预防兽医学

  • 猪繁殖与呼吸综合征病毒江苏分离株ORF5及Nsp2基因部分序列分析

    迟兰;崔盟;王寿利;吴艳涛;刘秀梵;

    对2006—2007年分离于江苏省部分发病猪场的PRRSV,采用RT-PCR技术,进行ORF5基因序列以及Nsp2基因部分序列的扩增、克隆并测序。应用DNAStar软件将测序结果与已发表的国内外参考毒株进行比对分析。结果表明,分离的21株病毒ORF5基因大小均为603bp;与国内分离株之间同源性为87.7%~97.0%,与国外美洲型分离株同源性为85.6%~90.5%;21株PRRSV分离株与欧洲型毒株之间的同源性仅为54.1%~56.6%。14株用于扩增Nsp2基因部分序列的PRRSV在全基因组第2778~2780位及第2947~3033位分别缺3个和87个碱基,其中的2个江苏扬州分离株在第2747~2836位又缺失了90个碱基;14个毒株之间同源性为93.2%~99.0%,与VR-2332相比同源性为74.9%~78.5%,与国内河北、河南等地2006年的PRRSV分离株相比同源性为94.1%~99.1%。

    2010年02期 v.30;No.158 145-149页 [查看摘要][在线阅读][下载 331K]
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  • 猪繁殖与呼吸综合征病毒GP5、M蛋白基因的克隆及其基因疫苗构建

    马德慧;薛江东;刘锴;姚春雨;杨明霞;

    参照GenBank中猪繁殖与呼吸综合征病毒(PRRSV)美洲型代表株VR2332 GP5和M蛋白基因序列,设计并合成2对引物,用RT-PCR方法分别扩增出PRRSV野毒株GP5和M蛋白基因603,525bp片段,并将其分别克隆到pMD18-T载体。测序正确后,将GP5和M蛋白基因分别克隆到真核表达载体pEGFP-C1上,成功构建基因疫苗表达载体pEGP5-C1和pEM-C1。小鼠免疫试验证实,这些基因疫苗质粒可以诱导小鼠产生特异性抗体,并在二免后1周开始检测到特异性淋巴细胞增殖反应。

    2010年02期 v.30;No.158 150-153页 [查看摘要][在线阅读][下载 247K]
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  • 高致病性猪繁殖与呼吸综合征病毒(PRRSV)气溶胶的发生与传播机制

    曹永芝;马卫明;陈书民;柴同杰;宋移福;贺加双;刘莲莲;谢冰;

    为深入认识猪繁殖与呼吸综合征病毒(PRRSV)气溶胶的发生与传播机制,将35日龄无PRRSV抗体仔猪预饲1周后分为4组(PRSSV攻毒组、直接接触组、间接接触组和阴性对照组),饲养于正负压隔离器中。2个隔离器置于不同室内并通过管道相连,采用AGI-30收集器收集其空气样品。然后,将其接种Marc-145细胞,再用RT-PCR检测病毒;并检测血常规和抗体变化。结果发现,攻毒组于攻毒后4d开始形成气溶胶,并持续到试验结束。气溶胶高峰出现在攻毒后15d。气溶胶传播的间接接触组从临床症状、病理变化、提取病理组织核酸和抗体检测等多个方面都证明其感染了PRRSV,并经鼻腔向外排毒;直接接触组和间接接触组几乎同时感染PRRSV。试验表明,PRRSV不仅能形成气溶胶并且能够通过其迅速感染临近猪群。

    2010年02期 v.30;No.158 154-158页 [查看摘要][在线阅读][下载 178K]
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  • Envision免疫组化技术在诊断猪繁殖与呼吸综合征中的应用

    杨鸿;钱君娣;邓桦;何启盖;马春全;卢玉葵;

    为探讨免疫组织化学Envision法在诊断猪繁殖与呼吸综合征(PRRS)中应用的可行性,采用免疫组织化学Envision二步法对30例疑似PRRS病猪肺组织的病毒抗原进行定位、半定量检测。结果表明,Envision法可原位检测病猪肺组织PRRSV抗原的分布;其抗原的阳性表达主要出现在肺巨噬细胞胞浆内,其次为肺泡上皮细胞和细支气管黏膜上皮细胞。依据阳性细胞百分率,进行染色结果判断,检出阳性病猪23例,阳性检出率为76.7%。试验证明,Envision法具有高敏感、低背景、快速简便的特点,可在PRRS诊断中推广应用。

    2010年02期 v.30;No.158 159-161页 [查看摘要][在线阅读][下载 215K]
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  • 贵州省猪繁殖与呼吸综合征病毒分子流行病学调查

    毛君婷;史开志;周碧君;王开功;汪德生;文明;李永明;

    为了解2007年4月至2008年7月贵州省猪繁殖与呼吸综合征病毒(PRRSV)分子流行病学特征,在此期间基于PRRSV的Nsp2基因在全省33个发病猪场展开调查。结果表明,有3种不同Nsp2基因缺失类型毒株在贵州省流行。参考PRRSV经典毒株相应序列,根据Nsp2基因缺失的不同情况将PRRSV贵州省流行毒株分为3种类型,类型Ⅰ(3/33)缺失177个碱基,类型Ⅱ(29/33)缺失90个碱基,类型Ⅲ(1/33)缺失93个碱基。类型Ⅱ毒株与近年来国内广泛流行的高致病性PRRSV缺失情况一致,类型Ⅰ和Ⅲ是2种新发现的缺失型毒株,但其系统发生地位与高致病性PRRSV接近。

    2010年02期 v.30;No.158 162-165+173页 [查看摘要][在线阅读][下载 387K]
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  • 10株猪圆环病毒2型(PCV2)河南株全基因组的克隆与序列分析

    陈陆;彭志锋;杨霞;陈圆圆;王宏魁;孙彦婷;郑鹿平;王川庆;

    为了解猪圆环病毒2型(PCV2)河南株的起源及遗传变异,从河南省不同临床表现的病猪中克隆了10株PCV2的全基因组,并对其进行了序列测定及分析。结果表明,河南株之间以及与中国其他地区PCV2流行株之间同源性均很高;河南株均处于欧洲分支中,提示PCV2河南株可能起源于欧洲株;河南省不同年份的PCV2中确实存在一定的基因差异,但PCV2全基因组从总体上来说遗传进化相对稳定;河南省猪群中与PCV相关的疾病不是由PCV2变异毒株引起的。

    2010年02期 v.30;No.158 166-173页 [查看摘要][在线阅读][下载 1432K]
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  • 猪圆环病毒2型LAMP检测方法的建立与评价

    史利军;张锦秀;章金刚;李伟;范晓娟;李刚;

    根据猪圆环病毒2型(Porcine circovirus type 2,PCV2)Rep和Cap基因保守区设计2对引物,1对外引物和1对内引物;利用设计的4条引物,在Bst大片段聚合酶的作用下,对PCV2 DNA进行恒温扩增;扩增条件为63℃恒温反应1h;建立了PCV2环媒恒温扩增技术(LAMP)检测方法。对检测方法特异性评价表明,检测方法只能检测PCV2 DNA,对猪圆环病毒1型(Porcine circovirus type 1,PCV1)、猪细小病毒(Porcine parvovirus,PPV)及猪伪狂犬病病毒(Porcine pseudorabies virus,PRV)检测无交叉反应。灵敏度评价表明,该检测方法可以检测到样品中10个拷贝的PCV2 DNA含量。

    2010年02期 v.30;No.158 174-176页 [查看摘要][在线阅读][下载 286K]
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  • PCR检测临床病例中PCV-2、PRRSV和CSFV的混合感染

    何后军;陆承平;罗咏梅;

    参照GenBank中已发表的有关基因序列,分别设计合成针对PCV-2、PRRSV和CSFV的3对引物,分别建立检测临床病例中PCV-2、PRRSV和CSFV感染的PCR或RT-PCR方法。结果显示,扩增产物经琼脂糖凝胶电泳,分别各呈现1条大小约1154,372,375bp的特异条带。采用建立的PCR方法对江西各地发病猪和死亡猪的133份临床病料进行PCV-2检测,结果总检出率53.38%(71/133)。在71份PCV-2阳性的病料中检测出PRRSV20份,阳性率28.17%(20/71);CSFV9份,阳性率12.68%(9/71);PRRSV和CSFV共同感染9份,阳性率12.68%(9/71)。

    2010年02期 v.30;No.158 177-179页 [查看摘要][在线阅读][下载 136K]
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  • REV囊膜糖蛋白的表达、纯化及单克隆抗体的制备和初步鉴定

    张文娟;裴宗飞;牛钟相;

    以禽网状内皮组织增生症病毒(REV)的cDNA为模板,用PCR技术获得囊膜糖蛋白(env)基因的部分片段并构建了pGEX-4T-3-env表达质粒,进而在大肠杆菌BL21中表达融合蛋白GST-env,SDS-PAGE证明表达的融合蛋白以包涵体的形式存在。融合蛋白经过变性、复性以及牛凝血酶酶切后得到纯化的目的蛋白env,免疫BALB/c小鼠,经融合、筛选制备特异性单克隆抗体(mAb),并通过间接ELISA、间接免疫荧光和Western blotting等方法对mAb做初步鉴定。结果表明,试验成功表达了env蛋白,并获得了4株稳定分泌针对env蛋白的杂交瘤细胞(3-2A11,1-2B3,1-2D11,3D2),其分泌的mAb的Ig亚类(型)分别为IgG2b,IgG2b,IgG2b,IgG1。ELISA检测,对应腹水的效价分别为1∶105,1∶2.1×105,1∶2.2×105,1∶105。Western blotting结果显示4株抗env的mAb均能特异性识别env蛋白,间接免疫荧光分析则表明只有3-2A11和3D2这2株mAb能与REV全病毒特异性反应。

    2010年02期 v.30;No.158 180-182+187页 [查看摘要][在线阅读][下载 190K]
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  • 鸡传染性支气管炎病毒广西分离株血清型的分析

    王秀英;韦平;陈秋英;李孟;磨美兰;张胜斌;韦飞妮;

    应用病毒感染的鸡胚材料免疫新西兰兔的方法制备抗鸡传染性支气管炎病毒(IBV)单因子血清,然后在鸡胚气管环培养(Tracheal organ cultures,TOC)上对广西分离的7个IBV代表性毒株和3个常用疫苗株进行交叉病毒中和试验。结果显示,10个毒株被分为6个血清型。根据试验所得的R值,应用聚类分析法分析了各血清型毒株之间的亲缘关系,显示目前在广西流行的IBV野毒株之间以及其与疫苗株间的抗原性存在很大程度的差异,分属不同的血清型。同时还对IBV基因分型和血清分型之间的关系进行了探讨。

    2010年02期 v.30;No.158 183-187页 [查看摘要][在线阅读][下载 196K]
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  • 1株鸡传染性贫血病毒野毒株对不同日龄SPF鸡的致病性

    王林;陈浩;崔治中;

    从山东省某商品代肉鸡场表现生长迟缓的20日龄病鸡群分离到1株鸡传染性贫血病毒(CAV)SDLY08株,通过口服和肌肉注射2种途径分别感染1,7,21日龄SPF鸡,12d后检测CAV对SPF鸡体质量、免疫器官和血液指标的影响。结果表明,于3个不同日龄感染后12d,SDLY08株均可导致增重减缓,胸腺显著萎缩,脾脏肿大,同时还可引起白细胞、红细胞数及红细胞压积的显著减少。且1日龄和7日龄鸡易感性大于21日龄鸡,肌肉注射比口服感染组的致病性更强。

    2010年02期 v.30;No.158 188-191页 [查看摘要][在线阅读][下载 322K]
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  • 鸭新城疫病毒分离株抗原表位和遗传演化分析

    胡北侠;黄艳艳;路希山;张秀美;许传田;颜世敢;张伟;

    从规模化养殖场鸭群气管和泄殖腔试子分离到新城疫病毒(NDV)27株,用2株针对NDV HN单抗进行抗原表位分析,并选择4个分离株进行F基因高变区(374bp)和HN基因全长序列分析。抗原表位分析结果显示,27个鸭分离株均能与其中一株单抗C3-B7反应,而与另外一株单抗1E5反应为阴性。F基因(374bp)序列分析结果显示,4个鸭分离株均属于NDV ClassⅠ分支,分离株之间核苷酸同源性为99.2%~100%;分离株与NDV ClassⅡ毒株遗传距离为0.9%~9.9%,与NDV ClassⅠ毒株遗传距离为38.5%~41.7%。根据核苷酸序列推导的氨基酸序列表明,4个鸭NDV分离株F蛋白裂解位点氨基酸模式为:112-EROERL-117。HN基因序列分析结果显示,4个鸭NDV分离株HN基因全长1851bp,编码585个氨基酸;同源性比较发现4个鸭NDV分离株之间核苷酸同源性为99.7%~99.8%,与NDV ClassⅡ毒株核苷酸同源性为68.4%~70.5%,与NDV ClassⅠ毒株核苷酸同源性为95.8%~98.0%。本研究结果显示,鸭分离毒均属于NDV ClassⅠ弱毒,在抗原表位和基因序列上与广泛应用的NDV弱毒疫苗株(LaSota)不同,这些毒株的来源有待进一步深入研究。

    2010年02期 v.30;No.158 192-195页 [查看摘要][在线阅读][下载 363K]
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  • 鸭瘟病毒CHv株UL34基因的克隆及分子特性分析

    钟小容;程安春;汪铭书;朱德康;龚永强;贾仁勇;罗启慧;刘菲;陈孝跃;

    通过生物信息学分析、斑点杂交实验、克隆和测序证实了本实验室构建鸭瘟病毒(Duck plague virus,DPV)CHv株基因文库时新分离的基因(GenBank登录号EF643562)为DPV UL34基因,进一步运用有关分子生物学软件对该基因进行了分子特性分析。结果表明,该基因大小为831bp,编码276个氨基酸的多肽,含有疱疹病毒UL34类似蛋白家族保守区。系统进化树分析显示,其与α疱疹病毒亚科中马立克病毒属的GaHV-2,GaHV-3,MeHV-1,EHV-1和水痘病毒属的CeHV-9,HHV-3的亲缘关系最近,揭示DPV-CHv株应该被划为α疱疹病毒亚科中的单独一类。该编码蛋白在252~274位氨基酸有一个明显的跨膜区,C末端有一微体靶向序列(ARL),但无信号肽;含有4个酪蛋白激酶Ⅱ磷酸化位点,3个蛋白激酶C磷酸化位点,5个N-豆蔻酰化位点和1个N-糖基化位点;亚细胞定位主要位于细胞核;密码子偏爱性分析显示其偏爱的密码子第3位碱基多以A和T结尾,属于低表达基因;不同密码子使用频率与酵母、大肠杆菌和人的密码子使用频率比较表明,其与大肠杆菌和酵母较接近,与人差异较大。该分析结果揭示DPV UL34基因为一C端锚定的Ⅱ型膜蛋白基因,体外表达选择大肠杆菌和酵母表达系统较为合适,同时该结果也为进一步开展DPV UL34基因的生物学功能研究具有一定的参考作用。

    2010年02期 v.30;No.158 196-201页 [查看摘要][在线阅读][下载 393K]
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  • 新型鸭肝炎病毒分离株JFX08全基因组测定与分析

    赵立娜;马秀丽;李玉峰;黄兵;宋敏训;李建亮;崔言顺;

    对我国鸭病毒性肝炎病毒(Duck hepatitis virus,DHV)分离株JFX08的全基因组进行了序列测定与分析。结果表明,JFX08毒株的基因组全长为7793nt,包括652nt的5’UTR,6753nt的ORF,366nt的3’UTR以及19nt的poly(A)尾巴。JFX08毒株的ORF编码2251个氨基酸,各基因均与韩国新型毒株的氨基酸序列相似性最高,与1型DHV和台湾新型DHV的序列相似性均较低。其中VP1较1型DHV存在2个氨基酸的插入和较多氨基酸位点的突变,高变区主要集中在180~194位和213~219位。JFX08毒株的非编码区核苷酸序列之间存在大量碱基突变和插入/缺失。多聚蛋白、VP0、VP3、VP1、2C和3D基因进化分析结果均表明,JFX08分离株与韩国新型DHV的遗传距离最近,属基因C型。

    2010年02期 v.30;No.158 202-205页 [查看摘要][在线阅读][下载 334K]
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  • 副猪嗜血杆菌广东分离株外膜蛋白P5基因的克隆及蛋白结构预测

    陈善真;王贵平;曾振灵;李春玲;贾爱卿;杨冬霞;

    根据GenBank上发表的副猪嗜血杆菌(HPS)外膜蛋白基因的核苷酸序列设计并合成1对特异性引物,从广东省HPS分离株外膜蛋白P5基因中扩增出与预期设计的1116bp大小相符的片段,将扩增产物连接到pMD18-T载体上,进行序列测定和分析。结果表明,克隆出HPS广东分离株的目的基因,核苷酸长为1116bp,共编码371个氨基酸,与已发表的HPS(SH0165)外膜蛋白基因核苷酸序列同源性100%,氨基酸同源性100%。生物学预测分析结果显示,HPS外膜蛋白是一种混合型结构蛋白,含有α-螺旋、β-折叠、β-转角和无规则卷曲,其β-转角和无规则卷曲区域可能形成抗原表位;其N端含有1个信号肽,最佳切割位点在21~22个氨基酸;有15个抗原决定簇;无跨膜区;同源建模分析,未见相似三维结构。

    2010年02期 v.30;No.158 206-210页 [查看摘要][在线阅读][下载 415K]
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简讯

人兽共患病

  • 猪流感病毒H9N2亚型济南株HA、NA基因的克隆与序列分析

    朱晓林;凌宗帅;邱莹;谢之景;赵宏坤;姜世金;张兴晓;

    根据GenBank中流感病毒H9N2亚型HA基因与NA基因序列,分别设计扩增HA基因与NA基因的特异性引物,用RT-PCR方法扩增猪流感病毒H9N2济南株(SW/SD/JT/07)HA基因和NA基因,分别将RT-PCR扩增产物克隆入pMD18-T载体,进行测序分析。结果表明,SW/SD/JT/07 HA基因长度为1701bp,编码566个氨基酸,HA0切割位点序列为R-S-S-R-G,属非高致病性毒株;HA蛋白有8个糖基化位点,与参考毒株糖基化位点数一致;HA蛋白有5个受体结合位点,其中在190位氨基酸与其余参考毒株存在差异。SW/SD/JT/07 NA基因长度为1413bp,编码470个氨基酸,NA蛋白基质结合部与参考毒株一致,高度保守;NA蛋白有5个抗原位点,在325位为D其余参考毒株均为N,SW/SD/JT/07与DC/HB/W1/04,CK/GS/2/99在398位为E,其余参考毒株为D或N;SW/SD/JT/07 NA蛋白与CK/SH/F/98,DC/HB/W1/04,CK/GS/2/99,SW/GD/WXL/04,SW/SD/W4/03,SW/YN/Simao2/07一样在茎区63,64,65位发生氨基酸缺失。SW/SD/JT/07 HA基因与参考毒株的同源性82.5%~98.6%,NA基因与参考毒株的同源性82.2%~99.1%。SW/SD/JT/07 HA基因与NA基因系统发生树分析表明,SW/SD/JT/07与AIV H9N2亚型亲缘关系密切。

    2010年02期 v.30;No.158 211-214页 [查看摘要][在线阅读][下载 313K]
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  • 牛结核分枝杆菌溶血磷脂酶真核表达载体的构建及在Hela细胞中的表达

    贾浩;徐广贤;周萍;张艳;王玉炯;

    为了研究牛结核分枝杆菌溶血磷脂酶基因(Lip)的生物学特性及其功能,试验构建了Lip-pEGFP融合基因的真核表达载体,利用脂质体(lipofectamine2000)将其转染到Hela细胞中,用荧光显微镜检测GFP在细胞中的表达情况。结果显示,重组Lip-pEGFP载体在Hela细胞中获得了高效表达,且能够稳定传代,为进一步研究Lip的生物学功能及其在牛结核分枝杆菌中的作用奠定了基础。

    2010年02期 v.30;No.158 215-218页 [查看摘要][在线阅读][下载 418K]
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  • 大肠杆菌性子宫内膜炎对山羊血液和子宫内膜的影响

    包喜军;吕俊锦;孙琳;刘孟;胡玉龙;周生银;李建基;王亨;

    用致病性大肠杆菌经子宫角插管灌入子宫腔,以建立山羊子宫内膜炎疾病模型。经检测发现,致病性大肠杆菌在子宫静脉血液中呈一过性存在;子宫卵巢静脉和颈静脉血液中性粒细胞数量明显增加。其中,颈静脉血液嗜中性粒细胞增多明显于子宫静脉血液,颈静脉血液淋巴细胞降低明显于子宫静脉血液。病羊子宫黏膜损伤、炎性细胞浸润,子宫内膜上皮分泌细胞微绒毛和纤毛成片或部分脱落。

    2010年02期 v.30;No.158 219-221页 [查看摘要][在线阅读][下载 330K]
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  • 猪囊尾蚴头节抗原的制备及间接ELISA方法的建立

    蔡亚南;杨桂连;徐鹏;门静涛;姜晶;刘春杰;赵权;

    采用Sephadex G-200层析技术纯化猪囊尾蚴头节抗原,用纯化抗原包被ELISA板,建立间接ELISA方法。通过各种条件优化,最终确定最佳试验条件为:抗原最适包被量为30mg/L;血清稀释度为1∶800;血清最佳反应时间为60min。结果表明,该方法具有较好的稳定性和重复性,可用于分泌抗猪囊尾蚴头节单克隆抗体杂交瘤细胞株的筛选。

    2010年02期 v.30;No.158 222-224页 [查看摘要][在线阅读][下载 93K]
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  • 用卡片PCR法检测卡耶他环孢子虫

    黄燕;张龙现;李晓虹;徐梅倩;吕彪;韩伟;朱顺海;周洋;曹杰;何国声;

    使用FTA卡片法提取卡耶他环孢子虫DNA,利用特异性引物组F1E/R2B、CC719/CRP999进行巢式PCR,得到1条298bp的特异条带。并以柔嫩艾美尔球虫、贝氏隐孢子虫等作为对照,结果显示,除卡耶他环孢子虫外,均无特异性条带。用卡耶他环孢子虫卵囊进行巢式PCR敏感性试验,结果显示敏感度最高达1.0×100个/mL。

    2010年02期 v.30;No.158 225-227+232页 [查看摘要][在线阅读][下载 181K]
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基础兽医学

  • 山羊子宫内膜上皮细胞转染pCI-neo-hTERT质粒后的永生化

    吴庆侠;王爱华;司永嘉;周丽梅;盛宏霞;靳亚平;

    为获得大量的、具有高度同一性和表型功能正常的山羊子宫内膜上皮细胞(EEC),本试验将含人端粒酶逆转录酶(hTERT)基因的真核表达质粒pCI-neo-hT ERT导入原代山羊EEC中,筛选稳定转染的细胞克隆,进行表型鉴定,利用免疫细胞化学方法检测hTERT导入后细胞端粒酶活性的表达情况,探讨转染后细胞的生长特性。结果显示,转染后获得的阳性克隆细胞及其传代细胞呈明显铺路石状,与原代细胞形态一致,具有接触抑制性;角蛋白检测阳性;细胞具有较高的端粒酶活性,目前已传至50代仍稳定增殖;100nmol/L的雌二醇(E2)可促进该细胞的增殖;50,100nmol/L的孕酮(P4)可明显抑制该细胞的增殖。这表明hTERT导入山羊EEC后,可使其重建端粒酶活性,从而获得大量的、具有高度同一性和表型正常的细胞。

    2010年02期 v.30;No.158 228-232页 [查看摘要][在线阅读][下载 448K]
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  • 玉屏风散及其麦冬加味对O型口蹄疫疫苗免疫反应的影响

    李瑞丽;胡松华;

    21只ICR小鼠随机分为对照组、玉屏风散组和玉屏风散加麦冬组。将玉屏风散及其加味制成含生药2g/mL的药液,每只小鼠灌胃给药1次(0.25mL),24h后经腹股沟皮下注射口蹄疫(FMD)疫苗(0.2mL),2周后用同样方法加强免疫1次。二免后3周采血和取脾脏,用间接ELISA检测特异性IgG及其亚类,用MTT法进行淋巴细胞增殖试验。结果显示,二免后试验组血清抗FMDVIgG和IgG亚类水平以及淋巴细胞刺激指数均显著高于对照组(P<0.05),而玉屏风散和玉屏风散加麦冬2组间的抗体水平以及淋巴细胞刺激指数没有显著性差异(P>0.05)。

    2010年02期 v.30;No.158 233-235页 [查看摘要][在线阅读][下载 231K]
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  • 肉桂醛、柠檬醛对犬白色念珠菌黏附力及超微结构的影响

    孙博;张志宏;金艺鹏;林德贵;

    根据先前的研究,肉桂醛和柠檬醛都有较好的抗真菌活性。本研究对肉桂醛、柠檬醛在真菌黏附口腔黏膜上皮以及对犬白色念珠菌超微结构的影响进行探索。结果表明,药物处理组白色念珠菌黏附率显著下降。扫描电镜显示,经过药物处理的犬白色念珠菌细胞表面粗糙、皱缩、萎陷、外膜空洞、胞浆内容物流出。透射电镜下,细胞普遍发生细胞壁增厚,质壁分离,萎陷,胞浆内容物外流等损伤。

    2010年02期 v.30;No.158 236-238页 [查看摘要][在线阅读][下载 302K]
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  • α-酮戊二酸对免疫应激下断奶仔猪肝损伤的影响

    李永塘;侯永清;丁斌鹰;刘玉兰;朱惠玲;王蕾;刘坚;

    24头体质量为(7.25±1.13)kg的(21±1)日龄(杜×长×大)断奶仔猪随机分为3组,每个组设有8个重复,每个重复1头猪。3个组分别为:饲喂基础日粮,注射生理盐水(对照组);饲喂基础日粮,注射脂多糖(LPS)(LPS组);饲喂基础日粮+1%α-酮戊二酸(AKG),注射LPS(AKG组)。预试期7d,正式试验期16d,探讨AKG对免疫应激下断奶仔猪肝损伤的影响。结果显示:(1)LPS刺激导致血清腺苷脱氨酶(ADA)的活性显著升高了15.29%(P<0.05),日粮添加1%AKG血清ADA活性较LPS组降低了7.85%(P>0.05);(2)LPS刺激导致肝脏丙二醛(MDA)活性显著升高了59.61%(P<0.05)以及谷胱甘肽过氧化物酶(GSH-Px)活性显著降低了23.21%(P<0.05),而日粮添加1%AKG肝脏MDA活性较LPS组降低了13.70%(P>0.05)、GSH-Px活性则升高了17.16%(P>0.05);(3)LPS刺激导致肝脏总蛋白质含量和RNA/DNA比值分别显著增加了8.20%(P<0.05),10%(P<0.05),而日粮添加1%AKG较LPS组肝脏总蛋白质含量和RNA/DNA比值分别降低了3.94%(P>0.05),10%(P<0.05)。结果表明:AKG能在一定程度上缓解LPS刺激对断奶仔猪肝脏的损伤。

    2010年02期 v.30;No.158 239-242页 [查看摘要][在线阅读][下载 129K]
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临床兽医学

  • 高铜对肉鸡肝线粒体膜通透性、脂类代谢及肝和肌肉铜含量的影响

    王荣梅;曹华斌;李和平;郭剑英;李成梅;唐兆新;

    选用1日龄健康AA肉鸡120只随机均分成4组,使用硫酸铜作为铜源,饲喂玉米-豆粕型基础日粮,对照组饲料铜含量为11mg/kg,3个试验高铜组饲料铜含量分别为110,220,330mg/kg,试验至60日龄结束,来探讨高铜日粮对肉鸡肝线粒体膜通透性、脂类代谢及肝和肌肉铜含量的影响。结果显示:(1)随着铜浓度的增加和/或饲养日龄的延长,线粒体膜通透性转换孔(Mitochondrial permeability transition pore,MPTP)逐渐扩大(P<0.05);(2)血清总胆固醇(T-Ch)含量110,220mg/kg铜添加组低于对照组(P>0.05),330mg/kg铜添加组极显著低于对照组(P<0.01),而甘油三酯(TG)的含量在各高铜组均极显著低于对照组(P<0.01);(3)与对照组相比,肝脏铜含量110,220mg/kg铜添加组有所增加(P>0.05),330mg/kg铜添加组极显著增加(P<0.01),肌肉中铜含量在各高铜组均极显著高于对照组(P<0.01)。这说明高铜可造成肝线粒体不同程度的肿胀和损伤,改变肉鸡脂类的新陈代谢,明显增加肝和肌肉组织的铜含量。

    2010年02期 v.30;No.158 243-246页 [查看摘要][在线阅读][下载 139K]
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  • 母鼠围产期铅暴露对仔鼠的氧化损伤及乙酰半胱氨酸的保护效应

    袁燕;达剑森;路浩;刘学忠;卞建春;刘宗平;

    为探讨发育期铅暴露所致仔鼠氧化损伤及N-乙酰半胱氨酸(NAC)的保护效应,从母鼠怀孕开始通过饮水染铅至仔鼠21日龄断奶建立动物模型,测定断奶仔鼠脑组织和血清谷胱甘肽过氧化物酶(GSH-Px)、超氧化物歧化酶(SOD)、过氧化氢酶(CAT)、乙酰胆碱酯酶(AchE)活性和丙二醛(MDA)含量,并观察海马的组织结构变化。结果显示,染铅使出生后21d仔鼠脑组织和血清MDA含量极显著升高(P<0.01),GSH-Px,SOD,AchE活性极显著降低(P<0.01),血清CAT活性极显著降低(P<0.01);NAC拮抗组与染毒组比较,血清和脑组织MDA含量极显著或显著降低(P<0.01或P<0.05),脑组织SOD活性显著升高(P<0.05),血清SOD,GSH-Px,CAT,AchE活性极显著升高(P<0.01),其余指标均差异不显著(P>0.05)。组织学观察表明,海马神经细胞形态正常,组间未见明显病理组织学变化,超微结构可见染毒组部分神经细胞异常。结果表明,母鼠铅暴露可致仔鼠脑组织脂质过氧化损伤,NAC可提高仔鼠脑组织的抗氧化能力,对铅损伤具有一定的保护作用。

    2010年02期 v.30;No.158 247-249+253页 [查看摘要][在线阅读][下载 231K]
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  • 乙酰半胱氨酸对大鼠饮水镉暴露所致肾功能损伤的保护效应

    陈大伟;王林;曹瑾;刘宗平;

    采用饮水对大鼠进行镉染毒(CdCl2,50mg/L)和NAC保护(CdCl250mg/L+NAC1g/L)试验,为期8周,通过检测尿液中碱性磷酸酶(UALP)、N-乙酰-β-D-氨基葡萄糖苷酶(UNAG)、γ-谷氨酰基转移酶(UGGT)活性的动态变化及观察肾小管上皮刷状缘超微结构,探讨镉对大鼠肾脏功能损伤以及NAC的保护作用。结果显示,镉染毒2周后UNAG,UGGT,UALP活性即显著或极显著高于对照组(P<0.05或P<0.01),且升高幅度与染毒时间呈正相关;与染毒组比较,保护组尿液中酶活性从试验后4周开始显著或极显著下降(P<0.05或P<0.01)。超微结构观察发现,镉染毒使大鼠肾小管上皮刷状缘不同程度的断裂和脱落,保护组刷状缘基本完整。结果表明,50mg/LCdCl2饮水暴露对肾功能和结构造成了明显损伤,NAC对这种损伤有显著的保护作用。

    2010年02期 v.30;No.158 250-253页 [查看摘要][在线阅读][下载 411K]
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  • 醋酸铅对小鼠卵巢组织结构和卵巢颗粒细胞凋亡的影响

    贺秀媛;朱翠娟;袁慧;张君涛;原维;李小波;朱家增;刘宗平;

    将40只20日龄雌性昆明系小鼠随机分成3个处理组和1个对照组,每组10只。给3个处理组小鼠分别连续2d腹腔按体质量注射醋酸铅10,20,40mg/kg,对照组小鼠注射等体积的生理盐水。于注射后24,72h分离卵巢,用原位末端标记法(TUNEL)测定卵巢颗粒细胞的凋亡率,研究卵巢组织结构及卵巢颗粒细胞凋亡的变化。结果显示,醋酸铅可使小鼠卵巢组织结构发生病变,加速卵巢颗粒细胞的凋亡,且凋亡率随着攻毒剂量的增加和时间的延长而升高,与对照组相比,差异极显著(P<0.01);表明醋酸铅对小鼠卵巢具有毒性作用,可诱导卵巢颗粒细胞发生凋亡,并呈现一定的剂量-时间依赖关系。

    2010年02期 v.30;No.158 254-257页 [查看摘要][在线阅读][下载 509K]
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动物科学

  • 不同蛋白和锌水平对早期断奶仔猪结肠蛋白质腐败产物和腹泻的影响

    杨玫;周安国;王之盛;

    采用2×2因子设计(蛋白水平23%或17%,ZnO100mg/kg或3000mg/kg),选用21日龄断奶的杜长大三元杂交猪32头,体质量(6.3±0.4)kg,随机分为4组,每组设4个重复,每个重复2头猪,试验期4周。试验结束后,从每个重复中随机挑选1头试猪进行屠宰,收集结肠内容物。结果表明,玉米-豆粕型基础日粮中添加3000mg/kg饲料级ZnO,对高蛋白诱发的高腹泻发生率有极显著的抑制作用(P<0.01),这可能是由于高锌可明显降低结肠内容物挥发性盐基氮和氨氮含量(P<0.01),显著提高高蛋白日粮的胰蛋白酶(P<0.05)、胃蛋白酶活性(P<0.05)和CP表观消化率(P<0.05)所致。

    2010年02期 v.30;No.158 258-261页 [查看摘要][在线阅读][下载 136K]
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  • 日粮锌源和锌水平对断奶仔猪血清及组织铜、铁、锌沉积的影响

    丁小玲;汤继顺;王希春;吴金节;

    选用临床检查健康的(26±2)日龄"杜×长×大"三元杂交断奶仔猪100头,按体质量和性别随机分为5组,每组20头,分别饲喂基础日粮、基础日粮+2000mg/kg氧化锌、基础日粮+3000mg/kg氧化锌、基础日粮+250mg/kg蛋氨酸锌、基础日粮+500mg/kg蛋氨酸锌。试验期14d。于断奶后0,7,14d,经前腔静脉采血,用原子吸收光谱仪检测血清中铜、铁、锌水平。试验结束时,每组选5头仔猪放血致死,取心、肝、肾、脑、脾、胸腺组织,测定铜、铁、锌含量。结果显示,仔猪断奶后,血清中铜、锌水平显著或极显著下降(P<0.05或P<0.01);添加不同锌源和锌水平的高锌日粮能提高断奶仔猪肝、肾、脑、血清锌的含量,显著或极显著降低仔猪血清铜和心、胸腺铜以及脾铁水平(P<0.05或P<0.01),对血清铁及其他组织铁含量无明显影响。这表明高锌日粮能增加断奶应激仔猪体内锌水平,降低部分组织中铜、铁含量。

    2010年02期 v.30;No.158 262-265+270页 [查看摘要][在线阅读][下载 185K]
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  • 水貂生长激素基因多态性与体质量性状的关联分析

    李玉梅;丁雪梅;杨金生;房恒通;唐鸿宇;杨金子;姚纪元;

    以水貂的生长激素基因(GH)作为候选基因,采用单链构象多态性和DNA测序的方法检测GH基因单核苷酸多态性(SNPs),并针对该群体特点建立合适的统计分析模型,探讨GH基因多态性与体质量性状的相关性。结果表明,C→A突变产生的3种基因型间的水貂个体体质量存在一定的差异(P<0.05),BB基因型个体与AA基因型个体之间有一定的差异(P<0.05)。T→A和C→G突变没有导致氨基酸的变化,DD基因型个体体质量平均值要高于CC基因型,但产生的3种基因型对水貂体质量的影响没有显著性差异(P>0.05)。统计各基因型之间的组合给水貂体质量带来的影响时,发现不同基因型之间的组合对所检测水貂样本的体质量有影响(P<0.05)。

    2010年02期 v.30;No.158 266-270页 [查看摘要][在线阅读][下载 221K]
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  • 牛腔前卵泡体外培养前后质量评定

    高志花;程玉芳;王琪;李秀花;周虚;

    采用台盼蓝染色、相差显微镜观察以及透射电镜方法对体外培养前后牛腔前卵泡活力进行评定。结果表明,台盼蓝染色和相差显微镜观察检测卵泡活力有一定的误检率,超微结构检测能够客观、真实地反映腔前卵泡健康状况,可作为评定腔前卵泡培养系统优劣的一个可靠手段。在实际应用中,相差显微镜观察与超微结构评定相结合可发挥良好作用。

    2010年02期 v.30;No.158 271-273+277页 [查看摘要][在线阅读][下载 266K]
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  • 猪卵母细胞与猪、水牛及食蟹猴精子的胞质内显微受精

    许惠艳;卢晟盛;卢克焕;

    为探讨猪精子、水牛精子及食蟹猴精子分别注入到猪卵母细胞后原核形成及早期胚胎发育情况,利用屠宰场收集的猪卵母细胞,经体外成熟44~48h后,进行胞质内显微受精(ICSI)操作。试验1:体外培养18~19h,用Ho-echst33342荧光染色,检查原核形成情况。试验2:进行体外培养,ICSI后2d检查分裂率,7d记录囊胚率。试验1结果显示:在原核形成率上,猪同种显微受精,原核形成率(50.10%)显著高于注入水牛精子(37.06%)及食蟹猴精子(37.48%),且差异显著(P<0.05),注入水牛精子和食蟹猴精子间差异不显著。试验2结果显示:猪同种显微受精所得的分裂率(86.58%)和囊胚率(29.93%)与水牛精子注入(70.98%,18.48%)、食蟹猴精子注入(78.69%,16.92%)差异显著(P<0.05)。结果表明,水牛精子、食蟹猴精子分别注入到猪卵母细胞后,观察到雌雄原核和精子解聚;水牛精子注入猪卵母细胞与食蟹猴精子注入猪卵母细胞,经体外培养发育到囊胚。

    2010年02期 v.30;No.158 274-277页 [查看摘要][在线阅读][下载 129K]
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  • 氨基酸、维生素对水牛体外受精胚胎体外发育的影响

    成俊萍;陆风花;王晓丽;韦精卫;潘红平;石德顺;

    通过在培养液中添加不同浓度的氨基酸或维生素,探讨其对水牛体外受精(IVF)胚胎体外发育的影响。结果表明:(1)非必需氨基酸可显著提高水牛卵母细胞IVF后胚胎的分裂率,但对囊胚发育率无显著影响;(2)低浓度的必需氨基酸对水牛IVF胚胎的发育具有一定促进作用,但高浓度则有抑制作用;(3)维生素对水牛IVF胚胎发育则有促进作用。在培养液中添加维生素,水牛IVF胚胎的分裂率和第7天囊胚发育率显著提高。

    2010年02期 v.30;No.158 278-281页 [查看摘要][在线阅读][下载 137K]
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综述