预防兽医学

  • 间接免疫荧光染色检测石蜡切片中的鸭病毒性肠炎病毒和抗原定位

    程安春;韩晓英;朱德康;汪铭书;袁桂萍;廖永洪;徐超;

    差速离心和蔗糖密度梯度离心纯化鸭病毒性肠炎病毒(DEV)免疫兔制备兔抗DEV高免血清后,用DEAE-Sephadex A-50柱层析纯化的兔抗DEVIgG建立了间接免疫荧光染色法(IFA)检测石蜡切片中DEV的方法。IFA的最佳条件为:石蜡切片用10mmol/L pH6.0的柠檬酸缓冲液为微波修复液微波修复10min,胰酶修复20min;10%小牛血清室温封闭30min;加入1∶25的兔抗DEVIgG于4℃孵育过夜;再加入FITC标记的羊抗兔IgG于37℃孵育45min。以建立的IFA对DEV人工皮下感染死亡鸭的各组织器官进行检测,在死亡鸭的脾脏、胸腺、法氏囊、肝脏、食道、十二指肠、直肠及肺脏中检测到DEV抗原。研究表明,IFA检测石蜡切片中的DEV具有直观、特异性强的优点,是对DEV进行检测和抗原定位的良好方法。

    2008年08期 No.140 871-875页 [查看摘要][在线阅读][下载 162K]
    [下载次数:380 ] |[网刊下载次数:0 ] |[引用频次:17 ] |[阅读次数:434 ]
  • 鹅副黏病毒胶体金检测卡的研究

    王翌;周铁忠;张喜悦;胡桂学;

    将制备的抗鹅副黏病毒(GPMV)JG04株单克隆抗体3A5标记胶体金颗粒,提纯的鸡IgG(抗JG04株GPMV)喷涂在NC膜上,建立检测GPMV的快速夹心胶体金免疫层析检测卡(ICS)。该检测卡检测鸡减蛋综合征病毒、传染性法氏囊炎病毒、传染性支气管炎病毒、小鹅瘟病毒鸡胚或鸭胚尿囊液和麻疹病毒、犬瘟热病毒细胞培养物呈阴性,与鹅副黏病毒、孔雀源新城疫毒株,鸽源新城疫毒株、新城疫La sota株、鸡源新城疫病毒的尿囊液出现阳性反应。敏感性试验结果表明,该检测卡可检出血凝效价为24以上的鹅副黏病毒尿囊液。

    2008年08期 No.140 876-878+887页 [查看摘要][在线阅读][下载 231K]
    [下载次数:140 ] |[网刊下载次数:0 ] |[引用频次:11 ] |[阅读次数:341 ]
  • 鹅副黏病毒核酸探针检测方法的建立与应用

    张伟;刁有祥;杜爱庆;高晓伟;张瑞平;刘方娜;臧大鹏;刘霞;

    根据GenBank中已发表的鹅副黏病毒F基因序列,设计合成1对引物,利用RT-PCR扩增出1条与目的片段大小一致,约856bp的基因片段,回收并纯化此PCR产物。用随机引物法合成cDNA,地高辛标记,建立了地高辛标记探针检测鹅副黏病毒的方法。该探针能与鹅副黏病毒核酸发生特异性杂交,最低检出限量为3ng/L;而与H9N2亚型禽流感病毒、鹅细小病毒、大肠杆菌等核酸杂交均为阴性。对疑似鹅副黏病毒感染病变组织检测结果表明,气管、肺脏、脾脏、肝脏均可检测出鹅副黏病毒,以气管的检出率为最高。该研究为鹅副黏病毒的诊断和流行病学调查提供了一种可靠的方法。

    2008年08期 No.140 879-882+896页 [查看摘要][在线阅读][下载 322K]
    [下载次数:73 ] |[网刊下载次数:0 ] |[引用频次:1 ] |[阅读次数:377 ]
  • 鸡传染性支气管炎病毒CK/CH/LDL05Ⅱ的分离鉴定及生物学特性

    马亚珍;李晓华;韩宗玺;邵昱昊;聂磊;龚利洋;张庆霞;孙怀刚;冉多良;刘胜旺;孔宪刚;

    采取2005年大连某鸡场发病鸡群萎缩的输卵管进行处理,经鸡胚尿囊腔接种SPF鸡胚,分离到1株病毒。通过致SPF鸡胚病变特征、病毒对鸡外周血红细胞凝集特性、病毒粒子形态学特征、对SPF鸡致病性及死亡率等方面的研究,发现病毒经鸡胚传毒至第3代可致鸡胚生长发育障碍(侏儒胚)、胚体严重卷曲且大腿及尾部有点状出血;病毒囊液不凝集鸡的外周血红细胞;在电镜下呈球形,病毒囊膜表面有疏松排列的棒状纤突,具有冠状病毒粒子的形态特征;以105.5×EID50/0.1mL的病毒接种15日龄的SPF雏鸡,鸡群发病率为22/22(100%),死亡率为12/22(54.5%)。根据以上结果确定该病毒为冠状病毒,命名为CK/CH/LDL05Ⅱ。在此基础上,用RT-PCR对CK/CH/LDL05Ⅱ的核蛋白基因进行了克隆、测序和分析。与GenBank中26株IBV参考毒株核蛋白基因序列进行比较分析,发现该毒株与我国2004年分离IBV毒株CK/CH/LDL/04Ⅱ的N基因推导氨基酸同源性最高(97.5%),表明两者具有较近的亲缘关系。这一结果不但从分子水平证实毒株CK/CH/LDL05Ⅱ是鸡传染性支气管炎病毒,而且表明该血清型的毒株最近连续2年存在于大连市的不同鸡场。

    2008年08期 No.140 883-887页 [查看摘要][在线阅读][下载 268K]
    [下载次数:187 ] |[网刊下载次数:0 ] |[引用频次:4 ] |[阅读次数:435 ]
  • 猪圆环病毒2型ORF2基因原核表达蛋白间接ELISA检测方法的建立及应用

    高超;高云航;么乃全;胡桂学;

    对含有已构建的猪圆环病毒2型(PCV2)ORF2基因原核表达质粒pET-ORF2s的BL21菌进行诱导表达,纯化重组蛋白包涵体,Western-blot检测纯化蛋白,将其作为抗原包被酶标板,优化间接ELISA试验条件,建立可检测PCV2血清抗体的间接ELISA方法。用该方法对吉林省多个种猪场收集的179份血清样品进行检测,总阳性率为42.5%。由此说明,本试验建立的PCV2血清抗体间接ELISA方法,具有较高的敏感性和特异性,适用于大规模猪场血清学检测。

    2008年08期 No.140 888-891+905页 [查看摘要][在线阅读][下载 298K]
    [下载次数:376 ] |[网刊下载次数:0 ] |[引用频次:27 ] |[阅读次数:424 ]
  • 猪圆环病毒2型抗体检测间接ELISA方法的建立

    丛丽媛;蒋智勇;张春红;陈德坤;宋长绪;

    用纯化的重组猪圆环病毒2型(PCV2)ORF2蛋白作为包被抗原,对各种条件进行优化(如抗原的包被、血清及酶标二抗作用时间、底物的选择等),建立了检测猪圆环病毒2型(PCV2)抗体的间接酶联免疫吸附试验(ELISA)的方法。结果显示,重组抗原最适包被浓度为0.5mg/L,最适包被条件为4℃过夜,血清稀释度1∶160,酶标二抗工作浓度1∶7500,待检测血清和酶标二抗的反应时间均为37℃,45min,底物37℃显色10min。阻断试验表明,建立的间接ELSA对PCV2抗体具有很好的特异性。板内和板间重复试验显示,同1份血清板内各孔的变异系数均值为2.78%,板间同一份血清D值变化不大,表明重复性好。

    2008年08期 No.140 892-896页 [查看摘要][在线阅读][下载 161K]
    [下载次数:285 ] |[网刊下载次数:0 ] |[引用频次:10 ] |[阅读次数:389 ]
  • 兔支气管败血波氏杆菌的分离鉴定及其免疫原性检测

    王伟;朱瑞良;李新苍;胡晓娜;王永花;

    2004年,山东省某一大型养兔场的20~30日龄幼兔突然大批发病死亡。病兔早期精神不振,多数病兔鼻腔流出脓性鼻液,随着病程的延长逐渐表现为呼吸困难,并出现鼻鼾声,以体况瘦弱,腹泻为主要症状。从中主要分离到4株细菌,根据其形态学特性、培养特性、生化特性、血清学反应特性等将分离菌鉴定为兔支气管败血波氏杆菌。然后对所分离到的兔支气管败血波氏杆菌菌株进行(G+C)mol%含量的测定以及16SrRNA的扩增,结果(G+C)mol%含量为61.7%~62.4%,与Kersters K结果相符(61.6%~62.6%);而该菌16SrRNA核苷酸序列与GenBank中收录的AF177666株禽波氏杆菌核苷酸序列同源性为82.7%,与本实验室保存的禽波氏杆菌及兔败血波氏杆菌参考菌株S80103株同源性高,分别为99.7%和99.9%。利用所分离到的兔支气管败血波氏杆菌菌株制备免疫原,通过免疫孕前母兔,使仔兔获得母源抗体,而使幼仔兔获得早期保护,效果较好。

    2008年08期 No.140 897-900+920页 [查看摘要][在线阅读][下载 273K]
    [下载次数:242 ] |[网刊下载次数:0 ] |[引用频次:13 ] |[阅读次数:419 ]
  • 用PCR与ELISA、RPLA对照检测乳腺炎金黄色葡萄球菌肠毒素和毒素休克综合征毒素-1

    马保臣;柴同杰;秦卓明;姜永强;董玉兰;蔡玉梅;

    用PCR方法对14个奶牛场分离得到的临床型乳腺炎金黄色葡萄球菌(金葡菌)124株,隐性乳腺炎金葡菌213株,山羊临床型乳腺炎金葡菌12株进行超抗原毒素sea,seb,sec,sed.see和tst基因的分子调查,结果表明:奶牛标本肠毒素基因和tst基因的阳性率为27.42%,隐性乳腺炎为1.41%,山羊标本为33.3%。奶牛标本产生毒素的类型以SEA,TSST-1和SEC为主,山羊标本产生肠毒素的类型以SEC为主。对于肠毒素基因和tst基因PCR阳性的金葡菌同时用ELISA和RPLA检测,3种方法检测结果基本一致。

    2008年08期 No.140 901-905页 [查看摘要][在线阅读][下载 188K]
    [下载次数:245 ] |[网刊下载次数:0 ] |[引用频次:11 ] |[阅读次数:380 ]
  • 双重PCR检测奶牛乳腺炎金黄色葡萄球菌粘附素clfa A和Fnbp A基因

    杨宏军;高运东;王长法;杨少华;仲跻峰;赵宏坤;

    利用设计合成的特异性引物对金黄色葡萄球菌进行PCR扩增,将目的基因回收并连接到T载体,鉴定后进行测序验证,然后对本实验室所分离鉴定的临床分离株进行双重PCR检测。结果显示,PCR产物经过电泳成像显示,仅有金黄色葡萄球菌分别在293bp和642bp处出现特异性条带。通过对金黄色葡萄球菌临床分离株双重PCR检测发现,其中95%以上存在粘附素基因clfa A和Fnbp A。证明本试验建立的双重PCR检测金黄色葡萄球菌粘附素基因的方法具有良好的特异性和可靠性。

    2008年08期 No.140 906-908+934页 [查看摘要][在线阅读][下载 651K]
    [下载次数:218 ] |[网刊下载次数:0 ] |[引用频次:4 ] |[阅读次数:345 ]
  • 绿色荧光蛋白在秀丽隐杆线虫中的表达

    周前进;庞林海;张红丽;杜爱芳;

    为探讨增强型绿色荧光蛋白(EGFP)基因在秀丽隐杆线虫体内的异源表达,以及电穿孔技术在线虫基因转化中应用的可能性,根据秀丽隐杆线虫Act-1基因序列设计引物,以其基因组DNA为模板,进行PCR扩增,成功扩增出Act-1启动子。将PCR产物与pUCm-T载体连接后,转化至DH5α感受态细胞,筛选出阳性克隆并测序。pEG-FP-N1真核表达载体经双酶切去掉CMV启动子序列,补平自连成载体pEGFP-4.1(4.1kb)。pEGFP-4.1和T载体上的Act-1启动子序列分别经双酶切,连接筛选阳性克隆,并进行酶切鉴定构成pAct-EGFP绿色荧光蛋白表达载体。通过电穿孔法转化秀丽隐杆线虫,通过PCR检测及激光共聚焦显微镜观察发现绿色荧光基因在虫体有明显的表达。

    2008年08期 No.140 909-913页 [查看摘要][在线阅读][下载 789K]
    [下载次数:876 ] |[网刊下载次数:0 ] |[引用频次:4 ] |[阅读次数:363 ]
  • 嗜线虫真菌Duddingtonia flagrans减少绵羊粪便中线虫感染性幼虫剂量测定

    王治才;李建军;王琳;杨学云;玛利亚姆;

    嗜线虫真菌Duddingtonia flagrans是目前发现的一种最具有动物胃肠道线虫病生物防治应用潜力的真菌。为了解该菌捕杀绵羊粪便中感染性幼虫效果与剂量的关系,为今后该制剂应用和质量检验标准的制定提供依据,用不同剂量的厚垣孢子,分别以不经消化道直接加入感染羊粪便,或作添加剂通过饲喂进入消化道后采集直肠粪便,经培养检测感染性幼虫数量的变化。结果表明,嗜线虫真菌Duddingtonia flagrans具有良好的捕杀胃肠道线虫感染性幼虫的生物学特性。以制剂厚垣孢子4×103/g剂量加入感染羊粪便,或以每天5×105/kg体质量的剂量饲喂绵羊,可使粪便培养物中线虫感染性幼虫数减少83.6%~87.5%。

    2008年08期 No.140 914-916页 [查看摘要][在线阅读][下载 96K]
    [下载次数:107 ] |[网刊下载次数:0 ] |[引用频次:4 ] |[阅读次数:376 ]
  • 捻转血矛线虫ES24抗原基因的原核表达及其免疫诊断的应用

    杜爱芳;李孝军;侯玉慧;

    将ES24基因从pUC18-ES24重组质粒中亚克隆到pET-30a原核表达载体上,构建重组表达质粒pET-30a-ES24,转化大肠杆菌,IPTG诱导表达,经SDS-PAGE电泳和Western-blot分析表明,表达蛋白相对分子质量约为30 000,可被6×His抗体和捻转血矛线虫阳性血清所识别。纯化后的重组表达蛋白作为诊断抗原具有良好的免疫反应性和特异性,可用作免疫诊断试剂。

    2008年08期 No.140 917-920页 [查看摘要][在线阅读][下载 418K]
    [下载次数:120 ] |[网刊下载次数:0 ] |[引用频次:4 ] |[阅读次数:355 ]

人兽共患病

  • 禽流感病毒H5N1亚型NS1蛋白在大肠杆菌中的高效表达和多克隆抗体的制备

    俞瑞卿;张传福;周晓巍;王玉炯;

    克隆了NS1蛋白基因并构建了重组表达质粒pTIG-Trx-E-tag-NS1。该质粒在大肠杆菌BL21中经IPTG诱导后获得了大量的可溶性表达蛋白,重组蛋白表达水平达到了细菌总蛋白的42.16%。经Anti-Etag进行Western blotting检测结果为阳性。后经金属螯和层析纯化获得纯度约为95%的蛋白样品,用纯化后的NS1蛋白直接作为抗原免疫家兔产生抗血清,经ELISA检测抗体效价达1∶256 000,通过Western blot检测,与商品化的抗E-tag单抗对照,显示NS1抗体获得了与抗E-tag单抗同样好的特异性。结果证明,成功地制备了特异性的NS1多克隆抗体。

    2008年08期 No.140 921-925+942页 [查看摘要][在线阅读][下载 543K]
    [下载次数:212 ] |[网刊下载次数:0 ] |[引用频次:3 ] |[阅读次数:363 ]
  • 日本血吸虫铁蛋白基因在油菜中的表达

    袁鑫;黄复深;邱元;郝知友;陈尔曼;

    根据GenBank日本血吸虫铁蛋白基因(SjFer)的序列设计1对特异性引物,利用PCR从cDNA文库中扩增SjFer基因,与T载体连接并测序。常规方法构建植物表达载体SjFer/pBI121,采用根癌农杆菌介导法转化油菜子叶,组织培养卡那霉素抗性筛选,获得转化植株。转化植株通过PCR和Northern-blot杂交进行鉴定。结果表明SjFer可在油菜中正确表达。该研究为进一步研究转基因油菜工程疫苗奠定了基础。

    2008年08期 No.140 926-929页 [查看摘要][在线阅读][下载 234K]
    [下载次数:92 ] |[网刊下载次数:0 ] |[引用频次:3 ] |[阅读次数:301 ]
  • 猪囊尾蚴及其培养细胞的超微结构观察

    米晓云;才学鹏;巴音查汗;王佩雅;孙晓林;骆学农;

    应用透射电镜和扫描电镜观察了采自猪体的猪囊尾蚴及其体外培养细胞的形态结构特征。猪囊尾蚴的基本结构包括皮层、间质层和实质区。皮层密布微绒毛;内部是实质区,含光面内质网,大量囊泡和圆形空泡。线粒体多分布在基质区的近基膜处。皮层以基膜与间质分开。间质层为网状纤维样,并形成分支深入实质区,起支架作用。肌组织位于间质层中,间质层向内为实质区,有实质细胞、皮层细胞、成肌细胞及成石灰颗粒细胞。排泄系统中除不同孔径的排泄管外,还有三五成群的焰细胞与毛细管相通。体外培养的细胞结构与体内自然生长的无明显差异,猪囊尾蚴培养细胞的内部细胞器较其体细胞清晰,与体细胞相比培养细胞有些细胞内部细胞器减少。猪囊尾蚴细胞的外部形态主要以圆形、椭圆形为主,多数细胞表面有凹槽、脊及绒毛。

    2008年08期 No.140 930-934页 [查看摘要][在线阅读][下载 2660K]
    [下载次数:163 ] |[网刊下载次数:0 ] |[引用频次:7 ] |[阅读次数:336 ]

基础兽医学

  • 钙信号转导与缺氧诱发肉鸡心肌细胞c-fos和c-myc基因表达的关系

    董世山;王迎春;马利芹;利凯;张建军;陈立功;赵立红;刘聚祥;乔健;

    利用细胞培养、免疫组化、原位杂交、图像分析技术研究钙信号与缺氧诱发心肌细胞癌基因c-fos、c-myc表达的关系,进一步阐明钙信号转导与以右心肥大衰竭为特征的肉鸡腹水综合征(AS)的关系。结果显示,钙通道拮抗剂异搏安(V)、硝苯吡啶(N)、环孢霉素A(C)显著抑制缺氧引起的癌基因c-fos和c-myc mRNA的表达(c-fosmR-NA:常氧149.6±22.4;缺氧205.4±57.6,缺氧+V151.3±20.1,缺氧+N154.5±25.2,缺氧+C 166.5±22.1;c-myc mRNA:常氧155.2±25.7;缺氧197.4±26.2,缺氧+V 160.5±19.4,缺氧+N 171.3±25.4,缺氧+C158.9±23.6)。同时显著抑制缺氧引起的癌基因c-fos和c-myc蛋白的表达(c-fos蛋白:常氧159.1±37.1,缺氧240.3±49.6,缺氧+V 165.2±52.2,缺氧+N 166.5±49.8,缺氧+C 190.8±33.6;c-myc蛋白:常氧149.6±24.9,缺氧236.3±55.4,缺氧+V178.9±42.1,缺氧+N174.4±36.3,缺氧+C 164.8±49.5)。这些结果揭示,异搏安和硝苯吡啶(心痛定)能够显著抑制缺氧引起的癌基因表达,表明钙信号转导系统参与缺氧引起心肌细胞癌基因的表达过程。Cyclosporin A可显著抑制缺氧引起的癌基因的转录表达,表明钙信号转导系统中的Ca2+/Ca M-CaN转导通路在心肌细胞肥大过程中具有重要作用。钙信号转导激活引起心肌细胞肥大的癌基因c-fos和c-myc的转录表达,表明钙信号通路可能与AS的发生发展密切相关。

    2008年08期 No.140 935-938页 [查看摘要][在线阅读][下载 143K]
    [下载次数:131 ] |[网刊下载次数:0 ] |[引用频次:1 ] |[阅读次数:355 ]
  • 血小板源性生长因子(PDGF-BB)促进山羊骨髓间充质干细胞向平滑肌细胞分化

    张舒;周杨;关思宇;梁霄玉;欧阳红生;

    将血小板源性生长因子(PDGF-BB)作用于骨髓间充质细胞,分别于5、7d后用抗α平滑肌肌动蛋白(α-SMA)单克隆抗体进行免疫组化分析,定量RT-PCR检测α-SMA mRNA的表达,透射电镜观察细胞超微结构。免疫组化结果显示,PDGF-BB诱导组表达α-SMA的细胞数约为95%,而对照组表达α-SMA的细胞数约为5%。免疫组化图象分析结果显示,5、7d PDGF-BB诱导组抗α-SMA着色平均灰度值小于对照组。RT-PCR结果显示,PDGF-BB诱导组有α-SMA mRNA表达,而对照组则没有。透射电镜显示,骨髓间充质细胞经过诱导后细胞浆内出现肌丝样结构。结果表明,PDGF-BB可以促进骨髓间充质干细胞向平滑肌细胞分化。

    2008年08期 No.140 939-942页 [查看摘要][在线阅读][下载 235K]
    [下载次数:147 ] |[网刊下载次数:0 ] |[引用频次:4 ] |[阅读次数:405 ]
  • 水泡性口炎病毒感染犊牛口腔黏膜上皮细胞的超微结构变化

    宋德光;祝万菊;王占锋;贺文琦;韩岩岩;陆慧君;高丰;

    将水泡性口炎病毒(VSV)接种于原代培养的犊牛口腔黏膜上皮细胞(CPMBCs),通过对不同时间收集的感染细胞制作超薄切片,观察病毒在该细胞上的形态发生。结果表明,VSV能导致CPMBCs出现典型的CPE和超微结构变化,主要表现为细胞圆缩、线粒体肿胀、胞浆空泡化,病毒游离于胞浆内或以出芽方式进入胞浆空泡内,病毒主要在细胞突起处进行出芽增殖,获得囊膜而成熟。感染24h后,细胞出现严重的纤维化,细胞骨架明显。该研究结果为VSV的嗜上皮机制研究提供了重要的依据。

    2008年08期 No.140 943-945+952页 [查看摘要][在线阅读][下载 1534K]
    [下载次数:137 ] |[网刊下载次数:0 ] |[引用频次:0 ] |[阅读次数:416 ]
  • 鸵鸟新城疫实验病理学研究

    尹燕博;单虎;王建琳;刘福辰;田振宇;将正军;郭福生;陆明哲;

    用鸡源新城疫(ND)强毒株F48E9和鸵鸟源新城疫强毒株O-XJ99-12,对不同免疫状态下2~4月龄鸵鸟进行动物试验。动物发病后经剖检、组织切片、病毒分离等方法证实:鸵鸟源和鸡源新域疫病毒(NDV)毒株,经静脉和黏膜感染非免疫鸵鸟,均可引起特征性的鸵鸟ND症状和病变,对鸡胚致病力强的NDV毒株,对非免疫鸵鸟的致病力也强;鸵鸟ND的免疫临界点,HI抗体效价最低为5log2。

    2008年08期 No.140 946-952页 [查看摘要][在线阅读][下载 6551K]
    [下载次数:177 ] |[网刊下载次数:0 ] |[引用频次:5 ] |[阅读次数:334 ]
  • 固始鸡免疫器官内细胞增殖动态变化

    李奎;孙桂荣;康相涛;李春丽;刘英;刘忠虎;李明;王永才;

    应用流式细胞术研究了固始鸡免疫器官内细胞增殖的动态变化。结果表明:(1)固始鸡不同免疫器官内细胞均以G1期细胞为主,少量细胞为S期和M期,无异倍体细胞。不同免疫器官细胞周期动态变化相似,部分发育阶段之间存在差异。(2)不同发育阶段固始鸡免疫器官细胞增值指数由大到小依次是脾脏、法氏囊和胸腺;在8周龄(胸腺)、或12周龄(脾脏和法氏囊)以前,免疫器官细胞增值指数处于上升阶段,而后逐渐下降,这一结果与固始鸡免疫器官生长发育的测定及其动态变化的分析基本一致。

    2008年08期 No.140 953-956页 [查看摘要][在线阅读][下载 144K]
    [下载次数:141 ] |[网刊下载次数:0 ] |[引用频次:15 ] |[阅读次数:339 ]
  • 胶体金试纸条半定量检测鸡蛋中磺胺嘧啶残留

    王喜亮;金秀娥;李奎;熊宁;易俊东;刘百红;卢芳;刘群;毕丁仁;

    采用竞争反应模式建立了鸡蛋中磺胺嘧啶(SD)残留的胶体金试纸条半定量检测方法。该试纸条由吸样材料、玻璃纤维、硝酸纤维素膜、吸水材料组成。用柠檬酸三钠还原法制备胶体金,胶体金标记SD单克隆抗体;SD竞争物包被于硝酸纤维素膜,制成胶体金试纸条。该试纸条在15min内可完成对SD残留的半定量检测,读条系统判定灵敏度为5μg/L,肉眼判定检测限为10μg/L,与其他磺胺类药物无交叉反应,在鸡蛋中的回收率为71%~96.7%;用试纸条与ELISA对来自动物试验的52份鸡蛋样品进行对比检测,以10、100ng/g为cutoff值,两者阳性(大于100ng/g)符合率为100%,弱阳性(10~100ng/g)符合率为72.7%,阴性(小于10ng/g)符合率为84.2%,两者总符合率为94.2%。该方法灵敏度高,简便快速,无需特殊仪器设备,有良好的开发应用前景。

    2008年08期 No.140 957-961页 [查看摘要][在线阅读][下载 721K]
    [下载次数:385 ] |[网刊下载次数:0 ] |[引用频次:13 ] |[阅读次数:351 ]

简讯

临床兽医学

  • 相思子毒素-a双抗体夹心ELISA法的建立和初步应用

    李小兵;谢光洪;周昌芳;张志刚;周晓翠;宋文学;张乃生;王兴龙;高宏伟;王哲;

    以已制备的抗相思子毒素-a(abrin-a)的单克隆抗体(McAb)4G1和兔源多抗建立了abrin-a双抗体夹心ELISA法。abrin-a质量浓度在15.62~250.00μg/L的范围内,质量浓度的对数值与其D450值呈直线相关,回归方程为y=1.0467x+0.5277(R2=0.9992,n=5),检测灵敏度为7.81ng/mL。该法与相思子凝集素、蓖麻毒素(ri-cin)和蓖麻凝集素无交叉反应。经初步用于人工污染abrin-a香肠样品和自来水样品检测,回收率分别为92.0%和85.0%,变异系数(CV)<6%。表明该检测方法具有快速、特异、灵敏等特点,可望用于食品、饲料和饮用水中abrin-a检验。

    2008年08期 No.140 962-964+967页 [查看摘要][在线阅读][下载 127K]
    [下载次数:129 ] |[网刊下载次数:0 ] |[引用频次:7 ] |[阅读次数:463 ]
  • 硼对肉乌骨鸡铜中毒临床效应的影响

    邓俊良;陈俊杰;邓,左之才;王娅;崔恒敏;

    选用560只1日龄肉用乌骨鸡,采用二因子多水平随机化试验设计研究日粮硼对铜中毒肉鸡的影响。试验中分别在玉米-豆粕型基础日粮中(Cu 50.9mg/kg,B 10.1mg/kg)添加549.1、749.1mg/kg的铜和49.1、109.1mg/kg的硼。观察各组雏鸡生产性能、临床表现及病理学变化。结果表明,硼对肉用乌骨鸡铜中毒具保护效应。

    2008年08期 No.140 965-967页 [查看摘要][在线阅读][下载 100K]
    [下载次数:49 ] |[网刊下载次数:0 ] |[引用频次:1 ] |[阅读次数:323 ]
  • 代谢产物对体外培养新生犊牛肝细胞MTP mRNA表达的影响

    陈仕均;唐海蓉;王哲;孙玉成;邓俊良;

    为了阐明代谢产物在奶牛肝脂蛋白组装与转运过程中的调控作用,通过向体外培养的新生犊牛肝细胞添加非酯化脂肪酸(NEFA)、β-羟丁酸(BHBA)和葡萄糖,采用内对照RT-PCR方法检测代谢产物对体外培养新生犊牛肝细胞MTP mRNA丰度的影响。结果显示,随着培养液中NEFA和葡萄糖浓度的升高,MTP mRNA的丰度呈现剂量依赖性上调(P<0.01);随着BHBA浓度的增加,MTP mRNA的丰度先升高后降低(P<0.01或P<0.05)。结果表明,NEFA和葡萄糖对肝细胞MTP mRNA表达具有促进作用,呈剂量依赖性:BHBA对肝细胞MTP mR-NA表达具有低剂量促进高剂量抑制的双重作用。

    2008年08期 No.140 968-972页 [查看摘要][在线阅读][下载 408K]
    [下载次数:80 ] |[网刊下载次数:0 ] |[引用频次:0 ] |[阅读次数:474 ]
  • 不同CO_2气腹压对山羊肝、肾功能的影响

    李建军;王洪斌;熊惠军;张建涛;高利;

    选择21只健康山羊随机均分为A、B、C 3组。分别用1.33、2.0、2.4kPa的气腹压值进行充气腹试验,以探讨不同CO2气腹压对山羊肝、肾功能的影响。结果表明:CO2气腹压可引起ALT、AST、ALP、Tbil、Crea升高和U-rea降低;在放气后1或2、3 d时,B、C 2组与A组相比较对肝、肾功能的影响差异显著;在放气后4d,A组肝、肾功能基本能恢复到气腹前水平,B、C 2组放气后4d尚未恢复到气腹前水平。当气腹压≥1.06 kPa时,均能够保证山羊的腹腔充分膨胀隆起。本试验确定了在山羊腹腔镜手术充气腹时,应选用1.06kPa≤PP≤1.33kPa气腹压值为宜,从而为今后开展山羊腹腔镜手术奠定了理论基础。

    2008年08期 No.140 973-977页 [查看摘要][在线阅读][下载 179K]
    [下载次数:153 ] |[网刊下载次数:0 ] |[引用频次:8 ] |[阅读次数:406 ]
  • 应用流式细胞术检测脂肪肝综合征肉鸡肝细胞生长周期与凋亡

    吴强;彭西;李英伦;徐之勇;崔恒敏;

    用高能低蛋白饲料饲喂1日龄三黄肉鸡7周,建立脂肪肝综合征(FLS)病理模型,以流式细胞术的方法检测肝细胞生长周期及细胞凋亡,以探讨FLS的发病机理。与对照鸡比较,5~7周龄试验鸡肝细胞S期、G2+M期和增殖指数(PI)降低,G0/G1期升高;肝细胞凋亡率4~7周龄显著升高(P<0.01)。结果表明,高能饲料在体内氧化,产生大量自由基,损伤肝细胞DNA,使肝细胞分裂增殖减缓并发生凋亡,同时低蛋白饲料缺少转运脂质的必要条件,脂肪堆积于肝细胞内,肝细胞的功能受损而发生FLS。

    2008年08期 No.140 978-981页 [查看摘要][在线阅读][下载 120K]
    [下载次数:289 ] |[网刊下载次数:0 ] |[引用频次:1 ] |[阅读次数:404 ]

动物科学

  • 还原型谷胱甘肽对肉鸡生长及血清IGF-1水平、组织IGF-1 mRNA表达的影响

    刘丽;韦建福;傅伟龙;吴觉文;郭慧;陈静;

    9日龄黄羽雌性肉鸡1 000只随机分为A、B、C、D 4个组,每组设5个重复,每个重复50只。在A、B、C、D组的日粮中分别添加剂量为0、80、120、160mg/kg的还原型谷胱甘肽(GSH),饲养期84 d。观察GSH对肉鸡生长性能、血清类胰岛素生长因子1(IGF-1)、T3、T4水平以及组织IGF-1 mRNA表达的影响。结果表明,(1)添加GSH的鸡只血中GSH水平显著高于对照组(A组);(2)添加GSH的鸡只平均体质量和平均日增重均高于A组,其中B组显著高于A组;(3)添加GSH的鸡只血中IGF-1水平显著高于A组,血中T3水平明显升高,T4水平有升高趋势;(4)各试验组肝脏IGF-1 mRNA的表达水平有所增高,但不明显。35d时,C组胸肌组织的IGF-1 mRNA表达水平显著性高于A组。结果提示,肉鸡饲粮中添加GSH可增强肝脏IGF-1的分泌和肌肉组织IGF-1 mRNA的表达,血中IGF-1水平升高,而促进鸡只生长。

    2008年08期 No.140 982-986页 [查看摘要][在线阅读][下载 158K]
    [下载次数:267 ] |[网刊下载次数:0 ] |[引用频次:21 ] |[阅读次数:347 ]
  • 蒙古绵羊雌性生殖道β-防御素(sBD-1)的序列分析及组织表达

    唐博;曹贵方;吕东媛;杜晨光;

    从蒙古绵羊输卵管、子宫、子宫颈、阴道组织中提取总RNA,根据GenBank中羊的β-防御素的cDNA序列设计合成引物,通过RT-PCR进行cDNA扩增,获得了301bp的片段。将该片段克隆于pMD-18T载体后进行序列分析,确认该PCR产物为β-防御素。通过相同的RT-PCR反应体系和条件后,对PCR产物进行琼脂糖凝胶电泳,以β-actin为参照,根据PCR产物的亮度推断不同组织中β-防御素的表达量。结果,蒙古绵羊雌性生殖道上皮各组织均有β-防御素表达,说明β-防御素在蒙古绵羊雌性生殖道的先天免疫中起重要作用。β-防御素的表达量在雌性生殖道各组织内不同,提示雌性生殖道各组织的防御功能强度不同。

    2008年08期 No.140 987-990页 [查看摘要][在线阅读][下载 555K]
    [下载次数:170 ] |[网刊下载次数:0 ] |[引用频次:27 ] |[阅读次数:504 ]
  • 下载本期数据