预防兽医学

  • 猪圆环病毒2型竞争定量PCR检测方法的建立及应用

    司兴奎;郭鑫;杨汉春;

    根据猪圆环病毒2型(PCV2)BF的序列设计引物,扩增472bp的ORF2部分基因片段,并克隆到pGEM-T载体中,构建含PCV2-ORF2部分基因片段的重组质粒。利用XbaⅠ限制性内切酶消化后获得共用同1对引物但缺失196bp的竞争重组子。通过重组质粒与竞争重组子间的竞争定量PCR方法(qc-PCR),建立猪PCV2-ORF2的标准竞争曲线和直线回归方程,并对PCV2试验感染猪血清中PCV2核酸的动态变化进行了研究。

    2008年10期 No.142 1115-1117页 [查看摘要][在线阅读][下载 172K]
    [下载次数:134 ] |[网刊下载次数:0 ] |[引用频次:4 ] |[阅读次数:441 ]
  • 实时荧光定量PCR检测猪细小病毒

    李小康;崔保安;陈红英;魏战勇;郑兰兰;赵丽;吕晓丽;

    根据已报道的猪细小病毒基因组序列,设计并合成了引物和探针,从猪细小病毒(PPV)感染的细胞中提取DNA,经PCR扩增,产物纯化后与pGEM-T-easy连接,转化大肠杆菌JM109,筛选后得到重组标准品质粒,对重组标准品质粒进行PCR和测序鉴定,表明目的片段已经成功克隆。将104~108拷贝反应的重组标准品质粒进行荧光定量PCR,系统自动分析软件显示Ct值与标准品浓度的对数之间存在良好的线性关系。动力学曲线分析表明,在该反应体系和反应条件下,标准曲线的灵敏度为102拷贝。本方法的建立为猪细小病毒感染的早期诊断奠定了基础。

    2008年10期 No.142 1118-1121页 [查看摘要][在线阅读][下载 203K]
    [下载次数:316 ] |[网刊下载次数:0 ] |[引用频次:12 ] |[阅读次数:385 ]
  • 猪伪狂犬病病毒疫苗株Bartha-K61在犬科动物体内的安全性评价及免疫实验

    袁子国;张秀香;高胜言;王晓虎;张守峰;扈荣良;

    为了对猪伪狂犬病病毒(PRV)疫苗株Bartha-K61在犬科动物体内的安全性和免疫原性作出评价,通过3种免疫途径(肌肉注射、滴鼻免疫和口服免疫)对犬进行免疫(2mL,6×108PFU/mL),并在免疫结束后通过组织病理切片、免疫组化、临床表现、产仔性能、排泄物中病毒存留情况进行了检测。结果发现,在PRV易感器官内未发现病毒抗原,且疫苗接种犬体温正常,精神状态良好,产仔正常,无任何不良症状,排泄物中亦无病毒粒子残留;同时,通过对免疫后犬只的细胞免疫水平、体液免疫水平和中和试验的检测发现,3种免疫途径均可有效地刺激机体产生免疫应答,且中和抗体水平达到较高水平。从而证明,PRV Bartha-K61在犬科动物体内安全有效,为以PRV为载体表达犬科动物疫病的抗原基因重组活载体疫苗的研制提供了科学依据。

    2008年10期 No.142 1122-1127+1132页 [查看摘要][在线阅读][下载 1059K]
    [下载次数:306 ] |[网刊下载次数:0 ] |[引用频次:9 ] |[阅读次数:409 ]
  • 表达猪流行性腹泻病毒S基因片段重组腺病毒的构建与免疫特性

    韦显凯;侯继波;姜平;

    利用RT-PCR、同源重组等技术构建了含有猪流行性腹泻病毒(PEDV)S基因上3个片段的重组腺病毒质粒pAd-S498~638,pAd-S1~638,pAd-S498~1384,经PacI酶切后转染HEK-293A细胞,3次噬斑纯化分别获得了重组腺病毒rAd-S498~638,rAd-S1~638,rAd-S498~1384。重组腺病毒于HEK-293A细胞连续传代至20代效价稳定,TCID50分别为每毫升10-6.29、10-5.75、10-6.5。应用猪流行性腹泻病毒阳性血清进行间接免疫荧光抗体试验,在3个腺病毒感染的HEK-293A细胞的胞质见有清晰荧光。将3个重组腺病毒分别免疫小鼠,结果均诱导产生较强的体液免疫应答。结果表明这3个重组腺病毒对S基因的3个片段均可成功表达,并具有较好的免疫原性,为PEDV重组腺病毒活载体疫苗的研究奠定了基础。

    2008年10期 No.142 1128-1132页 [查看摘要][在线阅读][下载 322K]
    [下载次数:482 ] |[网刊下载次数:0 ] |[引用频次:51 ] |[阅读次数:479 ]
  • IBDV超强毒GX8/99株的细胞适应毒和鸡体传代毒的致病性和VP5基因的比较

    朱秀同;崔治中;孙淑红;娄本红;

    传染性法氏囊病病毒(Infectious Bursal Diseas Virus,IBDV)的超强毒株GX8/99经在鸡胚成纤维细胞(CEF)上连续盲传23代后,细胞适应毒株GXC23对鸡的致病性显著减弱,对4~6周龄SPF鸡的致死率从85%~90%减为0~5%。GXC23在96孔细胞培养板上经2次无限稀释法后得到3个克隆病毒。经SPF鸡回传20代后,相应的毒株GX-2B20、GX-4B20、GX-5B20对SPF鸡的致死率仍维持在0~5%。序列比较表明,GX8/99在传代过程中,其细胞适应毒GXC23有8个碱基突变,其中5个碱基突变导致了氨基酸改变。bp#2T→C突变,导致传代毒ORF中的起始编码子后移了4个氨基酸。而3个克隆化病毒回鸡20代后致病性不变,这几个位点也保持不变,且与3个疫苗株完全一致。进一步分析表明,有4个超强毒株和4个强毒株的VP5基因的5个位点与GX8/99原始毒相同,而另3个超强毒及6个强毒株与细胞适应毒GXC23一致。这些结果表明,超强毒GX8/99在细胞传代过程中VP5基因上5个氨基酸的变异主要与适应细胞培养相关而与致病性无关。

    2008年10期 No.142 1133-1136+1140页 [查看摘要][在线阅读][下载 223K]
    [下载次数:103 ] |[网刊下载次数:0 ] |[引用频次:5 ] |[阅读次数:340 ]
  • RT-PCR对新城疫病毒(NDV)分离株的鉴定及其临床应用

    温贵兰;瞿继红;李永明;

    采用新城疫病毒的通用引物PA+PB、强毒引物PA+PC、弱毒引物PA+PD对11株贵州新城疫分离毒株与4株新城疫参考毒株进行了RT-PCR扩增。结果15株新城疫毒株均被PA+PB引物扩增出359bp的条带,F48E8、ND98、Fw、H2、P3、BY、L2、P1、P2被PA+PC引物扩增出254bp的条带,而PA+PD引物未扩增出DNA条带;ND89、Lasota被PA+PD引物扩增出254bp的条带,而PA+PC引物未扩增出DNA条带。采用3对引物对自然发病斗鸡脑、脾、咽喉试子、泄殖腔试子进行RT-PCR检测,确诊为斗鸡新城疫强毒感染,且与传统病毒分离与毒力鉴定的结果相一致。

    2008年10期 No.142 1137-1140页 [查看摘要][在线阅读][下载 267K]
    [下载次数:258 ] |[网刊下载次数:0 ] |[引用频次:6 ] |[阅读次数:440 ]
  • AA肉鸡群中免疫抑制性病毒分子流行病学调查及对疫苗免疫效果影响分析

    李新苍;朱瑞良;路建彪;刘红芹;王伟;胡晓娜;

    为了解AA肉种鸡群中免疫抑制性病毒的存在状况及其对NDV疫苗免疫效果和对商品鸡生长的影响,采用多重PCR、RT-PCR和血清学方法对山东某规模化大型AA父母代肉种鸡场的28日龄、180日龄左右种鸡及其所生产的1日龄、30日龄左右商品鸡进行IBDV、MDV、ALV、REV、CIAV及REOV感染状况的调查,并同时对鸡群NDV免疫后抗体水平进行跟踪监测。结果表明种鸡和商品鸡均存在CIAV的感染,并不同程度地存在CIAV与MDV、IBDV等的共感染;发病鸡群NDV抗体水平明显偏低的原因是由于鸡群感染免疫抑制性病毒所致;种鸡群感染CIAV并垂直传播给商品鸡,间接引起商品鸡发生免疫抑制性病毒的共感染,导致商品鸡群30日龄左右生长受阻、免疫能力降低、疾病爆发。

    2008年10期 No.142 1141-1144页 [查看摘要][在线阅读][下载 184K]
    [下载次数:133 ] |[网刊下载次数:0 ] |[引用频次:9 ] |[阅读次数:427 ]
  • 鸡传染性支气管炎病毒S1基因与猪IgGFc基因在HeLa细胞中的融合表达

    张明富;陈汉阳;彭博;佟铁俦;陈焕春;郭爱珍;

    根据GenBank中发表的猪的IgG Fc段基因及鸡传染性支气管炎病毒(IBV)S1基因序列,设计并合成引物。以猪肝组织总RNA为模板扩增出猪IgG Fc基因,以含全长IBV M41S基因的质粒为模板扩增出IBVS1基因,分别克隆至T载体。DNA测序表明,所获得的IBV S1基因大小为1.5kb,IgG Fc大小为1kb,序列正确。将IBVS1与IgG Fc基因串连,插入含有人组织型纤维蛋白溶酶原激活物分泌信号肽序列(tPA)的真核表达载体pcD-NA3.1-tPA上,在HeLa细胞上进行瞬时融合表达。经免疫光和斑点杂交检测,表达产物同时具有IBV S1蛋白和IgG Fc活性。

    2008年10期 No.142 1145-1149页 [查看摘要][在线阅读][下载 384K]
    [下载次数:123 ] |[网刊下载次数:0 ] |[引用频次:4 ] |[阅读次数:546 ]
  • 实时荧光定量RT-PCR检测ICP4、IFN-γ和IL-18基因在ILTV感染鸡三叉神经节中的表达

    木古丽;王云峰;石星明;童光志;何来;王玫;

    将20只4月龄SPF鸡人工感染传染性喉气管炎病毒(ILTV)WG株,于感染后39d翅静脉和肌肉注射地塞米松(DEX),感染后5、9、10、11、12、39d及DEX处理后1、2、3、5、6、7、8d采喉拭子,检测病毒DNA,并于感染前和感染后6、10、20、31d及DEX处理后2、4、7、10、30d每组各取1只鸡颈静脉放血致死后无菌采集三叉神经节,提总RNA后利用real-timeRT-PCR的方法定量检测ICP4、IFN-γ和IL-18特异性mRNA。结果表明,在人工感染后处于潜伏状态的病毒能再被激活,并且ICP4基因在病毒还未被激活时就能低水平表达,这种低水平的立即早期(IE)基因的表达能提供持续的抗原刺激来维持神经节中的炎性细胞分泌IFN-γ和IL-18,以至于维持病毒处于潜伏状态而不致激活后感染其他的健康宿主;DEX处理后2d,IFN-γ的表达达到峰值,对病毒的再激活起抑制作用,尽管DEX处理前后IL-18的表达量没有明显变化,推测当潜伏的病毒一旦被激活时,IFN-γ可协同IL-18起到抑制IL-TV的作用。

    2008年10期 No.142 1150-1153+1166页 [查看摘要][在线阅读][下载 239K]
    [下载次数:218 ] |[网刊下载次数:0 ] |[引用频次:4 ] |[阅读次数:516 ]
  • 2005—2006年流行的致病性鹅新城疫病毒的分子流行病学特征

    张俊涛;万洪全;王小波;吴力力;宋红芹;李书胜;陈露;王宝安;

    为了对能导致鹅临诊疾病的新城疫病毒(Newcastle disease virus,NDV)进行监测,2005-2006年从江苏、安徽2省不同地区的发病鹅群分离、鉴定了10株NDV,并对其中8株病毒的部分生物学特性及分子生物学特征进行了研究。鸡胚平均死亡时间(MDT)、1日龄雏鸡脑内接种致病指数(ICPI)测定结果表明8株病毒皆为NDV强毒株。对融合蛋白(F)和血凝素-神经氨酸酶(HN)基因序列的分析发现,8株病毒中有7株病毒在基因型分类上属于基因Ⅶd亚型,并与1997-2001年间流行的对鹅具有高度致病性的NDV高度同源(95.5%~99.8%),而且这7株病毒的F、HN蛋白具有出现于2001年以前流行的致病性鹅NDV的绝大部分特征性氨基酸,进一步说明这些特征性氨基酸非常保守,可以作为对鹅具有高度致病性的NDV的分子标志。

    2008年10期 No.142 1154-1157页 [查看摘要][在线阅读][下载 280K]
    [下载次数:107 ] |[网刊下载次数:0 ] |[引用频次:18 ] |[阅读次数:413 ]
  • 不同剂量小鹅瘟病毒VP3基因疫苗肌肉注射诱导小鼠细胞免疫

    卢菲;程安春;汪铭书;韩新锋;黎敏;车茜;刘晓东;陈孝跃;

    将小鹅瘟(Gosling plagne,GP)VP3基因疫苗(pcDNA-GPV-VP3)分别按每只50、100、200μg肌肉注射免疫BALB/c小鼠,以pcDNA3.1(+)和生理盐水为对照,于免疫后7、14、21、28、35、63、105d采血用淋巴细胞转化实验(MTT法)和流式细胞仪(FACS)分别检测小鼠外周血T淋巴细胞转化效果和CD4+、CD8+T淋巴细胞动态变化。结果表明,pcDNA-GPV-VP3免疫小鼠能够诱导机体产生良好的细胞免疫应答。50、100μg pcDNA-GPV-VP3免疫后小鼠外周血T淋巴细胞对ConA刺激的反应显著或极显著高于200μg组、空载体和生理盐水对照组,且以100μg组最优,而200μg组的转化效果比空载体组差;100μg pcDNA-GPV-VP3免疫小鼠后所诱导的CD4+T淋巴细胞免疫功能最强,50μg组次之;50μg pcDNA-GPV-VP3免疫小鼠后所诱导的CD8+T淋巴细胞免疫功能最强,100μg组次之。

    2008年10期 No.142 1158-1161页 [查看摘要][在线阅读][下载 299K]
    [下载次数:153 ] |[网刊下载次数:0 ] |[引用频次:16 ] |[阅读次数:442 ]
  • 羊传染性脓疱病毒松原分离株的分离鉴定及B2L基因的克隆与序列分析

    赵魁;贺文琦;宋德光;孟伶俐;陈克研;张学慧;高丰;

    利用原代犊牛睾丸细胞从临床上表现口疮症状的羔羊痂皮材料中分离获得1株病毒,对该株病毒进行病毒形态学、理化学、PCR检测与动物回归试验等系统鉴定后,证实该分离株为羊传染性脓疱病毒(Orf virus,ORFV),命名为ORFV-sy。利用PCR方法克隆出其B2L基因,并将该基因序列和推导的氨基酸序列与6个不同来源的ORFV毒株进行同源性和亲缘关系的比较分析。结果表明,各毒株间核苷酸和氨基酸的同源性分别为97.8%~99.5%和97.6%~99.5%;系统发育进化树结果表明,ORFV-sy毒株与印度分离绵羊株ORFV-Mukteswar67/04、ORFV-Izatnagar79/04的亲缘关系较近,表明不同地区分离毒株的B2L基因差异不大。

    2008年10期 No.142 1162-1166页 [查看摘要][在线阅读][下载 285K]
    [下载次数:264 ] |[网刊下载次数:0 ] |[引用频次:19 ] |[阅读次数:419 ]
  • 圈养大熊猫麻疹病毒易感性流行病学调查(英文)

    鎌田寛;大場茂夫;木場秀夫;津曲茂久;佐藤常男;金山喜一;藩英仁;渡部敏;张志和;侯蓉;王成东;沈富军;张亮;罗娌;

    成都大熊猫繁育研究基地对圈养的7只8~21岁的大熊猫血清犬瘟热病毒(CDV)中和抗体滴度进行了测定。结果显示,尽管这些大熊猫自2003年起每年接受2次CDV弱毒疫苗接种,该弱毒疫苗是由未知家犬犬瘟热病毒株制作的,大熊猫血清犬瘟热病毒中和抗体滴度却在2×到256×的较大范围内(平价值=16)波动。通常单次的麻疹病毒弱毒疫苗注射足以导致宿主产生相应的稳定的免疫反应,在大熊猫上抗犬瘟热中和抗体变化幅度较大提示在宿主与疫苗的关系中存在某种程度的不足。

    2008年10期 No.142 1167-1170页 [查看摘要][在线阅读][下载 175K]
    [下载次数:111 ] |[网刊下载次数:0 ] |[引用频次:1 ] |[阅读次数:355 ]
  • 牛瑟氏泰勒虫P33-P23核酸疫苗研究

    李娟;许应天;张西臣;李建华;张国才;宫鹏涛;杨举;孟丹;

    根据牛瑟氏泰勒虫主要表面蛋白基因p23和p33的已知序列,设计特异性引物,将克隆产物与pVAX1表达载体连接,得到真核重组表达质粒pVAX1-p33-p23,脂质体介导其转染Hela细胞后进行表达产物的鉴定,最后进行BALB/c小鼠免疫试验。结果,目的基因在真核细胞内得到正确表达,动物免疫试验pVAX1-p33-p23核酸疫苗能够提高小鼠的细胞免疫和体液免疫水平,并且pVAX1-p33-p23免疫组的免疫效果均高于pVAX1-P33和pVAX1-P23免疫组(P<0.05)。从而证明,牛瑟氏泰勒虫的重组pVAX1-p33-p23核酸疫苗成功构建。

    2008年10期 No.142 1171-1173+1180页 [查看摘要][在线阅读][下载 179K]
    [下载次数:96 ] |[网刊下载次数:0 ] |[引用频次:8 ] |[阅读次数:346 ]

人兽共患病

  • 猪圆环病毒检测与分型寡核苷酸芯片的建立及应用

    姜永厚;商晗武;陈伟杰;徐辉;丁先锋;赵灵燕;方立;黄怡君;

    本研究应用寡聚核苷酸基因杂交技术建立了一种快速可靠的检测猪圆环病毒(PCV)基因型的方法。在PCV保守序列复制酶基因内设计了2对特异性引物,在此物之间设计了2种基因型特异的核苷酸探针(22~30mer)。通过PCR扩增Cy5标记的DNA片段与固定在玻片表面的探针杂交进行PCV基因分型。该技术结合了PCR方法的高度敏感性和DNA-DNA杂交技术的选择特异性。利用该方法对58例临床样品进行了检测鉴定。结果显示,该技术能准确鉴别PCV病毒基因型。且其灵敏度是凝胶电泳的5倍。试验结果表明寡核苷酸基因芯片技术可有效地应用于PCV临床诊断和分子流行病学调查。

    2008年10期 No.142 1174-1180页 [查看摘要][在线阅读][下载 708K]
    [下载次数:106 ] |[网刊下载次数:0 ] |[引用频次:15 ] |[阅读次数:443 ]

基础兽医学

  • 父母代固始鸡十二指肠的发育形态学观察

    刘忠虎;白晓辉;康相涛;袁文菊;赵峰;肖传斌;

    应用大体解剖学和组织切片技术,对0~20周龄父母代固始鸡的十二指肠进行了发育形态学研究。结果表明,十二指肠的长度、体质量、周长和肠绒毛的长度、肠腺隐窝的深度、肠腺宽度及各肌层厚度等指标随周龄的增加而增长;十二指肠相对生长率、肠腺密度和十二指肠指数则呈下降趋势;肠绒毛有分支现象;淋巴组织的发育比较缓慢,到6周龄后才出现有淋巴小结;通过建立Logistic方程模型模拟十二指肠重量的生长变化,得到其生长方程:♂:Y=9.72/(1+15.31e-0.33t),♀:Y=8.29/(1+12.50e-0.31t)。

    2008年10期 No.142 1181-1184页 [查看摘要][在线阅读][下载 131K]
    [下载次数:160 ] |[网刊下载次数:0 ] |[引用频次:18 ] |[阅读次数:354 ]
  • 鸡干扰素α1及胸腺肽α1融合蛋白原核表达系统的建立

    王佳;孙铭泽;赵宇;刘宇鹏;刘慧玉;张英;李莉;刘松财;

    根据GenBank已发表的鸡干扰素α1(IFNα1)基因序列,设计1对特异性引物,采用PCR方法,从鸡基因组中扩增出鸡IFNα1基因。根据胸腺肽α1(THYα1)氨基酸序列,选用大肠杆菌偏爱密码子,设计基因序列,同时在IFNα1-THYα1之间设计1个5肽Linker。在IFNα1基因结构基础上,设计4条寡核苷酸单链作为下游引物,以搭桥的方式延伸和扩增,最终获得IFNα1-THYα1融合基因;将该基因克隆至pGEX4T-1载体后,转化至BL21(DE3)受体菌中,37℃培养至菌液D600为0.6~1.0时,IPTG(1.0mmol/L)诱导培养4h;经western blot鉴定证实,成功构建了鸡干扰素α1及胸腺肽α1融合蛋白原核表达系统,表达产物以包涵体形式存在,获得高纯度的IFNα1-THYα1蛋白。以细胞病变抑制试验及E玫瑰花结形成试验对目的蛋白进行体外活性检测,结果显示该蛋白具有生物活性。

    2008年10期 No.142 1185-1189页 [查看摘要][在线阅读][下载 370K]
    [下载次数:207 ] |[网刊下载次数:0 ] |[引用频次:2 ] |[阅读次数:505 ]
  • 日粮不同铜、维生素A水平及互作效应对肉仔鸡体内几种蛋白代谢相关指标的影响

    张春善;王博;杨燕燕;张映;张晓峰;

    选用1日龄艾维因肉仔鸡448只,随机分为8组,每组4个重复,每重复14只(公母各半)。用4×2(Cu×VA)完全随机设计,铜的添加量为0、8、150、225mg/kg,维生素A的添加量为1500和5000IU/kg。探讨日粮不同铜、维生素A水平及互作效应对肉仔鸡体内几种蛋白代谢相关指标的影响。结果显示日粮低铜(0~8mg/kg)组血清尿素氮(SUN)质量浓度降低,血清总蛋白(TP)质量浓度提高,血清谷草转胺酶(GOT)和谷丙转胺酶(GPT)的活性提高;高剂量维生素A(5000IU/kg)组SUN质量浓度降低,TP质量浓度显著增加;低铜(0mg/kg)与高剂量维生素A(5000IU/kg)在降低SUN质量浓度和提高TP质量浓度方面有协同作用。结果表明低铜(0~8mg/kg)利于肉仔鸡体内蛋白质合成。

    2008年10期 No.142 1190-1194+1198页 [查看摘要][在线阅读][下载 195K]
    [下载次数:179 ] |[网刊下载次数:0 ] |[引用频次:3 ] |[阅读次数:339 ]
  • 喹赛多对山羊生长性能及胴体品质的影响

    丁明星;王玉莲;朱惠玲;刘振利;袁宗辉;

    60只3月龄左右杂交山羊,随机分为6组,空白对照组饲料不添加任何药物,药物对照组饲料添加50mg/kg喹乙醇,4个试验组饲料中分别添加25、50、150和250mg/kg喹赛多,试验期90d。结果表明喹赛多25、50和150mg/kg能改善山羊平均日增重(ADG)4.4%、14.5%和7.2%,提高饲料转化率(FCR)5.9%、12.0%和7.4%。喹赛多250mg/kg提高FCR8.6%,但降低ADG2.1%。喹赛多50mg/kg组ADG和FCR均高于喹乙醇组。喹赛多50mg/kg降低山羊腹泻频率39.0%,但随剂量增加,其抗腹泻作用下降。喹赛多25、50、150和250mg/kg能提高山羊屠宰率2.5%、9.0%、5.0%和1.0%,增加眼肌面积4.8%、34.1%、16.1%和14.0%。喹赛多50mg/kg组山羊净肉率提高14.0%,高于其他各组。喹赛多各剂量均能显著增高肌肉pH值,平均降低滴水损失值13.7%。可见,喹赛多适宜剂量,尤其50mg/kg,有较好的促进山羊生长和改善胴体品质的作用。

    2008年10期 No.142 1195-1198页 [查看摘要][在线阅读][下载 131K]
    [下载次数:151 ] |[网刊下载次数:0 ] |[引用频次:4 ] |[阅读次数:340 ]
  • 印楝油氯仿提取物杀螨活性成分的分离纯化及其生物学活性

    贾仁勇;杜永华;殷中琼;蒲中慧;陈娇;

    将印楝油氯仿提取物经硅胶柱层析和丙酮重结晶进行生物活性跟踪分离纯化,并运用互补重对数模型(CCL模型)分析活性化合物的离体生物活性,求出半数致死浓度(LC50)和半数致死时间(LT50)。结果显示,从印楝油氯仿提取物中分离出一种白色雪花状丙酮结晶物,熔点为60~61℃,经结构鉴定为18-碳酸-3,4-呋喃二酯,其对兔疥螨幼虫的杀螨活性呈时间浓度依赖性,24h的LC50和LC90分别为0.0818和9.8424g/L,7.500g/L时的LT50和LT90分别为15.3324h和24.6784h。这表明印楝油氯仿提取物的杀螨活性成分主要为酯类物质,对兔疥螨具有较强的杀螨活性。

    2008年10期 No.142 1199-1202页 [查看摘要][在线阅读][下载 140K]
    [下载次数:151 ] |[网刊下载次数:0 ] |[引用频次:9 ] |[阅读次数:388 ]
  • 桔梗的“引经”作用对氟苯尼考药动学的影响

    李英伦;崔恒敏;陈红伟;

    20只新西兰白兔随机均分成2组(A、B组),A组单剂量1次灌胃内服氟苯尼考30mg/kg;B组氟苯尼考30mg/kg与桔梗煎液2g/kg单剂量1次同时灌胃内服给药;采用高效液相色谱法测定血药浓度,血药浓度最低检测限为0.05mg/L,以3p97药代动力学程序和SPSS12.0统计分析软件对所得数据进行分析。结果,药—时数据均符合一级吸收一室开放模型(W=1/C2),主要药代动力学参数及拟合方程如下。A组:T1/2Ka(0.461±0.066)h,T1/2ke(2.013±0.195)h,Tpeak(1.180±0.123)h,Cmax(7.332±1.000)mg/L,AUC(31.445±3.566)mg.h-1.L-1,V/F(2.995±0.330)L/kg,拟合方程为:C=19.833(e-0.396t-e-2.387t);B组:T1/2Ka(0.550±0.112)h,T1/2ke(3.308±0.270)h,Tpeak(1.414±0.183)h,Cmax(4.737±0.360)mg·L-1,AUC(23.128±2.096)mg.h-1.L-1,V/F(1.400±0.127)L/kg,拟合方程为:C=11.021(e-0.342t-e-1.860t)。结果表明,桔梗与氟苯尼考同时灌胃内服后,桔梗的"引经"对氟苯尼考在家兔体内药物代谢有较大影响。

    2008年10期 No.142 1203-1207页 [查看摘要][在线阅读][下载 339K]
    [下载次数:295 ] |[网刊下载次数:0 ] |[引用频次:22 ] |[阅读次数:317 ]

临床兽医学

  • 致奶牛乳腺炎金黄色葡萄球菌快速鉴别及药敏试验选择培养液的培养特性

    仇华磊;钱科;孙怀昌;

    本研究在Baird-parker培养基基础上,研制出致奶牛乳腺炎金黄色葡萄球菌(SA)快速鉴别培养及药敏试验用选择mBP培养液。在此培养液中,除SA生长良好外,链球菌等4种革兰氏阳性菌和大肠杆菌等6种革兰氏阴性菌均不生长;将10μL奶样接种入mBP培养液,37℃培养24h后即可根据培养液是否浑浊和产生黑色产物判断奶样中有无SA,检测灵敏度为60个细菌:经与标准纸片法药敏试验对比证明,mBP培养液对常用于奶牛乳腺炎治疗的7类8种抗生素的抑菌活性无明显影响:将10μL奶样或选择培养物接种入含标准抑菌浓度抗生素的mBP培养液中,35℃培养24h后即能根据培养液是否浑浊和产生黑色产物判断奶样中SA对所试抗生素的敏感性。以mBP培养液为基础建立的致奶牛乳腺炎金黄色葡萄球菌快速鉴别及药敏试验方法具有简单、快速、价廉和不需专门设备等优点,特别适合我国中、小型奶牛场和基层兽医站使用。

    2008年10期 No.142 1208-1212+1224页 [查看摘要][在线阅读][下载 210K]
    [下载次数:270 ] |[网刊下载次数:0 ] |[引用频次:9 ] |[阅读次数:402 ]
  • 神经肽Y对犊牛肝细胞PEPCK mRNA丰度及其活性的影响

    陈承祯;李小兵;谢光洪;徐闯;刘国文;张永宏;王哲;

    取单层培养36h生长良好的犊牛肝细胞,采用单因素重复试验,分别添加0、50、100、200、500、1000ng/L的羊体外合成神经肽Y(Neuropeptide Y,NPY),每个处理3个重复(每个重复2孔),再培养12h后分别提取RNA和制备细胞上清液。应用荧光定量PCR方法检测外源NPY对肝细胞糖异生关键酶磷酸烯醇式丙酮酸羧激酶(Phosphoenolpyruvate carboxykinase,PEPCK)基因表达的影响,同时用比色法检测其对肝细胞PEPCK活性的影响。结果表明,一定浓度的NPY显著促进肝细胞PEPCK mRNA表达,增强了PEPCK活性。

    2008年10期 No.142 1213-1215页 [查看摘要][在线阅读][下载 163K]
    [下载次数:112 ] |[网刊下载次数:0 ] |[引用频次:4 ] |[阅读次数:336 ]
  • 羊抗猪脂肪细胞膜抗血清对猪生长发育与脂质代谢的影响

    杜改梅;刘茂军;王俊东;

    选取24头刚断奶(5周龄)的上海大白猪,随机分成3大组(6小组),即对照组C(C1和C2小组)、试验组Ⅰ(Ⅰ1和Ⅰ2小组)、试验组Ⅱ(Ⅱ1和Ⅱ2小组),每小组4头猪。试验期为11周和17周。42日龄时,试验组Ⅰ和Ⅱ,分别腹腔和皮下注射山羊抗猪脂肪细胞膜抗血清,连续以每日2.5mL/kg剂量注射。对照组以相同剂量注射山羊正常血清。分别在免疫后11、17周末屠宰。结果显示,山羊抗猪脂肪细胞膜被动免疫猪后,各试验组(腹腔免疫组与皮下免疫组)的饲料报酬均明显高于对照组(P<0.05);体重和日增重也高于对照组。在免疫后7~17d各试验组血清FFA浓度与对照组相比差异显著(P<0.05),65d后各试验组均无明显差异;血清尿素氮在处理后各试验组均明显低于对照组(P<0.05),35d时皮下免疫组无明显差异;在免疫后7~17d各试验组血清总蛋白与对照组相比均明显升高(P<0.05),65d时各试验组均不存在显著性差异;免疫后7~17d各试验组血清胆固醇均显著低于对照组(P<0.05)。

    2008年10期 No.142 1216-1220页 [查看摘要][在线阅读][下载 302K]
    [下载次数:77 ] |[网刊下载次数:0 ] |[引用频次:0 ] |[阅读次数:289 ]
  • 利用PCR-RFLP检测五品种警犬遗传缺陷——血管性假性血友病

    张国生;杨前勇;叶俊华;徐黎;李红;吴衍;熊前;舒邓群;

    犬血管性假性血友病(vWD)是常染色体不完全显性遗传性出血病。血管性假血友病因子(vWF)的数量和质量正常与否决定着是否患有vWD,而vWF基因的表达又控制着vWF的数量和质量。本研究应用DNA测序技术和PCR-RFLP方法检测德国牧羊犬、杜伯文犬、罗威纳犬、史宾格犬和马里努阿犬等5个品种共132头犬的vWF基因5个候选区域。结果显示,德国牧羊犬、罗威纳犬、史宾格犬和马里努阿犬未发现vWF突变基因,杜伯文犬中有2头患病和3头携带者,携带频率为5.16%。

    2008年10期 No.142 1221-1224页 [查看摘要][在线阅读][下载 226K]
    [下载次数:65 ] |[网刊下载次数:0 ] |[引用频次:0 ] |[阅读次数:317 ]

动物科学

  • 营养水平对荷斯坦肥育牛胴体品质及肉品质量的影响

    郭亮;王治华;蔡治华;江汪洋;王连仲;

    将24头去势荷斯坦公牛随机分成3组,进行为期180d的肥育试验。Ⅰ组饲喂低营养日粮,Ⅱ组和Ⅲ组分别饲喂中、高营养日粮。结果显示:试验Ⅱ组、Ⅲ组与Ⅰ组比较,宰前活重、胴体重、屠宰率、净肉重、胴体出肉率及肉骨比均显著提高(P<0.05);Ⅱ、Ⅲ组之间胴体出肉率和肉骨比差异显著(P<0.05)。胴体品质:Ⅱ组和Ⅲ组的背膘厚、胴体脂肪、肠系膜脂肪、眼肌面积和大理石花纹均优于Ⅰ组(P<0.05);Ⅱ和Ⅲ组的背膘厚、胴体脂肪、肠系膜脂肪三项指标显著差异(P<0.05)。常规化学成分:各组间干物质、粗脂肪和粗蛋白显著差异(P<0.05);各组的钙、磷差异不显著(P>0.05)。牛肉质量:Ⅱ组、Ⅲ组的滴水损失、pH值和剪切力值均优于Ⅰ组(P<0.05);Ⅱ和Ⅲ组之间差异不显著(P>0.05)。结果表明,日粮营养水平对荷斯坦肥育牛的胴体品质及肉品质量具有显著影响。

    2008年10期 No.142 1225-1228+1238页 [查看摘要][在线阅读][下载 176K]
    [下载次数:238 ] |[网刊下载次数:0 ] |[引用频次:42 ] |[阅读次数:329 ]
  • 水牛活体采卵体外生产胚胎技术

    梁贤威;张秀芳;杨炳壮;陈明棠;黄芬香;庞春英;廖朝辉;覃广胜;韦升菊;黄右军;

    本研究应用B超引导阴道穿刺法,对40头尼里-拉菲和摩拉水牛连续3次采卵,采卵间隔为3d,共采卵120头次。共穿刺卵泡935个,采集卵母细胞643枚,可用卵母细胞为456枚,卵母细胞回收率为68.77%(643/935),卵母细胞可用率为70.92%(456/643),头均可用卵母细胞为(3.80±0.23)个。第1、2、3次采卵头均回收可用卵母细胞数分别为(3.82±0.50)、(3.82±0.35)、(4.05±0.43)枚,差异不显著(P>0.05)。收集的卵母细胞经体外成熟、体外受精和受精卵与颗粒细胞单层体外共培养,受精后48h分裂率为56.36%(257/456),囊胚率为20.39%(93/456)。2个品种水牛的头均可采卵泡数、头均回收卵母细胞数和囊胚率均无显著差异。这表明,在B超引导下进行连续活体采卵,并利用卵母细胞进行体外受精生产胚胎是可行的。

    2008年10期 No.142 1229-1232页 [查看摘要][在线阅读][下载 142K]
    [下载次数:130 ] |[网刊下载次数:0 ] |[引用频次:9 ] |[阅读次数:394 ]
  • 冷冻保存能降低绵羊卵母细胞受精能力

    田树军;孙树春;闫长亮;朱士恩;杨慧欣;

    本实验研究了体外成熟绵羊卵母细胞在含抗冻保护剂DMSO和EG的冷冻液中暴露和OPS法玻璃化冷冻保存后对体外受精卵裂率、精子入卵率、皮质颗粒分布、酶溶解透明带时间及雌原核形成的影响。将体外成熟24h的绵羊卵母细胞分为3组:(1)对照组,卵母细胞不进行处理;(2)毒性组,卵母细胞在冷冻液中进行暴露但不投入液氮中冷冻;(3)冷冻组,卵母细胞利用OPS法进行玻璃化冷冻。处理组卵母细胞在浓度递减的蔗糖溶液中脱除抗冻保护剂。结果,卵母细胞体外受精的卵裂率和单精子入卵率,毒性组(62.3%和29.3%)和冷冻组(67.6%和28.2%)显著低于对照组(78.4%和45.0%)(P<0.05),毒性组和冷冻组间无显著差异(P>0.05)。为了研究冷冻保存导致卵母细胞受精能力降低的机制,处理组及对照组一部份卵母细胞分别于处理后0h(IVM24h)、2h(IVM26h)和体外受精后12h(IVF12h)测定皮质颗粒分布和用0.1%链霉蛋白酶溶解透明带时间,另一部份卵母细胞则在不含有精子的受精液中孵育12h后测定雌原核形成率。结果,在IVM24h和IVM26h,皮质颗粒呈完全释放的比例,毒性组(41.2%和40.8%)和冷冻组(41.7%和51.8%)显著性高于对照组(7.1%和18.4%)(P<0.05);IVM26h酶溶解透明带时间,毒性组(435.6±16.6)s和冷冻组(422.3±14.6)s显著长于对照组(381.6±15.3)s(P<0.05);雌原核形成率,毒性组(58.7%)和冷冻组(63.9%)组显著高于对照组(8.2%)(P<0.05)。上述结果表明,含DMSO和EG的冷冻液对体外成熟绵羊卵母细胞具有孤雌激活作用,引起皮质颗粒的提前释放,导致透明带变硬,降低卵母细胞的受精能力。

    2008年10期 No.142 1233-1238页 [查看摘要][在线阅读][下载 210K]
    [下载次数:133 ] |[网刊下载次数:0 ] |[引用频次:6 ] |[阅读次数:354 ]
  • 猕猴脾脏中雌激素受体的表达及其性别差异

    祝春梅;陈正礼;曾文;程安春;潘康成;沈家海;

    选取健康成年雌雄猕猴各3只,采用免疫组织化学SP法研究了雌激素受体(ER)在脾脏中的分布,观察猕猴脾脏中ER的表达及性别差异。结果显示,ER免疫阳性反应物主要分布于脾脏红髓区,脾小结相对较少,而动脉周围淋巴鞘、血管内皮、脾小梁等组织结构内仅有少量分布。ER阳性产物主要定位于细胞核中,部分存在于胞浆和胞膜上。雌性猕猴脾脏中的阳性细胞数量显著高于雄性,表达强度也较雄性强。这表明,ER参与雌激素对脾脏的免疫功能调控。ER阳性产物分布特点表明雌激素发挥作用主要是通过经典基因组机制,同时也通过非基因组机制途径。而ER表达的明显性别差异提示体内雌激素水平可能对脾脏中B淋巴细胞的功能有正调节作用。

    2008年10期 No.142 1239-1242页 [查看摘要][在线阅读][下载 445K]
    [下载次数:89 ] |[网刊下载次数:0 ] |[引用频次:5 ] |[阅读次数:363 ]
  • 下载本期数据