预防兽医学

  • 猪血凝性脑脊髓炎病毒重组N蛋白间接ELISA检测方法的建立与应用

    单长见;张竞;尹洋;吕晓玲;李姿;兰云刚;贺文琦;高丰;

    为建立检测猪血凝性脑脊髓炎病毒(porcine hemagglutinating encephalomyelitis virus,PHEV)血清抗体的间接ELISA方法,构建了高效表达PHEV核衣壳蛋白(N)的重组质粒(pET28a-N),Western blot检测该重组蛋白具有较好的免疫原性。以纯化的N重组蛋白作为包被抗原,通过方阵试验确定了抗原的最适包被浓度为2mg/L,酶标二抗的最佳稀释倍数为1∶10 000,建立了用于PHEV抗体检测间接ELISA方法。此外,用该法(N-ELISA)对天津市地区采集到的200份猪血清样品进行检测,阳性检出率为83.5%,与前期工作中建立的全病毒作为包被抗原的间接ELISA诊断方法 (HEV-ELISA)检测结果的符合率为90.91%。结果表明:以重组N蛋白为包被抗原所建立的用于PHEV血清抗体检测的方法能够用于检测PHEV感染及相关的流行病学调查。

    2016年11期 v.36;No.239 1813-1817页 [查看摘要][在线阅读][下载 451K]
    [下载次数:150 ] |[网刊下载次数:0 ] |[引用频次:9 ] |[阅读次数:210 ]
  • 高致病性猪繁殖与呼吸综合征病毒疫苗株JXA1-R感染性克隆的构建与鉴定

    韩焘;张硕;吴佳俊;周智;李晓霞;汪葆玥;翟新验;

    本研究运用反向遗传操作技术平台构建了高致病性猪繁殖与呼吸综合征病毒(HP-PRRSV)JXA1-R疫苗株的感染性克隆,经RNA转染BHK-21细胞后成功拯救了病毒,对拯救病毒进行了病毒生物学特性研究,并用该病毒免疫30日龄仔猪进行免疫原性试验。结果表明该感染性克隆与HP-PRRSV JXA1-R疫苗株具有相同的生物学特性,能够很好的诱导猪体产生免疫抗体,并可保护免疫猪抵抗HP-PRRSV NVDC-JXA1强毒株的攻击。为进一步研究HP-PRRSV JXA1-R株疫苗的保护机制以及研发新一代基因工程疫苗奠定了基础。

    2016年11期 v.36;No.239 1818-1822页 [查看摘要][在线阅读][下载 1192K]
    [下载次数:213 ] |[网刊下载次数:0 ] |[引用频次:4 ] |[阅读次数:295 ]
  • 广东部分地区猪流行性腹泻病毒流行病学调查

    白小磊;崔进;崔甜甜;陈耀;石庆伟;冯嘉萍;王林川;张桂红;

    本试验对临床上猪腹泻相关的病原进行了检测并对广东部分地区的猪流行性腹泻病毒(porcine epidemic diarrhea virus,PEDV)展开了分子流行病学的调查。对采集自广东地区的14个规模化猪场的19份腹泻病料进行了RT-PCR检测,并对检出的12株PEDV的COE、ORF3、M以及N基因进行测序和遗传进化分析。结果显示,临床的腹泻案列多为混合感染所致,检出的主要病原有猪传染性胃肠炎病毒(TGEV)、PEDV、猪嵴病毒(PKV)、猪A群轮状病毒(PoRV)以及牛流行性腹泻病毒(BVDV)。与参考毒株CV777相比12株PEDV的COE、ORF3、M、N基因均存在不同程度、不同位点的氨基酸突变。COE、ORF3、M以及N基因的遗传进化分析显示:广东地区的12株PEDV毒株属于同一个分支彼此间的亲缘关系较近但与CV777疫苗毒株以及2012年之前广东地区分离的毒株CHGD-01、CH-GDGZ-2012、GD-1以及GD-A等毒株分属于2个不同的分支,亲缘关系相对较远。结果表明,广东地区现阶段流行的PEDV优势毒株与2012年之前相比可能已经发生了改变,CV777疫苗毒株的免疫效果如何还有待于通过更多的临床实验来验证。

    2016年11期 v.36;No.239 1823-1828+1863页 [查看摘要][在线阅读][下载 1162K]
    [下载次数:402 ] |[网刊下载次数:0 ] |[引用频次:28 ] |[阅读次数:176 ]
  • 新型重组减毒鸡白痢沙门菌ΔcrpΔasdC79-13(pcD-asd)平衡致死系统的构建及其特性

    翟崇凯;郁川;程相朝;余祖华;何雷;廖成水;张春杰;李银聚;田文静;

    为开发新型重组减毒鸡白痢沙门菌口服活疫苗载体。本研究以pcDNA3.1-Zeo(+)质粒为基础,用沙门菌asd基因替代其氨苄抗性基因Amp,构建不含抗性基因的真核互补质粒pcD-asd;再将互补质粒pcD-asd电转入沙门菌ΔcrpΔasdC79-13,构建ΔcrpΔasdC79-13(pcD-asd)平衡致死系统,研究其生物学特性,进一步将报告基因EGFP克隆入pcD-asd,构建重组菌株ΔcrpΔasdC79-13(pcD-asd-EGFP),感染鸡胚成纤维(CEF)细胞,Western blot分析该系统递呈外源抗原的能力。PCR、酶切及测序结果表明ΔcrpΔasdC79-13(pcD-asd)平衡致死系统构建成功;生物学特性鉴定结果表明,其血清型与亲本株ΔcrpΔasdC79-13及野生株C79-13保持一致;其生化特性与亲本株基本相近,但与野毒株相比发生明显变化;生长速度也更为缓慢,对氨苄抗生素敏感;重组菌株ΔcrpΔasdC79-13(pcD-asd)的LD50较野生株C79-13降低了3.4×104倍;Western blot结果发现,重组菌株感染CEF细胞后,可表达大小约为27 000EGFP蛋白。以上结果证实,本研究成功构建了新型重组减毒鸡白痢沙门菌ΔcrpΔasdC79-13(pcD-asd)株,其能够有效递呈外源抗原,该重组菌株有潜力作为安全、稳定、高效表达外源基因的口服重组活疫苗载体。

    2016年11期 v.36;No.239 1829-1835页 [查看摘要][在线阅读][下载 763K]
    [下载次数:100 ] |[网刊下载次数:0 ] |[引用频次:2 ] |[阅读次数:218 ]
  • 基因重组型番鸭细小病毒FJM3的全基因组特征

    万春和;傅秋玲;陈翠腾;傅光华;陈红梅;程龙飞;施少华;黄瑜;

    从1例未免疫雏番鸭细小病毒活疫苗与鹅细小病毒活疫苗的临床病死雏番鸭脏器中成功分离到1株番鸭细小病毒(FJM3株)。为明确其基因组特征,运用PCR方法,扩增出番鸭细小病毒FJM3株全基因组。结果表明,FJM3株基因组全长为5017nt,其基因组结构和经典番鸭细小病毒参考毒株一致。序列比对结果表明,FJM3株全基因组序列与GenBank中登录的经典MDPV参考株(FM株)核苷酸序列同源性为94.0%,与番鸭源GPV参考株(Y株)核苷酸序列同源性为85.6%。全基因组遗传进化分析表明,FJM3株处于MDPV遗传进化分支;VP1基因遗传分析表明,FJM3株处于经典MDPV遗传进化分支;VP3遗传进化表明,FJM3株处于GPV遗传进化分支。对FJM3株和参考株(FM株、Y株和SYG61v)进行遗传重组分析表明,该毒株于存在2处MDPV与GPV的基因重组现象。

    2016年11期 v.36;No.239 1836-1841页 [查看摘要][在线阅读][下载 1143K]
    [下载次数:159 ] |[网刊下载次数:0 ] |[引用频次:7 ] |[阅读次数:321 ]
  • 鸭坦布苏病毒HN1株囊膜E蛋白抑制肽的筛选及鉴定

    李小康;张巫凡;杨静;郭香玲;王臣;

    鸭坦布苏病毒(DTMUV)是一个新发现的病毒,主要引起鸭产蛋严重下降为特征,为鉴定与DTMUV囊膜E蛋白特异性结合的多肽,本试验利用噬菌体展示技术以DTMUV HN1株E蛋白为靶标,进行随机12肽库3轮筛选,结合ELISA试验和竞争抑制试验,成功筛选了2个能够与DTMUV HN1株E蛋白特异性结合的多肽。测序结果显示,其氨基酸序列分别为:HWSTRQGSTRWN(P3-12)和THRSWQGNSWYM(P8-12)。进一步分析多肽P3-12和P8-12对DTMUV在鸭胚成纤维细胞增殖方面的影响,结果显示,E蛋白抑制肽P3-12和P8-12本身对鸭胚成纤维细胞的增殖无明显影响,不同质量浓度的的抑制肽P3-12和P8-12(0.02、0.2、2、20mg/L)均能显著降低DTMUV在鸭胚成纤维细胞中的病毒滴度和病毒拷贝数,以上结果表明,抑制肽P3-12和P8-12均能抑制DTMUV在鸭胚成纤维细胞的增殖,本试验为进一步探明DTMUV与宿主的相互作用及抗病毒制剂的开发提供了理论依据。

    2016年11期 v.36;No.239 1842-1846页 [查看摘要][在线阅读][下载 1186K]
    [下载次数:98 ] |[网刊下载次数:0 ] |[引用频次:3 ] |[阅读次数:190 ]
  • 坦布苏病毒在种鸭中的垂直传播

    张英;赵丹丹;刁有祥;陈浩;提金凤;张璐;杨国平;

    为探究坦布苏病毒(Tembusu virus,TMUV)能否垂直传播,57只38周龄的健康樱桃谷种鸭分为A、B、C 3组,每组15只母鸭、4只公鸭。A组母鸭、B组公鸭静脉接种坦布苏病毒TMUV-SDSG株2.5 mL/只(ELD50=10-2.37/0.2mL);C组接种等量生理盐水。各组隔离饲养,收集种蛋进行孵化。无菌采集孵化不同阶段的死亡鸭胚的胚脑、尿囊液或卵黄膜以及新生雏鸭和死亡弱雏的脑组织,进行病毒分离和半套式RT-PCR检测。结果显示,在种蛋的卵黄膜,死亡鸭胚的尿囊液、卵黄膜和胚脑,新生雏鸭和死亡弱雏的脑组织中均能检测并分离到TMUV。其中,A组种蛋、死亡鸭胚、1日龄雏鸭、15日龄雏鸭和死亡雏鸭中TMUV阳性率分别为60%,67.44%,35.48%,16.67%和100%。B组种蛋、死亡鸭胚、1日龄雏鸭、15日龄雏鸭和死亡雏鸭中TMUV阳性率分别为50%,51.35%,46.88%,10%和71.43%。C组各样品中均未检测到TMUV。结果表明,TMUV可在种鸭中经种蛋垂直传播。

    2016年11期 v.36;No.239 1847-1852页 [查看摘要][在线阅读][下载 1599K]
    [下载次数:204 ] |[网刊下载次数:0 ] |[引用频次:18 ] |[阅读次数:199 ]
  • 2011—2013年7株鸽源新城疫病毒的生物学特性鉴定及遗传进化分析

    赵振振;朱杰;许海旭;胡顺林;刘秀梵;

    为了解目前鸽群中新城疫病毒(NDV)的流行情况,本研究对2011—2013年分离到的7株鸽源NDV进行了部分生物学特性的测定和遗传进化分析。结果显示,7株NDV的F蛋白裂解位点均为112 RRQKRF117,呈典型强毒特征,但7株病毒的MDT值范围较大,从50~114h不等;ICPI从0.98~1.51不等。遗传进化分析结果表明,分离到的7株鸽源NDV分离株之间的同源性较高,且均属于VIb亚型,但与目前广泛使用的疫苗株Lasota的遗传距离较远,因此有必要研制针对鸽源VIb亚型NDV的新型疫苗。

    2016年11期 v.36;No.239 1853-1857页 [查看摘要][在线阅读][下载 444K]
    [下载次数:132 ] |[网刊下载次数:0 ] |[引用频次:6 ] |[阅读次数:228 ]
  • 江苏羊群各型流感病毒抗体的血清学检测与分析

    王钟毓;李文良;毛立;郝飞;杨蕾蕾;张纹纹;姜平;江杰元;

    为了解羊群是否存在流感病毒的感染,采用血凝抑制试验对江苏省7个县市不同羊场的2012—2014年323份羊血清中不同亚型(H1、H5、H7、H9)流感病毒抗体进行检测。结果显示,羊的H9亚型和H5亚型(Re-4株)抗体阳性率分别为95%和71.7%;H7亚型抗体阳性率为25.5%;甲型H1N1流感病毒抗体阳性率为14.7%;H5亚型(Re-5株和Re-6株)抗体阳性率均为0。结果表明,不同亚型流感病毒在羊群中均普遍存在,流行情况各有不同,应对其流行病学和公共卫生意义给予重视。

    2016年11期 v.36;No.239 1858-1863页 [查看摘要][在线阅读][下载 999K]
    [下载次数:60 ] |[网刊下载次数:0 ] |[引用频次:1 ] |[阅读次数:204 ]
  • 乌苏里貉IgG Fc片段克隆表达及免疫交叉源性分析

    赵翠;刘玲红;郭树源;庞晓茹;宋道祯;付石军;常维山;

    为研究乌苏里貉IgG Fc与犬IgG间的免疫交叉源性,本研究采用斑点酶联免疫吸附法(dot-ELISA)初步确定犬与乌苏里貉血清抗体间存在较强免疫交叉反应源性;通过RT-PCR成功克隆乌苏里貉IgG Fc片段基因,构建pcDNA3.1-IgG(Fc)真核表达质粒,转染HEK293T细胞,借助间接免疫荧光试验(IFA))证实该蛋白成功表达(大小约为22 000),免疫印迹(Western blot)试验证明该蛋白与抗犬IgG存在免疫结合反应。结果表明,乌苏里貉IgG Fc与犬IgG间存在强烈的免疫交叉源性,应用犬源高免血清或犬免疫球蛋白治疗貉犬瘟热具有可行性,同时为今后构建特定抗原基因与IgG Fc基因融合表达载体,研究DNA疫苗及Fc的生物佐剂提供了理论依据。

    2016年11期 v.36;No.239 1864-1868+1890页 [查看摘要][在线阅读][下载 800K]
    [下载次数:92 ] |[网刊下载次数:0 ] |[引用频次:2 ] |[阅读次数:239 ]
  • 利用免疫沉淀法对鸡源志贺菌IpaC蛋白受体候选蛋白的初步筛选

    韩志霞;刘芳;蒋大伟;许兰菊;孔江南;李克宇;

    为筛选鸡源志贺菌IpaC蛋白的受体。利用生物素标记试剂盒标记IpaC蛋白,分离培养原代鸡肠上皮细胞和。利用ProteoExtract?天然膜蛋白提取试剂盒提取鸡肠上皮细胞的膜蛋白;应用免疫沉淀、免疫磁珠法分离富集与IpaC蛋白结合的蛋白质;利用SDS-PAGE电泳检测和Western blot鉴定。结果获得了与IpaC蛋白特异性结合的大约在34 000~55 000之间的蛋白条带。筛选得到的SDS-PAGE蛋白条带进行LC-MS/MS测序鉴定和生物信息学分析。初步将annexin A2,37 000Laminin receptor precursor,LIM and SH3protein 1,ras-related protein Rab-43作为IpaC蛋白受体的候选蛋白。为研究志贺菌在鸡体内的致病机制奠定基础,而且可以为评估鸡源志贺菌在公共卫生方面的重要性提供参考依据。

    2016年11期 v.36;No.239 1869-1874页 [查看摘要][在线阅读][下载 1319K]
    [下载次数:240 ] |[网刊下载次数:0 ] |[引用频次:1 ] |[阅读次数:163 ]
  • 创伤弧菌和副溶血弧菌双重LAMP检测方法的建立及初步应用

    周顺;高志鑫;张敏;

    为建立创伤弧菌和副溶血弧菌的双重环介导等温扩增(loop-mediated isothermal amplification,LAMP)检测方法,本试验以创伤弧菌metalloprotease基因和副溶血弧菌ompA基因为靶点设计LAMP扩增引物,并在内引物间添加不同的酶切位点,通过对反应时间和温度的优化及酶切反应,成功建立了双重LAMP检测方法,并对其检测特异性、灵敏度和实际应用性进行了研究。结果显示,62℃反应45min时可同时检测到2种弧菌的存在,通过限制性内切酶酶切,可准确区分2种弧菌。该方法比普通PCR检测方法灵敏度高102~103倍。选择17株细菌菌株作为检测模板,发现除创伤弧菌和副溶血弧菌反应结果呈阳性外,其他均为阴性。以大菱鲆作为实验动物,检测双重LAMP技术的实际应用可能,该方法可准确检测并鉴定出组织和血液中感染的细菌种类,其灵敏度可达374~410CFU/g(mL)。SYBR GreenⅠ是一种结合于DNA双链小沟中的荧光染料,反应产物加入该染料后,极易用肉眼判别。本试验成功建立了创伤弧菌和副溶血弧菌的双重LAMP检测方法,该方法可用于水产养殖中病原菌的早期诊断。

    2016年11期 v.36;No.239 1875-1881页 [查看摘要][在线阅读][下载 955K]
    [下载次数:295 ] |[网刊下载次数:0 ] |[引用频次:6 ] |[阅读次数:215 ]

人兽共患病

  • 红斑丹毒丝菌的分离鉴定及疫苗的免疫保护作用

    罗雪刚;罗永芳;戴怡雪;胡书月;李继祥;

    自重庆地区屠宰场猪扁桃体样品分离红斑丹毒丝菌,在测定血清型、Spa基因型和致病性的基础上,研究了弱毒疫苗G_4T_(10)的免疫保护作用。结果显示,从146份样品中分离33株红斑丹毒丝菌,其中27株对小白鼠具有致病性;19株和2株分别在试管凝集试验和琼扩试验中与兔抗G_4T_(10)血清呈阳性反应;12株为SpaA型,21株为SpaB型;在弱毒疫苗G_4T_(10)的免疫保护试验中,被动或主动免疫小白鼠对11株分离细菌的攻击具有保护作用。结果表明,健康猪群红斑丹毒丝菌的带菌率高,弱毒菌苗G_4T_(10)对多数菌株缺乏免疫保护。

    2016年11期 v.36;No.239 1882-1886页 [查看摘要][在线阅读][下载 588K]
    [下载次数:220 ] |[网刊下载次数:0 ] |[引用频次:7 ] |[阅读次数:192 ]
  • 野生亚洲象解没食子酸链球菌巴氏亚种和解没食子酸链球菌的分离

    李德荣;保明伟;陈勇;许定泽;包战天;袁飞洲;熊朝勇;

    解没食子酸链球菌巴氏亚种和解没食子酸链球菌是一种人兽共患的细菌传染性疫病。已报道的感染动物有鸽子、火鸡、鹅、鸭,尚未见野生亚洲象感染的报道。2014年11月17日,本研究从患有严重胸膜炎、腹膜炎的野生亚洲象中采集病料,分离到解没食子酸链球菌巴氏亚种和解没食子酸链球菌,特此报道。

    2016年11期 v.36;No.239 1887-1890页 [查看摘要][在线阅读][下载 906K]
    [下载次数:105 ] |[网刊下载次数:0 ] |[引用频次:4 ] |[阅读次数:480 ]
  • 山东省聊城地区野生淡水鱼华支睾吸虫囊蚴感染情况调查

    刘承军;刘孝刚;于迪;葛长城;曲悦;

    旨在了解聊城地区野生淡水鱼感染华支睾吸虫囊蚴情况,为防治工作提供理论依据。从聊城地区徒骇河中采集鲫鱼、麦穗鱼、白鱼、洛氏鱥、鳑鲏鱼5种野生淡水鱼共计693尾,采用直接压片法和消化法分别检查华支睾吸虫囊蚴的感染率、感染强度,并用豚鼠感染的方法证实鱼体内所染虫种。结果发现5种淡水鱼全部感染华支睾吸虫囊蚴,总感染率为41.13%(285/693),以麦穗鱼的感染率最高为58.88%(136/231),洛氏鱥最低为6.87%(9/131),单尾感染强度最高为鲈塘鳢(784个/尾),单尾感染强度最底为洛氏鱥(5个/尾),鱼背部肌肉感染率最高为100%,其次为腹部肌肉38.25%、鱼鳃为5.97%。聊城地区野生淡水鱼华支睾吸虫囊蚴的感染情况较为严重,应加强宣传和防治工作,以保护人体的健康。

    2016年11期 v.36;No.239 1891-1893页 [查看摘要][在线阅读][下载 385K]
    [下载次数:154 ] |[网刊下载次数:0 ] |[引用频次:7 ] |[阅读次数:189 ]
  • Taqman-MGB探针法检测炭疽杆菌

    徐超;张勤;杨娜;李轲;冯松凯;

    根据GenBank中炭疽杆菌的主基因组上gyrA基因,毒力因子px01上pagA基因和侵袭因子px02上的CapA基因分别设计引物和对应Taqman-MGB探针,建立了检测炭疽杆菌的实时定量PCR方法。该方法具有良好特异性,仅对炭疽杆菌检测结果为阳性,而与蜡样芽孢杆菌、苏云金杆菌、巨大芽孢杆菌、沙门菌、大肠杆菌、链球菌、铜绿假单孢杆菌无交叉反应,检测灵敏度最低可达100copies/μL。对24份皮毛盲样和120份送检样品检测结果表明建立的定量PCR方法与商业化定量PCR试剂盒的符合率为100%。Taqman-MGB探针方法灵敏、特异、重复性好,可应用于炭疽杆菌的快速诊断与监测。

    2016年11期 v.36;No.239 1894-1898页 [查看摘要][在线阅读][下载 678K]
    [下载次数:178 ] |[网刊下载次数:0 ] |[引用频次:2 ] |[阅读次数:239 ]

基础兽医学

  • 自噬在镉致BRL 3A细胞损伤中的保护作用

    谢俊泽;杨小康;严磊;顾建红;袁燕;卞建春;刘宗平;刘学忠;

    以大鼠肝细胞系(BRL 3A)为模型,不同浓度的镉处理细胞,用免疫印迹法和免疫荧光法检测自噬标记分子LC3表达;通过添加雷帕霉素(自噬促进剂)和氯喹(自噬抑制剂)来升高和降低自噬水平,MTT法检测自噬水平的变化对细胞活性的影响。结果显示:与对照组相比,随着镉浓度的升高,细胞LC3-Ⅱ含量先上升后下降,8μmol/L时,LC3-Ⅱ含量最高,差异显著或极显著(P<0.05或P<0.01)。与镉处理组相比,自噬水平的上升可以显著提高细胞活性(P<0.05),自噬水平的下降显著降低细胞活性(P<0.05)。结果表明:镉可以引起BRL 3A细胞自噬水平的上升,激活的自噬对镉致细胞损伤具有一定的保护作用。

    2016年11期 v.36;No.239 1899-1902+1915页 [查看摘要][在线阅读][下载 1638K]
    [下载次数:134 ] |[网刊下载次数:0 ] |[引用频次:7 ] |[阅读次数:244 ]
  • TCDCA对TGR5介导的NR8383细胞IL-1β的影响

    王旭;张子英;何秀玲;李培锋;

    研究牛磺鹅去氧胆酸(taurochenodeoxycholic acid,TCDCA)对TGR5介导的经脂多糖(Lipopolysaccharides,LPS)诱导后NR8383细胞IL-1β的影响。采用实时荧光定量PCR(real-time quantitative,qPCR)法确定TGR5在NR8383细胞中mRNA水平及白介素-1β(Interleukin-1,IL-1β)mRNA表达的影响;采用Western blot法测定TGR5在NR8383细胞中蛋白表达量;采用酶联免疫吸附法(enzyme-linked immune-sorbent assay,ELISA)测定TCDCA对TGR5介导的NR8383细胞IL-1β蛋白活性的影响。结果表明,高表达TGR5的NR8383细胞中IL-1βmRNA表达量和蛋白活性均显著高于正常细胞组,TCDCA能极显著降低LPS诱导的IL-1β基因表达和蛋白活性(P<0.01)。TCDCA是通过TGR5受体进而影响LPS对IL-1β基因水平及蛋白活性的诱导作用。

    2016年11期 v.36;No.239 1903-1907页 [查看摘要][在线阅读][下载 1482K]
    [下载次数:139 ] |[网刊下载次数:0 ] |[引用频次:3 ] |[阅读次数:193 ]
  • 复方氟苯尼考注射液体外抑菌试验及对人工感染巴氏杆菌仔猪的保护效果

    班赟;叶文初;袁富威;杨亚军;李剑勇;刘敏;李引乾;

    为了研究复方氟苯尼考注射液的体外抗菌活性及对人工感染巴氏杆菌仔猪的保护效果。本研究采用体外抑菌试验采用试管二倍稀释法,测定复方氟苯尼考注射液和单方氟苯尼考注射液对多杀性巴氏杆菌、副猪嗜血杆菌、猪传染性胸膜肺炎放线杆菌及链球菌的最小抑菌浓度(MIC)。体内治疗试验是将复方氟苯尼考注射液分为20、40、60mg/kg 3个剂量组与氟苯尼考对照组(40mg/kg)以及氟尼辛葡甲胺对照组(3.65mg/kg)以颈部肌肉注射治疗人工感染多杀性巴氏杆菌的仔猪。体外抑菌试验结果显示,复方氟苯尼考注射液对多杀性巴氏杆菌、副猪嗜血杆菌、猪传染性胸膜肺炎放线杆菌及链球菌的MIC分别为0.59、1.09、0.59、2.12mg/L;氟苯尼考注射液对多杀性巴氏杆菌、副猪嗜血杆菌、猪传染性胸膜肺炎放线杆菌及链球菌的MIC分别为1.12、6.13、17.86、17.86mg/L。保护性试验结果显示,复方氟苯尼考注射液低、中、高剂量组增重率分别为(10.19±4.84)、(14.33±4.07)、(15.53±5.38)kg,死亡率分别为10%、10%、0,好转率分别为60%、90%、100%,治愈率分别为20%、90%、100%;氟苯尼考组的增重率为(9.90±4.25)kg;氟尼辛葡甲胺组的增重率为(8.02±3.83)kg。结果表明,复方氟苯尼考注射液对多杀性巴氏杆菌、副猪嗜血杆菌、猪传染性胸膜肺炎放线杆菌及链球菌的抑菌效果强于单方氟苯尼考注射液;复方氟苯尼考注射液对人工感染多杀性巴氏杆菌仔猪的保护作用也优于氟苯尼考注射液。建议本品的治疗剂量为颈部肌肉注射40mg/kg,每7d给药1次,连用2次,如症状严重可2d给药1次,连用2次。

    2016年11期 v.36;No.239 1908-1915页 [查看摘要][在线阅读][下载 1716K]
    [下载次数:262 ] |[网刊下载次数:0 ] |[引用频次:6 ] |[阅读次数:204 ]
  • 氧化应激对PRRSV体外感染PAMs后诱导TLR3/NF-kB信号通路相关蛋白的影响

    闫晓霞;谢丽君;刘欢欢;臧雅婷;高洪;严玉霖;

    为探讨氧化应激对猪繁殖与呼吸征病毒(PRRSV)体外感染猪肺泡巨噬细胞(PAMs)后诱导TLR3/NF-kB信号转导中相关蛋白的影响,从PRRSV阴性的健康仔猪肺脏中分离和培养PAMs,随后分为正常对照组、PRRSV各试验组、NAC+PRRSV组以及H_2O_2+PRRSV组,于感染后6、12、24、48、72h收集细胞,Western blot检测各组不同时间段PAMs中TLR3、TRIF、TRAF6以及NF-kB蛋白表达水平的动态变化。结果显示,在PRRSV各试验组,TLR3、TRIF、TRAF6及NF-κB蛋白水平表达与正常对照组相比均升高(P<0.05),而且其表达量与感染之间有时间相关性;在NAC+PRRSV组中,TLR3、TRIF、TRAF6及NF-κB的蛋白表达虽有升高,但表达量都比正常接毒组明显下降;在H_2O_2+PRRSV组中,TLR3、TRIF、TRAF6及NF-κB的蛋白表达比正常接毒组表达量明显升高(P<0.05)。结果表明,抗氧化剂和促氧化剂可引起PAMs氧化应激状态的改变,从而导致PRRSV感染PAMs后TLR3/NF-κB信号传导通路的相关蛋白水平发生了变化。

    2016年11期 v.36;No.239 1916-1922页 [查看摘要][在线阅读][下载 988K]
    [下载次数:573 ] |[网刊下载次数:0 ] |[引用频次:10 ] |[阅读次数:232 ]

临床兽医学

  • DON暴露对雏鸡免疫功能的影响

    宫佳杰;耿芳芳;许伟;范梦雪;胡文娟;孟婷婷;李玉;冯士彬;吴金节;王希春;

    本试验旨在通过脱氧雪腐镰刀菌烯醇(deoxynivalenol,DON)暴露雏鸡体内毒理试验,根据免疫器官指数与病理剖检、血清抗体效价和免疫球蛋白水平的变化,研究DON对雏鸡免疫功能的影响。选取临床检查健康的120只1日龄海兰蛋公鸡,按单因素试验设计,随机分成4组,每组30只。试验雏鸡饲喂相同的全价日粮,从8日龄开始,低剂量组、中剂量组和高剂量组分别按采食量含DON 0.27,1.68,12.21mg/kg的剂量灌胃染毒,对照组灌服等量的生理盐水,每隔7d染毒1次,共染毒5次。试验期为36d。每次染毒前1d,每组随机抽取10只鸡,翅下静脉采血,分离血清,用于检测免疫球蛋白水平和抗体效价。试验结束时,每组随机屠宰20只,取胸腺、法氏囊和脾脏,计算免疫器官指数,并观察病理变化。结果显示:与对照组相比,低、中剂量组血清免疫球蛋白水平呈现降低的趋势,但差异不显著(P>0.05),高剂量组显著降低(P<0.05);各试验组血清抗体效均价差异不显著(P>0.05);低、中剂量组脾脏指数显著升高(P<0.05),中剂量组胸腺指数显著降低(P<0.05),高剂量组脾脏和胸腺指数均显著降低(P<0.05)。病理切片观察发现,各试验组脾脏和法氏囊均出现不同程度的水肿,胸腺出现不同程度充血、淤血,高剂量组伴有大量浆液渗出。结果表明:DON暴露能影响免疫器官指数和免疫球蛋白水平,并损害免疫器官,从而降低雏鸡的免疫功能。

    2016年11期 v.36;No.239 1923-1928页 [查看摘要][在线阅读][下载 2506K]
    [下载次数:91 ] |[网刊下载次数:0 ] |[引用频次:9 ] |[阅读次数:180 ]
  • 绞股蓝微粉发酵物对断奶仔猪免疫功能的影响

    段雪磊;巴翠晶;李得鑫;康建南;李林;包永占;史万玉;

    为研究绞股蓝微粉发酵物对断奶仔猪免疫功能的影响,选取70头21日龄"杜×长×大"断奶仔猪,随机分为7组,每组10头,试验期42d。其中,Ⅰ组为对照组,Ⅱ-Ⅳ组分别为未发酵绞股蓝微粉0.5%、1.0%、1.5%剂量组,Ⅴ-Ⅶ组分别为绞股蓝微粉发酵物0.5%、1.0%、1.5%剂量组。在试验期第1、14、28和42天时检测血清中的猪瘟抗体水平。在试验期第21、42天时测定外周血T淋巴细胞亚群(CD4~+/CD8~+)的比值和血清免疫球蛋白(IgG、IgA)的含量。结果显示:1.0%绞股蓝微粉发酵物能显著提高断奶仔猪的猪瘟抗体水平(P<0.05);1.0%绞股蓝微粉发酵物可以显著提高断奶仔猪血清免疫球蛋白(IgG、IgA)的含量(P<0.05);1.0%、1.5%绞股蓝微粉发酵物均可显著提高断奶仔猪外周血T淋巴细胞亚群(CD4~+/CD8~+)比值(P<0.05),且1.5%绞股蓝微粉发酵物差异显著(P<0.05)。结果表明:绞股蓝微粉发酵物可显著提高断奶仔猪免疫功能,且显著优于未发酵绞股蓝微粉。

    2016年11期 v.36;No.239 1929-1932页 [查看摘要][在线阅读][下载 124K]
    [下载次数:214 ] |[网刊下载次数:0 ] |[引用频次:21 ] |[阅读次数:189 ]
  • 牛场奶牛乳房炎的发病因素探究及其判别分析方程的建立

    张振威;李建斌;李荣岭;赵秀新;鲍鹏;薛光辉;杨君;侯明海;仲跻峰;

    利用2011年1月至2014年12月山东地区某牛场的奶牛生产性能测定(DHI)数据库及其乳房炎发病记录为数据集,通过sas统计分析软件,对胎次、泌乳天数、采样季节、采样年份、体细胞数、产奶量、乳脂率、乳蛋白率与乳房炎发病记录做逐步判别(Stepdisc)和glm相关性方差分析。结果显示:胎次、泌乳天数、采样季节、采样年份和体细胞数与乳房炎的发生显著相关。因此,综合与奶牛乳房炎发病密切相关的胎次、泌乳天数、采样季节、采样年份和体细胞评分建立了直观、相对准确的判定奶牛乳房炎发生的判别分析方程Y_0(未患乳房炎)和Y_1(患乳房炎),通过比较Y_0和Y_1的大小对未知个体牛是否患有乳房炎做出初步判断。此判断虽然不能对乳房炎的发生做出确诊,但能够帮助奶牛场管理者对奶牛群体进行宏观监测,从奶牛群体中筛选出发生乳房炎概率较大的作为重点监测对象。由此奶牛场能够尽早发现乳房炎,节约乳房炎检测成本,为乳房炎的及时控制与治疗提供科学理论依据,对DHI的推广和DHI报告的充分利用也具有重要意义。

    2016年11期 v.36;No.239 1933-1938页 [查看摘要][在线阅读][下载 158K]
    [下载次数:169 ] |[网刊下载次数:0 ] |[引用频次:7 ] |[阅读次数:207 ]
  • 铜对大鼠肝细胞活性、自由基代谢及细胞膜电位的影响

    郭剑英;余文兰;曹华斌;胡莲美;李英;陈俊全;严浩;唐兆新;

    通过建立大鼠肝细胞的铜胁迫模型,旨在讨论不同剂量的铜对大鼠肝细胞活性、自由基代谢及细胞膜电位的影响。以硫酸铜为试验铜源,6个不同铜质量浓度(以Cu2+计):0,50,100,200,400,800mg/L,分别加入培养液培养BRL-3A细胞24和48h后,测定不同Cu2+质量浓度、不同处理时间后细胞自由基产生、抗氧化酶活性及细胞膜电位变化。结果显示,处理质量浓度低于400 mg/L时,细胞增殖活性差异不显著(P>0.05),处理质量浓度为400,800mg/L时,细胞活性下降(P<0.05);处理质量浓度低于400 mg/L时,Cu2+质量浓度与细胞内T-SOD、GSH-Px、CP活性呈正相关,与MDA、NO含量呈负相关,质量浓度达400mg/L及以上质量浓度时,结果相反。随着Cu2+质量浓度的增加,细胞膜电位下降(P<0.05)。以上结果表明,适量的铜含量对细胞内的抗氧化酶活性具有促进作用,但高铜可能促使细胞活性下降,自由基产生增多,细胞膜电位下降。

    2016年11期 v.36;No.239 1939-1943+1948页 [查看摘要][在线阅读][下载 651K]
    [下载次数:274 ] |[网刊下载次数:0 ] |[引用频次:4 ] |[阅读次数:206 ]
  • 犬电视辅助胸腔镜手术(VATS)和开胸肺切除术对氧化应激的影响

    刘海峰;王志博;任清明;张士霞;张华;马海鹍;张建涛;王洪斌;

    14只健康犬随机分为电视辅助胸腔镜手术(video-assisted thoracoscopic surgery,VATS)组和开胸组,每组7只,2组动物分别采用VATS方法和开胸方法进行单侧全肺切除术。通过检测在术前、术中及术后不同时间点的血清MDA、SOD、GSH-Px、TNOS和iNOS含量变化,比较VATS和开胸手术对机体氧化应激的影响。结果显示:与术前相比,在术后4h2组各应激水平变化值达到最大,并且差异显著(P<0.05);GSH-Px和iNOS的检测结果显示VATS组更早出现显著性差异变化(2h)。在开胸手术中各项指标的峰值较高。说明2种手术方法均能够引起机体强烈的氧化应激;VATS手术产生相对低的应激水平,但是可能会更早出现应激状态。

    2016年11期 v.36;No.239 1944-1948页 [查看摘要][在线阅读][下载 139K]
    [下载次数:65 ] |[网刊下载次数:0 ] |[引用频次:1 ] |[阅读次数:285 ]

动物科学

  • 谷氨酰胺对妊娠期饲喂精氨酸民猪母猪后代肠道发育及ZO-1、occludin基因表达的影响

    吴国超;单安山;王军军;刘娣;韩昱;于浩;房恒通;赵云;周勇锋;王新;张晶;

    试验仔猪选用妊娠45日龄至分娩期间饲喂精氨酸民猪母猪所产7日龄仔猪,共48头,随机分成2组,每组3个重复,每个重复8头仔猪。对照组和试验组分别在基础饲粮水平上添加0、0.8%的谷氨酰胺。结果显示:与对照组相比,谷氨酰胺组的十二指肠和回肠绒毛长度显著升高(P<0.05);实时荧光定量PCR检测发现,谷氨酰胺组十二指肠、空肠以及回肠ZO-1和occludin mRNA的表达量均显著增加(P<0.05)。结果表明:谷氨酰胺对仔猪小肠绒毛具有一定的改善作用,并能促进细胞间紧密连接结构的形成,增强小肠黏膜的屏障功能。

    2016年11期 v.36;No.239 1949-1953页 [查看摘要][在线阅读][下载 954K]
    [下载次数:349 ] |[网刊下载次数:0 ] |[引用频次:3 ] |[阅读次数:315 ]
  • 黄芪多糖(APS)对断奶仔猪生长性能、血液生理生化指标及菌群多样性的影响

    甄玉国;陈雪;王晓磊;杨平平;周雪飞;

    通过对断奶仔猪生长性能及血液生理生化指标的测定筛选出黄芪多糖(APS)的最适添加量,同时分析最适宜添加量的APS组对盲肠菌群多样性的影响。将40头(杜×长×大)28日龄断奶仔猪根据初始体质量相近原则分为5组,每组8头,Ⅰ组为对照组,饲喂基础日粮,Ⅱ组添加150mg/kg金霉素,Ⅲ~Ⅴ组分别添加200,400,800mg/kg APS,试验期28d。测定断奶仔猪生长性能,血液生理生化指标及盲肠的菌群多样性。在整个试验期,与对照组相比,日粮中添加200mg/kg APS使肉料比显著升高(P<0.05);添加200mg/kg APS提高了血清中总蛋白、白蛋白、谷草转氨酶、谷丙转氨酶和碱性磷酸酶的含量,降低了血清尿素氮和葡萄糖的含量(P>0.05);日粮中添加抗生素和APS均能显著提高血液中淋巴细胞数和血小板数(P<0.05),除添加200mg/kg APS的试验组外,其余各组均可显著提高血液中白细胞和红细胞数量(P<0.05),添加200mg/kg APS后盲肠菌群丰富度高且优势条带明显。

    2016年11期 v.36;No.239 1954-1958+1968页 [查看摘要][在线阅读][下载 299K]
    [下载次数:454 ] |[网刊下载次数:0 ] |[引用频次:54 ] |[阅读次数:229 ]
  • 猪RBP4和ITGB1基因多态性对母猪繁殖性能的影响

    翟腾蛟;李梦寻;马力鹏;胡九英;汪德明;黄涛;

    用PCR-RFLP的方法检测了猪视黄醇结合蛋白4(RBP4)和整合素β1(ITGB1)基因在试验猪群中的多态性,同时分析其对大白猪产仔数、产活仔数、健仔数、初生窝重等性状的影响。结果显示:RBP4基因AA型产仔数、产活仔数、初生窝重显著高于AB、BB型(P<0.05),AA型健仔数极显著高于BB型(P<0.01),显著高于AB型(P<0.05)。ITGB1基因TT型产仔数、产活仔数、健仔数高于TC、CC型,差异均不显著(P>0.05)。RBP4与ITGB1基因9种合并基因型中AATT型产仔数、产活仔数、健仔数均高于其他合并基因型,差异均不显著(P>0.05)。

    2016年11期 v.36;No.239 1959-1963页 [查看摘要][在线阅读][下载 513K]
    [下载次数:160 ] |[网刊下载次数:0 ] |[引用频次:16 ] |[阅读次数:172 ]
  • 延黄牛皮下脂肪与背最长肌中差异基因通路的GSEA分析

    孟影;赵志辉;杨润军;芦春艳;于海滨;戢爽;

    通过构建延黄牛皮下脂肪与背最长肌基因芯片表达谱,获得芯片探针总数22 810个,占牛基因组芯片总量的94.5%,杂交后检测到信号的探针13 674个,占检测探针总数的60%。通过基因富集分析方法得出,皮下脂肪中富集的通路主要包括脂肪代谢过程、免疫系统发育过程、磷脂代谢过程、脂类生物合成、细胞脂代谢过程、膜脂代谢过程、脂类转运等基本生物过程。背最长肌中富集的通路有肌肉发育,系统进程、多细胞生物过程调节,横纹肌发育,有机化合物氧化的能量衍生,骨骼肌发育系统等生物过程。为深入研究脂肪组织与肌肉组织的调控机制提供新思路。

    2016年11期 v.36;No.239 1964-1968页 [查看摘要][在线阅读][下载 845K]
    [下载次数:488 ] |[网刊下载次数:0 ] |[引用频次:0 ] |[阅读次数:202 ]
  • 基于主成分和聚类分析的优质鸡肉质评价模型的建立

    赵振华;黎寿丰;黄华云;李春苗;王钱保;薛龙岗;

    为探讨优质鸡肉质合理评价模型,采用主成分和聚类分析方法对优质肉鸡7个新品系9个与肉质有密切联系的指标进行了分析。结果显示:9个原始指标依据主成分解释总变量和碎石图提取了4个主成分,反映原变量89.82%的信息。第一主成分主要综合了失水率、肌纤维面积、肌纤维密度和pH值信息,命名为质构因子;第二主成分主要综合了VB1、肌纤维密度、肌纤维面积和肌内脂肪(IMF)的信息,命名为作肉质因子;第三主成分综合了嫩度、肉色和肌内脂肪的信息即感官因子;第四主成分综合了肌苷酸、肌内脂肪含量和肉色的信息看作风味因子。聚类分析将9个肉质指标分为3类,聚类结果与主成分分析基本一致,综合利用主成分和聚类分析结果制定了优质鸡的肉质评价模型,为优质鸡选育和肉质评价提供了理论依据。

    2016年11期 v.36;No.239 1969-1973+1979页 [查看摘要][在线阅读][下载 290K]
    [下载次数:347 ] |[网刊下载次数:0 ] |[引用频次:15 ] |[阅读次数:187 ]
  • 卵黄抗体在雏鸡组织器官中的转移变化规律

    巨晓军;杨海明;王志跃;马尹鹏;行浩;靳石磊;丁文骏;

    随机取出雏后24,48,72,96,120,144h的海兰白公雏鸡各20只并屠宰,分别称量卵黄囊、肌胃、肠道、肝脏、胸腺、脾脏和法氏囊的质量,并利用鸡卵黄抗体ELISA试剂盒检测其IgY含量。结果显示,卵黄囊内IgY含量随时龄的增大呈现不断下降的趋势,雏鸡出雏后24~72h各段下降均显著(P<0.05)。肌胃、肠道、肝脏内IgY含量随时龄的增大先上升后下降,在96h或120h含量最高,24h雏鸡消化器官IgY含量与144h相比差异显著(P<0.05)。十二指肠、空肠、盲肠IgY含量随时龄的增大先上升后下降,在96h或120h含量最高,回肠、直肠随时龄的增大不断上升,24h雏鸡小肠和大肠IgY含量与144h相比差异显著(P<0.05)。胸腺、脾脏、法氏囊IgY含量随雏鸡时龄的增大而呈现不断上升的趋势,24h雏鸡免疫器官内IgY含量与144h相比差异显著(P<0.05)。结果表明,组织器官内IgY的含量呈现递增的趋势,与卵黄囊内IgY含量递减的传递规律相吻合。从IgY含量的变化上表明新生雏鸡发育早期不断从卵黄囊吸收卵黄抗体到组织器官的动态过程。

    2016年11期 v.36;No.239 1974-1979页 [查看摘要][在线阅读][下载 152K]
    [下载次数:106 ] |[网刊下载次数:0 ] |[引用频次:4 ] |[阅读次数:197 ]
  • 吡格列酮对母型-合子型过渡时期小鼠胚胎抗氧化能力的影响

    徐礼杰;方南洙;李钟淑;金花子;

    本试验通过H_2O_2建立小鼠胚胎氧化损伤模型,添加PPARγ激动剂吡格列酮对胚胎进行体外培养,DCHFDA测定胚胎内部ROS水平,半定量PCR测定胚胎内部抗氧化基因和NADPH氧化酶基因的表达。结果显示:(1)经过48h处理后,5μmol/L吡格列酮处理组的4-细胞率(P>0.05)和囊胚率(P<0.05)都比对照组的高;(2)DCHFDA检测发现,H_2O_2+PIO处理组的ROS水平比H_2O_2处理组的低(P<0.05);(3)H_2O_2降低抗氧化酶Gpx1、Gpx2的表达(P>0.05),而吡格列酮能上调Gpx1、Gpx2的表达(P<0.05);(4)H_2O_2上调NADPH氧化酶亚型Nox1、Nox3表达,吡格列酮能下调Nox1、Nox3的表达,差异性均不显著(P>0.05),但H_2O_2明显上调NADPH氧化酶亚型Duox2和NOX调节亚基Noxo1的表达水平(P<0.05),吡格列酮均能明显抑制Duox2和Noxo1的表达(P<0.05)。结果表明:吡格列酮能增加抗氧化酶的表达以及抑制NADPH氧化酶的表达,从而有效调控胚胎内部ROS水平,促进胚胎发育。

    2016年11期 v.36;No.239 1980-1985页 [查看摘要][在线阅读][下载 613K]
    [下载次数:90 ] |[网刊下载次数:0 ] |[引用频次:0 ] |[阅读次数:210 ]

论坛

  • 酵母培养物在反刍动物生产中的应用研究进展

    张学峰;周雪飞;甄玉国;王兰惠;

    酵母培养物通常指用固体或液体培养基经特定工艺发酵菌发酵后,产生的含代谢物和酵母菌的混合物,营养丰富,富含矿物质、B族维生素、消化酶、促生长因子和较齐全的氨基酸以及未知生长因子,是集营养与保健为一体的复合饲料添加剂。它本身无耐药性、无残留,得到了行业的广泛关注。本文综述了近年来酵母培养物在反刍动物生产中的营养及保健作用,以期为酵母培养物在反刍动物生产中的应用奠定理论基础。

    2016年11期 v.36;No.239 1986-1989页 [查看摘要][在线阅读][下载 117K]
    [下载次数:600 ] |[网刊下载次数:0 ] |[引用频次:27 ] |[阅读次数:201 ]
  • 多杀性巴氏杆菌毒素的研究进展

    方仁东;雷桂花;杜慧慧;彭远义;

    多杀性巴氏杆菌毒素(Pasteurella multocida toxin,PMT)是一种由D型多杀性巴氏杆菌分泌的毒素蛋白,作为猪萎缩性鼻炎的主要致病因子而备受关注。PMT作为一种有丝分裂原,通过细胞内多条信号通路影响细胞的生长和分化。PMT可分为N端和C端两大结构域,N端被认为与受体结合以及跨膜转运有关,C端具有催化活性。近年来,也有人认为PMT与致癌因素有关。随着PMT研究的深入,PMT疫苗也正成为研究的一个热点。本研究就PMT胞内活性、结构与功能等最新研究进展进行概述。

    2016年11期 v.36;No.239 1990-1996页 [查看摘要][在线阅读][下载 344K]
    [下载次数:517 ] |[网刊下载次数:0 ] |[引用频次:15 ] |[阅读次数:235 ]

简讯