预防兽医学

  • 马立克氏病病毒类白细胞介素8(vIL-8)的生物趋化作用

    高巍;秦爱建;张鑫宇;金文杰;邵红霞;

    利用杆状病毒表达系统,将病毒源性趋化因子病毒类白细胞介素8(vIL-8)基因克隆入转移载体pFastBacI,然后转化到DH10Bac感受态细胞中与Bacmid杆状病毒穿梭载体进行转座重组,通过重组子转染Sf9细胞得到含vIL-8的重组病毒rBacvIL-8。间接免疫荧光试验和雏鸡T、B淋巴细胞生物趋化分析结果表明,vIL-8在昆虫细胞中得到了表达,重组vIL-8在一定浓度范围内,可使鸡T、B细胞发生趋化作用,最高趋化指数分别为3.31±0.50和4.02±0.48,且是典型剂量依赖的钟形趋化性反应曲线;进一步分析发现vIL-8对B细胞趋化活性较对T细胞强?P<0.05),提示vIL-8对靶细胞的趋化性与病毒感染过程相关,在早期溶B细胞感染中有重要作用。

    2008年06期 No.138 623-626页 [查看摘要][在线阅读][下载 262K]
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  • 禽流感病毒NS1蛋白与鸡LY6E蛋白间的相互作用

    张万坡;田文霞;李建丽;程国富;毕丁仁;

    利用细菌双杂交系统,研究了禽流感病毒(Avian influenza virus,AIV)非结构蛋白(Nonstructurol1protein,NS1)和鸡淋巴细胞抗原复合体(LY6E)蛋白之间的相互作用。用RT-PCR方法克隆了AIV NS1基因和鸡LY6E基因的全长开放阅读框,将其克隆于细菌双杂交系统中的2个质粒中,成功构建了重组诱饵质粒pBT/NS1和重组目标质粒pTRG/LY6E。SDS-PAGE电泳表明,IPTG诱导后它们均得到正确表达。将重组质粒pBT/NS1和pTRG/LY6E共转化报告菌株,获得的阳性共转化子在含有3-AT和链霉素的组氨酸缺失的M9+筛选培养基上生长,表明AIV NS1蛋白和鸡LY6E蛋白之间存在相互作用,为AIV致病机制的研究提供了新的资料。

    2008年06期 No.138 627-630+645页 [查看摘要][在线阅读][下载 428K]
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  • 鸡减蛋性病毒病四联油乳剂灭活疫苗的研制与应用

    丁伯良;鄢明华;王英珍;李秀丽;张健;侯庆云;王东;张莉;

    选用鸡新城疫病毒Lasota株、鸡传染性支气管炎M41株、鸡减蛋综合征病毒EDSV76-AV127株及禽流感H9N2亚型Ss株等4株病毒作为制苗用毒种,采用中空纤维超滤浓缩技术对病毒抗原进行浓缩,制成四联油乳剂灭活疫苗。并对其进行了物理性状、无菌检验、安全性、免疫和效力检验及疫苗保存期试验等方面的检验,证明所制备疫苗完全符合质量标准。本疫苗在天津蓟县、宝坻、西青等地进行田间应用试验,共免疫蛋鸡2.8万羽份,结果表明,疫苗免疫保护率达95%。

    2008年06期 No.138 631-633页 [查看摘要][在线阅读][下载 88K]
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  • 缺氧与肉鸡心肌细胞c-fos和c-myc基因表达的关系

    王迎春;马利芹;董世山;利凯;张建军;陈立功;欧德渊;刘聚祥;乔健;

    利用细胞培养、原位杂交、免疫组化、图像分析等技术研究缺氧与肉鸡心肌细胞癌基因c-fos和c-myc表达的关系,进一步阐明缺氧与以右心肥大、衰竭为特征的肉鸡腹水综合征的关系。结果显示,缺氧显著引起心肌细胞内癌基因c-fos和c-mycmRNA的表达(c-fos mRNA:常氧149.6±22.4;缺氧205.4±57.6,P<0.01;c-myc mRNA:常氧155.2±25.7;缺氧197.4±26.2,P<0.01)。缺氧显著引起心肌细胞内癌基因c-fos和c-myc蛋白的表达(c-fos蛋白:常氧159.1±37.1,缺氧240.3±49.6;c-myc蛋白:常氧149.6±24.9,缺氧236.3±55.4;P<0.01)。结果表明缺氧显著诱发肉鸡心肌细胞内癌基因c-fos、c-myc的转录和表达,是启动心肌细胞肥大的重要原因。因此本研究进一步阐明缺氧是以右心肥大衰竭为特征的肉鸡腹水综合征的主要诱因。

    2008年06期 No.138 634-636页 [查看摘要][在线阅读][下载 101K]
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  • 重组鸡β-防御素在毕赤酵母中的表达及其抑菌活性

    万雪;赵建增;高英杰;宁官宝;邢海云;乔彦良;李朝阳;

    将鸡β-防御素(Gal-3)基因片段插入到酵母表达载体pPIC9k,在毕赤酵母GS115中进行表达,并研究了重组Gal-3的诱导、表达规律和抗菌谱。结果发现,重组菌株在接受诱导培养24h后开始有明显的Gal-3表达,诱导72h时达到表达高峰,至少持续表达96h以上。Tricine-SDS PAGE电泳发现,在约6000位置出现预期的蛋白质条带,约占分泌总蛋白的12.6%。证实,重组Gal-3能完全抑制金黄色葡萄球菌、铜绿假单胞菌、志贺痢疾杆菌、普通变形杆菌、伤寒沙门菌、化脓性链球菌、大肠杆菌、肠炎沙门菌等细菌的生长,其中大肠杆菌和肠炎沙门菌是对重组Gal-3最敏感的菌株。

    2008年06期 No.138 637-640页 [查看摘要][在线阅读][下载 346K]
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  • 猪圆环病毒2型ORF2和ORF1-2串联基因重组腺病毒对小鼠的免疫效果

    刘建营;丛丽媛;赵路易;王建龙;王晶钰;徐维加;宋长绪;

    为了研究含有猪圆环病毒2型(porcine circovirus type2,PCV2)基因的重组腺病毒作为基因工程疫苗的潜在应用价值,利用本实验室构建的PCV2的ORF2和ORF1-2串联基因的重组腺病毒对小鼠进行了免疫并对其免疫效果进行了研究。分别用表达ORF2和OFR1-2基因的重组腺病毒Ad-ORF2、Ad-ORF1-2经肌肉途径免疫Balb/c小鼠,对免疫后小鼠的血清抗体和脾淋巴细胞中各细胞亚群的比例及其增殖反应、自然杀伤活性和特异性杀伤活性进行了检测和比较。结果表明,用表达ORF2基因和ORF1-2串联基因的重组腺病毒Ad-ORF2、Ad-ORF1-2经肌肉途径免疫Balb/c小鼠后,随着免疫次数的增加,小鼠产生的针对PCV2ORF2基因的特异性抗体水平不断升高,第3次免疫后2周达到最高,但第3次免疫后4周有所下降;免疫重组腺病毒的试验组小鼠的脾淋巴细胞增殖活性、CTL杀伤活性和NK细胞杀伤活性与免疫空载体的对照组和免疫PBS的对照组比较均有显著的差异(P<0.05)。本研究为PCV-2基因工程疫苗的深入研究及应用奠定了基础。

    2008年06期 No.138 641-645页 [查看摘要][在线阅读][下载 242K]
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  • 稳定表达猪圆环病毒2型衣壳蛋白P815细胞系的建立

    宋勤叶;杨汉春;郭鑫;盖新娜;

    应用脂质体介导的基因转染方法,将表达猪圆环病毒2型(porcine circovirus,PCV2)衣壳蛋白的重组质粒pcDNA3.1-orf2转染P815细胞,筛选G418抗性单克隆细胞,并经PCR、RT-PCR和间接免疫荧光鉴定,随后对目的蛋白表达稳定性进行了检测。结果表明PCV2orf2基因已经整合进P815细胞基因组DNA中,ORF2编码的衣壳蛋白在获得的阳性P815细胞中稳定表达,建立了稳定表达PCV2衣壳蛋白的P815细胞系。该细胞系的建立为PCV2新型疫苗的研究提供了必要的实验材料,同时也可为其他病毒疫苗的研究提供有价值的参考。

    2008年06期 No.138 646-648+662页 [查看摘要][在线阅读][下载 218K]
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  • 牛传染性鼻气管炎病毒套式PCR检测方法的建立

    邓碧华;王凯民;唐泰山;张常印;雷治海;

    利用套式PCR技术建立一种快速检测牛传染病鼻气管炎病毒(bovine infectious rhinotracheitis virus,IBRV)并能区分野毒株和gB基因缺失疫苗的方法。根据基因库中牛传染性鼻气管炎病毒的gB和gE基因序列,应用pri mer5.0软件设计了gB/BN和gE/EN的2套套式PCR引物,分别对IBRV标准株进行PCR扩增,结果表明,这2套引物均能扩增出与设计目的片段大小一致的特异性条带;用此引物对同属的伪狂犬病毒、马立克氏病毒、鸭瘟病毒进行扩增,具有良好的特异性。引物gB/BN和gE/EN的检测灵敏度分别为0.01TCID50和0.1TCID50。

    2008年06期 No.138 649-651页 [查看摘要][在线阅读][下载 190K]
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  • 牛分支杆菌Mce4A蛋白对牛肺泡巨噬细胞iNOS、TNF-α、IL-6和IL-12表达的影响

    徐广贤;杨建民;周向梅;尹晓敏;赵德明;

    牛分支杆菌侵入巨噬细胞的机制,主要是由哺乳动物细胞侵袭蛋白(Mammalian cell-entry proteins,Mce)介导的,在牛分支杆菌的致病机理中具有重要的作用。为了探讨Mce4A蛋白在牛分支杆菌致病机理中的作用,用不同浓度的重组Mce4A蛋白刺激肺泡巨噬细胞,结果显示,Mce4A蛋白抑制巨噬细胞的活性;用重组Mce4A蛋白、MtbPPD、MbPPD和BCG刺激肺泡巨噬细胞,结果表明,Mce4A蛋白促使肺泡巨噬细胞TNF-α、i NOS和IL-6的表达上调,而对IL-12的表达没有影响。MbPPD和BCG促使肺泡巨噬细胞TNF-α、i NOS、IL-6和IL-12的表达上调;MtbPPD促使肺泡巨噬细胞TNF-α、IL-6和IL-12的表达上调,但是对i NOS的表达却没有影响。由此可见,Mce4A蛋白能够促使巨噬细胞分泌炎性细胞因子,促使机体发生炎性反应,在宿主细胞免疫应答反应中具有重要的作用。

    2008年06期 No.138 652-656页 [查看摘要][在线阅读][下载 591K]
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  • 驯鹿β-防御素reBD-1全长cDNA的克隆及序列分析

    杨银凤;郝永峰;赵艳芳;余兴帮;都格尔斯仁;

    为了获得驯鹿β-防御素reBD-1全长cDNA序列,根据已获得的reBD-1cDNA的已知序列设计1条序列特异性引物作为上游引物,反转录引物中的部分序列即3′接合器引物作为下游引物,克隆reBD-1cDNA的3′末端序列。另外,采用反向嵌套PCRRACE法,根据reBD-1cDNA的已知序列,设计1条5′末端磷酸化的特异性反转录引物和2对特异性反向嵌套PCR引物,首先进行反转录(RT),然后将mRNA反转录成的cDNA进行环化,最后进行反向嵌套巢式PCR,克隆reBD-1cDNA的5′末端序列。结果成功的克隆出了reBD-1cDNA的3′和5′末端序列,从而得到372bp的reBD-1cDNA全序列,其中包含44bp5′非翻译区(UTR)、192bp的开放读码框(ORF)、终止密码子TAA、118bp的3′UTR和poly(A)15。reBD-1cDNA全序列的获得为进一步研究其基因结构、基因表达和基因功能奠定了基础。

    2008年06期 No.138 657-662页 [查看摘要][在线阅读][下载 623K]
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  • 中国林蛙抗菌肽基因在毕赤酵母中的表达及其活性检测

    乔红伟;韩俊友;赵瑞利;胡博;谢芳;郑伟;雷连成;江利娜;韩文瑜;

    将中国林蛙皮肤抗菌肽基因(RC)克隆到毕赤酵母表达载体pPIC9K上,使之准确融合于а交配因子分泌信号,然后通过电击转化毕赤酵母宿主菌GS115/His-,构建pPIC9K/RC。将筛选出的高效表达的重组转化子用甲醇作诱导剂进行小瓶发酵,28~30℃诱导后,经Tricine SDS-PAGE检测,表达产物在а信号因子引导下分泌到培养基中。分泌到培养基中的表达产物能够抑杀细菌和抑制肿瘤细胞生长。对酵母重组子用酵母染色体DNA的通用引物和目的片段的引物进行PCR扩增。结果表明,中国林蛙皮肤抗菌肽基因能以单拷贝整合到毕赤酵母染色体基因组中并形成转录产物。

    2008年06期 No.138 663-666+671页 [查看摘要][在线阅读][下载 502K]
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  • 鲤鱼白细胞介素-8全长cDNA的克隆、鉴定及其差异表达分析

    谭业平;孙晓义;卢强;李莲瑞;邓洪宽;付宝权;

    用DD-RTPCR的方法获得差异显示片段A26,经地高辛标记作为探针对有丝分裂原刺激的鲤鱼外周血白细胞cDNA文库核酸杂交筛选,从0.8×104个重组噬菌体中,经过2轮筛选获得阳性克隆。序列分析表明该克隆含有1个大小为294bp编码98个氨基酸的完整开放阅读框,氨基酸序列含有Chemokine-CXC功能结构域,前体中含有22个氨基酸组成的引导肽,氨基酸序列比对显示成熟白细胞介素-8(IL-8)多肽中第12、13和14构成CXC基序,但之前无ELR基序。系统发生分析其与荷兰鲤鱼亲缘关系最近,氨基酸序列的同源性达89%。分离培养鲤鱼外周血白细胞,在不同条件下经LPS、PHA和ConA刺激后,提取总RNA,根据鲤鱼IL-8全长cDNA序列和β-ac-tin序列设计引物,利用半定量反转录聚合酶链式反应(RT-PCR)方法对鲤鱼外周血白细胞IL-8进行差异表达分析,结果显示,经有丝分裂原刺激后前期(4h)白细胞中IL-8的表达量明显增大,但随着时间推移(12、24h)并不一直比同期正常白细胞表达量大,表达量趋势成峰形图。

    2008年06期 No.138 667-671页 [查看摘要][在线阅读][下载 414K]
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  • 巨型艾美耳球虫(Eimeria maxima)地理株研究Ⅲ.11株巨型艾美耳球虫的同工酶分析

    李文超;陶建平;顾有方;沈永林;

    采用聚丙烯酰胺凝胶垂直板电泳(PAGE)技术,对11株Ei meria maxima和1株E.tenella的孢子化卵囊,进行了乳酸脱氢酶(LDH)、葡萄糖磷酸异构酶(GPI)、葡萄糖-6-磷酸脱氢酶(G6PD)、葡萄糖磷酸变位酶(PGM)和苹果酸脱氢酶(MDH)的同工酶分析。试验结果显示,E.maxima和E.tenella在LDH、GPI、G6PD、PGM和MDH的酶谱上有明显差异,而在11株E.maxima之间无差异,表明E.maxima的酶变异相当保守。

    2008年06期 No.138 672-675+683页 [查看摘要][在线阅读][下载 319K]
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  • 雏鸡感染柔嫩艾美耳球虫后血清生化指标的动态变化

    李佩国;李蕴玉;张香斋;贾清辉;张艳英;钟秀会;

    选择80只14日龄蛋公雏,随机均分为对照组和感染组。感染组每只鸡接种8.0×104个E.tenella孢子化卵囊,分别于感染后0、3、6、9、12d采血,测定血清生化指标。结果表明:与对照组相比,感染组血清尿酸(UA)、钾(K)、肌酐(Cre)、一氧化氮(NO)含量和乳酸脱氢酶(LDH)、碱性磷酸酶(ALP)、一氧化氮合成酶(iNOS)活性均有升高趋势,其中血清UA含量于3、6、9d显著升高(P<0.01或P<0.05);血清Cre、K含量和LDH活性在3、6d达显著水平(P<0.05或P<0.01);血清iNOS在6、9d显著升高(P<0.01或P<0.05);血清NO含量及ALP活性仅在6d升高明显(P<0.05或P<0.01)。血清甘油三酯(Tg)、总蛋白(TP)、白蛋白(ALB)、铁(Fe)、磷(P)含量和谷胱甘肽过氧化酶(GSH-Px)、超氧化物岐化酶(SOD)活性较对照组均呈下降趋势,其中血清Tg、TP及Fe含量在6、9d显著降低(P<0.05或P<0.01);血清P在3、9d差异显著(P<0.05或P<0.01);血清ALB含量和GSH-Px活性只在6d存在显著差异(P<0.05);血清SOD活性在3、6、9d均达显著水平(P<0.01)。血清钙(Ca)、丙二醛(MAD)含量及过氧化氢酶(CAT)活性变化不明显(P>0.05)。

    2008年06期 No.138 676-679+693页 [查看摘要][在线阅读][下载 183K]
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人兽共患病

  • 猪囊虫DNA疫苗pPCV的生物安全性

    姚文娟;邓小昭;刁振宇;孔晶;钟辉;周宗安;

    以猪囊虫DNA疫苗pPCV为研究对象,其生物安全性问题。将DNA疫苗pPCV以肌注方式免疫仔猪,分别于接种后1d、7d、4周、8周分离各组织,提取组织总DNA,利用PCR技术分析了质粒DNA在各组织的分布,以及与细胞基因组整合的可能性;同时采集环境样品,PCR法分析DNA疫苗上的CMV启动子基因、抗性基因和抗原基因在环境中发生转移和扩散的可能性。结果表明,在疫苗接种后第1天几乎所有组织都能检测到质粒DNA,随着时间的延续,仅在注射部位检测到质粒的存在,并且未发现质粒DNA整合入细胞基因组以及转化环境细菌。实验结果表明肌注DNA疫苗在注射部位以外组织中很快被清除,在注射部位组织及环境细菌中均未发现整合现象,因此认为该DNA疫苗对猪体和环境都是安全的。

    2008年06期 No.138 680-683页 [查看摘要][在线阅读][下载 225K]
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基础兽医学

  • 鸡脾脏中T淋巴细胞及其亚群的发育

    栾维民;杨树宝;杨丽华;张延林;高晶晶;何昭阳;

    利用免疫组化法结合计算机图像分析技术研究鸡不同生长发育阶段T淋巴细胞及其亚群在脾脏中的发育过程。研究发现,CD3+和CD8+T淋巴细胞最早出现在18日龄鸡胚,CD4+细胞出现在20日龄鸡胚。随着日龄增长,CD3+、CD4+和CD8+T淋巴细胞的数量均呈上升趋势,在21日龄雏鸡脾脏中达到稳定。CD3+和CD8+细胞在动脉周围淋巴鞘和红髓中大量分布,而CD4+细胞主要分布在动脉周围淋巴鞘中。脾小体中也存在CD4+细胞,但不存在CD8+细胞。CD4+细胞数量始终少于CD8+细胞,两者的比值基本维持在0.3~0.5。结果表明,鸡出壳后初期,脾脏的细胞免疫功能迅速增强,并在21日龄时达到成熟水平。

    2008年06期 No.138 684-687页 [查看摘要][在线阅读][下载 1799K]
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  • 鸡阿奇霉素的慢性毒性实验研究

    彭西;李梦云;李英伦;张富;崔恒敏;

    本试验采用固定剂量(1/20LD50,1/40LD50,1/80LD50)连续染毒法让大发乌骨蛋鸡120d连续摄入阿奇霉素。雏鸡生长缓慢。尸体剖检主要见肝脏体积肿大,呈黄色或浅黄色,胆囊肿大,胆汁淤滞;肠系膜点状出血。组织学变化以肝脏、肾脏、肠黏膜等组织器官的实质性细胞变性甚至坏死为特征。血液病理学变化主要是血清总蛋白含量前期降低,后期升高;白蛋白含量降低;球蛋白、总胆固醇、血糖含量和丙氨酸氨基转移酶、天门冬氨酸氨基转移酶、乳酸脱氢酶及碱性磷酸酶活性升高。

    2008年06期 No.138 688-693页 [查看摘要][在线阅读][下载 523K]
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  • 己烯雌酚对成年仓鼠附睾组织形态的影响

    杨筱珍;陈耀星;王子旭;

    探讨环境内分泌干扰物已烯雌酚(DES)对成年动物附睾组织形态的影响,将DES皮下注射成年仓鼠(剂量为每天1mg/kg)连续1周后,用光镜和电镜观察附睾组织形态的变化,并用脱氧核糖核酸末端转移酶介导的dUTP缺口末端标记法(TUNEL)检测附睾管上皮细胞和精子的凋亡情况。结果,DES处理后附睾头和附睾尾萎缩,附睾管变细。附睾管上皮细胞形态出现明显的改变,附睾上皮细胞和精子均出现大量凋亡,附睾管管腔内充满发育异常的生精细胞,少见长形精子。结果表明,DES能诱发成年动物附睾形态的改变,这可能是造成成年动物生精障碍的重要原因。

    2008年06期 No.138 694-696+701页 [查看摘要][在线阅读][下载 376K]
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  • 中药复方乳炎消注射液的研制

    荆娜娜;李引乾;张国士;孙雪峰;邱刚;姜成;

    以提高抑菌效果、中药浸膏得率和注射液澄明度为指标筛选中药复方乳炎消注射液处方及制备工艺,并用紫外分光光度计测定其主要有效成分氯原酸和黄芩苷的含量。结果,注射液选用金银花、黄芩、蒲公英、甘草、白芷作为处方组成,最佳工艺条件为10倍加水量在40KHz功率下超声处理2次、每次40min。紫外分光光度仪测得其主要有效成分氯原酸和黄芩苷的含量分别为1.150g/L和0.517g/L。结果表明,该注射剂的制备工艺合理、有效成分的含量测定方法简便、易行,乳炎消注射液符合药典规定的注射剂质量标准,能满足制剂学及兽医临床需要。

    2008年06期 No.138 697-701页 [查看摘要][在线阅读][下载 395K]
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  • 犊牛白血病的病理学观察

    范春玲;孙斌;朴范泽;

    对1头淋巴结肿大,最后死于各器官功能衰竭的犊牛进行病理学观察。其病理学变化表现为淋巴结、脾脏肿大,出血,正常结构破坏消失,分布有大量的肿瘤细胞。肝脏、心脏、肺脏、肾脏、骨髓和脑均有肿瘤细胞浸润。根据结果诊断为犊牛白血病。

    2008年06期 No.138 702-704页 [查看摘要][在线阅读][下载 529K]
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临床兽医学

  • 乳牛硒、碘代谢与酒精阳性乳的关系

    王振勇;王林;秦绪岭;

    通过分析酒精阳性乳患牛血清与乳清中硒(Se)和碘(Ⅰ)含量变化以及相关激素、酶水平的检测,探讨了机体Se、Ⅰ代谢与酒精阳性乳症发生的关系。试验结果显示酒精阳性乳患牛血清与乳清中Se、Ⅰ严重缺乏,谷胱甘肽过氧化物酶(GSH-Px)活性显著降低,甲状腺激素T3、T4水平显著降低。综合分析,酒精阳性乳患牛甲状腺机能低下;机体整体与乳腺局部Se和Ⅰ代谢紊乱,乳腺组织的代谢异常可能导致异常乳的分泌。

    2008年06期 No.138 705-706+710页 [查看摘要][在线阅读][下载 97K]
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  • 奶牛乳腺炎金黄色葡萄球菌纤连蛋白结合蛋白配基结合区基因的克隆与原核表达

    马保臣;秦卓明;董玉兰;柴同杰;袁小远;

    运用PCR方法扩增出奶牛乳腺炎分离株10A的Fnbp配基结合区基因,该片段大小为350bp左右,将其与PGEM-T载体连接,转化到受体菌DH5α中,用Amp/IPTG/X-gal琼脂平板筛选出含有重组子的菌株,鉴定成功后,测序结果表明:奶牛乳腺炎金黄色葡萄球菌10A的Fnbp配基结合区基因的序列与金黄色葡萄球菌Mu50、N315、MSSA476、MW2、RF122、COL以及NCTC8325的相应区域序列同源性分别为97%、97%、95%、95%、96%、94%和94%。将重组克隆载体质粒进行BamHⅠ和XhoⅠ双酶切回收后的DNA,定向插入到融合表达载体PET-32a中,构建了重组质粒PET-Fnbp,并转化到宿主菌BL21(DE3)株中,经IPTG4h诱导后,SDS-PAGE电泳表明,重组蛋白得到高效表达,重组蛋白主要以分泌形式存在,分子量35000左右,Ni柱纯化后的蛋白经Western-blotting检测,具有良好的抗原性和特异性。

    2008年06期 No.138 707-710页 [查看摘要][在线阅读][下载 218K]
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  • 实验性真胃左方变位奶牛血液、瘤胃液及真胃液参数的变化

    梁金平;张洪友;王相友;王哲;周昌芳;夏成;

    通过手术人为造成奶牛真胃左方变位,分别在术前和术后第3、5、7、9、11、13、15天检测血液、瘤胃液和真胃液一些指标的变化,结果,血氯、血钠升高(P<0.05),血pH和血糖下降(P<0.05)。真胃液中乙酸变化不显著(P>0.05),丙酸和丁酸增多(P<0.05)。瘤胃液中钠与乳酸升高(P<0.01),pH降低(P<0.01),丁酸变化不显着,乙酸降低(P<0.05),丙酸下降(P<0.01)。

    2008年06期 No.138 711-714页 [查看摘要][在线阅读][下载 195K]
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动物科学

  • 犊牛前脂肪细胞的传代培养

    宋文华;张才;车英玉;张辉;夏成;王贵;王哲;

    利用新生犊牛大网膜的脂肪组织原代培养脂肪细胞,待细胞贴满培养平皿底部90%时,进行细胞传代。观察细胞的形态;绘制细胞生长曲线、脂肪含量变化曲线;对细胞进行冻存与复苏,并计算复苏后的存活率。结果显示,细胞传代培养后,仍保持脂肪细胞蓄积脂肪的特性,细胞生长曲线与原代脂肪细胞的生长曲线依然一致,细胞冻存复苏后保持87%的存活率。

    2008年06期 No.138 715-718页 [查看摘要][在线阅读][下载 918K]
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  • “军牧1号”猪HSP70基因的克隆及序列分析

    吴永魁;周艳红;计红;李乾学;杨焕民;胡仲明;

    从"军牧1号"猪淋巴细胞中提取总RNA进行RT-PCR,将获得的HSP70cDNA克隆进pMD18-T载体,并转化至受体菌DH5α中,对阳性重组子进行DNA序列分析,结果构建的克隆质粒中含有编码HSP70的完整阅读框,它由1926个核苷酸组成,编码641个氨基酸,HSP70多肽相对分子质量为70143,C末端有高度保守的EEVD序列。与其他哺乳动物HSP70基因的同源性在81%~99%。氨基酸序列的同源性在81%~98%。与其他猪种比较,"军牧1号"猪HSP70编码基因有4个核苷酸发生替换,推定的翻译序列有2个氨基酸不同。系统进化树分析表明,"军牧1号"白猪与其他猪种的亲缘关系最近。证实了HSP70基因的高度保守性,并为HSP70的进一步研究和应用奠定了基础。

    2008年06期 No.138 719-723页 [查看摘要][在线阅读][下载 1001K]
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  • 松辽黑猪IGF-Ⅰ基因的单核苷酸多态性(SNP)及其与生长和胴体性状的关联性

    肖书奇;张树敏;张嘉保;李爽;高妍;姜宁;戴立胜;赵中利;赵志辉;

    采用PCR-SSCP技术分析了IGF-Ⅰ基因的5’UTR、外显子4在松辽黑猪群体中的遗传多态性。结果在所扩增的IGF-Ⅰ基因的5’UTR中的2个目的片段均未发现PCR-SSCP遗传多态;在第4外显子中发现PCR-SSCP多态,有2种等位基因A和B,有3种基因型AA型、AB型、BB型。对多态片段的测序分析表明:在IGF-Ⅰ基因第4外显子中存在有1碱基A→G突变。适合性卡方检验表明,该位点的不同基因型频率处于Hardy-Weinberg平衡。用最小二乘法分析IGF-Ⅰ基因第4外显子不同基因型与松辽黑猪生长和胴体性状的相关性,发现IGF-Ⅰ不同基因型对断奶后日增重有显著影响,AA型显著高于AB型和BB型(P<0.01)。AA型猪的瘦肉率显著低于AB型和BB型(P<0.01),而AA型猪的平均背膘厚显著高于AB型和BB型(P<0.01),对其他性状的影响差异不显著。结果表明,松辽黑猪IGF-Ⅰ基因应是影响生长和胴体性状的一个主效基因或与影响这些性状的主效基因紧密连锁。

    2008年06期 No.138 724-728页 [查看摘要][在线阅读][下载 793K]
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  • 绵羊卵母细胞和卵丘细胞体外成熟过程中ghrelin mRNA的表达

    杜晨光;曹贵方;吕东媛;宋艳华;唐博;火焱;

    运用实时定量RT-PCR技术检测了不同成熟培养时间绵羊卵母细胞和卵丘细胞ghrelin mRNA的相对表达量。结果表明,卵母细胞ghrelin mRNA相对表达量在16、24h呈现显著升高,而卵丘细胞ghrelin mRNA则随着成熟时间的延长表现显著降低。绵羊卵母细胞和卵丘细胞ghrelin mRNA的持续表达以及动力学变化提示这一新型分子在生殖功能上有潜在调控作用。

    2008年06期 No.138 729-731页 [查看摘要][在线阅读][下载 368K]
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综述