预防兽医学

  • CSFV-PRRSV-JEV联合共检基因芯片的研制与初步应用

    常晓霞;姜来生;曹三杰;文心田;黄小波;邓静;赵松;尹人杰;张仙;杨国淋;马锐;赵玉佳;滑翔;

    对猪瘟病毒(CSFV)、猪繁殖与呼吸障碍综合征病毒(PRRSV)和猪流行性乙型脑炎病毒(JEV)联合共检基因芯片的初步应用进行了研究。选用夹缝针,BaiOR点样缓冲液,确定靶基因质量浓度为200mg/L,各样点中心间距300μm,样点直径100μm,在相对湿度为50%~60%、8~30℃条件下用晶芯?SmartArrayerTM48点样仪在氨基化基片上接触式点样,成功制备了CSFV-PRRSV-JEV检测基因芯片。将标记后的探针基因与PRRSV-CSFV-JEV基因芯片经预杂交、杂交、洗涤干燥后,用晶芯?LuxScanTM10K微阵列芯片扫描仪扫描观察结果。结果表明:制备的芯片特异性强,检测灵敏度可达0.295μg/L,4℃条件下可保存120d;用制备的芯片对临床67份疑似繁殖障碍性疾病的病料进行检测,与RT-PCR检测结果符合率均在94%以上,为猪繁殖障碍性疾病的检测提供了理想的检测方法。

    2016年09期 v.36;No.237 1469-1475页 [查看摘要][在线阅读][下载 1245K]
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  • 重组猪细小病毒VP2基因的猪伪狂犬病毒rPRV-VP2株的构建及纯化

    付朋飞;乔涵;杨兴武;张宇;王林青;郭晓庆;潘鑫龙;陈红英;

    参考GenBank中登录的猪细小病毒(PPV)(M38367.1)基因序列,设计1对可以扩增出约1.6kb PPV VP2基因片段的特异性引物,上、下游引物的5′端均引入BamHⅠ酶切位点,PCR扩增得到VP2目的片段后,连接到pMD18-T载体中得到重组质粒pMD-VP2。取本实验室构建的含绿色荧光蛋白标记基因的伪狂犬病毒(PRV)通用转移质粒pG和构建好的pMD-VP2质粒,用BamHⅠ对质粒pG和pMD-VP2进行酶切,然后用CIAP对酶切产物进行去磷酸化处理,纯化回收后将VP2基因插入pG质粒中获得重组伪狂犬病毒转移质粒pGVP2。用脂质体转染法将PRV HB-98株全基因组与质粒pGVP2共转染ST细胞,得到携带有PPV VP2外源抗原基因和绿色荧光蛋白标记基因的重组伪狂犬病毒rPRV-VP2株。结合VP2基因PCR扩增和绿色荧光观察,经5轮病毒空斑纯化得到了纯化的重组病毒rPRV-VP2株。

    2016年09期 v.36;No.237 1476-1483页 [查看摘要][在线阅读][下载 3041K]
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  • 2014—2015年我国部分省份猪流行性腹泻病毒S基因的遗传变异分析

    王飞;陈小芬;苏丹萍;宋亚兵;焦臣鹏;陈瑞爱;贺东生;

    2010年以来,猪流行性腹泻肆虐我国的养猪业,给养猪业造成了严重的经济损失。为分析PEDV在我国最新的遗传变异情况,本试验对2014—2015年在7个省份分离的9株PEDV毒株的S基因进行克隆和测序,并将其分别与疫苗株、中国2010年前经典毒株、中国2010—2013年出现的毒株及韩国、美国近年来毒株进行S基因序列比对、分析。结果发现:9株PEDV S基因核苷酸同源性为98.4%~99.5%;与疫苗株和中国2010年前经典毒株相比核苷酸同源性为93.4%~96.2%;与中国、韩国、美国近年来暴发的毒株相比核苷酸同源性为97.4%~99.2%。遗传进化树显示:我国常用的疫苗毒株CV777处于G1组,这9株毒株S基因均位于G2组,说明我国当前流行毒株与疫苗株和早期经典毒株的亲缘性相去较远。序列比对表明现阶段PEDV S基因已发生较大变异,存在高度相似的缺失,插入和变异,且在中和表位区域存在多处变异,可能降低常规疫苗的免疫保护作用。

    2016年09期 v.36;No.237 1484-1488页 [查看摘要][在线阅读][下载 395K]
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  • 猪流行性腹泻病毒S1基因的截段克隆表达及其在卵黄抗体制备上的应用

    刘政龙;柴家前;王金良;庄金秋;李书光;沈志强;

    通过RT-PCR技术扩增了猪流行性腹泻病毒(porcine epidemic diarrhea virus,PEDV)S1截段基因序列,将扩增的S1基因截段克隆到原核表达载体pET-32α(+)中,构建了重组表达质粒pET-32α-S1,经测序鉴定正确后,转化至感受态细胞BL21(DE3)中,并进行IPTG诱导表达。结果显示:重组菌可表达相对分子质量为45 000的融合蛋白,蛋白表达量较高;Western blotting结果显示,表达的S1蛋白能与PEDV阳性血清发生特异性的免疫反应,表明原核表达的S1蛋白具有良好的反应原性;将纯化后的S1蛋白与蜂胶佐剂按比例混合,作为免疫抗原,免疫产蛋鸡,每隔2周免疫1次,共免疫3次,定期利用ELISA方法检测抗体效价水平,琼脂扩散试验抗体效价最高达到1∶64,收集并纯化卵黄抗体(IgY),SDS-PAGE结果分析纯化效果较好;在人工感染仔猪试验中,卵黄抗体试验组的治愈率为100%,说明卵黄抗体对猪流行性腹泻病具有较好的治疗效果。结果表明:表达的重组S1蛋白具有良好的抗原性,作为免疫抗原免疫产生的卵黄抗体具有较高的抗体效价,为进一步研制猪流性腹泻卵黄抗体生物制剂奠定了基础。

    2016年09期 v.36;No.237 1489-1493页 [查看摘要][在线阅读][下载 542K]
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  • 重组痘苗病毒TTVAC7理化特性

    范园园;李一权;张诺娜;邢彬;胡宁宁;韩继成;兰添;李敏;陈爽;李霄;金宁一;

    探讨重组痘苗病毒TTVAC7的理化特性,对重组痘苗病毒活载体疫苗的规模化生产、保存、运输和净化具有一定的指导意义。将重组痘苗病毒TTVAC7和天坛株痘苗病毒VTT经热、酸、碱、乙醚、氯仿、胰蛋白酶、紫外线照射及超声波破碎处理后,接种于BHK-21细胞,通过测定TCID50观察上述理化因子处理前后TTVAC7和VTT毒价的变化,并分析这些理化因子对TTVAC7和VTT的影响。结果显示,TTVAC7经55℃作用15min,VTT经55℃作用30min即可完全被灭活;在pH值3~9的范围内,pH值的变化不会引起TTVAC7和VTT病毒滴度的显著变化;紫外线垂直距离10、30cm照射病毒液60min,不能完全灭活病毒粒子;对氯仿敏感;经1%胰蛋白酶37℃处理60min,TTVAC7和VTT的病毒滴度下降2个滴度以上;对乙醚不敏感;经40、80Hz的非接触式超声处理60min,TTVAC7和VTT的病毒滴度下降低于2个滴度。结果表明,重组痘苗病毒TTVAC7和天坛株痘苗病毒VTT理化性质相似,均不耐高温,耐酸、碱、乙醚、紫外线及超声波,对氯仿和胰蛋白酶敏感。

    2016年09期 v.36;No.237 1494-1500页 [查看摘要][在线阅读][下载 1043K]
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  • 超强马立克氏病病毒的鉴定及病毒Meq基因序列的比较

    龚振华;张康;郭光礼;鱼海琼;王丽萍;于建敏;李金平;侯广宇;王建琳;

    对1例感染超强马立克氏病病毒的病例进行确诊,对感染病毒的Meq基因进行比较分析。采用病理解剖、PCR检测、病毒分离、动物试验和Meq基因序列分析,对感染病毒进行研究。病理解剖结果为病死鸡的肝脏、脾脏、腺胃、肌胃、十二指肠表现为肿瘤病变。PCR检测结果为病死鸡的组织病料感染马立克氏病病毒。病毒分离和动物试验结果证明该感染病毒是1株马立克氏病超强毒株,该病毒可以引起免疫过CVI988疫苗的鸡发病。Meq基因序列分析表明该病毒与7株马立克氏病病毒参考毒株的同源性为98.8%~99.6%,该病毒在Meq的第115、119和176位氨基酸突变同国内流行株,该检测病毒在Meq的第217位氨基酸突变同超超强马立克氏病毒株。结果表明,通过病理解剖、PCR检测、基因序列分析、病毒分离和动物试验,确诊病鸡感染超强马立克氏病病毒。

    2016年09期 v.36;No.237 1501-1506页 [查看摘要][在线阅读][下载 1667K]
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  • 鸭胚成纤维细胞酵母双杂交cDNA文库的构建与鉴定

    程冰花;路云建;刁有祥;王爱华;李秀丽;冯柳柳;赵立媛;颜敏;霍现格;

    为了解与坦布苏病毒(TMUV)E蛋白相互作用的宿主细胞蛋白,本试验制备鸭胚成纤维细胞(DEF)。采用Trizol法提取细胞总RNA,通过LD-PCR技术合成双链cDNA,经CHROMA SPIN TE-400column纯化后,与pGADT7载体连接,利用同源重组的方法克隆到Y187酵母感受态细胞,构建了鸭胚成纤维细胞的cDNA文库。结果显示:构建的文库滴度为3×107 CFU/mL,文库插入的双链cDNA片段为0.5~2.5kb,平均约为1.5kb,符合酵母双杂交筛选的要求。

    2016年09期 v.36;No.237 1507-1510页 [查看摘要][在线阅读][下载 468K]
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  • 运用免疫蛋白质组学方法筛选副猪嗜血杆菌血清4型菌株的免疫反应性蛋白

    王晨燕;周伦江;王隆柏;车勇良;吴学敏;陈如敬;

    选取2株副猪嗜血杆菌血清4型菌株(A、B菌株),采用蛋白提纯和双向电泳技术获得高分辨率的蛋白胶。通过比对蛋白胶和免疫印迹膜上的蛋白反应点,并切取相应蛋白点进行质谱鉴定。根据质谱鉴定结果,菌株A和B有13个相同的蛋白点,其中8个蛋白点是新发现的具有免疫原性的蛋白点,它们分别是二氢硫辛酰胺脱氢酶(DLDH)、dppA、过氧化氢酶(CAT)、蛋白酶(P)、转酮醇酶(TK)、延长因子(EF-Ts)、周质丝氨酸蛋白水解酶(SP)、2,3-二磷酸甘油酸变位酶(BPGM)。在2株副猪嗜血杆菌血清4型菌株中发现有13个相同的免疫反应性蛋白,DLDH、dppA、CAT、P、TK、EF-Ts、SP和BPGM是新发现的免疫原性蛋白,它们作为疫苗候选抗原有待进一步研究。

    2016年09期 v.36;No.237 1511-1515页 [查看摘要][在线阅读][下载 732K]
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  • 禽源空肠弯曲杆菌LOS基因簇多态性及其cstⅡ基因功能

    吕嘉敏;张宗尧;万红;王媚;罗开健;

    对277株禽源空肠弯曲杆菌进行LOS生物合成位点的基因簇进行分类,并以野生菌株CJ018(LOS classB)和CJ050(LOS classA)为模板构建cstⅡ基因突变株,进而用野生菌株及其突变株CJ018△cstⅡ和CJ050△cstⅡ对犬肾上皮细胞(MDCK)、非洲绿猴肾细胞(Vero)和人子宫颈癌细胞(Hela)进行黏附入侵试验。结果显示:89.17%试验菌株的LOS基因簇属于常见的6大类,其中Class A占2.17%、Class B占50.90%、Class C占6.14%、Class D占1.44%、Class E占14.44%、Class F占14.08%。成功运用电击法分别构建cstⅡ基因突变株,而且野生株和突变株CJ对细胞的黏附能力差异不显著(P≥0.062 0),而入侵能力差异显著(P=0.0000)。结果表明:含唾液酸化LOS的C.jejuni入侵细胞的能力显著强于含非唾液酸化LOS的C.jejuni。

    2016年09期 v.36;No.237 1516-1522+1536页 [查看摘要][在线阅读][下载 907K]
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  • 西藏林芝地区藏猪消化道寄生虫流行情况调查

    罗厚强;汪小强;张辉;兰彦芳;邱刚;李家奎;强巴央宗;

    为掌握西藏林芝地区藏猪消化道寄生虫病流行情况,采用寄生虫学完全剖检法、粪便虫卵检查法,对2014年12月—2015年1月在西藏林芝地区112头屠宰藏猪、73份粪便进行寄生虫病流行情况调查。结果显示:共检测出寄生虫11种,隶属于5门、6纲、9目、10科、10属,其中线虫5种,绦虫蚴2种,原虫2种,吸虫1种,棘头虫1种。优势虫种和感染率为细颈囊尾蚴(42.9%)、野猪后圆线虫(38.4%)、棘球蚴(33.0%)、蛔虫(30.4%)、肝片吸虫(26.8%)、食道口线虫(18.8%)、毛首线虫(15.2%)、球虫(15.1%)、结肠小袋纤毛虫(6.8%)、蛭形巨吻棘头虫(5.6%)、六翼泡首线虫(2.7%)。结果表明:林芝地区藏猪胃肠道寄生虫感染普遍,感染率较高。

    2016年09期 v.36;No.237 1523-1526页 [查看摘要][在线阅读][下载 840K]
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  • 瑟氏泰勒虫p33基因与牛IL-18基因的串联表达

    海旭南;宋建臣;李海峰;薛书江;许应天;

    为研究牛IL-18基因对瑟氏泰勒虫p33疫苗的免疫佐剂效应,根据GenBank上已经发表的p33基因序列和牛IL-18基因序列(IL-18)设计2对特异性引物,以瑟氏泰勒虫基因组DNA和pMD-19-T-IL-18质粒DNA为模板,采用SOE-PCR技术将2个基因连接在一起,经BamHⅠ、XhoⅠ双酶切,获得1 416bp的目的基因IL-18-p33,克隆于原核表达载体pGEX-4T-1中,构建了双基因重组表达载体pGEX-4T-1-IL-18-p33,转化大肠杆菌BL21,经IPTG诱导,表达出预期大小为79 000的融合蛋白。Western blotting检测结果显示,该蛋白与瑟氏泰勒虫抗血清呈阳性反应,表明融合蛋白具有反应原性,为进一步研究IL-18对瑟氏泰勒虫p33基因疫苗的免疫佐剂效应奠定了基础。

    2016年09期 v.36;No.237 1527-1530页 [查看摘要][在线阅读][下载 339K]
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人兽共患病

  • 重组牛朊蛋白特异性抗体的制备及鉴定

    赵文杰;杨利峰;王平利;赵琼;梁宏德;赵德明;

    以原核表达后经纯化的重组牛朊蛋白为免疫原,免疫prnp-/-基因敲除鼠。4次免疫后,利用淋巴细胞杂交瘤技术,取脾细胞和SP2/0骨髓瘤细胞进行细胞融合。间接ELISA方法筛选出阳性杂交瘤细胞,采用有限稀释法对阳性杂交瘤细胞进行3次克隆,用间接ELISA筛选出了稳定分泌针对牛重组朊蛋白特异性单克隆抗体的杂交瘤细胞株,命名为5C9D6。Western blotting鉴定结果表明,5C9D6均能特异性识别重组牛朊蛋白、健康牛、BALB/c脑组织匀浆中的PrPc,不识别prnp-/-基因敲除鼠脑组织匀浆液。本试验制备了可与牛、BALB/c鼠反应的单克隆抗体,同时也为牛海绵状脑病的研究及其诊断方法的建立奠定了基础。

    2016年09期 v.36;No.237 1531-1536页 [查看摘要][在线阅读][下载 874K]
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  • 腺病毒介导O型口蹄疫病毒VP1基因在关中奶山羊乳腺上皮细胞中的表达

    贺晓丽;林小湲;刘军;王勃;卓伟伟;张涌;郑月茂;

    构建O型口蹄疫病毒抗原表位VP1的重组腺病毒载体,并在体外和体内培养试验中检测腺病毒介导VP1的表达。利用PCR技术,从原始质粒中扩增VP1基因片段,双酶切后连接载体构建重组穿梭质粒pHBAd-MCMVVP1-GFP,并经磷酸钙沉淀法携带骨架质粒按比例转染HEK293A细胞,获得P1代腺病毒颗粒,经多轮扩增后进行浓缩纯化,获得复制缺陷型腺病毒颗粒,测定病毒滴度。进行体外感染乳腺上皮细胞,通过GFP的荧光表达量确定最佳感染复数。然后用RT-PCR和Western blotting检测感染的乳腺上皮细胞中抗原表位VP1的表达。进一步用纯化的腺病毒通过乳头滴定法感染羊乳腺组织,检测其乳汁中VP1的表达。结果显示,PCR、双酶切和基因测序等结果表明基因扩增和腺病毒载体构建正确,以其感染关中奶山羊乳腺上皮细胞和乳腺组织时,均可检测到VP1蛋白表达。结果表明,成功构建了含VP1基因的重组腺病毒载体,且能够介导VP1基因在体外和体内培养试验中有效表达,为进一步研究纯化分离的VP1蛋白的抗原性并提高抗原优化技术提供基础研究。

    2016年09期 v.36;No.237 1537-1543页 [查看摘要][在线阅读][下载 902K]
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基础兽医学

  • 人羊膜间充质干细胞归巢至小鼠急性损伤肝组织及其致瘤性

    李岩;丛姗;宋瑾;张钰堃;白立恒;曹贵方;

    将小鼠随机分为治疗组和对照组,按20μL/g的剂量腹腔注射10%CCl4溶液,每周2次,连续注射4周,建立小鼠急性肝损伤模型。建模后24h,治疗组尾静脉移植经Dir标记的人羊膜间充质干细胞0.2mL;对照组移植等量未经Dir标记的人羊膜间充质干细胞。使用小动物活体成像系统观察人羊膜间充质干细胞在小鼠体内分布。将NOD/SCID小鼠随机分为3组,试验组注射0.2 mL人羊膜间充质干细胞细胞悬液,阳性对照组注射0.2 mL Hep G2细胞悬液,阴性对照组只注射等量Matrigel和PBS的1∶1混合液。60d后脱颈处死小鼠,观察肿瘤形成情况并进行病理组织学检查。结果显示,活体成像试验发现,人羊膜间充质干细胞移植后2h,全身只有肝脏区域有荧光,人羊膜间充质干细胞移植后1d,肝脏及肺脏附近荧光信号达到最强,移植3d,肺部强荧光消失,肝部附近强荧光仍存在,移植后7~30d,全身各处荧光信号消失,但肝部荧光信号持续存在。体内致瘤试验发现,阳性对照组小鼠有肿瘤形成,而注射人羊膜间充质干细胞的试验组小鼠和阴性对照组小鼠均未观察到肿瘤形成。结果表明,人羊膜间充质干细胞尾静脉移植入急性肝损伤小鼠,可以成功归巢至肝脏并长期定植存在;人羊膜间充质干细胞在体内没有致瘤性,具有一定的临床安全性。

    2016年09期 v.36;No.237 1544-1549页 [查看摘要][在线阅读][下载 1569K]
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  • 表面增强拉曼光谱法研究β受体激动剂在生猪体内代谢与残留

    甘盛;赖青鸟;李志成;韩婷;吴超权;

    探索用表面增强拉曼光谱法检测盐酸克伦特罗等β受体激动剂于给药和停药期间在猪尿液、毛发、粪便和组织中的浓度,为快速检出在饲养和市场流通环节中的瘦肉精提供方法支持。在生猪饲料中以10mg/kg的量添加一种β受体激动剂,并连续喂养14d,然后停止给药,使用正常饲料。在给药期间于l、2、3、4、6、8、10和14d分别采集尿液、毛发和粪便,通过前处理后与表面信号增强剂等体积混合,测定其中的β受体激动剂浓度。停药后每天剪去少量毛发,前处理后测定其中的主药的蓄积浓度。结果显示,样品回收率在94.0%以上,相对标准偏差小于2%。盐酸克伦特罗、硫酸沙丁胺醇、硫酸特布他林、班布特罗、盐酸氯丙那林、富马酸福莫特罗的标准溶液在0.05~50μg/L质量浓度范围呈良好线性关系,定量下限为0.05μg/L;尿液、粪便、毛发样品中在1~50μg/L质量浓度范围呈良好线性关系,定量下限为1μg/L。盐酸莱克多巴胺的标准溶液在0.1~50μg/L质量浓度范围呈良好线性关系,定量下限为0.1μg/L。结果表明,该研究测试方法便捷灵敏,用于β受体激动剂在猪体内代谢分析,以及检测其在猪各组织部位残留情况尤为适宜。

    2016年09期 v.36;No.237 1550-1557页 [查看摘要][在线阅读][下载 672K]
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  • 虎杖苷对镉诱导小鼠肝脏氧化应激及内质网应激蛋白GRP78表达的影响

    林霖;张才;汪纪仓;邱妍;杨自军;

    将32只小鼠随机分成4组:正常对照组、镉组、镉+50mg/kg虎杖苷组、镉+100mg/kg虎杖苷组,于试验第1天,镉组及虎杖苷组小鼠一次性腹腔注射2mg/kg氯化镉(氯化镉的质量浓度为0.2g/L),制造小鼠肝脏氧化应激损伤,虎杖苷组小鼠同时经口给予50、100mg/kg虎杖苷,每日灌胃1次,连续灌胃1周后处死小鼠,统计小鼠肝脏脏器系数;HE染色,观察肝脏组织病理学变化;检测虎杖苷对小鼠肝脏超氧化物歧化酶(superoxide dismutase,SOD)活性、谷胱甘肽过氧化物酶(glutathione peroxidase,GSH-Px)活性及丙二醛(malonaldehyde,MDA),免疫组化检测各组小鼠肝组织Bax、Caspase-3及葡萄糖调节蛋白(GRP78)蛋白表达。结果显示:与正常对照组比较,镉组小鼠肝脏脏器系数显著升高,部分肝细胞发生变性、坏死,而给予虎杖苷组小鼠肝细胞损伤程度均明显减轻;与正常对照组比较,镉组小鼠肝组织SOD及GSH-Px活性均显著降低,MDA含量均显著升高(P<0.01)。与镉组比较,50、100mg/kg虎杖苷组小鼠肝组织SOD及GSH-Px活性均明显提高,差异显著(P<0.05),而50、100mg/kg虎杖苷保护组肝脏MDA含量均明显降低,差异显著(P<0.05)。免疫组化检测结果显示,镉组小鼠肝脏组织Bax、Caspase-3及GRP78蛋白表达与正常对照组比较均显著增强,差异显著(P<0.01),而虎杖苷保护组小鼠肝细胞Bax、Caspase-3及GRP78蛋白表达与镉组比较均显著降低(P<0.05)。结果表明:虎杖苷能减轻镉致小鼠肝细胞氧化应激损伤,并可能通过减弱镉诱导的肝细胞内质网应激强度降低细胞凋亡的产生。

    2016年09期 v.36;No.237 1558-1563页 [查看摘要][在线阅读][下载 1756K]
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  • 共轭亚油酸对小鼠血清瘦素、内脂素水平及生殖的影响

    崔亚利;李三吓;李同洲;李敏;陈宝江;

    本试验旨在探讨共轭亚油酸对小鼠生殖的影响及其机理。购入60只6~7周龄的KM雌性小鼠,随机分为2组。对照组饲喂添加了1.5%花生油的繁殖颗粒料,试验组饲喂添加了1.5%花生油和1.5%共轭亚油酸的繁殖颗粒料。酶联免疫法测定不同生殖周期血清瘦素和内脂素浓度,常规石蜡切片法制备卵巢切片,观察卵巢的组织学结构并计数次级卵泡数量。每组各6只妊娠后饲养至产仔。结果显示:共轭亚油酸极显著降低了间情期、发情期、妊娠5d小鼠的血清瘦素浓度(P<0.01),显著降低了妊娠9d瘦素浓度(P<0.05);共轭亚油酸极显著降低了间情期、发情期、妊娠9d的血清内脂素浓度(P<0.01),显著降低了妊娠5d时血清内脂素浓度(P<0.05);共轭亚油酸极显著增加发情期次级卵泡的数量和产仔数(P<0.01)。由此可见,共轭亚油酸可能通过调节血清瘦素和内脂素水平,增加发情期次级卵泡数量和胚胎数量,提高小鼠的生殖能力。

    2016年09期 v.36;No.237 1564-1567+1581页 [查看摘要][在线阅读][下载 136K]
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  • 苦豆草提取物对奶牛乳房炎致病菌的体外抑菌作用

    叶文初;袁富威;班贇;张洁;张耀相;刘宇;郭文柱;杨珍;李引乾;

    从陕西宝鸡某奶牛场患乳房炎的奶牛中采取奶样46份,用于分离与鉴定致奶牛乳房炎的病原菌。采用牛津杯法和试管二倍稀释法对引起奶牛乳房炎致病菌的体外抑菌作用。结果显示:本试验分离鉴定出金黄色葡萄球菌、停乳链球菌、表皮葡萄球菌及致病性大肠杆菌;苦豆草提取物对致奶牛乳房炎的病原菌(金黄色葡萄球菌、停乳链球菌、表皮葡萄球菌、致病性大肠杆菌)的最低抑菌质量浓度(MIC)分别为2.340、0.585、2.340、4.687mg/L,最低杀菌质量浓度(MBC)均为9.375mg/L。结果表明:苦豆草提取物在体外具有明显的抑菌作用。

    2016年09期 v.36;No.237 1568-1571页 [查看摘要][在线阅读][下载 128K]
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  • 咖啡酸对LPS诱导的犬子宫内膜上皮细胞活率下降的影响

    郭文娟;钱婉莹;林嘉宝;李晶;施振声;钟友刚;张勇;

    通过研究不同浓度的咖啡酸对脂多糖(LPS)诱导的犬子宫内膜上皮细胞活率下降的影响,探讨咖啡酸的抗炎作用效果,为宠物临床治疗犬子宫内膜炎的新药研发提供依据。根据LPS剂量筛选试验确定LPS诱导炎症模型的浓度;通过咖啡酸药物毒性试验,根据抑制率IR≤10%,选择低、中、高3个咖啡酸剂量组;用噻唑蓝比色法(MTT)测定不同剂量组的咖啡酸对LPS诱导的细胞活率下降的影响。结果显示,50mg/L LPS作用于子宫内膜上皮细胞12h能够引起细胞活率的显著下降(P<0.05);咖啡酸作用于子宫内膜上皮细胞12h后,与对照组相比,1μg/L~200mg/L组细胞活率均没有显著差异(P>0.05),且IR<10%,500 mg/L组有极显著性差异(P<0.01),且IR>40%;作用24h后,1μg/L~25mg/L组细胞活率没有显著差异(P>0.05),IR<10%,50~100mg/L组有显著差异(P<0.05)且IR>10%,200、500mg/L组有极显著差异(P<0.01),IR>50%;咖啡酸中剂量组(50mg/L)和咖啡酸高剂量组(100mg/L)对LPS引起的细胞的活率具有明显的提高作用。结果表明,咖啡酸对LPS诱导的子宫内膜细胞活力下降具有一定的保护作用,且在安全范围内,随着药物浓度升高,保护作用增强。

    2016年09期 v.36;No.237 1572-1576页 [查看摘要][在线阅读][下载 601K]
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临床兽医学

  • 吉林省某猪场新发猪葡萄球菌引起的化脓性肺炎

    王明月;王新平;郭昌明;邢泽黎;朱利塞;鲁海冰;盖小春;王方;

    对吉林省某猪场暴发的一种以呼吸困难、发绀和腹泻为主要临床特征,剖检以化脓性肺炎和纤维素性胸膜肺炎和腹膜炎为病变特征的疫病进行了深入研究。通过对送检病猪体内的实质器官和血液中分离出的葡萄球菌进行形态学鉴定、分离培养、生化特性鉴定和分子生物学鉴定,发现所分离的菌株为猪葡萄球菌,并将其命名JLHN15。由猪葡萄球菌引起猪化脓性肺炎或胸膜肺炎在国内外尚未见有报道,应引起国内临床兽医工作者重视。

    2016年09期 v.36;No.237 1577-1581页 [查看摘要][在线阅读][下载 928K]
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  • 急性冷应激对大鼠肝脏miRNA的影响

    郭文晋;甄莉;张婧馨;王迪;连帅;马莉;沈欢欢;杨焕民;

    将SPF级雄性Wistar大鼠随机分成冷应激组(4±0.05)℃和常温对照组(24±0.05)℃,再对2组大鼠肝脏中的6个miRNA进行qRT-PCR分析。结果显示:大鼠肝脏中6个miRNA的表达量均出现极显著差异(P<0.01),说明急性冷刺激对大鼠肝脏中的miRNA表达量有极显著(P<0.01)的影响,为今后的分子冷应激相关研究提供理论基础。

    2016年09期 v.36;No.237 1582-1585页 [查看摘要][在线阅读][下载 449K]
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  • 超声弹性成像技术鉴别犬肿块良恶性的应用

    魏通;郭玉堃;黄静;赫亚歌;王朝阳;邓立新;

    选取宠物临床符合要求的犬肿块病例108例进行超声影像学研究,然后进行组织病理切片检查,最后对结果进行统计学分析。研究结果为应用超声弹性成像技术诊断肿块良恶性的准确率为94.4%(102/108);应用传统超声技术(即二维灰阶超声、彩色血流多普勒超声)判定肿块良恶性的准确率分别为33.3%、55.5%,传统超声技术与超声弹性成像技术结果比较差异极显著(P<0.01)。结果表明,超声弹性成像技术在鉴别犬肿块良恶性方面与传统超声技术相比有着明显的特异性和准确性,该技术可作为今后宠物临床犬肿块良恶性的一种重要鉴别方法。本试验为提升宠物临床肿块性疾病的鉴别诊断水平有着一定的参考价值。

    2016年09期 v.36;No.237 1586-1592+1602页 [查看摘要][在线阅读][下载 2103K]
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动物科学

  • 长白山野杂猪与东北民猪肉质性状的比较

    娄安钢;李钟淑;

    在相同的条件下对长白山野杂猪与东北民猪进行饲养、屠宰,待肌肉成熟后,对两种猪胴体指标(胴体质量、眼肌面积和背膘厚)、肉质的物理指标(pH值、肉色、滴水损失、蒸煮损失和剪切力)、常规化学指标(粗蛋白、粗脂肪、胆固醇、水分和灰分)及氨基酸和肌内脂肪酸组成及含量进行了测定。结果显示,胴体指标在长白山野杂猪和东北民猪肉中无显著性差异(P>0.05);长白山野杂猪肉中剪切力显著低于东北民猪(P<0.05);长白山野杂猪肉中的粗脂肪含量显著高于东北民猪(P<0.05);氨基酸在长白山野杂猪和东北民猪肉中无显著性差异,但在长白山野杂猪中均有增高的趋势(P>0.05);长白山野杂猪肉脂肪酸中的C8:0、C10:0、C12:0、C14:0、C15:0、C16:0、C16:1、C18:1T、C18:1C含量显著高于东北民猪(P<0.05)。结果表明,长白山野杂猪的肉质优于东北民猪,可满足人们对高品质猪肉的需求,表现出了一定的杂交优势。

    2016年09期 v.36;No.237 1593-1596页 [查看摘要][在线阅读][下载 108K]
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  • 湘西黄牛超数排卵和冲胚效果与卵巢Figla基因表达水平之间的关系

    易康乐;雷虹;燕海峰;李昊帮;李剑波;李晟;段洪峰;高帅;李纯锦;周虚;

    利用real-time PCR和原位杂交技术分析了Figla(factor in the germline alpha)基因在湘西黄牛卵巢中的相对表达量与定位表达情况。结果显示:能冲出较多优质胚胎的湘西黄牛个体,卵巢组织中Figla基因mRNA水平的表达量要显著高于对照组(P<0.05)。Figla基因mRNA在牛卵巢组织中的初级卵泡、次级卵泡和成熟的有腔卵泡都有表达。而且Figla基因在有腔卵泡的卵母细胞中的胞质中表达,但在细胞核中没有表达。结果说明:湘西黄牛超数排卵和冲胚效果与卵巢Figla基因表达水平之间存在一定的关系,Figla基因可能是卵泡和早期胚胎发育的双重关键基因。

    2016年09期 v.36;No.237 1597-1602页 [查看摘要][在线阅读][下载 997K]
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  • 复合添加剂缓解出栏肉牛运输应激效果评价

    连帅;司鸿飞;王迪;张婧馨;郭文晋;甄莉;杨焕民;

    为研究VC、VE、γ-氨基丁酸(γ-aminobutyric acid,GABA)、KHCO3抗应激复合添加剂对出栏肉牛抗应激的作用效果。选择16头健康、体况相近、体质量(430±20)kg的14月龄杂交肉牛,随机分为4组:A组(饲喂添加剂运输)、B组(饲喂添加剂不运输)、C组(不饲喂添加剂运输)、D组(不饲喂添加剂不运输),A和B组每头牛添加VC、VE、GABA、KHCO3的剂量分别为4、2、1.2、6g/d,每日在饲料中添加1次,连续饲喂7d后进行8h、50~60km/h、2℃和相对湿度51%的公路运输,之后进行血清细胞因子、激素以及HSP70的检测。结果显示,运输应激后C组的IL-2浓度显著高于A、B和D三组(P<0.05);A和C组的IL-4、IL-10浓度显著低于B和D两组(P<0.05),A组与C组相比显著升高(P<0.05);A和C组的TNF-α浓度显著低于B和D两组(P<0.05);A和C组的血清中ACTH浓度显著高于B和D两组(P<0.05),A组与C组相比血清中ACTH浓度显著降低(P<0.05);C组的血清中GC浓度显著高于A、B和D三组(P<0.05);A和C组HSP70(热休克蛋白70)mRNA表达量显著高于B和C组(P<0.05),A组显著低于C组(P<0.05);A和C组HSP70蛋白显著高于B、D组(P<0.05)。结果表明,8h、50~60km/h、2℃和相对湿度51%公路运输后能引起出栏肉牛出现应激反应,影响机体免疫系统;抗应激添加剂可以缓解出栏肉牛由运输引起的应激。

    2016年09期 v.36;No.237 1603-1607页 [查看摘要][在线阅读][下载 136K]
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  • 植物乳杆菌DPP8对蛋鸡生产性能、血清生化指标和蛋品质的影响

    余祖华;丁轲;丁盼盼;李旺;李元晓;刘一尘;贾艳艳;曹平华;王玉琴;赵战勤;

    选取300只43周龄罗曼粉蛋鸡,随机分为5组,每组3个重复,每个重复20只鸡,对照组(Ⅰ组)饲喂基础日粮,试验Ⅱ、Ⅲ、Ⅳ、Ⅴ组在饲喂基础日粮基础上分别添加2.0×106、2.0×107、2.0×108、2.0×109 CFU/g的L.plantarum DPP8制剂。预试期1周,试验期9周。结果显示:(1)Ⅱ组和Ⅲ组的产蛋率显著高于对照组(P<0.05);Ⅳ组的料蛋比显著低于其余各组(P<0.05)。(2)Ⅲ组的血钙水平显著高于对照组(P<0.05),血糖水平极显著低于对照组(P<0.01)显著低于Ⅱ组(P<0.05);与对照组相比,Ⅳ组血清的钙、磷水平均显著增加(P<0.05),总白蛋白水平显著降低(P<0.05),血糖水平极显著降低(P<0.01);Ⅴ组的血磷水平显著增加(P<0.05),血钙水平极显著增加(P<0.01),血糖含量显著降低(P<0.05);Ⅲ组的血清总白蛋白水平显著低于其余各组(P<0.05)。(3)与对照组相比,各试验组的蛋黄颜色、蛋白高度和哈氏单位均极显著提高(P<0.01);Ⅲ组和Ⅳ组的蛋壳厚度显著提高(P<0.05),Ⅴ组的蛋壳厚度极显著提高(P<0.01)。结果表明,饲料中添加一定量的L.plantarum DPP8具有改善蛋鸡生产性能和提高蛋鸡蛋品质的作用,其中按照2.0×108 CFU/g剂量添加效果最好。

    2016年09期 v.36;No.237 1608-1612+1642页 [查看摘要][在线阅读][下载 150K]
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  • 不同蛋白水平饲粮对肉兔骨骼肌发育及相关因子表达的影响

    高琴;隋啸一;李福昌;刘磊;

    体况相近的断奶伊拉肉兔30只,随机分为3组:高蛋白饲粮组(HPD)、中蛋白饲粮组(MPD)和低蛋白饲粮组(LPD),每组10个重复,每个重复1只兔。结果显示:随着饲粮中蛋白含量的增加,家兔的体质量、胴体质量、前腿质量、后腿质量、前腿质量/体质量和后腿质量/体质量显著增加(P<0.05);与MPD比,HPD显著增加血浆中总蛋白、尿素和胰岛素的含量(P<0.05);与MPD和LPD相比,HPD组家兔显著增加了骨骼肌中胰岛素样生长因子1(IGF1)、IGF1R、肌原性决定因子(MYOD)、肌原因子5(MYF5)、肌生成抑制蛋白(MSTN)、MYF5和包WW包含体E3泛素蛋白酶体连接酶1(WWP)的mRNA水平(P<0.05)。从整体上看,饲粮中蛋白水平能显著影响家兔骨骼肌发育。高蛋白饲粮促进骨骼肌发育可能与IGF1、MYOD和MYF5基因有关;低蛋白饲粮抑制骨骼肌发育可能与IGF1的低表达有关。

    2016年09期 v.36;No.237 1613-1618页 [查看摘要][在线阅读][下载 374K]
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综述

  • 肠道菌群与中草药有效成分代谢的相互影响的研究进展

    黄恩福;黄柳梅;阮记明;张帆帆;梁海平;黄建珍;

    为解决抗生素等人工合成药物导致畜禽的耐药性、药物残留等问题,研究人员发现中草药可以作为抗生素替代品之一。为此,中草药在畜牧业生产及科学研究方面受到广泛关注。存在于动物体内的肠道菌群对中草药有效成分的分解代谢转化、吸收利用有着重要作用。因此,深入了解肠道菌群的分布及组成,以及对中草药有效成分的代谢作用,有利于兽医在临床上用药策略进行优化。本文就肠道菌群对中草药有效成分的分解代谢及中草药对肠道菌群的相互影响进行综述。

    2016年09期 v.36;No.237 1619-1623页 [查看摘要][在线阅读][下载 272K]
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  • 鸡白痢沙门菌研究进展

    殷俊磊;李求春;耿士忠;潘志明;焦新安;

    鸡白痢沙门菌是鸡白痢的病原,具有高度适应专一宿主的特点。它可引起雏鸡的急性全身性感染,发病率和病死率极高;成年鸡被感染后可引起体质量下降、产蛋率和孵化率降低、组织病变、白痢和生殖道畸形等,给很多国家的养鸡业带来巨大危害,并引起严重的经济损失。为了更好的预防和控制、甚至最终净化该病,需要对鸡白痢沙门菌进行深入的研究。本文从病原学及其基因组特征、流行病学、致病性及毒力基因、检测方法和防控措施等方面介绍了鸡白痢沙门菌的研究进展,并对其研究趋势进行了展望。

    2016年09期 v.36;No.237 1624-1629页 [查看摘要][在线阅读][下载 156K]
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  • 波状芽管蠕孢属疯草内生真菌研究进展

    余永涛;赵清梅;何生虎;白晓南;

    疯草是世界范围分布的豆科棘豆属和黄芪属有毒植物的统称,其主要毒性成分为吲哚里西啶类生物碱——苦马豆素。放牧家畜采食疯草会发生疯草中毒病,导致瘫痪、不孕、流产、生产性能下降、死亡等,造成的经济损失巨大。波状芽管蠕孢菌是疯草中普遍存在的一类内生真菌,该菌与疯草中苦马豆素的合成和疯草的毒性紧密相关。抑制或阻断波状芽管蠕孢菌在疯草中的传播和苦马豆素合成,将有望降低或消除疯草的毒性。本文将对波状芽管蠕孢属疯草内生真菌的种属分类、与疯草毒性的关系、传播机制、SW的合成机理等方面的研究进行综述,为疯草内生真菌相关研究的开展和从控制疯草内生真菌角度防控动物疯草中毒病提供思路。

    2016年09期 v.36;No.237 1630-1637页 [查看摘要][在线阅读][下载 173K]
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  • 日粮蛋白源调控仔猪氮营养素利用的研究进展

    王贵富;孙泽威;

    本文就蛋白源饲料对仔猪生长性能、蛋白质消化吸收、血清氨基酸含量以及小肽、氨基酸相关转运载体的影响作一综述,并对今后蛋白源饲料的研究作出展望。

    2016年09期 v.36;No.237 1638-1642页 [查看摘要][在线阅读][下载 129K]
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  • 纳米氧化锌对生物体的毒性及其机制

    李慧民;孔涛;

    纳米氧化锌是一种新型多功能锌源。本文介绍了纳米氧化锌的暴露途径、纳米氧化锌毒性作用的可能靶细胞及其产生毒性效应的机理,展望了纳米氧化锌的发展前景。

    2016年09期 v.36;No.237 1643-1647页 [查看摘要][在线阅读][下载 138K]
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吉林大学建校70周年人物专栏