• 重组N蛋白抗原检测PRRSV抗体的ELISA研制——Ⅲ.ELISA试剂盒保存条件

    吴延功;徐天刚;王志亮;张喜悦;王君玮;宋翠平;刘佩兰;徐培莲;宋芳;

    对应用重组N蛋白抗原检测猪繁殖与呼吸综合征病毒(PRRSV)抗体的EL ISA诊断方法的主要成分(抗原包被板、酶标二抗、阳性血清、阴性血清)及组装成的试剂盒的保存条件进行了摸索。分别用5种方法对抗原包被板处理,结果表明用真空包装机抽真空后充入氮气法处理效果最好;酶标二抗在酶标抗体保存液中保存,能很好地保持EL ISA测定结果的稳定性。对其他试剂盒组成成分的保存期分别测定后,组装成试剂盒,测定试剂盒的保存期为12个月。

    2006年04期 347-349页 [查看摘要][在线阅读][下载 84K]
    [下载次数:390 ] |[网刊下载次数:0 ] |[引用频次:13 ] |[阅读次数:497 ]
  • 寡核苷酸探针原位检测石蜡切片中PRRSV核酸

    李雪梅;程安春;汪铭书;刘伍梅;张平英;豆文波;陈希文;

    根据G enB ank收录的美洲型猪繁殖与呼吸综合征病毒(PRRSV)ATCC VR-2332株ORF 6和ORF 7基因序列,用O ligo软件设计并合成大小为37 bp的寡核苷酸探针,经生物素标记后,成功建立了原位检测石蜡组织切片中PRRSV核酸的方法。该探针能检测到56 pg PRRSV核酸的RT-PCR产物DNA,能特异检测出PRRSV核酸及其PCR产物,而对猪瘟病毒(HCV)、猪细小病毒(PPV)、猪伪狂犬病病毒(PRV)、猪乙脑病毒(JEV)的核酸呈阴性反应。应用该方法检测PRRSV SC-1株人工感染的28日龄仔猪,在感染后7 d即可在肺脏、肾脏、扁桃体、胸腺、肺门淋巴结、十二指肠和大脑检测到PRRSV核酸。该法可用于仔猪PRRSV感染的诊断和组织中核酸的定位及分布研究,也可用于甲醛固定组织的回顾性诊断。

    2006年04期 350-353页 [查看摘要][在线阅读][下载 557K]
    [下载次数:174 ] |[网刊下载次数:0 ] |[引用频次:13 ] |[阅读次数:376 ]
  • 特异性中和抗体终止猪体内猪繁殖与呼吸综合征病毒(PRRSV)复制

    夏平安;崔保安;张红英;梁宏德;杨霞;陈丽颖;

    根据猪繁殖与呼吸综合征病毒(PRRSV)美洲型标准株(VR-2332)的ORF 6及ORF 7部分保守序列,设计合成1对特异引物,通过优化RT-PCR反应条件,建立了从血清中检测PRRSV RNA的RT-PCR诊断方法。60日龄仔猪经鼻腔接种1 mL 105.6TC ID50/mL PRRSV强毒液,7 d后肌肉注射中和效价为1∶64的特异性高免血清,每隔1周利用RT-PCR检测猪体内PRRSV RNA,5周内PRRSV RNA检测均为阴性,表明高滴度特异性中和抗体完全终止了PRRSV感染猪体内的病毒复制。

    2006年04期 354-356页 [查看摘要][在线阅读][下载 151K]
    [下载次数:273 ] |[网刊下载次数:0 ] |[引用频次:18 ] |[阅读次数:437 ]
  • 机体抗病毒免疫触发机制研究获新发现

    2006年04期 356页 [查看摘要][在线阅读][下载 32K]
    [下载次数:65 ] |[网刊下载次数:0 ] |[引用频次:0 ] |[阅读次数:240 ]
  • 猪Ⅱ型圆环病毒(PCV2)Henan株的分离与全基因组序列分析

    刘新文;曹胜波;郭东春;姚清侠;陈焕春;

    用PCR方法从河南某猪场送检的1头疑似断奶仔猪多系统衰竭综合征病猪的腹股沟淋巴结中检测到了猪Ⅱ型圆环病毒(porc ine c ircov irus type 2,PCV 2)核酸。将该病料研磨、过滤除菌后接种无PCV 1和PCV 2污染的PK-15细胞,盲传12代后,用PCR方法仍然能够在接种细胞中检测到PCV 2核酸。从接种细胞中收获病毒,经超速离心纯化后电镜负染观察,可见直径约17 nm、呈二十面体对称结构的病毒粒子,表明从发病猪中分离到了PCV 2,将该毒株命名为PCV 2 H enan株。序列分析表明:该株病毒全基因组长1 767 bp,包含11个读码框,与PCV 1同源性为76.2%~77.3%,与其他PCV 2株的同源性为95.5%~99.6%。

    2006年04期 357-359页 [查看摘要][在线阅读][下载 232K]
    [下载次数:319 ] |[网刊下载次数:0 ] |[引用频次:23 ] |[阅读次数:436 ]
  • 家蚕蛹表达对虾白斑综合征病毒囊膜蛋白Vp28和Vp19的免疫原性

    魏克强;许梓荣;

    以重组杆状病毒HyNPV-V p28和HyNPV-V p19感染的家蚕蛹研制成白斑综合征病毒(W SSV)囊膜蛋白rV p28和rV p19亚单位疫苗,并对克氏原螯虾持续口服免疫75 d,观察其对W SSV的抗病保护能力。免疫35 d后进行口服攻毒,rV p28、rV p28+rV p19疫苗组的累积死亡率与对照组比较差异显著(P<0.05),免疫保护率(RPS)均达59.26%;注射攻毒后,rV p28疫苗组的累积死亡率比阳性对照组降低40%。第2次口服攻毒,rV p28、rV p28+rV p19疫苗组呈现显著的保护作用,RPS分别达到63.16%、68.42%;第2次注射攻毒,各疫苗组的累积死亡率比对照组降低30%。对免疫组存活虾的胃、肠和肝胰腺组织进行病毒的原位杂交检测均呈阴性反应,而对照组死亡虾的组织都呈阳性反应。结果表明,家蚕蛹表达的病毒囊膜蛋白具有较好的免疫原性,rV p28或者与rV p19合并口服免疫能诱导螯虾产生显著的免疫保护作用。

    2006年04期 360-362页 [查看摘要][在线阅读][下载 411K]
    [下载次数:126 ] |[网刊下载次数:0 ] |[引用频次:9 ] |[阅读次数:329 ]
  • REV和ALV-J共感染鸡病毒血症及抗体反应的相互影响

    孟珊珊;崔治中;孙淑红;

    为了研究禽网状内皮增生病病毒(REV)、禽J亚群白血病病毒(ALV-J)共感染时对彼此病毒血症及抗体反应的影响,2日龄SPF鸡分别接种REV、ALV-J或同时2种病毒造成共感染,对各感染组7周内的病毒血症及抗体反应进行动态检测。相对于单一感染,共感染时,2种病毒的病毒血症水平动态均无明显变化。在单独感染ALV-J后5周有30%(5/16)的鸡产生抗体,而有REV共感染时,没有鸡产生针对ALV-J的抗体(0/16),表明REV感染可明显抑制鸡体对ALV-J抗体的反应,而REV与ALV-J共感染对REV抗体反应无明显影响。

    2006年04期 363-366页 [查看摘要][在线阅读][下载 136K]
    [下载次数:298 ] |[网刊下载次数:0 ] |[引用频次:61 ] |[阅读次数:397 ]
  • 禽脑脊髓炎病毒结构蛋白VP3基因真核表达载体的构建及其免疫

    徐建生;唐波;成大荣;曹军;吕玲;周晓昕;

    根据已发表的禽脑脊髓炎病毒(AEV)1 143株结构蛋白VP 3基因的序列,设计1对特异性引物,经PCR从原核表达载体pET-VP 3中扩增出VP 3基因片段,克隆入T载体经测序证明所扩增的序列正确。从T载体切下目的片段,定向克隆入pcDNA 3.1(+)载体,转化大肠杆菌DH 5α,鉴定后大量提取质粒,转染CO S-1细胞,用间接免疫荧光检测到目的基因的表达。将重组载体对BALB/c小鼠进行免疫,结果2次免疫后就检测到特异性抗体,表明该载体在动物体内有较高的表达水平,可用于动物体内免疫,为进一步研究AEV的核酸疫苗打下了基础。

    2006年04期 367-368+372页 [查看摘要][在线阅读][下载 214K]
    [下载次数:94 ] |[网刊下载次数:0 ] |[引用频次:6 ] |[阅读次数:407 ]
  • 银染mRNA差异显示法克隆柔嫩艾美耳球虫(Eimeria tenella)抗药性相关基因

    韩红玉;姜连连;赵其平;董辉;陈兆国;林矫矫;黄兵;

    以柔嫩艾美耳球虫(E im eria tenella)敏感株、地克珠利抗药株和马杜拉霉素抗药株孢子化卵囊为材料,用银染mRNA差异显示方法筛选和克隆与球虫抗药性相关的基因。首先提取这3个虫株孢子化卵囊的总RNA为模板,用O ligo(dT)12GG为锚定引物和2个10碱基随机引物组合进行RT-PCR,产物经变性聚丙烯酰胺凝胶电泳后银染。分别切取5条差异条带,进行2次PCR扩增,产物回收后与PGEM-T-easy V ector连接转化。经PCR鉴定正确后,再进行斑点杂交试验、序列分析和同源性比较。结果发现,地克珠利抗药株和马杜拉霉素抗药株分离的差异片段中都有2个cDNA片段(可能为新的基因片段),这为克隆全长cDNA和探索球虫抗药性产生的分子机理奠定了一定的基础。

    2006年04期 369-372页 [查看摘要][在线阅读][下载 364K]
    [下载次数:188 ] |[网刊下载次数:0 ] |[引用频次:21 ] |[阅读次数:352 ]
  • 雏鸡感染毒害艾美耳球虫后的体液免疫

    刘晶;郑世民;胡京友;

    采用SPA菌体花环法、间接EL ISA法和免疫组织化学法检测毒害艾美耳球虫(E.neca trix)感染雏鸡后,其血液免疫球蛋白含量、B细胞和免疫器官抗体生成细胞数量的动态变化。结果发现:①E.neca trix感染雏鸡后10 d血液B细胞数量和IgG、IgM、IgA含量均开始增加,16~18 d达到峰值;②感染雏鸡法氏囊、脾脏等免疫器官的抗体生成细胞数量于7~21 d不同程度增加,14~18 d达最高峰。结果表明,雏鸡体液免疫在抵抗E.neca trix感染中也发挥重要作用。

    2006年04期 373-375页 [查看摘要][在线阅读][下载 100K]
    [下载次数:147 ] |[网刊下载次数:0 ] |[引用频次:25 ] |[阅读次数:351 ]
  • 鹅球虫Eimeria fulva的生活史及其感染引起的组织病理变化观察

    刘梅;戴亚斌;李文良;陶建平;

    12只10日龄雏鹅分别接种7.0×105~1.5×106个孢子化E im eria fu lva卵囊,在接种后24~264 h分期扑杀,对E.fu lva的生活史及其感染引起的组织病理变化进行了动态性观察。在内生性发育过程中,E.fu lva至少有2个世代的裂殖生殖阶段,每个成熟的裂殖体含15个左右的裂殖子。接种后168 h左右,虫体进入配子生殖阶段。感染后7.5 d始有卵囊排出,显露期为2.5 d。25℃下卵囊孢子化时间为60~84 h。E.fu lva可寄生于整个肠道和泄殖腔的绒毛上皮、肠腺和固有膜中,引起上皮坏死、脱落以及肠壁水肿、出血和炎性细胞浸润等。病变以空肠和回肠较为严重。感染鹅严重腹泻,但不会发生死亡。研究结果表明,E.fu lva对雏鹅具有中等程度的致病性。

    2006年04期 376-378页 [查看摘要][在线阅读][下载 498K]
    [下载次数:90 ] |[网刊下载次数:0 ] |[引用频次:2 ] |[阅读次数:315 ]
  • 猪胸膜肺炎放线杆菌PCR诊断方法的建立与应用

    刁有祥;丁家波;姜世金;崔治中;禚宝山;

    根据胸膜肺炎放线杆菌A pxⅣ基因设计1对引物,扩增特异的650 bp核酸片段,建立了应用PCR检测猪胸膜肺炎放线杆菌的方法。特异性试验结果表明,12个血清型的放线杆菌参考菌株均能扩增出650 bp特异性的核酸片段,而大肠杆菌、多杀性巴氏杆菌、猪肺炎支原体、伤寒沙门氏菌和支气管败血性波氏杆菌的扩增结果均为阴性。敏感性试验结果表明,PCR的最低检出限量为500个放线杆菌。利用建立的PCR检测方法对22株从山东省不同地区分离的疑似胸膜肺炎放线杆菌菌株进行检测,结果14株为阳性。对感染猪病变组织的检测结果表明,病变部位不同,胸膜肺炎放线杆菌的检出率不同,其中以扁桃体的检出率最高。

    2006年04期 379-381页 [查看摘要][在线阅读][下载 296K]
    [下载次数:271 ] |[网刊下载次数:0 ] |[引用频次:18 ] |[阅读次数:413 ]
  • 日本利用胚胎干细胞培育出免疫细胞

    2006年04期 381页 [查看摘要][在线阅读][下载 36K]
    [下载次数:43 ] |[网刊下载次数:0 ] |[引用频次:0 ] |[阅读次数:281 ]
  • 禽巴氏杆菌C_(48-1)外膜蛋白H基因与鸡IL-18基因真核共表达载体的构建及表达

    曹素芳;黄青云;韩先干;邓宪方;

    根据鸡IL-18和真核质粒pcDNA 3的序列,设计1对特异性引物,以重组质粒pcDNA 3/IL-18为模板,扩增出具有完整真核表达结构的CM V-cIL-18-BGHpA片段。将此片段非定向插入重组表达质粒pcDNA 3/om pH中,经酶切分析、PCR鉴定及序列测定证实成功构建了共表达禽巴氏杆菌C48-1外膜蛋白H基因和鸡IL-18基因的重组表达质粒。将共表达质粒转染Cos7细胞,经RT-PCR、SDS-PAGE及W estern b lotting检测,证明了外膜蛋白H基因及鸡IL-18基因均获得了瞬时表达,为研究禽巴氏杆菌C48-1外膜蛋白H的免疫原性和鸡IL-18在基因疫苗中的免疫调节作用奠定了基础。

    2006年04期 382-384页 [查看摘要][在线阅读][下载 333K]
    [下载次数:128 ] |[网刊下载次数:0 ] |[引用频次:5 ] |[阅读次数:359 ]
  • 美国研制出禽流感病毒变异检测新方法

    2006年04期 384页 [查看摘要][在线阅读][下载 40K]
    [下载次数:65 ] |[网刊下载次数:0 ] |[引用频次:0 ] |[阅读次数:277 ]
  • 鹅源H5N1亚型禽流感病毒株HA基因的克隆与序列分析

    王伟利;周宇;孟庆锋;刘明;钱爱东;

    本研究对1株鹅源H 5N 1亚型禽流感病毒血凝素(HA)基因进行了扩增、克隆及序列测定。结果表明:所扩增的片段长1 707 bp,包含完整的开放阅读框架,编码568个氨基酸。该毒株裂解位点的氨基酸序列为RRRKKR,具有高致病性的分子特征;该毒株有6个潜在糖基化位点;受体结合位点的氨基酸分别为YW IHELY,其左侧壁氨基酸为SGV SSA,右侧壁为NGQ SGR。该毒株与国内外一些参考毒株的HA基因序列比较,核苷酸同源率为76.8%~98.1%,氨基酸同源率为85.7%~97.4%,属于欧亚种系。

    2006年04期 385-386+389页 [查看摘要][在线阅读][下载 138K]
    [下载次数:117 ] |[网刊下载次数:0 ] |[引用频次:3 ] |[阅读次数:562 ]
  • H5亚型禽流感病毒HA基因在重组杆状病毒中的表达及检测

    费东亮;金宁一;马鸣潇;夏志平;鲁会军;金扩世;

    利用杆状病毒表达系统对H 5亚型禽流感病毒HA基因在sf9细胞中的表达进行了研究。首先将pUCm-T-H 5HA质粒用B amHⅠ及N otⅠ酶切,获得HA基因片段,同时杆状病毒转座载体质粒pF astB acⅠ也用B amHⅠ及N otⅠ酶切,然后用T4DNA连接酶连接,构建了重组质粒pF astB ac-H 5HA。再将该重组质粒转化DH 10 B ac感受态细菌,在体内进行重组,并经三重抗性与蓝白斑筛选,得到杆状病毒重组质粒B acm id-H 5HA。将B acm id-H 5HA转染sf9细胞,获得重组杆状病毒,经SDS-PAGE和W estern b lotting检测表明,HA蛋白在重组杆状病毒中获得表达。

    2006年04期 387-389页 [查看摘要][在线阅读][下载 355K]
    [下载次数:189 ] |[网刊下载次数:0 ] |[引用频次:17 ] |[阅读次数:406 ]
  • 共表达H5亚型AIVHA基因与鸡IL-18基因的重组鸡痘病毒的构建

    王振国;金宁一;马鸣啸;费东亮;金扩世;

    以鸡痘病毒(FPV)疫苗株为载体,将H 5亚型A IV血凝素基因(HA)和鸡白细胞介素18(IL-18)基因分别插入到鸡痘病毒表达载体pUTA-16-L acZ复合启动子(AT I-P 7.5×20)和单一启动子(P 7.5)下游,构建了携带A IV HA基因和鸡IL-18基因的重组鸡痘病毒转移载体质粒pUTAL-H 5HA-IL 18。将H 5亚型A IV HA基因插入到鸡痘病毒表达载体pUTA 2复合启动子(AT I-P 7.5×20)下游构建了携带H 5亚型A IV HA基因的重组鸡痘病毒转移载体质粒pUTA 2-H 5HA。应用脂质体转染法,将重组鸡痘病毒转移载体质粒与282E 4株鸡痘病毒共转染鸡胚成纤维细胞(CEF),在B rdU药物加压下进行3次蚀斑筛选。以不同代次细胞的mRNA为模板,利用H 5亚型A IV HA基因和鸡IL-18基因特异引物进行RT-PCR和蛋白印迹检测,筛选出能共表达H 5亚型A IV HA基因与鸡IL-18基因和单独表达H 5亚型A IVHA基因的重组鸡痘病毒rFPV-H 5HA-IL 18和rFPV-H 5HA,这些重组鸡痘病毒的构建为A IV活载体疫苗的研制奠定了基础。

    2006年04期 390-393页 [查看摘要][在线阅读][下载 694K]
    [下载次数:97 ] |[网刊下载次数:0 ] |[引用频次:4 ] |[阅读次数:351 ]
  • 英国开发出基因检测新技术

    2006年04期 393页 [查看摘要][在线阅读][下载 31K]
    [下载次数:66 ] |[网刊下载次数:0 ] |[引用频次:0 ] |[阅读次数:161 ]
  • 贝氏隐孢子虫不同感染剂量对樱桃谷鸭的致病性

    臧为民;张龙现;宁长申;孙铭飞;邵兆霞;刘红英;王进产;

    为了确定贝氏隐孢子虫对鸭的致病性,本试验分为2×105、4×105、8×105、16×105、32×105、64×105个卵囊剂量组,实验感染2日龄樱桃谷品种雏鸭。从感染鸭的排卵囊情况、临床症状、组织病理学变化、病理形态学变化比较了不同剂量组的致病情况。结果表明,贝氏隐孢子虫主要引起呼吸困难症状,气管炎和法氏囊炎病变。其致病性与剂量有明显的相关性。贝氏隐孢子虫有较强致病性,而且病程较长,但其致死率较低。

    2006年04期 394-396+400页 [查看摘要][在线阅读][下载 803K]
    [下载次数:58 ] |[网刊下载次数:0 ] |[引用频次:6 ] |[阅读次数:476 ]
  • 内毒素对兔红细胞膜磷脂含量的影响及阳离子A对其的拮抗效应

    高斌;高洪;严玉霖;

    利用高效液相色谱法分别测定正常对照组(Ⅰ组)、内毒素组(Ⅱ组)和内毒素+阳离子A拮抗组(Ⅲ组)中兔红细胞膜磷脂酰胆碱(PC)、磷脂酰乙醇胺(PE)、磷脂酰丝氨酸(PS)和磷脂酰肌醇(P I)含量。结果显示,Ⅱ组中除PE在处理后0.5 h没有明显变化外(P>0.05),PC、PE、PS、P I含量在0.5、1、3、5、7 h均低于Ⅰ组(P<0.05,P<0.01);而Ⅲ组中除PS、PE和P I在处理后0.5 h、PC在1 h、P I在3 h没有明显变化外(P>0.05),整个时间段中上述4种磷脂的含量均高于Ⅱ组(P<0.05,P<0.01)。可见,内毒素能使兔红细胞膜磷脂含量降低,而阳离子A在一定程度上具有对内毒素的拮抗作用和对红细胞膜的保护效应。

    2006年04期 397-400页 [查看摘要][在线阅读][下载 122K]
    [下载次数:68 ] |[网刊下载次数:0 ] |[引用频次:2 ] |[阅读次数:327 ]
  • 麻鸭α干扰素基因的克隆与序列分析

    陈斌;程安春;汪铭书;余勇;唐琼;石谦;张东;彭健康;陈海滨;

    根据G enB ank文献,应用O ligo 6.0分析软件设计合成了用于扩增鸭Ⅰ型干扰素(-αIFN)基因的2对引物,以麻鸭肝脏提取的基因组DNA为模板,采用N est-PCR方法扩增获得了约600 bp片段,经T载体克隆和测序分析证实,是麻鸭Ⅰ型干扰素基因(SD IFN-α)。生物信息学分析表明,SD IFN-α的开放阅读框架(ORF)由576个核苷酸所组成,预测蛋白质相对分子质量为21 640,编码191个氨基酸,其中前28个氨基酸可能是信号肽部分,切割位点在28号氨基酸A和29号氨基酸S之间,序列中无内含子。成熟的多肽中含8个半胱氨酸和2个糖基化位点,2个蛋白激酶C磷酸化位点(prote in k inase C phosphory lation s ite)和2个酪蛋白激酶Ⅱ磷酸化位点(case in k inaseⅡphosphory lation s ite)。SD IFN-α与鸭α-IFN基因核苷酸同源性为99.3%,有4个碱基的差异;与北京鸭α-IFN基因的核苷酸同源性为99.1%,氨基酸同源性为98.96%;与鸡-αIFN的核苷酸同源性为71.8%。与鹅、狗、牛、马和人的-αIFN基因的核苷酸同源性分别为96.0%、45.8%、45.5%、44.6%和41.7%。遗传进化分析结果表明,IFN-α的这些同源性与其动物分类地位相一致。

    2006年04期 401-404页 [查看摘要][在线阅读][下载 203K]
    [下载次数:110 ] |[网刊下载次数:0 ] |[引用频次:15 ] |[阅读次数:369 ]
  • 兔脑一氧化氮合酶(NOS)阳性神经元的形态、结构和分布

    尹逊河;邱建华;王树迎;蔡玉梅;刘燕;王传宝;

    应用M ADPH-d酶组织化学技术,对兔脑一氧化氮合酶(NO S)阳性神经元的形态、结构和分布进行了研究。结果显示:①NO S阳性神经元呈蓝色,细胞核不着色,突起染色很清晰;神经元胞体大多呈多角形、梭形,还有一些呈圆形或卵圆形等。②NO S阳性神经元几乎分布于家兔的各个脑区,包括大脑皮质、小脑、丘脑下部、中脑和脑桥。小脑分布最集中,而延髓分布较少。以上结果表明,NO S阳性神经元及其催化产生的一氧化氮(NO)与中枢神经系统的诸多功能有关。

    2006年04期 405-407页 [查看摘要][在线阅读][下载 643K]
    [下载次数:63 ] |[网刊下载次数:0 ] |[引用频次:2 ] |[阅读次数:327 ]
  • 37℃热应激对实验性大肠杆菌病肉鸡肺动脉压和右心功能的影响

    李东红;乔健;王建林;徐彤;王慧煜;利凯;

    160只商品代AA肉仔鸡于29日龄时随机均分为常温对照组、热应激对照组、常温感染组和热应激感染组,研究了37℃热应激对实验性感染大肠杆菌肉鸡肺动脉压和右心功能的影响。结果37℃热应激1~3 d极显著降低(P<0.01)肉鸡感染大肠杆菌引起的肺动脉高压,肺动脉收缩压、舒张压和平均肺动脉压分别下降了34.78%、45.83%、40.48%。热应激3、7 d,感染大肠杆菌肉鸡右心室收缩压显著下降(P<0.05,P<0.01),分别下降了26.60%、28.00%,右心室收缩和舒张压最大变化速率显著下降(P<0.05),分别下降了77.50%、50.77%和75.00%、50.58%。结果表明,37℃热应激可以拮抗肉鸡感染大肠杆菌引起的肺动脉高压,降低感染肉鸡死亡率,但使右心功能下降。

    2006年04期 408-410+414页 [查看摘要][在线阅读][下载 131K]
    [下载次数:73 ] |[网刊下载次数:0 ] |[引用频次:0 ] |[阅读次数:327 ]
  • 半胱胺盐酸盐对仔猪胃黏膜细胞H~+-K~+-ATPase活性和生长抑素表达的影响

    石志敏;杜改梅;陈杰;赵茹茜;

    将分离的仔猪胃粘膜细胞分为4组,在含10%胎牛血清的DM EM高糖培养液中培养24 h后,分别在新鲜的基础培养液中添加0(对照组)、0.001(低水平组)、0.01(中水平组)和0.1(高水平组)g/L的半胱胺盐酸盐,继续培养20 h后收集细胞,测定细胞H+-K+-ATPase活性,同时用相对定量RT-PCR法测定细胞H+-K+-ATPase和生长抑素(SS)mRNA的相对丰度。结果表明:(1)低水平的半胱胺盐酸盐对H+-K+-ATPase的表达和活性没有影响(P>0.05),但中、高水平的半胱胺盐酸盐显著提高了H+-K+-ATPase的表达和活性(P<0.05),其中H+-K+-ATPase mRNA的相对丰度分别提高了36%和44%,H+-K+-ATPase活性分别提高了57%和53%。(2)低水平半胱胺盐酸盐对SS mRNA的表达没有影响(P>0.05),中、高水平的半胱胺盐酸盐显著提高了SS mRNA的相对丰度(P<0.05),提高幅度均为52%。以上结果提示半胱胺盐酸盐可增强体外培养的仔猪胃黏膜细胞H+-K+-ATPase的表达及活性,而这一作用可能由SS所介导。

    2006年04期 411-414页 [查看摘要][在线阅读][下载 390K]
    [下载次数:160 ] |[网刊下载次数:0 ] |[引用频次:8 ] |[阅读次数:379 ]
  • ~3H-TdR掺入法检测鸡不同组织淋巴细胞增殖反应的条件优化

    郭慧君;崔治中;李宏梅;

    为了检测感染免疫抑制病毒后鸡群的细胞免疫变化,以建立的3H-T dR掺入法观察了外周血、脾脏、胸腺、法氏囊中淋巴细胞的增殖反应,对影响该方法的细胞密度、丝裂原浓度(ConA或LPS)、犊牛血清(FCS)浓度等条件进行优化。结果表明,外周血淋巴细胞增殖试验的最佳条件:细胞105~106/mL,ConA 5 m g/L,FCS 10%;脾脏中淋巴细胞最佳条件:细胞5×106/mL,ConA 10 m g/L,FCS 10%;胸腺中淋巴细胞最佳条件:细胞106/mL,ConA 40 m g/L,FCS10%;法氏囊中淋巴细胞最佳条件:细胞5×106/mL,LPS 40 m g/L,FCS 10%。

    2006年04期 415-417页 [查看摘要][在线阅读][下载 340K]
    [下载次数:136 ] |[网刊下载次数:0 ] |[引用频次:6 ] |[阅读次数:314 ]
  • 兔烧伤合并海水浸泡后重要器官的病理变化

    王大鹏;孙笑非;徐华彪;李辉;虞积耀;

    观察兔烧伤合并海水浸泡后,皮肤、心、肝、脾、肺、肾组织病理学变化特点,为兔烧伤合并海水浸泡后的早期救治提供依据。新西兰兔20只,制作烧伤动物模型后,随机分为浸泡组(n=10)和对照组(不经海水浸泡组,n=10)。光镜和电镜下观察兔烧伤合并海水浸泡后,皮肤、心、肝、脾、肺、肾组织病理学变化特点,并用HP IA S-1000病理分析系统对肝细胞进行测量。结果显示,兔烧伤合并海水浸泡后,皮肤、心、肝、脾、肺、肾组织病理学变化明显比对照组严重,肝细胞体积明显小于对照组。兔烧伤合并海水浸泡后重要器官的病理变化有其自身特点,比其单纯烧伤后的病理变化明显加重。

    2006年04期 418-419+423页 [查看摘要][在线阅读][下载 88K]
    [下载次数:61 ] |[网刊下载次数:0 ] |[引用频次:6 ] |[阅读次数:282 ]
  • NO、TNF和IL-2与新型鸭肝炎病毒感染雏鸭肝脑组织损伤的关系

    胡薛英;郑艳华;王德海;谷长勤;苏敬良;佘锐萍;程国富;

    用新型鸭肝炎病毒人工感染9日龄健康樱桃谷雏鸭,对感染后12、24、48、96、168 h和14 d雏鸭血液、肝和脑组织中一氧化氮(NO)含量,血液中肿瘤坏死因子(TNF)和白细胞介素-2(IL-2)含量进行了测定,同时对感染雏鸭的组织病理学变化进行了观察。结果表明,血清中NO含量在接种后48 h开始升高,一直持续到接种后96 h,接种后7 d恢复正常;肝脏组织中NO含量仅在接种后24 h与对照组比较显著升高,在其他时间未表现有差异;脑组织中NO含量在整个试验期间没有变化。血清中的TNF和IL-2含量在接种后24 h均表现升高,接种后96 h降低,其他时间无改变。感染雏鸭的肝组织在接种后24 h表现出血性坏死性肝炎变化,接种后48~96 h呈增生性病变,而接种后各时期脑组织均呈非化脓性脑炎变化。由此表明,新型鸭肝炎病毒感染可导致雏鸭体内NO、TNF和IL-2发生变化,并且与肝组织损伤、疾病的发生发展有关。

    2006年04期 420-423页 [查看摘要][在线阅读][下载 624K]
    [下载次数:240 ] |[网刊下载次数:0 ] |[引用频次:18 ] |[阅读次数:423 ]
  • 上海PMWS并发PRRS自然病例的病理组织学观察

    叶承荣;谭勋;王小龙;

    对上海5例5~13周龄断奶仔猪多器官衰竭综合征(PMW S)并发猪繁殖与呼吸综合征(PRRS)自然病例进行了病理组织学观察。结果:5例病猪均出现坏死性淋巴结炎、间质性肺炎以及不同程度的坏死性脾炎、间质性肾炎和肝炎。2例病猪出现心肌炎,表现为心肌纤维断裂、溶解和心肌间质中淋巴细胞局灶性浸润。2例病猪出现脑炎,在大脑白质区出现神经胶质细胞结节。

    2006年04期 424-426页 [查看摘要][在线阅读][下载 830K]
    [下载次数:114 ] |[网刊下载次数:0 ] |[引用频次:4 ] |[阅读次数:299 ]
  • 铜中毒对雏鸡外周血T-淋巴细胞的影响(英文)

    崔恒敏;杨光;彭西;邓俊良;黎得兵;

    180只1日龄艾维茵肉鸡健雏随机分为3组,分别饲喂对照(每千克日粮含铜11.97 mg)和铜中毒(每千克日粮含铜650 mg,铜中毒组;每千克日粮含铜850 mg,铜中毒组)日粮6周,以流式细胞术和酸性-α-醋酸萘酯酶(ANAE)染色的方法观测外周血T-淋巴细胞的动态变化。2个铜中毒组1~6周龄外周血T-淋巴细胞的ANAE阳性率均显著低于对照组(P<0.05或P<0.01),同时2个铜中毒组间比较也呈显著差异(P<0.05或P<0.01)。与对照组比较,2个铜中毒组2~6周龄CD4+T淋巴细胞数量均显著降低(P<0.05或P<0.01),CD8+T淋巴细胞数量变化不明显(P>0.05),CD4+/CD8+比值降低(P<0.05)。结果表明,铜中毒可抑制T-淋巴细胞的生成,降低其在外周血中的数量。

    2006年04期 427-431页 [查看摘要][在线阅读][下载 270K]
    [下载次数:71 ] |[网刊下载次数:0 ] |[引用频次:14 ] |[阅读次数:471 ]
  • 实验性肉种鸡葡萄球菌关节炎的发病机制——左旋氧氟沙星治疗后鸡血清细胞因子水平的动态变化

    李秀梅;谷长勤;胡薛英;周全;周诗其;程国富;

    5周龄健康艾维茵肉鸡120羽随机均分为空白对照组、药物对照组、感染组和药物治疗组。人工复制鸡葡萄球菌性关节炎的病理模型,并用左旋氧氟沙星治疗,测定血清中IL-1β、IL-2、TNF-α的动态变化。结果表明:整个试验过程中,感染组及感染治疗组血清中IL-1β、IL-2、TNF-α的水平与空白对照组相比,均有不同程度的升高;感染治疗组与感染组比较,血清中IL-1β的含量给药后1、7、14、21、28 d差异显著(P<0.05);血清中IL-2的含量7、14、21、28、35 d差异显著(P<0.05);血清中TNF-α的含量5、7、14、28 d差异显著(P<0.05)。由此认为上述3种细胞因子参与了鸡葡萄球菌关节炎的发生、发展,且IL-1β、TNF-α以损伤为主。

    2006年04期 432-434页 [查看摘要][在线阅读][下载 120K]
    [下载次数:119 ] |[网刊下载次数:0 ] |[引用频次:1 ] |[阅读次数:419 ]
  • 除草剂敌草快所致的大鼠胎儿动脉管收缩与肾上腺皮质激素及其受体的关系

    沈明浩;任大勇;张作杰;李大军;

    研究敌草快所致的大鼠胎儿动脉管收缩与肾上腺皮质激素及其受体的关系。①取妊娠19 d大鼠20只,随机分为4组。试验1组未切除肾上腺,2、3组切除两侧肾上腺。1、3组皮下注射7 m g/kg敌草快,2组和对照组皮下注射等量生理盐水。取出胎儿,冷冻后观察动脉管收缩情况。②在①里取出胎儿后,从各组母体的腹大动脉中采取血液,测定肾上腺皮质激素浓度。③在①里取出胎儿后,切断头部,收集血液,测定肾上腺皮质激素的浓度。④取妊娠19、20、21 d大鼠各20只,随机分成2组。试验组、对照组分别皮下注射40 m g/kg肾上腺皮质激素和等量生理盐水,取出胎儿,冷冻后观察动脉管收缩情况。另用80 m g/kg肾上腺皮质激素,重复上述操作。⑤取妊娠21 d大鼠20只,收集120只胎儿动脉管、大动脉和母体肝脏,W estern b lotting法定量其组织液中蛋白质,并与标准肾上腺皮质激素受体蛋白(97 000)对照比较。另取妊娠19、20、21 d大鼠各20只,收集各自胎儿心脏及心血管系统,通过免疫组织学方法,观察胎儿动脉管内皮中肾上腺皮质激素受体的分布情况。结果表明,敌草快能促进妊娠末期母鼠分泌大量肾上腺皮质激素;注射肾上腺皮质激素的胎儿动脉管内径明显小于对照组,且引起收缩的临界期为胎龄19~20 d;妊娠20、21 d胎儿动脉管内皮细胞中存在肾上腺皮质激素受体。由此可见,敌草快能促进肾上腺皮质激素的释放,肾上腺皮质激素对胎儿动脉管具有收缩作用。

    2006年04期 435-438页 [查看摘要][在线阅读][下载 437K]
    [下载次数:99 ] |[网刊下载次数:0 ] |[引用频次:5 ] |[阅读次数:310 ]
  • 加拿大发现DNA检测新方法

    2006年04期 438页 [查看摘要][在线阅读][下载 37K]
    [下载次数:39 ] |[网刊下载次数:0 ] |[引用频次:0 ] |[阅读次数:196 ]
  • 养殖场绵羊寄生虫病的控制技术

    廖党金;骆佳锐;戴卓建;俄木阿迁;徐文福;赵兴元;涂浥;

    采用粪便寄生虫虫卵检测和虫体鉴定方法调查四川凉山半细毛羊原种场及周围的羊寄生虫,主要有血矛线虫、奥斯特线虫、仰口线虫、夏伯特线虫、食道口线虫、毛首线虫、肺线虫、细颈线虫、片形吸虫、前后盘吸虫。根据凉山州半细毛羊原种场的主要寄生虫发育史、流行病学和中间宿主及该地的气候等制订寄生虫病的定期监测程序,即每年的2、5、8、11月各进行一次监测;根据该场主要寄生虫病疫情、绵羊的抵抗能力等制订进行预防性驱虫的参考标准,即15%羊的片形吸虫虫卵EPG值大于300时或20%羊的线虫虫卵EPG值大于1 000时进行驱虫;再根据“虫净灵”效果,制订驱虫效果考核参考指标,即口服药物后4 d线虫虫卵转阴率95%以上、20 d吸虫虫卵转阴率100%。从而建立起“定期监测、按需驱虫、及时评估”的控制技术,实施2年来的结果表明,该场绵羊的主要寄生虫病即片形吸虫病和线虫病的感染率分别下降了80.51%和27.80%。

    2006年04期 439-441页 [查看摘要][在线阅读][下载 84K]
    [下载次数:226 ] |[网刊下载次数:0 ] |[引用频次:29 ] |[阅读次数:313 ]
  • 促卵泡激素和胰岛素对牛卵泡颗粒细胞长期培养的影响

    高庆华;周虚;王春清;韩春梅;叶云鹏;

    以M cCoy′s5a为基础培养液添加硒、转铁蛋白、雄烯二酮、谷氨酰胺,对牛卵巢上大(直径>8 mm)、中(4 mm<直径<8 mm)、小(直径<4 mm)非闭锁卵泡的颗粒细胞进行无血清培养,研究添加不同浓度的促卵泡激素(FSH)和胰岛素对颗粒细胞增生、分化和激素分泌的影响。结果,FSH能诱导颗粒细胞增生及提高其雌二醇合成能力,颗粒细胞雌二醇的合成能力与生理浓度的FSH存在剂量依赖关系。胰岛素对大、中、小卵泡颗粒细胞增生和雌激素分泌有促进作用。

    2006年04期 442-443+447页 [查看摘要][在线阅读][下载 269K]
    [下载次数:393 ] |[网刊下载次数:0 ] |[引用频次:26 ] |[阅读次数:383 ]
  • 鸡胚胎原始生殖细胞的体外培养

    秦洁;蔡琳琳;李碧春;韩威;周冠月;吴宏;孙思宇;

    旨在对影响鸡胚胎原始生殖细胞(PGC s)体外培养、传代过程的各种影响因素进行探讨。将分离到的19期鸡胚胎生殖腺的PGC s在以鸡胚成纤维细胞(CEF)为饲养层,添加细胞因子的培养体系中进行培养、传代。经冷冻保存的PGC s在添加细胞因子的培养体系中能增殖,并具有分化能力。从细胞形态、集落形态、增殖生长能力、核型检测、碱性磷酸酶测定等方面对培养过程中的鸡胚胎PGC s进行检测。结果表明,采用传至3代的CEF为饲养层,多次离散法进行传代所获得的5代鸡胚胎PGC s不但能有效维持PGC s的未分化状态和正常二倍体核型,也具有其作为多能性胚胎干细胞的一系列特征。

    2006年04期 444-447页 [查看摘要][在线阅读][下载 621K]
    [下载次数:346 ] |[网刊下载次数:0 ] |[引用频次:12 ] |[阅读次数:486 ]
  • 影响昆明小鼠和BALB/c小鼠胚胎干细胞分离、克隆、传代的若干因素

    郭志林;王新庄;王木;张涌;王轶敏;

    对昆明小鼠和BALB/c小鼠2种胚胎的研究表明,2种品系小鼠胚胎均可用作胚胎干细胞(ES)分离建系的材料,两者在ES分离、传代上无显著差异(P>0.05);大鼠心肌细胞条件培养液与添加L IF的ES常规培养液相比,显著提高了小鼠ES细胞F1、F2出现率(P<0.05);采用低浓度消化液使形成ES克隆的比率分别从14%、16%提高到35%、32%,使ES传到第5代的比率分别从1.7%、0提高到5%、7.1%;而采用连续消化法使形成ES克隆的比率从15%、17%提高到40%、50%,使ES传到第5代的比率从0、1%提高到10%、20%;对ES进行伊红染色、核型分析、AKP染色及体外分化能力检测,证实所分离的ES符合小鼠ES的一系列特征。

    2006年04期 448-450页 [查看摘要][在线阅读][下载 95K]
    [下载次数:184 ] |[网刊下载次数:0 ] |[引用频次:18 ] |[阅读次数:387 ]
  • 兔子宫内膜组织的双向电泳

    王水莲;薛立群;刘自逵;

    为了有效地研究胚泡附植的分子机制,本研究建立了一套适合兔子宫内膜蛋白分析的双向电泳技术体系,包括蛋白质含量测定、第1向IEF-PAGE和第2向SDS-PAGE的凝胶配方及电泳参数的选择、电极溶液的选择,并运用该技术体系分析了未孕兔和受孕2、4、6、9 d兔子宫内膜蛋白。结果表明,在给定的时期内,兔子宫内膜蛋白质的含量有变化,但差异不显著;用所建立的双向电泳体系分析子宫内膜蛋白质后发现,双向电泳图谱的重复性好,蛋白质点的分辨率高,共同蛋白质点多,差异蛋白质点少。

    2006年04期 451-453+456页 [查看摘要][在线阅读][下载 384K]
    [下载次数:73 ] |[网刊下载次数:0 ] |[引用频次:1 ] |[阅读次数:269 ]
  • 副猪嗜血杆菌分型方法的研究进展

    张海花;童富淡;朱家新;

    2006年04期 454-456页 [查看摘要][在线阅读][下载 120K]
    [下载次数:443 ] |[网刊下载次数:0 ] |[引用频次:17 ] |[阅读次数:346 ]
  • 猪圆环病毒致病性的分子基础

    刘光清;云涛;倪征;梁华丽;华炯刚;李双茂;杜青云;

    2006年04期 457-459+464页 [查看摘要][在线阅读][下载 155K]
    [下载次数:203 ] |[网刊下载次数:0 ] |[引用频次:4 ] |[阅读次数:348 ]
  • 附红细胞体及附红细胞体病

    陈启军;尹继刚;刘明远;

    2006年04期 460-464页 [查看摘要][在线阅读][下载 178K]
    [下载次数:564 ] |[网刊下载次数:0 ] |[引用频次:79 ] |[阅读次数:370 ]
  • 下载本期数据