• 双基因共表达的“自杀性”DNA疫苗载体的改造及其体外表达特性

    谢京国;方六荣;肖少波;姚林;潘永飞;陈焕春;

    PCR扩增西门利克森林病毒(SFV)亚基因组启动子26S序列及人工合成Linker,将其插入基于SFV复制子的“自杀性”DNA疫苗表达载体pSCA1的多克隆位点,获得含2个26S启动子并能同时驱动双基因共表达的“自杀性”DNA疫苗表达载体pSCA2。为了验证pSCA2的表达能力,PCR扩增绿色荧光蛋白基因EGFP和红色荧光蛋白基因DsRed2,分别插入pSCA2的2个26s启动子下游,获得EGFP和DsRed2双基因共表达的“自杀性”DNA疫苗pSCA2-EGFP/RFP。将pSCA2-EGFP/RFP转染BHK-21细胞,转染后24h,可同时观察到被转染细胞发绿色荧光和红色荧光,证实EGFP和DsRed2均获得表达。

    2006年06期 583-585+590页 [查看摘要][在线阅读][下载 261K]
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  • 蛋鸡中发现J亚群白血病与网状内皮增生症自然混合感染

    成子强;张玲娟;刘杰;刘思当;赵振华;张利;崔治中;

    发病蛋鸡经组织学、免疫组化检测确诊为J亚群白血病与网状内皮增生症混合感染。与人工接种病例不同的是,在肿瘤组织内还发现一种特殊的细胞——淋巴-巨噬细胞;在骨髓和肿瘤组织中检测到部分髓细胞胞浆内有ALV-J抗原表达。从发病情况、各器官病变程度及免疫组化结果来看,2种病原存在明显的相互协同作用,脾可能是网状内皮增生症的原发器官,但其发病的时间可能不如J亚群白血病早。此次在蛋种鸡发现此混合感染提示,病毒在环境选择压及免疫选择压的作用下,其生物特性、致病作用以及宿主范围均可发生改变,应警惕J亚群白血病和网状内皮增生症混合感染在蛋鸡中的大面积暴发。

    2006年06期 586-590页 [查看摘要][在线阅读][下载 832K]
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  • 鸡传染性贫血病毒与其他禽免疫抑制性疾病病毒的混合感染

    蒋玲艳;韦平;李莉萍;阳秀英;韦天超;磨美兰;李义杰;

    应用多重PCR方法对广西主要养鸡地区的514只可疑鸡传染性贫血与其他禽免疫抑制性疾病临床病/死鸡进行了检测。结果显示,鸡传染性贫血病毒(CIAV)与其他禽免疫抑制性疾病病毒的二重或多重感染率达48.05%;CIAV阳性鸡群中,马立克氏病病毒(MDV)、网状内皮增生症病毒(REV)、禽白血病病毒(ALV)的群阳性率和个体阳性率均明显高于CIAV阴性鸡群,表明CIAV的感染与3种肿瘤病病毒的感染具有明显相关性,其中CIAV与MDV的感染具有明显相互促进作用;被调查鸡群中,传染性法氏囊病病毒(IBDV)和禽呼肠孤病毒(ARV)也有一定的感染率。结果表明,商业鸡群中各种免疫抑制性病毒的混合感染很普遍,与鸡群临床上所表现的生长阻滞、疫苗免疫效果不佳、总的发病率和死淘率增加等密切相关。

    2006年06期 591-593页 [查看摘要][在线阅读][下载 143K]
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  • 不同基因型新城疫病毒强毒株对鸡的致病性

    陈立功;万洪全;郝延刚;袁万哲;吴力力;宋红芹;陈露;王宝安;

    就不同基因型新城疫病毒强毒株对鸡的致病性进行了比较。用3种基因型(g、d亚型、型)新城疫病毒强毒株分别人工感染25日龄雏鸡,结果各株病毒接种鸡均100%发病、100%死亡,表现出嗜内脏型新城疫病毒感染引起的典型的新城疫症状和病理变化。免疫组化检测发现,攻毒鸡多种组织器官中能检测到病毒抗原,在能检测到病毒抗原的器官中,病毒抗原主要定位于淋巴细胞、网状细胞、巨噬细胞、肝细胞及各种上皮细胞的胞浆内;新城疫病毒对肠相关淋巴组织的亲嗜性优先于附近的上皮。本试验结果表明,基因g、d亚型、型新城疫病毒强毒株对鸡均具有高度致病性。

    2006年06期 594-596页 [查看摘要][在线阅读][下载 595K]
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  • 免疫鸡群新城疫病毒的分离与分子鉴定

    刘铀;刘艳芬;陈绍红;谢为天;马龙;

    从免疫鸡群中分离到9株新城疫病毒(NDV),其中5株为强毒株,4株为中强毒株。用RT-PCR扩增F基因cDNA片段,并将其分别克隆到pGEM-Teasy载体中。序列分析结果表明,上述分离株F基因长度为1662bp,编码553个氨基酸,其F蛋白的氨基酸序列同源性为96.0%~99.8%;但与常见疫苗株的氨基酸同源性仅为87.6%~92.2%,F蛋白裂解位点序列为112R-R-Q/R-K-R-F-I-G119,均属于基因型NDV。

    2006年06期 597-599页 [查看摘要][在线阅读][下载 151K]
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  • 3株鹅源新城疫病毒的分子特征和遗传发生分析

    焦库华;马晓丹;马建云;刘文博;

    2005年分离的3株鹅源新城疫病毒毒株经毒力(MDT)检测为强毒株,鸡胚平均死亡时间为48~60h。RT-PCR扩增出了融合蛋白(F)基因,测定相应的核苷酸序列并进行遗传发生分析和酶切位点分析。对基因编码的氨基酸序列进行了推导,3个试验毒株的蛋白酶裂解激活位点附近的氨基酸序列均为112R(K)RQKR↓F117,为强毒特征序列。根据绘制的系统进化发生树和F基因上3种限制性内切酶(RE)位点分布,确定了这3个毒株均为基因型。以上证据表明该基因型的新城疫病毒在我国鹅群的流行占据一定优势。

    2006年06期 600-602页 [查看摘要][在线阅读][下载 73K]
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  • 简讯

    2006年06期 602+609+621+625+700页 [查看摘要][在线阅读][下载 134K]
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  • 抗H9亚型禽流感病毒独特型抗体的制备与应用

    李宝全;彭军;牛钟相;姜世金;

    用纯化的鸡抗H9亚型禽流感病毒(AIV)免疫球蛋白G(IgG)作为抗原免疫家兔,制备兔源多克隆抗独特型抗体(Pab2),同时免疫小鼠,应用细胞融合技术建立了分泌抗AIV独特型单克隆抗体(Mab2)的杂交瘤细胞系。经鉴定,2类抗独特型抗体均能竞争性地抑制鸡抗AIVIgG与AIV的结合。保护试验证实,兔源多克隆抗独特型抗体疫苗较单克隆抗独特型抗体疫苗具有更高的保护作用。

    2006年06期 603-605页 [查看摘要][在线阅读][下载 91K]
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  • 鹅源新城疫的生物学特性分析

    张倩;王志亮;单虎;郑东霞;

    对2株鹅源新城疫病毒从形态、致病力、部分F基因序列分析、动物回归试验以及病死鹅的剖检症状等方面与鸡新城疫病毒进行了比较。结果显示,2株鹅源新城疫病毒与鸡新城疫病毒应该属于同种病毒,而不是一种新病毒,只是毒力更强,且能引起鹅发病。

    2006年06期 606-609页 [查看摘要][在线阅读][下载 226K]
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  • 基因型鹅副粘病毒NA-1株全基因组的克隆及特性分析

    徐明;丁壮;毕玉海;李志杰;常爽;黄海楠;宋子运;尹仁福;杜眉;

    将本实验室分离保存的NA-1株鹅副粘病毒(GPMV)经SPF鸡胚增殖,收集鸡胚尿囊液进行病毒纯化,提取病毒基因组RNA。参考GenBank已收录的GPMVZJ1株基因组序列,设计了8对特异性引物,RT-PCR法分别特异性的扩增出病毒各基因片段,并将各目的基因片段回收纯化,克隆PGEM-T载体,转化大肠杆菌DH5α,小提质粒选取阳性克隆酶切鉴定并进行序列测定,对测定结果进行拼接得到全长cDNA序列(GenBank登录号:DQ659677)。NA-1株核苷酸比新城疫病毒(NDV)核苷酸多6个碱基,位于1644~1645nt之间,符合NDV核苷酸“六碱基原则”。序列分析结果表明,GPMVNA-1株与各地代表株核苷酸同源性81.2%~91.3%。同时根据各毒株F基因开放阅读框前389个核苷酸序列绘制出系统发育进化树,结果表明GPMNNA-1株与SF02和QY97病毒株同属于基因型,不同于基因IX型NDV的国家标准株F48E9和基因型的LaSota传统弱毒株。

    2006年06期 610-613+618页 [查看摘要][在线阅读][下载 226K]
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  • 重组N蛋白抗原检测PRRSV抗体ELISA的研究 Ⅳ.与IDEXXELISA试剂盒及Westernblot的比较

    吴延功;徐天刚;王志亮;张喜悦;王君玮;宋翠平;刘佩兰;徐培莲;宋芳;

    利用重组N蛋白抗原建立了检测猪繁殖与呼吸综合征病毒(PRRSV)抗体的ELISA方法并组装成试剂盒,将试制的3批试剂盒分别与IDEXX生产的试剂盒及Western-blot进行了符合率试验。试验结果表明,所研制的试剂盒与Westernblot的符合率达97.67%以上。对460份临床血清分别用自制的试剂盒和IDEXX公司生产的试剂盒进行检测,其中有37份不相符合,用Westernblot对这37份血清进行验证,有35份血清检测结果与自制的试剂盒检测结果一致。由此表明,自行研制的试剂盒,其特异性和敏感性均能满足目前临床上该疫病的流行病学分析或免疫抗体检测。

    2006年06期 614-615页 [查看摘要][在线阅读][下载 71K]
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  • 卵黄抗体被动免疫防治仔猪产肠毒素大肠杆菌性腹泻

    储卫华;高国峰;

    用ETECK88+菌株C83907对120日龄待开产蛋鸡进行免疫,获得高免卵黄抗体粉。选用3日龄和21日龄的杜×长×大三元杂交早期断奶仔猪,人工感染C83907大肠杆菌,口服含抗产肠毒素大肠杆菌抗体的卵黄粉进行被动免疫。结果显示,3日龄仔猪服用抗ETEC卵黄抗体粉后,72h腹泻停止,而服用普通蛋黄粉组却仍然腹泻并且有66.7%的死亡率;服用抗ETEC卵黄抗体粉的21日龄仔猪仅有短暂腹泻现象,存活率100%,试验期间总体质量有所增加,而对照组表现严重腹泻伴有脱水现象,试验期间有部分猪只死亡;临床应用表明,喂以3g和5g抗ETEC卵黄粉组的治愈率与抗生素治疗组相当。研究结果表明,卵黄抗体对早期断奶仔猪有一定的促进生长和防止腹泻的效果。

    2006年06期 616-618页 [查看摘要][在线阅读][下载 143K]
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  • 抗猪肺炎支原体特异性P36蛋白单克隆抗体的制备与鉴定

    胡茂志;焦新安;潘志明;邵国青;刘秀梵;

    表达P36基因的重组菌BL21(6P-1-P36)经诱导表达,超声波裂解后高速离心,分别收集上清和沉淀。可溶性表达产物亲和层析纯化后用于单抗筛选;同时,用GST-P36包涵体抗原腹腔注射免疫BALB/c小鼠(400μg/只)。利用淋巴细胞杂交瘤技术,获得了1株能分泌特异性抗体的杂交瘤细胞株5A7-2。生物学特性鉴定表明,腹水单抗的间接ELISA效价为1∶2.5×106;免疫球蛋白亚类为IgG2a。免疫印迹结果显示,腹水单抗能与GST-P36融合蛋白反应而不与谷胱苷肽转移酶(GST)反应,并且在猪肺炎支原体(Mycop lasma hyopneumoniae,Mhp)蛋白36000位置也有明显的条带,说明5A7-2所分泌的是针对MhpP36蛋白的单抗。P36蛋白是Mhp种特异性蛋白,其单克隆抗体的制备,为Mhp种特异性检测方法的建立奠定了基础。

    2006年06期 619-621页 [查看摘要][在线阅读][下载 152K]
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  • 致病性F18大肠杆菌黏附素受体易感性仔猪的体外鉴定

    吴圣龙;原志伟;鞠慧萍;朱国强;王建业;宋成义;陈国宏;

    在PCR-RFLP方法分析了不同猪个体FUT1基因M307位点等位基因多态性的基础上,制备M307位点为GG和AG2种类型仔猪小肠上皮细胞分别与表达F18ab菌毛的野生型大肠杆菌、表达F18ac菌毛含fed操纵子全基因的重组大肠杆菌及表面分泌表达F18ab菌毛FedF亚单位的重组大肠杆菌进行体外黏附和黏附抑制试验。结果表明,上述野生菌或重组菌对GG和AG2种基因型的30~35日龄断奶仔猪小肠上皮细胞均具有较好的黏附能力。上述3种大肠杆菌分别与抗F18ab纯菌毛血清、F18ac纯菌毛血清及抗F18ab菌毛FedF亚单位单因子血清作用后,则丢失黏附小肠上皮细胞能力。而GG基因型的3日龄仔猪小肠上皮细胞不能很好的黏附上述野生菌或重组菌,但是可以很好地黏附表达987P菌毛的大肠杆菌。

    2006年06期 622-625页 [查看摘要][在线阅读][下载 491K]
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  • 牛-干扰素在昆虫细胞中的高效表达

    许金俊;秦爱建;金文杰;刘岳龙;

    应用RT-PCR技术从经植物血凝素(PHA)刺激诱导的奶牛脾脏淋巴细胞总RNA中扩增出牛-γ干扰素基因(bovine interferon-γ,BovIFN-γ)cDNA,并克隆到pGEM-T easy载体中,经过限制性酶切分析和测序证实,所克隆到的基因编码区序列与已报道的序列完全一致。将含信号肽的BoIFN-γ基因整个编码区cDNA亚克隆到杆状病毒转座载体pFastBac中,构建了转移载体pFastBac-BoIFN-γ,转座到宿主菌DH10Bac中,在含庆大霉素、四环素、卡那霉素、IPTG和X-gal的KGTIX LB平板上筛选白色菌落,提取DNA获得重组穿梭载体Bacmid-BoIFN-γ质粒,与脂质体共转染Sf9细胞,产生有感染力的重组杆状病毒reBac-BoIFN-γ。重组病毒经过传代扩增感染Sf9细胞,通过IFA试验、Western-blot和抗病毒活性测定证实,BoIFN-γ基因在感染的昆虫细胞和上清中得到了表达,上清中活性可达2.651×105U/mL。表达条件优化结果表明,不同MOI对rBoIFN-γ的表达产量影响不大,上清中干扰素活性在感染后5d达到高峰。

    2006年06期 626-630页 [查看摘要][在线阅读][下载 343K]
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  • 青海血蜱cDNA表达文库的免疫学筛选和阳性克隆的鉴定

    高金亮;罗建勋;樊瑞泉;魏永红;李文卉;任巧云;关贵全;殷宏;

    为获得抗青海血蜱免疫原基因,用兔抗青海血蜱差异蛋白阳性血清和兔抗青海血蜱唾液蛋白阳性血清对青海血蜱cDNA表达文库进行了免疫学筛选,经过初筛和复筛共获得58个阳性信号。用所得阳性噬菌体转染宿主菌BM25.8使之自动亚克隆为重组质粒,用此亚克隆质粒转化宿主菌JM109并从中提取重组质粒进行PCR、酶切和测序分析。序列分析表明:共获得新cDNA序列21个。将前5个cDNA登录GenBank/ncbi,获取登录号。所获阳性克隆为青海血蜱保护性抗原的筛选奠定了基础。

    2006年06期 631-633页 [查看摘要][在线阅读][下载 224K]
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  • 我国部分城乡犬狂犬病中和抗体水平调查

    张菲;刘晔;张守峰;曹亮;骆求辉;冯卫权;文武金;凌凤俊;李瑞达;石兴亚;扈荣良;

    以国际兽疫局(OIE)推荐的荧光抗体病毒中和试验(FAVN)对随机采自广东、河北、北京等地区的573份犬血清进行了狂犬病病毒中和抗体效价的测定,以确定犬群中狂犬病的免疫状况。结果显示,在不同地区或不同城市的动物防疫区域中,犬体内狂犬病病毒中和抗体平均水平存在着明显的差异,城市犬的中和抗体水平较高,有的中和抗体保护水平(0.5IU/mL)阳性率高达100%,少数则达不到保护水平,不同防疫区域狂犬病中和抗体水平为(0.08±0.03)~(4.39±1.45)IU/mL,平均保护水平阳性率为46.3%;乡村看家犬病毒中和抗体水平普遍较低,大部分犬体内无中和抗体,只有个别犬体内存在水平较低的中和抗体,平均保护水平阳性率为1.8%。

    2006年06期 634-636页 [查看摘要][在线阅读][下载 82K]
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  • 梅花鹿朊蛋白基因(PRNP)的克隆及序列分析

    孟丽平;赵德明;杨建民;徐广贤;马李颖;

    根据GenBank中鹿朊蛋白基因序列设计特异性扩增引物,采用PCR方法从中国梅花鹿基因组中扩增得到梅花鹿的朊蛋白基因,采用PCR产物直接测序,并将其克隆到pGEM-TEasy载体中测序进行进一步确认,通过分析表明所克隆的梅花鹿朊蛋白基因的ORF基因片段包含771bp,编码256个氨基酸的前体蛋白,相对分子质量约为28200。与已报道的其他品种鹿朊蛋白基因序列进行对比分析,核苷酸及氨基酸序列的同源性均在98%以上。本试验为进一步研究中国梅花鹿朊蛋白的多态性提供了数据。

    2006年06期 637-638+641页 [查看摘要][在线阅读][下载 148K]
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  • 抗大田软海绵酸单克隆抗体的制备、纯化及其特性

    于光;卢士英;李岩松;周玉;任洪林;谭建华;柳增善;

    用大田软海绵酸与人IgG的偶联物OA-IgG作为免疫原,免疫BALB/c小鼠,通过常规细胞融合技术将免疫脾细胞与小鼠骨髓瘤细胞系SP2/0融合,用间接竞争ELISA方法对融合细胞所分泌抗体的特异性进行筛选。经过3次克隆,获得1株可稳定分泌抗OA的杂交瘤细胞株3C5,其染色体数为50±2,所分泌抗体属IgG1亚类,相对分子质量是159390,抗体亲和常数为9.8×108L/mol,滴度达2.56×106。

    2006年06期 639-641页 [查看摘要][在线阅读][下载 154K]
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  • 家蝇早期胚胎转基因前后的表达差异

    江禹;万忠海;江露;王莉莉;王吉贵;涂长春;刘维全;

    以转基因处理的家蝇卵为对象,采用银染差异显示技术(DD-PCR),对携带绿色荧光蛋白(GFP)和抗菌肽(ABP)融合基因的真核表达质粒以电转移的方式进入家蝇受精卵后,卵内基因的表达情况做了初步研究。结果表明,转基因处理的蝇卵与未经转基因处理的蝇卵在分化开始之前基因的表达存在差异;以T11MA为锚定引物,在转基因处理组发现6条差异表达的片段,成功地克隆得到其中3条。序列分析证实其中2条为新基因片段,另1条为家蝇细胞色素C的编码片段;斑点杂交证实了新基因片段仅在转基因处理组得到表达,而细胞色素C在2组中都有表达。获得的新基因片段登录于GenBank,登录号分别为AY030235和AY030236。本试验结果为解释外源基因在宿主细胞内的去向,发现宿主内部对目的基因整合和分解的相关因素提供了可能,并为系统地开展发育相关研究打下了基础。

    2006年06期 642-645页 [查看摘要][在线阅读][下载 244K]
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  • 中国林蛙皮肤抗菌肽基因的cDNA克隆

    乔红伟;韩俊友;赵瑞利;郑伟;韩艳;韩文瑜;

    抗菌蛋白蛙皮抗菌肽,是两栖类动物中存在的天然免疫物质,在蛙类中仍然保持着一定的活性。我们用提取中国林蛙皮肤总RNA,逆转录合成cDNA,PCR扩增得到DNA片段,并与GenBank上登陆的其他蛙类的皮肤抗菌肽序列进行比较,发现此序列是一个新的蛙皮肤抗菌肽序列。PCR产物与pMD18-T连接,得到阳性重组体pMD18-RTCD,将阳性重组体进行测序,分析蛙皮素的氨基酸序列,显示它属于蛙皮抗菌肽家族。此外,中国林蛙抗菌肽氨基酸序列包含C-末端残基,同时具有两栖类动物抗菌肽的特征。这些信息对将来研究两栖类动物的天然免疫的分子机制具有重要作用,为应用基因工程技术对我国林蛙抗菌肽基因进行克隆表达奠定了基础。

    2006年06期 646-648页 [查看摘要][在线阅读][下载 181K]
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  • 东北白鹅和籽鹅血液生化指标

    康波;杨焕民;刘胜军;周瑞进;李士泽;姜冬梅;

    为建立东北白鹅和籽鹅血液生化指标的正常参考值及其正常参考范围,探讨东北白鹅和籽鹅的各项血液生化指标之间的差异显著性,随机抽取(12±0.5)月龄健康、体质量为(4.2±0.2)kg的东北白鹅母鹅和(3.5±0.2)kg的籽鹅母鹅各65只,空腹12h后翅下静脉采血,离心分离血清,应用半自动生化分析仪及试剂盒对血清22项生化指标进行检测分析。结果表明:东北白鹅和籽鹅丙氨酸氨基转移酶(ALT/GPT)、天门冬氨酸氨基转移酶(AST/GOT)、谷氨酸酰基转移酶(GT)、胆碱脂酶(CHE)、乳酸脱氢酶(LDH-L)、葡萄糖(Glu)、高密度脂蛋白胆固醇(HDL-C)、总蛋白(TP)、白蛋白(Alb)、钙(Ca)、肌酐(Cre)、镁(Mg)等血清生化指标之间差异达到极显著水平(P<0.01);碱性磷酸酶(ALP)、总胆固醇(CHO)、无机磷(P)之间差异达到显著水平(P<0.05);a-羟丁酸脱氢酶(a-HBDH)、尿素氮(BuN)、甘油三脂(TG)、尿酸(UA)、总胆红素(T.Bili)、直接胆红素(D.Bili)、氯(Cl)之间无显著性差异(P>0.05)。本试验建立的东北白鹅和籽鹅血液生化指标的正常参考值及其正常参考范围,为今后鹅的相关研究提供了基础的科学数据和基本的理论依据。

    2006年06期 649-652页 [查看摘要][在线阅读][下载 130K]
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  • 转化型人参皂甙的生物活性:体外实验研究

    许小琴;金文杰;李金贵;付本懂;王鲁;楮秀玲;郭志廷;韦旭斌;

    将人参总皂甙经化学转化成转化型人参皂甙后分离得8个组分,在体外细胞上进行了转化型人参皂甙8个组分对CEF细胞毒性、生长活性、诱导肿瘤细胞凋亡、诱导单克隆抗体生成以及抗IBDV、AIV(H9)、NDV、MDV病毒的活性研究。结果发现,转化型人参皂甙各组分的细胞毒性作用在23.26~39.53mg/L之间;对鸡胚成纤维细胞(CEF)的生长和活性呈促进作用的工作浓度在10~20mg/L之间;转化型人参皂甙8号组分12.5mg/L诱导48h后,肝癌细胞7402株有60%的细胞凋亡,大鼠脑胶质瘤细胞C6株有35%的细胞凋亡;3、4、7号组分12.5mg/L和6.25mg/L对单克隆抗体6E6株杂交瘤细胞和单克隆抗体10B11株杂交瘤细胞的单抗生成具有明显促进作用,其HI效价为26~7与对照组的25相比有明显差异,IFA效价为104~5,与对照组的102相比有极显著差异;4、7、8号组分15mg/L阻断IBDV、AIV(H9)、NDV感染CEF细胞的作用都达到了51.1%以上,抑制IBDV、AIV(H9)、NDV在CEF上增殖的作用都在30%以上;6、7号组分12.5mg/L在阻断感染、抑制增殖、直接杀灭3种方式的抗MDV-RB1B强毒株在SPF鸡CEF细胞上的空斑减数率都达了到ACV抗MDV空斑减数率的80%,其中4、6号组分对MDV-RB1B株的直接杀灭作用与ACV的杀灭作用相等。表明人参总皂甙经化学处理转变成转化型人参皂甙,可明显改变其生物学活性。

    2006年06期 653-656页 [查看摘要][在线阅读][下载 165K]
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  • 青霉素单克隆抗体的制备及鉴定

    吴建祥;周雪平;

    用与细胞色素C交联的氨苄青霉素(Amp-Cy)免疫的BALB/c鼠脾细胞与SP2/0鼠骨髓瘤细胞融合,经筛选、克隆,获得3株能稳定传代并分泌抗青霉素的单克隆抗体的杂交瘤细胞(1C1,2C11K和2G7),并分别制备它们的单克隆抗体腹水。3株单克隆抗体腹水的间接ELISA效价在10-6以上,1C1和2C11的抗体类型及亚类均为IgG1,而2G7为IgM,3株单克隆抗体的轻链均为κ链。3株单克隆抗体(1C1、2C11、2G7)的青霉素50%抑制质量浓度分别为45.3、60.1、80.0μg/L。间接竞争酶联免疫吸附试验(CI-ELISA)显示,3株单克隆抗体对青霉素类和先锋霉素类抗生素有特异性反应,而对链霉素、卡那霉素、氯霉素、土霉素、四环素、新霉素其他抗生素没有交叉反应,可用于青霉素类抗生素残留的检测。

    2006年06期 657-659页 [查看摘要][在线阅读][下载 95K]
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  • 家禽动眼神经核簇的细胞构筑及其5-HT神经元的分布

    黄丽波;袁学军;李冬野;刘济五;

    用Nissi染色法和免疫组化SP法研究鸡、北京鸭、鸽子的动眼神经核簇细胞构筑及5-羟色胺神经元分布情况,结果表明:北京鸭的动眼神经核簇系由动眼神经核、E-W核和前背外侧核3个部分所构成,而在鸡和家鸽仅包括动眼神经核和E-W核。他们的核团形态和细胞构筑基本相同。观察到5-HT阳性神经元在鸡、鸭和鸽子动眼神经核及鸡E-W核内的分布,而在鸭和鸽子的E-W核和鸭的前背外侧核内却未见分布。动眼神经核5-HT阳性神经元的数量较多,在各个亚核的分布均匀,胞体着色较深。

    2006年06期 660-661+672页 [查看摘要][在线阅读][下载 422K]
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  • 番鸭呼肠孤病毒病雏番鸭实质器官的超微结构

    陈少莺;胡奇林;程晓霞;陈仕龙;江斌;林天龙;林锋强;朱小丽;程由铨;

    对人工感染番鸭呼肠孤病毒发病雏番鸭的心、肝、肺、肾、脾脏、胸腺、法氏囊等7种实质器官的超微结构进行了观察。电镜下发现:心、肝、肺、肾等实质器官出现不同程度的细胞变性、水肿以及局灶性溶解坏死;各器官血管内皮细胞脂滴增多、水肿以至坏死脱落,通透性增加;浆细胞、淋巴细胞和吞噬细胞呈散在或灶性浸润于坏死区和实质细胞间。免疫器官脾脏、胸腺和法氏囊中的部分淋巴细胞、浆细胞坏死和不同程度凋亡,且细胞溶解坏死形成大小不一的坏死灶并被大量增生的吞噬细胞所吞噬,淋巴细胞数量明显减少。上述结果提示,番鸭呼肠孤病毒能导致番鸭免疫抑制。

    2006年06期 662-664页 [查看摘要][在线阅读][下载 1064K]
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  • 洛克沙砷对养猪场周围环境的污染

    李银生;曾振灵;陈杖榴;邱江平;

    选择2个有代表性的长期使用洛克沙砷的养猪场,测定其周围土壤及蚯蚓中的砷含量和蚯蚓体内几种酶的活性,并与实验室模拟试验进行了比较。结果表明,长期使用洛克沙砷的养猪场周围的土壤及用饲喂过洛克沙砷的猪粪作肥料的土壤都存在砷污染。生活在其中的蚯蚓会造成砷的富集及酶活性的改变。蚯蚓可以作为检测土壤洛克沙砷的指示生物,同时证实模拟试验的结果对真实环境具有重要的参考价值。

    2006年06期 665-668页 [查看摘要][在线阅读][下载 102K]
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  • 利用转座子标签法构建埃氏巨型球菌乙酸生成关键酶基因缺失工程菌

    杨文艳;刘国文;崔晓霞;逄晓阳;冯海华;王哲;

    应用转座子标签法,通过转座子供体菌E.coliS17-1/pZJ25∷Tn5对受体菌埃氏巨型球菌进行转座子诱变,采用含卡那霉素和氟乙酸钠的选择性培养基筛选接合子,共筛选出稳定的对卡那霉素和氟乙酸具有抗性的转座工程菌9株。对埃氏巨型球菌的突变株进行16SrRNA和Tn5的PCR鉴定,及乙酸激酶(AK)和磷酸转乙酰酶(PTA)酶比活力分析,确定突变株属于pta基因缺失型氟乙酸抗性菌株。

    2006年06期 669-672页 [查看摘要][在线阅读][下载 187K]
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  • 微粒蒙脱石对猪组织铅水平、红细胞生成和肝脏ALA-D酶活性及铅诱导的脂质过氧化的影响(英文)

    余东游;杨晓刚;许梓荣;

    选60头体质量约33kg的“杜长大”杂交猪,随机分成2组,每组3个重复,一组饲以基础日粮+10mg/kg铅+0.5%微粒蒙脱石,另一组饲以基础日粮+10mg/kg铅作为对照。研究结果表明:添加微粒蒙脱石组与对照组相比,明显降低了猪全血、脑、肝、肾、骨和毛等组织中铅含量;通过血细胞计数、血红素和血球容积测定表明,添加微粒蒙脱石组的红细胞生成显著增高,且肝脏中ALA-D酶活性显著提高。铅对肝脏的损伤作用明显,表现为丙二醛(MDA)含量显著升高(17.08%),过氧化氢酶(CAT)、超氧化物歧化酶(SOD)、谷胱甘肽过氧化物酶(GPx)含量分别降低85.73%、52.17%、47.56%,而在日粮中添加微粒蒙脱石可以显著改善铅诱导的上述损伤。结果提示,微粒蒙脱石对铅中毒有潜在的治疗作用。

    2006年06期 673-676页 [查看摘要][在线阅读][下载 230K]
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  • 高铜对断奶应激仔猪血清生化指标及激素水平的动态影响

    吴金节;王希春;李义刚;李福宝;李健;

    选用30头(28±2)日龄“长大定”三元杂交断奶仔猪,按体质量和性别随机分成3组,每组10头。组(对照组)仔猪饲喂基础日粮;组仔猪在断奶后14d内饲喂基础日粮+250mg/kg铜(CuSO4·5H2O),然后改喂基础日粮;组仔猪饲喂基础日粮+250mg/kg铜(CuSO4·5H2O)。试验期28d。所有试验猪均于断奶后0、7、14、28d,经前腔静脉采血,测定部分血清生化指标及血清激素水平。结果表明,与断奶前相比,3组仔猪断奶后血清总蛋白、白蛋白、球蛋白、总胆固醇和碱性磷酸酶水平均显著下降或极显著下降(P<0.05或P<0.01);组仔猪血清尿素氮含量在断奶后7d极显著升高(P<0.01),而血清生长激素、胰岛素和三碘甲状腺原氨酸在断奶后7d显著下降(P<0.05);组仔猪血清生长激素、胰岛素和三碘甲状腺原氨酸在断奶后14d极显著升高(P<0.01);组仔猪血清生长激素、胰岛素和三碘甲状腺原氨酸及甲状腺素在断奶后14、28d显著升高或极显著升高(P<0.05或P<0.01)。试验显示,高铜日粮可显著提高断奶应激仔猪血清生长激素、胰岛素和三碘甲状腺原氨酸及甲状腺素的水平。

    2006年06期 677-680页 [查看摘要][在线阅读][下载 136K]
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  • 富硒麦芽对实验性肝癌大鼠NO、NOS和脂质过氧化的影响

    赵洪进;刘家国;刘艳娟;刘永旺;王小龙*;

    50只清洁级SD大鼠随机分为4组:对照组(5只)、模型组(15只)、富硒麦芽组(15只)和亚硒酸钠组(15只)。对照组和模型组饲喂大鼠基础饲料,饲料含硒量为0.1mg/kg;富硒麦芽组和亚硒酸钠组分别在基础饲料中补充富硒麦芽和亚硒酸钠,饲料含硒量为3.0mg/kg。除对照组外,其余3组采用0.01%二乙基亚硝胺(DEN)诱发大鼠肝癌16周,停止诱癌后继续饲养2周再处死全部大鼠,观察富硒麦芽对丙氨酸氨基转移酶(ALT)、碱性磷酸酶(ALP)、白蛋白(ALB)、总胆红素(TBIL)、一氧化氮(NO)、一氧化氮合成酶(NOS)、丙二醛(MDA)和谷胱甘肽过氧化物酶(GSH-Px)的影响。结果显示,富硒麦芽组大鼠血浆ALT、ALP、TBIL、NO、MDA和肝组织NO、NOS、MDA显著低于模型组,全血和肝组织GSH-Px活性显著高于模型组;与亚硒酸钠组相比,富硒麦芽组大鼠血浆和肝组织的NO含量和NOS活性显著降低。试验表明富硒麦芽具有减轻肝脏损伤、延缓大鼠肝癌形成的能力,其作用机制之一可能为富硒麦芽能抑制NO的产生,清除体内大量过剩的氧自由基,减轻NO等自由基所致的脂质过氧化损伤。

    2006年06期 681-683页 [查看摘要][在线阅读][下载 107K]
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  • 干奶期不同能量水平对奶牛血中神经肽Y和生长激素浓度的影响

    李艳飞;李红梅;牛淑玲;左之才;徐闯;王哲;

    将健康围产期奶牛30头随机分为3组,预产前28d按奶牛营养需要分别饲喂100%、120%、80%能量日粮,产后各组奶牛均饲喂标准的产奶日粮,至产后56d结束,观测干奶期不同能量摄入水平对围产期健康奶牛血中神经肽Y和生长激素浓度的影响。结果表明,干奶期低能量日粮饲喂,奶牛血中神经肽和生长激素浓度均高于其他2组,从产前14d至产后28d组间差异显著(P<0.01;P<0.05),提示低能量饲料饲喂干奶期奶牛,产后能量负平衡得到缓解。

    2006年06期 684-686页 [查看摘要][在线阅读][下载 100K]
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  • 阴离子型日粮及补Ca对围产期奶牛代谢与健康及其生产性能的影响

    吴文旋;刘建新;叶均安;吴跃明;

    将36头干奶后期中国荷斯坦奶牛随机分为对照组、试验组、试验组(每组12头),分别饲喂常规日粮、阴离子型日粮及在此基础上补Ca日粮,探讨其对奶牛体内代谢状况、健康状况及生产性能的影响。与饲喂常规日粮相比,饲喂阴离子型日粮可降低奶牛尿液pH值(P<0.01)和血液HCO-3浓度(P>0.05);增加奶牛产后12h(P<0.05)、2d(P<0.05)血清总钙含量,对血清无机磷、镁含量没有显著影响;明显降低奶牛亚临床性低血钙率(33%)、胎衣不下率(33%)和乳房水肿率(17%);增加牛奶乳糖率(P<0.05),对其他奶成分和奶产量没有显著影响(P>0.05)。在阴离子型日粮中补Ca后,与饲喂阴离子型日粮相比,除增加奶牛产后血清镁含量外(P<0.05),对其他各项指标没有明显影响。

    2006年06期 687-689+693页 [查看摘要][在线阅读][下载 143K]
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  • 左旋咪唑防治奶牛隐性乳房炎的使用方法

    韦俞军;廖党金;

    选择患隐性乳房炎的中国荷斯坦奶牛95头(条件相当),随机将其分为19个组,即左旋咪唑口服剂型,7.5mg/kg1次组、7.5mg/kg1次剂量并间隔10d重复1次组、7.5mg/kg1次剂量并间隔20d重复1次组、10.0mg/kg1次组、10.0mg/kg1次剂量并间隔10d重复1次组、10.0mg/kg1次剂量并间隔20d重复1次组、12.5mg/kg1次组、12.5mg/kg1次剂量并间隔10d重复1次组、12.5mg/kg1次剂量并间隔20d重复1次组;左旋咪唑注射剂型,5.0mg/kg1次组、5.0mg/kg1次剂量并间隔10d重复1次组、5.0mg/kg1次剂量并间隔20d重复1次组、7.5mg/kg1次组、7.5mg/kg1次剂量并间隔10d重复1次组、7.5mg/kg1次剂量并间隔20d重复1次组、10.0mg/kg1次组、10.0mg/kg1次剂量并间隔10d重复1次组、10.0mg/kg1次剂量并间隔20d重复1次组,1个对照组不用药。试验前和用药后每间隔10d用BMT法检测各头奶牛的隐性乳房炎情况,对其检测结果打分,每组以其加权平均值考核,试验结果表明,口服剂型以7.5mg/kg1次剂量并间隔10d重复1次组和注射剂型以5.0mg/kg1次剂量并间隔10d重复1次组的效果较好,这2种应用方法比较以7.5mg/kg1次剂量并间隔10d重复1次的方法最佳。然后田间试验,选择条件相当的2群奶牛,一群(55头)应用左旋咪唑7.5mg/kg1次剂量并间隔10d重复1次的方法防治隐性乳房炎,另一群(53头)为不用药对照,结果隐性乳房炎恢复率、转化成临床型乳房炎奶牛数量和产奶牛量,用药牛群均好于不用药牛群。

    2006年06期 690-693页 [查看摘要][在线阅读][下载 123K]
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  • 骡几种舌色与血液流变学指标相关性

    严作廷;巩忠福;谢家声;罗超应;杨锐乐;杨国林;黄虎祖;尚清彦;

    用血液流变学方法测定了27匹健康成年骡和188例病骡的全血黏度、还原全血黏度以及血细胞压积、红细胞电泳时间。结果显示:随着舌色由淡红、红、赤红、暗红的转变,7种切变率下的全血黏度、还原全血黏度以及血细胞压积、红细胞电泳时间逐渐增加。其中全血黏度、还原全血黏度、血细胞压积差异显著或极显著(P<0.05或P<0.01)。淡红、红、赤红、暗红四种舌色的全血黏度和还原全血黏度均随着切变率的增加而逐渐降低。这一结果说明,血液流变学主要指标与家畜舌色之间存在密切关系。

    2006年06期 694-695页 [查看摘要][在线阅读][下载 55K]
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  • 小鼠骨髓间充质干细胞(MSCs)的分离纯化及其定向诱导分化为神经元样细胞

    胡亮;董雅娟;柏学进;马保华;杨恕玲;淡新刚;董方圆;王雪红;李建栋;程明;

    比较了全骨髓法和密度梯度离心法分离、纯化小鼠骨髓间充质干细胞,并研究了不同培养基和血清对干细胞生长的影响以及小鼠骨髓间充质干细胞的神经分化潜能。结果表明,密度梯度离心法和贴壁法结合使用可以分离纯化小鼠骨髓间充质干细胞;所获得的小鼠骨髓间充质干细胞具有诱导分化为神经元样细胞和脂肪样细胞的潜能,为小鼠骨髓间充质干细胞体外定向诱导分化的研究提供了技术支撑。

    2006年06期 696-700页 [查看摘要][在线阅读][下载 302K]
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  • 肝素和钙离子载体诱导波尔山羊精子体外获能和体外受精

    马恒东;梁鑫;

    运用肝素、钙离子载体(IA)协同咖啡因诱导波尔山羊精子体外获能,利用去透明带金黄地鼠卵穿透试验检测了精子的获能效果。结果发现:精卵孵育4h和6h时的穿透率均高于2h时的穿透率;肝素和钙离子载体对精子获能有明显的促进作用,与未添加组相比差异极显著(P<0.01);20mg/L和50mg/L的肝素剂量组,去透明带金黄地鼠卵穿透率为64.7%、68.4%;钙离子载体的添加剂量在0.3μmol/L时,穿透率达到68.2%;咖啡因与肝素、钙离子载体具有明显的协同作用。将获能的精子与山羊卵母细胞进行体外受精孵育17h,也获得了60%以上的受精率。

    2006年06期 701-703页 [查看摘要][在线阅读][下载 87K]
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  • 《中国兽医学报》2006年第26卷总目次

    2006年06期 704-708页 [查看摘要][在线阅读][下载 129K]
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