预防兽医学

  • N-糖基化猪瘟病毒E2蛋白不同接种剂量对BALB/c小鼠的免疫效果分析

    孙全文;王爱华;董炳梅;杨翠军;王金良;

    E2蛋白(E2 protein,E2-Pro)为猪瘟病毒(classical swine fever virus,CSFV)的主要结构蛋白之一,是CSFV最主要的保护性抗原,因此应用体外糖基化技术获得的N-糖基化E2蛋白(glycosylated E2 protein,Gly-E2-Pro)理论上可进一步增强机体的免疫应答。为了验证这一设想以及获得最佳的免疫效果,本研究分别将Gly-E2-Pro按20,50,100μg/只,接种BALB/c小鼠,同时设E2-Pro与CSFV对照,于不同时间采血制备血清,通过血清中IgG、IL-4及INF-γ水平的测定,评价Gly-E2-Pro的免疫效果及确定最佳免疫剂量。结果显示,免疫Ⅰ组(20μg/只)Gly-E2-Pro虽刺激机体产生了IgG免疫应答,但水平较低,与E2-Pro、CSFV组差异不显著;免疫Ⅲ组(100μg/只)Gly-E2-Pro免疫后,前期出现免疫抑制,至28d抗体水平急剧上升,达到极高值;免疫Ⅱ组(50μg/只)Gly-E2-Pro免疫后,血清IgG水平显著高于E2-Pro与CSFV组,同时显著高于免疫Ⅰ组与Ⅲ组。以上结果说明,Gly-E2-Pro可有效增强机体的体液免疫应答,50μg/只为最佳接种剂量。

    2014年08期 v.34;No.212 1225-1230页 [查看摘要][在线阅读][下载 157K]
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  • 鸡减蛋综合征病毒Hexon基因SYBR GreenⅠ实时荧光定量PCR检测方法的建立

    杜冬华;周静;王爱华;孙继国;

    用PCR方法扩增出鸡减蛋综合征病毒(EDSV)Hexon基因保守片段,经琼脂糖凝胶电泳及序列测定分析扩增产物的特异性。以构建的阳性重组质粒作为标准品,建立SYBR GreenⅠ实时荧光定量PCR反应的扩增曲线和溶解曲线,并绘制标准曲线。结果表明,建立的EDSV荧光定量PCR标准曲线Ct值与1×101~1×106拷贝/μL的基因拷贝数呈现良好线性关系,灵敏度可达10拷贝,且特异性及重复性良好;说明本试验建立的SYBR GreenⅠ实时荧光定量PCR检测方法可用于EDSV的诊断及病原的定量分析。

    2014年08期 v.34;No.212 1231-1234页 [查看摘要][在线阅读][下载 138K]
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  • H9N2亚型禽流感病毒NS1基因真核表达载体的构建及其在293细胞瞬时表达

    董永军;王丽荣;贺会利;

    在293细胞中瞬时表达A/Chicken/Henan/1001/2010(H9N2)NS1基因蛋白,并对表达蛋白活性进行测定。试验利用PCR技术从NS1-T载体质粒上扩增NS1基因,将其克隆至pCAGGS载体,构建重组质粒NS1-pCAGGS;经酶切和测序鉴定正确后,重组质粒NS1-pCAGGS与脂质体按照一定比例混合后转染293细胞,用间接免疫荧光方法对瞬时表达细胞进行荧光信号反应。结果显示,禽流感NS1基因可以很好地在293细胞中瞬时表达,具有良好的反应原性。

    2014年08期 v.34;No.212 1235-1238+1243页 [查看摘要][在线阅读][下载 142K]
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  • 鸭源新城疫病毒对鹅的致病性试验

    鲁爱玲;刁有祥;崔京腾;葛平萍;孙晓艳;王蛟;张璐;

    鸭源新城疫病毒(NDV)SDFC株通过静脉注射、肌肉注射、点眼滴鼻3种途径人工感染15日龄健康雏鹅,观察试验鹅的发病情况及临床症状,于感染后不同时间剖杀,观察各组织器官的主要剖检变化,并进行病理组织学研究,同时对病毒在组织中的抗原分布进行检测。结果显示,试验鹅感染鸭源NDV后发病率达100%,静脉注射组死亡率为80%,肌肉注射组死亡率为40%,点眼滴鼻组死亡率为26.7%。病鹅表现下痢、流泪,部分出现瘫痪、扭头、角弓反张等神经症状;剖检变化表现为胰腺、脾脏有大小不等的白色坏死灶,胸腺、法氏囊萎缩,心包积液,肠道、肝脏、肺脏、肾脏出血;病理组织学变化表现为胸腺、脾脏、法氏囊等器官内淋巴细胞坏死、崩解,心脏、肺脏、肝脏、肾脏广泛性出血、变性;抗原分布检测结果显示,病毒在病鹅体内多个组织器官中分布。试验结果表明,鸭源NDV对鹅具有较强的致病性。

    2014年08期 v.34;No.212 1239-1243页 [查看摘要][在线阅读][下载 214K]
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  • 马立克氏疫苗病毒在鸡传代细胞上的培养工艺

    刘玉鹏;赖汉漳;李延鹏;罗琼;陈瑞爱;

    为探索马立克氏病(Marek's disease,MD)疫苗病毒在DF-1细胞系上的最佳培养工艺以及由此方法制备的马立克氏病疫苗对鸡的保护效力,通过进行培养基和血清选择、病毒在DF-1细胞上接种稀释度和接种方式选择以及滴度测定,并制备以DF-1细胞为基质的CVI988和FC-126病毒疫苗,按中华人民共和国兽用生物制品规程(2000)检验合格后与其他商品苗进行保护效率对比试验。结果表明,试验成功探索了CVI988和FC-126病毒在DF-1细胞系上的培养工艺,以DF-1细胞为基质制备的疫苗也取得了和其他商品苗保护率相当的良好效果,因此推断DF-1细胞可以作为马立克氏病疫苗病毒的传代细胞培养候选基质。

    2014年08期 v.34;No.212 1244-1247+1252页 [查看摘要][在线阅读][下载 151K]
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  • Ⅰ型鸭肝炎病毒SYBR-Green实时荧光定量PCR检测方法的建立

    王文秀;张倩;曲光刚;莫玲;沈志强;

    为建立一种快速、特异的Ⅰ型鸭肝炎病毒(DHV-Ⅰ)SYBR GreenⅠ荧光定量PCR检测方法,根据GenBank已登录的DHV-Ⅰ型疫苗株C80(DQ864514.3)的非编码区基因序列设计1对特异性引物,经RT-PCR扩增出230bp的靶序列,并克隆到pMD18-T载体上,构建重组质粒;将纯化的重组质粒10倍梯度稀释后作为标准阳性模板,进行SYBR GreenⅠ荧光定量PCR扩增并建立标准曲线,对其敏感性、特异性和重复性进行评价。结果显示,建立的标准曲线的循环阈值与模板浓度呈现良好的线性关系(R2=0.998 2),产物Tm值为87.2~87.9℃,检测灵敏度为71.5拷贝/μL。对55份疑似病料进行检测,荧光定量检测48份为阳性,而用常规PCR方法只能检出39份阳性,ELISA方法只检出30份阳性。这表明所建立的DHV-Ⅰ的SYBR GreenⅠ荧光定量PCR检测方法具有特异、灵敏、快速和重复性良好等优点,可用于临床DHV-Ⅰ感染的快速检测,为DHV的分子诊断、流行病学调查及定量分析奠定了基础。

    2014年08期 v.34;No.212 1248-1252页 [查看摘要][在线阅读][下载 157K]
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  • 新疆特色植物对金黄色葡萄球菌生物膜形成的影响

    李延荣;陈伟;

    采用微孔板半定量法,探讨新疆特色植物甘草、盐穗木、醉马草、苦豆子的水煎液对金黄色葡萄球菌临床菌株生物膜形成能力的影响。结果表明,盐穗木和甘草水煎液通过2种方式抑制金黄色葡萄球菌生物膜形成:低浓度时不影响细菌生长但抑制生物膜形成;高浓度时通过抑制细菌生长削弱生物膜形成能力。而苦豆子与醉马草水煎液对金黄色葡萄球菌生物膜形成的抑制作用则不依赖于其对细菌生长的抑制。

    2014年08期 v.34;No.212 1253-1256页 [查看摘要][在线阅读][下载 163K]
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  • 猪致病性大肠杆菌O9菌蜕的制备及免疫保护力

    李书光;胡琳琳;王金良;肖跃强;沈志强;

    通过PCR方法克隆噬菌体PhiXl74的融菌基因E,将其与温控表达载体pBV220连接,成功构建温控融菌表达盒,设计扩增温控表达盒的2对引物,使其5′端分别与lacZ基因敲除基因的首尾50bp基因同源,使用Red系统同源重组,使用麦康凯平板筛选、PCR鉴定白色菌落,温控诱导融菌蛋白的表达,制备大肠杆菌O9的菌影,并对其融菌效率及免疫保护力进行了初步研究。结果显示,成功构建了温控融菌表达盒,经同源重组成功获得猪致病性大肠杆菌O9温控融菌株,温控表达溶菌蛋白能够成功抑制细菌的增殖,并使活菌数下降3个指数,对小鼠安全性好,皮下免疫组攻毒保护率达到71.43%。

    2014年08期 v.34;No.212 1257-1260+1266页 [查看摘要][在线阅读][下载 153K]
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  • 奶牛乳房炎无乳链球菌的分离及PCR鉴定

    阚威;樊杰;武小虎;赵兴绪;张晶晶;周长卿;王华;曹会萍;李展;

    利用THB(Todd-Hewitt Broth)固体培养基和色素试验培养基选择培养无乳链球菌,参照GenBank中无乳链球菌参考菌株(Accession:AF015927.1、JQ289582.1)16SrRNA和种属特异性基因cfb(CAMP因子)序列设计引物,对奶样中分离的12株疑似无乳链球菌进行鉴定。结果显示,经PCR扩增后,被检测的12株细菌均可扩增出预期大小的16S rRNA基因序列,而12株中有8株可以扩增出预期大小的cfb基因序列,条带单一,特异性好。序列BLAST显示,12株菌的16S rRNA基因序列与NCBI上报道的无乳链球菌相应序列高度同源(>99.0%),各分离菌株间的16S rRNA基因序列也高度同源(99.0%~100.0%);cfb基因序列与NCBI上已报道的无乳链球菌相应序列具有高度同源性(>99.0%),各菌株间cfb基因序列也高度同源(100.0%)。经选择培养与PCR鉴定结果可以确定12株疑似菌株中有8株为无乳链球菌。

    2014年08期 v.34;No.212 1261-1266页 [查看摘要][在线阅读][下载 165K]
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  • 大菱鲆源鳗弧菌毒力基因的检测及序列分析

    葛慕湘;靳晓敏;房海;张艳英;陈翠珍;

    采用PCR方法,对分离于大菱鲆的30株致病性鳗弧菌进行了溶血素vah1基因、鞭毛蛋白flaA基因、金属蛋白酶empA基因及外膜蛋白ompU基因的检测,选取3个代表菌株的相应基因序列通过Blast与GenBank中公布的参考菌株进行核苷酸同源性比较分析。结果表明,所检测的30株鳗弧菌均携带vah1、flaA、empA、ompU基因,携带率为100%;所测代表菌株的vah1、flaA、empA基因同参考菌株间均具有较高的同源性(93.9%~99.9%),而外膜蛋白ompU基因,3株代表菌间存在较大差异(86.0%~95.9%),其中的S010610-1株与其他2株代表菌及参考菌株均存在较大差异,在进化树中单独聚为一支。3株代表菌的其他基因(vah1、flaA、empA)均具有较高的同源性(94.2%~99.5%),但均存在一定的差异性。

    2014年08期 v.34;No.212 1267-1271+1277页 [查看摘要][在线阅读][下载 192K]
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人兽共患病

  • 快速检测奶粉中阪崎肠杆菌新型酶免疫传感器

    黄留洋;窦文超;胡雪;赵广英;

    为探求奶粉中阪崎肠杆菌(Enterobacter sakazakii,E.sakazakii)更好的快速检测技术,将硫堇和辣根过氧化物酶标记阪崎肠杆菌抗体依次自组装到多壁碳纳米管/羧甲基壳聚糖-海藻酸钠修饰的丝网印刷碳电极上,制得一种阪崎肠杆菌酶免疫传感器。采用交流阻抗法和循环伏安法对不同修饰电极进行电化学特性表征测试,根据免疫电极CV还原峰电流在孵育前后的变化差值(ΔI)对阪崎肠杆菌进行检测。优化试验条件下,该方法对阪崎肠杆菌检测线性范围为103~109 CFU/mL,检出限为6.6×101 CFU/mL;且具有良好的特异性(非目标菌ΔI<0.5μA)、准确性(与GB/T 4789.40-2010符合率为100%)、稳定性(免疫电极在4℃无菌环境下保存30d,响应电流仍能达到初始值的92.3%)和重现性(RSD=6.3%)。

    2014年08期 v.34;No.212 1272-1277页 [查看摘要][在线阅读][下载 190K]
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  • 重组单增李斯特菌溶血素O在大肠杆菌中的分泌表达及活性分析

    李文艳;张永红;林洪羽;李秀锦;仲飞;

    单增李斯特菌是食源性致病菌,常引起人和动物的生殖障碍,由此菌分泌的溶血素O(LLO)是重要的致病因子。为研究LLO对细胞的毒性作用及对动物体生殖免疫的调节作用,需要制备大量重组LLO。为此本试验依据LLO基因序列(JN703918)通过PCR方法从单增李斯特菌菌株基因组中扩增无信号肽的LLO编码基因,然后将其插入到pET-20b(+)质粒中,使其5′端与载体中的pelB信号肽序列融合,3′端与His-标签融合,构建成LLO分泌性原核表达载体pET-20b-LLO/H。将载体分别转化大肠杆菌BL21(DE3)pLysS,在IPTG的诱导下进行表达,利用Ni-NTA琼脂糖凝胶从细菌周质释放液中提取和纯化重组LLO蛋白,并通过SDS-PAGE及Western blot进行鉴定。利用溶血试验检测重组蛋白的生物活性。结果表明,本试验扩增的LLO基因序列与GenBank中的LLO基因序列完全一致。采用分泌性表达策略实现了重组LLO在大肠杆菌中的分泌表达,并且表达的重组LLO具有明显的溶血活性。

    2014年08期 v.34;No.212 1278-1283页 [查看摘要][在线阅读][下载 178K]
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  • 霍乱弧菌DPO-PCR特异性检测方法的建立与应用

    徐义刚;李丹丹;吴岩;刘忠梅;魏冬旭;李苏龙;

    采用一种新型的引物设计方法——双启动寡核苷酸引物(dual-priming oligonucleotide,DPO),以霍乱弧菌mdh基因为靶序列,建立了霍乱弧菌DPO-PCR特异性检测方法,分析了DPO引物退火温度不敏感性、检测灵敏度及特异性,并对检测方法进行了初步应用。灵敏度结果显示,DPO-PCR方法对霍乱弧菌的最低检出限为1.07×102 CFU/mL。退火温度不敏感性试验中,与常规PCR引物相比,DPO引物在45~65℃退火温度均能够高效扩增出靶基因片段。特异性结果显示,DPO-PCR方法的特异性比常规PCR方法强,不产生任何非特异性扩增。利用建立的霍乱弧菌DPO-PCR检测方法对采集的550份样本进行检测,检出43份霍乱弧菌阳性样本,经行业标准法(SN/T2425-2010)复检,检测结果相同,表明所建立的DPO-PCR检测方法具有良好的实用性,为霍乱弧菌的快速准确检测提供了新途径。

    2014年08期 v.34;No.212 1284-1288页 [查看摘要][在线阅读][下载 159K]
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基础兽医学

  • 夏季奶牛血液中热休克蛋白的表达量

    王建平;王加启;卜登攀;

    选择40头体质健康的中国荷斯坦奶牛,根据胎次和泌乳天数,按照随机区组试验设计分为Ⅰ组(30kg/d)、Ⅱ组(30~35kg/d)、Ⅲ组(35~40kg/d)和Ⅳ组(40kg/d)。热应激前、热应激前期、热应激中期、热应激后期和热应激后分别于尾静脉采血,用ELISA试剂盒测定热休克蛋白(HSP)27,70,90的表达量。结果显示,Ⅳ组HSP27表达量最高,Ⅱ组表达量最低,Ⅳ组、Ⅲ组和Ⅰ组均显著高于Ⅱ组(P<0.05)。HSP70表达量各组间没有明显差异,但随产奶量呈线性增加(P<0.05)。HSP90的表达量,Ⅳ组和Ⅲ组明显高于Ⅱ组(P<0.05)。HSP27的表达量热应激后差异较大;HSP70的表达量各组整个过程差异较大;HSP90的表达量在热应激前、热应激前期和热应激后差异较大。总之,在热应激过程,高产奶牛血清中热应激蛋白的表达量较高,HSP70表达量随产奶量呈线性增加,而不同热应激蛋白的变化规律差异较大。

    2014年08期 v.34;No.212 1289-1293页 [查看摘要][在线阅读][下载 152K]
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  • 断奶应激对犊牛血液生化、免疫和内分泌的影响

    高艳霞;仁瑞清;李建国;曹玉凤;李秋凤;

    选择体质量和出生日期接近的26头犊牛,其中6头母犊,20头公犊。10日龄开始补充苜蓿干草、精饲料自由采食,60日龄断奶。分别在断奶前(-1d)和断奶后1,3,5,7,14d采集血液,测定血清中代谢物、激素及免疫球蛋白含量的变化情况。结果表明,断奶影响犊牛的消化代谢,血清中葡萄糖、总蛋白、尿素氮、甘油三酯含量变化显著(P<0.01)。断奶造成犊牛血清皮质醇、急性反应蛋白、T3、T4、乳酸脱氢酶、碱性磷酸酶、溶菌酶显著变化(P<0.01),使免疫球蛋白、γ-IFN、IL-1含量有不同程度下降(P>0.05)。因此,断奶不仅降低了犊牛的免疫力,而且对犊牛产生了严重的应激反应。

    2014年08期 v.34;No.212 1294-1299+1303页 [查看摘要][在线阅读][下载 228K]
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  • Bcl-2在梅花鹿茸角中的表达

    曹航;李当当;王守堂;杨占清;方青;郭斌;岳占碰;

    鹿茸角是哺乳动物唯一的失去后还能完全再生的器官,人们对鹿茸角再生的分子机理了解甚少。本试验以梅花鹿为研究对象,通过原位杂交方法对Bcl-2在梅花鹿茸角中的表达进行了研究。结果显示,Bcl-2在梅花鹿茸角表皮层内表达甚微,在茸角真皮层、间充质层及软骨层等处均有表达,但在表达强度上存在一定差异。在真皮层中,Bcl-2在真皮成纤维细胞中有较强的表达,在鹿茸间充质细胞中也有少量Bcl-2的表达;在鹿茸软骨层中,Bcl-2在软骨细胞中的表达量很高,主要表达在增殖区的软骨细胞中。这表明Bcl-2可能在梅花鹿茸角再生过程中起重要的调节作用。

    2014年08期 v.34;No.212 1300-1303页 [查看摘要][在线阅读][下载 160K]
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  • 鸡内质网分子伴侣Calnexin基因的生物信息学与组织表达谱分析

    李楠;王丽丽;曹嫦妤;龚都强;王伟;李金龙;

    为探明鸡内质网分子伴侣钙联结蛋白(Calnexin,CNX)基因特性及蛋白结构和功能,以鸡CNX基因序列为对象,利用生物信息学方法分析了12个物种该分子核苷酸和氨基酸序列的同源性及蛋白的结构和功能,并应用qRTPCR法分析了35日龄海兰白鸡30个组织中CNX mRNA组织表达谱。结果表明,CNX核苷酸序列及氨基酸序列在不同物种中具有一定保守性,该蛋白属于跨膜蛋白,不存在信号肽,酶分类可能属于EC 1.11.1.9,并与糖类特异性结合发挥活性。鸡CNX mRNA在鸡组织中广泛表达,其中在回肠、动脉和腺胃组织中表达量很高,表明CNX是鸡机体内必需蛋白分子,可能在消化系统和心血管系统中发挥更为重要作用。

    2014年08期 v.34;No.212 1304-1308+1313页 [查看摘要][在线阅读][下载 190K]
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  • 无血清培养基诱导破骨样细胞分化

    付应霄;顾建红;袁燕;刘学忠;卞建春;刘宗平;

    探索了无血清培养基对RAW264.7细胞诱导破骨样细胞(osteoclast-like-cell,OCL)分化的影响。结果显示,无血清条件下,M-CSF+RANKL能够诱导RAW264.7细胞分化产生TRAP阳性OCL,F-actin及Hoechst33258染色观察到OCL骨架结构完整、核规则,具有骨吸收活性。这表明在无血清条件下RAW264.7细胞可诱导分化产生OCL,但其存活时间短,此外,M-CSF在其分化过程中具有不可替代的作用。

    2014年08期 v.34;No.212 1309-1313页 [查看摘要][在线阅读][下载 199K]
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  • 家养野猪自然感染猪圆环病毒2型的病理学观察

    王小波;王海燕;高杏;吴力力;高崧;

    经PCR检测南京某养殖场送检的表现为多系统衰竭综合征的家养野猪病原为猪圆环病毒2型(PCV2)。采用常规石蜡切片法和免疫组织化学法对患病仔猪的病理组织学变化特点及PCV2抗原在淋巴结内的分布进行了研究。结果显示,剖检病死仔猪病变主要表现为全身淋巴结肿大和间质性肺炎。组织病理学变化主要表现为淋巴结、脾和扁桃体等免疫器官淋巴滤泡萎缩,淋巴细胞数量减少,有大量巨噬细胞浸润及多核巨细胞;非淋巴组织病变主要为肺脏呈典型的间质性肺炎,肝脏局灶性坏死及淋巴细胞浸润;肺脏和肝脏病灶内也可见少量多核巨细胞。PCV2主要分布于淋巴组织内单核巨噬细胞、支气管黏膜上皮、肺泡壁Ⅱ型上皮细胞内,肾小球内也可见少量分布。

    2014年08期 v.34;No.212 1314-1318页 [查看摘要][在线阅读][下载 278K]
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  • 泰山梧桐花多糖对免疫抑制小鼠的免疫调理作用

    赵雪;王尊民;朱瑞良;郭繁霞;吴村;曲亭和;潘德芹;黄璇;李奕芙;

    采用5种不同剂量的环磷酰胺(CTX)皮下注射小鼠,筛选能造成显著免疫抑制的CTX最佳剂量,建立小鼠免疫抑制模型。通过水提醇沉法提取泰山梧桐花多糖,将不同剂量的泰山梧桐花多糖加入到新城疫活疫苗中,制备含泰山梧桐花多糖的新城疫弱毒苗,注射免疫抑制小鼠,来探讨泰山梧桐花多糖对免疫抑制小鼠的免疫调理作用。结果显示,泰山梧桐花多糖能提高免疫抑制小鼠的抗体水平、淋巴细胞比率、淋巴细胞数及血液淋巴细胞转化率,其中400mg/L剂量组(I组)可在第3天解除CTX导致的小鼠免疫抑制;由此说明泰山梧桐花多糖对小鼠具有免疫增强作用。该研究为泰山梧桐花多糖开发成为免疫增强剂和免疫佐剂提供了理论依据。

    2014年08期 v.34;No.212 1319-1323+1327页 [查看摘要][在线阅读][下载 175K]
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  • 16种中药提取物对副猪嗜血杆菌的体外抗菌活性分析

    李莉;殷中琼;贾仁勇;张玉婷;唐寅;代如意;李曼;

    为筛选能有效控制副猪嗜血杆菌病的中药,本研究采用肉汤二倍稀释法和琼脂平板培养计数法探讨黄连等16种中药提取物对副猪嗜血杆菌的体外抗菌作用。结果显示,黄连和黄柏对副猪嗜血杆菌的抗菌效果最好,其最小抑菌浓度(minimum inhibitory concentration,MIC)和最小杀菌浓度(minimum bactericidal concentration,MBC)均为0.98g/L;黄芩、虎杖、秦皮的MIC为1.95g/L,抗菌效果较好;其次是蒲公英、连翘等10味中药,其MIC范围为3.90~62.50g/L;而白鲜皮和紫花地丁的抗菌效果相对较差,MIC为125.00g/L。

    2014年08期 v.34;No.212 1324-1327页 [查看摘要][在线阅读][下载 118K]
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  • 小檗碱肠溶微囊的研制

    王静;方信;王璐;孙占鳌;刘家国;

    为提高小檗碱生物利用度,并改善其对动物的适口性,采用醇提法从黄连中提取出小檗碱成分,以液中干燥法制备小檗碱成分肠溶微囊,并通过单因素试验对影响微囊形成的几个关键条件进行筛选。结果显示,小檗碱成分肠溶微囊制备的最佳工艺条件为:小檗碱∶羟丙基甲基纤维素邻苯二甲酸酯(HPMCP)=1∶7,HPMCP∶丙酮乙醇混合液=1∶20,丙酮乙醇混合液∶液体石蜡=1∶5,司班80∶液体石蜡=6∶100。以此工艺制备3批微囊,其平均包封率为93.32%,微囊外观规整,呈现均匀的流动性和分散性,粒径大小在5~55μm,平均粒径为30.54μm;微囊在人工胃液中2h内溶出少于2%,而在人工肠液中2h释放达到97.343%,几乎达到完全释放,符合中华人民共和国药典的要求。

    2014年08期 v.34;No.212 1328-1331页 [查看摘要][在线阅读][下载 167K]
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临床兽医学

  • N-乙酰L-半胱氨酸预处理对大鼠局灶性脑缺血再灌注损伤的保护机制

    胡安康;顾建红;刘宗平;

    制备大鼠局灶性脑缺血再灌注实验模型,通过N-乙酰L-半胱氨酸(NAC)预处理对脑缺血再灌注损伤的保护作用,探索脑梗死病理过程及药物治疗途径。NAC预处理21d,利用栓线法建立大鼠大脑中动脉栓塞模型,造模后24h进行神经症状评分,TTC染色,检测血浆MDA、GSH含量,观察大脑皮质细胞凋亡情况及凋亡相关蛋白Bcl-2、Bax的表达。结果显示,通过神经症状评分和TTC染色判定大鼠局灶性脑缺血实验模型建立成功。与对照组相比,NAC预处理组(100mg·kg-1)大鼠血浆中MDA含量显著降低(P<0.05),GSH含量显著升高(P<0.05);NAC模型组细胞凋亡率及Bax/Bcl-2比值明显低于对照组。结果表明,NAC通过改善氧化应激状态,调控凋亡蛋白Bcl-2、Bax表达,从而对大鼠脑缺血再灌注损伤具有一定的保护作用。

    2014年08期 v.34;No.212 1332-1336页 [查看摘要][在线阅读][下载 222K]
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  • 青蒿素与柳氮磺吡啶对柔嫩艾美尔球虫感染的疗效观察

    宋萍;苏洋洋;马庆涛;李金贵;

    为了探讨青蒿素(artemisinin,ART)和柳氮磺吡啶(sulfasalazine,SASP)单独给药与联合给药对鸡球虫病的防治效果。试验选用50只1日龄黄羽肉鸡,正常饲养至1周龄时分为5组,2周龄时除空白组外,ART组、SASP组、ART+SASP组和感染对照组分别以105个/羽的剂量接种柔嫩艾美尔球虫(Eimeria tenella,E.tenella)孢子化卵囊,各给药组于攻虫前3d开始给药至试验结束。试验结束后对各组的抗球虫指数(anticoccidial index,ACI)、卵囊的孢子化率、血清NO含量、脏器指数及血清生化指标等数据进行统计。结果表明,ART、SASP以及两者联合用药均能显著提高鸡群的ACI,并使卵囊的孢子化率降低,缓解了球虫感染所致的NO水平升高,且联合用药效果更明显。这提示ART与SASP联合应用在E.tenella感染的防治中具有增效作用。各组鸡群之间血清生化参数无显著性差异,说明该2种药物均无明显毒副作用。

    2014年08期 v.34;No.212 1337-1340页 [查看摘要][在线阅读][下载 125K]
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  • 中药地翁颗粒对小鼠脾淋巴细胞功能的影响

    夏方;冷春青;付运星;吴永丽;郭勋;董海兵;张立艳;白换力;吴帅成;韦旭斌;伊鹏霏;付本懂;

    为观察中药地翁颗粒在体外对小鼠脾淋巴细胞功能的影响,设置高(100mg/L)、中(10mg/L)、低(1mg/L)3个剂量组,采用3 H法进行刀豆蛋白A(ConA)、脂多糖(LPS)诱导脾淋巴细胞增殖试验,ELISA方法检测ConA或金黄色葡萄球菌Cown株灭活菌体(SAC)刺激的脾淋巴细胞上清液IL-2、IL-6、IL-10、IL-12、IFN-γ和TNF-α的含量。结果显示,在安全浓度范围内,地翁颗粒能够明显促进T淋巴细胞和B淋巴细胞增殖;能够促进ConA刺激的淋巴细胞分泌INF-γ;能够促进SAC刺激的淋巴细胞分泌IL-12、INF-γ和IL-6,并抑制IL-10的分泌。结果表明,地翁颗粒能够有效调节小鼠脾淋巴细胞的功能,促进细胞免疫。

    2014年08期 v.34;No.212 1341-1344+1348页 [查看摘要][在线阅读][下载 130K]
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  • 鸡高尿酸血症模型的建立及别嘌呤对其的抑制作用

    赵振升;孔涛;周变华;王文周;杨森;

    300只1日龄海兰褐蛋公雏,饲养至40日龄,通过在正常全价日粮中添加酵母和鱼粉建立高尿酸血症模型,并在全价日粮中添加别嘌呤,探讨其对高尿酸血症的抑制作用。结果表明,酵母高蛋白组和酵母高蛋白高钙组,鸡临床痛风症状明显,解剖发现心、肝、脾及肠系膜表面有石灰样的尿酸盐沉积,肾脏体积显著肿大,表面白色与红色相间,呈现典型的花斑肾病变。血中尿酸含量和黄嘌呤氧化酶(XOD)活性显著升高(P<0.01)。别嘌呤可显著降低血中尿酸含量和XOD活性(P<0.01);说明高蛋白和高钙可诱发鸡高尿酸血症,别嘌呤对其有抑制作用。

    2014年08期 v.34;No.212 1345-1348页 [查看摘要][在线阅读][下载 125K]
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  • 镉对PC12细胞的氧化损伤及α-硫辛酸的保护效应

    张康保;高倩;张雅静;王涛;胡飞飞;江辰阳;王棋文;袁燕;刘学忠;卞建春;刘宗平;

    为研究α-硫辛酸(α-lipoid acid,α-LA)对镉致PC12细胞氧化损伤的保护效应,通过不同浓度的醋酸镉染毒PC12细胞,并用100μmol/Lα-LA联合作用,测定PC12细胞内超氧化物歧化酶(SOD)、过氧化氢酶(CAT)、谷胱甘肽过氧化物酶(GSH-Px)活性和丙二醛(MDA)含量。结果表明:与对照组相比,10μmol/L醋酸镉处理24h组细胞MDA含量和CAT活性极显著升高(P<0.01),SOD和GSH-Px活性极显著降低(P<0.01);不同浓度镉处理组细胞内MDA含量和CAT活性显著或极显著升高(P<0.05或P<0.01),10和20μmol/L组SOD和GSH-Px活性极显著降低(P<0.01)。α-LA保护组与相应染毒组相比,MDA含量和CAT活性显著降低(P<0.05),SOD和GSHPx活性有升高趋势,但组间差异不显著(P>0.05)。说明镉可致PC12细胞发生氧化应激,α-LA可以提高PC12细胞的抗氧化能力,对镉引起的氧化损伤有一定的保护作用。

    2014年08期 v.34;No.212 1349-1352+1357页 [查看摘要][在线阅读][下载 196K]
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  • 铅和(或)镉对大鼠肾细胞的毒性损伤及硒的拮抗作用

    王庆华;顾建红;胥清芳;刘宗平;

    为探讨铅和(或)镉的毒性机制及硒的拮抗作用,在大鼠肾细胞培养过程中添加不同浓度的铅、镉和硒,在显微镜下观察细胞形态,测定细胞凋亡率和细胞周期及上清液脂质过氧化指标。结果表明:(1)20μmol/L以上铅、镉单独染毒组细胞损伤严重,加硒后细胞的形态损伤有降低的趋势;(2)铅、镉单独和联合染毒组GSH-Px、SOD活性随染毒剂量的增加,呈逐渐下降趋势(P<0.05),而MDA含量和细胞凋亡率则呈升高趋势(P<0.05),具有明显的剂量-效应关系和剂量-时间关系;(3)在铅、镉单独和联合染毒组加硒,脂质过氧化指标呈下降趋势(P<0.05),说明硒对铅、镉及其联合暴露所致的脂质过氧化损伤有一定的保护作用(P<0.05)。

    2014年08期 v.34;No.212 1353-1357页 [查看摘要][在线阅读][下载 215K]
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  • 小花棘豆中毒对和田羊瘤胃微生物数量的影响

    王帅;贾琦珍;陈根元;张玲;史卉玲;马春晖;

    探讨小花棘豆对和田羊瘤胃微生物区系的影响,进一步揭示小花棘豆的毒性作用机理。将12只和田羊随机分为3组,即对照组、试验Ⅰ组和试验Ⅱ组。试验组分别按10g/kg和20g/kg的剂量饲喂小花棘豆,至典型临床症状出现为止。攻毒前及攻毒后每隔7d取瘤胃液,检测瘤胃液中微生物数量的变化。结果显示,与正常对照相比,试验羊瘤胃液中总细菌数、白色瘤胃球菌数、黄化瘤胃球菌数、纤毛虫数、内毛虫数和双毛虫数极显著下降(P<0.01),并与小花棘豆中毒呈现较强的相关性;而瘤胃液中厌氧真菌数、产琥珀酸拟杆菌数和等毛虫数与小花棘豆中毒无明显相关性。结果表明,小花棘豆中毒可显著影响和田羊瘤胃纤维素分解菌和纤毛虫数量,且具有一定的时间效应和剂量效应关系。

    2014年08期 v.34;No.212 1358-1363页 [查看摘要][在线阅读][下载 141K]
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动物科学

  • 枸杞多糖对己烯雌酚生殖损伤仓鼠抗氧化能力及生殖激素水平的影响

    张彩利;刘玉姣;王安忠;赵兴华;张铁;马爱团;

    为探讨枸杞多糖(LBP)对己烯雌酚(DES)致成年雄性仓鼠生殖损伤的保护作用,66只成年雄性仓鼠随机分为空白对照组(A)、DES组(B)、LBP组(C、D、E)及VC+VE组(F)。除对照组注射橄榄油外,其余5组皮下注射DES,连续用药7d,同时C、D、E组分别灌服1,10,50mg/kg的LBP,F组灌服100mg/kg的VC及200IU/kg的VE,A、B组灌服等剂量的生理盐水,于末次给药24h后取材。摘取睾丸、附睾和精囊腺测质量并观察睾丸组织结构,检测血清中SOD、GSH-Px、MDA及T、LH、FSH、E2的水平。结果显示,DES能显著降低仓鼠体质量及生殖器官质量,而10,50mg/kg LBP及维生素对其有显著缓解作用(P<0.05);DES处理组仓鼠睾丸组织结构严重损伤,应用LBP后其损伤程度显著减轻,其中以10,50mg/kg LBP的作用最为明显,VC+VE的缓解作用与50mg/kg LBP组接近;随着LBP剂量的增加,血清中SOD、GSH-Px的水平增加(P<0.01),而MDA的水平下降(P<0.01),维生素组与LBP组的变化趋势一致;LBP对血清激素水平也有不同程度的提高,其中以50mg/kg作用最为显著(P<0.01)。这表明50mg/kg LBP能显著缓解DES致成年雄性仓鼠睾丸生精损伤。

    2014年08期 v.34;No.212 1364-1368+1372页 [查看摘要][在线阅读][下载 215K]
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  • 发芽糙米对高脂血症大鼠抗氧化的影响

    文琼;Froilan Bernard Matias;文利新;李荣芳;屠迪;黄海滨;邬静;

    为探讨发芽糙米对大鼠非酒精性脂肪肝内抗氧化活力以及肝脏组织的保护作用,30只SD大鼠随机分为5组,A组和B组分别饲喂普通日粮、高脂饲料8周;C、D、E组饲喂高脂饲料4周后,分别在高脂饲料中添加12.5%,25.0%,50.0%的发芽糙米,自由采食4周后观察结果。结果显示,与B组相比添加发芽糙米的3组大鼠都可以在一定程度上提高大鼠肝脏组织匀浆中T-AOC、T-SOD酶的活力,减少MDA的生成,降低血清中AST、ALT、TC的含量从而保护肝脏组织,而且差异显著(P<0.05),同时血清中TG水平也有下降趋势。这表明发芽糙米具有抗氧化的生物活性,能改善机体脂质代谢,保护肝脏。

    2014年08期 v.34;No.212 1369-1372页 [查看摘要][在线阅读][下载 110K]
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  • 钼对AA~+肉鸡生产性能、脂质代谢及抗氧化能力的影响

    郝贵增;尚泽松;爨淑楠;张振芳;贾哲;张才;

    200只1日龄AA+肉鸡,随机分为对照组,饮水中添加钼3mg/L组,6mg/L组,9mg/L组,12mg/L组,每组4个重复,采用自由饮水采食的方式饲养42d,并记录每天采食量及每周体质量。于试验14,28,42d,每个重复随机抽取2只鸡,进行心脏采血,分离血清用于血清中脂质代谢及抗氧化能力指标的测定。将每组鸡剖杀后,测量并记录腹部脂肪,屠体质量,半净膛质量,全净膛质量等。结果显示,与对照组相比,添加钼12mg/L组摄食量、料肉比降低,且差异显著(P<0.05),而对肉鸡的屠宰性能、脂质代谢的影响差异不显著(P>0.05),但对肉鸡血清抗氧化能力的影响差异显著(P<0.05)。这表明在饮水中添加12mg/L的钼,可提高肉鸡的生产性能,其作用机制可能是提高了肉鸡的抗氧化能力。

    2014年08期 v.34;No.212 1373-1376页 [查看摘要][在线阅读][下载 109K]
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  • 高铜日粮对肉鸡肝脏Bax、Bcl-2蛋白表达的影响

    苏荣胜;贾雪霞;刘好朋;潘家强;唐兆新;

    将200羽1日龄Cobb商品代肉鸡随机分为4组,各组日粮中铜含量分别为:对照组(Ⅰ组)11mg/kg、试验Ⅱ组110mg/kg、试验Ⅲ组330mg/kg、试验Ⅳ组550mg/kg。饲养至10,30,50日龄时每组各取5只鸡用于采集肝脏样品,用蛋白质印迹法检测Bax、Bcl-2蛋白表达量。结果显示,随着铜浓度的增加及饲喂时间的延长,Bax蛋白表达量升高,而Bcl-2蛋白表达量下降,表明高铜可诱导肝细胞不同程度的凋亡。

    2014年08期 v.34;No.212 1377-1379+1384页 [查看摘要][在线阅读][下载 147K]
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  • 薄荷油对雌性小鼠的抗生育作用

    易真珍;舒扬;赵建;王经洋;李平;李太强;龙兴发;朱链发;殷中琼;

    为探讨薄荷油对雌性小鼠的抗生育作用,将80只健康的雌性性成熟昆明小鼠随机分成3个试验组和1个对照组,各试验组小鼠分别灌胃含薄荷油0.135,0.270,0.540g/(kg·d)的0.5%羧甲基纤维素钠(sodium carboxymethylcellulose,CMC)混悬液,对照组灌胃0.5%CMC溶液,1周后按雌雄比2∶1合笼,继续对雌鼠灌胃总计19d,剖检灌胃雌鼠,统计雌鼠的怀孕率,采集血清进行血液生化指标检测,并采集脾脏和肾脏,计算其脏器系数。采集卵巢、子宫进行固定,并进行病理学观察。同时进行抗着床、抗早孕、抗中期和抗晚期妊娠试验。结果表明,薄荷油具有明显的抗生育作用,并对妊娠各阶段有显著影响。对脾脏和肾脏无明显副作用,其脏器系数均无统计学意义。病理学观察结果显示,卵泡间质组织毛细血管充血,卵泡细胞发生灶性坏死,可见炎性细胞浸润。子宫肌层、固有层和黏膜层发生不同程度的充血、出血、水肿和炎症,严重者,可见固有层细胞发生坏死。这表明薄荷油对雌性小鼠的抗生育作用主要是通过破坏子宫和卵巢等生殖器官而实现的,其作用机制需进一步研究。

    2014年08期 v.34;No.212 1380-1384页 [查看摘要][在线阅读][下载 186K]
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  • 精子活率与精子完整率和质膜完整率的相关性分析

    易康乐;蒋桂韬;燕海峰;雷虹;孙鏖;薛立群;彭英林;

    采用考马斯亮蓝(R250)染色法和低渗膨胀试验(HOST试验)检测精子顶体反应和质膜完整性,以检测和评价这2种方法在猪精液质量检测中的实际应用价值。结果表明,冷冻复苏后,精子活率为37.97%,精子平均速度为55.72μm/s,顶体完整率和质膜完整率分别为51.01%和39.95%。经相关性分析得出,猪精子顶体反应率和质膜完整性与精子活率相关系数为0.904 0和0.817 6,呈显著相关(P<0.01),而精子的平均游动速度与顶体反应率和质膜完整性相关系数为-0.056 2和-0.151 8,无明显相关性(P>0.05),精子活率与精子平均游动速度间也无明显相关性(P>0.05)。

    2014年08期 v.34;No.212 1385-1387页 [查看摘要][在线阅读][下载 95K]
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综述

  • 新发反刍动物传染病——施马伦贝格病研究进展

    李敏思;冯新;宋战昀;王振国;韩文瑜;

    <正>2011年11月在德国西部城镇施马伦贝格镇牛场中发现一种未知的,主要感染绵羊、山羊、牛等反刍动物的新型病毒性动物传染疾病。感染动物出现高烧达40℃、精神不振、产奶严重下降、多功能衰竭、腹泻、厌食、怀孕母畜流产、死胎或畸形等临床症状。德国研究人员利用分离的病毒进行鉴定证实该病毒为一种新型布尼亚病毒,被命名为施马伦贝格病毒(Schmallenberg virus,SBV)[1]。该病毒通过媒介昆虫蠓及蚊等吸血节肢动物传播,感染到母畜则经由胎盘将病毒传染给胎儿,在反刍动物中迅速蔓延。到目前为止,该病在德国、英国、荷兰、法国等20多个国家被发现,并引起了世界动物卫生组织(Office International Des Epizooties,OIE)以及包括我国在内的诸多国家的高度关注。现对该病的病原学、流行病学、临床症状、诊断检测方法及国内外采取措施等方面的研究进展进行综述。

    2014年08期 v.34;No.212 1388-1392页 [查看摘要][在线阅读][下载 185K]
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简讯

  • 更正

    <正>发表在本刊2014年34卷第7期1094~1099页的论文"甘肃棘豆内生真菌种群多样性"的作者顺序应更正为:杨晓雯1,李国中2,曹丹丹1,薛瑞旭1,权海云1,赵宝玉1,路浩1*(1.西北农林科技大学动物医学院,陕西杨凌712100;2.内蒙古阿拉善左旗兽医站,内蒙古阿拉善,750300)。

    2014年08期 v.34;No.212 1392页 [查看摘要][在线阅读][下载 48K]
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  • 中国畜牧兽医核心期刊表

    <正>~~

    2014年08期 v.34;No.212 1394页 [查看摘要][在线阅读][下载 76K]
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