预防兽医学

  • 猪蓝耳病病毒抗体双抗原夹心ELISA方法的建立及初步应用

    仝利剑;赵建增;张社民;高荣;高英杰;慕泽鑫;邢海云;罗胜军;温涛;

    根据PRRSV VR-2332株序列设计了1对扩增PRRSV N蛋白基因的特异性引物,从PRRSV北方株感染细胞中提取总RNA,通过RT-PCR获得长约372 bp的N蛋白编码基因片段。将其克隆到pGEX-6p-1质粒,构建了原核表达载体pPRRS-N。重组基因在大肠杆菌中表达出相对分子质量约为41 000的融合蛋白,目的蛋白表达量约占菌体蛋白的28.5%。利用此重组融合N蛋白建立了一种检测PRRSV特异性抗体的双抗原夹心ELISA,并通过与商品化试剂盒的应用比较对本方法进行了系统评价。分析了来自北京、山东、河南、河北4省区13个养猪场的260份血清,结果表明,本方法的敏感性和特异性分别为93.5%和86.7%,与IDEXX PRRSV抗体检测试剂盒检测结果的符合率达到91.5%。

    2010年10期 v.30;No.166 1273-1276页 [查看摘要][在线阅读][下载 220K]
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  • 猪传染性胃肠炎病毒吉林株的分离鉴定及S基因的克隆与序列分析

    王龙涛;葛晨霞;王翠瑜;黄海龙;高云航;胡桂学;

    利用PK-15细胞从临床上表现为腹泻症状的病死仔猪肠系膜淋巴结材料中分离获得1株病毒,对该病毒进行病毒形态学、PCR检测与动物回归试验等系统鉴定后,证实该分离株为猪传染性胃肠炎病毒(TGEV),命名为TGEVJL。利用PCR方法克隆出其S基因部分片段,并将该基因序列和推导的氨基酸序列与7个不同来源的TGEV毒株进行同源性和亲缘关系的比较分析,结果表明,各毒株间核苷酸和氨基酸的同源性分别为96.3%~99.3%和94.8%~98.8%;系统进化树结果表明,TGEVJL株与日本分离的TQ14毒株和西班牙分离的TOY56-165毒株亲缘较近,表明不同地区分离毒株的S基因差异不大。

    2010年10期 v.30;No.166 1277-1281页 [查看摘要][在线阅读][下载 449K]
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  • PRRSV变异株ORF6基因与IL-18共表达真核质粒的构建及其表达

    王晓莉;李志杰;丁壮;张泉鹏;宣华;王贵平;

    针对白细胞介素18(IL-18)基因和本实验室分离的PRRSVJL/07/SW毒株全基因序列,分别设计了2对特异性引物,扩增出IL-18基因和ORF6基因。将2个目的基因克隆于真核表达载体pEGFP-N1中,成功构建了重组真核质粒pEGFP-ORF6和pEGFP-IL18-ORF6,阳性质粒转染Marc-145细胞进行筛选。通过表达载体在转染细胞中的高效转染,增强型绿色荧光蛋白(EGFP)快速、准确的反映出阳性质粒在细胞质中的正确表达,再通过SDS-PAGE和Western blot鉴定构建的真核表达质粒pEGFP-IL18-ORF6的正确性。结果表明,ORF6基因和IL-18基因在Macr-145细胞中能有效表达。结论,所构建的真核质粒pEGFP-IL18-ORF6结构正确,能够在Marc-145细胞中高效表达,而且表达产物具有特异免疫学反应。

    2010年10期 v.30;No.166 1282-1285+1290页 [查看摘要][在线阅读][下载 361K]
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  • SYBR Green Ⅰ实时荧光定量PCR检测猪流行性腹泻病毒方法的建立及应用

    王金良;郭显坡;魏凤;沈志强;

    根据GenBank登录的猪流行性腹泻病毒株FJ473395的M基因序列设计1对特异性引物,经RT-PCR扩增出182 bp的片段。产物经回收与pMD18-T Vector连接后转化到基因工程菌DH5α中,提取重组质粒,经PCR及测序鉴定后,作为阳性模板建立SYBR GreenⅠ荧光定量PCR标准曲线,并做敏感性试验、特异性试验和重复性试验。结果表明,标准曲线循环阈值与模板浓度呈良好的线性关系,产物Tm在85~85.5℃之间,灵敏度为5.875拷贝/μL,特异性和重复性较好。本试验建立了检测PEDV的SYBR GreenⅠ荧光定量PCR方法,为该病的早期诊断,并定量分析PEDV感染程度奠定了基础。

    2010年10期 v.30;No.166 1286-1290页 [查看摘要][在线阅读][下载 455K]
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  • A亚群禽白血病病毒GD08株的分离与全基因组序列测定

    张小桃;辛欢欢;张贺楠;史伟伟;刘红波;廖明;辛朝安;曹伟胜;

    通过DF-1细胞培养、ELISA抗原检测和特异聚合酶链式反应(PCR)从疑似禽白血病感染的黄羽肉种鸡中,分离并鉴定出1株A亚群禽白血病病毒(ALV-A),命名为GD08。依据A亚群原型株RAV-1前病毒全基因组序列设计并合成3对引物,首次完成了ALV-A中国分离株的全基因组序列测定。测序结果显示GD08株基因组序列全长7 704 bp,其中gp85全长为1 018 bp,预计编码339个氨基酸。序列分析发现GD08株的gp85与国内外各参考毒株的相应核苷酸序列相似性在44.2%~89.4%之间,其中与A亚群MAV-1株相似性最高(89.4%),与J亚群原型株HPRS-103相似性最低(44.2%)。基于ALVgp85核苷酸序列的系统发育进化树表明:GD08株与MAV-1株的亲缘关系最近。结果表明,在J亚群禽白血病普遍流行的情况下,ALV-A引起禽白血病病例在我国华南地区依然存在,提示了我国华南地区地方品种鸡禽白血病的流行呈现复杂化趋势。

    2010年10期 v.30;No.166 1291-1295+1300页 [查看摘要][在线阅读][下载 515K]
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  • 鸡传染性喉气管炎病毒gB基因重组DNA疫苗的构建与鸡IL-18联合免疫试验

    邵攀峰;陈红英;崔保安;王振亚;宋亚鹏;刘金朋;

    本研究构建了编码ILTV糖蛋白gB基因的重组DNA疫苗pgB,为测定该DNA疫苗与鸡IL-18联合免疫的试验效果,将pgB、pIL-18分别以单独和联合的方式免疫21日龄SPF雏鸡,免疫后每周抽取外周血及外周抗凝血,应用ELISA和流式细胞仪分别检测免疫鸡的体液免疫及细胞免疫水平。二免疫后第3周用100 ELD50ILTV强毒进行攻击。结果显示,pgB和pgB与pIL-18联合免疫组均能诱导鸡产生特异性的体液免疫及细胞免疫应答,其中以pgB与pIL-18联合免疫组的T淋巴细胞亚群CD3+、CD3+CD4+、CD3+CD8+明显高于单独pgB免疫组(P<0.01),87%抵抗ILTV强毒的致死性攻击。

    2010年10期 v.30;No.166 1296-1300页 [查看摘要][在线阅读][下载 370K]
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  • IBDV抗原表位与VP2组合基因的分子构建及其在昆虫细胞中的表达

    周宇;王永山;范红结;欧阳伟;唐雨德;王忠灿;

    运用PCR重叠延伸技术将传染性法氏囊病病毒(IBDV)多表位5e与VP2基因连接构建组合基因VP2-5e,将其插入到杆状病毒表达系统供体质粒pFastBac HT中,转化E.coliDH10Bac感受态细胞,经三抗性筛选获得重组杆状病毒表达质粒pBac HT-VP2-5e,用脂质体法转染Sf9细胞,获得重组杆状病毒vBac HT-VP2-5e。对vBac HT-VP2-5e感染的Sf9细胞,以间接免疫荧光试验(IFA)检测,具有特异性荧光;电镜检查,重组VP2-5e蛋白能够自组装成病毒样颗粒(VLP);用免疫印迹分析(Western-blotting),在59 000处出现一条特异性蛋白条带。本试验为组合基因型重组IBD多价疫苗的研究奠定了基础。

    2010年10期 v.30;No.166 1301-1306页 [查看摘要][在线阅读][下载 592K]
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  • 鸭肿头败血症病毒的生物学特性

    蒋文灿;盛敏;

    为了进一步明确近年来在四川广汉、华阳等养鸭地区流行的鸭肿头败血症(Duck swollen head septicemia)的病原特征,对分离的鸭肿头败血症病毒(Duck swollen head septicemia virus,DSHSV)XD株、NF株进行培养特性、毒力、形态、理化性质、与鸭瘟病毒抗原相关性等方面的生物学特性研究。结果证明:该病毒能在鸭胚上繁殖并传代,不能在鸡胚、鸭胚成纤维细胞、鸡胚成纤维细胞上繁殖。鸭胚半数致死量为10-5.78/0.2 mL。病毒粒子呈球形,大小65~70 nm,无囊膜。核酸类型为ds RNA。基因组大于19 kb。病毒不能凝集鸡、鸭、鹅、兔、绵羊红细胞。对氯仿不敏感,对热有一定抵抗力,对酸碱有较强抵抗力。与鸭瘟病毒无抗原相关性。

    2010年10期 v.30;No.166 1307-1312页 [查看摘要][在线阅读][下载 455K]
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  • 牛传染性鼻气管炎病毒gB基因的截短表达与抗原反应性分析

    石建平;孟日增;马海利;牛得料;肖成蕊;刘晶;丁壮;

    根据牛传染性鼻气管炎病毒(IBRV)全基因组序列设计合成gB基因的特异性引物,采用PCR方法扩增IBRgB基因,并将其克隆到pMD18-T载体。用DNA Star分析IBR gB基因编码的吸附蛋白抗原性、亲水性和表面展示概率,将gB基因截短成4个片段,用Oligo 6设计4对引物,并以pMD18-T-gB为模板,用PCR方法分别扩增出gB1、gB2、gB3和gB44个基因片段,其大小分别为402、312、306和318 bp,分别定向插入到pGEX-6p-1表达载体中,转入表达菌BL21中,经IPTG诱导表达。SDS-PAGE电泳表明,表达产物以包涵体形式存在,融合蛋白大小约为40 300、39 000、38 700和37 800,与预测值相符。利用GSTrap HP层析柱纯化重组蛋白,经Western-blot和ELISA鉴定4种融合蛋白中gB3和gB4有较好的抗原反应性和特异性。

    2010年10期 v.30;No.166 1313-1317页 [查看摘要][在线阅读][下载 633K]
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  • 大肠杆菌多重耐药调控基因soxS的克隆及其原核表达

    于晓颖;刘玉堂;丛薇;刘树明;马红霞;

    根据GenBank中大肠杆菌的soxS基因序列设计引物,以大肠杆菌ATCC25922的基因组为模板,PCR扩增出约324 bp的soxS基因片段,将所得片段与pMD18-Tsi mple vector连接,转化至J M109大肠杆菌中,成功地筛选到阳性克隆,其质粒序列测序结果与GenBank中报道一致。从阳性克隆中提取质粒,经BamHⅠ和XhoⅠ酶解,回收324 bp的目的片段,定向克隆到pET-28a表达载体中,提取质粒,再次转化到大肠杆菌BL21(DE3)中,成功地筛选出阳性克隆。经IPTG诱导阳性菌,获得表达产物,通过SDS-PAGE检测出soxS基因的表达。

    2010年10期 v.30;No.166 1318-1320+1325页 [查看摘要][在线阅读][下载 259K]
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  • 副猪嗜血杆菌OMP P2基因PCR检测方法的建立与应用

    李鹏;李军星;李玉峰;张国龙;宋艳华;王先炜;姜平;

    通过反应条件的优化、特异性和敏感性的测定,建立了一种快速、简便、准确的PCR方法,用于检测副猪嗜血杆菌(HPS)OMP P2基因。PCR扩增片段大小为1 080 bp左右,最小检测量为1 000个HPS。与胸膜肺炎放线杆菌、多杀性巴氏杆菌、大肠杆菌、肠沙门菌、金黄色葡萄球菌和链球菌无特异性反应。用该法检测人工感染猪的肺脏、心脏和肾脏抽提的DNA,结果为阳性;检测肝脏、脾脏、脑组织样品抽提的DNA,结果为阴性。用该法检测人工感染发病仔猪及自然感染仔猪肺组织,并结合细菌分离培养,证明以肺脏组织为病料,通过细菌分离培养,再用PCR法鉴定分离菌体,可有效地用于HPS的特异诊断。检测116份来自发病猪场的患病仔猪肺脏病料,其中有110份为阳性,与16S rRNA PCR检测结果一致,表明HPS所致发的Glsser's病已在我国广泛发生和流行。

    2010年10期 v.30;No.166 1321-1325页 [查看摘要][在线阅读][下载 564K]
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  • 安氏隐孢子虫COWP部分编码基因的表达及免疫原性

    任文陟;郑君;宫鹏涛;李建华;李明英;刘颖丽;张西臣;

    依据NCBI中安氏隐孢子虫囊壁蛋白(COWP)编码基因设计特异性引物,提取安氏隐孢子虫长春株总RNA,RT-PCR扩增目的基因AF,构建重组原核表达载体pET28a-AF,通过大肠杆菌BL21诱导表达,产物经SDS-PAGE以及Western blotting鉴定。然后纯化重组蛋白,通过免疫BALB/c小鼠进行体液免疫和细胞免疫水平的检测。结果显示,重组原核表达质粒pET28a-AF构建成功,Western blotting显示重组蛋白约为18 000,可被安氏隐孢子虫免疫小鼠的多克隆抗体和HRP标记的抗组氨酸抗体识别。重组蛋白免疫BALB/c小鼠的抗体水平差异显著(P<0.05),与对照组相比,CD4+的值差异极显著(P<0.01),而CD8+的值差异显著(P<0.05)。结果表明,成功克隆并表达了重组安氏隐孢子虫囊壁蛋白,纯化的重组蛋白具有一定的免疫原性。

    2010年10期 v.30;No.166 1326-1329页 [查看摘要][在线阅读][下载 196K]
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人兽共患病

  • 禽流感病毒HA基因在S2细胞中的表达与鉴定

    史利军;张亚兰;尹惠琼;章金刚;李刚;

    根据GenBank中发表的禽流感病毒(AIV)血凝素(HA)序列设计了1对引物并分别引入NotⅠ和NcoⅠ酶切位点,用PCR方法扩增AIV HA基因片段。回收目的基因片段,并用NotⅠ/NcoⅠ限制性内切酶消化,经纯化后,将其定向克隆入果蝇表达载体pMT/B/V5中,构建重组表达载体pMT-HA。测序验证正确后,用脂质体转染法与辅助质粒pCoBlast共转染果蝇S2细胞,通过Blasticidin(杀稻瘟素)进行加压筛选,获得了抗性细胞S2-HA。提取S2-HA细胞的基因组DNA,PCR检测目的基因在果蝇S2细胞中的整合与表达。用终浓度500μmol/L的硫酸铜溶液诱导表达,收集无血清的细胞表达上清,样品浓缩后进行SDS-PAGE及Western Blotting检测。结果表明,成功构建了重组表达载体pMT-HA,转染细胞经10 mg/L的Blasticidin筛选及鉴定后获得了稳定表达HA的果蝇S2细胞株。

    2010年10期 v.30;No.166 1330-1333页 [查看摘要][在线阅读][下载 284K]
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  • 羊布鲁菌强毒株16M与疫苗株M5外膜蛋白蛋白质组学研究

    杨艳玲;盛雪玲;唐婕;郎需龙;王景龙;卜昭阳;王兴龙;

    通过比较蛋白质组学分析M5生存表型的改变所引起的蛋白图谱与强毒株的差异之处,根据这些差异表达蛋白的LC/MS-MS鉴定结果来分析疫苗株的致弱机制进而为寻找新的毒力相关分子、鉴别诊断分子以及揭示布鲁菌胞内寄生机制提供帮助。本研究利用比较蛋白质组学技术,对布鲁菌强毒株16 M和弱毒株M5的外膜蛋白进行了差异比较分析,结果共发现33个差异蛋白点,代表了26个开放阅读框,这些蛋白涉及了蛋白质的生物合成(5/26)、氨基酸合成(3/26),脂肪酸代谢(2/26)、能量代谢(5/26),以及细胞被膜生物合成(4/26)和一些调节系统(4/26)等多个生物过程。这些发现为研究外膜蛋白在布鲁菌毒力,胞内寄生等过程中发挥的重要作用提供了新依据。

    2010年10期 v.30;No.166 1334-1342页 [查看摘要][在线阅读][下载 593K]
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  • 抗猪囊尾蚴头节特异性单链抗体的构建及克隆

    郑君;赵权;徐辞;曲溪;王石;种法政;

    首先对猪囊尾蚴头节特异性单链抗体重链可变区基因(Vh)和轻链可变区基因(Vl)进行酶切鉴定,PCR鉴定以及测序分析,然后采用重叠延伸PCR(SOE PCR)技术,将重链可变区基因和轻链可变区基因,通过linker链连接成Vh-linker-Vl单链抗体基因(ScFv)。将此基因与pMD18-T载体连接,转化感受态大肠杆菌J M109,从而进一步克隆并对重组载体pMD-ScFv进行鉴定。结果:成功构建并克隆了抗猪囊尾蚴头节单链抗体,为重组免疫毒素ScFv-PE40的构建?表达及活性测定奠定了良好的基础。

    2010年10期 v.30;No.166 1343-1345页 [查看摘要][在线阅读][下载 104K]
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基础兽医学

  • 有机锰与铬互作对肉鸡脂质代谢及锰与铬在组织沉积的影响

    姚华;乔富强;郝俊虎;李宏全;王俊东;

    本试验以玉米-豆粕型日粮为基础,添加不同水平的有机锰(以锰计:0,60,120 mg/kg)与有机铬(以铬计:0,400,600μg/kg),研究锰与铬对肉鸡脂质代谢及对肉鸡组织锰、铬沉积的影响。结果表明,7周末,单独添加锰、铬均显著降低血清TC含量(P<0.01,P<0.05);锰与铬同时添加,互作效应显著(P<0.05)。单独添加锰对7周末血清TG含量表现极显著效应(P<0.01)。与对照组相比,单独添加60 mg/kg锰或120 mg/kg锰血清TG含量分别降低31.91%或55.32%。单独添加400μg/kg铬和600μg/kg铬,血清G含量分别降低8.50%和26.58%;锰与铬互作对3、7周末血清G含量明显降低(P=0.026 8,orP=0.012 7)。单独添加铬使7周末血清TAA含量显著升高(P=0.006),随铬添加量增加,血清TAA含量分别高出对照组35.93%和40.97%。锰与铬互作,对7周末血清TAA含量表现显著效应(P=0.0388),与对照组相比,60 mg/kg锰600μg/kg铬互作组血清TAA含量增加43.57%;120 mg/kg锰互作组血清TAA含量分别增加29.19%和32.38%。单独添加锰仅对胫骨锰沉积产生显著影响(P<0.05)。单独添加铬及锰与铬同时添加对各组织中锰的沉积均未表现出统计学上的显著互作效应(P>0.05)。单独添加铬仅增加了肝脏铬沉积(P<0.05)。单独添加锰减少了肝脏铬的吸收(P<0.01),增加了肾脏铬的排出(P<0.05)。锰与铬同时添加,对肝脏铬沉积表现显著互作效应。随饲粮铬添加量增加,60 mg/kg锰水平条件下,肝脏铬含量呈下降趋势;120 mg/kg锰水平条件下,肝脏铬含量显著降低(P<0.01)。表现为锰颉颃铬,使铬在肝脏中的沉积明显下降。

    2010年10期 v.30;No.166 1346-1351页 [查看摘要][在线阅读][下载 464K]
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  • 太白蓼乙酸乙酯提取物的药效学研究

    张为民;张彦明;卿素珠;郭抗抗;

    通过抗腹泻、抗炎、对免疫功能调节、体外抑菌和抗病毒等相关试验,研究了太白蓼乙酸乙酯提取物(PTKE)及PTKE柱层层析进一步分离物EB的药效学作用。结果表明,PTKE对蓖麻油和番泻叶所致的小鼠腹泻均有极显著的抑制作用(P<0.01);对乙酸所致家兔肠黏膜毛细血管通透性增高有极显著抑制作用(P<0.01),对腹腔注射醋酸所致小鼠腹腔毛细血管通透性增高及皮内注射二甲苯致皮肤毛细血管通透性增高也均有显著的抑制作用(P<0.05);饮水中分别加入50、100、150 mg/kg的PTKE水溶液观察其对雏鸡免疫功能的影响,结果显示,在雏鸡生长的14~42日龄,各试验组雏鸡胸腺指数、脾脏指数和法氏囊指数与对照组相比差异显著或极显著(P<0.05或P<0.01);EB质量浓度为156μg/L时,其对脾脏、胸腺、法氏囊和外周血淋巴细胞的增殖显著高于细胞对照组(P<0.01);PTKE和EB对临床分离鸡的2株大肠埃希菌和1株沙门菌具有一定的体外抑制作用;EB对新城疫病毒在鸡胚内增殖具有一定的抑制作用。以上结果提示,太白蓼提取物有明显的抗腹泻和抗炎作用,并能促进雏鸡免疫器官发育及淋巴细胞的增殖,具有一定的抑菌和抗病毒作用。

    2010年10期 v.30;No.166 1352-1357页 [查看摘要][在线阅读][下载 209K]
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  • 卵转铁蛋白制备抗菌活性肽的研究

    郑健;张铁华;张春红;张卓丹;陈玉江;

    本试验以卵转铁蛋白为原料,利用胃蛋白酶酶解技术制备抗菌活性肽,优化实验条件,确定分子量范围。结果表明,胃蛋白酶酶解卵转铁蛋白制备抗菌肽在温度为40℃,pH值为2.0,底物浓度为4%,酶的加入量为1%,水解时间为2 h时,抑菌率达到90.36%;通过正交试验得出底物浓度及酶与底物浓度比对抑菌率的影响显著性水平达到0.05。并对在最优条件下得到的抗菌活性肽进行HPLC分析,确定相对分子质量范围主要在5 000~9 000之间。

    2010年10期 v.30;No.166 1358-1362页 [查看摘要][在线阅读][下载 387K]
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  • 黄淮山羊骨形态发生蛋白4(BMP4)基因的克隆及优化表达

    李明;石晓卫;陈其新;张弛;周建设;刘孟洲;赵巧辉;

    根据GenBank公布的人和牛BMP4基因序列设计引物,通过RT-PCR和PCR方法分别扩增全长编码序列和内含子2、3,进行克隆及测序鉴定;根据已得到的序列设计引物扩增BMP4成熟蛋白cDNA,克隆入pET32a表达载体,转化E.coliBL21(DE3)plysS进行诱导表达,同时进行诱导条件的优化。结果显示,山羊BMP4基因全编码序列、内含子2和3序列长度分别为1 230、1 053、962 bp,与猪、人、小鼠和牛相应序列的同源性分别为:96.10%、94.96%、91.79%、99.19%,83.80%、76.03%、66.94%、96.71%和87.15%、80.24%、67.20%、98.13%。在E.coliBL21(DE3)plsS中表达的BMP4融合蛋白的相对分子量为31 000,适宜的诱导条件为:0.5 mmol/L IPTG、22℃、诱导8 h.结果表明,黄淮山羊BMP4基因全长编码序列和内含子2、3已被成功克隆。适宜表达条件的确定为进一步研究山羊BMP4的生物学功能奠定了基础。

    2010年10期 v.30;No.166 1363-1367+1376页 [查看摘要][在线阅读][下载 388K]
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  • 骨组织中总RNA提取方法的改进

    陈秀霞;侯加法;

    为了改进经典Trizol法,我们建立了一种有效提取矿化骨组织中总RNA的新方法。在Trizol裂解时加入等体积水饱和酚,在异丙醇沉淀时加入高浓度的盐溶液,并重复氯仿抽提1次。通过紫外分光光度法和1%甲醛变性凝胶电泳法分析提取RNA,以其逆转录cDNA为模板,经PCR扩增雌激素受体(ER)基因予以鉴定。结果,本方法获得的总RNA A260/A280达到1.85以上,电泳条带显示RNA完整,RT-PCR结果显示其纯度较好。结果表明,改良Trizol法是一种从矿化骨组织中提取总RNA的高效便捷的方法。

    2010年10期 v.30;No.166 1368-1370页 [查看摘要][在线阅读][下载 181K]
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临床兽医学

  • 高锌日粮对断奶仔猪肠道黏膜免疫及黏膜上皮形态的影响

    王希春;吴金节;陈亮;何小佳;

    本试验旨在研究长期饲喂不同锌源的高锌日粮对断奶应激仔猪肠道黏膜免疫及黏膜上皮形态的影响。选用临床检查健康的(26±2)日龄"杜×长×大"三元杂交断奶仔猪60头,按体质量和性别随机分成3组,每组20头,分别饲喂基础日粮、基础日粮+3 000 mg.kg-1氧化锌和基础日粮+500 mg.kg-1蛋氨酸锌。试验期70 d。于试验结束时,每组选取5头仔猪放血致死,分别取十二指肠近端、空肠近端1/4处、空肠远端1/4处和回肠中段,用于测定肠黏膜绒毛高度、绒毛宽度、隐窝深度,小肠上皮间淋巴细胞、杯状细胞数量,粘液层厚度及肠道粘液中IgA的含量。结果显示,在断奶后0~42 d,添加高锌日粮组仔猪的体重和日增重显著或极显著高于对照组仔猪(P<0.05或P<0.01),而在断奶后42~70 d,对照组仔猪日增重显著高于添加高锌日粮组仔猪(P<0.05);两高锌组仔猪小肠黏膜结构有明显的损伤,表现为绒毛高度下降,隐窝变深,肠黏膜上皮细胞萎缩,肠道粘液层厚度变薄;上皮间淋巴细胞数、杯状细胞数和肠道黏液中IgA水平都显著或极显著低于对照组(P<0.05或P<0.01)。高锌日粮长期暴露引起断奶仔猪锌中毒,改变了肠道黏膜上皮结构的完整性,并降低了仔猪生长性能及肠道黏膜免疫功能。

    2010年10期 v.30;No.166 1371-1376页 [查看摘要][在线阅读][下载 731K]
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  • 高乌甲素对犬术后血浆PGE_2含量的影响及其镇痛机理

    彭广能;汪恒;谢礼;徐在品;钟志军;马晓平;石锦江;吴睿雪;熊杰;刘益新;魏春梅;

    选取18只健康杂交雌犬,随机分为A、B、C、D、E、F共6个组,每组3只。A、B、C、D、E组均实施子宫卵巢摘除术制作动物疼痛模型;F组不做手术作为对照组。A、B、C组分别一次性皮下注射高乌甲素0.2、0.4、0.8 mg/kg,D组口服卓比林(20 mg/kg);E组不给与镇痛治疗。各组动物均在术前、术毕、术后2、6、12、24 h等时间点进行疼痛评分并采血测定血浆中前列腺素E2(PGE2)含量。结果显示:E组术后PGE2含量随时间增加而显著升高;高乌甲素能显著降低术后血浆PGE2含量(P<0.05),B组效果最佳;D组与B组无显著差异(P>0.05)。术后各组的疼痛评分,D组与B组差异不显著(P>0.05)。结果表明,高乌甲素的镇痛效果与卓比林相当,且其镇痛机理可能是通过抑制PGE2生成来实现的。

    2010年10期 v.30;No.166 1377-1380+1384页 [查看摘要][在线阅读][下载 299K]
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  • 奶牛乳房炎重要致病菌和常用抗菌药物体外在牛奶中的分布

    曹立亭;胡松华;

    为了解奶牛乳房炎重要致病菌和常用抗菌药物在乳房内的分布情况,本试验分析了一次挤奶过程中不同时间段牛奶的主要乳成分变化,并研究了金黄色葡萄球菌和大肠杆菌以及常用抗菌药物体外在牛奶中的分布。结果表明,随着挤奶过程的进行,牛奶中的脂肪含量逐渐升高,挤奶后期显著高于挤奶前期和中期(P<0.05),而乳蛋白和乳糖含量变化不大;金黄色葡萄球菌和大肠杆菌主要富集在牛奶的上部,细菌计数上部显著高于中部和下部(P<0.01);常用抗菌药物盐酸林可霉素、青霉素钠、硫酸庆大霉素、盐酸四环素、氨苄西林钠、乳糖酸红霉素、乳酸环丙沙星、头孢噻呋钠在牛奶中下部显著高于上部和中部,乳酸链球菌素Nisin Z在牛奶中分布比较均匀,并在上部略高。本研究结果提示,经奶牛乳头管进入的细菌可以随牛奶中的脂肪滴上浮,侵入乳腺的深层组织;乳房炎致病菌和常用治疗药物在乳房中分别向上下两极移动,这种分布上的分离现象可导致抗菌药物和致病菌不能充分接触,可能是临床上乳房炎治疗失败的一个原因。

    2010年10期 v.30;No.166 1381-1384页 [查看摘要][在线阅读][下载 199K]
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  • 褪黑素对山羊内毒素血症心肌线粒体NO代谢及巯基的影响

    刘朝明;吴彩霞;郭剑英;杨红;刘静;石达友;李英;潘家强;唐兆新;

    为探讨NO和巯基在山羊内毒素血症发病机理中的作用,将48只山羊随机分为对照组、内毒素组、褪黑素保护组、褪黑素组。每组12只,分别在处理后3、6 h各宰杀6只提取心肌线粒体,检测心肌线粒体中的MDA的含量,总巯基(T-SH)的含量,蛋白巯基(PB-SH)的含量,非蛋白巯基(NP-SH)的含量,以及总一氧化氮合成酶(TNOS),分型一氧化氮合成酶(i NOS)的活性和一氧化氮(NO)水平的变化。结果显示,内毒素血症时山羊心肌线粒体中总巯基(T-SH)的含量,蛋白巯基(PB-SH)的含量,非蛋白巯基(NP-SH)的含量降低,MDA的含量,总一氧化氮合成酶(TNOS),分型一氧化氮合成酶(i NOS)的活性和一氧化氮(NO)水平升高。而褪黑素治疗组则情况明显好转。结果表明,由于NO过量生成而引起的脂质过氧化损伤在山羊内毒素血症发病机理中起着重要的作用,褪黑素可有效拮抗脂质过氧化造成的损伤。

    2010年10期 v.30;No.166 1385-1389页 [查看摘要][在线阅读][下载 154K]
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动物科学

  • 植物源乳化剂对肉鸡生产性能及脂肪代谢的影响

    范京辉;钱利纯;孙建义;楼立峰;陈贤惠;

    用1日龄公母混合肉鸡432只,随机分成4组,每组设3个重复。分别在基础日粮中添加0、200、250、300mg/kg的植物源脂肪乳化剂,进行饲养试验,42 d屠宰。结果显示,乳化剂显著提高了肉鸡42 d日增重(P<0.05)及降低料重比(P<0.05),以300 mg/kg剂量组最优。300 mg/kg组肉鸡的腿胸肌率和腹脂率显著提高(P<0.05)。乳化剂显著提高了血清游离脂肪酸浓度(P<0.01),血清与肝脏中胆固醇浓度(P<0.05),腹脂与胸肌中脂蛋白脂酶的比值(P<0.05);降低肝脏中苹果酸脱氢酶活性(P<0.05),腹脂、胸肌中脂蛋白脂酶活性(P<0.05)。研究表明,植物源乳化剂能提高日粮脂肪的消化率,促进肉鸡生长。

    2010年10期 v.30;No.166 1390-1393页 [查看摘要][在线阅读][下载 142K]
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  • 西农莎能奶山羊和波尔山羊GDF9基因多态性与产羔数的相关分析

    颜泉梅;杨莎;朱广琴;朱春梅;安小鹏;王建刚;宋宇轩;曹斌云;

    为了研究西农萨能奶山羊和波尔山羊生长分化因子9(GDF9)基因遗传多态性及其与产羔数和生长体重的相关性。根据绵羊GDF9基因序列设计4对引物,采用PCR-SSCP技术检测GDF9基因的多态性,同时用最小二乘法研究了其多态性与产羔数和生长体重的关系。所研究的西农萨能奶山羊群体和波尔山羊群体P1扩增片段存在多态性,分别定义为AA、AG和GG3种基因型;P2、P3和P4扩增片段均不存在多态性,只出现一种带型。通过测序发现:GG型与AA型相比在外显子2的792 bp处有1个G→A的单碱基突变,结果导致第396位氨基酸由缬氨酸变为异亮氨酸。在西农莎能奶山羊群体中,AA基因型产羔数最小二乘均值均极显著高于AG基因型和GG基因型;AG基因型显著高于GG基因型。此外,在西农莎能奶山羊中还发现AA基因型的个体各个生长阶段的体重和GG型和AG型的相比差异均不显著。在波尔山羊群体中,AA基因型产羔数最小二乘均值均极显著高于AG基因型和GG基因型,AG基因型的高于GG型,但没达到显著水平。结果表明,GDF9基因对西农莎能奶山羊和波尔山羊的产羔数均有显著影响,因此认为GDF9基因外显子2第792 bp处G→A的突变可作为西农莎能奶山羊和波尔山羊多胎性状的有效分子标记。

    2010年10期 v.30;No.166 1394-1397页 [查看摘要][在线阅读][下载 223K]
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  • 山羊胚胎冷冻保存技术研究

    许丹宁;田允波;黄运茂;陈学进;

    本研究探讨了不同抗冻保护剂、不同冷冻方法、玻璃化液(EFS40)中添加FCS和BSA,以及冷冻前细胞松驰素B处理对山羊胚胎冷冻保存效果的影响。结果表明,山羊胚胎常规冷冻时以1.5 mol/L EG为抗冻保护剂的保护效果最好,解冻后胚胎发育率为70.59%,孵化率为58.82%;玻璃化冷冻细管法和OPS法以EFS40为保护液的冷冻效果较好,其解冻后胚胎的发育率分别为67.57%和52.94%;EFS40中添加BSA的冷冻保护效果显著地高于不添加其他成分的EFS40;山羊胚胎冷冻前用细胞松驰素B处理,能提高冷冻保存的效果。

    2010年10期 v.30;No.166 1398-1401页 [查看摘要][在线阅读][下载 138K]
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综述

  • RNA干扰技术在动物抗病育种中的应用前景

    鲍永华;郭永臣;赵志辉;李宁;

    动物疾病尤其是病毒性疾病一直是畜牧业亟待解决的问题,随着转基因技术的出现,生产遗传修饰动物来抵抗特定传染病的策略备受关注。从长远利益来看,这种基因工程动物从遗传本质上提高了畜禽的抗病能力。转基因抗病育种在未来可能成为减少动物传染性疾病的最有前途的方法之一。RNA干扰是双链RNA特异性诱导同源基因表达沉默的现象。研究证实,RNA干扰在细胞水平,小鼠模型以及动物个体的抗病毒效果是非常明显的,RNA干扰技术作为抗病毒策略为生产抗病转基因动物提供了光明的应用前景。RNA干扰技术介导的抗病转基因动物的研究相继取得了阶段性进展,抗疯牛病转基因羊和牛以及抗内源性逆转录病毒猪已经成功获得,虽然目前获得的转基因动物类型有限,但为继续生产抗病转基因家畜提供了有效的参考和依据。

    2010年10期 v.30;No.166 1402-1408页 [查看摘要][在线阅读][下载 231K]
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