预防兽医学

  • 表达PEDV中国变异株S基因重组猪伪狂犬病病毒的构建和纯化

    杨盼盼;吴艳阳;杨东东;高冬生;王川庆;赵军;李存法;

    为了研制出能够同时预防猪流行性腹泻病毒(porcine epidemic diarrhea virus,PEDV)和猪伪狂犬病病毒(pseudorabies virus,PRV)感染的二联活疫苗,本研究将增强型绿色荧光蛋白(EGFP)和PEDV中国变异株的纤突蛋白免疫决定簇区域(S1)基因分别克隆至含有PRV胸苷激酶(TK)基因上、下游同源臂的穿梭载体pTK中,构建重组PRV转移质粒pTK-EGFP和pTK-S1。将重组质粒pTK-EGFP与PRV疫苗毒株Bartha-K61基因组DNA共转染Vero细胞,经绿色荧光蚀斑纯化得到重组病毒rPRV-EGFP。随后将重组质粒pTK-S1与rPRV-EGFP基因组DNA共转染Vero细胞,通过反向筛选EGFP阴性蚀斑,蚀斑纯化得到表达PEDV S蛋白的重组伪狂犬病病毒rPRV-S1。本研究将为更有效防控猪伪狂犬病和猪流行性腹泻提供辅助工具。

    2018年06期 v.38;No.258 1057-1065页 [查看摘要][在线阅读][下载 1330K]
    [下载次数:256 ] |[网刊下载次数:0 ] |[引用频次:9 ] |[阅读次数:191 ]
  • 猪流行性腹泻病毒纤突蛋白S1主要抗原表位区原核表达及其抗血清中和活性鉴定

    周如月;刘琪;冯晓声;贾爱卿;王贵平;

    本研究利用生物信息学软件预测了猪流行性腹泻病毒(porcine epidemic diarrhea virus,PEDV)S1蛋白的1个B细胞中和线性表位。为了验证S1蛋白中该表位的存在,并鉴定其中和活性,构建含有该B细胞线性表位截短S1基因的重组质粒pGEX-4T-S1,通过蛋白电泳和Western blot确定该重组质粒可以在原核细胞中表达。将该重组蛋白纯化,免疫BALB/c小鼠,3次免疫后,眼眶静脉采血进行间接免疫荧光及中和试验。结果表明,截短S1蛋白能够引起机体的体液免疫反应,该免疫血清能有效中和PEDV,中和效价为1∶64。该研究结果对PEDV免疫机制和新型疫苗的研究具有重要的借鉴意义。

    2018年06期 v.38;No.258 1066-1070页 [查看摘要][在线阅读][下载 460K]
    [下载次数:320 ] |[网刊下载次数:0 ] |[引用频次:10 ] |[阅读次数:174 ]
  • 1株田间自然重组PRRSV类NADC30毒株的分离鉴定及序列分析

    崔丹丹;彭志锋;王傲杰;王新港;周峰;王川庆;

    为了解田间猪繁殖与呼吸综合征病毒(PRRSV)的流行及变异情况,本研究将PRRSV阳性样品接种到Marc-145细胞并传代后成功分离到1株PRRSV,将其命名为HENZMD-9,并对其全基因序列进行测定和分析。结果显示,HENZMD-9为1株类美国NADC30毒株,并与国内高致病性PRRSV(HP-PRRRSV)毒株的2个片段发生重组,这2个片段分别来自HP-PRRSV JXA1株的细胞传代致弱株JXA1-P80及JXA1-P45,分别位于基因组5′端及开放式阅读框1ab区域,表明HENZMD-9很有可能与JXA1-R疫苗回复株发生了重组,提示不同类型毒株在田间的共存会加剧PRRSV的演变,从而增加临床防控难度。因此,持续监测PRRSV田间流行及变异动态对PRRSV的防控具有一定的临床指导意义。

    2018年06期 v.38;No.258 1071-1076页 [查看摘要][在线阅读][下载 1188K]
    [下载次数:284 ] |[网刊下载次数:0 ] |[引用频次:3 ] |[阅读次数:239 ]
  • 糖基化位点突变对猪圆环病毒2型增殖的影响

    李佳暖;李得鑫;崔元;孙继国;袁万哲;

    为提高猪圆环病毒(PCV)的滴度,以本实验室已成功分离的1株PCV2d流行毒株PCV2RC160307为模板,通过融合PCR突变其Rep蛋白上的1个N-糖基化位点,并成功构建自身环化感染性克隆HT-PCV2,转染ST细胞,盲传至F8代后,通过PCR、间接免疫荧光(IFA)及过氧化物酶单层试验(IMPA)进行验证,并通过IMPA测定TCID50发现,拯救成功的HT-PCV2病毒滴度为105.2×TCID50/0.1mL,较分离的流行毒株RC160307及未糖基化位点突变的感染性克隆H-PCV2的病毒滴度有所提高。此种方法为PCV2复制机制的进一步研究疫苗的研制及其疾病的预防奠定基础。

    2018年06期 v.38;No.258 1077-1081页 [查看摘要][在线阅读][下载 522K]
    [下载次数:184 ] |[网刊下载次数:0 ] |[引用频次:2 ] |[阅读次数:215 ]
  • 不同包被抗原检测PRRS抗体间接ELISA方法的建立

    马思续;崔春晓;张留君;冯延;魏凤灵;许瑞勤;杨国宇;夏平安;张改平;

    为了建立更加敏感、特异、准确、有效地检测抗猪繁殖与呼吸综合征病毒(PRRSV)抗体的间接ELISA方法,本研究利用RT-PCR方法分别扩增出PRRSV VR2332毒株的GP4和N蛋白完整编码基因,将2种基因片段分别和共同插入原核表达载体pET-32a中,成功构建重组质粒pET-32a-GP4、pET-32a-N和pET-32a-GP4-N。将3种重组质粒分别转化至大肠杆菌BL21(DE3)中诱导表达出GP4蛋白、N蛋白和GP4-N融合蛋白,并对表达出的蛋白进行纯化。将3种已纯化的重组蛋白分别作为间接ELISA的包被抗原,通过不断优化反应条件,最终建立了检测抗PRRSV抗体的间接ELISA方法。分别使用该3种方法检测从河南省多个地区收集的200份猪血清样品中的抗PRRSV抗体,并与商品化试剂盒进行比较,结果显示,GP4蛋白做抗原时检测阳性符合率为82.7%,N蛋白做抗原时检测阳性符合率为87.2%,GP4-N融合蛋白做抗原时检测阳性符合率为85.5%;因此,N蛋白是间接ELISA方法检测抗PRRSV抗体的优势包被抗原。

    2018年06期 v.38;No.258 1082-1087页 [查看摘要][在线阅读][下载 708K]
    [下载次数:248 ] |[网刊下载次数:0 ] |[引用频次:9 ] |[阅读次数:212 ]
  • poly(I:C)刺激鸡胚胎成纤维细胞产生外泌体的抗新城疫病毒活性

    丁伟;徐小洪;丁佳欣;李金斗;丁壮;

    外泌体(exosomes,Ex)是由各种细胞分泌的微小囊泡,可以通过传递RNA、DNA及蛋白质改变受体细胞状态。poly(I:C)是一种dsRNA模拟物,具有一定的抗病毒活性。为研究经poly(I:C)处理后鸡胚胎成纤维细胞(chicken embryo fibroblast,CEF)来源Ex的抗新城疫病毒(NDV)活性,通过超速离心法分离得到CEF来源Ex,并通过透射电镜和免疫印迹试验(Western blot)对其进行鉴定,随后评估其抗NDV活性及活化靶细胞抗病毒能力。结果发现,poly(I:C)刺激使CEF Ex分泌量增加1倍,且poly(I:C)Ex表现出比PBS Ex更强的抗NDV作用。进一步研究表明,poly(I:C)刺激CEF产生的Ex可通过TLR3-NFκB途径产生抗NDV作用。

    2018年06期 v.38;No.258 1088-1093页 [查看摘要][在线阅读][下载 1144K]
    [下载次数:234 ] |[网刊下载次数:0 ] |[引用频次:4 ] |[阅读次数:147 ]
  • O型口蹄疫病毒缅甸98株衣壳蛋白的表达及抗原性分析

    胡高维;马凯凯;齐兴财;常兴妮;殷相平;李志勇;张志东;

    口蹄疫病毒空衣壳是由口蹄疫病毒衣壳蛋白构成的不含核酸成分的衣壳结构,具有与完整病毒相似的构象和免疫原性。本研究以O型口蹄疫缅甸98株(O/MYA98/BY/2010株)为研究对象,利用其P12A-3C基因构建重组杆状病毒,间接免疫荧光试验检测到Sf9昆虫细胞成功表达重组衣壳蛋白。对收集的蛋白分析发现,重组衣壳存在于未被裂解的前体蛋白和中间体蛋白中。双抗夹心ELISA检测到重组衣壳蛋白相比灭活病毒有较高的抗原结合效价。蔗糖密度梯度离心纯化空衣壳,空衣壳所在梯度表现出最强抗原性。研究结果证实了重组衣壳蛋白具有良好的抗原性,可为口蹄疫病毒空衣壳疫苗的深入研究提供参考。

    2018年06期 v.38;No.258 1094-1099页 [查看摘要][在线阅读][下载 874K]
    [下载次数:143 ] |[网刊下载次数:0 ] |[引用频次:1 ] |[阅读次数:188 ]
  • 鹅细小病毒TaqMan荧光定量PCR方法的建立及临床应用

    王艳秋;张紫璇;高旭;李卓昕;王美琪;刘晋宇;鲁承;梁晚枫;于龙政;王妍;

    为了建立一种能定量检测鹅细小病毒(GPV)的荧光定量PCR方法,根据GenBank已收录GPV-VP3基因保守区设计1对特异引物和TaqMan探针,经反应条件优化、标准曲线建立,以及敏感性、特异性和重复性试验。结果显示,该方法在10~7~10~2拷贝/μL具有良好的线性关系(R2=0.999);灵敏度是普通PCR方法的100倍;对其他3种常见禽病毒无特异性扩增,具有较好的特异性;组内与组间的变异系数均小于2%,具有良好的重复性。对临床20份疑似GPV感染鹅病料进行检测,检出率比普通PCR高10%。表明本试验建立的TaqMan荧光定量PCR方法准确、稳定、灵敏和特异,可以用于GPV临床定性与定量检测。

    2018年06期 v.38;No.258 1100-1104页 [查看摘要][在线阅读][下载 1602K]
    [下载次数:212 ] |[网刊下载次数:0 ] |[引用频次:12 ] |[阅读次数:197 ]
  • 以色列急性麻痹病毒(IAPV)RT-PCR检测方法的建立及应用

    张体银;李丹丹;郑腾;白泉阳;张志灯;王武军;于师宇;

    为建立以色列急性麻痹病毒(Israeli acute paralysis virus,IAPV)特异性核酸检测方法,本研究以IAPV polymerase polyprotein基因为靶基因设计合成1对特异性引物,建立了IAPV的RT-PCR检测方法。结果显示,对蜜蜂的5种不同病毒进行RT-PCR检测,只有IAPV病毒检测结果为阳性,具有良好的特异性;对IAPV的最低检测限为103拷贝/μL,具有较高的灵敏度;利用该检测方法对来自福建省不同养蜂场的8份蜜蜂样品进行检测,3份样品为阳性,通过序列比对分析,同源性超过99%,进一步证实为IAPV。结果表明,所建立的IAPV RT-PCR检测方法灵敏度高、特异性强、重复性好,具有良好的实用性。

    2018年06期 v.38;No.258 1105-1108页 [查看摘要][在线阅读][下载 314K]
    [下载次数:123 ] |[网刊下载次数:0 ] |[引用频次:4 ] |[阅读次数:193 ]
  • 不同来源牛血清样品中HoBi样病毒的检测

    王建昌;马飞;李波;刘立兵;王金凤;南汇珠;

    为了解HoBi样病毒在我国不同来源的牛血清样品中的存在情况,本研究使用荧光RT-PCR方法对530份进境种牛血清、200份河北省奶牛血清和47份商品化胎牛血清进行检测,并对病毒5′UTR序列进行扩增、测序和遗传进化分析。结果表明,从13份南美源胎牛血清中检出4份HoBi样病毒阳性样品,其余血清均为HoBi样病毒阴性;5′UTR序列分析表明,4株病毒与GenBank中登录的HoBi样病毒聚为一支。进一步分析表明,4株病毒核苷酸同源性为96.9%~100.0%,与南美、欧洲源毒株亲缘关系最近,同源性为95.7%~99.6%,而与亚洲源毒株亲缘关系较远,同源性为88.2%~93.0%。本研究结果表明在我国使用的部分南美源商品化胎牛血清中存在HoBi样病毒的污染。

    2018年06期 v.38;No.258 1109-1113页 [查看摘要][在线阅读][下载 476K]
    [下载次数:80 ] |[网刊下载次数:0 ] |[引用频次:0 ] |[阅读次数:147 ]
  • 猪支气管败血波氏杆菌外膜蛋白OmpQ基因的克隆表达及多抗血清的制备

    宁建刚;冯娜;肖敏;高翔;温峰琴;包世俊;邢小勇;胡永浩;

    为研究猪源性支气管败血波氏杆菌外膜蛋白OmpQ的功能及免疫原性,本研究参照GenBank中支气管败血波氏杆菌S798株的外膜蛋白OmpQ基因序列设计引物,通过PCR扩增技术获得OmpQ基因,测序后进行同源性分析,并将其克隆至pET-28a(+)载体,构建重组质粒pET-OmpQ,转化大肠杆菌Transetta(DE3),经IPTG诱导表达纯化目的蛋白免疫昆明小鼠制备多克隆抗体,Western blot分析其免疫原性。结果显示,表达蛋白相对分子质量大小约为36 000,且以包涵体的形式存在。间接ELISA和Western blot结果表明,表达产物具有较好的免疫原性。研究结果为支气管败血波氏杆菌外膜蛋白OmpQ的后续生物学功能研究奠定基础,并为支气管败血波氏杆菌的快速诊断提供数据支持。

    2018年06期 v.38;No.258 1114-1118页 [查看摘要][在线阅读][下载 670K]
    [下载次数:204 ] |[网刊下载次数:0 ] |[引用频次:2 ] |[阅读次数:212 ]
  • iTRAQ技术分析无乳链球菌牛源株与人源株差异表达蛋白

    郭长明;袁橙;朱善元;王安平;吴双;王永娟;左伟勇;洪伟鸣;秦枫;

    为了分析无乳链球菌牛源株ATCC13813与人源株A909差异蛋白质组,提取ATCC13813与A909全菌蛋白,iTRAQ技术标记后,进行液相色谱串联质谱(LC-MS/MS)鉴定和定量,质谱数据通过Mascot 2.2和Proteome discoverer 1.4软件分析,并对差异蛋白进行GO功能注释和KEGG pathway通路分析。结果显示,共鉴定出差异表达蛋白350个(P<0.05),与ATCC13813相比,在A909中上调表达蛋白174个(比值>1.5),下调表达蛋白176个(比值<0.667)。生物信息学分析预测这些蛋白主要涵盖28个生物学功能,14个通路。本研究为阐明不同宿主来源株无乳链球菌致病性差异奠定基础。

    2018年06期 v.38;No.258 1119-1125页 [查看摘要][在线阅读][下载 1159K]
    [下载次数:133 ] |[网刊下载次数:0 ] |[引用频次:9 ] |[阅读次数:201 ]
  • 广州市马红球菌病血清学调查

    张西君;吴腾;俞森;白洁;罗蔼剑;张莹;沈丹;鱼海琼;孙凌霜;

    本研究对广州市8家马场及散户马匹随机抽样,采用本研究室建立的ELISA检测方法,对马红球菌病血清学分布情况进行调查,分析各影响因素与其抗体阳性率和量的相关性。结果表明:广州市马匹马红球菌病平均抗体阳性率为58.7%;性别因素与阳性率与抗体量相关,但均不显著;品种因素与马红球菌病抗体阳性率无关,且阳性马匹中,纯血马抗体量高于国产马及其他品种马匹,但无显著性差异;马场环境因素与阳性率及抗体量显著相关;季节因素与马红球菌抗体阳性率及血清阳性抗体量间无明显相关性。本研究通过系统的流行病学方法对马红球菌病进行血清学、流行病学统计调查与分析,不仅为广州市马无疫区建设及我国马红球菌病的防控措施建设提供必要参考,且对该疾病防控具有重要的公共卫生学意义。

    2018年06期 v.38;No.258 1126-1131页 [查看摘要][在线阅读][下载 1979K]
    [下载次数:125 ] |[网刊下载次数:0 ] |[引用频次:6 ] |[阅读次数:152 ]
  • 犬组织相容复合物Ⅰ类分子的真核表达和细胞膜呈递

    贺英;陈娟;潘素敏;倪静;曹旺斌;杨宗泽;史秋梅;

    为进一步研究主要组织相容性复合体Ⅰ类分子(major histocompatibility complex classⅠ,MHCⅠ)的作用机制,提高其抗原呈递效率,通过基因重组技术获得犬DLA-12基因,插入pcDNA3真核表达载体,成功构建了重组质粒pcDNA3-DLA-12。用重组质粒脂质体法转染FK81细胞,G418筛选稳定转染细胞,获得表达MHCⅠ克隆细胞。Western blot检测可见43 000左右的蛋白特异反应带,与目的蛋白大小相当。流式细胞仪分析表明,超表达DLA-12增加了MHC I的细胞膜呈递。

    2018年06期 v.38;No.258 1132-1135页 [查看摘要][在线阅读][下载 403K]
    [下载次数:58 ] |[网刊下载次数:0 ] |[引用频次:0 ] |[阅读次数:131 ]

人兽共患病

  • 狂犬病减毒脂质体口服冻干活疫苗免疫效果检测

    翟少华;程瑶;文兆海;毛丽萍;简子健;

    将制备的狂犬病rSRV9减毒口服冻干脂质体活疫苗配合以自制的复合佐剂,免疫小鼠、犬、猫,根据ELISA抗体定量检测方法,对免疫后小鼠血清IgG、小鼠粪便IgA、犬和猫血清IgG、犬和猫唾液IgA的ELISA抗体水平进行检测,其检测结果与注射狂犬病疫苗免疫效果进行对比。结果显示,复合佐剂+rSRV9病毒口服免疫后70d,小鼠血清抗狂犬病特异性IgG抗体水平为4 214.00U/mL,小鼠粪便中SIgA抗体水平为137.00U/mL;复合佐剂+rSRV9病毒口服免疫犬120d抗体水平最高,犬抗狂犬病特异性IgG抗体水平为1 420.00U/mL,唾液中SIgA抗体水平为1 199.00U/mL;猫抗狂犬病特异性IgG抗体水平为2 088.00U/mL,唾液中SIgA抗体水平为1 896.00U/mL。狂犬病疫苗口服组与注射组特异性抗体水平差异均不显著。结果表明,狂犬病rSRV9减毒口服冻干脂质体活疫苗的抗体产生水平已接近注射狂犬病疫苗的免疫效果,能够达到对动物的免疫效果。

    2018年06期 v.38;No.258 1136-1140+1150页 [查看摘要][在线阅读][下载 147K]
    [下载次数:290 ] |[网刊下载次数:0 ] |[引用频次:6 ] |[阅读次数:164 ]
  • 1株鹅源H9N2亚型禽流感病毒分子进化分析及对鹅的致病性

    张溢珊;陈济铛;陈建红;刘敏芳;曹梦蕊;张济培;

    从广东地区鹅群采集的咽喉拭子中分离到1株H9N2亚型禽流感病毒(AIV)并命名为A/Goose/Guangdong/A11/2016(H9N2)(GS/A11)。采用RT-PCR方法扩增出病毒的全基因片段,并进行序列比较及遗传进化分析。推导氨基酸序列分析表明,GS/A11的HA蛋白裂解位点序列为333PSRSS↓GL340,无连续碱性氨基酸,符合低致病性禽流感特征;GS/A11上的Q226L突变提示结合人α-2,6唾液酸受体的能力增加;M2蛋白中出现了与金刚烷抗性相关的S31N突变。基因遗传进化树分析显示,分离株病毒为三元重组基因型。为了解H9N2亚型对鹅的致病性,以106×EID50剂量经静脉注射6周非免疫鹅,攻毒显示,攻毒鹅无明显临床症状,仅表现为局部器官感染,可经喉气管和泄殖腔排毒。研究提示,该株H9N2亚型AIV对鹅无明显致病力,但感染后可持续排毒。该现象为流感病毒在鹅及其他禽类中流行并发生基因重组提供了机会,故应加强鹅H9N2亚型AIV的检测及分子遗传的演变监控。

    2018年06期 v.38;No.258 1141-1150页 [查看摘要][在线阅读][下载 3872K]
    [下载次数:201 ] |[网刊下载次数:0 ] |[引用频次:8 ] |[阅读次数:218 ]
  • 胶东地区MSSA与MRSA的分离鉴定与耐药性分析

    王龙光;黄秀梅;逄春华;李玉清;刘焕奇;曲志娜;

    了解胶东地区猪源耐甲氧西林金黄色葡萄球菌(MRSA)的临床感染现状及耐药性,为临床合理使用抗生素类药物提供数据依据。利用多重PCR方法,扩增葡萄球菌属16SrRNA基因,金黄色葡萄球菌属nuc基因以及耐药基因mecA;血浆凝固酶试验对MRSA进行鉴定;微量肉汤稀释法对MRSA的耐药表型进行检测;运用SPSS20.0软件对试验数据进行统计分析。结果显示:共分离出508株金黄色葡萄球菌,其中MRSA 122株,占24.02%;甲氧西林敏感金黄色葡萄球菌(MSSA)386株,占75.98%。所有样品均来自健康猪只的鼻腔拭子和体表拭子。MRSA对AM和P的耐药率为100%;对CLI、CEF、TIL、CZ、EM、A/C和SXT的耐药率均在80%以上;对OFL、ENR和SF的耐药率较低,分别为13.11%,5.74%和4.10%。MSSA对EM、AM和P的耐药率均在90%以上;对CLI、CEF、TIL、CZ和SXT的耐药率均在50%以上;对ENR、OFL和A/C的耐药率分别为25.65%,47.15%,41.71%;对SF的耐药率最低为2.33%。MRSA与MSSA未检出耐VAN的菌株。MRSA的多重耐药率为100%,多集中在7耐及以上;MSSA多重耐药率为99.22%,多集中在3~11耐。结果表明,MRSA的检出率较高,MRSA的耐药率及多重耐药率高于MSSA,且均处于较高水平,应给予重视,临床应依据药敏试验结果合理选择抗菌类药物。

    2018年06期 v.38;No.258 1151-1156页 [查看摘要][在线阅读][下载 491K]
    [下载次数:129 ] |[网刊下载次数:0 ] |[引用频次:5 ] |[阅读次数:200 ]
  • 弓形虫环核苷酸依赖性蛋白激酶真核表达载体构建及在Vero细胞内的定位分析

    孙洪超;黄冶川;杨怡;庄浩瀚;陈学秋;杜爱芳;

    为研究弓形虫环核苷酸依赖性蛋白激酶(PKAR)基因在Vero细胞内的定位情况,本研究构建弓形虫TgPKAR-RFP-C2真核表达质粒,并将其真核转染至Vero细胞内。试验中利用PKAR基因序列设计引物,以反转录获得的cDNA模板进行PCR扩增,成功获得目的片段,并构建克隆质粒pMD-PKAR。经BglⅡ和HindⅢ双酶切后构建真核表达质粒PKAR-RFP-C2,利用脂质体转染法将其导至Vero细胞内,利用Leica激光共聚焦显微镜观察PKAR基因在Vero细胞内的表达情况及其定位。结果显示,成功获得了PKAR基因,与GenBank公布的基因序列相似性为100%,并成功构建真核表达质粒及在Vero细胞内表达。Western blot试验成功检测到目的条带;激光共聚焦显微镜观察发现PKAR基因主要在Vero细胞的细胞质中呈点状表达。结果为进一步研究PKAR基因生物学功能及核酸疫苗研制奠定基础。

    2018年06期 v.38;No.258 1157-1163页 [查看摘要][在线阅读][下载 1024K]
    [下载次数:137 ] |[网刊下载次数:0 ] |[引用频次:1 ] |[阅读次数:188 ]
  • 我国蜱虫源埃里希体的宿主分布及分子流行病学调查

    李俊姣;刘新鑫;陈严玉;陶志;杨莹莹;费亦东;李青梅;丁壮;尹仁福;

    为了解我国蜱虫源埃里希体(Ehrlichia)的宿主分布及分子流行病学情况,于2016—2017年在内蒙古、黑龙江、吉林、浙江和海南等省份采集寄生于牛、羊、犬等蜱虫样品1 000余只,根据采样年份、宿主、地点等因素随机取300份蜱虫按每5只为1组进行Ehrlichia分离鉴定和分子流行病学调查。PCR结果和测序数据显示,蜱虫样品中Ehrlichia的总阳性率为10%(6株/60组),阳性率与时间、宿主、地点等因素密切相连;对所分离的6株牛蜱虫源Ehrlichia进行分子生物学鉴定发现,其中5株为犬埃里希体(E.canis),另外1株为反刍埃里希体(E.ruminantium)。结果表明,E.canis是当前的优势流行菌株,且广泛存在并寄生于各类动物的蜱虫中,通过蜱虫叮咬进而感染多种动物;因此有必要进一步进行E.canis的流调、疫苗的研发、杀虫等来阻断埃里希体病的流行。

    2018年06期 v.38;No.258 1164-1167页 [查看摘要][在线阅读][下载 502K]
    [下载次数:276 ] |[网刊下载次数:0 ] |[引用频次:2 ] |[阅读次数:199 ]

基础兽医学

  • 亚低温冷刺激对大鼠肝细胞中SOD、CAT和Caspase-3的影响

    薛琳琳;付云超;邹洪波;郭文晋;杨焕民;

    为研究冷应激状态下大鼠肝细胞系的抗氧化水平,本试验选取3个时间点(0,4,8h)分别对大鼠肝细胞系进行32℃冷刺激,并分别对3个时间点细胞的超氧化物歧化酶、过氧化氢酶和Caspase-3的活性进行检测。结果发现,32℃冷刺激时,超氧化物歧化酶和过氧化氢酶的活性并无显著性变化,但有下降的趋势,而Caspase-3在4h组的含量显著高于0,8h组(P<0.05),8h组的含量显著高于0h组(P<0.05)。结果表明,冷应激很有可能对大鼠肝细胞系的抗氧化水平产生不利影响,从而引起细胞出现一系列异常变化,甚至会导致肝细胞凋亡,影响正常的肝细胞功能。

    2018年06期 v.38;No.258 1168-1170页 [查看摘要][在线阅读][下载 228K]
    [下载次数:175 ] |[网刊下载次数:0 ] |[引用频次:5 ] |[阅读次数:163 ]
  • 丹参多糖对免疫性肝损伤相关炎性因子的体外调节

    韩超;王霄;陶金良;杨金凯;包永占;史万玉;

    为了探究丹参多糖对导致免疫性肝损伤相关炎性因子的体外调节作用,在体外用LPS刺激共培养的小鼠正常肝细胞NCTC1469和小鼠巨噬细胞RAW246.7建立体外肝细胞损伤模型,LPS单一刺激RAW246.7建立炎症模型。MTT法测定丹参多糖对NCTC1469和RAW246.7活性的安全范围;微板法测定NCTC1469与RAW246.7共培养细胞上清液中ALT的活性;Diff-Quik染色观察RAW246.7的形态变化;ELISA测定RAW246.7细胞上清液中TNF-α、IL-6、IL-10和IL-1β水平;Griss法测定细胞上清液中NO的含量。结果显示,与空白组相比,LPS组能显著性提高NCTC1469和RAW246.7共培养中ALT的含量,刺激RAW246.7细胞变形,RAW246.7细胞液中TNF-α、IL-6、IL-10、IL-1β和NO的释放量显著性升高(P<0.01)。丹参多糖各组(2.0,1.0,0.5g/L)能显著性降低共培养细胞液中ALT的活性(P<0.05),并能改善LPS导致的RAW246.7的变形程度,显著性降低RAW246.7细胞液中TNF-α、IL-6、IL-10、IL-1β和NO的释放量(P<0.01)。结果表明,丹参多糖能有效抑制炎症反应,并通过减少炎性因子的释放达到缓解免疫性肝损伤的效果。

    2018年06期 v.38;No.258 1171-1176页 [查看摘要][在线阅读][下载 1363K]
    [下载次数:242 ] |[网刊下载次数:0 ] |[引用频次:9 ] |[阅读次数:156 ]
  • 用于活体成像裸鼠肺癌肿瘤模型的建立

    范园园;李铁;陈爽;李一权;荣凤君;李文杰;尹逊哲;韩继成;李善智;李敏;崔传信;李霄;金宁一;

    本研究构建1株能够稳定表达荧光素酶的人肺癌细胞,并进行生物学特性鉴定及体内成瘤情况验证。将携带有萤火虫荧光素酶基因的pGL4.50质粒转入A549细胞中,利用G418一直加压筛选出能够表达荧光素酶的阳性细胞克隆,并对阳性细胞克隆进行稳定性和体外活体成像检测。测定A549-luc细胞和A549细胞的生长曲线、迁移、侵袭及细胞周期,确定转染前后细胞生物学特性变化。为检测A549-luc细胞在体内成瘤和发光情况,建立裸鼠皮下荷瘤模型并应用小动物活体成像系统观察。结果表明,通过G418一直加压筛选和荧光素酶活性检测,筛选出2株荧光素酶活性高的克隆Clone20和Clone28,并连续传至40代,每5代检测1次荧光素酶活性,最终保留荧光素酶活性和稳定性最高的Clone28,Clone28通过体外活体成像检测显示生物发光值与细胞数目呈正相关的线性关系(R2=0.994 8)。A549-luc细胞和A549细胞具有相似的生长特性、迁移和侵袭能力以及细胞周期。成功建立了裸鼠皮下荷瘤模型,其发光强度与肿瘤体积呈正相关的线性关系(R2=0.971 5)。本研究稳定表达荧光素酶的人肺癌细胞的构建并成功建立裸鼠皮下荷瘤模型,可通过活体生物成像系统动态监测肿瘤的变化。

    2018年06期 v.38;No.258 1177-1184页 [查看摘要][在线阅读][下载 1827K]
    [下载次数:669 ] |[网刊下载次数:0 ] |[引用频次:4 ] |[阅读次数:122 ]
  • 益生菌对哺乳仔猪生产性能及胃肠道生理状态的影响

    王国强;朱群;常娟;王平;尹清强;刘超齐;王二柱;卢富山;

    针对哺乳仔猪发病率和死亡率高的问题,本研究通过定期给乳仔猪口服益生菌,观察其对哺乳仔猪生长性能和健康的影响。选择品种相同、出生日期及体质量相近的仔猪15窝,每窝选择8头仔猪,共计120头哺乳仔猪,分为4个处理组,每组30头仔猪,每窝中每组2头仔猪(公母各半)。试验分组如下:对照组,灌服生理盐水;试验Ⅰ组,灌服干酪乳杆菌培养液(1×109 CFU/mL);试验Ⅱ组,灌服粪肠球菌培养液(1×109 CFU/mL);试验Ⅲ组,灌服干酪乳杆菌和粪肠球菌混合培养液(比例为3∶1)。仔猪出生时灌服1mL,在7,14,21日龄时分别灌服2,3,4mL。仔猪于21日龄断奶,并持续观察至28日龄。结果表明,灌服益生菌试验Ⅰ~Ⅲ组21,28日龄仔猪的平均日增重分别比对照组提高了16.57%,15.73%,17.55%及17.61%,19.49%,27.40%(P<0.05);21日龄仔猪的死亡率和腹泻率分别比对照组下降了58.46%,43.13%,64.82%及53.59%,53.10%,55.30%(P<0.05);断奶后7d仔猪的腹泻率分别比对照组下降了62.60%,51.93%,70.26%(P<0.05)。3个益生菌组之间的生产指标均差异不显著(P>0.05)。另外,复合益生菌组仔猪的胃肠道中蛋白酶和淀粉酶活性及乳酸菌数量显著高于对照组(P<0.05),而pH值和大肠杆菌数量则显著低于对照组(P<0.05)。血清学分析表明,3个益生菌组21日龄仔猪血清IgA和IgG的含量显著高于对照组(P<0.05),复合益生菌组血清谷丙转氨酶(ALT)和谷草转氨酶(AST)的含量显著低于对照组(P<0.05)。说明益生菌可提高哺乳仔猪生长性能和健康指数,对于哺乳仔猪的生产具有良好的促进作用。

    2018年06期 v.38;No.258 1185-1191页 [查看摘要][在线阅读][下载 149K]
    [下载次数:403 ] |[网刊下载次数:0 ] |[引用频次:26 ] |[阅读次数:135 ]
  • 牛和羊脂肪细胞超微结构的比较

    蒙建菊;孙宗扬;王振宝;王金泉;

    为了探明牛、羊脂肪细胞超微结构的异同,本试验以15月龄成年雄性阿勒泰大尾羊尾脂、肾周脂和15月龄成年雌性荷斯坦奶牛肾周脂为研究对象,采用透射电镜技术观察并比较了牛、羊不同部位脂肪细胞超微结构。结果显示,在阿勒泰大尾羊尾脂脂肪细胞膜的外侧有特殊的"发丝状"结构,周围分布有黑色点状颗粒;在肾周脂脂肪细胞胞质中清晰可见一些未融合的、形状不一的脂肪滴,以及大量排列整齐的内质网,表面粗糙,其外形及排列明显与尾脂脂肪细胞中内质网不同。牛肾周脂脂肪细胞胞质中有大量的线粒体和内质网。大尾羊尾脂脂肪细胞与羊肾周脂和牛肾周脂脂肪细胞在超微结构上存在明显差异。

    2018年06期 v.38;No.258 1192-1196+1200页 [查看摘要][在线阅读][下载 3492K]
    [下载次数:251 ] |[网刊下载次数:0 ] |[引用频次:3 ] |[阅读次数:206 ]

临床兽医学

  • 小檗果提取物对奶牛乳房炎常见致病菌体外抑菌和抗炎作用

    赛福丁·阿不拉;努尔艾力·麦提尼亚孜;阿依姑丽·买买提明;德力拜尔;阿得力江·吾斯曼;买热木尼沙·吾甫尔;

    为探索小檗果提取物的体外抑菌和抗炎功效,本试验以乙醇和水为溶媒提取了小檗果粗体物,进行体外抑菌试验,检测对奶牛乳房炎常见致病菌即大肠埃希菌、金黄色葡萄球菌及链球菌的抑菌活性,并采用二甲苯致小鼠耳廓肿胀法观察抗炎作用。结果显示,小檗果水提物和醇提物对3种致病菌均有抑菌作用,达到高敏或中敏,抑菌圈直径为(10.69±0.16)~(16.89±0.67)mm。与模型组相比,小檗果水提物和醇提物低剂量组明显抑制二甲苯所致小鼠耳廓肿胀(P<0.01),抑制率均高于58%。本试验为小檗果进一步开发利用提供试验依据。

    2018年06期 v.38;No.258 1197-1200页 [查看摘要][在线阅读][下载 113K]
    [下载次数:245 ] |[网刊下载次数:0 ] |[引用频次:9 ] |[阅读次数:180 ]
  • 白头翁素对E.coli诱导断乳腹泻仔兔肠道组织病理变化、NF-κB p65 mRNA及蛋白表达的影响

    杜冬华;利凯;周静;梁淑珍;王鹏;刘春凌;

    为了探讨白头翁素(anemonin)在仔兔大肠杆菌性腹泻中的作用及其对核因子NF-κB p65表达的影响,试验将200只30日龄健康新西兰兔随机分为4组,大肠杆菌感染致腹泻(E.coli)组、E.coli+anemonin干预组、生理盐水(NS)组和NS+anemonin对照组。观察各组仔兔临床症状,作为仔兔是否发病的指标,同时统计各组仔兔体质量变化及存活时间,观察肠道组织病理学变化,并用实时荧光定量RT-PCR和Western blot方法分别检测肠道组织内NF-κB p65基因及其蛋白表达量。结果显示,E.coli组仔兔表现精神沉郁,食欲减退或废绝,排出水样或胶冻样稀粪,脱水,且体质量下降明显;剖检发现肠黏膜充血,水肿;组织学变化显示肠黏膜绒毛排列紊乱,萎缩、断裂、脱落、间隙增宽、空泡化等。而与E.coli组相比,E.coli+anemonin干预组仔兔症状则较轻,死亡率明显降低(P<0.05),感染仔兔存活时间明显延长(P<0.05);Western blot和qRT-PCR结果显示,anemonin干预可使仔兔肠道组织NF-κB p65mRNA及其蛋白表达量极显著减弱(P<0.01),干预后14d恢复至正常表达水平。以上结果表明,E.coli感染诱导仔兔腹泻导致肠损伤过程中可激活NF-κB p65mRNA及其蛋白表达,这可能是导致仔兔肠损伤的重要因素,而其抑制剂anemonin在干预E.coli致仔兔腹泻引起的肠损伤方面有重要作用。

    2018年06期 v.38;No.258 1201-1206页 [查看摘要][在线阅读][下载 1541K]
    [下载次数:317 ] |[网刊下载次数:0 ] |[引用频次:6 ] |[阅读次数:189 ]
  • 米曲霉和酵母培养物对绵羊瘤胃发酵的影响

    朴光赫;甄玉国;张学峰;王涛;汪晓东;刘仰知;

    通过体内与体外试验相结合,研究米曲霉培养物(AO)和酵母培养物(YC)对绵羊瘤胃发酵的影响,从而筛选出在绵羊日粮精粗比为3∶7条件下AO和YC的最适组合。体外试验分为12组:对照组(Ⅰ组)、0.4%AO(Ⅱ组)、1.5%YC(Ⅲ组)、0.2%AO+0.5%YC(Ⅳ组)、0.2%AO+1.0%YC(Ⅴ组)、0.2%AO+1.5%YC(Ⅵ组)、0.3%AO+0.5%YC(Ⅶ组)、0.3%AO+1.0%YC(Ⅷ组)、0.3%AO+1.5%YC(Ⅸ组)、0.4%AO+0.5%YC(Ⅹ组)、0.4%AO+1.0%YC(Ⅺ组)、0.4%AO+1.5%YC(Ⅻ组),每组3个重复。体内试验分为5组:对照组、0.4%AO组、1.5%YC组、体外筛选最优2组,每组3个重复。体外及体内测定各时间段的pH值、氨氮(NH3-N)、挥发性脂肪酸(VFA)浓度。结果表明,体外培养试验中,通过多项指标综合指数可以看出0.4%AO+1.0%YC组和0.4%AO+0.5%YC组对绵羊瘤胃发酵的影响优于其他YC和AO复合组。在体内试验中,0.4%AO+1.0%YC组发酵效果优于其他组,能显著降低NH3-N质量浓度,并能显著提高乙酸、丙酸和TVFA浓度(P<0.05)。因此AO和YC的最佳组合为0.4%AO+1.0%YC。

    2018年06期 v.38;No.258 1207-1213页 [查看摘要][在线阅读][下载 159K]
    [下载次数:282 ] |[网刊下载次数:0 ] |[引用频次:5 ] |[阅读次数:115 ]

动物科学

  • TNF-α对仔猪睾丸支持细胞中Fas/FasL表达的调节作用

    邓洁;张会琼;黄莎;胡煜;练雨;王鲜忠;

    本研究旨在探索TNF-α对睾丸支持细胞(SCs)中Fas/FasL表达的影响及机制。用不同质量浓度的TNF-α(0.0,0.1,1.0,10.0,25.0,50.0,100.0,200.0μg/L)处理SCs不同时间(0,6,12,24,36,48,72h)后,采用CCK-8细胞增殖检测试剂盒检测细胞的增殖;通过流式细胞术检测细胞周期进程和细胞凋亡;用Western blot和荧光定量PCR技术检测Fas/FasL、MMP-2/MMP-9和TIMP-2/TIMP-1蛋白水平及其mRNA丰度;利用ELISA试剂盒检测IL-1β、IL-6、IGF-1、TGF-β1等细胞因子水平。结果显示,当TNF-α质量浓度为50.0μg/L、作用时间为36h时,细胞的增殖活力最低;这一条件显著促进了Fas/FasL、MMP-2/MMP-9蛋白及mRNA的表达(P<0.05),极显著降低了TIMP-1和TIMP-2mRNA与蛋白表达(P<0.01),且极显著促进了细胞促炎性因子IL-1β和IL-6分泌(P<0.01),显著抑制了促生长因子IGF-1和TGF-β1分泌(P<0.05)。结果表明:TNF-α以剂量和时间依赖方式诱导SCs中Fas/FasL mRNA及蛋白表达,从而诱发SCs凋亡,且Fas/FasL表达受到MMP-2/MMP-9、TIMP-2/TIMP-1以及细胞因子水平的影响。

    2018年06期 v.38;No.258 1214-1221页 [查看摘要][在线阅读][下载 1267K]
    [下载次数:139 ] |[网刊下载次数:0 ] |[引用频次:2 ] |[阅读次数:156 ]
  • 酿酒酵母培养物对肉仔鸡生长性能及免疫功能的影响

    孙喆;甄玉国;赵巍;赵小丽;汪晓东;秦贵信;

    本试验旨在探究日粮中添加不同发酵时间的酿酒酵母培养物对肉仔鸡生长性能和免疫功能的影响,并确定其应用于肉仔鸡的最适发酵产品的发酵时间。选取336羽健康、体质量相近的1日龄AA肉仔鸡,随机分为7个处理组,每个处理6个重复,每个重复8只。对照组饲喂基础日粮,酿酒酵母培养物组分别在基础日粮中添加发酵时间12,4,36,48,60h的酵母培养物,阳性对照组添加"达农威益康V XP"酵母培养物产品,预试期7d,试验期为42d。结果表明:饲粮中添加不同发酵时间的酿酒酵母培养物可以改善肉仔鸡的生长性能,与对照组相比,7~42d添加发酵24,36h的酿酒酵母培养物组肉仔鸡的平均日增重(ADG)分别显著提高了11.16%,12.36%(P<0.05),料重比(F/G)分别降低了9.19%,8.77%(P<0.05),且各处理组的平均日采食量(ADFI)均有提高趋势(P>0.05),比对照组分别提高了1.41%,2.32%,2.70%和3.46%,且阳性对照组与对照组基本持平。同时,添加酿酒酵母培养物可以促进肉仔鸡的免疫功能,21,42d,添加发酵24,36h酿酒酵母培养物组的免疫球蛋白(IgA,IgG)浓度显著高于对照组(P<0.05),而添加发酵36h酿酒酵母培养物组的白蛋白和血清总蛋白质含量也显著高于空白对照组与阳性对照组(P<0.05)。各试验组的免疫器官指数与对照组相比均有不同程度地提高,其中42d,添加发酵24h酿酒酵母培养物组的脾脏指数显著高于对照组(P<0.05),比对照组提高了36.19%。综上所述在本试验条件下,添加发酵24,36h的酿酒酵母培养物对肉仔鸡的营养保健效果最佳。

    2018年06期 v.38;No.258 1222-1227页 [查看摘要][在线阅读][下载 140K]
    [下载次数:372 ] |[网刊下载次数:0 ] |[引用频次:29 ] |[阅读次数:184 ]
  • 银黑狐TYRP1基因CDS区鉴定及生物信息学分析

    张文香;徐桂利;刘艳军;牛迪;彭永东;尹生辉;石刚;刘铮铸;巩元芳;李祥龙;李佩国;

    为了探明酪氨酸酶相关蛋白1(TYRP1)基因对狐狸毛色的调控机制,本研究利用RT-PCR、染色体步移和核酸测序等技术,获得了银黑狐TYRP1基因完整编码区(coding DNA sequence,CDS),利用ProtParam和PredictProtein等在线软件对该基因进行了生物信息学分析,并利用Lasergene7.1软件包进行银黑狐与其他物种间的同源性分析及系统进化树的构建。结果表明,银黑狐TYRP1基因CDS区共计1 614bp,编码537个氨基酸残基,属于不稳定可溶性亲水蛋白质。亚细胞定位主要在内质网和高尔基体中,属于分泌蛋白。在第24和25个氨基酸之间存在1个裂解位点,存在信号肽。其属跨膜蛋白,包括跨膜域、胞外域和胞内域3个部分。二级结构以无规则卷曲为主(59.03%),α-螺旋占22.91%,属卷曲蛋白质。三级结构与二级结构预测结果基本一致,主要是由无规则卷曲和α-螺旋构成。银黑狐与其他10个物种间的相似度为88.6%~99.6%,说明物种之间同源性较高,TYRP1基因编码区在进化过程中保守性较强。系统进化分析提示,银黑狐与赤狐和家犬的遗传亲缘关系最近。银黑狐TYRP1基因编码区的成功获取及分析为进一步探讨其在毛色形成过程中的功能研究提供了较好的理论依据。

    2018年06期 v.38;No.258 1228-1236页 [查看摘要][在线阅读][下载 3103K]
    [下载次数:142 ] |[网刊下载次数:0 ] |[引用频次:0 ] |[阅读次数:280 ]
  • 水牛孤雌激活早期胚胎蛋白质表达谱的构建及生物信息学分析

    陈富美;濮黎萍;付强;王焕景;张鹏飞;候振;徐壮壮;黄凤玲;陆阳清;张明;

    收集水牛孤雌激活后2细胞期早期胚胎500枚,利用0.1%链酶蛋白酶去除透明带后提取蛋白质,并使用胰蛋白酶进行酶解处理,再将酶解得到的多肽混合物经强阳离子交换色谱进行预分离,预分离后所收集的馏分通过液相色谱串联质谱(LC-MS/MS)技术进行质谱鉴定,原始数据通过数据库搜索获得该时期蛋白质表达谱。通过SEQUEST检索共得到778种蛋白,对其进行生物信息学初步分析,包括GO富集分析和蛋白互作网络分析等。结果发现,这些蛋白质主要参与氧化还原、蛋白质折叠、细胞内蛋白质运输等生物学过程,主要定位于线粒体和细胞膜上。本研究为后续以孤雌激活为研究模型探讨哺乳动物早期胚胎发育和母源性蛋白质调控机制提供了新的研究手段和方法。

    2018年06期 v.38;No.258 1237-1243页 [查看摘要][在线阅读][下载 2008K]
    [下载次数:110 ] |[网刊下载次数:0 ] |[引用频次:0 ] |[阅读次数:169 ]

综述

  • RNA-Seq技术在动物病毒传染病学研究中的应用

    侯佩莉;王洪梅;赵贵民;何洪彬;

    病原与宿主相互作用,是构成感染的基本因素,RNA-Seq技术的发展推动病原与宿主相互作用研究,已进入全方位系统分析整个转录组水平,能够从整体水平研究差异表达基因以及基因功能,揭示特定生物学过程以及病毒致病的分子机理。现主要介绍了RNA-Seq原理、技术特点及其在动物病毒感染研究中的应用,简略地分析了该技术的不足之处,并对其应用进行了展望。

    2018年06期 v.38;No.258 1244-1249页 [查看摘要][在线阅读][下载 149K]
    [下载次数:314 ] |[网刊下载次数:0 ] |[引用频次:7 ] |[阅读次数:162 ]
  • 牛结核病免疫学诊断研究进展

    彭永崇;朱小洁;王子健;陈颖钰;郭爱珍;

    牛结核病是一种严重危害养牛业、食品安全和公共卫生的人兽共患传染病。由于检疫和扑杀是目前控制牛结核病的基本策略,检测技术成为影响牛结核病控制效果的重要因素。理想的检测方法应具有准确、简便、高效、成本低、对动物干扰小、结果可追溯等特点。当前的法定检疫方法为结核菌素皮内变态反应,该方法具有受环境分枝杆菌干扰、诊断特异性低、费时费力、对动物干扰大、结果判断主观性强、不可回溯等缺陷。一些牛结核实验室诊断技术克服了以上缺点,可与皮试法联用或单独使用。新型诊断抗原仍在不断被发掘,新型材料也被不断用于牛结核病诊断技术中。现对相关进展进行了归纳和综述,以期为牛结核病免疫学诊断的合理应用及深入研究提供参考。

    2018年06期 v.38;No.258 1250-1254+1259页 [查看摘要][在线阅读][下载 151K]
    [下载次数:663 ] |[网刊下载次数:0 ] |[引用频次:14 ] |[阅读次数:233 ]
  • 中药防治猪传染性胃肠炎作用研究进展

    朱买勋;林渝宁;周雪;

    中药具有防治猪传染性胃肠炎(TGE)的作用,直接抑制病毒的增殖、阻滞病毒对宿主细胞的入侵、抑制病毒的繁殖、增强动物机体自身免疫力、激发相关抗病毒因子产生等都可以有效地参与抗病毒作用,且不同种类的中药在不同的抗病毒途径中发挥着不同的作用,分析中药防治TGE的作用效果,为TGE的防治提供参考。

    2018年06期 v.38;No.258 1255-1259页 [查看摘要][在线阅读][下载 155K]
    [下载次数:345 ] |[网刊下载次数:0 ] |[引用频次:10 ] |[阅读次数:147 ]
  • 没有中兽医药学教育就没有中兽医药学的明天

    罗超应;李锦宇;王贵波;

    与西兽医药学的对抗疗法相比较,中兽医药学以整体观念、平衡机体的独特魅力,被愈来愈多的人所接受,在美国及西方许多国家的动物主人及兽医寻求中医整体疗法。然而,中国兽医却偏爱使用西医药治疗疾病,尤其是中兽医药学面临着后继乏人与学术异化等困扰。本研究对其进行复杂性分析后,科学认识中兽医药学的特点与优势,为促进其健康发展与发挥更大作用,关键是人才培养,没有中兽医药学教育就没有中兽医药学的明天。

    2018年06期 v.38;No.258 1260-1264页 [查看摘要][在线阅读][下载 125K]
    [下载次数:234 ] |[网刊下载次数:0 ] |[引用频次:3 ] |[阅读次数:160 ]

简讯