预防兽医学

  • 猪瘟免疫猪接种PRRSV nsp2Δ1882-2241弱毒疫苗后IL-12、IL-10、TNF-α应答特征

    单悦;付云云;郎广平;郭敏;白雪;梅林;屈雪琪;温涛;杨举;邢海云;梁志选;罗胜军;赵建增;高英杰;

    不同时间段采集猪的血液样本,利用ELISA方法检测血清和细胞培养上清中IL-12、IL-10、TNF-α等3种细胞因子的水平,分析猪双重免疫CSFV、PRRSV弱毒苗后血清和细胞培养上清中细胞因子的变化规律。结果显示,IL-12在血清中的浓度显著高于细胞培养上清中的浓度(P<0.01),在CSFV高抗体PRRSV高抗体组中28d采血的细胞培养上清中IL-12的浓度高于14d采血的细胞培养上清中的浓度(P<0.05);IL-10血清中水平显著低于细胞培养上清中水平(P<0.01),在CSFV高抗体PRRSV高抗体组中28d采血的细胞培养上清中的IL-10浓度显著低于14d采血的细胞培养上清中的浓度(P<0.01);TNF-α在血清中水平显著低于细胞培养上清中水平(P<0.01),在3组中28d采血的细胞培养上清液中TNF-α浓度高于14d采血的细胞培养上清液中浓度(P<0.05)。结果表明,2种疫苗特异性抗体应答高时,IL-12水平显著上调,IL-10水平显著下调,提示上调IL-12及下调IL-10都是基因缺失疫苗发挥效力的潜在机制。TNF-α总体水平上升,但在血清中水平较低。

    2012年07期 v.32;No.187 937-940+944页 [查看摘要][在线阅读][下载 407K]
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  • 2009年我国猪群中猪圆环病毒2型感染情况调查

    韩雪;蔡林;倪建强;夏应菊;訾占超;汪葆玥;周智;吴佳俊;宁昆;邱鹏;遇秀玲;翟新验;田克恭;

    为了解我国猪群中猪圆环病毒2型(Porcine circovirus type 2,PCV2)的感染情况,分析感染与猪年龄的关系,本试验于2009年在我国28个省市的71个中小规模场、22个屠宰场和62家散养户采集了2 905份猪血清样品,用PCR法对PCV2进行检测。结果显示,检出阳性血清429份,阳性率为14.8%。在被调查的场/户中,86.4%屠宰场、52.1%中小规模场和58.1%散养户为PCV2感染阳性,其中48.6%的PCV2阳性中小规模场的群阳性率低于10%。分析中小规模场PCV2感染情况和猪年龄之间的关系发现,在5个年龄组中,2~4周龄组未检出PCV2感染,5周龄以上各组均检出PCV2感染,其中11~14周龄组和15~26周龄组阳性率较高,高于5~7周龄组和8~10周龄组。

    2012年07期 v.32;No.187 941-944页 [查看摘要][在线阅读][下载 122K]
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  • 猪瘟免疫猪接种PRRSV Nsp2Δ1882-2241弱毒疫苗后免疫应答及T细胞表型变化特征

    付云云;单悦;郭敏;郎广平;白雪;梅林;屈雪琪;温涛;梁志选;杨举;罗胜军;邢海云;赵建增;高英杰;

    选择17头28日龄的CSFV和PRRSV抗体均为阴性的仔猪,于试验的第1天和第14天分别对其进行猪瘟耐热保护剂活疫苗(兔源)和高致病性猪繁殖与呼吸综合征Nsp2Δ1882-2241弱毒疫苗免疫。在免疫后的第28、42天采集外周血液,分析特异性抗体表达量和外周血T淋巴细胞表型的变化,评估猪瘟免疫对猪繁殖与呼吸综合征免疫的影响。结果显示,在CSF免疫后第28、42天,CSFV高抗组中的CD4+、CD4+/CD8+、CD4+CD8+和CD4-CD8-数目均比CSFV低抗组高,CD3+和CD8+细胞数量比CSFV低抗组低;PRRS高抗组中,CD4-CD8-细胞含量高于PRRS低抗组;在CSF免疫后第28天,CSFV抗体产生较高(阳性比率为73.33%),PRRSV抗体产生较低(阳性比率仅为6.67%)。在CSF免疫后的第42天,CSF高抗组中PRRSV抗体阳性比率较CSF低抗组高8.33%。结果表明,CSFV特异性抗体产生高时能增加PRRSV特异性细胞免疫应答,增加CD4+细胞、CD4+CD8+细胞数量,提高机体免疫水平。CD3+和CD4-CD8-细胞应答作用值得重视。

    2012年07期 v.32;No.187 945-950页 [查看摘要][在线阅读][下载 404K]
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  • 滴鼻途径感染猪血凝性脑脊髓炎病毒小鼠的免疫动态变化

    何叶;周平;苏高莉;孙秀萍;刘立卓;潘伟;兰云刚;高丰;贺文琦;靳朝;

    应用石蜡切片、ELISA等方法,通过对小鼠脾脏病理组织学观察以及脾脏指数、IL-2、IFN-γ和TNF-α等重要细胞因子的检测,研究猪血凝性脑脊髓炎病毒(Hemagglutinating encephalomyelitis virus,HEV)感染不同周龄(4、6周龄)BALB/c小鼠后的免疫动态变化特点。结果显示,无论是4周龄还是6周龄小鼠,在被HEV感染后的1~3d,脾小体生发中心增大并在红髓有多量浆细胞出现,第4天脾小体开始缩小,其周边和中央动脉周围有多量淋巴细胞聚集,到第5天脾小体生发中心消失并在其周边和中央动脉周围淋巴细胞增多。另外,脾脏指数和血清中的TNF-α、IFN-γ、IL-4浓度均呈现先升高后降低的趋势,IL-2含量变化不明显,而IL-10含量较少几乎检测不到。结果表明,HEV感染初期,小鼠对侵入的病毒做出一定的免疫应答,但是随着病毒复制,病毒量的增大,小鼠的免疫反应受到抑制。同时不同周龄小鼠的被检指标降低或升高程度及持续时间不同,表明HEV的免疫、发病与小鼠感染年龄之间存在一定相关性。

    2012年07期 v.32;No.187 951-954+979页 [查看摘要][在线阅读][下载 784K]
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  • 家养野猪副猪嗜血杆菌的分离鉴定及16S rRNA序列分析

    肖根辉;王萍;宋德平;花象柏;何后军;邬向东;邓舜洲;黎家祥;

    对江西省某家养野猪场临诊疑似副猪嗜血杆菌(Haemophilus parasuis,Hps)感染的病例进行细菌分离鉴定,PCR扩增分离菌株的16SrRNA并进行测序分析,并对分离菌进行细菌形态、生化鉴定和PCR鉴定及序列比对分析。结果显示,获得1株家养野猪源Hps分离株(命名为HPJXYZO1),该分离株与国内外参考菌株序列之间的同源性为93.1%~99.2%,与本实验室江西省家猪源分离株的同源性为84%~92.1%。结果表明,江西省家养野猪中存在Hps感染,分离株与国内外家猪源Hps间的16SrRNA序列差异不大,Hps 16SrRNA核苷酸序列比较稳定,其进化不存在明显的地域相关性。

    2012年07期 v.32;No.187 955-957+966页 [查看摘要][在线阅读][下载 244K]
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  • 马动脉炎病毒GL、M和N蛋白主要抗原域的原核表达及抗原性鉴定

    王贵宾;郭巍;赵立平;李红梅;赵敏;相文华;

    采用RT-PCR方法从EAV Bucyrus株扩增了截短的GL、M和全长的N基因片段,将三者分别克隆到表达载体pGEX-6p-1中,测序验证后转化Rosetta(DE3)宿主菌中经IPTG诱导表达,诱导后菌体裂解物经SDS-PAGE分析。试验结果表明,重组菌表达出约35 000、34 000和38 000的特异性条带,通过条件优化及切胶纯化获得较高浓度的目的蛋白。经Western-blot和间接ELISA分析,纯化的蛋白只与抗马动脉炎病毒阳性血清发生特异性反应,证实该蛋白具有良好的反应原性和特异性。

    2012年07期 v.32;No.187 958-961页 [查看摘要][在线阅读][下载 281K]
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  • 内源性绵羊肺腺瘤病毒全基因组序列测定与序列分析

    周艳喜;苏佳;李靖;刘霄卉;马学恩;

    参照内源性绵羊肺腺瘤病毒株enJSRV-20全基因组序列设计合成3对引物,应用PCR技术扩增内源性绵羊肺腺瘤病毒基因片段分别连接pMD-18T载体并测序,完成了内源性绵羊反转录病毒基因组序列测定。分析结果显示,测定序列全长7 519bp,与内源性绵羊肺腺瘤病毒代表株enJSRV-20核苷酸同源性为99.4%,与外源性绵羊肺腺瘤病毒代表株AF357971.1的核苷酸同源性为90.4%。基于全基因组序列核苷酸的系统进化发生树分析结果显示,扩增序列与enJSRV-20的亲缘关系最近。

    2012年07期 v.32;No.187 962-966页 [查看摘要][在线阅读][下载 521K]
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  • 犬细小病毒VP2截短基因的原核表达及表达蛋白抗原性分析

    王净;王鹏;李刚;史利军;袁维峰;王慧文;穆秀明;高志花;

    采用PCR方法扩增了犬细小病毒(Canine parvovirus,CPV)2段VP2截短基因,将2段短基因片段分别克隆至原核表达载体pET-32a(+)中,表达质粒命名为pET-32a-306和pET-32a-363。将pET-32a-306和pET-32a-363转化至宿主菌E.coli BL21(DE3),IPTG诱导后进行SDS-PAGE和Western blotting分析。结果显示,融合蛋白相对分子质量大小为30 000和33 000;与全长VP2蛋白相比,目的蛋白得到了高效表达,且都为可溶性表达。West-ern blotting结果表明,该蛋白融合表达并且有很好的免疫反应原性,可为CPV亚单位疫苗和免疫学诊断方法的研究提供候选抗原。

    2012年07期 v.32;No.187 967-970+992页 [查看摘要][在线阅读][下载 433K]
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  • 禽偏肺病毒RT-PCR检测方法的建立及应用

    陈琳;刁有祥;邹金峰;

    根据GenBank中已经发表的B亚型禽偏肺病毒(aMPV)F基因的保守序列设计并合成1对引物,利用RT-PCR可以扩增出1条725bp的片段,进行特异性试验和敏感性试验,建立了禽偏肺病毒病的RT-PCR检测方法。特异性试验表明,建立的RT-PCR检测方法能够从禽偏肺病毒疫苗毒株VIR 115-B中扩增到725bp的特异性片段,而对H9N2亚型禽流感病毒、新城疫病毒、传染性支气管炎病毒的扩增结果均为阴性;敏感性试验表明,该方法最低检出量的cDNA质量浓度为1.45μg/L;对山东省492份病料进行检测,阳性检出率为43.09%(212/492),随机挑取11份进行克隆测序及序列分析,结果显示所扩增到的阳性产物均为B亚型的禽偏肺病毒。建立的禽偏肺病毒的RT-PCR检测方法具有快速、准确、特异性强、敏感性高的特点。

    2012年07期 v.32;No.187 971-974+996页 [查看摘要][在线阅读][下载 309K]
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  • 番鸭呼肠孤病毒和H9亚型禽流感病毒共感染对番鸭脾脏免疫抑制作用

    林锋强;陈少莺;蔡羲;程晓霞;陈仕龙;高春亮;王劭;朱小丽;李兆龙;马春全;赵佳荣;

    8日龄番鸭人工感染番鸭呼肠孤病毒(MDRV)或/和H9亚型禽流感病毒(H9AIV),观察其脾脏形态和显微结构变化,检测脾脏细胞增殖功能,探讨病毒感染对番鸭脾脏免疫反应的影响。结果显示,H9AIV感染不引起番鸭发病死亡;番鸭脾脏轻度肿大,病理变化以出血、淋巴细胞坏死为主;显著抑制番鸭脾脏淋巴细胞增殖反应。MDRV单独感染番鸭发病率80%、死亡率50%,对番鸭淋巴细胞增殖反应有抑制作用(差异显著),生长迟缓;脾脏肿大,出现典型坏死病变,细胞凋亡等病理变化。共感染组番鸭发病率100%、死亡率80%,生长迟缓;脾脏异常肿大,白髓区淋巴细胞坏死,数量明显减少甚至消失;坏死灶明显增多,范围增大,坏死灶中淋巴细胞坏死消失后,形成大小不一的空白斑;对番鸭淋巴细胞增殖反应有抑制作用,差异极显著;共感染组在H9AIV病毒检出时间和检出率上均大于AIV组。结果表明,MDRV与H9AIV共感染在番鸭脾脏免疫反应抑制上有协同作用。

    2012年07期 v.32;No.187 975-979页 [查看摘要][在线阅读][下载 131K]
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  • 猪源乳酸杆菌对永生化猪小肠上皮细胞的黏附性能

    王大会;齐雪峰;赵献军;佟琪;白东宁;王芳;

    以永生化猪小肠上皮细胞ZYM-SIEC02为体外模型,通过革兰染色法、平板计数法等检测发酵乳杆菌Y091231(Lactobacillus fermentation)、乳酸乳杆菌Y091221(Lactobacillus lactis),嗜酸乳杆菌Y224031(Lactoba-cillus acidophilus)的黏附性能及对大肠杆菌C83921、致病性沙门菌、金黄色葡萄球菌CVCC2258的黏附抑制作用。结果显示,3株菌对永生化猪小肠上皮细胞的黏附性均较强,黏附指数平均为:Y091231(2 903.25±83.33)个/100cells、Y091221(2 320.37±81.02)个/100cells、Y224031(1 965.43±37.72)个/100cells,菌株之间差异不显著(P>0.05)。黏附抑制试验结果显示,Y091231对大肠埃希菌C83921和金黄色葡萄球菌CVCC 2258的黏附抑菌能力最强((99.4±3.17)%和(98.0±2.31)%),Y091221对沙门菌的抑菌能力最强((97.1±2.04)%),Y224031对大肠埃希菌C83921比对另外2种致病菌的黏附抑制能力高,但又显著低于Y091231和Y09 1221(P<0.05),表明不同种乳酸菌对致病菌的黏附抑制作用具有菌种特异性。

    2012年07期 v.32;No.187 980-983页 [查看摘要][在线阅读][下载 381K]
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  • 3种兔球虫ITS-1序列测定与系统发育分析

    顾小龙;刘红彬;崔平;索勋;方素芳;

    从河北省兔场分别单卵囊分离孢子化大型艾美耳球虫卵囊、黄艾美耳球虫卵囊及肠艾美耳球虫卵囊,接种无球虫兔后获得纯种卵囊,CTAB法提取孢子化卵囊基因组DNA。利用艾美耳属球虫18SrDNA和5.8SrDNA保守引物,PCR扩增3种兔球虫ITS-1片段,产物纯化后测序。将3种球虫ITS-1测序结果与GenBank发布的兔球虫ITS-1序列进行比对和遗传距离比较,绘制系统发育树。结果表明,大型艾美耳球虫、黄艾美耳球虫及肠艾美耳球虫河北株分别扩增出424、455、434bp的ITS-1片段。大型艾美耳球虫、黄艾美耳球虫及肠艾美耳球虫河北株与GenBank中发布的同种兔球虫ITS-1序列相似性分别为97.4%、97.9%和96.9%。系统发育树显示兔球虫ITS-1序列形成1个单系群,该单系群根据寄生部位分为2个姊妹群。

    2012年07期 v.32;No.187 984-987页 [查看摘要][在线阅读][下载 466K]
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  • 鸭源贝氏隐孢子虫对鸡的致病性

    赵金凤;张素梅;王荣军;菅复春;张龙现;

    设计3个不同剂量的鸭源隐孢子虫试验感染2日龄雏鸡,通过临床症状、增重、排卵囊规律和法氏囊指数及寄生器官组织扫描电镜观察,证实贝氏隐孢子虫160万个卵囊感染即可引起明显的呼吸道症状,发病鸡增重显著降低,法氏囊严重萎缩。贝氏隐孢子虫致病程度和排卵囊规律与感染剂量相关,主要病变表现呼吸道病变和法氏囊炎症。

    2012年07期 v.32;No.187 988-992页 [查看摘要][在线阅读][下载 687K]
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  • 贝类折光马尔太虫LAMP可视化检测方法的建立

    谢丽基;谢芝勋;庞耀珊;邓显文;谢志勤;刘加波;

    根据折光马尔太虫的基因保守序列设计了1套特异性环介导等温扩增(LAMP)引物,建立了折光马尔太虫LAMP可视化检测方法。该方法全部反应可在1h内完成;可通过肉眼观察颜色直接判定结果;检测的灵感性可达20fg,高于常规PCR方法100倍;对其他贝类常见病原体的检测结果均为阴性。结果表明,所建立的折光马尔太虫LAMP检测方法简便、快速、灵敏、特异,可用于贝类折光马尔太虫感染的快速检测。

    2012年07期 v.32;No.187 993-996页 [查看摘要][在线阅读][下载 293K]
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人兽共患病

  • H9N2亚型禽流感疫苗株的筛选及其免疫效果评价

    许传田;鲁梅;胡北侠;杨少华;颜世敢;张琳;张秀美;

    通过交叉血凝试验,疫苗备用毒株免疫SPF鸡后再用同源和异源毒株攻毒,评价疫苗备用毒株对SPF鸡保护效果。结果显示,H9N2疫苗备用株免疫SPF鸡后,再用H9亚型流感病毒流行株攻毒,SPF鸡咽喉和泄殖腔排毒量大大降低。结果表明,本试验筛选的疫苗备用毒株对H9N2亚型流感病毒具有一定的保护率,完全符合疫苗株要求。

    2012年07期 v.32;No.187 997-1000页 [查看摘要][在线阅读][下载 111K]
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  • 白鸡屎藤挥发油抗肠炎沙门菌及其内毒素的作用

    吴强;崔恒敏;李英伦;郁建生;

    雏鸡肠炎沙门菌病是肠炎沙门菌及其内毒素共同作用的结果。为了研究白鸡屎藤挥发油抗肠炎沙门菌及其内毒素的作用,本试验测定了白鸡屎藤挥发油抗肠炎沙门菌的效果,进一步提取了肠炎沙门菌内毒素并测试了白鸡屎藤挥发油对肠炎沙门菌内毒素的体外灭活作用和对肠炎沙门菌内毒素致热的解热作用,同时本试验还对白鸡屎藤挥发油进行了定性定量分析并测试了白鸡屎藤挥发油及其主要药理活性成分的药动学特征。结果显示,白鸡屎藤挥发油包括丁香酚、樟脑、龙脑、水杨酸甲酯等活性成分,在中剂量(100mL/L)、高剂量(150mL/L)均表现出较强的体外抑菌效果,25mL/L以上浓度即可表现出较强的灭活内毒素作用,并且2~4h大部活性成分进入血液循环,表现出显著的解热作用。结果表明,白鸡屎藤挥发油具有一定的抗菌、抗内毒素和解热作用,可以用于雏鸡肠炎沙门菌感染性发热病的治疗。

    2012年07期 v.32;No.187 1001-1006页 [查看摘要][在线阅读][下载 152K]
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  • 新生仔猪口服屎肠球菌对其肠道菌群组成及化学屏障的影响

    黄怡;黄琴;崔志文;李卫芬;余东游;

    随机选择24头出生时间相近的健康杜×长×大外三元仔猪,分为2个组,每组3个重复;每个重复4头。分别在仔猪刚出生、3日龄及5日龄灌服10%灭菌脱脂奶(对照组)或含有屎肠球菌活菌(5×108~6×108 CFU/mL)的10%脱脂奶重悬液(处理组),每次2mL/头,仔猪25日龄断奶。记录哺乳期仔猪腹泻发生率。断奶当天屠宰仔猪,采集肠道内容物及黏膜样品,检测盲肠内容物主要菌群的数量、各肠段pH值和结肠内容物乳酸含量,用实时定量PCR检测空肠黏膜化学屏障相关基因的表达量。结果显示,屎肠球菌使仔猪盲肠的乳酸菌比率升高8.98%,致病性肠杆菌的数量和比例分别下降28.68%(P<0.05)和13.01%,仔猪腹泻率也下降了43.21%,但不影响细菌总数和乳酸菌数量,也不影响肠道pH值、结肠乳酸含量以及空肠黏膜MUC2、pBD-1和PMAP-37mRNA的表达量,却显著下调LYS mRNA的表达。结果表明,口服屎肠球菌改善哺乳期仔猪肠道菌群组成,促进肠道健康,同时它对溶菌酶基因表达的抑制作用可能是维持乳猪肠道微生态稳定的重要因素之一。

    2012年07期 v.32;No.187 1007-1010+1019页 [查看摘要][在线阅读][下载 144K]
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基础兽医学

  • 钙稳态失衡在镉诱导大鼠大脑皮质神经细胞凋亡中的作用

    袁燕;孙娅;江辰阳;刘学忠;卞建春;顾建红;刘宗平;

    用不同浓度醋酸镉(0、5、10、20μmol/L)以及细胞内钙离子螯合剂BAPTA-AM(10μmol/L)单独或联合作用于大鼠大脑皮质神经细胞12h,利用流式细胞仪检测细胞凋亡率、细胞内[Ca2+]i、活性氧(ROS)水平以及线粒体膜电位(ΔΨm)。结果显示,与对照组相比,各镉染毒组细胞凋亡率、细胞内[Ca2+]i和ROS水平显著或极显著升高(P<0.05或P<0.01),ΔΨm显著或极显著降低(P<0.05或P<0.01)。BAPTA-AM联合组与相应镉染毒组相比,细胞凋亡率、细胞内[Ca2+]i和ROS水平降低,ΔΨm升高,部分组间差异显著或极显著(P<0.05或P<0.01)。结果表明,镉可诱导大脑皮质神经细胞凋亡,细胞内钙稳态失衡在镉诱导大脑皮质神经细胞凋亡中起着重要作用,凋亡机理可能与细胞内钙超载引起ROS水平升高和ΔΨm下降有关。

    2012年07期 v.32;No.187 1011-1014页 [查看摘要][在线阅读][下载 258K]
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  • 玉米赤霉烯酮中毒大鼠卵巢组织Bax和Bcl-2的表达

    俞亚玲;周宏超;孙薇薇;张冠世;贾辰;李引乾;

    10周龄SD大鼠单剂量腹腔注射5mg/kg玉米赤霉烯酮玉米油溶液,分别于3、6、12、24、48h时剖杀取卵巢组织,检测不同时间卵巢组织Bax和Bcl-2的表达。结果显示,病理组织学观察发现卵巢组织出现不同程度损伤,卵泡颗粒细胞发生凋亡。免疫组化SP法试验组与对照组卵巢组织中均有Bax和Bcl-2的表达,并且随着时间的推进呈现动态变化。Bax在3、6、12h时表达量上调,表达量与对照组比较差异显著(P<0.05),24、48h时表达量下降,与对照组比较差异不显著(P>0.05)。3~48h卵巢组织中Bcl-2表达量与对照组比较差异不显著(P>0.05)。结果表明,大鼠玉米赤霉烯酮中毒可引起卵巢组织的病变及颗粒细胞凋亡,且Bax在玉米赤霉烯酮中毒大鼠卵巢颗粒细胞凋亡中起着重要作用,Bcl-2的作用不明显。

    2012年07期 v.32;No.187 1015-1019页 [查看摘要][在线阅读][下载 920K]
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  • 激活素A促进鸡胚背根神经节神经突起生长的作用机制

    方琳;王轶楠;刘海岩;李晨光;李继茹;柳忠辉;

    采用半定量PCR检测激活素II型受体(ActRII)、钙基因相关肽(CGRP)、血管活性肠肽(VIP)mRNA表达,液相-质谱联用仪检测5-羟色胺释放水平。结果显示,5μg/L激活素A能明显促进鸡胚背根神经节神经突起生长,同时可见激活素A促进ActRIIA、CGRP mRNA表达及神经递质5-羟色胺释放,但对ActRIIB及VIP mRNA表达无影响。结果表明,Activin A可能通过Activin A-ActRIIA途径发挥作用,其促进鸡胚背根神经节神经突起生长与其上调CGRP表达及5-HT释放有关。

    2012年07期 v.32;No.187 1020-1022+1032页 [查看摘要][在线阅读][下载 240K]
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  • Ghrelin对雌激素诱导小鼠胸腺萎缩过程中细胞因子及凋亡相关蛋白基因表达的影响

    尹帆;李江;张媛;马勇江;李英;李玉谷;

    应用光镜和实时定量PCR技术研究了Ghrelin对雌激素诱导小鼠胸腺萎缩过程中胸腺形态学以及部分细胞因子和凋亡相关蛋白基因表达的影响。结果显示,注射Ghrelin后,雌激素诱导的小鼠萎缩胸腺在形态学上基本恢复到正常水平,胸腺中IL-6、TGF-β1、Caspase3、FADD mRNA含量显著降低,Caspase 9、FasL mRNA含量略为下降,而IL-7、Bcl-2mRNA含量有所上升。结果表明,Ghrelin可能通过促进胸腺上皮细胞的增殖以及阻断Caspase级联程序和Fas/FasL凋亡信号通路抑制胸腺细胞的凋亡,从而逆转雌激素诱导的小鼠胸腺萎缩。

    2012年07期 v.32;No.187 1023-1027页 [查看摘要][在线阅读][下载 386K]
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  • 内毒素致肝细胞凋亡与Survivin蛋白表达的关系及阳离子A保护效应

    高洪;屈常林;高利波;陈利平;严玉霖;赵汝;陈培富;邹丰才;

    72只SD大鼠随机分为对照组(Ⅰ组)、内毒素组(Ⅱ组)和CA保护组(Ⅲ组)。3组动物经相应处理后分别在第3、4、8、12h采集肝脏作为检测样本,用流式细胞仪检测肝细胞凋亡情况,免疫组织化学染色技术检测Survivin蛋白的表达情况。结果显示,在4个时段中,Ⅱ组凋亡肝细胞百分比都极显著高于Ⅰ组(P<0.01);在3、12h,Ⅱ组极显著高于Ⅲ组(P<0.01),在4h,Ⅱ组显著高于Ⅲ组(P<0.05);在8h,Ⅱ组肝细胞凋亡百分比呈上升趋势,Ⅲ组在3、4、8h3个时间点呈上升趋势,在12h有下降趋势。Ⅱ组Survivin的表达极显著低于Ⅰ组(P<0.01),且Ⅱ组一直呈减少趋势;Ⅱ组极显著少于Ⅲ组(P<0.01),Ⅲ组在3、4、8h这3个时间点呈下降趋势,在12h上升。结果表明,在内毒素血症中肝细胞凋亡与Survivin蛋白的表达呈负相关的关系,而CA则能明显上调Survivin在肝脏的表达水平,从而抑制肝细胞凋亡,对由ET诱导的肝损伤有可能发挥一定的保护作用。

    2012年07期 v.32;No.187 1028-1032页 [查看摘要][在线阅读][下载 615K]
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  • 利用乳汁体细胞研究共轭亚油酸钙对奶牛乳腺基因表达的作用

    韩立强;王月影;王林枫;郭豫杰;鲁维飞;杨国宇;

    8头泌乳中期的奶牛被随机分为2组,分别是对照组(每头牛:基础日粮+棕榈酸钙200g/d)和试验组(每头牛:基础日粮+共轭亚油酸钙200g/d),试验期14d,检测了奶产量、乳成分,分析奶牛的血液变化,并采用荧光定量PCR对乳汁体细胞中脂蛋白脂酶(LPL)、乙酰辅酶A羧化酶(ACACA)的基因表达进行检测。结果显示,与对照组相比,试验组奶牛的乳产量、乳蛋白、乳糖和乳汁体细胞含量没有显著影响,但是显著降低了乳脂肪含量(P<0.05),对照组和试验组奶牛乳脂肪含量分别为0.032 6g/mL和0.024 4g/mL。检测血液指标发现,共轭亚油酸钙显著升高了奶牛血液中高密度脂蛋白的含量(P<0.05)。基因分析发现,试验组奶牛乳汁体细胞中LPL、ACA-CA的基因表达显著下调,表明共轭亚油酸钙抑制了奶牛乳腺细胞脂肪酸合成酶的基因表达。

    2012年07期 v.32;No.187 1033-1037页 [查看摘要][在线阅读][下载 183K]
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  • NDPK B真核表达载体的构建及其对细胞生长活性的影响

    郭育培;杨建新;张学东;王泽;党源;张晓东;丁壮;

    将目的基因NDPK B连接到pEGFP-N1真核表达载体,转染Vero细胞,通过增强型绿色荧光蛋白(EGFP)和Western blotting分析,鉴定构建的pEGFP-NDPK B真核表达载体的正确性;利用生物信息学工具分析预测NDPKB蛋白的三维结构和可能存在的活性位点;MTT试验检测NDPK B对细胞生长活性的影响。结果显示,pEGFP-NDPK B真核表达载体构建成功,在Vero细胞中NDPK B和GFP蛋白能有效地融合表达。在线预测了NDPK B蛋白的三维结构和可能存在的活性位点。MTT试验结果表明,NDPK B对Vero细胞生长活性的抑制率为25.8%,对A549细胞生长活性的抑制率为22.7%。结果表明,NDPK B能够抑制细胞的生长,对细胞的凋亡具有正调节作用。

    2012年07期 v.32;No.187 1038-1042+1055页 [查看摘要][在线阅读][下载 379K]
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  • 抗菌肽V13KL原核表达载体的构建及其表达产物的鉴定

    秦莹;乔木;关继羽;陈玥;孔德龙;安培培;唐博;陈育新;岳占碰;李子义;

    将V13KL编码基因片段克隆到原核表达载体pET30b(+),并在目的蛋白N端设计肠激酶酶切位点,构建出pET30b(+)-VK13L重组质粒,转化大肠杆菌表达菌株BL21(DE3),优化诱导条件,使得抗菌肽得到了高效表达。经Tricine-SDS-PAGE和Western blotting鉴定,目的蛋白的相对分子质量与预期一致。结果表明,V13KL基因成功克隆并且获得表达,在诱导体系中加入1mmol/L IPTG诱导6h便可检测到蛋白表达。

    2012年07期 v.32;No.187 1043-1046页 [查看摘要][在线阅读][下载 312K]
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临床兽医学

  • 连续低剂量黄曲霉毒素B1对大鼠肝肾损伤作用

    周育;张巧艳;郑晓亮;王钫;汪小福;吉小凤;徐俊锋;

    用含有不同质量浓度黄曲霉素B1(AFB1)(0、4、20、25、50μg/kg)的污染饲料连续饲喂各试验组大鼠60d,于7、15、30、60d静脉取血,测定各组大鼠肝功能与肾功能生化指标。每周检测大鼠体质量,试验第60天断头处死大鼠,检测肝肾组织病理学变化并计算各组大鼠的脏体系数。试验期间各组受试动物未发现明显的中毒症状和异常情况,60d内无受试动物死亡。与对照相比,不同剂量组AFB1对大鼠体质量无显著性影响;连续喂饲7d,大鼠血清AST和BUN含量显著升高(P<0.05);连续喂饲15d,大鼠血清AST、BUN和ALB含量显著升高(P<0.05),连续喂饲30d,大鼠血清BUN含量显著升高(P<0.05),连续喂饲60d,大鼠血清CR和BUN含量显著升高(P<0.05)。在各测试质量浓度条件下,大鼠虽未发现明显的中毒症状和异常情况,试验期间无动物死亡,但与空白对照相比,各剂量组AFB1对大鼠均产生了显著的肝肾组织病理学损伤,中毒程度与给毒剂量成正相关性。随着毒素暴露时间延长,大鼠肝脏对低剂量AFB1表现出一定的耐受性,而大鼠的肾脏损伤与毒素暴露时间表现出显著的积累效应。

    2012年07期 v.32;No.187 1047-1052页 [查看摘要][在线阅读][下载 607K]
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  • 乳房炎病奶牛血清抗氧化物酶活性

    尹柏双;李静姬;呼显生;崔永镇;郝景峰;

    将14头奶牛分为健康对照组和乳房炎组,分别在泌乳的不同时期采血液,分离血清,测定血清中超氧化物歧化酶(SOD)、谷胱甘肽过氧化物酶(GSH-Px)、过氧化氢酶(CAT)活性。结果显示,患病奶牛血清中SOD、GSH-Px、CAT活性显著低于对照组(P<0.01或P<0.05)。结果表明,患病奶牛血清中抗氧化物酶活性的降低导致自由基大量蓄积可能是乳房炎发病机理之一。

    2012年07期 v.32;No.187 1053-1055页 [查看摘要][在线阅读][下载 98K]
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  • 三聚氰胺对小白鼠亚慢性毒性

    林居纯;鄢荣梅;彭西;曹三杰;文心田;

    将80只昆明小白鼠随机分为4组(每组20只):空白对照组(Ⅰ组)、三聚氰胺高剂量组(300mg/kg)(Ⅱ组)、三聚氰胺中剂量组(150mg/kg)(Ⅲ组)和三聚氰胺低剂量组(37.5mg/kg)(Ⅳ组),试验周期为30d。试验期内观察小白鼠一般情况、体质量变化及食物利用率。结果显示:三聚氰胺染毒组小鼠体增重缓慢,食物利用率极显著降低(P<0.01);Ⅱ、Ⅲ组小鼠血清ALT、AST、BUN、Cr和UA值显著高于Ⅰ组(P<0.05),Ca和P显著低于Ⅰ组(P<0.05);Ⅱ组小鼠肝、肾指数显著高于Ⅰ组(P<0.05),Ⅱ、Ⅲ组脾指数显著低于Ⅰ组(P<0.05);Ⅱ、Ⅲ组小鼠肺、肝、脾、肾及膀胱有病理变化。结果表明,三聚氰胺亚慢性毒性会影响动物生长,造成肺、肝、肾及脾损害。

    2012年07期 v.32;No.187 1056-1059页 [查看摘要][在线阅读][下载 357K]
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动物科学

  • 不同供体细胞代数对兔体细胞核移植效率的影响

    宋伟杰;谷瑞环;尹明茹;李敦高;邢凤英;李善刚;陈学进;李和平;

    将兔成纤维细胞分为5~10低代数组和20~25高代数组进行核移植研究。结果显示,2试验组供体细胞核移植的效率存在差异。通过对供体细胞进行核移植后的重构胚胎的融合率、卵裂率、囊胚率以及体内发育的比较,发现低代数相对来说更有效率,但是高代数组也能获得正常的克隆后代。结果表明,兔不同代数体外培养细胞对克隆效率存在影响,并为制备转基因打靶兔提供基础。

    2012年07期 v.32;No.187 1060-1064+1072页 [查看摘要][在线阅读][下载 336K]
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  • 高乌甲素对犬围术期血清β-EP、IL-2水平的影响

    彭广能;谢礼;钟志军;汪恒;徐在品;符华林;熊杰;吴睿雪;刘益新;魏春梅;石锦江;马晓平;

    为探讨高乌甲素对犬围术期血清β-内啡肽(β-EP)、白细胞介素-2(IL-2)水平的影响,了解犬术后镇痛、调节免疫、减少应激的方法与途径,选取健康本地犬20只,随机均分为4组(A、B、C、D组),分别进行耳廓部分切除术。A组和B组在麻醉前分别于肌肉注射高乌甲素注射液0.4、0.8mg/kg;C组在麻醉前于肌肉注射复方氨林巴比妥注射液2mL;D组不采取任何镇痛措施。各组动物分别于术前(T1)、术毕(T2)、术后4h(T3)、术后12h(T4)、术后24h(T5)无菌采集外周血液,测定血清中β-EP、IL-2的含量,分析统计各数值的变化。结果显示,术后各组犬的血清β-EP含量均有不同程度升高,其中B组只在T2和T3与术前有显著差异(P<0.05),而A、C、D组术后各时间点β-EP含量与术前相比均有显著差异(P<0.05)或极显著差异(P<0.01)。各组犬的血清IL-2含量在T1后都有下降,并于T3后开始上升;B组在术后各时间点与术前相比均无明显差异(P>0.05),且变化幅度最小;A组只在T3和T4与术前相比有显著差异(P<0.05);C、D组术后各时间点与术前相比均有显著差异(P<0.05)或极显著差异(P<0.01)。结果表明,高乌甲素能够有效抑制犬术后血清β-EP升高和IL-2降低的幅度,可以作为动物临床镇痛的有效药物使用,在本试验设定的剂量中,运用高乌甲素0.8mg/kg对犬术后镇痛、调节免疫、抗应激的效果较好。

    2012年07期 v.32;No.187 1065-1067+1088页 [查看摘要][在线阅读][下载 123K]
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  • 芽孢杆菌制剂对蛋鸡产蛋性能、血清相关指标及肠道菌群的影响

    吕尊周;袁肖笑;郝柱;尹兆正;

    将480只30周龄海赛克斯褐壳蛋鸡随机分成4组,每组4个重复,每个重复30只鸡。对照组(Ⅰ组)饲喂基础日粮,试验组(Ⅱ~Ⅳ)分别在基础日粮中添加100、200、300mg/kg水平的芽孢杆菌制剂。结果显示,Ⅱ组产蛋率显著高于Ⅰ组和Ⅳ组(P<0.05),料蛋比有所降低但不显著(P>0.05)。Ⅱ组白蛋白和血糖含量显著高于Ⅰ组和Ⅳ组(P<0.05),芽孢杆菌对总蛋白、尿酸、总胆固醇和甘油三酯无显著性影响(P>0.05)。各试验组IgA和IgG含量均比对照组有所提高,但差异不显著(P>0.05)。Ⅱ组和Ⅲ组C3浓度显著高于Ⅰ组(P<0.05),Ⅱ组C4浓度显著高于Ⅰ组和Ⅳ组(P<0.05)。Ⅱ组和Ⅲ组回肠大肠杆菌的数量较Ⅰ组显著降低(P<0.05),乳酸杆菌显著提高(P<0.05)。结果表明,芽孢杆菌制剂能够改善蛋鸡的生产性能,提高机体免疫力,促进肠道健康;蛋鸡日粮中添加100mg/kg芽孢杆菌制剂效果最佳。

    2012年07期 v.32;No.187 1068-1072页 [查看摘要][在线阅读][下载 134K]
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  • 皖南花猪骨骼肌AdpR和MyHC mRNA表达的发育性变化

    张佳;周杰;盛晟;邵康;吴小雪;李维新;殷宗俊;

    为探讨皖南花猪骨骼肌组织中脂联素受体(AdpR1、AdpR2)和不同类型肌球蛋白重链(MyHC)mRNA的发育性变化及性别差异,选择0(出生当天)、30、45、90、180日龄的皖南花猪公母各5头,以β-Actin为内标,采用△△Ct相对定量实时荧光PCR方法对背最长肌和半腱肌中AdpR1、AdpR2、MyHCI、MyHC2a、MyHC2b和My-HC2xmRNA进行定量分析。结果显示,背最长肌和半腱肌AdpR1、AdpR2、MyHC1、MyHC2a、MyHC2b和My-HC2xmRNA的表达都有显著或极显著的发育变化规律(P<0.05或P<0.01)。总体上AdpR1、AdpR2、My-HC2a、MyHC2b和MyHC2xmRNA在背最长肌显著或极显著高于半腱肌(P<0.05或P<0.01);MyHC1mRNA在背最长肌极显著低于半腱肌(P<0.01)。半腱肌MyHC1mRNA在母猪显著大于公猪(P<0.05),而MyHC2amRNA在母猪显著小于公猪(P<0.05)。背最长肌和半腱肌AdpR2mRNA的表达分别与MyHC1正相关(P<0.05),半腱肌AdpR1mRNA的表达与MyHC2x正相关(P<0.05)。结果表明,皖南花猪骨骼肌组织中AdpR和MyHC的基因表达有特定的发育模式和组织特异性,且有一定性别差异。

    2012年07期 v.32;No.187 1073-1078页 [查看摘要][在线阅读][下载 300K]
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  • 水稻秸整株青贮对荷斯坦奶牛生产性能的影响

    华金玲;郭亮;张永根;王立克;

    采用单因素试验设计,将30头健康的荷斯坦奶牛随机分为3组,水稻秸整株青贮分别以0、25%、50%(干物质基础)3个比例添加饲喂奶牛60d(预试验15d,正式试验45d)探讨水稻秸整株青贮对奶牛生产性能的影响。结果表明,水稻秸整株青贮可以代替一定比例的玉米青贮,并且对奶牛生产性能的影响差异不显著(P>0.05)。同时水稻秸青贮添加量为25%(Ⅱ组)和50%(Ⅲ组)的试验组每天每头奶牛的生产成本比玉米青贮的(Ⅰ组)组生产成本降低了1.92元(人民币)和3.82元(人民币),相对应的收入每天每头牛增加了3.48元(人民币)和4.56元(人民币)。

    2012年07期 v.32;No.187 1079-1082页 [查看摘要][在线阅读][下载 106K]
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综述

  • 哺乳动物X染色体失活机制及其应用

    鲁成龙;华松;彭辉;吕品;刘旭;张涌;

    <正>1 X染色体失活的起源及发展哺乳动物X染色体失活是指雌性动物为了平衡与雄性动物X染色体基因表达量的差异,而失活其中1条X染色体的现象。X和Y染色体起源于1对同源的常染色体,自然选择的压力导致了1条染色体的某个基因突变,从而产生了决定性别的基因,

    2012年07期 v.32;No.187 1083-1088页 [查看摘要][在线阅读][下载 258K]
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简讯