预防兽医学

  • 陕西部分猪场PCV2抗体及病毒检测分析

    罗丽华;赵紫印;冯秀;侯玉凤;徐盼盼;吕江漫;周宏超;张振仓;郭抗抗;

    为了解陕西省猪群中猪圆环病毒2型(PCV2)感染及其免疫抗体情况,2016-2017年间,在陕西省7个地区21个猪场采集544份血清样品(其中8个免疫猪场进行PCV2疫苗免疫,采集320份血清样品;13个非免疫猪场未进行PCV2疫苗免疫,采集224份血清样品),分别通过ELISA方法检测PCV2血清抗体及PCR方法检测PCV2核酸。结果显示,采集的544份血清中PCV2血清抗体平均阳性率为68%(368/544),其中免疫猪场为85%(271/320),非免疫猪场为43%(97/224);PCV2核酸平均阳性率为19%(103/544),其中免疫猪场为10%(32/320),非免疫猪场为32%(71/224)。结果表明,在PCV2疫苗免疫猪场和非免疫猪场均存在PCV2感染情况,疫苗免疫在一定程度上可以减少PCV2的感染,但是并不能完全阻止PCV2的感染。在防控PCV2感染工作中,除了做好生物安全工作以外,疫苗免疫接种是防止病毒感染的有效措施,但还要做好免疫猪抗体检测工作,减少病毒感染,防止猪圆环病毒相关疾病的发生。

    2019年07期 v.39;No.271 1245-1249页 [查看摘要][在线阅读][下载 261K]
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  • 猪圆环病毒3型SYBR greenⅠ荧光定量PCR方法建立及初步应用

    吕素芳;李峰;郭广君;魏凤;张文通;沈志强;

    为建立一种快速、特异、敏感的SYBR greenⅠ实时定量PCR方法,检测猪圆环病毒3型(PCV3)在感染猪体内的分布情况和病毒含量,本研究根据PCV3的cap基因序列设计1对引物,对反应条件、反应体系进行优化,建立了检测PCV3 cap基因的SYBR greenⅠ实时定量PCR方法,并对动物回归试验后剖检的病料组织进行了检测。结果,该方法比传统PCR方法灵敏度高100倍,可达3.04×10~2拷贝/μL,且具有良好的特异性和重复性。在不同病料组织中均可检测到PCV3,但不同感染猪、不同组织病毒检出及含量有差异,其中肝脏、肺脏、颌下淋巴结中病毒含量显著高于心脏、心包肌、肾脏等;肝中病毒拷贝数最高,达1.16×10~6拷贝/μL,表明PCV3具有一定的组织嗜性。该方法可用于PCV3的病原学监测、流行病学调查及定量研究。

    2019年07期 v.39;No.271 1250-1255页 [查看摘要][在线阅读][下载 1071K]
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  • 抗猪流行性腹泻病毒纳米单链抗体CNC-CBD-scFv的制备及鉴定

    刘慧敏;李浩;朱文娇;常琛;路万平;杨国庆;

    为防治猪流行性腹泻病毒(porcine epidemic diarrhea virus,PEDV),本文制备纳米化抗PEDV单链抗体(single-chain fragment,scFv)并验证其生物学特性。通过PCR方法扩增含有纤维素结合结构域(cellulose binding domain,CBD)的单链抗体基因CBD-scFv,构建抗PEDV的原核重组表达载体pET19b-CBD-scFv,鉴定正确后进行蛋白表达与鉴定。经硫酸水解法制备纳米纤维素(cellulose nanocrystal,CNC)后,将纯化复性后的CBD-scFv蛋白与CNC孵育结合得到纳米抗体CNC-CBD-scFv,通过SDS-PAGE和透射电镜鉴定复合物的结合效果。SDS-PAGE与Western blot结果表明抗体蛋白CBD-scFv正确表达;制备的纳米纤维素粒度均达到纳米材料级别;CNC与CBD-scFv结合后SDS-PAGE与透射电镜结果说明CNC与CBD-scFv在室温条件下可高效结合。本试验在高效表达合成复合纳米抗体材料的同时为PEDV的防治及应用奠定了一定的试验基础。

    2019年07期 v.39;No.271 1256-1260+1268页 [查看摘要][在线阅读][下载 1100K]
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  • 从江香猪源Ⅰ、Ⅱ型干扰素生菜中融合表达及其生物活性

    田浪;温贵兰;张升波;杨佰启;李昌红;陈广;张喜懿;

    干扰素(interfern,IFN)是在特定的诱生剂作用下,由细胞产生的一种具有高度生物活性的糖蛋白,具有广谱抗病毒活性。从江香猪源Ι型干扰素α2和Ⅱ型干扰素γ于生菜中融合表达及生物活性研究未见报道。本研究应用生菜植物表达系统,将从江香猪源干扰素植物表达载体PBI121-IFNα2、PBI121-IFNα2γ、PBI121-IFNγ、PBI121-Vec转入根癌农杆菌LBA4404中,用真空渗透法将携带干扰素质粒的根癌农杆菌感染生菜叶片;用β-葡萄糖苷酸酶(β-glucuronidase,GUS)染色和酶联免疫吸附测定(enzyme linked immunosorbent assay,ELISA)检测从江香猪源干扰素在生菜叶片中的表达;用实时荧光定量PCR(quantitative real-time PCR,Q-PCR)技术分析从江香猪源干扰素蛋白活性。结果显示:GUS染色和ELISA检测证明从江香猪源IFNα2、IFNα2γ、IFNγ在生菜中实现了表达;Q-PCR检测显示:在Marc-145细胞上从江香猪源干扰素蛋白对PRRSV的复制有明显抑制作用,在PK15细胞上从江香猪源干扰素蛋白对干扰素γ诱导蛋白30(interferon-gamma-inducible protein 30,IFI30)、2′-5′寡聚腺苷酸合成酶(2′-5′oligoadenylate synthetase,OAS)、抗黏液病毒蛋白(myxovirus resistance,MX)基因的mRNA水平的上调有一定的促进作用。本研究成功实现从江香猪源IFNα2、IFNα2γ、IFNγ在生菜中进行表达且表达蛋白具有生物学活性,为从江香猪源Ι型和Ⅱ型干扰素新复合型药物植物蛋白的开发利用提供参考依据。

    2019年07期 v.39;No.271 1261-1268页 [查看摘要][在线阅读][下载 1353K]
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  • IBDV和NDV共感染对DF-1细胞的协同致病作用

    钱晶;欧阳伟;王晶宇;王晓丽;夏兴霞;诸玉梅;王永山;

    为研究传染性法氏囊病病毒(IBDV)和新城疫病毒(NDV)共感染对DF-1细胞的致病作用,本试验将IBDV和NDV以单独/共同形式感染DF-1细胞,镜下观察可见共感染组最早在感染48 h后出现细胞病变现象(CPE),其他感染组在72 h后出现明显CPE;细胞活性检测结果显示共感染组在48 h出现明显下降,在72 h显著低于其他组。感染上清中共感染组与单感染组病毒增殖曲线基本一致,均表现为24~72 h处于病毒增殖期。荧光定量PCR检测结果显示,共感染组细胞内NDV核酸载量均显著高于单感染组,其IBDV核酸载量在48 h高于单感染组;共感染组MDA5转录水平在24 h显著低于其他组,在48 h显著高于其他组;各感染组Ⅰ型IFN转录水平受到明显抑制,其中共感染组IFN-β转录水平显著低于单感染组。本研究结果表明IBDV与NDV共感染导致细胞病变加剧并促进胞内病毒复制,明确了病毒共感染具有协同致病作用;还发现病毒共感染导致MDA5-IFN信号通路出现异常,这为下一步解析IBDV与NDV共感染对宿主天然免疫系统的影响及协同致病机制奠定基础。

    2019年07期 v.39;No.271 1269-1274页 [查看摘要][在线阅读][下载 1692K]
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  • 种公鸡精液在坦布苏病毒感染传播中的作用

    陈珍;施少华;刘荣昌;蔡国漳;傅光华;陈翠腾;朱春华;刘斌琼;黄瑜;

    利用建立的(RT-)PCR方法对35份表现产蛋下降、受精率低下的种母鸡卵巢组织和140份用于人工授精种公鸡的精液进行病毒感染检测。结果仅检出坦布苏病毒阳性,其阳性率分别为100.0%和57.8%;以建立的间接ELISA方法对该种鸡群的320份种母鸡血清和140份种公鸡血清检测坦布苏病毒抗体,其阳性率分别为100.0%和69.3%。以上结果表明,该种鸡群的种母鸡和种公鸡均感染坦布苏病毒。以自精液中分离的坦布苏病毒人工感染成年公鸡,5 d后在其精液中检测到坦布苏病毒,第14天在其血清中检测到坦布苏病毒抗体;以检测为坦布苏病毒阳性的精液通过人工授精给开产蛋鸡后出现产蛋率下降,并在其卵巢和血清中分别检测到坦布苏病毒及其特异性抗体。可见,种公鸡也可感染坦布苏病毒,且可通过精液以人工授精方式水平传播给开产蛋鸡并造成产蛋下降。因此,应加强种公鸡坦布苏病毒感染的监测,并将其纳入种鸡场垂直传播疫病控制与净化计划中。

    2019年07期 v.39;No.271 1275-1279页 [查看摘要][在线阅读][下载 287K]
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  • 兔病毒性出血症快速检测方法的建立

    林颖峥;林士佳;孙欣;熊炜;张强;王艳;李树清;

    兔病毒性出血症是兔的1种传播性极强、致死率极高的重要传染病,针对性地加强该病原的进出境监测将对动物疫病防控具有重要的意义。本研究使用软件分析设计RT-PCR、实时荧光定量RT-PCR的引物和TaqMan探针,建立了兔病毒性出血症RT-PCR和实时荧光定量RT-PCR方法,并测定其特异性和敏感性。试验结果显示,只有阳性参照样品的DNA出现扩增,其他对照样品均未见扩增产物,证实这些检测方法具有良好的特异性。对阳性样品DNA进行10倍梯度稀释,再分别用新建的2种方法进行试验,结果显示兔病毒性出血症RT-PCR检测的DNA下限量为100 pg,实时荧光定量RT-PCR的DNA下限量为100 fg,2种方法都具有较高的敏感性。新建的RT-PCR和实时荧光定量RT-PCR方法互补应用,有助于缩短检疫周期、提高检测效率,为出入境口岸部门加强入境试验兔或其他不同用途兔的疫病检测提供技术保障。

    2019年07期 v.39;No.271 1280-1283+1290页 [查看摘要][在线阅读][下载 478K]
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  • IFITM3对羊口疮病毒在羊胚胎鼻甲上皮细胞上增殖的影响

    刘健新;彭斐;任旭皎;黎振标;鲁荣;李慧子;张彭涛;宁章勇;

    羊胚胎鼻甲上皮细胞(OFTu)是羊口疮病毒(ORFV)高效感染和增殖的细胞,为分析ORFV感染对OFTu细胞干扰素诱导跨膜蛋白3(IFITM3)表达的影响及探讨IFITM3的表达状态对ORFV在OFTu细胞上增殖的作用,本研究对ORFV感染OFTu细胞后IFITM3基因的动态表达进行了分析,并通过构建IFITM3不同表达状态的感染细胞模型,探讨了IFITM3的不同表达状态对ORFV在OFTu细胞上增殖的作用。结果表明,ORFV感染可以诱导细胞IFITM3的表达,感染后2 h开始逐渐升高,感染后6~36 h与对照组相比差异极显著(P<0.01)。过表达IFITM3的OFTu细胞会在感染后的24和36 h显著抑制(P<0.05)ORFV的增殖,干扰表达IFITM3的OFTu细胞在ORFV感染后的前36 h促进了病毒的增殖,但差异不显著。研究结果进一步丰富了IFITM3的抗病毒谱,也为深入探索该蛋白的功能及作用提供了基础数据。

    2019年07期 v.39;No.271 1284-1290页 [查看摘要][在线阅读][下载 1257K]
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  • 狐肺炎大肠杆菌ybjX基因缺失株构建及其对小鼠致病性检测

    张志强;苏硕青;李巧玲;肖丽荣;李永慧;黄翠琴;段滇宁;吴同垒;高云航;

    为研究外膜蛋白YbjX对大肠杆菌致病作用的影响,本研究利用λ-Red同源重组系统构建了狐肺炎大肠杆菌(HBCLE-12)ybjX基因缺失突变株(HBCLEΔybjX),并对其生物学特性进行分析,探索YbjX蛋白在大肠杆菌致病过程中的作用。结果表明,缺失株HBCLEΔybjX与野生型菌株和回补菌株相比,其生长速度、生化特性无明显差异,但其运动能力和血清内存活能力显著下降,对多种抗生素的敏感性明显增强。动物试验表明,ybjX基因缺失突变株对小鼠的致病力显著下降。本研究为进一步阐释大肠杆菌致病机制和疫苗设计奠定基础。

    2019年07期 v.39;No.271 1291-1296页 [查看摘要][在线阅读][下载 598K]
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  • 穿孔艾美耳球虫浙江分离株的致病性和免疫原性

    陈莉;石团员;付媛;周永学;鲍国连;杜爱芳;

    兔球虫病是一种严重威胁我国家兔养殖业的重要传染性寄生虫病,目前,世界公认的兔球虫种类有11种,其中,穿孔艾美耳球虫(Eimeria perforans)在我国兔群的感染率最高,为35.2%;然而,国内尚未有关于其分离株致病性和免疫性的报道。本研究通过单卵囊显微挑选和无球虫兔体内传代技术,从浙江地区分离获得了1株穿孔艾美耳球虫,在此基础上,通过分子生物学技术对其进行了分子鉴定,结果显示,浙江分离株与欧洲分离株在18S rRNA基因序列的同源性在99.2%以上,且在进化树上自成一小亚枝。最后,通过动物试验对其致病性和免疫原性进行了鉴定,致病性试验结果如下:以5×10~2(Ⅰ组),5×10~3(Ⅱ组),5×10~4(Ⅲ组)和5×10~5(Ⅳ组)个孢子化卵囊感染无球虫兔,在感染后4~6 d,各感染组均出现饮水、食料和排粪量明显减少,以及粪便形态干小的临床症状,其中,第Ⅲ组中的2只兔在接种后12 d出现腹泻,并在之后第13天死亡1只,死亡兔剖检十二指肠和空肠有弥散性出血点;在感染后6~12 d,各感染组兔平均体质量数值上略小于不感染对照组,但无显著性差异(P≥0.05);在感染后5~13 d,第Ⅰ~Ⅳ组兔的平均排卵囊总量分别为(3.65×10~7±1.86×10~6)/只、(9.92×10~7±3.60×10~6)/只、(4.89×10~7±4.49×10~6)/只和(3.93×10~7±1.56×10~6)/只,以第Ⅱ组兔的平均排卵囊量最大,排卵囊期持续2周以上,有2个排卵囊高峰,高峰值分别出现在感染后第7和10~11天;免疫原性试验结果如下:第Ⅰ~Ⅴ组兔在感染接种后第14天攻毒,攻毒剂量为1×10~6个孢子化卵囊/只,攻毒后第4~6天,第Ⅲ、Ⅳ组和攻毒对照组(Ⅴ组)出现拉稀症状,其中,第Ⅲ组兔分别在攻毒后第6和7天死亡1只,攻毒后死亡率为50%;攻毒后,除第Ⅲ组外,各组兔平均体质量无显著性差异(P≤0.05);攻毒后第5~10天,第Ⅰ~Ⅴ组兔的平均排卵囊总量分别为(3.88×10~5±2.10×10~5)/只、(8.00×10~5±2.83×10~5)/只、(1.89×10~5±2.25×10~4)/只、(3.36×10~5±7.46×10~4)/只和(1.77×10~6±6.34×10~5)/只,相对于攻毒对照组,第Ⅰ~Ⅳ组兔的卵囊减少排出比率分别为78.0%,54.7%,89.3%和81.0%。以上试验结果表明,穿孔艾美耳球虫浙江分离株为致病性毒株,可导致试验兔拉稀和死亡,但免疫原性不强。

    2019年07期 v.39;No.271 1297-1302页 [查看摘要][在线阅读][下载 1915K]
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人兽共患病

  • 表达H1N1亚型猪流感病毒HA蛋白的重组伪狂犬病病毒rPRV-optiHA的构建及生物学特性

    范桂芳;徐守兴;杨斓;宋文博;华琳;吴斌;

    为研发针对猪流感病毒流行毒株和猪伪狂犬病病毒变异毒株更为有效的基因工程疫苗,本研究以变异伪狂犬病病毒基因缺失毒株(rPRVΔTKΔgI/gE)为载体,采用同源重组的方法,成功构建了表达经密码子优化的H1N1亚型猪流感病毒HA基因的重组病毒rPRVΔTKΔgI/gE-optiHA。对获得的重组病毒在多种细胞上的增殖特性、一步生长曲线、遗传稳定性以及对小鼠的安全性等生物学特性进行了研究。结果表明,构建的rPRVΔTKΔgI/gE-optiHA重组病毒能够稳定表达HA蛋白,并且经过优化后,目的基因的表达量有明显提高。该重组病毒在ST、PK-15、Vero和BHK-21细胞上的增殖滴度均高于10~(-7.0)/0.1 mL,对PK-15细胞的敏感性最高。一步生长曲线结果表明,重组病毒的增殖特性未受影响。连续传代20代后,该重组病毒依然具有较好的遗传稳定性,并且对小鼠安全性良好。本研究为重组病毒rPRV-optiHA的进一步研究与应用奠定了基础。

    2019年07期 v.39;No.271 1303-1309+1335页 [查看摘要][在线阅读][下载 1547K]
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  • 埃博拉病毒病抗原反向间接血凝检测方法的建立

    张颖;王化磊;曹增国;李国华;李恩涛;迟航;焦翠翠;徐胜男;杨松涛;赵永坤;夏咸柱;

    为建立埃博拉病毒(Ebola virus,EBOV)抗原快速检测方法,本研究利用纯化后的埃博拉病毒样颗粒(EBOV-VLPs)免疫马匹制备阳性血清,采用饱和硫酸铵沉淀法初纯血清中的IgG,后经过Protien G柱亲和层析法精纯IgG,利用精纯后的IgG致敏醛化的绵羊红细胞,建立反向间接血凝抗原检测方法,并对该方法进行最佳反应条件的优化。将该方法用于不同批次制得的已知病毒滴度埃博拉假病毒血凝效价检测,检测结果显示:病毒滴度的高低与血凝效价检测结果呈现良好的相关性。本研究成功建立埃博拉病毒抗原反向间接血凝检测方法,该方法简单、方便、快捷,无需特殊的仪器设备,1 h内便可报告检测结果,在普通实验室中便可进行操作。此外,该方法也适用于埃博拉病毒感染及疫病暴发后临床样品的定性分析。

    2019年07期 v.39;No.271 1310-1314页 [查看摘要][在线阅读][下载 204K]
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  • 甘肃省某市种羊场布鲁菌病血清流行率横断面研究

    赵咏中;方玉鹏;王建军;董伟;赵欢庆;许开云;

    为了进一步了解甘肃省W市种羊场羊布鲁菌病血清流行率情况及空间分布,为当地种羊场羊布鲁菌病的防控提供参考。本研究采用血清学检测以及群间、空间分析的方法,对甘肃省W市种羊场进行羊布鲁菌病血清流行病学调查。结果表明,W市2016年种羊场布病表观血清流行率为38.10%,真实血清流行率为45.69%,个体表观血清流行率为6.61%,真实血清流行率为5.84%;2017年种羊场布病表观血清流行率为47.62%,真实血清流行率为57.75%,个体表观血清流行率为4.79%,真实血清流行率为3.53%;2次检出的阳性种羊场主要分布在农区,牧区种羊场未检出布病阳性羊。表明W市阳性种羊场数量有所增加,布病表现出明显的区域性特征。

    2019年07期 v.39;No.271 1315-1319页 [查看摘要][在线阅读][下载 383K]
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  • 羊种布氏杆菌介导巨噬细胞mmu-miR-146a-5p的差异表达及其靶基因的初步鉴定

    焦寒伟;赵宇;罗艺晨;顾国靖;李博文;李文杰;周志雄;伍莉;王红均;黄庆洲;

    羊种布氏杆菌(Brucella melitensis,B.melitensis)感染巨噬细胞后,运用高通量测序技术挖掘出mmu-miR-146a-5p差异表达。利用TargetScan和miRDB数据库分别进行mmu-miR-146a-5p靶基因的在线预测,结果分别有224和125个,利用韦恩分析发现,2个数据库的在线预测结果交集有70个;进一步利用PicTar数据库进行mmu-miR-146a-5p靶基因的在线预测,并与韦恩分析结果取交集;转染mmu-miR-146a-5p mimics至巨噬细胞中,通过荧光定量PCR方法检测预测靶基因的相对表达量,发现Ptpra与Tfdp2表达量显著降低,结果初步表明,mmu-miR-146a-5p的靶基因为Ptpra与Tfdp2。该试验为进一步研究mmu-miR-146a-5p在羊种布氏杆菌感染巨噬细胞过程中的作用奠定了基础。

    2019年07期 v.39;No.271 1320-1324页 [查看摘要][在线阅读][下载 580K]
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  • 河北省奶牛场犊牛安氏隐孢子虫的分离鉴定

    康茜;陈颖彬;关一凡;李林;秦建华;赵月兰;

    本研究从河北省奶牛场有腹泻症状2月龄左右的犊牛粪便中分离卵囊,进行病原分离与虫株鉴定。采集腹泻犊牛的新鲜粪便24份,采用饱和蔗糖溶液漂浮法和抗酸染色法检测隐孢子虫卵囊,观察卵囊形态、大小。提取卵囊基因组DNA,进行18S rRNA基因PCR扩增及琼脂糖凝胶电泳检测。对扩增片段进行序列测定及分析,进一步确定分离虫株隐孢子虫的种类/基因型,根据18S rRNA基因核苷酸序列构建系统发育进化树,确定虫株亲缘关系。结果显示,5份样品检出隐孢子虫卵囊,感染率为20.83%。形态学观察卵囊呈长圆形或椭圆形,大小为(5.0~8.2)μm×(4.2~6.3)μm,平均大小为6.6μm×5.3μm,卵囊指数为1.24,鉴定分离虫株为安氏隐孢子虫。PCR扩增出预期大小为1 188 bp的特异性片段,序列分析和同源性分析结果表明,分离株与安氏隐孢子虫AB089285.2株、AB513856.1株、AY954885.1株的同源性为98.7%~98.8%,进一步表明分离的隐孢子虫虫株为安氏隐孢子虫。在种系进化关系上,分离株与安氏隐孢子虫AB513856.1株亲缘关系最近。本研究为揭示河北省奶牛隐孢子虫病的流行特征,实施有效防制措施提供了科学依据。

    2019年07期 v.39;No.271 1325-1329页 [查看摘要][在线阅读][下载 931K]
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  • 安徽及周边地区羊贾第虫流行及分子特性分析

    李慧;贾昌泽;汪凯;唐莉;陈苗;阚珍珍;李文超;刘欣超;顾有方;

    从安徽省及周边的7个规模化绵羊场和10个规模化山羊场分别采集832和781份新鲜粪样,采用基于贾第虫磷酸丙糖异构酶(tpi)基因的巢式PCR扩增,随后对获得的tpi基因阳性的样本进行了谷氨酸脱氢酶(gdh)基因的扩增,并对获得的阳性扩增产物进行测序和生物信息学分析。绵羊贾第虫感染率为0.36%,山羊贾第虫感染率为0.00%。tpi基因序列分析显示3个阳性样品基因型分别为E1(2)和E6(1),gdh基因序列分析显示2个阳性样品均属聚集体E。本研究中,安徽及周边地区绵羊和山羊贾第虫感染率较低,且存在的基因型均为反刍动物常见的聚集体E,未发现具有人兽共患潜力的A或B型。

    2019年07期 v.39;No.271 1330-1335页 [查看摘要][在线阅读][下载 661K]
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  • 含伯氏疏螺旋体OspA、OspC蛋白VLPs的构建及鉴定

    于喜冰;李俊姣;常瑾;费亦东;穆佳琦;丁佳欣;李金斗;丁壮;尹仁福;

    莱姆病是一种经蜱传播的人兽共患病,随着人们经济的发展,伴侣动物的不断出现增加了人与动物经蜱传播莱姆病的风险,而当前并未有治疗莱姆病的有效方法,因此研制莱姆病疫苗成为一大热点。为了更好地预防莱姆病的发生,本研究通过替换新城疫病毒血凝素-神经氨酸酶蛋白(haemagglutinin-neuraminidase protein,HN)胞外域的方式,利用昆虫杆状病毒表达系统分别构建了含伯氏疏螺旋体候选抗原表位外膜蛋白A(outer surface protein A,OspA)、外膜蛋白C(outer surface protein C,OspC)的新城疫病毒样颗粒(virus-like particles,VLPs),形成了含有伯氏疏螺旋体抗原表位的新城疫病毒样颗粒,为之后研制莱姆病疫苗提供了新思路、新想法。

    2019年07期 v.39;No.271 1336-1341+1346页 [查看摘要][在线阅读][下载 1429K]
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基础兽医学

  • 泰和乌骨鸡回肠显微结构及黏膜上皮机械屏障结构

    曾杰;陈听冲;钟圣伟;温泽星;周作红;张晖;

    泰和乌骨鸡是江西省特色禽类,具有重要的营养和药用价值,但有关其消化器官的超微结构研究甚少。本试验通过光镜和透射电子显微镜技术对乌骨鸡回肠及其肠上皮细胞进行了观察。结果表明,回肠壁分为黏膜、黏膜下层、肌层和外膜4层;肠绒毛密集;肌层发达,且在外肌层和外膜之间有大量黑色素颗粒分布;肠绒毛固有层和上皮细胞基部有肥大细胞分布;回肠上皮主要由单层柱状吸收上皮细胞构成,杯状细胞较少;吸收上皮细胞游离面纹状缘明显,胞质内有大量的吸收颗粒、线粒体和粗面内质网;上皮细胞侧面有紧密连接、黏着小带和桥粒构成的连接复合体,构成完整的黏膜上皮机械屏障。

    2019年07期 v.39;No.271 1342-1346页 [查看摘要][在线阅读][下载 1855K]
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  • 貉不同发育阶段卵泡及黄体超微结构

    曹满园;许保增;冯怀亮;

    貉为季节性单次发情动物,目前对貉卵泡发育调节机制的研究鲜有报道。为揭示貉不同发育阶段卵泡的变化规律,本试验应用光镜和电镜对貉不同发育阶段卵泡和黄体的组织结构进行了观察。结果表明,随着卵泡的成熟,卵泡膜内血管增生,但排卵时卵泡出血较少,仅在卵泡壁血管有充血现象。繁殖期(2~3月)卵泡的闭锁多发生于生长卵泡,且随着卵泡直径的增大,卵泡闭锁的比例增加。生长卵泡和成熟卵泡胞质中含有较多数量的粗面内质网,且生长卵泡膜外有大量的胶原纤维围绕。排卵后颗粒细胞黄体化,其中含有丰富的脂滴和滑面内质网,脂滴含有合成孕酮的前体物质和类固醇酯类,滑面内质网可能与脂类代谢有关。另外,X-射线微分析仪检测不同阶段卵泡液中各元素含量的结果显示,随着卵泡的发育卵泡液及卵泡壁中钙含量显著增加。本试验为揭示雌性貉的生殖机理提供了依据。

    2019年07期 v.39;No.271 1347-1354+1365页 [查看摘要][在线阅读][下载 6202K]
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  • 硫酸化朱砂七多糖的制备及药效

    鲁孟佳;徐越;郭抗抗;周宏超;卿素珠;张为民;

    建立并优选硫酸化朱砂七多糖(sulfated polysaccharide from Polygonum ciliinerve,sPCP)的制备条件,探讨硫酸化修饰对朱砂七多糖(polysaccharide from Polygonum ciliinerve,PCP)药效的影响。本研究应用正交试验筛选氯磺酸-吡啶法制备sPCP的最佳条件,体外试验研究sPCP的抑菌活性,采用CCK-8法结合实时荧光定量PCR(real-time PCR)研究sPCP对猪传染性胃肠炎病毒(transmissible gastroenteritis virus,TGEV)在猪睾丸细胞(swine testis,ST)上增殖的抑制作用,并采用ELISA法测定了sPCP对猪外周血细胞因子IL-2和TNF-α含量的影响。试验表明,sPCP最佳制备条件氯磺酸∶吡啶为1∶8,反应温度95℃,反应时间1 h,产物硫酸基取代度为4.31;sPCP能抑制大肠埃希菌和志贺菌,效果优于PCP;在安全浓度范围内,sPCP对TGEV在ST细胞上增殖具有显著的抑制作用(P<0.01),能显著提高猪外周血细胞因子IL-2和TNF-α含量(P<0.01),效果均优于PCP(P<0.01)。结果表明,筛选出了sPCP的最佳制备条件,且硫酸化修饰能有效提高PCP的药效。

    2019年07期 v.39;No.271 1355-1360页 [查看摘要][在线阅读][下载 754K]
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临床兽医学

  • 血浆TRAP5b在奶牛产后低血钙症发生的风险预警作用

    赵畅;张江;范子玲;白云龙;舒适;夏成;

    在黑龙江省某集约化牛场随机选取分娩当天到分娩后6 d的68头奶牛为试验动物。通过检测血中抗酒石酸酸性磷酸酶5b(TRAP5b)、钙离子(Ca~(2+))、无机磷(P~(3+))、β-羟丁酸(BHBA)、葡萄糖(GLU)、游离脂肪酸(NEFA)、镁离子(Mg~(2+))、乳酸(LA)和碱性磷酸酶(ALP)的水平,结果显示:低血钙症奶牛血中TRAP5b活性及含量比正常对照组显著升高,Ca~(2+)、P~(3+)、ALP、GLU的水平比正常对照组显著降低。TRAP5b含量或活性与Ca~(2+)呈极显著得负相关,与P~(3+)、ALP呈显著得正相关。根据受试者工作特征曲线(ROC)分析确定奶牛产后低血钙症发生的风险预警值为:血浆TRAP5b含量>154.63 mmol/L,TRAP5b活性>1 370.00 U/mL,P~(3+)<1.365 mmol/L,ALP<54.5 I/L。因此,TRAP5b、Ca~(2+)、P~(3+)和ALP均可用于预测奶牛低血钙发生的风险预警指标,尤其是TRAP5b。

    2019年07期 v.39;No.271 1361-1365页 [查看摘要][在线阅读][下载 271K]
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  • 归芎益母散对血瘀型胎衣不下临床疗效及与Th1/Th2细胞因子的相关性

    黄雪利;王胜义;王磊;王慧;宋晓平;崔东安;

    筛选45头血瘀型胎衣不下奶牛,随机分为4组,分别为归芎益母散高、中、低剂量组(800,400,200 g/头)、药物对照组(250 g/头,益母生化散),经口灌服给药,用药1~3 d,另设1个空白对照组(健康奶牛10头)。结果表明,与空白对照组比较,用药前,血清中IL-2、TNF-ɑ显著降低(P<0.01,P<0.05),IL-4、IL-10显著升高(P<0.01),Th1/Th2型细胞因子显著偏小(P<0.01),用药后,高、中剂量组患牛日均产奶量,产褥期子宫炎发生率及产后180 d繁育性能指标与其相当(P>0.05),血清IL-2、TNF-ɑ水平上升(P<0.01,P<0.05),IL-4、IL-10水平降低(P<0.01),Th1/Th2细胞因子趋于平衡,其中,高剂量组Th1/Th2细胞因子与空白对照组差异不显著(P>0.05);与药物对照组比较,高、中剂量组治愈率升高18.2%,19.7%,产褥期子宫炎发生率降低了9.1%,11.4%,归芎益母散中剂量组配种次数显著减少(P<0.05),空怀时间明显缩短(P<0.01),高剂量组空怀时间显著缩短(P<0.05)。说明归芎益母散不仅具有调节患牛的子宫收缩和整体免疫机能的潜在药理效应,还促进滞留胎衣及早排出,降低受试奶牛继发感染产褥期子宫炎,有效提高了奶牛的繁殖性能,还具有促进患牛泌乳的作用。调节外周血中Th1/Th2细胞因子趋于平衡,是归芎益母散治疗奶牛胎衣不下重要机理之一。

    2019年07期 v.39;No.271 1366-1373页 [查看摘要][在线阅读][下载 191K]
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  • 能量负平衡奶牛血清的蛋白组学及生物信息学分析

    孙书函;舒适;白云龙;赵畅;夏成;张洪友;徐闯;

    目前集约化牛场高产奶牛产后乏情率较高,严重影响奶牛繁殖性能。尽管奶牛产后乏情发生机制已有较多报道,但奶牛产后能量负平衡所致的乏情血清蛋白组学机制尚不明确。本试验在黑龙江省某集约化牛场随即采取产后14~21 d奶牛,根据奶牛血液中β-羟丁酸的含量,按判定标准将试验奶牛分为能量正平衡组(NEB,n=60)和能量负平衡组(PEB,n=60),采集血清。应用iTRAQ/LC-MS/MS联用技术研究能量负平衡奶牛血清蛋白组学,获得23种差异表达蛋白。其中NEB组表达上调的有16种,分别为淀粉样结合蛋白A前体(SAA)、脂多糖结合蛋白前体(LBP)、骨膜素前体(POSTN)、Interα胰蛋白酶抑制剂重链H4前体(ITIH4)、细丝蛋白A(FLNA)、补体C2前体(C2)、蛋白酶体α亚基2型(PSMA2)、蛋白酶体亚基β1型前体(PSMB1)、蛋白酶体α亚基4型(PSMA4)、山梨醇脱氢酶(SORD)、蛋白酶体亚基α型-7(PSMA7)、血管紧张素原前体(AGT)、热休克蛋白HSP90-α(HSP90A1)、甘油醛-3-磷酸脱氢酶(GAPDH)、精氨琥珀酸裂解酶(ASL)和血红素结合蛋白前体(HPX),表达下调的有7种Cathelicidin7前体(CAMP)、转甲状腺素蛋白前体(TTR)、多聚免疫球蛋白受体前体(PIGR)、载脂蛋白F(APOF)、核糖核酸酶4前体(RNASE4)、载脂蛋白A1前蛋白(APOA1)和载脂蛋白A5前体(APOA5)。这些差异表达蛋白多与脂类代谢和蛋白酶复合体系统相关,也与和糖酵解相关的SORD和GAPDH有关。

    2019年07期 v.39;No.271 1374-1380页 [查看摘要][在线阅读][下载 1382K]
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  • 不同品质粗饲料对皖东牛瘤胃内环境和消化代谢的影响

    华金玲;付佳伟;郭亮;郁冯艳;

    以小麦秸秆和燕麦干草分别作为皖东牛粗饲料来源,探究粗饲料品质对皖东牛瘤胃内环境和消化代谢的影响。选取(493±33) kg,28~36月龄的健康皖东牛公牛10头,随机分为2组,分别饲喂小麦秸秆(XMJ)和燕麦干草(YMC)为粗饲料来源的日粮,每组5头,利用口腔采集瘤胃液和全收粪法采集样本用于指标测定,探索秸秆和牧草对皖东牛瘤胃内环境和营养物质代谢的影响。研究结果表明,XMJ组和YMC组皖东牛瘤胃pH值之间差异不显著(P>0.05),NH_3-N浓度和菌体蛋白(MCP)产量YMC组显著高于XMJ组(P<0.05);YMC组干物质(DM)、中性洗涤纤维(NDF)和酸性洗涤纤维(ADF)的表观消化率显著高于XMJ组(P<0.05),进食氮YMC组高于XMJ组(P>0.05),由于YMC组排泄氮较多,氮利用率方面YMC组低于XMJ组(P<0.05)。综上所述,禾本科来源的粗饲料品质对皖东牛的纤维消化代谢影响显著,单一饲喂小麦秸秆或燕麦干草不利于氮利用。

    2019年07期 v.39;No.271 1381-1384+1398页 [查看摘要][在线阅读][下载 138K]
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动物科学

  • 紫锥菊颗粒对肉鸡生产性能的影响

    罗俊峰;董海兵;陈洪亮;闫化岭;陈云亮;任建海;

    为探讨紫锥菊颗粒对鸡新城疫、禽流感抗体效价、生产性能、生产效益的影响,齐鲁晟华制药有限公司联合某大规模养殖场进行临床试验验证:选取60 000只鸡,分为4组,即空白组、高剂量组、中剂量组、低剂量组,从4日龄开始服用紫锥菊颗粒,每吨饲料中分别添加紫锥菊颗粒0,2.0,1.0,0.5 kg,连续服用10 d。结果显示,每吨饲料中添加2.0和1.0 kg紫锥菊颗粒组在提高抗体效价,鸡只成活率以及生产性能方面,与未使用紫锥菊颗粒组比较有显著性差异(P≤0.05),通过计算,平均每只鸡多赚取0.35元。紫锥菊颗粒可以通过刺激机体免疫系统,增强机体对细菌和病毒抗感染的能力,提高肉鸡生产性能。

    2019年07期 v.39;No.271 1385-1387页 [查看摘要][在线阅读][下载 468K]
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  • 禁食软粪对新西兰白兔生长性能、毛皮质量、屠宰性状、脂代谢及盲肠微生物的影响

    王亚东;孙帅杰;薛明明;黄涛;周建设;许会芬;王建平;孙桂荣;李明;

    旨在研究禁食软粪对新西兰白兔生长性能、毛皮质量、屠宰指标及脂代谢及盲肠微生物的影响。选取12只平均体质量为(0.91±0.12) kg的28日龄断奶新西兰白兔,随机分为A、B 2组,每组6个重复。其中A组为对照组,正常饲养;B组为试验组,戴项圈禁食软粪。预试期7 d,正式试验60 d,每天称量采食量,每周称1次体质量。结果表明:1)禁食软粪显著降低了生长期新西兰白兔体增重、日增重、料重比(P<0.05)。2)与对照组相比,禁食软粪极显著降低了试验组新西兰白兔毛皮长度、毛皮宽度、毛皮质量(P<0.01),被毛长度和毛皮厚度差异不显著(P>0.05)。3)禁食软粪极显著降低了新西兰白兔全净膛质量和半净膛质量(P<0.01)。4)禁食软粪对新西兰白兔屠宰后45 min和24 h的pH值、剪切力、蒸煮损失、滴水损失无显著性影响(P>0.05)。5)与对照组相比,禁食软粪对试验组新西兰白兔高密度脂蛋白胆固醇、白蛋白差异极显著(P<0.01),对总胆固醇差异显著(P<0.05),对低密度脂蛋白胆固醇、甘油三酯及总蛋白差异不显著(P>0.05)。6)对2组兔子盲肠微生物进行宏基因组测序,结果表明:与对照组相比,试验组厚壁菌门(Firmicutes)丰度无显著性变化(P>0.05),拟杆菌门(Bacteroidetes)丰度增加,放线菌门(Actinobacteria)丰度减少。综合考虑本试验所测指标,禁食软粪降低了新西兰白兔的生长性能、毛皮质量、屠宰指标及肉品质。这为研究其他小型哺乳动物食粪行为提供了依据。

    2019年07期 v.39;No.271 1388-1393页 [查看摘要][在线阅读][下载 837K]
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  • 玉米赤霉烯酮通过干扰内分泌系统造成性成熟雄性大鼠生殖损伤

    王新;于浩;房恒通;金永成;沈景林;周长海;赵云;王俊梅;付玉蓉;张晶;

    玉米赤霉烯酮(ZEA),作为一种环境类雌激素物,其对动物及人体健康具有潜在的危害。尤其是,ZEA可能会导致人类不孕不育症。本试验中,给予性成熟的雄性SD大鼠每公斤单次腹腔注射5 mg/kg的ZEA,在随后的48 h内观察检测。可见大鼠血清睾酮(T)和促黄体生成素(LH)在6 h极显著降低,而血清LH在随后12 h又极其显著升高;睾丸环腺苷酸(cAMP)在6 h同样显著下降;同时,睾丸LHR,Star,p450scc,3β-hsd-1 mRNA表达水平在注射ZEA后6 h显著下调。总之,本研究可以得出单次腹腔注射ZEA可能通过扰乱内分泌系统,影响胆固醇合成中关键酶的基因表达,进而抑制睾酮生成,最终造成生殖系统短暂性的损伤。

    2019年07期 v.39;No.271 1394-1398页 [查看摘要][在线阅读][下载 622K]
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综述

  • 自噬与细菌相互作用的研究进展

    王亨;钱思竹;臧浩哲;王建强;毋柯蓉;崔璐莹;李建基;

    细菌感染细胞的过程中,自噬是一把"双刃剑"。一方面,非吞噬细胞内的细菌被自噬体内化、降解,从而有助有感染细菌的清除;另一方面,某些细菌在进化过程中形成了独特的机制来逃避细胞的自噬作用,防止最终被溶酶体所降解,同时利于其在细胞内复制和存活。本文将自噬与细菌的相互作用进行综述,希望对细菌和自噬相互作用的研究有所帮助。

    2019年07期 v.39;No.271 1399-1402+1409页 [查看摘要][在线阅读][下载 142K]
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  • 猪源产肠毒素性大肠杆菌主要毒力因子研究进展

    吴文文;丁雪燕;洪天旗;羊扬;段强德;朱国强;

    产肠毒素性大肠杆菌(enterotoxigenic Escherichia coli,ETEC)是引起婴幼儿和幼畜腹泻的主要细菌性病原,初生幼畜感染后常因剧烈腹泻脱水而死亡。菌毛黏附素和肠毒素是ETEC目前研究最多的2类毒力因子,随着技术手段的不断进步和研究的深入,一些新型毒力因子不断被发现,如鞭毛、非菌毛黏附素、肠聚集性耐热毒素(the enteroaggregative heat-stable toxin1,EAST1)、自转运黏附蛋白、细胞溶血素等。本综述主要针对猪源ETEC的主要毒力因子以及新型毒力的结构功能及致病性进行阐述,为进一步深入探索ETEC的致病机理提供理论基础。

    2019年07期 v.39;No.271 1403-1409页 [查看摘要][在线阅读][下载 561K]
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  • 代谢组学在哺乳动物睾丸功能研究中的进展

    甘露;胡煜;练雨;王鲜忠;

    代谢组学作为研究机体内代谢物变化的一门新兴技术,能够从差异代谢物中筛选疾病标志物,并已广泛应用于畜牧与医学领域。本文首先概述了代谢组学的特点以及目前应用于代谢组学分析的常用技术,并对代谢组学在睾丸支持细胞功能、精子生成、精液质量评价及睾丸生殖毒性的应用进行了论述,揭示了代谢组学对睾丸功能研究的促进作用,并就代谢组学如何更好的应用于临床实践进行了展望。

    2019年07期 v.39;No.271 1410-1415页 [查看摘要][在线阅读][下载 159K]
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  • 动物生物技术专业实验教学改革探讨

    吕岩;焦虎平;肖冲;高妍;李颖;郝林琳;丁洪浩;

    在高等教育生物技术专业中,实验教学是培养计划的重要组成部分。它能够实现知识从书本到实践的转移,让学生真正做到"学以致用"。根据现代教育理念和生物技术专业的特点,为实现专业培养目标,培养高素质、高技能人才,本文探讨了动物生物技术专业实验教学急需改革的3个方面,一是对实验教学内容进行合理整合,同时增设一些基础性实验、综合性实验和设计性实验;二是探索新型教学模式,提高学生在实践课中的兴趣,启迪学生创新思维,培养其动手能力;三是探讨实验课程考核标准,构建合理的实验教学评价体系,综合评价学生的实验能力。

    2019年07期 v.39;No.271 1416-1420页 [查看摘要][在线阅读][下载 269K]
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