- 温立斌;何孔旺;俞正玉;茅爱华;高晓静;倪艳秀;张雪寒;郭容利;李彬;王小敏;周俊明;吕立新;
选用3头自然感染仔猪和1头阴性对照猪,剖杀后采集心脏、肝脏、脾脏、肺脏、肾脏、胰脏、脑、空肠、扁桃体、胸腺、淋巴结、膀胱、性腺等组织,用荧光定量PCR方法检测病毒在组织中的分布及病毒载量。结果显示,类猪圆环病毒因子P1分布在仔猪的心脏、肝脏、肺脏、胰脏、脑和膀胱等组织,病毒载量以胰脏、脑和膀胱为最高,可达105拷贝/g以上;对照猪脏器中没有检测到病毒核酸。该研究为P1的诊断及致病机制奠定了基础。
2013年01期 v.33;No.193 1-3页 [查看摘要][在线阅读][下载 314K] [下载次数：160 ] |[网刊下载次数：0 ] |[引用频次：8 ] |[阅读次数：0 ] - 苏高莉;赵魁;孙秀萍;何叶;周平;潘伟;包英夫;李吉达;宋德光;高丰;
利用初生胎羊鼻甲骨(Primary ovine fetal turbinate,OFTu)细胞从送检的疑似"口疮"症状的病羊唇部痂皮中分离获得1株病毒,用PCR检测、电镜负染观察及理化性质测定等方法对该分离株病毒进行鉴定,证实该分离株为羊传染性脓疱病毒(Orf virus,ORFV),命名为(Orf virus Jilin-Nongan,ORFV JL-NA株)。对ORFV JL-NA分离株Orf059(F1L)基因进行克隆、测序并对测序结果进行序列分析。结果显示,获得的ORFV JL-NA分离株Orf059(F1L)基因序列长为994bp,编码329个氨基酸,与ORFV-D1701株、ORFV-Jilin株、ORFV-NZ2株、ORFV-20株、ORFV-7株、ORFV-C2株、ORFV-IA82株、ORFV-SA00株、ORFV-mi90株、ORFV-torino株、ORFV-Shanxi株核苷酸序列同源性分别为96.4%、97.3%、99.1%、98.7%、99.0%、97.5%、98.4%、97.2%、97.4%、96.9%和96.8%。遗传进化树结果显示,ORFV JL-NA分离株与意大利ORFV-7毒株的亲缘关系较近,表明不同地区分离株的Orf059(F1L)基因差异不大。
2013年01期 v.33;No.193 4-8页 [查看摘要][在线阅读][下载 677K] [下载次数：354 ] |[网刊下载次数：0 ] |[引用频次：13 ] |[阅读次数：0 ] - 张坤;刁有祥;程彦丽;崔京腾;王蛟;
用鸭瘟病毒(Duck plague virus,DPV)人工感染2月龄SPF鸭,定期剖杀,经聚合酶链反应(PCR)检测为鸭瘟后,对各组织器官的病理组织学变化进行观察,并进行血常规和血液生化指标检测。结果显示,人工感染后24h,试验鸭中枢免疫器官胸腺、法氏囊表现为淋巴细胞数量减少,组织间隙增大;肝脏、脾脏组织病变较为严重,大部分组织器官均出现程度较轻的病理变化。感染后48～96h,中枢免疫器官的淋巴细胞极度减少、网状细胞增生、组织器官结构模糊不清,严重充血、出血;其余组织器官出现细胞变性、出血等不可逆病理变化。感染后120h,组织细胞变性、坏死,出现大片坏死区。点眼滴鼻组鸭感染DPV后组织学变化与皮下注射组相似,只是发生的时间偏后约24～48h。对照组鸭病理组织学观察未见损伤。WBC、HGB、AST、ALT等发生显著变化。结果表明,接种DPV强毒感染鸭的组织器官严重受损,特别是免疫器官,甚至会引起免疫抑制。
2013年01期 v.33;No.193 9-15+48页 [查看摘要][在线阅读][下载 1778K] [下载次数：251 ] |[网刊下载次数：0 ] |[引用频次：12 ] |[阅读次数：1 ] - 高凤;于可响;马秀丽;李玉峰;王友令;李建亮;崔言顺;
根据鸭黄病毒E蛋白基因序列设计了1对特异性引物和TaqMan探针,建立了实时荧光定量RT-PCR检测鸭黄病毒的方法。根据含鸭黄病毒目的扩增片段的质粒拷贝数与定量反应Ct值的关系,绘制了标准曲线(Y=-3.39 X+43.18,r=0.973)。该方法具有特异性,对鸭病毒性肝炎病毒、禽流感病毒、新城疫病毒、腺病毒、鸭瘟病毒、猪乙脑病毒的核酸都没有扩增反应。敏感性试验显示,建立的此方法最低可检出1.9个TCID50病毒核酸。该方法对5只健康雏鸭人工感染86h后的组织器官样品(盲肠扁桃体除外)的检测结果均为阳性,与病毒分离鉴定的阳性符合率为100%。结果表明,该方法真实可靠,而且从核酸提取到报告检测结果耗时不超过3h,为鸭黄病毒病提供了一种敏感特异的定量检测方法。
2013年01期 v.33;No.193 16-19页 [查看摘要][在线阅读][下载 620K] [下载次数：270 ] |[网刊下载次数：0 ] |[引用频次：7 ] |[阅读次数：0 ] - 王丽;李传龙;赵鹏;李德庆;张青婵;李中明;崔治中;
对自国外直接进口的蛋用型海兰褐祖代鸡群的禽白血病感染状态进行了持续观察,并与国内3个不同发病状况的海兰褐父母代鸡群的种蛋p27检出率、抗体阳性率、投诉情况进行了比较。将国外直接进口的蛋用型海兰褐祖代鸡群3个配套系240只1日龄鸡在SPF环境中饲养,在不同日龄采集泄殖腔棉拭子检测禽白血病病毒(A-vian leukosis virus,ALV)群特异性p27抗原、采集血清检测ALV-AB及J特异性抗体和采集血浆分离外源性ALV,并在鸡群开产后收集种蛋,检测蛋清p27抗原和父母代鸡群胎粪p27抗原。同时对来自天津、山东的不同投诉情况的3个父母代鸡场种蛋p27抗原或ALV-AB及J抗体进行了检测。结果显示,进口祖代鸡ALV-AB及J特异性抗体在68、150日龄检测均为阴性;分别在12、26、68、150日龄采血浆在DF1细胞分离病毒均为阴性;收集的250枚种蛋蛋清和孵化的父母代鸡群胎粪p27抗原检测均为阴性。而其他国内3个父母代鸡场的种蛋p27检出率最高达12%。结果表明,该海兰褐祖代鸡群无外源性禽白血病的感染,不同鸡群的种蛋p27检出率与病毒分离率及发病情况具有较好的吻合性,可以作为开展ALV的流行病学调查和种鸡场净化的重要指标。
2013年01期 v.33;No.193 20-23页 [查看摘要][在线阅读][下载 440K] [下载次数：195 ] |[网刊下载次数：0 ] |[引用频次：5 ] |[阅读次数：0 ] - 程彦丽;刁有祥;张坤;杨建朋;国纪垒;肖坡;
根据GenBank发表的鸭源新城疫病毒SDWF02株NP基因序列,设计并合成1对特异性引物,扩增出鸭源新城疫病毒的NP基因,与原核表达载体pET-28a构建重组质粒pET28a-NP,经鉴定后转化Rosetta感受态细胞,经IPTG诱导,SDS-PAGE和Western-blot分析表明,54 000的融合蛋白得以表达,该蛋白能与鸭源新城疫的阳性血清发生特异性的反应。以纯化的重组蛋白为包被抗原,建立检测鸭源新城疫抗体的间接ELISA方法,经方阵滴定确定最佳包被质量液为pH9.6的碳酸盐缓冲液,最佳包被质量浓度为10ng/孔,血清最佳稀释度为1∶1 000。经应用试验表明该方法具有良好的特异性、可重复性和敏感性,为临床检测鸭源新城疫抗体水平提供了一种简单、准确、快速的诊断方法。
2013年01期 v.33;No.193 24-28+79页 [查看摘要][在线阅读][下载 722K] [下载次数：210 ] |[网刊下载次数：0 ] |[引用频次：3 ] |[阅读次数：0 ] - 贾爱卿;王贵平;黄静琳;
用PCR技术对华南地区分离的17株不同血清型副猪嗜血杆菌菌株ompP2基因进行克隆鉴定,并以CLUSTALS1和PHYLIP-3.68软件将ompP2基因序列进行比对和遗传进化分析。17株副猪嗜血杆菌菌株中均能扩出ompP2基因,克隆测序结果发现ompP2基因大小有所不同,与参考序列ABKM01000007的同源性在92%～99%之间。序列比较结果显示,ompP2基因与GenBank公布的副猪嗜血杆菌全基因组测序中的ompP2基因序列具有较高的同源性,不同菌株ompP2基因序列大小存在差异,为进一步验证ompP2蛋白的功能及相关研究奠定了基础。
2013年01期 v.33;No.193 29-31+93页 [查看摘要][在线阅读][下载 732K] [下载次数：218 ] |[网刊下载次数：0 ] |[引用频次：5 ] |[阅读次数：0 ] - 吴华;刘保光;潘玉善;胡功政;苑丽;刘建华;
对该临床菌株进行接合试验,采用PCR扩增获得blaTEM-57基因片段,定向克隆入表达载体pET-28a构建重组质粒,经酶切和DNA测序鉴定后进行诱导表达,用双紫外分光光度仪测定表达蛋白的底物水解特性和抑制剂的抑酶特性。结果显示,耐药质粒成功从供体菌接合转移到大肠杆菌C600,接合子对青霉素类及氨基糖苷类药物耐药。PCR扩增产物电泳出现blaTEM-57目的条带。重组质粒经EcoRⅠ、XholⅠ双酶切及测序鉴定后,显示pET-28α/TEM-57原核表达载体构建成功。原核表达的最优条件为IPTG浓度0.8mmol/L、温度37℃、诱导时间4h。blaTEM-57能水解氨苄西林、阿莫西林、头孢氨苄、头孢噻呋钠、头孢曲松钠、头孢噻肟钠及头孢哌酮,对头孢氨苄的Km最小为2.4,对头孢噻呋钠的Km最大为121.5;抑制剂舒巴坦钠和他唑巴坦对blaTEM-57水解抗生素有不同程度的抑制作用。pET-28α/TEM-57重组质粒得到成功构建和诱导表达,为进一步研究酶的其他特性及制备特异性的单克隆抗体奠定了基础。
2013年01期 v.33;No.193 32-37页 [查看摘要][在线阅读][下载 665K] [下载次数：252 ] |[网刊下载次数：0 ] |[引用频次：9 ] |[阅读次数：0 ] - 秦倩倩;付本懂;伊鹏霏;董海兵;白换力;张立艳;吕爽;蒋小林;韦旭斌;申海清;
模拟大肠杆菌O78在血液中被鸡异嗜性粒细胞吞噬杀伤的过程,利用激光共聚焦和涂板菌落计数的方法研究中药单体成分穿心莲内酯对异嗜性粒细胞吞噬杀伤大肠杆菌O78活性的影响。结果显示,穿心莲内酯质量浓度为1mg/L时有极显著的提高异嗜性粒细胞吞噬大肠杆菌O78的作用(P<0.01),并且在异嗜性粒细胞发挥杀伤作用的12h后有极显著的增强其杀伤作用的功效(P<0.01)。结果表明,穿心莲内酯能够提高异嗜性粒细胞吞噬、杀伤大肠杆菌O78的活性,从而起到增强机体抗病能力,提高机体免疫力的作用。
2013年01期 v.33;No.193 38-42页 [查看摘要][在线阅读][下载 706K] [下载次数：236 ] |[网刊下载次数：0 ] |[引用频次：5 ] |[阅读次数：0 ] - 杨德英;任永军;聂华明;付彦;谢跃;陈林;农向;岩宁;古小彬;王淑贤;杨光友;
利用PCR扩增了中国四川省7个不同地理区域(雅安、攀枝花、乐山、广元、泸州、广安和阿坝)23株家兔体内豆状囊尾蚴的CO2(Cytochrome oxidase subunit 2,468bp)和ND4(NADH dehydrogenase subunit 4,1 077bp)基因的部分序列,并进行分析。结果显示,7个种群23个分离株中CO2和ND4基因序列中分别有21个和32个变异位点,分别检测出了5个和7个单倍型,2个基因的种群分析结果显示乐山种群最为保守;CO2分析结果显示攀枝花和雅安种群内变异最大,且高于种群间变异。2个线粒体基因构建的NJ/MP树显示7个种群的系统发生与他们分布的地理区域没有直接的相关性,还未形成显著的地理种群结构。结果表明,四川省7个地理种群间和种群内豆状囊尾蚴均存在一定的遗传变异和遗传多样性,为豆状带绦虫的分子流行病学调查和群体遗传研究奠定了基础。
2013年01期 v.33;No.193 43-48页 [查看摘要][在线阅读][下载 722K] [下载次数：166 ] |[网刊下载次数：0 ] |[引用频次：4 ] |[阅读次数：0 ]
- 蔡扩军;孟庆玲;乔军;陈创夫;马饰委;黄炯;张再超;田振中;杨丽红;
通过Poly A polymerase对小干扰RNA分子(Small interfering RNA,siRNA)3′端进行加"Poly A"处理,然后进行RT-PCR扩增,并将扩增产物克隆到T载体上进行测序。结果表明,通过该方法可以快速检测FMDV特异性siRNA分子的表达,这为siRNA的干扰FMDV复制分子机制和抗FMDV转基因动物细胞水平的评价研究提供了技术支撑。
2013年01期 v.33;No.193 49-52页 [查看摘要][在线阅读][下载 710K] [下载次数：130 ] |[网刊下载次数：0 ] |[引用频次：0 ] |[阅读次数：2 ] - 吕文强;师润;陈陆;张金来;杨霞;赵军;王新卫;王川庆;
为了解CD44分子在雏鸡肠组织内的表达及其时空表达特性,设计1对引物,建立RT-PCR方法对CD44mRNA进行鉴定;以GAPDH基因为内参,建立检测鸡CD44基因表达水平的SYBR GreenⅠ实时荧光定量(Q-PCR)方法,对1～28日龄商品鸡肠组织不同部位中CD44mRNA表达水平进行检测。结果显示,从鸡肠组织中成功鉴定出CD44mRNA,建立的荧光定量方法能特异性检测到CD44mRNA,CD44和GAPDH基因的扩增效率分别为95%和101%,线性范围均在108～104拷贝/μL,敏感度高,最低检测限分别为45和77个拷贝。建立的CD44SYBR GreenⅠ荧光定量PCR检测方法具有特异、灵敏、快速、重复性好等优点。雏鸡不同日龄,不同肠组织中CD44表达水平有所差异,5～20日龄时的空肠组织和5～10日龄时的直肠组织中CD44表达量较高。
2013年01期 v.33;No.193 53-58+63页 [查看摘要][在线阅读][下载 998K] [下载次数：64 ] |[网刊下载次数：0 ] |[引用频次：0 ] |[阅读次数：0 ] - 张九州;郑逢梅;李乔晶;姬郭彪;杨霞;赵军;陈陆;常洪涛;王新卫;李欢;王川庆;
用猪链球菌血清2型(Streptococcus suis serotype 2,SS2)的荚膜多糖(Capsular polysaccharide,CPS)致敏经戊二醛处理过的鸡红细胞,优化致敏醛化红细胞的抗原量和时间。结果显示,在37℃条件下CPS(2.2 5mg/L)致敏鸡红细胞90min,IHA试验在25℃条件下操作,被检血清IHA效价在1∶8及其以上时判为SS2抗体阳性。应用此方法对猪大肠杆菌、副嗜血杆菌、猪肠球菌、SS1、SS7、SS9、金黄色葡萄球菌、沙门菌、巴氏杆菌阳性血清进行检测,结果表明,SS2抗体均为阴性。对1044份无临床症状的猪血清进行检测,SS2抗体阳性率为61.69%。该方法敏感性高,特异性较强,可用于大规模SS2抗体水平的检测和SS2的血清流行病学调查。
2013年01期 v.33;No.193 59-63页 [查看摘要][在线阅读][下载 656K] [下载次数：162 ] |[网刊下载次数：0 ] |[引用频次：5 ] |[阅读次数：0 ]
- 安铁洙;宁方勇;王春生;朴善花;梁洋;
利用pIRES2-EGF和pMX载体以及前期获得的蜘蛛拖丝蛋白基因(2S)构建逆转录病毒载体pMX-2S-IRES-EGFP。采用磷酸钙法将pMX-2S-IRES-EGFP质粒转染到PlatE细胞并获得重组逆转录病毒。通过小鼠成纤维细胞系NIH3T3检测病毒侵染能力,并采用PCR法检测蜘蛛拖丝蛋白基因在NIH-3T3细胞的整合状况。结果显示,成功构建了逆转录病毒载体pMX-2S-IRES-EGFP;通过感染NIH-3T3细胞测定重组逆转录病毒滴度约为2×105 cfu/mL;PCR鉴定结果显示,目的基因2S-IRES-EGFP已整合入NIH-3T3细胞基因组中。
2013年01期 v.33;No.193 64-68页 [查看摘要][在线阅读][下载 873K] [下载次数：165 ] |[网刊下载次数：0 ] |[引用频次：1 ] |[阅读次数：0 ] - 王亚超;邓俊良;王利民;钱辉;刘国文;王哲;
在应用实时荧光定量PCR法观察胰岛素(In)、胰高血糖素(GLN)、神经肽(NPY)对体外培养新生犊牛肝细胞硬脂酰CoA去饱和酶(Stearoyl CoA desaturase,SCD)mRNA丰度的影响。结果显示,随着培养液中In含量的升高,肝细胞中的SCD mRNA表达逐渐升高(P<0.05),呈现明显的剂量依赖促进效应;随着培养液中GLN含量的升高,肝细胞SCD mRNA丰度表达逐渐减弱,高血糖素处理组SCD mRNA表达均极显著低于对照组(P<0.01);而随着NPY质量浓度在0～1 000ng/L之间逐渐上升,肝细胞SCDmRNA的表达水平不断升高,各处理组显著高于对照组,除50ng/L处理组和500ng/L处理组之间差异不显著外,其他处理组之间差异显著(P<0.05)。结果表明,胰岛素和神经肽Y促进SCD mRNA表达,胰高血糖素抑制SCD mRNA表达。
2013年01期 v.33;No.193 69-73页 [查看摘要][在线阅读][下载 722K] [下载次数：149 ] |[网刊下载次数：0 ] |[引用频次：8 ] |[阅读次数：0 ] - 董世起;周东海;张鼎;马锐;郭定宗;
将断奶15d仔猪(45日龄)处死后分别取胃窦部、胃体部、胃底部,4%中性多聚甲醛固定24h后制作组织蜡块,采用SP免疫组化试剂盒和DAB显色法,对各组织蜡块进行免疫组化检测,对检测结果进行拍照并分析。结果显示,肥胖抑制素(Obestatin)在断奶仔猪胃组织内广泛存在,而且在胃的不同部位其分布、含量有所不同。胃底部和胃体部以胞内分泌为主,胃窦部则主要分泌到黏膜外。Obestatin在仔猪胃壁中确实存在,且其在胃壁中的分布从上到下逐渐在组织内和组织外变化。同时,本试验也从侧面证实了猪和其他已证明的动物种属之间的Obestatin具有相似的结构位点。
2013年01期 v.33;No.193 74-79页 [查看摘要][在线阅读][下载 1730K] [下载次数：84 ] |[网刊下载次数：0 ] |[引用频次：1 ] |[阅读次数：1 ] - 康磊;李文立;姜建阳;李方正;任慧英;
选用1日龄科宝-500肉鸡240只,随机分为6个处理组,每处理组4个重复,每个重复10只。Ⅰ组饲喂玉米-豆粕型基础日粮,Ⅱ、Ⅲ、Ⅳ、Ⅴ、Ⅵ组分别在基础日粮中添加0.4%、0.8%、1.2%、1.6%和2.0%谷氨酰胺,试验时间15～42日龄,共28d。试验期间从每天早上9:00到下午17:00温度维持在(35±1)℃,下午17:00至次日上午9:00温度维持在(30±1)℃,鸡舍相对湿度控制在70%～80%。试验测定了热应激条件下28、35、42日龄肉鸡盲肠内乳酸杆菌、双歧杆菌、产气荚膜梭菌、大肠杆菌的数量。结果显示,日粮中添加谷氨酰胺显著提高了28、35、42日龄热应激肉鸡盲肠内乳酸杆菌、双歧杆菌的数量(P<0.05),显著降低产气荚膜梭菌、大肠杆菌的数量(P<0.05)。结果表明,在基础日粮中添加一定水平的谷氨酰胺可维持热应激肉鸡的肠道微生物区系的稳定。
2013年01期 v.33;No.193 80-84页 [查看摘要][在线阅读][下载 672K] [下载次数：410 ] |[网刊下载次数：0 ] |[引用频次：29 ] |[阅读次数：0 ] - 赵程程;郑海南;吴山力;郑梅竹;杨德才;张玉静;艾永兴;
构建鸡去泛素化相关因子1(Chicken ubiquitin-related factor 1,chUAF1)的原核表达载体,并对表达产物进行鉴定。将提取的鸡法氏囊cDNA根据哺乳动物基因组的特性5′-端GC含量高3′-端GC含量低的特点设计2对引物,PCR获取2段基因片段。将两者用搭桥部分的酶切位点进行酶切,胶回收,连接成chUAF1基因全长,再将基因克隆入pMD18-T载体,酶切鉴定后,将chUAF1基因亚克隆到pET28a原核表达载体,构建重组质粒pET28a-UAF1。转化BL21(DE3)大肠杆菌中,IPTG诱导表达并鉴定。结果显示,所构建的chUAF1基因表达载体pET28a-chUAF1经PCR及DNA测序结果表明构建正确,SDS-PAGE鉴定在预期位置出现阳性条带。结果表明,已成功构建了pET28a-chUAF1原核表达载体,为下一步试验提供了依据。
2013年01期 v.33;No.193 85-88页 [查看摘要][在线阅读][下载 831K] [下载次数：151 ] |[网刊下载次数：0 ] |[引用频次：1 ] |[阅读次数：0 ] - 王丛丛;石有斐;李金莲;李培锋;夏俊峰;刘海涛;马卫明;
采用80mg/kg剂量的地塞米松对小鼠进行腹腔注射制备免疫抑制小鼠模型;牛磺鹅去氧胆酸(Tauroche-nodeoxycholic acid,TCDCA)设计了0.05、0.10、0.20g/kg低、中、高3个给药剂量对小鼠灌胃给药;检测免疫器官质量,碳粒廓清法检测单核-巨噬细胞吞噬功能,流式细胞术检测外周血CD4+和CD8+细胞亚群百分率及CD4+与CD8+的比值,ELISA检测血清中IgG的含量。结果显示:模型小鼠和正常小鼠相比较,脾指数、单核-巨噬细胞吞噬功能、CD4+和CD8+亚群百分率及血清IgG含量均极显著降低(P<0.01),说明地塞米松制备的小鼠模型免疫功能极显著低下。给药组与模型组相比较,TCDCA的3个剂量组对小鼠脾指数均无显著影响(P>0.05);低剂量组和中剂量组极显著增强单核-巨噬细胞系统吞噬功能(P<0.01);3个剂量组均显著提高外周血中CD4+细胞百分率(P<0.05),中剂量组显著提高CD4+与CD8+的比值(P<0.05);低剂量组和中剂量组显著提高小鼠血清中IgG含量(P<0.05)。结果表明,TCDCA对糖皮质激素免疫抑制小鼠的非特异性免疫和特异性细胞免疫、体液免疫功能具有恢复作用,但对脾脏萎缩无恢复作用。
2013年01期 v.33;No.193 89-93页 [查看摘要][在线阅读][下载 786K] [下载次数：177 ] |[网刊下载次数：0 ] |[引用频次：7 ] |[阅读次数：0 ] - 付应霄;顾建红;王世涛;王怡;赵鸿雁;刘伟;仝锡帅;刘宗平;
采集ICR小鼠骨髓单核细胞在体外培养过程中加入25.0μg/L M-CSF+50.0μg/L RANKL诱导形成破骨细胞,同时选择RAW264.7细胞培养过程中添加100.0μg/L RANKL诱导分化为破骨细胞。通过检测抗酒石酸碱性磷酸酶(Tartrate resistant acid phosphatase,TRAP)染色阳性数及骨吸收陷窝,比较小鼠骨髓单核细胞和RAW264.7细胞株诱导形成的破骨细胞活性。结果显示,小鼠骨髓诱导的细胞TRAP阳性数显著低于RAW264.7细胞株(P<0.05),而小鼠骨髓诱导的破骨细胞所形成骨吸收陷窝的面积显著大于RAW264.7细胞株(P<0.05)。结果表明,2种方法均可诱导形成具有典型特征的破骨细胞,骨髓单核细胞诱导形成的破骨细胞活性更强,但破骨细胞的数量和纯度明显低于RAW264.7细胞株。
2013年01期 v.33;No.193 94-97+101页 [查看摘要][在线阅读][下载 1105K] [下载次数：412 ] |[网刊下载次数：0 ] |[引用频次：9 ] |[阅读次数：0 ] - 任艳红;赵福利;李婧;马迎彪;李宁;
采用自由饮水的方式于母鼠孕哺期染毒,染毒剂量为0.3、1.0、3.0g/L,每组10只。用石墨炉原子吸收光谱仪测定仔鼠出生后第21天时血液和海马组织中铅含量。用RT-PCR方法测定21d不同剂量组仔鼠海马组织中钙结合蛋白-2(Calsyntenin-2)mRNA的表达、结果显示,各剂量染铅组血液、海马组织中铅含量与对照组相比,明显升高(P<0.05)。Y型迷宫试验结果显示,低、中、高剂量铅暴露组21d的仔鼠,获取记忆的能力(T1)、保持记忆的能力(T2)和记忆保持率(T3)均低于同期对照组仔鼠,差异均有统计学意义(P<0.05)。与对照组相比,中、高剂量铅暴露组海马组织中Calsyntenin-2mRNA的表达明显低于对照组(P<0.05),但是低剂量组与对照组相比,差异无统计学意义(P>0.05)。结果表明,孕哺期母体铅暴露使铅在仔鼠体内蓄积,引起仔鼠学习记忆功能损害;铅的神经毒性可能与下调海马组织中Calsyntenin-2mRNA的表达、影响突触的信息传递有关。
2013年01期 v.33;No.193 98-101页 [查看摘要][在线阅读][下载 706K] [下载次数：127 ] |[网刊下载次数：0 ] |[引用频次：5 ] |[阅读次数：0 ] - 袁燕;江辰阳;孙娅;徐卉;刘学忠;顾建红;卞建春;刘宗平;
为研究镉对胎鼠大脑皮质神经细胞凋亡与一氧化氮合酶基因mRNA转录的影响,用不同浓度醋酸镉(0、5、10、20μmol/L)染毒胎鼠大脑皮质神经细胞12h,流式细胞术检测细胞凋亡率,荧光显微镜观察镉对神经细胞凋亡的形态学影响,实时荧光定量PCR检测神经型一氧化氮合酶(nNOS)、诱导型一氧化氮合酶(iNOS)mRNA的转录水平。结果显示,与对照组相比,各染毒组细胞凋亡率呈现升高趋势;染镉组细胞核皱缩,染色质致密浓染,甚至核碎裂;5、10μmol/L组nNOS mRNA转录水平显著升高(P<0.05或P<0.01),20μmol/L组nNOS转录水平降低至对照组水平;20μmol/L组iNOS mRNA转录水平极显著升高(P<0.01)。结果表明,镉可诱导大脑皮质神经细胞凋亡,并可调节nNOS和iNOS mRNA的转录。
2013年01期 v.33;No.193 102-106页 [查看摘要][在线阅读][下载 913K] [下载次数：195 ] |[网刊下载次数：0 ] |[引用频次：9 ] |[阅读次数：0 ]
- 宋岩岩;赵宝玉;路浩;庞龙;温伟利;王文龙;王姗姗;
将64只雌性SD大鼠随机分为对照组和试验Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ组,每组16只。试验Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ组分别饲喂含甘肃棘豆干草粉15%(含苦马豆素0.03‰)、30%(含苦马豆素0.06‰)、45%(含苦马豆素0.09‰)的全价饲料,对照组饲喂全价饲料。试验期间,每天观察受试大鼠的临床表现,每周测定体质量1次。在攻毒5、9、13、17周后采血,运用全自动血液细胞分析仪测定各组大鼠血液WBC、LYM、MO、NE、RBC、HGB、HCT、MCV、RDW、PLT及MPV的变化。结果显示,与对照组相比,试验组WBC、MO、NE、RDW、MPV升高,LYM、RBC、HGB、HCT降低,MCV先降低后升高,PLT先升高后降低,部分组间差异显著或极显著(P<0.05或P<0.01)。结果表明,长期低剂量摄食苦马豆素可诱发SD大鼠贫血,但可提高机体免疫力和骨髓造血能力。
2013年01期 v.33;No.193 107-112+118页 [查看摘要][在线阅读][下载 858K] [下载次数：173 ] |[网刊下载次数：0 ] |[引用频次：9 ] |[阅读次数：0 ] - 袁苏娅;姬丽娜;王勇胜;曾晓萍;卿素珠;张涌;
在对1例死亡的转基因克隆牛进行病理解剖观察基础上,采用组织学常规石蜡切片-HE染色技术研究克隆牛心脏、肝脏、肺脏和肾脏的组织形态及变化。结果显示,克隆牛体格及脏器体积均偏大。心脏、肝脏出现代偿性增生和淤血,肺脏呈现典型的肺不张和严重局灶性肺气肿。组织学观察显示,心肌纤维拉长变细、横纹不清晰,部分核着色深,出现轻度颗粒变性;肝细胞有明显的脂肪变性、颗粒变性和缺血性病变。肺间质增宽、多个肺泡壁破裂融合,肺间质和肺泡壁毛细血管扩张充血;肾间质毛细血管淤血,近曲小管上皮细胞颗粒变性严重,上皮细胞发生肿胀、部分脱落至管腔。综合病理形态学观察结果显示,该例克隆牛为典型的生后肺不张导致的肺气肿继发其他脏器增生淤血,最后呼吸衰竭而死亡。
2013年01期 v.33;No.193 113-118页 [查看摘要][在线阅读][下载 2055K] [下载次数：125 ] |[网刊下载次数：0 ] |[引用频次：5 ] |[阅读次数：0 ] - 梁燕;梁宇翔;米勇;池建平;李英伦;
采用人工感染诱发鸡慢性呼吸道病建立病理模型,在对因治疗选择泰乐菌素的基础上,联合运用不同剂量的维生素A作为辅助治疗,以肺组织病理变化及肺组织中SP-A表达量为指标,探讨维生素A辅助治疗鸡试验性慢性呼吸道病的药理作用。结果显示,与健康对照组比较,模型组肺组织损伤程度明显加重;SP-A阳性细胞数量显著减少,阳性细胞平均灰密度值显著升高(P<0.05);药物治疗后,各治疗组肺组织损伤都有不同程度减轻,以维生素A中、高剂量组改善最为明显(P<0.01);各治疗组SP-A阳性细胞数量显著增加(P<0.01),阳性细胞平均灰密度值有不同程度降低,以维生素A低、中剂量组降低最为明显(P<0.01)。结果表明,维生素A可以通过保护肺组织上皮细胞的结构和功能、促进肺组织SP-A合成与分泌、加速肺受损组织修复,对慢性呼吸道病起到良好的辅助治疗效果,并以剂量为1 200IU/kg饲料效果最佳。
2013年01期 v.33;No.193 119-124页 [查看摘要][在线阅读][下载 1463K] [下载次数：162 ] |[网刊下载次数：0 ] |[引用频次：3 ] |[阅读次数：0 ] - 任晓镤;陈伟;张利莉;
采用微量板半定量法研究新疆南疆地区特色中草药甘草及醉马草水煎液对表皮葡萄球菌的生长及其生物膜形成的影响。结果显示,较高浓度(15%及以上)的甘草水煎液能够通过抑制菌株的生长来影响表皮葡萄球菌生物膜的形成;而低浓度(7.5%)的醉马草水煎液在不影响菌株生长的情况下对表皮葡萄球菌生物膜的形成有抑制作用。
2013年01期 v.33;No.193 125-128+149页 [查看摘要][在线阅读][下载 1043K] [下载次数：262 ] |[网刊下载次数：0 ] |[引用频次：16 ] |[阅读次数：0 ] - 孙源荣;王德云;范云鹏;郭利伟;胡元亮;温海;陈杨;
为了观察中药佐剂对犬疫苗的免疫增强作用,选取45日龄仔犬24头随机分为6组,均用英特威二联苗首免,首免后第14、28天再分别用英特威四联苗、辉瑞四联苗二免、三免,1头份/头,在每次免疫的同时,4个中药佐剂组分别肌肉注射高浓度方Ⅰ和方Ⅱ、低浓度的方Ⅰ和方Ⅱ,1mL/头,佐剂对照组口服左旋咪唑片(2.5mg/kg),无佐剂对照组不给药。分别于免疫前(0d)及首次免疫后第7、14、21、28、35、42天前肢静脉采血,分离血清,检测犬瘟热、犬细小病毒病和犬传染性肝炎抗体及IL-2、IFN-γ、IL-4和IL-10含量的变化。结果显示,2个中药佐剂对3种抗体效价及4种细胞因子的含量均有不同程度的提高,并存在一定的量效关系,综合评价以方Ⅰ高剂量的效果最好。
2013年01期 v.33;No.193 129-132页 [查看摘要][在线阅读][下载 724K] [下载次数：317 ] |[网刊下载次数：0 ] |[引用频次：1 ] |[阅读次数：0 ]
- 徐琪;张扬;李秀;赵荣雪;段修军;孙国波;董飚;陈国宏;
对金定鸭、樱桃谷鸭、苏牧麻鸭和番鸭的失水率(X1)、剪切力(X2)、pH值(X3)、肉色(X4)、粗脂肪((X5)、多不饱和脂肪酸(PUFA,X6)、必需脂肪酸/(EFA,X7)、肌原纤维直径(X8)等8个肉质指标进行了测定,运用主成分分析对肉品质指标进行分析,并建立了主成分综合评价模型(Y=-0.301zx1+0.367zx2-0.033zx3-0.223zx4-0.342zx5+0.250zx6+0.249zx7+0.267zx8)。结果表明,选取前2个特征值作为2个主成分(累计贡献率达到85.15%),基本上反映了原所有肉质指标包含的全部信息;番鸭主成分综合得分最高,其次分别为金定鸭、苏牧麻鸭,樱桃谷鸭表现较低,结果与预期完全吻合。
2013年01期 v.33;No.193 133-136页 [查看摘要][在线阅读][下载 716K] [下载次数：403 ] |[网刊下载次数：0 ] |[引用频次：28 ] |[阅读次数：0 ] - 衣帅;谢姗珊;刘继峰;杜小燕;齐飞虎;李益琛;任文陟;刘殿峰;陈振文;
用筛选优化出的24个具有丰富多态性的微卫星位点对华北制药厂的34只虎皮猫基因组DNA进行PCR扩增,对扩增产物进行琼脂糖凝胶电泳和STR扫描,运用popgene3.2软件对试验用虎皮猫群体进行群体遗传结构分析。结果显示,虎皮猫群体平均观测等位基因数为4.083 3,平均有效等位基因数为2.632 3,平均有效杂合度为0.610 8,平均香隆指数为1.078 6。结果表明,微卫星DNA标记技术适于猫群体遗传结构分析;该试验用虎皮猫群体符合封闭群的遗传特性。
2013年01期 v.33;No.193 137-141页 [查看摘要][在线阅读][下载 853K] [下载次数：192 ] |[网刊下载次数：0 ] |[引用频次：8 ] |[阅读次数：0 ] - 高飞;唐成程;全龙泉;戴祯;苏佰通;赖良学;逄大欣;欧阳红生;
构建猪肌肉生长抑制素(Myostatin,MSTN)基因的打靶载体并获得敲除MSTN基因的猪胎儿成纤维细胞。以Puro为正筛选基因,白喉毒素-A(DT-A)为负筛选基因。将同源长臂和同源短臂分别插入Puro基因的两侧。同源长短臂分别为4 294bp和1 015bp,定点敲除MSTN基因的部分内含子2和部分外显子3。采用FugeneHD转染法将打靶载体转入37d的猪胎儿成纤维细胞中,转染后的细胞采用嘌呤霉素筛选。结果显示,成功构建了对猪MSTN基因部分区域进行敲除的打靶载体,共得到48个具有药物抗性的细胞克隆,经PCR检测,获得2个正确同源重组的细胞克隆。
2013年01期 v.33;No.193 142-145+160页 [查看摘要][在线阅读][下载 1115K] [下载次数：611 ] |[网刊下载次数：0 ] |[引用频次：4 ] |[阅读次数：0 ]