- 王建业;孙怀昌;朱国强;
分别将禽腺联病毒(Avian adeno-associated virus,AAAV)的Rep78基因和VP3基因克隆入pET-47b原核表达载体并转化BL21(DE3)大肠杆菌,在IPTG的诱导下2种目的蛋白均成功得到了表达。SDS-PAGE显示,Rep78蛋白的相对分子质量约为85 000,而VP3蛋白相对分子质量约为60 000。Western-blot分析显示,表达产物均能与抗AAAV的阳性血清反应。将目的蛋白切胶免疫BALB/c小鼠分别制备了针对2种蛋白的多克隆血清。间接免疫荧光试验显示制备的抗血清能够与AAAV抗原特异反应。不与鸡胚致死孤儿病毒(CELO)抗原反应。结果表明,制备的抗Rep78和VP3蛋白的血清可以用于检测重组AAAV载体制备过程中Rep和Cap基因的表达水平。
2008年12期 v.28;No.144 1363-1366页 [查看摘要][在线阅读][下载 230K] [下载次数:115 ] |[网刊下载次数:0 ] |[引用频次:4 ] |[阅读次数:0 ] - 林雪彦;王中华;李福昌;彭军;苏鹏程;牛钟相;
用扫描电镜观察健康鸡嗉囊黏膜表面正常菌群与黏膜细胞结合的状态,结果发现,嗉囊黏膜表面覆盖着大量的乳酸杆菌,将乳酸杆菌放大可见,其表面以伪足样丝状物与嗉囊黏膜细胞紧密结合。用透射电镜观察乳酸杆菌黏附消化道上皮细胞(CaCo-2cell)的状态发现,上皮细胞与乳酸杆菌相结合后其结构没有变化,菌体结构也完好无损。另外,用透射电镜对乳酸杆菌表面黏附物质被提取前后的形态变化进行了观察,结果表明,细菌被提取蛋白后,细菌细胞壁变薄、透明、凹凸不平,而未提取蛋白的细菌表面结构正常,表明乳酸杆菌表面存在着某种蛋白物质,这种物质就是上皮细胞发生结合的黏附素蛋白。
2008年12期 v.28;No.144 1367-1368+1373页 [查看摘要][在线阅读][下载 322K] [下载次数:207 ] |[网刊下载次数:0 ] |[引用频次:7 ] |[阅读次数:0 ] - 戈锐;彭广能;夏咸柱;杨松涛;苏建青;邹啸环;冯娜;马晓平;石锦江;
采集5份患出血性肠炎犬的粪便,通过猫肾细胞(F81)传代培养后,成功分离到2株病毒。对2株病毒进行病毒形态学、理化学、血凝试验、PCR鉴定与分子生物学系统鉴定后,证实分离株是犬细小病毒,通过VP2结构蛋白测序分析表明,新分离到的2株细小病毒抗原型分别属于CPV-2a和CPV-2b。
2008年12期 v.28;No.144 1369-1373页 [查看摘要][在线阅读][下载 356K] [下载次数:245 ] |[网刊下载次数:0 ] |[引用频次:15 ] |[阅读次数:0 ] - 李文杰;刘金彪;高崧;刘秀梵;
应用复合PCR方法,对江苏地区的162份可疑病料进行了检测,结果72份病料为PCV2阳性,17份为PCV1阳性,其中7份同时感染PCV1和PCV2。从发病时间看,以9~11月发病最多,阳性率高达54.67%。样品较多的保育猪和育肥猪的阳性率分别是26.03%和68.12%。通过流行病学调查,表明该病已在江苏地区呈流行趋势。同时对18头PCV2阳性猪病料的心、肝、脾、肺、肾、脑、腹股沟淋巴结、肠系膜淋巴结、扁桃体进行PCV2检测,结果有7头PCV2阳性猪的各个脏器都能检测出PCV2;在这些脏器中,肺、腹股沟淋巴结、扁桃体的检出率都为100%,较其他受检脏器更适合作为PCV2的检测样品。
2008年12期 v.28;No.144 1379-1382页 [查看摘要][在线阅读][下载 206K] [下载次数:211 ] |[网刊下载次数:0 ] |[引用频次:10 ] |[阅读次数:0 ] - 刘新鑫;孟轲音;尹仁福;丁壮;
参照GenBank公布的鹅源新城疫病毒NA-1株F基因(DQ659677)的核苷酸序列设计1对引物,通过PCR扩增F基因全长,将其克隆到pET-22b(+)载体中,构建了原核表达载体pET-22b(+)-F,转化大肠杆菌BL21(DE3),表达并纯化了重组蛋白,Western-blot证明该重组蛋白具有免疫原性。利用重组蛋白为包被抗原,通过方阵试验确定了包被抗原的最佳包被量为0.21μg/孔,建立了检测鹅源新城疫病毒抗体的间接ELISA诊断方法。
2008年12期 v.28;No.144 1383-1386页 [查看摘要][在线阅读][下载 269K] [下载次数:128 ] |[网刊下载次数:0 ] |[引用频次:1 ] |[阅读次数:0 ] - 徐春志;周碧君;岳筠;程振涛;史开志;鲍娟;李永明;文明;
比较Trizol法和SDS-蛋白酶K法提取山羊痘病毒DNA后,根据山羊痘病毒P32基因设计引物,建立了能检测感染细胞培养物与组织病料的PCR方法,结果显示以SDS-蛋白酶K法提取的病毒DNA在含量与纯度上均明显高于Trizol法;该PCR方法对山羊痘标准毒株细胞感染物能扩增出特异性的DNA条带,最小检出量为40.625ng;且能检出山羊痘疫苗毒Y株、贵州现场分离毒LD株和QL株的细胞感染物以及山羊痘疹样本中病毒DNA,而对鸡痘疫苗毒株感染细胞、正常细胞及正常山羊皮肤均为阴性反应。这些结果表明,建立的PCR方法具有特异性强、可靠性好、灵敏度高等特点,可用于山羊痘的临床诊断。
2008年12期 v.28;No.144 1387-1390页 [查看摘要][在线阅读][下载 212K] [下载次数:102 ] |[网刊下载次数:0 ] |[引用频次:3 ] |[阅读次数:0 ] - 张俊辉;周玉;任洪林;付佳;柳增善;
以食物中毒性金黄色葡萄球菌毒素为研究对象,利用PCR方法分别扩增出金黄色葡萄球菌肠毒素SEB1、SEB2、SED1、SED2、SEE基因片段。将克隆得到的5个毒素基因片段采用柔性的Linker序列(Gly4Ser)3进行串联(SEB1-SEB2-SED1-SED2-SEE),通过重叠延伸PCR法扩增出了融合毒素T,目的基因全长1 835 bp,测序结果同源性达99%。将融合基因克隆到pET-28a(+)原核表达载体,转化大肠杆菌后成功表达了融合蛋白,蛋白主要以包涵体形式存在,占菌体总蛋白的29.6%。
2008年12期 v.28;No.144 1391-1393+1397页 [查看摘要][在线阅读][下载 313K] [下载次数:109 ] |[网刊下载次数:0 ] |[引用频次:3 ] |[阅读次数:0 ]
- 王文龙;哈斯阿古拉;阮风雷;呼和巴特尔;赵云刚;
从牛皮蝇Ⅱ期幼虫中提取总RNA,进行RT-PCR扩增牛皮蝇Hypodermin A基因。将扩增基因进行克隆测序,构建原核表达载体pET30-HA,转化大肠杆菌BL21(DE3)。用IPTG诱导表达,得到表达量达到全菌蛋白35%以上的特异性蛋白。SDS-PAGE分析表明,表达产物大部分以包涵体形式存在。Western-blot检测结果表明,获得的重组蛋白为重组Hypodermin A,具有较好的免疫活性。
2008年12期 v.28;No.144 1394-1397页 [查看摘要][在线阅读][下载 235K] [下载次数:90 ] |[网刊下载次数:0 ] |[引用频次:4 ] |[阅读次数:0 ] - 袁子国;张秀香;李修明;王晓虎;高胜言;徐惠娟;张守峰;扈荣良;
构建以伪狂犬病病毒(PRV)为载体表达狂犬病病毒糖蛋白的重组活载体疫苗。采用AseⅠ/MluⅠ切下EG-FP-rgp的表达盒,将其克隆入p8-AA载体的酶切位点处,经酶切鉴定为正向连接,阳性重组子命名为p8-EGFP/rgp。将该质粒与PRV TK-/gI-基因组在质脂体介导下共转染PK-15细胞,获得PRV-EGFP/rgp重组病毒;通过噬斑克隆对其进行筛选、纯化,并通过RT-PCR、Southern-blot、Western-blot和间接免疫荧光对其进行鉴定,并对重组病毒的滴度、外源基因的遗传稳定性及其与亲本病毒株生长特性的关系进行了测定。结果表明:重组病毒的滴度(TCID50)为108.125/mL;外源基因在细胞内得到了有效的表达,并具有良好的免疫反应性和遗传稳定性;PRV-EGFP/rgp与亲本病毒PRV TK-/gI-生长趋势差异不显著。通过构建表达狂犬病病毒糖蛋白正向重组PRV的活载体疫苗的研制,为狂犬病疫苗的研制提供了新的思路和方法。
2008年12期 v.28;No.144 1398-1403页 [查看摘要][在线阅读][下载 399K] [下载次数:90 ] |[网刊下载次数:0 ] |[引用频次:5 ] |[阅读次数:0 ] - 魏德友;刘军;朱锡;宋继东;刘国胜;吴长福;刘娥娥;周媛媛;陈振文;
采集北京市丰台区城区和4个乡镇家养犬血清样品1 299份,采用免疫荧光中和试验法检测血清狂犬病病毒抗体效价。结果显示,被调查犬中有59.7%接种过狂犬疫苗,城区和乡镇接种率分别为75.9%和30.1%;有32.1%未接种过狂犬疫苗,城区和乡镇分别占16.1%和61.4%;有8.2%不清楚是否接种过狂犬疫苗,城区和乡镇分别占8%和8.5%。免疫犬狂犬病中和抗体效价d 0.5的占疫苗接种犬的57.1%,城区和乡镇分别为60.7%和40.6%。未免疫犬狂犬病中和抗体效价d>0的占未接种疫苗犬的27.6%,城区和乡镇分别为42.6%和20.3%。106只免疫不详犬均有狂犬病中和抗体。本次调查发现,犬群中仅有39%的犬只具有有效的狂犬病保护性抗体,疫苗接种率和狂犬病毒抗体效价城区均好于乡镇,但总体免疫水平仍不能有效控制群体中狂犬病的爆发和流行。
2008年12期 v.28;No.144 1404-1406+1410页 [查看摘要][在线阅读][下载 124K] [下载次数:103 ] |[网刊下载次数:0 ] |[引用频次:4 ] |[阅读次数:0 ] - 郭敏;何国声;徐梅倩;高兴春;岳城;
利用PCR方法从pET28/FgCL1重组质粒中扩增FgCL1基因,定向克隆至原核表达载体pGEX-4T-2中,构建重组质粒pGEX/FgCL1,将该重组质粒转化大肠杆菌BL21中,转化子经IPTG诱导表达。重组蛋白以包涵体形式存在,相对分子质量为61 000。Western-blot、ELISA试验结果显示,纯化后的重组蛋白能被自然感染大片吸虫的牛血清所识别,表达产物具有良好的抗原性。
2008年12期 v.28;No.144 1407-1410页 [查看摘要][在线阅读][下载 214K] [下载次数:124 ] |[网刊下载次数:0 ] |[引用频次:4 ] |[阅读次数:0 ] - 宋捷;唐泰山;田玲玲;张常印;雷治海;孙旭辉;陈国强;赵建;王凯民;姜焱;
从GenBank上调取西尼罗病毒的基因序列,经过分析,设计并合成2套套式RT-PCR引物,分别对西尼罗病毒灭活苗进行扩增,结果扩增出与目的片段大小一致的条带,将其克隆入pMD18-T-Vector中,进行序列测定,证实为WNV的基因。建立了套式RT-PCR检测方法,经各反应条件的优化后,发现2套nest-PCR引物能分别扩增出85个拷贝和62个拷贝的双链DNA,对乙型脑炎病毒、黄热病毒等11种病毒核酸进行扩增,发现具有良好的特异性,显示建立套式RT-PCR具有高效、快速、特异、灵敏的特点,可用于口岸WNV的检测和监测。
2008年12期 v.28;No.144 1411-1414+1418页 [查看摘要][在线阅读][下载 245K] [下载次数:109 ] |[网刊下载次数:0 ] |[引用频次:4 ] |[阅读次数:0 ] - 梅建军;王兴龙;万忠海;李晓燕;马云志;刘锴;王学理;任林柱;
应用热酚法提纯牛布鲁菌544A的O链,经Sephades G-50纯化后,琼脂糖凝胶免疫扩散和SDS聚丙烯酰胺凝胶进行电泳鉴定,用牛布鲁菌544A株全菌体免疫BALB/c小鼠,用纯化的O链筛选出4株针对O链表面A抗原的种特异性单克隆抗体的杂交瘤细胞株4B8、1C9、1G9和1E2,4株单克隆抗体均不与羊布鲁菌16 M、大肠杆菌O157、小肠结肠炎耶尔森菌O9、鼠伤寒沙门菌、放线杆菌发生交叉反应,具有高特异性,其中4B8的亲和常数达到了8.99×108M-1,适合用于鉴定牛种布鲁菌的研究。
2008年12期 v.28;No.144 1415-1418页 [查看摘要][在线阅读][下载 224K] [下载次数:95 ] |[网刊下载次数:0 ] |[引用频次:6 ] |[阅读次数:0 ]
- 王家乡;彭克美;杜安娜;唐丽;位兰;王岩;李升和;宋卉;靳二辉;
采用大体解剖学、组织化学和形态计量学的方法研究了0~3月龄非洲鸵鸟十二指肠的发育过程。观察了十二指肠的相对质量(相对于体质量),绒毛的高度、宽度、肌层厚度、肠腺隐窝的深度、肠腺的密度、绒毛杯状细胞、肠腺杯状细胞的数量变化。观察到十二指肠的相对质量在90日龄达到高峰;肠绒毛的高度、肌层厚度、肠腺隐窝的深度、肠腺的密度与日龄呈正相关;肠绒毛和肠腺的宽度在90日龄时达到峰值;绒毛杯状细胞、肠腺杯状细胞的数量从初生至45日龄随日龄增加而增加,45日龄至90日龄随日龄增加而减少,在45日龄达顶峰。结果表明,0~3月龄十二指肠的发育不完善,必须重视此阶段的饲养管理。
2008年12期 v.28;No.144 1419-1422页 [查看摘要][在线阅读][下载 400K] [下载次数:316 ] |[网刊下载次数:0 ] |[引用频次:26 ] |[阅读次数:0 ] - 王友令;张胜;唐兆新;
将90只30日龄的岭南黄鸡肉鸡(公母各半),随机分为3组:对照组(30只)、内毒素组(30只)、氨基胍治疗组(30只)。分别在试验后1、3、5、7、9 h每组各宰杀6只提取血清和肝组织。检测血清和肝组织中丙二醛(MDA)含量、超氧化物歧化酶(SOD)活性、谷胱甘肽过氧化物酶(GSH-Px)活性。结果显示,内毒素血症时血液和肝组织中丙二醛的含量升高,SOD与GSH-Px的活力降低,而在氨基胍治疗组情况明显改善。结果表明,肉鸡内毒素血症时存在着明显的脂质过氧化作用,而氨基胍可以明显的减轻内毒素诱导的自由基诱导的脂质过氧化损伤。
2008年12期 v.28;No.144 1423-1425+1429页 [查看摘要][在线阅读][下载 143K] [下载次数:86 ] |[网刊下载次数:0 ] |[引用频次:2 ] |[阅读次数:0 ] - 李引乾;靳亚平;王建华;沈文正;马勇江;
分离妊娠山羊子宫内膜淋巴细胞(Endometrial lymphocyte,EML)后,分别加入4、8、12、16 mg/L的亚硒酸钠进行体外培养,探讨硒对EML的活化作用及其对分泌细胞因子IL-2I、L-4、TGFβ1及TGFβ2的影响。结果显示,8~16 mg/L的亚硒酸钠可显著地促进山羊EML的体外活化(P<0.01),并呈剂量依赖性。EML活化后,对IL-2的分泌呈微弱的促进作用;对IL-4、TGFβ1、TGFβ2的分泌有显著的促进作用。
2008年12期 v.28;No.144 1426-1429页 [查看摘要][在线阅读][下载 128K] [下载次数:142 ] |[网刊下载次数:0 ] |[引用频次:6 ] |[阅读次数:0 ] - 刘宇鹏;吴琼;张明军;郝林琳;刘慧玉;刘松财;
依据IFNα1和THYα1的分子结构特征设计了1个连接肽,根据氨基酸序列和大肠杆菌密码子的偏爱性,采用PCR方法合成了三者融合基因,将该基因克隆至pGEX4T-2载体中,构建了pGEX4T-2-IFNα1-THYα1原核表达质粒。将重组质粒转化至BL21(DE3)受体菌中,37℃培养至D600为0.6~1.0时,IPTG(1.0 mmol/L)诱导培养4 h,经SDS-PEGA和Western-blot鉴定,目的蛋白获得高效表达。
2008年12期 v.28;No.144 1430-1432页 [查看摘要][在线阅读][下载 190K] [下载次数:217 ] |[网刊下载次数:0 ] |[引用频次:4 ] |[阅读次数:0 ] - 张锦霞;张守峰;郭学军;扈荣良;
将含有双抗菌肽基因的表达盒插入到逆转录病毒载体pLN-bcp-LK(R)中,获得了含有双抗菌肽基因的重组逆转录病毒载体pLN-bcp-LfcinB-CE-MA(R),利用脂质体转染PA317包装细胞,G418进行筛选得到了阳性细胞克隆,克隆扩大培养后,用病毒上清感染NIH3T3细胞进行滴度测定,最高滴度为1×104CFU/mL,用病毒上清转染妊娠中后期奶牛乳腺组织,产犊后采集的奶样经琼脂板溶圈法和Tricine-SDS-PAGE检测,结果表明乳汁中表达的抗菌肽对大肠杆菌和金黄色葡萄球菌均具有明显地抑菌活性,并能实现相对稳定的表达,表达可持续30~45 d。
2008年12期 v.28;No.144 1433-1437页 [查看摘要][在线阅读][下载 411K] [下载次数:158 ] |[网刊下载次数:0 ] |[引用频次:6 ] |[阅读次数:0 ] - 张金龙;李艳飞;王奔;封家旺;
用低维生素E(VE)和添加不饱和脂肪酸的日粮饲喂雏鸡建立VE缺乏雏鸡模型,采用比色法和半定量RT-PCR法分别检测脾脏淋巴细胞Caspase-3活性及Caspase-3 mRNA的表达水平。结果显示,VE缺乏组雏鸡脾脏淋巴细胞Caspase-3活性和Caspase-3 mRNA丰度高于对照组,组间差异均极显著(P<0.01)。结果表明,Caspase-3活性及Caspase-3 mRNA丰度的改变,是VE缺乏雏鸡脾脏淋巴细胞凋亡的调控机制之一。
2008年12期 v.28;No.144 1438-1440页 [查看摘要][在线阅读][下载 133K] [下载次数:173 ] |[网刊下载次数:0 ] |[引用频次:8 ] |[阅读次数:0 ] - 李玉荣;霍桂桃;周向梅;尹晓敏;赵德明;
采用RT-PCR技术从金黄地鼠(Mesocricetus auratus)脑组织获得朊蛋白基因(Prion protein nucleic acid,PRNP)开放阅读框(Open reading frame,ORF),截去其N端信号肽(66 bp)和C端GPI锚定位点(69 bp)形成朊蛋白编码区PRNPx;将编码区重组于融合表达质粒Pet-DsbA中,并在大肠杆菌BL21(DE3)plysS中经IPTG诱导表达,并经Western-blot验证。结果表明,金黄地鼠PRNP基因ORF区全长为765 bp,编码254个氨基酸的前体蛋白,核苷酸序列与已发表金黄地鼠序列(M14054)同源性为99.87%,其第116个氨基酸发生了同义突变由GCT变为GCC;朊蛋白在大肠杆菌得到高效表达,产物是相对分子质量为47 000的融合蛋白。
2008年12期 v.28;No.144 1441-1444页 [查看摘要][在线阅读][下载 303K] [下载次数:73 ] |[网刊下载次数:0 ] |[引用频次:0 ] |[阅读次数:0 ] - 王林;卓丽玲;顾建红;路浩;王富民;刘宗平;
采用机械研磨、筛网过滤和酶消化相结合的方法获取肾小管节段进行原代培养,以免疫组织化学法和细胞化学染色法鉴定培养细胞。结果表明,肾小管上皮细胞围绕肾小管节段呈岛屿状向四周逐渐生长并于第4~7天处于对数生长期,培养细胞角蛋白ck18表达阳性,碱性磷酸酶染色阳性,证实培养细胞为近端肾小管上皮细胞,且纯度较高。
2008年12期 v.28;No.144 1445-1448页 [查看摘要][在线阅读][下载 359K] [下载次数:407 ] |[网刊下载次数:0 ] |[引用频次:12 ] |[阅读次数:0 ] - 冯海华;邓旭明;赵丽红;宋斯伟;岳占碰;张国才;
提取健康梅花鹿鹿茸肥大软骨细胞总RNA,以RT-PCR获得colX基因2 038 bp的完整编码序列,将其克隆入载体pMD18-T中,经限制性内切酶和质粒PCR分析,并测序证实的阳性重组子与表达载体pET-28a(+)连接,转化大肠杆菌BL21(DE3)。以IPTG诱导,经SDS-PAGE及Western-blot分析表明,获得相对分子质量为65 000的colX蛋白表达带,与预期相符,表明成功获得梅花鹿colX基因蛋白。
2008年12期 v.28;No.144 1449-1451+1460页 [查看摘要][在线阅读][下载 169K] [下载次数:127 ] |[网刊下载次数:0 ] |[引用频次:1 ] |[阅读次数:0 ] - 陈国华;景志忠;房永祥;王笑笑;窦永喜;蒙学莲;宋世斌;
将猪白介素4(Porcine interleukin4,PIL-4)基因亚克隆到真核表达载体pEGFP-N1中,构建重组表达质粒pEGFP-PIL-4,利用脂质体法转染CHO-K1细胞,采用荧光显微镜实时观察、RT-PCR和Western-blot分别检测CHO细胞转录表达目的分子的情况,通过MTT法检测所表达蛋白的生物学活性。结果在将重组质粒转染CHO-K1细胞中24、48 h后的均观察到绿色荧光;经G418筛选14~20 d后转染的细胞形成了阳性细胞集落,用RT-PCR扩增出约339 bp的目的基因片段;经Western-blot检测到约为39 000的特异蛋白分子条带,并证明在转染重组质粒的细胞中表达了高生物活性的重组蛋白。
2008年12期 v.28;No.144 1452-1455+1467页 [查看摘要][在线阅读][下载 294K] [下载次数:203 ] |[网刊下载次数:0 ] |[引用频次:2 ] |[阅读次数:0 ] - 姚清侠;钱平;曹毅;徐卓菲;何雁南;陈焕春;
利用基因工程技术,将编码梅山猪α-干扰素成熟蛋白基因(mPoIFNα,501 bp)亚克隆到含分泌信号肽序列的毕赤酵母表达载体pPIC9K中,构建成分泌型重组表达载体pPIC9K-mPoIFNα。用化学方法(LiCl)将线性化的mPoIFNα与ssDNA共转化入毕赤酵母菌株GS115,转化子经MD平板筛选和PCR鉴定后,得到的阳性菌株再以高浓度的G418筛选多拷贝重组子。该高拷贝菌株经1%甲醇连续诱导4 d,表达产物经SDS-PAGE和Western-blot检测,结果表明在毕赤酵母中猪α-干扰素获得分泌型表达,表达产物约为20 000,在GS115中的表达量约为40mg/L,占GS115表达的可分泌型总蛋白的40.1%。对表达产物进行理化分析发现,重组酵母菌表达的蛋白耐酸(pH2),对热(56℃)部分敏感,并能被特异性抗猪α-干扰素抗体中和而不与抗猪γ-干扰素抗体反应。细胞病变抑制法(CPE50)测定干扰素生物活性,试验结果表明rPolIFNα具有较高的抗病毒生物活性,在MDBK中的抗VSV比活性为8.0×106U/mg。
2008年12期 v.28;No.144 1456-1460页 [查看摘要][在线阅读][下载 369K] [下载次数:305 ] |[网刊下载次数:0 ] |[引用频次:16 ] |[阅读次数:0 ] - 郭小权;黄克和;陈甫;骆建兵;
35日龄100羽伊沙蛋鸡随机均分为对照组(含钙1.00%)和高钙组(含钙3.78%)。试验第17天,对2组鸡作血清中尿酸、钙、磷、肌酐和尿素氮的测定,并各组剖检5只鸡,用原位缺口末端标记法(TUNEL法)对肾小管细胞凋亡细胞进行染色和计数,计算凋亡细胞百分率。结果表明,与对照组相比,高钙组血清无机磷显著降低,血清钙、尿酸、肌酐和尿素氮显著升高。与对照组相比,高钙组肾小管凋亡细胞百分率显著升高。
2008年12期 v.28;No.144 1461-1463+1479页 [查看摘要][在线阅读][下载 265K] [下载次数:211 ] |[网刊下载次数:0 ] |[引用频次:23 ] |[阅读次数:0 ]
- 侯磊;王建民;李培培;李珏;邢凤;
对黄河下游7个山羊种群共59个个体的mtDNA D-环533 bp序列进行分析,发现59个多态位点,其中单一多态位点21个,简约信息位点38个,分别占全序列的11.7%、3.94%和7.13%。确定了37种单倍型,崂山奶山羊1个个体还发现了1处5碱基的缺失。各群体单倍型多样度为0.785 7~0.969 7,核苷酸多样度为1.27%~1.73%,遗传多样性较丰富。构建系统发育树将37种单倍型分为2个分支,由此推断黄河下游山羊资源至少具有2个母系起源,角猾羊与A类型聚为1支,7个群体具有角猾羊起源,未发现捻角山羊对7个群体有贡献的证据。错配分析表明,A类型经历过群体扩张,B类型未经历过群体扩张。并通过遗传距离分析了各群体的遗传分化。
2008年12期 v.28;No.144 1474-1479页 [查看摘要][在线阅读][下载 800K] [下载次数:71 ] |[网刊下载次数:0 ] |[引用频次:12 ] |[阅读次数:0 ] - 李斌;韩伟;方俊顺;刘健明;赵焕;曹陈冲;陶勇;章美林;章孝荣;
采用离子霉素和6-DMAP对黄淮白山羊体外成熟卵母细胞进行联合激活,分别在不同的培养体系进行体外培养,观察孤雌胚胎的发育情况。培养体系分别为:无共培养条件下,M199(10%FCS)、CR1aa和HTF+P1;颗粒细胞共培养条件下,CR1aa、HTF+P1和SOFaa。结果发现,无共培养条件下,CR1aa和HTF+P1组孤雌胚胎的卵裂率显著高于M199组(P<0.05),但3组均未有囊胚;共培养条件下,HTF+P1组的卵裂率显著高于CR1aa和SOFaa组(P<0.05),而CR1aa组的囊胚率却显著高于其他2组(P<0.05)。综合试验结果说明,CR1aa联合颗粒细胞共培养能够获得较好的培养效果,适用于山羊孤雌胚胎的体外培养。
2008年12期 v.28;No.144 1480-1482页 [查看摘要][在线阅读][下载 96K] [下载次数:67 ] |[网刊下载次数:0 ] |[引用频次:6 ] |[阅读次数:0 ]