖核酸酶的活性。

    2006年03期 284-287页 [查看摘要][在线阅读][下载 383K]
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  • 携带猪囊虫表位的嵌合蛋白疫苗的构建及其免疫学研究

    邓小昭;周宗安;刁振宇;高健;王元伦;刘玉;郑纪山;

    用PCR法将猪囊虫抗原表位n1、n2插入乙肝病毒核心蛋白(HBc)序列的第78~79位之间,将猪囊虫抗原表位n3接在149位之后,再将该序列克隆入pET28a载体中,构建了重组表达质粒pET28a-Δc-3n,在大肠杆菌中表达出融合蛋白,命名为PCCE。将PCCE纯化后免疫小鼠,以ELISA检测小鼠的体液免疫应答,Westernblot检测抗体的特异性,DotELISA验证所选表位的保护性。另用绦虫卵攻击免疫小鼠,以观察疫苗的保护作用。测序结果表明,重组质粒构建成功;SDS-PAGE显示,融合蛋白表达正确,电镜证实有蛋白颗粒形成。对免疫小鼠应用ELISA检测到高滴度抗体;Westernblot结果表明,免疫鼠体内诱导出了3种特异性抗体;DotELISA结果表明,所选表位对宿主可能具有保护性。绦虫卵攻击免疫小鼠试验表明,疫苗PCCE的相对保护率为89%。结论成功地表达和纯化了以HBc为载体的携带3个猪囊虫表位的融合蛋白(PCCE),以PCCE作为疫苗免疫小鼠,能诱导较强的特异性体液免疫反应,免疫小鼠对绦虫卵攻击具有较好的免疫保护作用。

    2006年03期 288-291页 [查看摘要][在线阅读][下载 362K]
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  • 抑制素基因免疫的免疫反应性

    茆达干;杨利国;张志杰;何晓红;曹少先;

    通过应用抑制素真核表达质粒pcINH和抑制素融合表达质粒pCIS分别经肌肉注射免疫大鼠的2个系列试验,检测了免疫鼠抑制素抗体水平及抗体阳性鼠的比例。结果,抑制素质粒pcINH经脂质体介导免疫大鼠,50%(13/26)的个体产生了抑制素阳性抗体,40μg组产生的抗体水平最高;抑制素融合表达质粒pCIS免疫经盐酸普鲁卡因处理的大鼠,2次免疫获得了38.9%(23/54)的抗体阳性率,3次免疫获得55.6%(20/36)的抗体阳性率,100μg组产生的抗体水平最高;加强免疫可提高抗体的水平,但免疫剂量的增加并不一定能增加抗体阳性鼠的比例。

    2006年03期 292-295页 [查看摘要][在线阅读][下载 124K]
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  • 毕赤酵母表达皮蝇素A蛋白

    孙怡;徐梅倩;高兴春;何国声;

    建立了用毕赤酵母表达系统表达皮蝇素A(HypodermotinA,HA)的技术,并对表达条件进行了优化筛选。将皮蝇素A基因连接到质粒pPIC9k上,构建了重组转移质粒pPIC9k-HA。重组质粒通过电激转化入酵母细胞GS115后,用组氨酸缺陷培养基和G418分别进行筛选。重组酵母细胞在含0.5%甲醇的培养基中诱导产生目的蛋白,培养3d后收取上清,用阴离子交换层析柱分离纯化。经SDS-PAGE检测,所表达的蛋白相对分子质量约为30000。Western-blotting表明,该蛋白能与兔抗HA血清特异性结合。明胶电泳检测显示,该蛋白具有酶活性。单因素改变表达条件的结果表明,甲醇浓度在0.5%~1%、溶氧量在70%以上、诱导2~3d的情况下表达产量最高,达1500mg/L左右。该研究结果对防治牛皮蝇蛆病疫苗的深入研究及毕赤酵母在寄生虫领域的应用有一定价值。

    2006年03期 296-299页 [查看摘要][在线阅读][下载 354K]
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  • 动物油脂中DNA的提取及牛、羊源性成分的PCR检测

    邵碧英;张体银;李志方;郑腾;陈文炳;

    用异硫氰酸胍法提取鱼油、加入牛肉DNA的鱼油、加入山羊肉DNA的鱼油和牛油中的DNA。18SrDNA片段以及牛、羊源性成分的PCR扩增结果表明,建立的动物油脂DNA提取方法是可行的。用建立的DNA提取方法提取3份送检鱼油的DNA,牛、羊源性成分的PCR检测结果均为阴性。

    2006年03期 300-302页 [查看摘要][在线阅读][下载 222K]
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  • Vc对肉鸡腹水综合征发病率、右心肥大和肺微细动脉肌型化的作用

    向瑞平;李德印;石冬梅;沈永恕;张华;皇甫和平;王小龙;

    350只AA商品肉鸡随机分为A、B、C、D和E组,常规饲养。14日龄后,A组鸡正常对照,B、C、D和E组鸡舍温按每日1~2℃由25℃逐步降至12℃,同时D和E组在日粮中按1.5mg/kg的剂量添加甲状腺素T3以诱发肉鸡腹水综合征(AS);C和E组在日粮中以500mg/kg的剂量添加维生素C(VC)以观察其效果。结果表明,低温和T3能显著增加AS发病率、红细胞压积(PCV)值和肺厚壁末梢血管百分率(P<0.01),显著抑制肉鸡的增重(P<0.05),低温显著增加采食量,而T3则显著抑制采食量(P<0.01);同时,分别在低温或低温加T3的条件下,添加VC能显著抑制AS发病率和肺厚壁末梢血管百分率的上升(P<0.01),但未能改变肉鸡的PCV值、增重、采食量和饲料转换率(P>0.05),从而提示VC对低温和T3诱发的肉鸡AS和肺微细血管肌型化有预防作用。

    2006年03期 303-306页 [查看摘要][在线阅读][下载 383K]
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  • 应用碱性单细胞凝胶电泳技术(SCGE)检测镉致鸡脾淋巴细胞DNA的损伤效应

    李金龙;熊永忠;徐世文;李术;刘丽玲;

    应用碱性单细胞凝胶电泳技术(singlecellgelelectrophoresis,SCGE)检测了0~30μmol/LCdCl2对体外培养的鸡脾脏淋巴细胞DNA的损伤效应。结果表明,镉浓度在0~30μmol/L范围内,随着镉浓度的增加,对鸡脾脏淋巴细胞DNA的损伤作用逐渐增强,呈现显著的剂量效应(r=0.983,P=0.004)。结果提示,镉致鸡脾脏淋巴细胞DNA损伤是镉对禽类免疫毒性的重要机制之一。

    2006年03期 307-309页 [查看摘要][在线阅读][下载 180K]
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  • 锌中毒对雏鸡外周血T-淋巴细胞的影响(英文)

    崔恒敏;赵翠燕;彭西;邓俊良;黎得兵;

    200只1日龄艾维茵肉鸡随机分为4组,即对照组(每千克日粮含锌100mg)、锌中毒组(每千克日粮含锌1500mg)、锌中毒组(每千克日粮含锌2000mg)、锌中毒组(每千克日粮含锌2500mg),每组均饲喂日粮7周。以流式细胞术和酸性α-醋酸萘酯酶(ANAE)染色法观测外周血T-淋巴细胞的动态变化。结果,3个锌中毒组7周龄时,外周血T-淋巴细胞ANAE阳性率显著低于对照组(P<0.05或P<0.01),同时3个锌中毒组间比较也呈显著差异(P<0.05或P<0.01)。与对照组比较,锌中毒组2至7周龄和锌中毒组6、7周龄CD4+T淋巴细胞数量减少,锌中毒组、组2至4周龄和锌中毒组、组7周龄CD8+T淋巴细胞数量降低,CD4+/CD8+比值3个锌中毒组2、4周龄升高,6、7周龄降低。由此表明,锌中毒可抑制T-淋巴细胞的生成,降低其在外周血中的数量。

    2006年03期 310-313页 [查看摘要][在线阅读][下载 361K]
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  • 除草剂敌草快(Diquat)所致的大鼠胎儿动脉管收缩与血管紧张素及其受体的关系

    沈明浩;任大勇;郭环宇;陈萍;李大军;

    为研究除草剂敌草快(Diquat)对胎儿动脉管的毒性作用机理,进行了以下3个试验(1)取妊娠21d大鼠20只,随机分成5组,每组4只,于不同时间皮下注射敌草快7mg/kg,对照组注射等量生理盐水。取出胎儿,冷冻后,观察动脉管收缩情况。(2)取妊娠21d大鼠16只,随机分成4组,每组4只。试验1组母体皮下注射敌草快7mg/kg,2、3组通过子宫壁给胎儿分别注射0.05mL生理盐水和0.05mL(0.05mg)非选择性血管紧张素(ET)受体ETA/ETB拮抗药TAK-044后,再母体皮下注射敌草快7mg/kg,取出胎儿,观察动脉管收缩情况。(3)取妊娠21d大鼠16只,随机分成4组,每组4只。试验1组母体皮下注射敌草快7mg/kg,2、3组通过子宫壁给胎儿分别注射0.05mL生理盐水和0.05mL(0.02mg)选择性ETA受体拮抗药BQ-123后,再母体皮下注射敌草快7mg/kg,取出胎儿,观察动脉管收缩情况。结果表明,敌草快对妊娠末期胎儿动脉管有毒性作用,胎儿注射TAK-044和BQ-123都不引起动脉管收缩。由此可见,敌草快所致胎儿动脉管收缩与ET有关,且有ETA受体作为媒介参与。

    2006年03期 314-316页 [查看摘要][在线阅读][下载 98K]
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  • 艾维因肉鸡实验性锌缺乏症的病理学观察

    彭西;崔恒敏;赵翠燕;邓俊良;

    1日龄艾维因肉鸡健雏100只,随机分为2组,分别喂以正常对照(日粮锌100mg/kg)和锌缺乏(日粮锌23.6mg/kg)日粮7周,进行系统的病理学观察。缺锌鸡出现生长迟缓、羽毛发育不良等临床症状。组织学观察,胸腺、腔上囊和脾脏淋巴细胞数量减少、变性、坏死。电镜观察,胸腺、腔上囊和脾脏的淋巴细胞核溶解、固缩,线粒体肿胀,嵴断裂、溶解,粗面内质网扩张。血液病理学变化,主要是血清碱性磷酸酶活性下降,血清胰岛素、总蛋白、白蛋白、球蛋白、球白比和锌含量显著降低。

    2006年03期 317-319页 [查看摘要][在线阅读][下载 74K]
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  • 干乳期能量摄入水平对围产期奶牛肝载脂蛋白B100mRNA丰度的影响

    孙玉成;王雪莹;李红梅;王哲;张嘉保;

    将年龄、胎次相同,年产奶量大于5000kg的围产期健康奶牛30头随机分为3组,每组10头。组饲喂中国奶牛饲养标准(2000)减少20%日粮(能量摄入80%组),组饲喂中国奶牛饲养标准(2000)日粮(能量摄入100%组),组饲喂中国奶牛饲养标准(2000)增加20%日粮(能量摄入120%组)。试验从产前28d开始至产后56d结束,产后各组奶牛均饲喂标准泌乳日粮。采用内对照RT-PCR方法,检测了干乳期摄入不同能量的围产期奶牛肝脏活体组织载脂蛋白B100(apoB100)mRNA丰度。结果表明,apoB100mRNA相对表达量,产前至产后、组均呈先升高后降低的趋势,组产后apoB100mRNA丰度降低了61.45%,组呈逐渐降低的趋势,各组均在产后28d达最低值(组,P<0.05;、组,P<0.01)。产前14d至产后1d,apoB100mRNA相对表达量组高于组,组高于组,组间差异极显著(P<0.01);产后28d,组高于、组(P<0.05)。由此可见,围产期奶牛能量摄入水平对肝脏载脂蛋白B100mRNA丰度有显著影响。

    2006年03期 320-322+325页 [查看摘要][在线阅读][下载 200K]
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  • 利多卡因、布吡卡因行犬硬膜外阻滞时的药代动力学

    刘德义;侯加法;张皎;付小伟;

    为研究利多卡因(lidocaine)和布吡卡因(bupivacaine)行硬膜外阻滞时的药代动力学特征,将16只健康犬随机分成2组(n=8),硬膜外阻滞时按体质量分别注入2%利多卡因6mg/kg和0.5%布吡卡因2mg/kg,在注药后的3、5、8、10、15、20、30、40、50、60、75、90、120、150、180min分别采取股动脉血,用气相色谱法测定血药浓度,比较2组药代动力学指标。结果表明,利多卡因和布吡卡因的药-时曲线均符合一室开放模型,t1/2ka分别为(3.55±0.73)min和(7.76±0.38)min,tpeak分别为(18.8±2.2)min和(35.6±1.5)min,Cmax分别为(4.67±0.37)mg/L和(1.38±0.08)mg/L,AUC分别为(739±73)μg.mL-1.min和(366±45)μg.mL-1.min,CL分别为(12.2±4.6)mL/min和(5.5±0.67)mL/min。

    2006年03期 323-325页 [查看摘要][在线阅读][下载 104K]
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  • 不同耐药水平大肠杆菌acrA和marA基因转录水平的比较

    柳巨雄;吉淑娟;杨斌;张海旺;王玮;胡仲明;曾凡勤;邓旭明;韩春田;

    为阐明大肠杆菌耐药菌株药物敏感性变化与acrA和marA的mRNA水平之间的关系,用定量RT-PCR方法比较了多重耐药菌株、单药耐药菌株以及质控株ATCC25922的acrA和marA的mRNA水平。结果,acrAmRNA水平,多重耐药菌株SEMR是单药耐药菌株SEICI、SEICH和质控株ATCC25922的16倍;marAmRNA水平,SEMR是SEICH的4倍、SEICI和ATCC25922的8倍;SEICI和SEICH的acrAmRNA、marAmRNA水平与ATCC25922的无明显差异;同一菌株acrAmRNA和marAmRNA水平的变化保持了较为稳定的一致性。结论大肠杆菌多重耐药菌株的acrAmRNA和marAmRNA水平与其耐药水平存在相关性。

    2006年03期 326-328+332页 [查看摘要][在线阅读][下载 271K]
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  • 膨化与加酶玉米对断奶仔猪血液指标及胰腺和肠道淀粉酶活性的影响

    王潇;何瑞国;

    选择96头断奶仔猪,随机分为4组,每组6个重复,每个重复4头仔猪,分别饲喂普通玉米、膨化玉米、普通玉米加酶及膨化玉米加酶为主要能量原料的饲料,研究了膨化与加酶玉米对断奶仔猪血液指标以及胰腺组织和小肠内容物淀粉酶活性的影响。结果表明,膨化和加酶处理玉米以及二者互作对断奶仔猪血清葡萄糖和尿素氮浓度均无显著影响。膨化和加酶处理均可显著提高仔猪断奶14d时十二指肠和空肠内容物的淀粉酶活力,对断奶28d时胰腺和小肠各段内容物淀粉酶活性均无影响;在整个试验期,未见到膨化和加酶处理的互作。

    2006年03期 329-332页 [查看摘要][在线阅读][下载 137K]
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  • 纳米载铜蒙脱石对肉鸡生长、肠黏膜形态和消化酶活性的影响

    马玉龙;许梓荣;

    取1日龄AA商品代混合雏鸡240只,随机分为对照组、CMN-组和CMN-组,分别饲喂添加0g/kg、1g/kg和2g/kg纳米载铜蒙脱石(CMN)的玉米-豆粕型日粮42d。笼养,24h光照,自由采食和饮水。结果表明,CMN-和CMN-组肉鸡的体增重和饲料利用效率显著高于对照组,但CMN-组和CMN-组之间无差异显著性。小肠黏膜绒毛高度和隐窝深度微测结果显示,CMN-和CMN-组小肠黏膜形态要明显优于对照组。此外,日粮中添加1~2g/kg的CMN,肉鸡小肠黏膜麦芽糖酶、氨基肽酶N和碱性磷酸酶的活性明显升高,小肠内容物消化酶也有升高的趋势。由此可见,CMN能改善小肠黏膜形态,提高肠黏膜和内容物中消化酶的活性,进而促进饲料养分的消化与吸收,有益于肉鸡生长和饲料效率的改善。

    2006年03期 333-336+346页 [查看摘要][在线阅读][下载 164K]
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  • 羊睾丸组织在小鼠皮下异种移植

    许迎科;张才乔;曾卫东;刘建新;

    将幼年羊的睾丸组织块移植到小鼠背部皮下,同时用环孢素A(CsA)抑制受体小鼠的免疫功能,在不同时间阶段观察了移植的睾丸组织的存活和发育状况。结果表明,添加CsA组与不添加组的移植试验结果无显著差异;移植入的羊睾丸组织块可在受体动物中存活,体积明显增大,但不能分化以实现精子发生。经组织块培养试验发现,移植3个月后的羊睾丸组织仍有存活的精原细胞,说明受体小鼠皮下环境能长期支持羊睾丸组织块的存活。

    2006年03期 337-339页 [查看摘要][在线阅读][下载 316K]
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  • 莱芜黑山羊发情周期中FSH、LH、E_2和P的分泌规律

    侯衍猛;曹洪防;徐云华;钟为;王树迎;

    莱芜黑山羊在发情期和间情期,血浆内的卵泡刺激素(FSH)和黄体生成素(LH)均呈脉冲式分泌,雌激素(E2)和孕酮(P)为波动式分泌。发情期FSH的脉冲周期较间情期长,两者之间显著差异(P<0.05)。发情期LH的脉冲周期短于间情期,两者之间差异不显著(P>0.05)。在整个发情周期中,FSH和LH均先后出现4个分泌峰,FSH和LH的第1个分泌峰分别出现在第7天和第5天,其余3个分泌峰均同时出现(分别为第10、15和20天)。E2和FSH、LH均在发情周期的第20天达最高峰。P在间情期一直维持在一个较高水平。

    2006年03期 340-343页 [查看摘要][在线阅读][下载 115K]
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  • 寡糖对动物免疫功能的作用

    宾石玉;周安国;程培文;

    2006年03期 344-346页 [查看摘要][在线阅读][下载 90K]
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