预防兽医学

  • 2株猪繁殖与呼吸综合征病毒欧洲型分离株ORF4~7基因的克隆与序列分析

    黄梅清;车勇良;陈少莺;江斌;王隆柏;陈仕龙;

    欧洲型猪繁殖与呼吸综合征病毒(Porcine reproductive and respiratory syndrome virus,PRRSV)FJ0602和FJ0603株的ORF4~7基因进行了分段克隆、序列测定及同源性比较。结果显示,FJ0602和FJ0603株与LV核苷酸同源性为95.2%和95.3%,与VR2332核苷酸同源性为67.1%和66.9%,证实FJ0602和FJ0603株均为欧洲型PRRSV;与欧洲型弱毒疫苗株Amervac PRRSV有高度同源性,达到98.6%以上,提示分离毒PRRSV FJ0602和FJ0603株可能由疫苗株演化而来。FJ0602和FJ0603之间的核苷酸同源性为99.6%,表明这2毒株亲缘关系很近,很可能来源于同一毒株。

    2013年11期 v.33;No.203 1623-1626页 [查看摘要][在线阅读][下载 189K]
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  • 猪流行性腹泻病毒COE核酸疫苗的构建及免疫原性

    向敏;张洁;高其双;卢顺;陈志华;黄海军;陶弼菲;彭霞;占才耀;夏瑜;童伟文;华娟;王连芳;

    用疑似患猪流行性腹泻病猪肠病料,扩增部分保护性抗原基因(COE基因),通过T4连接酶将COE基因与真核表达载体pIRES2-EGFP进行连接,提取纯化重组质粒。通过脂质体转染vero细胞,用SDS-PAGE和Western blot鉴定COE蛋白的表达。用重组质粒对BALB/c小鼠进行免疫,观察免疫效果。结果显示成功构建了pIRES2-EGFP-COE真核表达载体;目的蛋白在vero细胞中得到表达;重组质粒免疫小鼠能够产生相应抗体。结果表明,COE核酸疫苗可在小鼠体内诱导相应的抗体产生,这为进一步研究猪腹泻病毒的核酸疫苗奠定了基础。

    2013年11期 v.33;No.203 1627-1630页 [查看摘要][在线阅读][下载 313K]
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  • PRRSV Nsp9蛋白基因的RT-LAMP检测方法的建立

    王腾;李巍;张秀媛;朱玉婵;孙继国;

    根据GenBank中登录的PRRSV Nsp9基因序列,应用Primer Explorer V4软件,在该基因序列中选取保守区设计了4条RT-LAMP引物,旨在建立1种针对Nsp9蛋白基因的逆转录环介导等温扩增(RT-LAMP)的快速检测方法。采用引物分组扩增的方法对引物进行了检测,以确保引物的可靠性。对反应体系、温度以及时间进行了优化,检测了该方法的特异性和灵敏度。结果表明,该方法在等温条件下只需50min就能检测出结果。与RT-PCR方法相比,在判定检测结果时不需要借助昂贵仪器设备,具有高特异性、高灵敏度、操作简便快速等特点,适合于临床检测的应用。

    2013年11期 v.33;No.203 1631-1635页 [查看摘要][在线阅读][下载 386K]
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  • B亚型禽偏肺病毒对SPF鸡的致病性

    孙晓艳;刁有祥;裴苹苹;王蛟;刘鑫;

    利用分离的1株B亚型禽偏肺病毒,采用静脉注射和点眼滴鼻两种途径接种SPF鸡,并在接种同时免疫新城疫弱毒疫苗。在攻毒后3、6、9、12、15d,每组随机抽取3只翅下采血,检测血液生化指标,利用血凝和血凝抑制试验检测新城疫HI抗体效价;利用流式细胞术分析外周血CD4+/CD8+比值,ELISA试剂盒测定血清中IL-2、IFN-γ的含量;同时观察静脉注射组和点眼滴鼻组鸡的临床症状、剖检病变和病理组织学变化。结果表明,攻毒后9~15d,静脉注射组和点眼滴鼻组外周血CD4+/CD8+比值和血清IL-2、IFN-γ的含量均显著低于对照组(P<0.05),而静脉注射组与点眼滴鼻组间无显著差异(P>0.05);静脉注射组和点眼滴鼻组的免疫器官指数低于对照组,但各组间差异不显著(P>0.05);各组间新城疫HI抗体水平无显著差异(P>0.05);血液生化指标仅谷丙转氨酶(ALT)和谷草转氨酶(AST)在攻毒后显著升高(P<0.05),其他指标在各组间无显著差异(P>0.05);静脉注射组和点眼滴鼻组在感染后3~10d出现轻微临床症状;病理组织学检测结果显示,静脉注射组和点眼滴鼻组的呼吸道和肝脏病变最明显。综上所述,B亚型禽偏肺病毒感染SPF鸡后,在一段时间内抑制机体细胞免疫,导致免疫机能下降,并引起轻微的组织病变;B亚型禽偏肺病毒通过两种不同的攻毒途径对SPF鸡的致病性无显著差异。

    2013年11期 v.33;No.203 1636-1641+1646页 [查看摘要][在线阅读][下载 592K]
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  • 犬细小病毒结构蛋白VP2基因的克隆和在毕赤酵母中表达

    贺英;史秋梅;潘素敏;张艳英;邵欣华;

    表达犬细小病毒VP2蛋白(CPV-VP2),用于重组蛋白免疫小鼠制备单克隆抗体,并为犬细小病毒病的诊断奠定基础。采用PCR方法对CPV-VP2基因进行扩增,将CPV-VP2基因克隆到毕赤酵母分泌表达载体pPICZAA中,构建真核重组表达载体pPICZAA-VP2,将该重组质粒线性化后,转化巴斯德毕赤酵母(Pichia pastoris)X-33中,甲醇诱导表达CPV-VP2,SDS-PAGE和Western-blotting鉴定表达蛋白。结果,成功扩增了CPV-VP2基因,构建了真核重组表达载体pPICZAA-VP2,在毕赤酵母菌中表达出约68 000蛋白。Western-blotting鉴定表明,表达蛋白为目的蛋白VP2。表达菌株扩大表达体系于培养基中培养,上清液用70%过硫酸铵4℃沉淀浓缩,采用His选择镍-亲和层析柱分离纯化获得重组的酵母表达的带组氨酸标签的VP2蛋白,表达量约3mg/L。结果表明,在毕赤酵母中成功地表达了CPV-VP2蛋白,且能被犬细小病毒VP2单克隆抗体特异识别。

    2013年11期 v.33;No.203 1642-1646页 [查看摘要][在线阅读][下载 288K]
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  • 鉴别犬瘟热病毒疫苗株和野毒株RT-PCR-RFLP方法的建立及应用

    张洪亮;张传美;王聪;黄娟;任颖超;单虎;

    根据Onderstepoort株H基因序列,设计1对引物建立RT-PCR-RFLP检测方法,对不同宿主来源的疑似犬瘟热临床样品进行检测,并对检出的犬瘟热病毒野毒山东株PCR产物进行克隆和序列分析,验证RT-PCR-RFLP检测方法。结果RT-PCR扩增片段为1 921bp,产物经RFLP分析,野毒株的PCR产物能被NdeⅠ酶切为1 282、345和294bp 3个片段,弱毒疫苗株则不能被切开;病毒RNA的最小检出量为2.15ng。临床检测共检出19份样品为犬瘟热阳性,其中15份为野毒株感染,其H基因编码区全长为1 824bp,均在1 279和1 543处有NdeⅠ酶切位点,推导氨基酸与野毒株的同源性在92.9%~96.9%,与疫苗株的同源性在89.0%~90.8%,进化树分析显示这些毒株在基因型上属于Asia-1型,为野毒株谱系。该方法的建立为临床上犬瘟热病毒的鉴别检测和诊断提供了依据。

    2013年11期 v.33;No.203 1647-1656页 [查看摘要][在线阅读][下载 1426K]
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  • 绵羊肺腺瘤病毒SYBR GreenⅠ实时荧光定量PCR检测方法的建立及应用

    王金良;于新友;沈志强;孙翠平;唐娜;

    根据GenBank登录的绵羊肺腺瘤病毒gag基因序列设计1对特异性引物,经RT-PCR扩增出了276bp的片段。产物经回收与pMD18-T Vector连接后转化到基因工程菌DH5a中,提取重组质粒,经PCR及测序鉴定后,作为阳性模板建立SYBR GreenⅠ荧光定量PCR标准曲线,并做敏感性试验、特异性试验、重复性试验和临床检测应用。结果表明,标准曲线循环阈值与模板浓度呈良好的线性关系,产物Tm在82~82.5℃之间,灵敏度为2.22个拷贝/μL,特异性和重复性较好,较常规RT-PCR方法提前1h出检测结果。本试验建立了检测JSRV的SYBRGreenⅠ荧光定量PCR方法,为该病的早期快速诊断,并定量分析JSRV感染程度奠定了基础。

    2013年11期 v.33;No.203 1657-1661+1678页 [查看摘要][在线阅读][下载 399K]
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  • 泰山松花粉多糖和乳酸杆菌对禽波氏杆菌OMP亚单位疫苗免疫增强的协同作用

    左雪梅;崔国林;杨世发;梁漫飞;钟世勋;朱瑞良;

    采用改进的水提醇沉法提取泰山松花粉粗多糖,并制备禽波氏杆菌OMP亚单位疫苗。取1日龄SPF雏鸡300只,随机分为6组,Ⅰ~Ⅴ组分别免疫含有松花粉多糖100g/L的禽波氏杆菌OMP亚单位疫苗,Ⅵ组只免疫禽波氏杆菌OMP亚单位疫苗,Ⅰ、Ⅱ组在前2周分别口服高、低剂量的乳酸杆菌活菌菌液1mL,Ⅲ、Ⅳ分别口服高、低剂量的乳酸杆菌热灭活菌菌液1mL。在首免后,每周采取血液和小肠,用间接ELISA法检测血清抗体水平、MTT法检测外周血淋巴细胞转化率﹑全自动血细胞分析仪测定外周血淋巴细胞比率、ELISA法检测小肠sIgA含量和IL-2水平。结果表明,Ⅰ~Ⅳ组抗体水平、IL-2含量、淋巴细胞比率、淋巴细胞转化率、sIgA含量显著高于V组、Ⅵ组(P<0.05);V组各检测指标显著高于Ⅵ组(P<0.05);乳酸杆菌活菌组各检测指标比灭活菌组略高,高剂量组略高于低剂量组。因此,泰山松花粉多糖作为免疫佐剂能显著提高疫苗的免疫效果,同时口服乳酸杆菌能进一步增强动物对疫苗的免疫应答能力,口服乳酸杆菌活菌与口服热灭活菌效果差异不显著,泰山松花粉多糖和乳酸杆菌对增强禽波氏杆菌OMP疫苗的免疫力有协同作用。

    2013年11期 v.33;No.203 1662-1667页 [查看摘要][在线阅读][下载 248K]
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  • 由禽波氏杆菌和奇异变形杆菌共感染为主所致鸡胚发病死亡的生物学鉴定

    郭繁霞;朱瑞良;刘冠华;崔国林;

    2010年,辽宁铁岭某种鸡孵化场出现孵化率低、死淘率高的现象。通过对送检病死鸡胚进行病原检测,最终检测出5株革兰阴性杆菌和3种病毒,其中禽波氏杆菌和奇异变形杆菌的检出率分别为76.44%、61.36%,两者混合感染率达51.83%,而其他病原菌(大肠杆菌、沙门菌、绿脓杆菌)和病毒(ALV、REV、CIAV)的检出率均较低。采用1对根据病原菌23SrRNA基因的共同保守序列设计的引物,以及根据临床常见致病菌16S~23SrRNA基因间隔序列(ISR)两端的16S及23SrRNA保守序列而设计的通用引物分别对分离菌进行PCR扩增。并分别测定所得片段的DNA序列。结果显示,所得DNA片段分别与GenBank中收录的登录号为HM545299的禽波氏杆菌和登录号为AY993943的奇异变形杆菌的相应核苷酸序列同源性达99.5%和98.7%。本研究最终确定禽波氏杆菌和奇异变形杆菌的混合感染是引起该场疫情发生的主要原因。

    2013年11期 v.33;No.203 1668-1673页 [查看摘要][在线阅读][下载 218K]
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  • 牛乳源性金黄色葡萄球菌nEBPS蛋白表达鉴定及多克隆抗体制备

    布日额;任晓峰;吴金花;王学理;刘燕;锡林高娃;孙立杰;刘洋;

    利用PCR方法扩增乳源致病性金黄色葡萄球菌nEBPS全基因,将其定向克隆至原核表达载体pET30a(+)中,鉴定正确后,转化BL21表达菌,经IPTG诱导获得了以可溶性表达的重组蛋白。通过Ni NTA Purification System纯化重组蛋白,纯化蛋白质量浓度为2.16g/L。纯化蛋白经免疫印迹检测显示重组蛋白能够被牛源金黄色葡萄球菌阳性血清识别,具有良好的反应性。将纯化的重组蛋白免疫新西兰白兔制备多克隆抗体,间接ELISA测定抗体效价为1∶25 600,凝集试验测定抗体效价为1∶128。

    2013年11期 v.33;No.203 1674-1678页 [查看摘要][在线阅读][下载 342K]
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  • 奥氏奥斯特他线虫巨噬细胞转移抑制因子克隆表达与酶功能鉴定

    曲光刚;沈志强;王文秀;王金良;唐娜;付石军;唐世云;韩文瑜;

    通过原核表达系统表达奥氏奥斯特他线虫(Ostertagia ostertagi)巨噬细胞转移抑制因子(OoMIF),并对该蛋白的酶功能进行鉴定。通过GenBank和Nematode V 3.0数据库发表的序列,利用分子生物学软件设计了1对特异的引物,通过RT-PCR扩增OoMIF全基因,经测序分析后,将OoMIF亚克隆到pET28a(+),然后将鉴定为阳性的重组质粒转化到BL21中用IPTG进行诱导表达。利用HPLC对可溶性表达的重组OoMIF蛋白进行纯化,同时通过免疫印迹对线虫自身的MIF及纯化后的OoMIF进行鉴定,最后对OoMIF的互变异构酶和氧化还原酶活性进行鉴定。结果表明OoMIF具有互变异构酶活性,但没有氧化还原酶活性。为进一步探究OoMIF生物学功能及其MIF在宿主免疫调节中的作用提供依据。

    2013年11期 v.33;No.203 1679-1684页 [查看摘要][在线阅读][下载 694K]
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人兽共患病

  • Cox.A16型手足口病乳鼠动物模型的建立及免疫、病理特征

    任庆杰;李敏;杨晓岚;管晨;张广州;王希良;王玉光;赵忠鹏;

    为建立Cox.A16型手足口病乳鼠动物模型并进行免疫、致病特性研究。将临床分离的Cox.A16病毒株经蚀斑纯化,乳鼠驯化,最终获得1株能致死11日龄乳鼠的Cox.A16毒株,命名为TS10/08(GenBank Accession NO.JX068829,Cox.A16-TS)。Cox.A16-TS感染11日龄C57BL/6J乳鼠后,观测临床疾病得分、体质量变化、死亡率并测定病毒载量、免疫分子、组织病理损伤等病毒、免疫、病理指标。结果表明,Cox.A16-TS毒株感染11日龄C57BL/6J乳鼠,其病毒毒力为50LD50/mL,感染后不同时期肌肉病毒载量均高于其他组织中,至4d达到高峰,后不断下降。至感染后6d发病达高峰时做病理检测,相对于脑组织,肌肉中有更严重的淋巴细胞浸润,引起更严重的炎性分子升高。血清中MCP-1,MIP-1alpha,MIP-1beta和CSF3动态变化,并在不同时间形成峰值。本试验初步建立了Cox.A16型手足口病乳鼠动物模型,为药物筛选、疫苗研发和免疫机理研究奠定了基础。

    2013年11期 v.33;No.203 1685-1690页 [查看摘要][在线阅读][下载 661K]
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  • 同时检测禽流感和新城疫病毒的一步法荧光定量RT-PCR方法的建立

    姜翠翠;王泽;丁壮;

    分别根据新城疫病毒与禽流感病毒的M基因、禽流感病毒HA基因上的保守序列,设计了通用型禽流感病毒、H5\H7\H9亚型及通用型新城疫病毒5对特异性引物和5条Taqman荧光标记核酸探针。以阳性重组质粒进行体外转录后的RNA为标准品绘制标准曲线,建立了一步实时荧光RT-PCR方法。结果表明,本试验建立的标准曲线Ct值与模板浓度具有良好的线性关系,相关系数大于0.99。通过利用所建立的方法与鸡胚分离法同时对新鲜采集的临床样品进行检测,2种方法的检测结果符合率为100%,说明在临床样品检测、流行病学监测方面具有良好的应用前景。

    2013年11期 v.33;No.203 1691-1695+1706页 [查看摘要][在线阅读][下载 602K]
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  • 吉林省梅花鹿副结核病、结核病及布鲁菌病血清流行病学调查

    付志金;宋战昀;冯新;王振国;侯红燕;王春雨;王全凯;李敏思;

    采集吉林省具有代表性的4个地区的8个梅花鹿场(四平2个梅花鹿场、通化2个梅花鹿场、长春市2个梅花鹿场、辽源2个梅花鹿场)中630份血清样本作为研究对象,进行血清学(ELISA方法)检测,了解吉林省梅花鹿副结核病、结核病及布鲁菌病感染现状。。上述4个地区均存在梅花鹿副结核病,结核病及布鲁菌病发生和流行,其中副结核病的整体阳性率为18.73%、结核病的整体阳性率为19.21%、布鲁病的整体阳性率为28.42%。吉林省梅花鹿副结核病、结核病及布鲁菌病流行不容乐观,提示广大饲养者及相关部门应该高度重视梅花鹿副结核病的防治工作。

    2013年11期 v.33;No.203 1696-1699页 [查看摘要][在线阅读][下载 117K]
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  • 鼠伤寒沙门菌SL1344株ΔcrpΔasd缺失株的构建及生物学特性初步研究

    田芳华;程相朝;张春杰;李银聚;李静;张明亮;李小康;李正;赵战勤;

    构建鼠伤寒沙门菌SL1344ΔcrpΔasd双基因缺失突变株,并对其生物学特性进行初步研究。首先以χ7213(pREΔasd)为供体菌,SL1344Δcrp为受体菌进行结合转移,通过自杀性质粒介导的等位交换技术两步法筛选SL1344的ΔcrpΔasd双缺失株。该缺失株在有外源DAP的存在下能够正常生长,且能稳定遗传缺失的asd基因;其血清型与亲本株SL1344Δcrp及强毒株SL1344保持一致;其生化特性与亲本株基本相同,但与强毒株相比变化较明显,且生长速度明显减慢;雏鸡毒力试验结果表明其毒力较SL1344降低约105倍。鼠伤寒沙门菌SL1344ΔcrpΔasd缺失株构建成功,为进一步开发以鼠伤寒沙门菌为载体的口服疫苗奠定了基础。

    2013年11期 v.33;No.203 1700-1706页 [查看摘要][在线阅读][下载 540K]
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基础兽医学

  • SSCP检测内毒素致mtDNA基因突变及阳离子A的保护作用

    刘倩;周铭涛;高洪;高利波;赵汝;

    将60只健康试验大鼠随机分为3组:正常对照组(A组)、ET处理组(B组)、CA+ET处理组(C组),运用PCR-SSCP技术对肝脏mtDNA tRNACys-Tyr、COI基因片段一等基因进行了分析,同时运用分光光度计法对血清丙二醛的含量进行测定,观察ET致mtDNA的突变效应以及CA对该效应的保护作用。,结果发现,B组mtDNA tRNACys-Tyr基因片段在第5238与5242碱基处发生了插入1个碱基T的插入突变,COI一基因片段发生T5322G和T5331G处置换点突变,其他各组无基因突变发生。B组血清MDA含量均明显高于其他二组(P<0.05)、C组明显低于B组但高于A组(P<0.05)。结果表明,ET可导致mtDNA基因发生突变,而CA对ET致基因突变具有保护效应。

    2013年11期 v.33;No.203 1707-1711页 [查看摘要][在线阅读][下载 423K]
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  • 镉致体外培养鸡脾淋巴细胞膜蛋白损伤

    肖银霞;费东亮;徐世文;

    为了探讨镉对体外培养鸡脾淋巴细胞膜蛋白损伤的影响。通过对体外培养的鸡脾淋巴细胞以终浓度为10μmol/L CdCl2进行染毒,培养12、24、36、48、72h后,收集细胞并提取细胞膜,聚丙烯酰胺梯度电泳分析膜蛋白组分。结果显示,试验组膜蛋白Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ、Ⅳ、Ⅸ的含量有升高趋势,蛋白区带Ⅴ、Ⅵ、Ⅶ的百分含量有降低趋势,蛋白区带Ⅴ、Ⅷ的含量变化不明显。说明镉能对鸡脾淋巴细胞膜蛋白造成损伤,使其膜蛋白组分含量改变,膜蛋白功能受抑制。

    2013年11期 v.33;No.203 1712-1714+1719页 [查看摘要][在线阅读][下载 147K]
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  • 氟喹诺酮类药物多组分残留检测抗体的筛选

    魏东;张乃生;

    通过N-羟基琥珀酰亚胺活性酯法将诺氟沙星、环丙沙星、达氟沙星和沙拉沙星分别与牛血清白蛋白偶联制备免疫抗原,与卵清白蛋白偶联制备检测抗原,筛选一种可用于多种氟喹诺酮残留的检测抗体。将免疫抗原分别免疫獭兔制备多克隆抗体,采用间接竞争ELISA法测定抗体特异性。诺氟沙星抗体特异性较强,与同类药物的交叉反应较少,沙拉沙星抗体与同类药物发生交叉反应最多,且与诺氟沙星、环丙沙星和恩诺沙星的交叉反应率较高。结果表明,确定沙拉沙星抗体作为进一步研究的抗体。

    2013年11期 v.33;No.203 1715-1719页 [查看摘要][在线阅读][下载 265K]
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  • 氟苯尼考联合多西环素缩小猪源大肠杆菌耐药突变选择窗

    陈阳阳;薛慧亮;马红霞;王大成;李志萍;苏红艳;

    为使临床合理使用抗菌药物,防止细菌耐药性的产生提供理论依据。本研究探讨在体外初步联合氟苯尼考和多西环素缩小猪源大肠杆菌耐药突变选择窗(MSW)。应用琼脂二倍稀释法,肉汤法富集1011 CFU/mL细菌分别测定了氟苯尼考、多西环素对15株猪源大肠杆菌临床分离株的最小抑菌浓度(MIC)、防耐药突变浓度(MPC),并计算出它们各自的MSW,对于2种药物MSW均比较大的菌株S8、S11、S12进行氟苯尼考联合多西环素用药,测定其MPC和MSW。结果显示,从吉林省分离的15株猪源大肠杆菌对氟苯尼考、多西环素耐药率分别为33.3%和46.7%;MPC大于100mg/L的分别占到40%和13.3%;MSW大于50的分别占40%和0.067%。对于S8、S11、S12氟苯尼考联合多西环素用药,联合指数分别为0.75、0.09、0.438,均呈现相加或协同作用。联合用药可使氟本尼考对S8、S11、S12菌株的MPC分别由原来的256.0、128.0、460.8mg/L,变为8.0、8.0、16.0mg/L,均关闭了MSW。结果表明,氟苯尼考联合多西环素可以缩小或关闭猪源大肠杆菌耐药选择突变窗。

    2013年11期 v.33;No.203 1720-1723+1729页 [查看摘要][在线阅读][下载 146K]
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  • 铅镉联合急性中毒对大鼠脏器病理组织学和超微结构的影响

    戴书俊;卢洪可;殷中琼;袁桂萍;王川;

    按照等毒性配比法混合硝酸铅与氯化镉溶液进行急性毒性试验,采用Bliss法和Keplinger标准进行毒性评价,并应用光镜和电镜观察大鼠染毒后各脏器的显微与超微结构变化。探讨硝酸铅(Pb(NO3)2)与氯化镉(CdCl2·2.5H2O)溶液联合经口灌胃对SD大鼠的急性毒性效应。结果显示,铅镉联合作用下大鼠的绝对致死量(LD100)为5 062.00mg/kg,最大耐受浓度(MTD)为1 436.00mg/kg,半数致死量(LD50)为2 696.54mg/kg,95%可信区间是2 162.00~3 362.89mg/kg。铅镉联合急性中毒的靶器官为肝脏、肾脏和脾脏,光镜下,主要表现为血管发生不同程度的充血和溶血、实质细胞发生不同程度的变性(水泡变性和颗粒变性)和坏死。电镜下,主要表现为细胞器结构破坏。结果表明,硝酸铅和氯化镉联合急性毒性为相加作用,对大鼠肝脏、肾脏和脾脏均有不同程度的急性毒性损伤。

    2013年11期 v.33;No.203 1724-1729页 [查看摘要][在线阅读][下载 1065K]
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  • 常山提取物和常山乙素对小鼠脾淋巴细胞增殖的影响

    郭志廷;韦旭斌;梁剑平;王学红;尚若锋;郭文柱;郝宝成;张永红;

    为了明确常山提取物和常山乙素的免疫学活性,应用MTT法测定2种药物体外对小鼠脾T、B淋巴细胞增殖的影响。结果显示,常山碱提取物质量浓度达到200mg/L时显著抑制了小鼠脾淋巴细胞的增殖(P<0.05);质量浓度在10mg/L时对ConA诱导T淋巴细胞增殖有显著的促进作用(P<0.05);质量浓度在10~200mg/L对LPS诱导B淋巴细胞增殖有一定的促进作用(P>0.05)。常山乙素质量浓度达到0.1mg/L时显著抑制了小鼠脾淋巴细胞的增殖(P<0.05);质量浓度在0.001~0.01mg/L时对ConA诱导T淋巴细胞增殖有一定的促进作用(P>0.05),质量浓度在0.000 1mg/L时具有显著的促进作用(P<0.05);质量浓度在0.000 1~0.005mg/L对LPS诱导B淋巴细胞增殖有一定的促进作用(P>0.05)。结果表明,常山提取物和常山乙素具有良好的免疫增强活性,为今后相关研究提供了免疫学参考。

    2013年11期 v.33;No.203 1730-1732+1757页 [查看摘要][在线阅读][下载 126K]
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  • 鸡脂肪肝出血综合征发生过程中脂质代谢与血清甲状腺激素水平变化

    姜锦鹏;顾有方;吕锦芳;宁康健;应如海;韦冠东;李春震;

    探讨血清甲状腺激素水平与鸡脂肪肝出血综合征(FLHS)发生之间的关系。选用14日龄青脚麻鸡160只,按体质量随机分为对照组和FLHS组。对照组饲喂基础日粮,FLHS组饲喂高脂日粮(基础日粮+10%牛油)的同时肌肉注射苯甲酸雌二醇(剂量为2.4mg/kg,每周3次,共3周),试验期为28d。结果显示,试验期间,FLHS组鸡的体温明显降低;28和42日龄时,FLHS组鸡的平均体质量与平均采食量均显著高于对照组(P<0.05或P<0.01);皮下脂肪厚度、肌间脂肪宽度、肝指数、肝脂率、皮脂率、腹脂率升高;血清TG、TC和LDL-C浓度均显著高于对照组(P<0.05或P<0.01),而血清HDL-C浓度均显著低于对照组(P<0.01);血清T3、T4和FT3水平降低,特别在试验后期降低更明显,而血清FT4水平变化不显著;同时FLHS组血清TP、ALB和PA浓度均比对照组有所提高。结果提示,FLHS可引起血清甲状腺激素水平的下降,而甲状腺激素水平的下降进一步造成脂质代谢紊乱,参与了鸡FLHS的发生。

    2013年11期 v.33;No.203 1733-1737页 [查看摘要][在线阅读][下载 180K]
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  • 冷应激环境下补充V_C对雄性小鼠免疫器官和呼吸器官组织结构的影响

    顾有方;靳二辉;乔恩美;金光明;陈会良;李升和;

    选用清洁级雄性昆明小鼠30只,随机分均为冷应激组、冷应激+VC组和对照组,冷应激和冷应激+VC组每天在0℃下给2h的冷刺激,冷应激+VC组补充300μg/g的VC,试验期1周。结果,在冷应激环境中,小鼠早晚体质量均表现明显下降趋势,胸腺、脾脏和肺脏的重量均显著降低(P<0.05),器官指数有所下降,但差异不显著(P>0.05);胸腺小体数量增加,胸腺细胞数量明显减少,动脉周围淋巴鞘变薄,肺泡腔变大,肺泡壁变薄,肺泡间毛细血管减少。补充VC后,小鼠早晚体质量下降趋势减缓,肺脏重量和器官指数显著增加(P<0.05),胸腺和脾脏重量及器官指数也有所增加,但差异不显著(P>0.05)。胸腺小体体积减小,淋巴细胞数量有所增加,脾小结数量以及体积都有所增加,动脉周围淋巴鞘增厚,肺泡壁明显增厚,肺泡间结缔组织增加,毛细血管增多。结果表明补充VC可以改善冷应激对免疫器官和呼吸器官造成的不良影响。

    2013年11期 v.33;No.203 1738-1743页 [查看摘要][在线阅读][下载 716K]
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  • 泰和乌骨鸡胚后肝脏组织结构的发育性变化

    周作红;肖红;张家禾;彭沙沙;张晖;

    为在实际生产中配制适合泰和乌骨鸡胚后肝脏结构发育特点的饲粮提供形态学依据,本试验通过石蜡切片和HE染色的方法,研究泰和乌骨鸡胚后肝脏显微结构的发育性变化,结果表明,胚后1d的肝脏被膜极薄,肝细胞数量很少,双核细胞较多,肝小叶不明显,血窦清晰,肝细胞内、外含有大量的脂滴。胚后7d,肝被膜薄,被膜下肝细胞体积较大,内含较多脂滴,但靠近中央部的肝细胞内脂滴逐渐消失,血窦较清晰。胚后14d,肝脏被膜有所增厚,被膜下肝细胞内仍然含有较多脂滴,其他结构与7d类似。胚后21d,肝被膜相对较厚,结缔组织相对前期较发达,有少量被膜结缔组织深入实质内,肝血窦相对较少,其他结构与14d类似。第28天,肝细胞与早期比较,体积较小,无脂滴,胞质染色深。肝细胞排列呈肝细胞管作辐射状排列,且相互吻合。肝细胞管中央形成胆小管。窦周隙明显。肝细胞结构和排列方式符合典型的禽类特点。

    2013年11期 v.33;No.203 1744-1749页 [查看摘要][在线阅读][下载 809K]
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简讯

临床兽医学

  • 不同量舒泰复合针刺麻醉对犬应激激素——儿茶酚胺的调节作用

    左保杏子;王金花;林佳;危丽娟;杨雨辉;彭玉璐;周文霞;

    将25只犬随机均分为单纯舒泰麻醉组、1/3舒泰复合针刺麻醉组、1/2舒泰复合针刺麻醉组、2/3舒泰复合针刺麻醉组和空白组5组,再对前4组麻醉后行腹部切皮术,对试验过程中的7个时间点采血离心取血浆做免疫酶联吸附(ELISA)试验,以测定各时间点儿茶酚胺(CA)和阿片肽(OP)的含量,将针药复合组结果与单纯舒泰组及空白组做对照。结果显示,针药组中虽然复合的舒泰用量不同,但均能达到麻醉的效果,以复合1/3用量效果最佳,且在针刺过程中OP浓度显著高于未加针刺时的浓度,且CA浓度也随OP浓度的升高而降低或保持在较低水平;舒泰组在给予舒泰进入麻醉之后,CA浓度不再变化,而苏醒时,CA浓度显著升高,在整个过程中OP浓度并无明显变化;空白组的CA浓度先升高后降低,而OP浓度无明显变化。结果表明,针刺可以减少麻醉用药量,并能有效提高机体体内的OP水平,从而起到调节应激激素-CA的作用,且在针药复合麻醉组在术中术后,生理参数、动物情绪明显比单纯用药时稳定。

    2013年11期 v.33;No.203 1750-1753页 [查看摘要][在线阅读][下载 259K]
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  • COX-2抑制剂预处理对大鼠脑缺血再灌注损伤的保护作用

    程守全;徐爽;梁袁;苏亮;包雪鹦;金波;周慧鹏;范春潮;

    观察选择性环氧合酶-2(COX-2)抑制剂帕瑞昔布钠(parecoxib)预处理对大鼠局灶性脑缺血(focal cerebral ischemic,FCI)脑保护作用。参照线栓法制备大鼠局灶性大脑中动脉缺血(MCAO)模型,将60只大鼠随机分为假手术组(A组)、局灶性大脑中动脉缺血/再灌注模型组(B组)、帕瑞昔布钠小剂量组(C组)和帕瑞昔布钠大剂量组(D组),分别采用神经功能缺失评分、TTC染色法、免疫组化和原位杂交检测观察帕瑞昔布钠的脑保护作用,探讨帕瑞昔布钠在脑保护作用中的重要地位。结果,与模型组相比帕瑞昔布钠不同剂量治疗组神经功能缺失明显减轻(P<0.05),梗死体积明显缩小(P<0.05),凋亡细胞明显减少,帕瑞昔布钠1.6mg/kg及帕瑞昔布钠3.2mg/kg组COX-2mRNA阳性细胞数与模型组比较显著减少(P<0.001,P<0.05);结果表明,帕瑞昔布钠预处理可减轻脑缺血再灌注损伤,具有一定的脑保护作用。

    2013年11期 v.33;No.203 1754-1757页 [查看摘要][在线阅读][下载 244K]
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  • 阿苯达唑对自发性兔脑炎原虫病的治疗

    潘耀谦;刘兴友;冯春花;赵振升;李瑞珍;刘志科;李会珍;孙玉倩;

    为了有效地治疗兔脑炎原虫病,本研究根据脑炎原虫的生物学特点和对组织损伤的特征选用阿苯达唑进行了治疗试验。将28只3~4月龄隐性感染的獭兔,随机分为对照组和治疗组进行试验。治疗组按30mg/kg剂量(首次给药量为50mg/kg),每隔12h给药1次,连续用药10d,停药1周为1个治疗期,共治疗3个疗程。对照组按正常饲养。每1疗程之后,均采血和尿液进行ELISA检测和尿沉渣虫体检查。结果,治疗组的病兔用阿苯达唑治疗3个疗程后,ELISA检测的D值均低于标准值(<0.044),即抗脑炎原虫血清抗体呈阴性反应,从尿沉渣中也不能检出虫体。而对照组病兔的D值则大大高于正常值,从尿沉渣中均易检出虫,并有1只对照兔出现典型的神经症状,剖检后从脑组织中检出脑炎原虫性肉芽肿。经方差分析,2组间差异非常显著(P<0.01)。试验证明,阿苯达唑对兔脑炎原虫有良好治疗作用,用药的时机以脑炎原虫还未进入脑组织时最合适,用药的剂量一定要保持有效的杀虫浓度。

    2013年11期 v.33;No.203 1758-1761+1767页 [查看摘要][在线阅读][下载 409K]
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  • 补中益气丸对糖尿病大鼠胃组织MUC1、COX、NOS表达变化及相互作用

    张永斌;刘晓秋;陈嘉;郭学军;周钱粮;李守军;

    观察补中益气丸对糖尿病大鼠胃组织MUC1、COX-1、COX-2、cNOS、iNOS不同病程表达变化及其相互作用的影响。大鼠随机分为正常组,模型组和中药组,采用STZ腹腔注射结合乙醇灌胃的方法建立糖尿病大鼠胃黏膜损伤模型,检测胃组织NO、PGE2、6-keto-PGF1α、MUC1、COX-1、COX-2、cNOS和iNOS随病程的表达变化及其相互作用。结果显示,糖尿病大鼠出现胃黏膜损伤和胃肠功能紊乱,胃组织MUC1、COX-2、iNOS发生显著变化,MUC1随病程进展逐渐降低,iNOS和COX-2表现为早期活性降低,晚期活性升高,PGE2、6-keto-PGF1α和NO随病程显著升高,相关分析发现,COX-1与cNOS呈显著正相关,与iNOS呈著负相关。补中益气丸能调节MUC1、COX-2、iNOS的表达及其相互作用,阻止胃黏膜损伤。结果表明,STZ腹腔注射结合乙醇灌胃的方法可成功诱导糖尿病大鼠胃黏膜损伤模型,iNOS与COX-2可能为相互协作和相互介导的关系,在糖尿病胃黏膜损伤方面起重要作用,补中益气丸通过升高MUC1、降低iNOS和COX-2的表达及其相互作用,阻止胃黏膜损伤和糖尿病的发展。

    2013年11期 v.33;No.203 1762-1767页 [查看摘要][在线阅读][下载 476K]
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  • 酵母铬对围产后期奶牛抗氧化能力的影响

    范春玲;周玉龙;张旭;李淑静;王恒根;孙斌;

    选用20头胎次相近和分娩期相近的中国荷斯坦奶牛,随机分为4组,对照组为基础日粮,3个处理组在基础日粮中分别添加3.0、6.0和9.0g/d的酵母铬。试验期为2周,从分娩当天持续到产后14d。结果表明,(1)与对照组相比,添加酵母铬可以提高血清中总抗氧化能力(T-AOC),超氧化物歧化酶(SOD)和谷胱苷肽过氧化物酶(GSH-PX)的活力(P<0.01),降低丙二醛的浓度;(2)酵母铬降低了皮质醇含量,提高了胰岛素活性。本试验条件下,发现基础日粮添加9.0g/d的酵母铬,使铬添加水平为0.8mg Cr/kg时,效果较好。为研究在日粮中添加不同水平的酵母铬对围产后期奶牛抗氧化性能的影响提供依据。

    2013年11期 v.33;No.203 1768-1772页 [查看摘要][在线阅读][下载 133K]
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  • 某新建大型奶牛场临床乳房炎病原菌分离及发病规律

    毛永江;张美荣;刘姗;许兆君;陈丹;廖想想;王杏龙;杨章平;

    对我国南方地区某新建大型奶牛场2010年10月至2012年7月间头胎及二胎共2 006头荷斯坦牛临床乳房炎发病情况进行调查,结合病原菌感染类型结果,用χ2检验分析不同胎次临床乳房炎发病次数和发病率及不同致病菌导致的临床乳房炎在不同季节和泌乳阶段发病率的差异。结果表明,该牛场一胎和二胎奶牛临床乳房炎发病率分别为11.81%和9.02%(按头数算),但二胎牛多次发生临床乳房炎的比例较大。一胎奶牛仅发现大肠杆菌和葡萄球菌单独感染及葡萄球菌-大肠杆菌混合感染3种病原菌组成类型,二胎奶牛比头胎牛增加了金黄色葡萄球菌、链球菌、酵母菌和链球菌-葡萄球菌混合感染4种类型。致病菌类型以大肠杆菌和葡萄球菌单独感染为主,一、二胎奶牛均占总发病数85%以上;季节和泌乳阶段对一、二胎奶牛临床乳房炎发病率具有显著影响(P<0.05),一胎牛秋季发病率最高,而春季发病率最低,而二胎牛冬季发病率最高(33.33%),秋季最低(16.88%);2个胎次奶牛泌乳早期临床乳房炎发病率明显高于其他阶段。大肠杆菌和葡萄球菌在整个泌乳期均可发生,酵母菌主要出现在二胎牛泌乳中期,平均感染时间分别为(148.75±69.60)d,而金黄色葡萄球菌和链球菌主要发生在二胎牛泌乳后期,平均感染时间分别为(213.60±55.88)和(234.43±42.35)d。结果对该地区同类型奶牛场临床乳房炎防控有重要的参考价值。

    2013年11期 v.33;No.203 1773-1777页 [查看摘要][在线阅读][下载 133K]
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动物科学

  • 军牧1号白猪、杜洛克猪、西藏小型猪和大白猪ESR、FSHβ、EGF基因的多态性分布

    李文静;印崇;高峰;白春艳;孙博兴;邢沈阳;

    ESR、FSHβ和EGF基因与猪繁殖性状密切相关。为检测军牧1号白猪、西藏小型猪、杜洛克猪和大白猪ESR、FSHβ和EGF基因的多态性分布情况,采用PCR和PCR-RFLP的方法对61头军牧1号白猪,51头杜洛克猪,51头西藏小型猪和69头大白猪的ESR、FSHβ和EGF基因多态性进行了检测。结果显示,对于各个基因的优势等位基因,在军牧1号白猪群体中,ESR基因位点A等位基因频率为0.639 3,FSHβ基因的B等位基因频率高达0.909 8,EGF基因的A等位基因频率仅有0.016 4;杜洛克猪群体中,ESR基因A等位基因频率为0.607 8,FSHβ基因的B等位基因频率为0.823 5,而EGF基因的A等位基因频率仅为0.029 7;西藏小型猪群体中,ESR基因A等位基因频率是0.460 8,FSHβ基因B等位基因频率仅为0.068 7,EGF基因A等位基因频率为0.196 1;大白猪群体中,ESR基因位点有频率为0.500 0的有害A等位基因,而FSHβ基因和EGF基因的B等位基因频率则分别为0.801 3和0.739 1。所有基因型分布均符合哈代-温伯格平衡(P>0.05)。

    2013年11期 v.33;No.203 1778-1782页 [查看摘要][在线阅读][下载 288K]
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