预防兽医学

  • 猪源多杀性巴氏杆菌的病原流行病学及其毒力特性

    席晓剑;赵战勤;薛云;龙塔;王乐;刘会胜;

    2009-2013年间,采用病原菌的形态学观察、生化鉴定和PCR鉴定,从河南及其周边省份1 914份有肺炎等症状猪的肺脏等病料组织中分离鉴定出142株多杀性巴氏杆菌(总分离率为7.4%),其中A型69株,占48.6%;D型70株,占49.3%;3株不能定型;没有发现B、E和F型。2009-2013年间,多杀性巴氏杆菌不同年份的分离率为6.0%~10.6%,其中2012年显著偏高(P<0.01)。另外发现其分离率具有明显的季节性,其中6和12月份最高。多杀性巴氏杆菌最常见的共感染菌依次是链球菌(50.5%)、副猪嗜血杆菌(41.1%)、大肠杆菌(29.5%)、支气管败血波氏杆菌(14.7%)和沙门菌(10.5%)。小鼠毒力试验结果表明,多杀性巴氏杆菌血清A型菌株毒力普遍较强,而D型毒力普遍较弱。但是,A型菌株也有毒力较弱的菌株,另外,在D型菌株中发现了一株毒力很弱的菌株PM-18,其LD50在4.8×107 CFU以上,该菌株是否能作为天然弱毒疫苗菌株值得进一步研究。

    2015年08期 v.35;No.224 1205-1210页 [查看摘要][在线阅读][下载 187K]
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  • 1株藏猪源枯草芽孢杆菌BY-2的益生特性分析

    杨伟平;彭甲银;王方圆;辛海云;曹斌云;

    评价了来自藏猪盲肠的1株生长快,能高效降解纤维素的细菌枯草芽孢杆菌(Bacillus subtilis)BY-2的益生特性。结果表明,BY-2能够耐受高温,在65~85℃条件下培养20min,其存活率均达到90%及以上,均显著高于BY-2在100℃条件下的存活率(59.1%)(P<0.05)。BY-2在人工胃液中培养,随着pH值的升高存活率呈上升趋势,在不同pH1~4下培养长达4h时,存活率为73.78%~83.61%,其中pH1条件下BY-2的存活率显著低于pH2~4的存活率(P<0.05)。人工肠液和不同浓度胆盐对BY-2的存活率均有影响,但胆盐浓度对BY-2存活率的影响差异不显著(P>0.05),当在不同胆盐浓度的人工肠液中培养4h,BY-2的存活率均在75%以上。此外,BY-2的提取液对大肠杆菌、沙门菌和金黄色葡萄球菌均有强的抑制能力。由试验结果看,BY-2表现出强的抗逆特性及抗菌特性,具有作为猪源益生菌微生态制剂开发的潜力。

    2015年08期 v.35;No.224 1211-1216页 [查看摘要][在线阅读][下载 236K]
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  • 副猪嗜血杆菌毒力菌株和猪支气管败血波氏杆菌毒力菌株双重PCR检测方法的建立及应用

    覃娟娟;顾凡;蔡雨涵;乔小改;刘鹏娟;李萍;朱玲;徐志文;

    为建立一种能同时检测副猪嗜血杆菌(Hps)毒力菌株和猪支气管败血波氏杆菌(Bb)毒力菌株快速、准确的诊断方法,依据毒力血清型Hps OMP P2和Bb DNT基因序列分别设计合成引物,通过优化反应条件,成功建立了同时检测Hps毒力菌株和Bb毒力菌株的双重PCR方法。本试验建立的双重PCR法特异性强,重复性好,最低可检测核酸质量浓度分别达到1.79×10-3 g/L及8.3×10-3 g/L。使用该方法对来自四川地区部分猪场的36份猪呼吸综合征(PRDC)病料进行检测,结果检出率分别是33.33%和5.56%,与单一PCR结果一致,但高于细菌分离鉴定的准确率。试验结果表明该方法具有临床实用性,为四川地区Hps和Bb的诊断和预防奠定基础。

    2015年08期 v.35;No.224 1217-1222页 [查看摘要][在线阅读][下载 262K]
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  • 副猪嗜血杆菌LN/111013株sod A基因序列分析及其毒力强度初步判断

    程迪;迟阳;艾春华;董筱萍;高慎阳;刘丽颖;周铁忠;王佳丽;

    根据已经发表的副猪嗜血杆菌(HPS)sod A基因序列设计引物,对辽宁省HPS LN/111013株sod A基因进行特异性扩增、克隆及测序,获得长度为621bp的sod A基因完整序列。通过与已知代表毒株的sod A基因核苷酸及其编码的氨基酸进行同源性比对和系统进化树分析,结果显示核苷酸的同源性为97.3%~100.0%,氨基酸的同源性为95.2%~100.0%,表明该毒株与近年来国内外流行毒株的亲缘关系较近。通过与国内标准HPS强毒株(SH0165)sod A基因序列进行比对,发现该辽宁株核苷酸7个主要位点中在206,516,556处一致,而在48,147,450,597这4个位点不一致;氨基酸4个关键位点中16,49位点符合低致病力毒株特点,69,186位点符合高致病力毒株特点。而该毒株的临床发病情况和致病性试验表明其毒力较强,说明仅凭一个sod A毒力基因来判断该菌株的致病性还不够全面,或该辽宁株可能来源于高低菌株的变异或重组。

    2015年08期 v.35;No.224 1223-1227页 [查看摘要][在线阅读][下载 351K]
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  • 奶牛乳腺炎无乳链球菌sip与pgk双基因主要抗原区域的融合表达

    布日额;吴金花;王金良;锡林高娃;刘燕;乌日汗;

    为获得具有无乳链球菌膜表面相关蛋白sip和磷酸甘油激酶pgk双重活性的融合蛋白,探讨其作为无乳链球菌亚单位疫苗候选抗原的可行性。根据GenBank中已发表的无乳链球菌sip、pgk基因的核苷酸序列,设计合成4条引物,通过重叠PCR技术将2个基因主要抗原区域进行融合表达;在2个基因连接处引入45bp连接肽的核苷酸序列;重组蛋白通过pET30a(+)载体及BL21表达菌实现原核表达,表达的蛋白大小约为47 000;Western blot检测表明,重组蛋白可被无乳链球菌多抗识别,具有较好地免疫生物学活性。本研究为奶牛乳腺炎无乳链球菌亚单位疫苗的研发提供了一定的理论依据。

    2015年08期 v.35;No.224 1228-1231页 [查看摘要][在线阅读][下载 270K]
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  • 健康和腹泻川金丝猴粪样菌群比较分析

    王剑;王强;曾东;牛李丽;简平;张艳;倪学勤;

    通过对比健康与腹泻成年川金丝猴粪便菌群,初步探讨腹泻对川金丝猴粪便细菌区系的影响。采集成年川金丝猴稀软粪样和正常粪样各7份,利用变形梯度凝胶电泳(DGGE)和实时荧光定量(Real-time PCR)技术分别定性和定量检测粪样菌群变化。结果表明,健康与腹泻粪样菌群DGGE指纹图谱形成2个聚类,相似性为0.78,细菌多样性指数差异不明显。健康成年川金丝猴粪样菌群以梭菌属(包括柔嫩梭菌、梭菌clusterⅪVa、梭菌clusterⅣ)、拟杆菌-普氏菌属为主要优势菌群;肠道微生物定植抗力指标B/E值为0.97;腹泻粪样中双歧杆菌数量(P<0.01)、乳酸杆菌数量(P<0.05)显著低于正常粪样,而梭菌clusterⅠ和肠杆菌显著(P<0.05)高于正常粪样,其他菌群差异不显著,B/E值(P<0.01)极显著降低。表明腹泻导致川金丝猴粪样菌群结构失调。

    2015年08期 v.35;No.224 1232-1238页 [查看摘要][在线阅读][下载 230K]
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  • 绵羊气管上皮细胞的分离培养及绵羊肺炎支原体对其的吸附

    黄海碧;郑佳琪;王晓晖;陈德浩;张超;刘利;郝永清;

    为建立简便、高效、稳定的绵羊气管上皮细胞的体外培养及鉴定的方法,并在所培养的细胞上研究绵羊肺炎支原体侵染模型,本研究利用链蛋白酶冷消化法对绵羊气管上皮细胞进行体外分离,通过差速贴壁法纯化气管上皮细胞并进行传代后用液氮保存,细胞复苏后通过测定生长曲线、上皮细胞骨架蛋白角蛋白8和18以及对染色体与微生物的检测等对所培养细胞进行鉴定,并将鉴定纯化的气管上皮细胞用绵羊肺炎支原体进行侵染。结果显示,成功培养出绵羊气管上皮细胞,纯化的细胞在显微镜下排列紧密,形态均一,呈鹅卵石铺路样。细胞生长曲线呈"S"型,分子生物学手段和增菌试验未检测到气管上皮细胞中含有微生物污染,通过细胞免疫组化检测到了细胞角蛋白8、18,染色体核型数目为2n=54。绵羊肺炎支原体能黏附于分离纯化的绵羊支气管上皮细胞,为进一步研究支原体侵染细胞的机制等奠定了基础。

    2015年08期 v.35;No.224 1239-1243页 [查看摘要][在线阅读][下载 286K]
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  • 血液直接PCR方法在猪嗜血支原体检测中的应用

    张晋强;薛翼鹏;李晓云;董耀泽;陈建闪;石泽宇;马海利;

    为临床上能快速准确检测猪嗜血支原体感染,建立了一种检测猪嗜血支原体的血液直接PCR方法。该方法能特异性地扩增猪嗜血支原体16SrRNA基因中的一段396bp序列,而对猪繁殖与呼吸综合征病毒、猪圆环病毒2型、猪细小病毒、猪伪狂犬病病毒、大肠杆菌、金黄色葡萄球菌等没有扩增到目的条带;该方法能检测到每微升抗凝血中猪嗜血支原体的最低拷贝数为5.52×101 copies,与常规PCR相当;应用血液直接PCR和常规PCR对100份抗凝血样进行检测,阳性检出率分别为65%和69%,差异不显著(P>0.05)。结果表明,血液直接PCR方法具有良好的特异性、较高的灵敏度和较快的检出速度,适用于临床上对猪嗜血支原体感染进行快速确诊和流行病学调查。

    2015年08期 v.35;No.224 1244-1247页 [查看摘要][在线阅读][下载 165K]
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  • 猪圆环病毒2型福建分离株ORF2基因遗传变异分析

    曾显成;陈景杰;林群群;池雪林;吴异健;吴宝成;谢宝贵;

    为了解福建部分地区感染猪圆环病毒2型(PCV2)的基因型及遗传变异情况,采集了9份来自福建4个地区临床疑似PMWS仔猪肺、肾、淋巴结组织,病毒核酸提取后用PCV2ORF2特异引物进行PCR扩增、凝胶电泳,鉴定5份阳性样品,阳性率55.6%,回收、纯化阳性条带后送生物公司测序。Base by Base软件分析发现5份阳性样品ORF2的变异程度很小,主要是1~7个碱基点突变,有1处2个碱基连续突变,没有插入或缺失突变,同源性为98.91%~99.84%。进化树分析显示5份阳性样品都属于Group 1群(PCV2b型)中的1A/1B亚型,表明来自不同地区的样品之间变异较小。结合GenBank中已收录的所有福建18株PCV2ORF2序列进行分析,发现PCV2b基因型占95.6%,其中1A/1B亚型占72.7%,1C亚型占27.3%,结果表明PCV2b基因型中的1A/1B亚型在福建地区广泛流行并占主导地位。研究结果对本地区选择相匹配的疫苗进行有效防控具有重要意义。

    2015年08期 v.35;No.224 1248-1253页 [查看摘要][在线阅读][下载 448K]
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  • 表达鸡补体因子C3d基因重组杆状病毒的构建及初步应用

    孙盈;闫敏鑫;黄秀芬;孔瑞丽;黄金海;李永清;

    为研制鸡体内补体因子C3d抗体的检测方法,采用RT-PCR方法从鸡肝脏组织细胞的总RNA中扩增出1 002bp的鸡补体因子C3d基因全长,然后将其克隆到杆状病毒载体pFB-LIC-Bse中获得重组质粒pFB-C3d。将pFB-C3d转化到带有杆状病毒基因组的DH10Bac感受态细胞中,制备重组杆粒rBacmid-C3d。再将该重组杆粒转染到昆虫细胞sf9中,通过病毒拯救技术构建携带C3d基因的重组杆状病毒。Western blot试验结果表明,重组杆状病毒能在昆虫细胞sf9中表达出大小约为35 000的C3d-his融合蛋白。以该融合蛋白作为抗原建立的Western blot和间接免疫荧光试验(IFA)显示,经C3d-M2-GST融合蛋白免疫的鸡血清能够与杆状病毒表达的C3d结合,说明本研究构建的重组杆状病毒可以用来检测C3d作为分子佐剂及其融合蛋白免疫鸡后产生针对C3d自身的抗体,为今后建立体内C3d水平监测的指示系统奠定基础。

    2015年08期 v.35;No.224 1254-1259页 [查看摘要][在线阅读][下载 316K]
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  • Gal-13成熟肽基因在毕赤酵母中的表达与抑菌活性分析

    许国洋;付利芝;杨金龙;曹国文;张素辉;邱进杰;潘康成;

    扩增鸡β-防御素-13(Gal-13)成熟肽基因序列,构建酵母重组表达载体pPICZαA-Gal-13,通过SacⅠ限制性内切酶线性化处理后,电击转化毕赤酵母X-33,并对利用甲醇诱导后的重组菌株表达产物进行表达规律分析和抑菌活性研究。结果表明,扩增到的Gal-13成熟肽基因序列为108bp,共编码36个氨基酸;筛选到的重组菌株均为Mut+表型,其诱导表达上清经Tricine-SDS-PAGE凝胶电泳后,发现其在约5 900的位置出现目的条带,抑菌试验发现其对沙门菌(CVCC534)和金黄色葡萄球菌(ATCC25923)具有抑菌活性。

    2015年08期 v.35;No.224 1260-1263页 [查看摘要][在线阅读][下载 216K]
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人兽共患病

  • ZE515对CP5型金黄色葡萄球菌疫苗的佐剂作用

    王萌;金海波;张岑容;卢一松;胡松华;

    前期研究表明一种含人参皂甙的植物油佐剂ZE515对口蹄疫疫苗具有佐剂作用,本研究探讨该佐剂对荚膜多糖CP5型金黄色葡萄球菌(S.aureus)疫苗的佐剂作用。将ZE515和灭活的金黄色葡萄球菌抗原乳化制备成疫苗,ICR小鼠皮下注射疫苗免疫2次,二免后3周采血制备血清,检测血清抗体及其亚类、细胞因子IL-5和IFN-γ,取脾脏检测淋巴细胞增殖指数(SI),并对免疫鼠腹腔注射S.aureus活菌进行攻毒保护性试验。结果显示,ZE515能显著增强抗体及其亚类的免疫应答(P<0.05),提高淋巴细胞增殖指数(P<0.05),提升血清IL-5和IFN-γ表达水平(P<0.05)。ZE515对S.aureus疫苗的佐剂作用显著强于常规铝胶佐剂,含ZE515的疫苗对S.aureus强毒攻毒的保护率为75%,而含铝胶佐剂的疫苗保护率只有50%,表明ZE515对S.aureus疫苗具佐剂作用,值得进一步研究。

    2015年08期 v.35;No.224 1264-1268页 [查看摘要][在线阅读][下载 218K]
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  • 牛源肠球菌耐药基因与表型关系及16S rDNA同源性分析

    候书宝;武小虎;张勇;马友记;胡俊杰;赵兴绪;

    为探究牛源肠球菌耐药性基因型与表现型之间的关系,采用微量肉汤稀释法分析62株肠球菌对7种抗生素的耐药表型,采用PCR技术检测相关的抗药基因,并分析62株肠球菌16SrDNA的同源性。结果显示,98.4%,98.4%,63.9%,6.5%,6.5%的菌株分别对万古霉素、红霉素、四环素、氯霉素和庆大霉素不敏感,100.0%菌株对卡那霉素敏感。100.0%的菌株均携带aphA3、aadA、aadE和aac6aph2基因;98.4%,98.4%,98.4%,95.2%,88.7%,72.6%,3.2%的菌株分别携带ermB、tet(M)、tet(O)、aac、mefA、vanB和vanA基因。62株肠球菌中均未检测出catpIP基因。结果表明,红霉素的耐药性(98.4%)与ermB(98.4%)基因呈正相关,与mefA(88.7%)的相关性也较好。氯霉素的耐药表型(6.5%)与catpIP(0)基因的相关性较好,万古霉素耐药表型(98.4%)与vanB(73.6%)基因相关性较好,其他耐药表型与检测的基因无明显相关性。16SrDNA分析表明,62株肠球菌按同源性可分为A、B、C、D、E、F这6种类型,其中E型与致病株EU717958的同源性较近,F型与致病株EU717964的同源性较近。

    2015年08期 v.35;No.224 1269-1274+1279页 [查看摘要][在线阅读][下载 239K]
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  • 5株鼠伤寒沙门菌基因缺失株的生物学特性比较

    余祖华;陈松彪;张春杰;程相朝;李银聚;何雷;郁川;李静;贾艳艳;

    为了探讨crp、cya、sipB、crp/cya、crp/sipB基因缺失株成为鼠伤寒沙门菌减毒候选活疫苗的可能性,对缺失株的生物学特性进行研究。结果显示,缺失株的血清型仍和亲本菌株相同,其中crp、cya、crp/cya、crp/sipB与亲本菌株相比失去了利用麦芽糖、乳糖、山梨醇等碳源的能力,也不能分解H2S、半乳糖和鼠李糖,但仍保留了利用葡萄糖的能力。通过口服方式把5株crp、cya、sipB、crp/cya、crp/sipB基因缺失株接种KM小鼠进行毒力测定和免疫保护性测定,结果它们的半数致死量比野生株的至少高700倍,双基因缺失株的毒力更弱,攻毒后crp、cya、sipB、crp/cya、crp/sipB基因缺失株的免疫保护率分别为90.0%,60.0%,50.0%,60.0%,60.0%。结果表明,crp基因缺失株可作为鼠伤寒沙门菌减毒活疫苗的候选株。

    2015年08期 v.35;No.224 1275-1279页 [查看摘要][在线阅读][下载 153K]
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  • 人参皂甙Re对兽用狂犬病灭活疫苗的佐剂作用

    苏小艳;李小虎;张玉红;裴增杨;

    大量研究表明从人参中提取的人参皂甙Re(Re)具有提高机体免疫功能的作用,显示了良好的免疫佐剂活性,但其对兽用狂犬病灭活苗(RV)在犬上的免疫佐剂活性研究鲜有报道。本试验将比格犬随机分成RV(1头份)组和RV(1头份)+Re(100μg/只)组,在免疫前1周和免疫后1,4,8,16周采血,进行血清特异性抗体和外周血淋巴细胞CD4+/CD8+值的检测。结果表明,RV+Re试验组能显著提高血清特异性抗体水平,并明显延长了血清特异性抗体的持续时间,提高了CD4+/CD8+值。提示Re作为佐剂能增强机体对抗原的免疫应答,提高RV疫苗的免疫效果。

    2015年08期 v.35;No.224 1280-1283页 [查看摘要][在线阅读][下载 228K]
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  • 旋毛虫Kazal型丝氨酸蛋白酶抑制剂的表达及免疫相关性

    马静;李达;孔令杰;刘畅;李爽;毛贻贤;杜娟;路义鑫;

    根据GenBank上旋毛虫Kazal型丝氨酸蛋白酶抑制剂(KaSPI)基因编码序列设计特异性引物,进行RT-PCR扩增,将所获PCR产物克隆至pEASY-T1载体后转入克隆感受态Tans5α,经过PCR和EcoRⅠ、XhoⅠ双酶切鉴定后进行测序。将所获目的基因与载体pET-30a(+)相连接,然后将鉴定正确的重组表达质粒pET-TsKaSPI转化到大肠杆菌BL21(DE3)中,利用IPTG诱导蛋白表达。SDS-PAGE电泳分析所得融合蛋白大小约为38 000,与预测蛋白理论值大小相符,主要以包涵体形式存在。对纯化后的重组蛋白进行Western blot鉴定,结果显示该蛋白可以被感染旋毛虫小鼠阳性血清所识别,具有良好的抗原性。将纯化的重组蛋白经腹腔注射到小鼠体内检测其对小鼠的免疫保护性,结果表明,旋毛虫肌幼虫减虫率为38.3%。通过间接ELISA法检测血清抗体水平,结果显示重组蛋白免疫小鼠血清的抗重组蛋白抗体IgG总体水平显著高于感染对照组和佐剂组。

    2015年08期 v.35;No.224 1284-1289页 [查看摘要][在线阅读][下载 304K]
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基础兽医学

  • 重组牛抵抗素对体外培养肝细胞PEPCK活性的影响

    王娅;黄文华;邓俊良;左之才;任志华;王哲;胡延春;余树民;

    为了探讨重组牛抵抗素对体外培养肝细胞PEPCK活性的影响,取72h培养良好的肝细胞培养板(6孔板),每孔分别接种重组牛抵抗素0,10,50,100,300,500ng/L(共6个梯度,每个梯度6个重复),继续培养12h,收集上清,采用乳酸脱氢酶偶联比色法测定PEPCK活性。结果显示,PEPCK酶活性随重组牛抵抗素浓度的升高而增强,10ng/L以上的重组牛抵抗素可明显提高PEPCK活性,这表明牛抵抗素具有生物学活性,能提高PEPCK活性。

    2015年08期 v.35;No.224 1290-1292页 [查看摘要][在线阅读][下载 99K]
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  • 基于高通量转录组测序的红花籽油对肥育猪肝脏差异表达基因的影响

    李建平;秦贵信;任艳蕾;张巧灵;王大力;孙博兴;赵志辉;姜海龙;

    18头肥育猪按饲粮均分为2组,添加红花籽油组和不添加油脂组(对照组)。试验期60d结束,全部屠宰,分别采集肝脏组织样品,进行高通量转录组测序,找出2处理组间的差异表达基因和差异代谢通路。利用Illumina HiSeqTM2500高通量RNA-seq测序技术对2组肥育猪肝脏RNA测序,使用TopHat2软件将测序得到的reads序列与猪(Sscrofa10.2)参考基因组序列比对,找出差异表达基因,在Nr、GO和KEGG数据库中进行功能注释、富集分析和聚类分析。结果显示,红花籽油组和对照组肝脏中差异表达基因共有1 114个,与对照组相比,红花籽油组表达上调的基因有579个,下调的基因有535个。GO功能分类注释到细胞组成、生物学过程和分子功能数据库中的差异表达基因分别有902,903,857个。注释到KEGG通路中差异表达基因414个,显著富集通路4个(P<0.05)。

    2015年08期 v.35;No.224 1293-1301+1306页 [查看摘要][在线阅读][下载 329K]
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  • 小G蛋白Ran对奶牛乳腺上皮细胞mTOR和Jak2/Stat5信号通路的影响

    吴迪;骆超超;黄建国;刘静;高学军;刘玉芬;

    为探讨小G蛋白Ran对β-酪蛋白合成的主要信号通路mTOR和Jak2/Stat5及其增殖的影响,本研究对Ran进行瞬时转染和稳定转染,Western blot检测细胞中mTOR、p-mTOR、Stat5和p-Stat5的表达;高压液相层析仪检测酪蛋白的分泌量;CASY细胞活力分析仪分析细胞活力。结果显示,Ran过表达时,细胞活力显著增加(P<0.01),细胞中mTOR、p-mTOR、Stat5和p-Stat5的表达均也显著增加(P<0.01);表明Ran可能激活细胞中的mTOR通路和Jak2/Stat5通路,对乳腺上皮细胞的泌乳与增殖有正向调节作用。

    2015年08期 v.35;No.224 1302-1306页 [查看摘要][在线阅读][下载 282K]
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  • 不同分离方法及首次换液时间对兔骨髓间充质干细胞生物活性的影响

    陈晓佩;于文浩;王亚丹;刘远哲;张宁;王新庄;

    探讨不同分离方法及首次换液时间对兔骨髓间充质干细胞(BMSCs)生物活性的影响。分别采用红细胞裂解法和全骨髓贴壁法分离纯化兔骨髓间充质干细胞,倒置显微镜观察细胞形态、台盼蓝染色检测细胞活性、记录首次传代时间、细胞免疫组化法鉴定CD90、CD44、CD34抗原表达;分别于培养12,24,48,72h首次换液,以后每2d换液1次,记录各组0~3代培养时间。结果显示,2种分离方法均能得到较均一的长梭形细胞,聚集成旋涡状均匀生长,CD90、CD44抗原表达阳性,CD34抗原表达阴性。其中红细胞裂解法所得细胞活性较全骨髓贴壁法高,首次传代时间短,差异显著(P<0.05);24h首次换液各代达传代所需时间与其他各组比较差异极显著(P<0.01),为最佳首次换液时间,可显著缩短细胞培养周期。这表明,采用红细胞裂解法,24h首次换液能够提高骨髓间充质干细胞的活性,缩短细胞培养周期。

    2015年08期 v.35;No.224 1307-1311页 [查看摘要][在线阅读][下载 240K]
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  • 藏绵羊脑动脉系统的结构特征

    王欣荣;刘英;吴建平;

    以成年欧拉型藏绵羊头为试验材料,采用管道铸型腐蚀技术,制作了藏绵羊脑动脉系统的铸型标本,用大体解剖学方法对其结构特性开展了研究。结果显示,藏绵羊颅内主要脑动脉由脑部颈动脉、大脑动脉环和各脑动脉分支组成;大脑动脉环的整体形状呈"倒葫芦"形,管径均匀一致,其上发源的脑动脉各分支左右对称,基本走形相同;藏绵羊的脑硬膜外异网主要由一对左右对称的长三角形四面体构成,脑异网左右两叶间有2~3条"V"型吻合支呈疏松或紧密连接。藏绵羊大脑动脉环与其他动物类似,主要脑动脉间少有细小侧支出现。本试验观察的藏绵羊标本,其左、右大脑前动脉之间没有交通支连接;藏绵羊与牛科动物比较,其颅外主要的供脑血管网无脑硬膜外后异网及附属结构。

    2015年08期 v.35;No.224 1312-1316页 [查看摘要][在线阅读][下载 350K]
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临床兽医学

  • 姜黄等4种具有抗真菌活性中药的最佳提取工艺

    张悦天;李曼;向发;殷中琼;贾仁勇;余婷婷;陈静;朱维凤;

    以浸膏得率、最低抑菌浓度(MIC)值为指标,采用正交设计试验,综合考虑提取方法、溶剂、料液比、提取次数、提取时间、提取温度等5个影响因素,对姜黄等4种具有抗真菌活性中药有效物质提取工艺进行优选。结果优选出的最佳提取工艺分别为:姜黄粗粉(20目)80%乙醇溶液(6倍量),加热回流提取3次,每次2h;射干粗粉(20目)70%乙醇溶液(10倍量),加热回流提取3次,每次2h;栀子粗粉(20目)80%甲醇溶液(6倍量)浸泡0.5h后超声波提取2h;五倍子粗粉(20目)48%乙醇溶液(23倍量),59℃条件下超声提取29min。最佳提取工艺下,姜黄、射干、栀子、五倍子4种提取物浸膏对4株真菌的MIC总值和分别达到31.25,25.00,18.75,18.75g/L,抑菌效果明显且提取工艺稳定可行,值得借鉴。

    2015年08期 v.35;No.224 1317-1323页 [查看摘要][在线阅读][下载 147K]
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  • 舒泰联合盐酸右美托咪定对妊娠猪麻醉效果观察

    李魏;钟志军;谷武阳;李刚诗;唐天亮;吴德;解冰冰;艾生权;石先鹏;申义君;肖越峰;陈英;杨平;李兵;彭广能;

    为探讨舒泰联合盐酸右美托咪定对妊娠期梅山猪实施子宫卵巢全摘除术的麻醉效果,对6头8~10月龄妊娠60d梅山猪肌肉注射麻醉药(麻醉剂量为5mg/kg舒泰和3.3μg/kg盐酸右美托咪定)观察麻醉效果和安全性。结果显示,联合用药麻醉妊娠期梅山猪的诱导期为(2.4±0.7)(1.9~3.7)min,麻醉维持期为(76.0±8.9)(62.5~86.3)min;苏醒期为(92.7±17.9)(60.5~113.8)min。麻醉过程中梅山猪出现体温降低、心率下降、呼吸频率升高、血氧分压降低,但均可自行耐过且无明显不良反应。联合用药麻醉能维持40~55min完全镇痛、肌松期。这表明舒泰与盐酸右美托咪定联合用药对妊娠期梅山猪镇痛、镇静、肌松效果良好,完全能够满足猪子宫卵巢全摘除术等常规实验手术的麻醉需要。

    2015年08期 v.35;No.224 1324-1328页 [查看摘要][在线阅读][下载 123K]
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  • 高钒对雏鸡肝脏的影响

    刘晓东;彭利兰;崔恒敏;吴邦元;张森;龙征荣;田珂;

    为探讨高钒对雏鸡肝脏生长、结构和几个重要酶活性的影响,选用1日龄AA肉鸡健雏420只,随机分为6组,每组70只,分别饲以对照日粮(钒0.073 mg/kg)和高钒日粮(钒5 mg/kg,高钒Ⅰ组;钒15 mg/kg,高钒Ⅱ组;钒30mg/kg,高钒Ⅲ组;钒45mg/kg,高钒Ⅳ组;钒60mg/kg,高钒Ⅴ组)共计6周,以实验病理学和生化试剂盒检测的方法观察研究雏鸡肝脏变化。结果显示,与对照组比较,高钒Ⅱ组肝脏质量在试验第2,3和4周显著降低,高钒Ⅲ、Ⅳ、Ⅴ组肝脏质量在整个试验期间显著降低,同时高钒Ⅲ、Ⅳ和Ⅴ组肝细胞出现颗粒变性和空泡变性;高钒Ⅳ、Ⅴ组ATP酶活性显著降低,而血清ALT、AST酶活性显著升高;高钒Ⅱ、Ⅲ、Ⅳ、Ⅴ组血液葡萄糖和肝脏糖原含量减少。上述结果表明,日粮钒含量超过30mg/kg时可使雏鸡肝脏受损,肝功能降低。

    2015年08期 v.35;No.224 1329-1333+1338页 [查看摘要][在线阅读][下载 422K]
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  • 表没食子儿茶素没食子酸酯对福美双诱导的肉鸡胫骨软骨发育不良的影响

    刘晶英;张鼎;李坤;王智;韩照清;Muhammad Shahzad;李家奎;

    旨在研究表没食子儿茶素没食子酸酯(EGCG)通过调控热休克蛋白HSP90的表达对肉鸡胫骨软骨发育不良(TD)的影响。试验将120羽1日龄健康AA肉鸡预饲1周后随机分成3组:对照组、TD发生组和EGCG处理组。通过向基础日粮中添加药物的方式,分别对TD发生组和EGCG处理组雏鸡饲喂25mg/kg的福美双,诱发TD。从第3日起,对EGCG处理组雏鸡每天腹腔注射10mg/kg的EGCG。14d后,全部扑杀试验鸡。形态学检查肉鸡胫骨生长板发育状况;HE染色法观察生长板软骨细胞分化和血管生成变化;Real-time PCR和Western blot法分别检测HSP90基因和蛋白表达差异。结果显示,TD发生组雏鸡TD症状明显,HSP90基因和蛋白表达量均明显上升。EGCG处理组雏鸡TD症状明显缓解,HSP90基因和蛋白表达量显著下降;生长板软骨细胞分化和血管浸润显著恢复。由此推测,EGCG可能通过下调HSP90基因和蛋白在TD肉鸡软骨细胞中的表达,恢复TD胫骨病变区软骨细胞分化和血管生成,抑制TD发生,提高肉鸡健康状况。

    2015年08期 v.35;No.224 1334-1338页 [查看摘要][在线阅读][下载 293K]
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动物科学

  • 大足黑山羊胎盘子叶性状和结构及其与繁殖性能的相关性

    罗南剑;管代禄;李黄琨;王燕;赵永聚;

    收集79窝(单羔,n=21,G1;双羔,n=47,G2;三羔,n=11,G3)大足黑山羊正常分娩后胎盘及繁殖性能数据,比较不同产羔类型胎盘子叶承载效率(窝初生重与子叶总面积之比)、子叶密度(子叶个数与胎盘质量之比)、子叶面积和子叶组织学结构、绒毛超显微结构,并且分析子叶性状和结构及其与繁殖性能的相关性。结果表明,大足黑山羊随产羔数增加,胎盘子叶承载效率和子叶总面积极显著增加(P<0.01),G1、G2和G3组子叶承载效率分别是(5.70±2.50),(9.23±3.90),(8.15±3.33)g·cm-2,子叶总面积分别为(501.57±124.25),(546.34±197.78),(735.85±194.28)cm2;子叶密度极显著性降低(P<0.01),G1、G2和G3组分别是(0.38±0.18),(0.26±0.10),(0.21±0.08)n·g-1,子叶总数无显著性差异(P>0.05);由组织学结构观察发现,随着产羔数增加,胎盘子叶内血管数量增多,密度增大,绒毛形状变宽变大,密集程度增加,表面褶皱更丰富。相关性分析表明,产羔数和窝初生重与胎盘质量、子叶总面积、子叶承载效率呈极显著正相关(P<0.01)。研究发现山羊胎盘子叶面积与子叶承载效率相互联系;胎盘子叶组织结构及绒毛结构与山羊产羔数有显著性相关。

    2015年08期 v.35;No.224 1339-1344页 [查看摘要][在线阅读][下载 281K]
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  • 新疆肉用绵羊颗粒细胞抑制素βA基因RNAi载体的构建及其干扰效率验证

    林杉;陈宝麒;田占伟;刘贤侠;杨华;赵宗胜;

    抑制素βA基因(inhibin-βA,INHβA)的表达与绵羊(Ovis aries)的产羔数有一定关系。为了观察INHβA对绵羊发情性状的影响以及在目的基因沉默后,引起的发情性状相关激素变化的情况,本研究利用RNAi技术构建载体干扰INHβA的表达。根据GenBank上绵羊INHβA(GenBank:NW_004080167.1)mRNA的序列设计干扰片段,通过酶切和测序验证,成功构建了4个INHβA基因RNAi质粒载体PLLU2G-shINHβA-1(I-1)、PLLU2G-shINHβA-2(I-2)、PLLU2G-shINHβA-3(I-3)、PLLU2G-shINHβA-4(I-4)和1个空载体(赛亚公司的PLLU2G)阴性对照;在成功分离卵巢颗粒细胞并建立培养体系后,利用Lip2000介导干扰载体转染细胞,通过荧光定量RT-PCR检测干扰前后INHβA的表达量。结果显示,4个干扰载体的干扰效率依次为34%,58%,39%,19%,其中I-2对INHβA表达的沉默效果最好。通过卵巢注射干扰载体I-2,检测干扰后绵羊血清INHβA、卵泡刺激素(FSH)、黄体生成素(LH)和雌二酮(E2)的含量。结果显示,注射干扰载体后INHβA和FSH分别呈现明显的下降和上升波峰,而血清中LH和E2水平没有发生明显变化。

    2015年08期 v.35;No.224 1345-1352页 [查看摘要][在线阅读][下载 437K]
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  • 17β-雌二醇对大鼠海马组织结构及Slit、Robo、GAP-43表达的影响

    关佳瑶;高一;张祥毅;何洁玉;李良娟;武鑫;吴建云;

    采用免疫组织化学、电镜、荧光定量PCR等方法,探讨17β-雌二醇对大鼠海马组织结构及Slit、Robo、GAP-43表达的影响。结果显示:(1)与正常组和假手术组比较,卵巢切除可导致海马CA1区神经元数量减少(P<0.05),GFAP表达增加(P<0.05),但星形胶质细胞数量未见明显变化(P>0.05);核膜、线粒体、内质网等超微结构出现明显异常,Slit、Robo表达增加(P<0.05),GAP-43表达降低(P<0.05)。(2)在去卵巢补充雌激素组,可见海马CA1区组织结构正常,Slit、Robo表达较去卵巢组显著降低(P<0.05),GAP-43表达显著增加(P<0.05);与正常组和假手术组比较,Slit、Robo、GAP-43表达无显著差异(P>0.05)。结果表明,雌激素缺乏可引起海马组织结构损伤,17β-雌二醇可通过抑制Slit、Robo表达,促进GAP-43表达而发挥神经保护作用。

    2015年08期 v.35;No.224 1353-1360+1365页 [查看摘要][在线阅读][下载 664K]
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  • 甘草提取物对产蛋后期蛋鸡生产性能及蛋品质的影响

    李晓丽;何万领;张才;任振东;

    为探讨甘草提取物在蛋鸡生产中的应用,试验选用3 000只420日龄的海兰褐壳蛋鸡,随机分为5组,每组6个重复,每个重复100只,分别为基础饲粮组以及40,80,120,150mg/kg甘草提取物添加水平组,试验期40d。结果表明:(1)与对照组相比,饲粮添加80mg/kg甘草提取物显著降低了料蛋比(P<0.05),各试验组产蛋率、平均蛋质量、日采食量和破蛋率与对照组无显著差异(P>0.05);(2)与对照组相比,各试验组均可显著改善蛋黄颜色(P<0.05),但蛋壳强度、蛋壳厚度、蛋白高度和哈氏单位与对照组差异不显著(P>0.05);(3)饲粮添加80~150mg/kg甘草提取物可显著降低蛋黄胆固醇含量(P<0.05),且各试验组均有提高蛋清相对质量、蛋清蛋白质含量和蛋黄蛋白质含量的趋势,但差异不显著(P>0.05)。综合分析表明,蛋鸡饲粮中添加80mg/kg甘草提取物效果最佳。

    2015年08期 v.35;No.224 1361-1365页 [查看摘要][在线阅读][下载 116K]
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  • 日粮能量水平对长白猪体质量、脂蛋白酯酶活性及其基因表达的影响

    李庆海;范京辉;楼立峰;王欢欢;张良辉;张雷;童训权;章学东;

    为探讨日粮能量水平对长白猪脂蛋白酯酶基因(lipoprteinlipase,LPL)mRNA相对表达量的影响,选用同日出生的90日龄(d)长白猪24头(去势公猪12头和母猪12头),按日粮能量水平分成2组,每组3个重复,每个重复4头,饲喂至180d,统一屠宰取样,采用qRT-PCR方法检测2组长白猪肾周脂肪、肝脏、皮下脂肪和背最长肌中LPL基因mRNA的相对表达量,并测定背最长肌中LPL酶活性。结果表明,LPL基因在2组试验猪组织间的表达模式基本相似,在肾周脂肪中的表达量最高,背最长肌中的表达量最低;组间的比较结果显示,H组(高能量组)肾周脂肪组织中LPL基因mRNA表达量极显著高于L组(低能量组)(P<0.01),但皮下脂肪和背最长肌中差异不显著(P>0.05);H组在150,180d的体质量均显著高于L组(P<0.05);同样H组LPL酶活性和背膘厚显著高于L组(P<0.05)。结果提示,日粮能量水平可以影响猪LPL基因mRNA的表达水平及LPL活性,进而影响皮下脂肪和肌内脂肪沉积。

    2015年08期 v.35;No.224 1366-1370页 [查看摘要][在线阅读][下载 168K]
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  • 饲料桑粉对生长育肥猪的营养价值评定

    杨静;曹洪战;李同洲;卜海燕;侯希峰;芦春莲;

    选取健康、胎次一致的杜长大三元杂交去势公猪6头,采用全收粪法进行消化试验,测定生长育肥猪对饲料桑粉的各常规营养成分的表观消化率和消化能,确定饲料桑粉对生长育肥猪的营养价值。结果表明,饲料桑粉的总能、总能表观消化率和表观消化能分别为15.70MJ/kg、68.04%和10.66MJ/kg;粗蛋白质含量、表观消化率和可消化粗蛋白质分别为20.04%,76.49%,15.33%;粗脂肪含量、表观消化率和可消化粗脂肪分别为3.55%,29.77%,1.06%;粗纤维含量、表观消化率和可消化粗纤维分别为17.18%,31.52%,5.41%;无氮浸出物含量、表观消化率和可消化无氮浸出物分别为36.64%,81.91%,33.08%。结果提示,饲料桑粉是一种营养价值较高的饲料资源。

    2015年08期 v.35;No.224 1371-1374页 [查看摘要][在线阅读][下载 109K]
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综述

  • 客观评估沃尼妙林的药学信息

    远立国;刘雅红;

    <正>1引言全新化合物研发的自身局限性导致新药诞生缓慢,加上抗菌药物的不合理使用,导致微生物耐药性持续上升,致使原本有限的医疗资源更加匮乏[1]。在这种严峻的形势下,正确对待并合理分配医疗资源,改造或再评估与老药之间的关系,科学使用抗菌药物对促进抗菌药物更好地为人类服务具有非常重要的意义[2]。沃尼妙林(valnemulin)具有优良的抗菌活性、独特的选择性抗菌机制[3],与市售的抗菌药之间很

    2015年08期 v.35;No.224 1375-1381页 [查看摘要][在线阅读][下载 159K]
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  • 常山、常山碱及其衍生物防治鸡球虫病的研究进展

    郭志廷;梁剑平;韦旭斌;

    <正>鸡球虫病(coccidiosis in chicken)是一种全球流行、无季节性、高发病率和高死亡率的肠道寄生性原虫病[1]。据报道,全世界每年因鸡球虫病造成高达30亿美元的经济损失,中国每年用于防制鸡球虫病的药物费用高达数亿元人民币,占鸡病全部防制费用的1/3[2]。目前,国内外对于鸡球虫病的防治主要依靠化学药物,如地克珠利、妥曲珠利和常山酮等,它们对现代养禽业的健康发展贡献巨大[3]。随

    2015年08期 v.35;No.224 1382-1386页 [查看摘要][在线阅读][下载 132K]
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  • 牛隐孢子虫病研究进展

    黄柳梅;阮记明;梁海平;魏庆;王自蕊;黄恩福;黄建珍;

    <正>隐孢子虫(Cryptosporidium)是于1907年由Tyzzer在实验小鼠胃肠道中首次发现的,属于顶端复合体门(Apicomplex)、孢子虫纲(Sporrozoa)、真球虫目(Eucoccida)、艾美球虫亚目(Eimerina)、隐孢子虫科(Cryptospordiidae)、隐孢子虫属(Cryptosporidium)。其宿主范围十分广泛,可感染包括人类在内的哺乳动物、鸟类、爬行类、两栖类和鱼类等多种脊椎动物,主要寄生于宿主胃肠道上皮细胞内[1]。

    2015年08期 v.35;No.224 1387-1391页 [查看摘要][在线阅读][下载 134K]
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  • 犬布鲁菌病的流行病学、诊断与防控研究进展

    曹雪峰;田一男;于爽;徐晓阳;黄祥明;吴孔菊;彭广能;黄克和;钟志军;

    <正>布鲁菌病(Brucellosis,简称布病)是一种危害严重的人兽共患传染病,能感染家畜、野生动物和人类等[1]。目前布鲁菌分为10个种型(6个经典种型和4个新种型),经典种型包括B.melitensis(羊种,分1,2,3亚型),B.abortus(牛种,包括1,2,3,4,5,6,7,9亚型),B.suis(猪种,包括1,2,3,4,5亚型),B.canis(犬种),B.ovis(绵羊附睾种),B.neotomae

    2015年08期 v.35;No.224 1392-1396页 [查看摘要][在线阅读][下载 169K]
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