预防兽医学

  • 马立克氏病病毒L-meq基因的原核表达及多克隆抗体的制备

    郑梅竹;潘风光;邹亚学;孙莹;崔文璟;张玉静;

    从潜伏期感染马立克氏病病毒的鸡淋巴组织中提取基因组DNA,采用梯度PCR的方法获得了马立克氏病病毒的L-meq基因,与NCBI数据库已发表的序列(AB091109)相比,同源性达99%。将L-meq基因片段定向克隆到原核高效表达载体pET-28a中,构建pET-28a-L-meq重组质粒。将重组质粒转化受体菌Rosetta中,以IPTG对其进行诱导表达,SDS-PAGE电泳分析,结果表明L-meq基因在E.coli Rosetta中得到了正确表达,薄层扫描分析表明,表达蛋白占细菌总蛋白的18.8%,将表达蛋白进行初步的纯化,制备了L-MEQ蛋白的多克隆抗体。用ELISA方法对多克隆抗血清进行鉴定,结果表明其纯化的重组的L-MEQ蛋白具有良好反应原性和特异性。

    2007年06期 No.132 777-780页 [查看摘要][在线阅读][下载 247K]
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  • 1株高致病性血凝性脑脊髓炎病毒的分离与鉴定

    贺文琦;陆慧君;宋德光;陈艳玲;李志萍;周玉;常灵竹;高丰;

    利用细胞培养方法从临床表现神经症状的死亡仔猪脑组织内分离获得1株病毒,同时对该病毒进行电镜负染观察、昆明种小鼠致病性试验、RT-PCR检测和部分基因测序分析。电镜观察可见细胞培养物中有大量的直径约115 nm的冠状病毒样粒子;接种病毒的小鼠均出现典型的神经症状,死亡率100%;血凝性脑脊髓炎病毒(HEV)特异性引物RT-PCR扩增结果阳性;其S基因序列与GenBank中登录的HEV-67 N相应基因序列的同源性高达99.6%。结果表明,分离的病毒为猪血凝性脑脊髓炎病毒,分离株暂命名为HEV-CC-2007。

    2007年06期 No.132 781-784页 [查看摘要][在线阅读][下载 303K]
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  • 1株H1亚型水禽流感病毒分离株的致病特性和表面膜蛋白基因的序列分析

    薛峰;刘慧谋;彭宜;张评浒;钱忠明;刘秀梵;

    采用常规血清学试验和特异性RT-PCR方法,对我国华东地区家养水禽流感病毒进行了长达4年的跟踪监测,分离到多株H1亚型禽流感病毒,并对其中的1株A/Duck/Yangzhou/163/2003(简称Dk/YZ/163/03)的血凝素基因进行了序列测定,并与GenBank中收录的其他序列进行了比较。结果发现,Dk/YZ/163/03的血凝素基因(HA)与禽流感日本分离株A/Japan/91(H1)的同源性最高;而神经氨酸酶基因(NA)与Mallard dk/A1b/35/1976(H1N1)同源性最高;其推导的氨基酸剪切位点序列为P-S-I-Q-S-R,是典型低致病性禽流感病毒的特征序列,这与该毒株对SPF鸡和BALB/c小鼠的低致病特性相吻合。

    2007年06期 No.132 785-789+794页 [查看摘要][在线阅读][下载 564K]
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  • 禽Ⅱ型副粘病毒各种禽源分离株的免疫原性

    王林果;韦平;韦天超;李康然;黄淼章;黄钰缤;文艳玲;杨宗维;

    分别制备了源于鸡、鹅、鸽、鹌鹑、孔雀、画眉鸟、珍珠鸡的禽型副粘病毒(APMV-1)7个强毒分离毒株和商品弱毒疫苗株克隆30(C30)的灭活油乳剂苗,并用这8种灭活油乳剂苗和C30株的活疫苗分别在鸡、鹌鹑、鹅和鸽进行了免疫及交叉攻毒保护试验。免疫后(PI)分别测定试验禽血清的新城疫病毒(NDV)血凝抑制(HI)抗体的滴度,并于PI 5周用强毒株进行攻毒。结果表明,鸽的HI抗体几何平均滴度(MAT)为9.00~10.0 log2,鸡的为7.13~7.63 log2,鹌鹑的为5.00~5.13 log2,鹅对灭活油乳剂苗的为5.63~6.38 log2、而对C30株活疫苗的仅为3.38log2;除了C30株活疫苗免疫鹅提供的保护率比较低(20%)外,8种油乳剂苗都能对同源或者异源强毒株的攻毒提供比较高的保护率(66.75%~100%)。研究结果表明,经典疫苗株C30与近年来从各种不同禽类分离的致病性APMV-1野毒株之间、不同禽源分离株之间的抗原性,以及各种不同禽源分离株的之间的免疫原性差异均不大。

    2007年06期 No.132 790-794页 [查看摘要][在线阅读][下载 135K]
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  • 禽网状内皮组织增殖病病毒的实时荧光定量PCR检测

    赵丽青;王树峰;吴延功;王志亮;

    基于Light Cycler平台,利用SYBR GreenI染料能特异与双链DNA结合而发荧光的特性,建立了一种荧光PCR方法检测禽网状内皮组织增殖病病毒(REV)的方法。整个检测过程2 h内可以完成,病毒的最低检出浓度为10-7,在特异性试验中,REV有特异性的扩增曲线,而禽流感病毒和阴性对照一样,没有特异性扩增。对REV患鸡各器官组织进行了荧光PCR检测,各脏器病毒含量从高到低依次是肝、脾、腺胃、肾、肌胃,肝脏中的病毒含量最高,肌胃中的病毒含量最少,肺中没有检测到病毒。基于SYBR GreenI的荧光PCR方法检测REV快速、敏感、特异性好,为开展REV病原学检测提供了一种快速、无污染的方法。

    2007年06期 No.132 795-798页 [查看摘要][在线阅读][下载 462K]
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  • 禽传染性支气管炎病毒S1基因在毕赤酵母中的表达

    余祖华;王红宁;周生;黄勇;柳萍;

    根据GenBank已公布的传染性支气管炎病毒(Infectious bronchitis virus,IBV)株S1基因序列及pPIC9K表达载体序列,设计1对IBV S1基因表达片段的PCR引物,用RT-PCR方法扩增出长度为1 566 bp IBV S1基因表达片段,5′端不含信号肽序列,3′端添加了终止密码子。用限制性内切酶SnaB和Not将S1基因和载体pPIC9K酶切回收后连接,构建了重组表达载体pPIC9K-S1。用限制性内切酶Bgl将表达质粒pPIC9K-S1线性化,然后用电转化的方法导入毕赤酵母GS115,在MD平板上生长的转化子经过PCR鉴定和表型筛选后,获得了整合型阳性重组菌株GS115/pPIC9K-S1 His+Muts。将重组菌株在1%甲醇中进行诱导分泌表达,并对表达产物进行SDS-PAGE、Western blot分析。结果显示,IBV S1基因在毕赤酵母中成功获得了表达,表达蛋白的分子量约为76 000,能与IBV阳性血清特异性结合,表达的蛋白占上清中总蛋白量的12.5%。

    2007年06期 No.132 799-802页 [查看摘要][在线阅读][下载 236K]
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  • 口蹄疫重组鸡痘病毒活载体疫苗在豚鼠、猪体内的毒性、分布及抗体消长规律

    金明兰;金宁一;鲁会军;马鸣潇;郑敏;霍小伟;刘慧娟;计越;李旭;

    利用临床观察、病理解剖、PCR、RT-PCR、ELISA、中和抗体检测等方法,对口蹄疫(FMD)重组鸡痘病毒(FPV)在豚鼠、仔猪体内的毒性、分布以及抗体消长规律进行研究。结果表明,FMD重组鸡痘病毒免疫的动物在整个试验期间,未表现出明显的临床症状和不良反应;病理组织切片检测无明显的组织学变化;PCR、RT-PCR检测证明,豚鼠、猪免疫FMD重组鸡痘病毒后,在心脏、肝脏、脾脏、肺脏、肾脏、肌肉、脑、肠系膜淋巴结内检测到FPVDNA和FMDV DNA,且在大部分组织能存在3 d左右;FMD重组鸡痘病毒均可诱导免疫动物产生较高水平的抗FMDV特异性抗体和中和抗体,验证了所构建重组FPV的生物安全性及良好的免疫原性,为其他哺乳动物实验提供了必要的基础数据。

    2007年06期 No.132 803-806页 [查看摘要][在线阅读][下载 102K]
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  • 进口奶牛病毒性腹泻病毒快速检测鉴定

    赵秀玲;闻伟刚;黄素文;张吉红;杜华宏;

    采用ELISA方法对3 073头奶牛全血进行牛病毒性腹泻病毒(Bovine viral diarrhea virus,BVDV)检测,结果发现编号a889的血样呈阳性反应,另外有3份血样(a126、a803、b1277)呈可疑反应;进一步的白细胞抽提物ELISA反应表明,a889血样呈阳性反应,其余呈阴性反应。对a889血样进行RT-PCR扩增,得到1条310 bp大小的特异性条带,与预期片段大小吻合;经序列同源性比较分析,确定a889血样中存在牛病毒性腹泻病毒。

    2007年06期 No.132 807-809页 [查看摘要][在线阅读][下载 113K]
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  • 猪繁殖与呼吸综合征病毒河南分离株ORF5基因的克隆与变异分析

    周海范;夏平安;崔保安;柴春霞;张红英;杨霞;

    从河南郑州、新乡、周口不同地区猪场的急性病猪中分离到3株猪繁殖与呼吸综合征病毒(Porcine reproduc-tive and respiratory syndrome virus,PRRSV),分别命名为PRRSV Hn-1/06、PRRSV Hn-2/06和PRRSV Hn-3/06,细胞中和试验证实其血清型与美洲型一致。利用RT-PCR方法克隆了它们的ORF5基因,并对其基因序列和推导的氨基酸序列与7个不同来源的PRRSV毒株进行了同源性和亲缘关系比较分析,结果表明,3个分离株之间的ORF5基因及其推导的氨基酸均同源性均大于95.5%;与VR-2332标准北美洲株和疫苗株RespPRRS MLV间的同源性均低于与中国CH-1a毒株,而与流行的欧洲株间的同源性均低于54.5%。同时对推导氨基酸序列与6个北美洲型PRRSV株进行变异分析比较,证实其推导氨基酸序列发生了变异,特别是中和位点处第39位明显不同,表明河南省流行的PRRSV为北美洲型的变异株。

    2007年06期 No.132 810-813+817页 [查看摘要][在线阅读][下载 196K]
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  • TaqMan MGB探针实时检测兔病毒性出血症病毒

    张秀娥;田夫林;李希友;李建亮;崔言顺;

    应用荧光定量PCR技术,根据兔病毒性出血症病毒的保守基因VP60设计了1对引物和1段Taqman MGB探针,建立了用于检测兔病毒性出血症病毒的实时荧光定量RT-PCR方法。试验中能够检出的RHDV VP60基因质粒拷贝数达103数量级,能够检测到RHDV病毒核酸最低量可以达到5 pg,未检出其他病原的RNA。试验结果表明,建立的TaqMan MGB探针实时荧光定量RT-PCR方法的特异性、敏感性、重复性均达到试验设计要求,能快速检测临床样品中的兔病毒性出血症病毒,适合于兔各脏器及肌肉组织中兔病毒性出血症病毒的快速诊断和检测。

    2007年06期 No.132 814-817页 [查看摘要][在线阅读][下载 162K]
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  • 仔猪大肠杆菌病K88-K99-987P-F41四价亚单位疫苗的研制 Ⅳ.疫苗生产与免疫效力试验

    袁万哲;何孔旺;陆承平;

    选用4株带有K88、K99、987P、F41粘附素抗原的产肠毒素性大肠杆菌,分别接种于BBL、Minca、Slanetz和Minca培养基进行培养,将培养物加热提取粘附素抗原后,加入油佐剂制成四价亚单位疫苗。经成品检验合格后分别免疫小鼠和怀孕母猪,同时监测怀孕母猪抗体。最后1次免疫后15 d,分别用同源ETEC确定的攻毒剂量攻击。结果显示,经2次免疫后,K88、K99、987P、F41对小鼠的免疫保护率与1次免疫没有显著差异(P>0.05);对仔猪,1次免疫跟2次免疫均可显著地降低腹泻指数(P<0.05),2次免疫与1次免疫没有显著差异(P>0.05)。怀孕母猪免疫1周后(产前23 d)抗体开始上升,第2周(产前16 d)达到高峰。2次免疫后抗体迅速回升,第4周(产前2 d)达到最高峰,产后2 d抗体大幅度下跌,几近免疫前水平。二免母猪所产仔猪发病率明显低于一免母猪(P<0.05)。攻毒保护试验和抗体消长规律的结果表明,制备的仔猪大肠杆菌病K88-K99-987P-F41四价亚单位疫苗具有良好的免疫原性,能有效预防仔猪大肠杆菌病的发生。

    2007年06期 No.132 818-820+861页 [查看摘要][在线阅读][下载 162K]
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  • 4株鸭源肠球菌的鉴定和致病性

    韩梅红;谷长勤;胡薛英;周诗其;杨峻;邵华斌;程国富;

    对临床分离的4株鸭源肠球菌郑1株、郑2株、郑3株、北京株和1株粪肠球菌参考菌株进行了系统鉴定,并用SDS-PAGE和Western-blot技术对各菌株细胞壁蛋白图谱进行比较分析。结果5个菌株的形态、染色、生理生化特性均与粪肠球菌特性一致;它们均对青霉素、万古霉素和庆大霉素敏感而对四环素耐药;5个菌株人工感染雏鸭及小白鼠均有致病性,但各菌株间致病力存在差异,北京株最强,参考株最弱,其余3株介于北京株和参考株之间;各菌株的细胞壁蛋白经SDS-PAGE在相对分子质量33 370~131 690之间均显示数十条蛋白带,其中郑2株和北京株在相对分子质量66 840处均有1条染色较深的蛋白带,而用Western-blot分析显示抗北京株胞壁蛋白抗体只能检测到北京株相对分子质量为66 840的抗原蛋白。以上结果表明,这5个被检菌株为致病性粪肠球菌,且致病性以北京株最强。

    2007年06期 No.132 821-824+829页 [查看摘要][在线阅读][下载 201K]
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  • 以减毒沙门氏菌为载体的GM-CSF与生长抑素DNA疫苗的安全性和稳定性

    舒邓群;陈荣达;茆达干;吴志敏;杨利国;

    将含GM-CSF基因与生长抑素(SS)的融合真核表达质粒pGM-CSF/SS转入减毒沙门氏菌株CS022。选择40只22~24 g的雌性小鼠,随机分成4组,其中1组为对照组,口服生理盐水;2~4组为试验组,分别用上述重组减毒沙门氏菌株CS022以108、109、1010CFU的剂量口服免疫小鼠,2周后以相同的剂量加强免疫,研究pGM-CSF/SS真核表达质粒在体内的稳定性和减毒沙门氏菌对小鼠的安全性。同时通过体外传代,研究该真核表达质粒在体外的稳定性。结果表明:108、109CFU剂量口服小鼠,成活率达100%,而1010CFU剂量口服小鼠成活率降低至90%,腹泻率达50%。体外传10代和口服免疫4周后从小鼠肝脏和脾脏分离的减毒菌用琼脂糖凝胶电泳和酶切鉴定法证实,减毒菌中的重组质粒在体外和侵入小鼠体内过程中具有较好的稳定性。质粒DNA在传10代以后,虽然每代的质粒DNA含量有些变化,但总体趋势基本是恒定的,第10代时,质粒DNA的含量与第1代的含量差异不显著。上述结果提示,利用该减毒沙门菌作为载体传递pGM-CSF/SS DNA疫苗免疫小鼠具有相对安全性和稳定性,为进一步有效激发机体的免疫应答提供了前提。

    2007年06期 No.132 825-829页 [查看摘要][在线阅读][下载 205K]
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  • 猪传染性胸膜肺炎放线杆菌毒素Ⅲ A基因的克隆及其在巴斯德毕赤酵母中的分泌表达

    汪招雄;何启盖;刘军发;刘正飞;陈焕春;

    应用PCR方法扩增猪传染性胸膜肺炎放线杆菌(Actinabacillus pleuropneumoniae,App)编码毒素A结构蛋白的完整基因,连接到载体pMD18-T中,经Not和Snab双酶切后连接到用同样酶切的表达载体pPIC9k上,转化GS115酵母感受态细胞,经甲醇诱导表达了分泌到胞外的Apx A蛋白。SDS-PAGE分析显示,表达的蛋白约为110 000,与预期相符。Dot-blot和ELISA检测结果表明,表达蛋白具有良好的抗原性和特异性。为进一步研究Apx A蛋白的结构和功能,研制App重组诊断抗原或亚单位疫苗奠定了基础。

    2007年06期 No.132 830-833页 [查看摘要][在线阅读][下载 202K]
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  • 鸭疫里默氏杆菌基因组文库的构建及免疫原性基因初步筛选

    朱德康;程安春;汪铭书;丁轲;

    以血清1型鸭疫里默氏杆菌(RA)CH-1株为材料提取基因组DNA,采用限制性内切酶Sau3A进行部分酶切消化,纯化回收1.0~6.5 kb片段,用T4DNA连接酶将回收片段与经BamH酶切并去磷酸化的ZAP Express载体进行连接,用噬菌体包装蛋白包装。经测定包装滴度为5.23×106pfu/mL,蓝白斑筛选重组率为96.8%,表明已成功构建血清1型RA CH-1株部分基因组文库。在此基础上以RA抗血清为抗体探针进行免疫筛选,获得3个阳性克隆,经多次重复筛选后再体内删除,得到含有插入片段的质粒并测序。生物信息学分析结果显示,该序列(GenBank登录号:DQ151838)含有1个编码369个氨基酸的完整开放阅读框架,是尚未见报道的RA基因序列,并且存在多个预测的抗原表位。

    2007年06期 No.132 834-837页 [查看摘要][在线阅读][下载 103K]
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  • 出血性大肠杆菌O157 Eae-Stx1/2B融合蛋白的免疫学特性

    陈萍;冯书章;孙洋;郭学军;周博;尹铁勇;

    为了研究重构融合蛋白Eae-Stx1/2B免疫特性及对出血性大肠杆菌感染的免疫保护作用,进行了细胞粘附抑制试验和免疫保护试验。结果证明Eae-Stx1/2B融合蛋白免疫血清在体外能降低出血性大肠杆菌对HEp-2细胞的粘附作用,这一特性在出血性大肠杆菌疫苗设计中具有重要价值。以纯化的融合蛋白Eae-Stx1/2B为抗原对小鼠进行腹腔注射免疫和滴鼻免疫,ELISA检测结果显示,2次免疫后7 d,免疫组抗Eae-Stx1/2B融合蛋白和抗出血性大肠杆菌O157血清IgG抗体显著高于未免疫组;用出血性大肠杆菌O157强毒株EDL933攻击免疫小鼠,免疫组小鼠排菌时间显著缩短,免疫组小鼠存活率均高于未免疫组,免疫组小鼠体质量恢复增长较快。上述试验结果表明,Eae-Stx1/2B融合蛋白对出血性大肠杆菌感染有保护作用。

    2007年06期 No.132 838-841页 [查看摘要][在线阅读][下载 178K]
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  • 捻转血矛线虫重组H11抗原山羊免疫保护性试验

    严若峰;徐立新;李祥瑞;

    以重组H11-1、H11-2及H11-1与H11-2混合物分别免疫山羊后,ELISA检测发现血清抗体均在首次免疫后14 d达到较高水平,在第2次免疫后10 d达到高峰。用10 000只捻转血矛线虫第3期幼虫攻击山羊后,对不同免疫组山羊排出虫卵数、虫卵孵化率和成虫数的统计分析结果表明,免疫组与对照组间差异不显著,但免疫组雌虫数显著少于对照组,这对防治捻转血矛线虫病可能会起一定的作用。

    2007年06期 No.132 842-844页 [查看摘要][在线阅读][下载 132K]
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简讯

人兽共患病

  • 柔嫩艾美耳球虫杨凌株3-1E基因的克隆、表达与蛋白结构预测

    翟军军;于三科;才学鹏;林青;窦永喜;景志忠;闫鸿斌;田广孚;

    应用PCR技术,从柔嫩艾美耳球虫(Eimeria tenella)孢子化卵囊子孢子cDNA表达文库中扩增得到鸡E.tenella杨凌株(YL)子孢子表面抗原3-1E基因。序列分析表明,E.tenella YL 3-1E基因的开放阅读框(ORF)为513个碱基,编码170个氨基酸,与报道的E.tenella甘肃株(GS)3-1E基因相似性为99.8%,两者推导的氨基酸序列相似性为99.4%;而与文献报道的堆型艾美耳球虫(E.acervulina)美国株(US)3-1E基因序列的相似性为98.8%,推导的氨基酸序列相似性为98.8%。利用生物信息学和分子生物学软件对3-1E基因编码的蛋白进行结构预测,结果表明,该蛋白为结构松散的球状蛋白。将3-1E基因亚克隆到表达载体pGEX-4T-1,构建pGEX-3-1E重组质粒并在大肠杆菌BL21中进行表达,表达产物经SDS-PAGE分析,表明成功地表达出了分子量为44.7 ku的融合蛋白。该研究为球虫基因工程疫苗的研制奠定了基础。

    2007年06期 No.132 845-849页 [查看摘要][在线阅读][下载 492K]
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  • 球虫感染及药物对雏鸡血清矿物质含量的影响

    李佩国;李蕴玉;贾青辉;张艳英;张香斋;钟秀会;

    将160只14日龄雏鸡随机分为未感染对照组(I)、感染对照组(Ⅱ)、中药组(Ⅲ)和球敌组(Ⅳ)。除I组外,其余每只鸡口服感染8.0×104个E.tenella孢子化卵囊,对球虫感染0、3、6、9、12 d时的血清钾、磷、钙、铁含量进行了测定。结果表明:与I组比较,Ⅱ组血清钾含量在感染后3、6 d分别显著提高了44.81%(P<0.05)和130.28%(P<0.01);磷含量于感染后3、9 d分别显著降低了26.36%(P<0.01)和34.07%(P<0.01);铁含量在感染后6、9 d分别显著降低了37.12%(P<0.05)和35.07%(P<0.05)。Ⅲ、Ⅳ组血清钾、铁含量虽然与Ⅱ组差异不显著,但在感染高峰期(6 d),钾含量分别降低了26.76%和35.28%;铁含量分别提高了39.64%和38.44%;磷含量于感染后9 d分别显著增加了45.00%(P<0.05)和61.11%(P<0.05),并与I组无显著差异。球虫感染及药物对血清钙含量无明显影响(P>0.05)。结果提示,中药和球敌能抵抗球虫感染,有助于保持血清矿物质含量的相对恒定。

    2007年06期 No.132 850-852+892页 [查看摘要][在线阅读][下载 115K]
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  • 猪囊尾蚴特异性单克隆抗体的制备及其识别抗原成分的鉴定

    石团员;宁长申;张改平;王选年;张龙现;李青梅;职爱民;菅复春;蔡书军;乔宏兴;

    通过SDS-PAGE方法对猪囊尾蚴囊液抗原成分进行了分离鉴定,并分别分离纯化了其中的16 000和10 000特异性蛋白质成分;将16 000和10 000纯化蛋白质成分分别做成佛氏佐剂苗,分组免疫BALB/c小鼠,超免后,无菌取脾脏制备脾细胞,分别与NS0骨髓瘤细胞进行融合,经阳性筛选和特异性鉴定获得2株分泌猪囊尾蚴特异性单抗的杂交瘤细胞,命名为TSCF-1611H12B8和TSCF-1012G5B5。免疫学鉴定结果表明,单抗TSCF-1611H12B8和TSCF-1012G5B5与猪细颈囊尾蚴、旋毛虫、住肉孢子虫和蛔虫抗原间不存在交叉反应;单抗TSCF-1611H12B8识别囊液中16 000和10 000蛋白质抗原条带,而单抗TSCF-1012G5B5识别囊液中的10 000蛋白质条带。

    2007年06期 No.132 853-857+962页 [查看摘要][在线阅读][下载 231K]
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  • 伪狂犬病基因缺失疫苗SA215株gD基因的序列分析及其功能

    许雁峰;郭万柱;徐志文;朱玲;阳爱国;

    SA215是伪狂犬病病毒3基因缺失疫苗株(PRV TK-/gE-/gI-/LacZ),试验以其主要功能基因gD基因为对象,通过对病毒吸附细胞的差异和免疫仔猪后血清中抗体效价变化的测定,认为gD基因编码蛋白可介导病毒进入细胞和诱导机体产生中和抗体。经从gD基因的基因型到表现型全面分析SA215株的免疫原性,发现gD基因变异没有影响到其功能的实现,推定SA215株应具有良好的免疫原性。

    2007年06期 No.132 858-861页 [查看摘要][在线阅读][下载 145K]
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基础兽医学

  • 胰岛素、胰高血糖素对体外培养脂肪细胞胰高血糖素受体mRNA丰度的影响

    张永宏;孙玉成;高妍;宋文华;刘国文;王雪莹;李小兵;王哲;

    为阐明胰岛素、胰高血糖素在奶牛脂肪代谢中的调控作用,应用RT-PCR法观察了胰岛素、胰高血糖素对体外培养脂肪细胞胰高血糖素受体(GLNR)mRNA丰度的影响。结果发现,随着培养液中胰岛素质量浓度的升高,GLNR mRNA表达逐渐增加(P<0.05);而随着培养液中胰高血糖素浓度的升高,GLNR mRNA表达逐渐降低(P<0.01)。本研究结果表明,胰岛素、胰高血糖素直接调控奶牛脂肪细胞胰高血糖素受体mRNA的表达。

    2007年06期 No.132 862-864+886页 [查看摘要][在线阅读][下载 160K]
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  • 不同能量摄入水平对围产期健康奶牛血清总胆红素、蛋白及转氨酶的影响

    左之才;邓俊良;王哲;张乃生;李艳飞;牛淑玲;李红梅;刘彩霞;

    将健康围产期奶牛30头随机分为3组,分别于产前28 d开始饲喂NRC标准日粮(能量摄入100%组或Ⅰ组)、NRC标准增加20%日粮(能量摄入120%组或Ⅱ组)和NRC标准减少20%日粮(能量摄入80%组或Ⅲ组),产后各组奶牛均饲喂标准日粮,至产后56 d结束,观察干奶期不同能量摄入水平对围产期健康奶牛血清总胆红素、蛋白及转氨酶的影响。结果表明,围产期是机体生理状况处于剧烈变动的时期,奶牛产后的蛋白代谢活动、转氨酶活性较产前明显增强,但健康奶牛均能通过调整糖代谢、脂代谢和蛋白质代谢,促进能量与营养物质间的相互转化,适应机体的各种生理变化。

    2007年06期 No.132 865-869页 [查看摘要][在线阅读][下载 148K]
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  • 不同能量摄入水平对围产期奶牛脂肪组织Leptin mRNA和HSL mRNA表达的影响

    牛淑玲;张才;张国才;王哲;张乃生;张嘉保;刘国文;陈玉江;

    选用围产期健康奶牛30头随机均分为3组,其中组为对照组,组和组为试验组。Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ组于产前28d开始分别饲喂中国奶牛饲养标准(2000)标准日粮(能量摄入100%组)、标准日粮增加20%日粮(能量摄入120%组)和标准日粮减少20%日粮(能量摄入80%组),产后各组奶牛均饲喂同一标准日粮至56 d。试验各组奶牛分别于产前28、14 d、产后1、14、28、56 d尾根部手术采取脂肪样品,采用荧光RT-PCR法对脂肪组织Leptin mRNA及HSL mRNA表达水平进行定量分析。结果表明,不同能量摄入水平显著影响脂肪组织Leptin mRNA和HSL mR-NA表达。低能饲喂明显提高了脂肪组织中Leptin mRNA表达,降低了HSL mRNA表达;高能饲喂明显降低了脂肪组织中Leptin mRNA表达,提高了HSL mRNA表达。

    2007年06期 No.132 870-873+878页 [查看摘要][在线阅读][下载 218K]
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  • 低温诱发肉鸡腹水综合征发生过程中肺血管重塑与肺动脉高压的关系

    王建琳;乔健;赵立红;张建军;利剀;王慧煜;徐彤;田勇;

    将160只15日龄雄性AA商品代肉鸡随机分为对照组((22±1.5)℃)和低温组((11±2)℃)。15~50日龄,每组每周随机取6只,以右心导管法直接测定肺动脉压(PAP),并取肺组织做石蜡切片进行Weigert-间苯二酚复红染色,分析肺血管重塑情况。50日龄时统计整个饲养过程中肉鸡腹水综合征(AS)发生率。结果显示,低温组肉鸡AS发生率(18.75%)极显著高于对照组(1.25%)(P<0.01);低温组肉鸡PAP从22日龄开始较对照组明显升高(P<0.01或P<0.05);20~50、50~100、100~200μm肺动脉结构分别从36、43、43日龄开始较对照组发生了明显的重塑(P<0.01或P<0.05)。结果表明,低温诱发肉鸡AS过程中出现了明显的PAP升高和肺血管重塑,且肺动脉高压(PH)促进了肺血管重塑,肺血管重塑加剧了PAP升高。

    2007年06期 No.132 874-878页 [查看摘要][在线阅读][下载 145K]
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  • 日粮能量对初情期前母猪外周血清FSH、LH释放的影响

    刘立文;于淼瑛;周虚;

    选杜长大三元杂交母猪24头(140日龄)分3个组,高能组、中能组、低能组。试验处理20 d,每5 d采血1次,离心,-20℃冰箱储存,然后放射免疫分析(RIA)。结果表明:外周血浆FSH、LH浓度在不同日粮能量水平饲养后,高能组急剧上升,到第10天达到高峰,然后逐渐下降,在处理第20天接近恢复试验前水平。低能组缓慢降低,第10天到最低点,然后逐渐恢复,在处理第20天接近恢复试验前水平。外周血浆FSH、LH浓度在高能组与低能组于处理第5天差异显著(P<0.05),第10天差异极显著(P<0.01),说明能量通过下丘脑-垂体-卵巢轴影响初情期前母猪生殖机能。

    2007年06期 No.132 879-881页 [查看摘要][在线阅读][下载 137K]
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  • 抗盐酸克伦特罗单链抗体基因的克隆、序列分析及表达

    霍方珍;卢士英;周玉;杨正涛;柳增善;

    提取分泌抗盐酸克伦特罗单克隆抗体杂交瘤细胞株的总RNA,通过RT-PCR技术,扩增VH和VL,用一段柔性肽链-(G4S)3将VH和VL连接成ScFv。测序后经NCBI Blast分析,所得ScFv具有重组功能性鼠抗体可变区基因的特征。将所得目的基因与pET-22b(+)连接,转化E.coli BL21,用IPTG诱导表达,表达蛋白经SDS-PAGE分析,37℃培养5 h表达量较大,25℃诱导表达以可溶性为主。

    2007年06期 No.132 882-886页 [查看摘要][在线阅读][下载 355K]
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  • 半胱胺盐酸盐对断奶羔山羊小肠黏膜生长的影响及其抗氧化作用

    何军;沈赞明;杨倩;

    利用8只断奶公山羊(淮南羊×波尔山羊)研究了半胱胺盐酸盐制剂(CT2000)对小肠黏膜生长发育的影响。根据体质量相近配对原则将断奶羔山羊分为2组(n=4),自由饮水和采食花生杆,每只山羊每日分别给予精料100g,试验组在精料中添加CT2000(半胱胺含量为13.5 mg/kg)。经6周饲喂后宰杀,取小肠各段组织样,分别观察小肠绒毛高度、隐窝深度;测定黏膜蛋白质和核酸含量、谷氨酰转移酶和碱性磷酸酶活性等指标。所有山羊每周称重。结果显示:经CT2000处理的山羊平均日增重显著高于对照(80.7 g/d vs 73.8 g/d,P<0.05);且十二指肠绒毛高度、隐窝深度以及肌层厚度等指标均优于对照组:十二指肠与回肠黏膜DNA含量显著提高((2.99±0.07)mg/gvs(2.64±0.06)mg/g;(2.53±0.07)mg/g vs(2.22±0.07)mg/g,P<0.05));十二指肠γ-谷氨酰转移酶活性显著提高((125.5±15.6)U/g vs(96.7±8.8)U/g,P<0.05);黏膜蛋白质含量((140±9.6)ng/g vs(125.2±8.0)mg/g)及碱性磷酸活性((100.5±14.2)U/g vs(90.1±18.6)U/g)有增加的趋势,但未达统计学显著水平(0.05<P<0.15)。以上结果表明,口服半胱胺盐酸盐促进断奶羔山羊小肠黏膜生长。向体外培养的小肠黏膜上皮细胞中加入半胱胺(0.01 g/L),细胞3H-TDR掺入量显著高于对照组((3 280±468)vs(561±106),P<0.01);细胞总抗氧化能力和谷胱甘肽含量提高((2.35±0.06)vs(2.02±0.02)IU/107细胞;(505±23)vs(424±21)IU/107细胞,P<0.05);表明半胱胺在体外条件下促进肠黏膜细胞DNA合成,增强细胞清除自由基、抵抗损伤的能力。

    2007年06期 No.132 887-892页 [查看摘要][在线阅读][下载 268K]
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  • 莪术油复方口服液对禽流感病毒H5N1亚型的抑制作用和攻毒保护试验

    黄亚东;李燕梅;菅永峰;陈芳艳;项琪;李校堃;王林川;

    利用从中药莪术中提炼的莪术油制成的莪术油复方口服液,与鸡源禽流感病毒(AIV)H5N1在10日龄非免疫鸡胚中相互作用,观察莪术油复方口服液对禽流感病毒H5N1的抑制效果;用莪术油复方口服液对14日龄非免疫试验鸡连续口服喂药1周,采用禽流感病毒H5N1攻击鸡群,观察药物对鸡的保护效果。结果表明,在体外抑制试验中,0.25%、0.5%和1%的莪术油复方口服液对鸡胚为无毒浓度,对鸡胚的保护作用分别为60%、80%和80%;0.75%、1.5%和3%的莪术油复方口服液对试验鸡的保护作用分别为80%、100%和100%。病理组织检查结果表明鸡的肺脏无病变,并且增强了脾脏的免疫功能。初步结果显示,莪术油复方口服液对禽流感病毒具有显著的抑制作用。

    2007年06期 No.132 893-898页 [查看摘要][在线阅读][下载 1415K]
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  • 福美双诱发肉鸡胫骨软骨发育不良的组织病理学变化

    田文霞;李家奎;毕丁仁;张艳红;覃平;韩秀萍;

    120羽1日龄健康AA肉鸡预饲1周后随机分为2组,对照组饲以基础日粮,试验组饲以基础日粮添加100mg/kg福美双,进行了肉鸡胫骨长度、生长板厚度、肉鸡胫骨软骨发育不良(TD)指数及TD发病率等指标的检测,并进行了形态学和组织病理学观察。结果显示,患病鸡胫骨长度、生长板厚度和TD指数均有显著变化(P<0.01),TD发病率显著上升(P<0.05);病鸡胫骨近端的纵切面有玉白色楔状软骨团块深入干骺端甚至骨髓腔,呈现典型的胫骨软骨发育不良病理学变化。结果提示,100 mg/kg福美双可显著提高AA肉鸡TD发病率,并引起相应的组织病理学变化,为TD分子机理的研究提供了一个理想的实验动物模型。

    2007年06期 No.132 899-902页 [查看摘要][在线阅读][下载 282K]
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  • 葡萄球菌性关节炎肉鸡免疫器官的病理学变化

    谷长勤;王德海;胡薛英;谢长清;程国富;

    利用鸡源致病性金黄色葡萄球菌复制鸡葡萄球菌性关节炎的病理模型,研究免疫器官的主要病理学变化及其内CD4+和CD8+T淋巴细胞的动态变化。结果表明:鸡接种细菌后呈典型的关节炎症状。脾脏肿大,表面呈网格状,法氏囊黏膜增厚,盲肠扁桃体和胸腺上散在出血点。光镜下脾脏淋巴小结早期数目增多,后期呈灶状坏死,法氏囊水肿,淋巴小结坏死液化。CD4+和CD8+T淋巴细胞的变化为:脾脏在接种后7 d淋巴小结内的CD4+和CD8+T淋巴细胞已明显多于对照组,与对照组比差异极显著(P<0.01);接种后7 d,法氏囊的淋巴滤泡周围的间隙中检出较多的阳性细胞,在接种后14 d CD4+T淋巴细胞达到高峰,随后下降,与对照组相比在接种后7 d差异显著(P<0.05),在接种后14 d差异极显著(P<0.01);而CD8+T淋巴细胞在接种后7 d就达到高峰,与对照组相比差异极显著(P<0.01);盲肠扁桃体的CD8+T淋巴细胞在接种后7 d上升,21 d达到最高值;胸腺组织中阳性细胞数对照组和试验组都很少,试验组的阳性细胞数的变化没有明显的规律。鸡接种金黄色葡萄球菌后免疫器官内CD4+和CD8+T淋巴细胞数目增多,表明T淋巴细胞参与了金黄色葡萄球菌引起鸡的关节炎的发生发展过程。

    2007年06期 No.132 903-906+909页 [查看摘要][在线阅读][下载 648K]
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  • 免疫增强剂“禽福”和“Inmunair”对IBD疫苗免疫雏鸡外周血液免疫学变化的影响

    高雪丽;郑世民;顾志刚;

    分别将免疫增强剂"禽福"和"Inmunair"与鸡传染性法氏囊病(IBD)中等毒力活疫苗配合使用,检测免疫雏鸡外周血液T、B细胞数量及血清免疫球蛋白IgG、IgM和IgA含量的动态变化,结果发现,应用免疫增强剂的IBD疫苗免疫雏鸡外周血液各项免疫检测指标均较IBD疫苗单独免疫雏鸡有不同程度地增高,表明免疫增强剂与疫苗联合应用,能显著提高疫苗免疫雏鸡全身免疫功能;而IBD强毒攻击后,疫苗单独免疫雏鸡上述指标明显低于应用免疫增强剂的疫苗免疫雏鸡,同时,后者对IBD强毒攻击的有效抵抗力明显高于前者。

    2007年06期 No.132 907-909页 [查看摘要][在线阅读][下载 79K]
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  • DAB_(389)(Gly_4Ser)_2-αMSH的纯化及细胞特异性毒性

    李泽鸿;张国利;岳玉环;吴广谋;

    重组表达载体pET28a/DAB389(Gly4Ser)2-αMSH在BL21(DE3)中以可溶形式表达重组蛋白,依次通过硫酸铵盐析、离子交换层析、亲和层析纯化、脱盐得93.26%重组蛋白纯品;细胞活性测试结果表明,该重组毒素只对SP2/0、HeLa、A549、A375等4种癌细胞有杀伤作用,对DK、BHK正常细胞没有杀伤力;重组蛋白对SP2/0、HeLa、A549、A375细胞的IC50分别为:3.138、2.736、7.243、4.672 mg/L。

    2007年06期 No.132 910-913+918页 [查看摘要][在线阅读][下载 426K]
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  • 日粮粗纤维水平对鹅生产性能、代谢激素和生化指标的影响

    刘长忠;何瑞国;毛宗林;张碧绿;张毅;向枭;

    以500只29日龄生长鹅为试验动物,以砻糠和玉米秸秆为主要纤维源,进行28 d的饲养试验,研究日粮在等能量等蛋白水平下,不同粗纤维(crude fiber,CF)水平(3%、5%、7%、9%和11%)对鹅生产性能、代谢激素和血清生化指标的影响。结果表明:随着日粮粗纤维水平的增加,生长鹅的日采食量呈增加的趋势,但各处理组间差异不显著(P>0.05),饲料转化率和日增重呈先增加后减少的趋势(P<0.05);5%CF组与7%CF组生长鹅的生产性能最佳,与11%CF组相比,日增重分别提高了22.60%与24.25%(P<0.05),饲料转化率分别改善了22.65%与21.74%(P<0.05);日粮粗纤维水平对生长鹅血清中血糖(GLU)、碱性磷酸酶(ALP)、生长激素(GH)和IGF-I有显著影响(P<0.05),而对尿酸(UA)、总蛋白(TP)、谷丙转氨酶(ALT)、谷草转氨酶(AST)、胰高血糖素(GLU)、胰岛素(INS)、促甲状腺素(TSH)、三碘甲状腺原氨酸(T3)和甲状腺素(T4)均无显著影响(P>0.05)。

    2007年06期 No.132 914-918页 [查看摘要][在线阅读][下载 134K]
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  • Ob基因对松辽黑猪肉质和胴体性状的影响

    李毅;张嘉保;赵志辉;武霞;张树敏;金鑫;

    以松辽黑猪为研究对象,分析Ob基因对其肉质和胴体性状的影响。测定30头松辽黑猪的9个肉质性状和6个胴体性状,用PCR-RFLP方法检测Ob基因型。结果显示,松辽黑猪TT基因型平均膘厚比CT基因型低,而肌内脂肪含量、瘦肉率则显著高于后者(P<0.05),其他肉质和胴体性状在Ob基因型间没有显著差异(P>0.05)。结果表明,Ob基因的TT基因型对猪的肉质和胴体性状具有显著的正遗传效应。

    2007年06期 No.132 919-921+926页 [查看摘要][在线阅读][下载 122K]
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  • 猪链球菌2型分泌性核酸酶A(SsnA)活性检测及其基因序列的克隆与测序分析

    张东;王楷宬;汤明;黄保续;范伟兴;

    对8株猪链球菌2型重庆分离株的核酸酶A全基因进行克隆测序,结果表明该基因长度为3 126 bp,与Gen-Bank发表的唯一的该基因的序列相比,核苷酸同源性高于98%,推导的氨基酸同源性高于94%。根据核酸酶A基因的测序结果建立扩增片段长度为301 bp的PCR检测方法,并用甲苯胺蓝DNA酶琼脂对猪链球菌分泌性核酸酶A的活性进行检测。检测了从病猪内脏分离的猪链球菌致病株35株,33株核酸酶A基因PCR检测阳性(阳性比例为94.3%),其中有24株分泌活性检测为阳性(阳性比例68.6%);正常猪扁桃体分离株14株,PCR检测为阳性的10株(阳性比例71.4%),其中有核酸酶A分泌活性为8株(阳性比例57.1%),检测菌株中有2型猪链球菌44株,38株扩增出核酸酶A基因的片段PCR检测阳性并且分泌活性为阳性的有32株,猪链球菌1型、7型、9型、13型、1/2型各1株,均能扩增出核酸酶A基因的片段,但只有13型猪链球菌有核酸酶A分泌活性。对猪链球菌在不同生长时期核酸酶活性的检测显示,猪链球菌在培养4、8、16、32、48 h均有核酸酶A的分泌,并且C a2+和M g2+为分泌性核酸酶A的活性必需因子。

    2007年06期 No.132 922-926页 [查看摘要][在线阅读][下载 217K]
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  • 锌源和锌水平对断奶应激仔猪血清生化指标的影响

    汤继顺;吴金节;王希春;刘莉;徐雪松;刘智;

    选用(26±2)日龄"杜长大"三元杂交断奶仔猪100头,按体质量和性别随机分成5组,每组20头,分别饲喂基础日粮、基础日粮+2 000 mg/kg氧化锌、基础日粮+3 000 mg/kg氧化锌和基础日粮+250 mg/kg蛋氨酸锌、基础日粮+500 mg/kg蛋氨酸锌。试验期14 d。断奶后于前腔静脉采血,测定部分血清生化指标水平。结果表明,高锌日粮能显著提高断奶应激仔猪体质量(AW)、平均日增重(ADG)和日采食量(ADFI),降低料重比(F/G)和断奶后腹泻率。断奶后仔猪血清总蛋白(TP)、白蛋白(ALB)、球蛋白(GLOB)、总胆固醇(CHL)、碱性磷酸酶(ALP)水平显著或极显著下降(P<0.05或P<0.01),对照组仔猪血清尿素氮(SUN)含量在断奶后7 d极显著升高(P<0.01)。断奶前后,血清谷丙转氨酶(GPT)和谷草转氨酶(GOT)活性无显著差异。添加高锌显著提高断奶仔猪血清ALP水平,降低血清钙(Ca)和血清磷(P)浓度,对上述其他生化指标无显著影响。

    2007年06期 No.132 927-930+934页 [查看摘要][在线阅读][下载 135K]
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  • 不同性别肉鸡心肌易颤性、血清酶活性和电解质水平的比较

    栗绍文;乔健;董世山;彭鹏;李家奎;张维民;乔惠理;黄光华;

    对不同性别肉鸡的心肌易颤性、血清酶活性和电解质水平进行了比较,结果表明:(1)雄性肉鸡的电刺激诱颤阈和输钾诱颤阈均显著低于雌性肉鸡(P<0.05),二者均表明雄性肉鸡的心肌易颤性高于雌性肉鸡;(2)冷加压试验:冷加压5 min内心率和PT波宽出现了显著的变化,而且变化幅度雄性肉鸡均明显大于雌性肉鸡,提示雄性肉鸡的心肌易颤性高于雌性肉鸡;(3)雄性肉鸡LDH活性和CK活性极显著高于雌性肉鸡(P<0.01),而AST活性无显著差异(P>0.05);(4)K+、Na+、Cl-浓度均无显著差异(P>0.05)。

    2007年06期 No.132 931-934页 [查看摘要][在线阅读][下载 135K]
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临床兽医学

  • 南京地区犬尿石症的调查及尿结石成分的分析

    孙卫东;王金勇;刘永旺;王小龙;

    对南京地区5家具有代表性的动物医院中近2年犬尿石症临床病例进行了系统调查,并应用傅立叶红外光谱、扫描电镜结合X-射线能谱对84个自然病例的尿石样品的成分作了分析。结果表明:(1):南京地区犬尿石症的发病率为0.58%~1.31%,其中雄性占54.02%,雌性占45.98%。(2)南京地区犬尿结石有4种类型,即磷酸铵镁(鸟粪石)、草酸钙、尿酸盐和磷酸钙。描述了各种结石的显微结构特征,并讨论了犬尿石症的发病原因。

    2007年06期 No.132 935-937+941页 [查看摘要][在线阅读][下载 422K]
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  • 驯鹿狂蝇蛆(Cephenemyia trompe)超微形态结构

    杨晓野;李云章;包巴音仓;王志;

    利用扫描电子显微镜技术对驯鹿狂蝇蛆(Cephenemyia trompe)的形态结构进行了观察。结果表明,驯鹿狂蝇蛆体表的棘刺随所在不同部位而形态不一,但刺基较大,多数为圆丘形;期幼虫口钩周缘有内外2圈三角形口前齿;期幼虫与期幼虫相比,棘刺数量增多,棘刺变大;期幼虫后气门板上在光学显微镜下的所谓"气孔"实质上是个膜状结构,中间有一道弧形气缝。

    2007年06期 No.132 938-941页 [查看摘要][在线阅读][下载 510K]
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  • 犬黄嘌呤尿结石症的诊断:36例临床病理报告

    穆洪云;娄红军;谢伟东;张俭伟;董君艳;

    36只尿石症病犬表现体温下降,剧烈呕吐,食欲废绝,血清尿酸、肌酐、尿素氮升高,尿沉渣中有众多结晶体析出,经尿液和血清生化指标测定、B超探察、X线影像并结合饮食结构调查,确诊为黄嘌呤结石症。

    2007年06期 No.132 942-946页 [查看摘要][在线阅读][下载 298K]
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动物科学

  • 猪胚胎的OPS玻璃化冷冻

    张德福;刘东;吴华丽;郑筱峰;王昭凯;王少兵;

    以广西巴马小型猪为供体,采用超数排卵技术,采集5~6日龄具有完整透明带的胚胎(囊胚/桑葚胚),采用二步法OPS(Open pulled straw)玻璃化冷冻技术进行保存,即胚胎首先在冷冻液1(TCM199+20%FBS+10%EG+10%DMSO)中平衡3 min,然后立即转入冷冻液2(TCM199+20%FBS+20%EG+20%DMSO+0.4 mol/LSUC)中并在1 min内装管(每管含2~6枚胚胎),直接投入液氮保存;3个月后解冻移植给8头受体母猪(每头移入25~26枚胚胎),其中1头怀孕产仔(8头活仔),获得猪胚胎超低温(-196℃)冷冻后代。

    2007年06期 No.132 947-949页 [查看摘要][在线阅读][下载 78K]
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  • 水牛健康与闭锁优势卵泡中颗粒细胞凋亡的生物学特征

    何宝祥;杜玉兰;郑喜邦;余四九;

    采用组织学苏木精伊红(HE)染色与光镜检查、荧光显微镜检查和DNA电泳技术,检查了水牛健康优势卵泡(HDF)和闭锁优势卵泡(ADF)中颗粒细胞(GCs)凋亡的生物学特征。此外还应用孕酮处理早期的ADF,应用流式细胞术(FCM)方法检查该激素诱发GCs凋亡的情况。HE染色和荧光显微镜检查结果显示,HDF和ADF都含有凋亡的GCs,只是ADF中凋亡的GCs较多。凋亡GCs的HE染色表现细胞体积缩小,染色浓黑,荧光原位检测发现核浓缩。DNA电泳分析表明,在HDF中未发现GCs的DNA降解,而在ADF中因闭锁程度不同而表现不同程度的DNA降解,出现典型的"拖尾"带,但均未出现具有细胞凋亡特征的DNA"Ladder"。FCM检查结果见到早期的ADF存在着DNA的降解,孕酮处理使DNA降解碎片显著增加。上述结果提示,在水牛的HDF中,GCs的凋亡很少,在ADF中GCs的凋亡较多。水牛ADF中GCs的死亡,少量是以凋亡方式发生的,而坏死是主要方式。

    2007年06期 No.132 950-954+958页 [查看摘要][在线阅读][下载 427K]
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  • 山羊雄性胎儿生殖细胞建立干细胞系初探

    李莲军;何志云;苗永旺;程美玲;卢克焕;

    体外培养山羊50~68日龄雄性胎儿生殖细胞,并检测它们的碱性磷酸酶(AP)活性和Oct-4蛋白,探讨性别分化后的生殖细胞用于建立干细胞系的可行性及检测指标。当山羊胎儿睾丸细胞体外培养时,生殖细胞及其来源的细胞克隆均呈AP阴性和Oct-4蛋白阴性,其中有部分细胞克隆表现为AP假阳性。山羊胎儿生殖细胞克隆呈隆突状生长,多为圆形,与周围细胞界限分明,但克隆内细胞间界限不清。细胞克隆至少可以培养3代以上。研究结果显示,山羊雄性胎儿生殖细胞可以用于建立生殖系来源的干细胞系;AP和Oct-4蛋白不适宜用来检测体外培养的山羊胎儿生殖细胞及其来源的细胞系。

    2007年06期 No.132 955-958页 [查看摘要][在线阅读][下载 377K]
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  • 用单胚mRNA差显方法克隆羊早期胚胎发育阻滞形成的相关基因

    李拥军;敖红;孙桂金;

    为探讨山羊体外培养胚胎发育阻滞的发生机理,用单胚mRNA差异显示技术,对来源于体内发育和体外培养的山羊早期8~16细胞期胚胎的基因表达进行了研究,获得体内发育胚胎特异表达的一些片段,并对其中1个片段进行了分析。结果表明,该片段与犬信号肽酶复合体25亚基(SPC25)基因具有92%的同源性。SPC蛋白可通过切除相关前体蛋白的信号肽,成为成熟的分泌蛋白而影响和作用于早期胚胎发育过程。该基因可望对克服早期胚胎发育阻滞有重要作用。

    2007年06期 No.132 959-962页 [查看摘要][在线阅读][下载 177K]
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