预防兽医学

  • 仔猪体内姜黄素对猪繁殖与呼吸综合征病毒感染的作用评价

    吴小萍;房军洋;郭忠义;陈旭;穆杨;杜涛峰;

    为研究仔猪体内姜黄素对猪繁殖与呼吸综合征病毒(porcine reproductive and respiratory syndrome virus,PRRSV)感染的作用,用PRRSV攻毒PRRSV阴性的健康仔猪后,姜黄素拌料饲喂仔猪,每日测量仔猪的直肠温度,并分析病毒血症及PRRSV特异性抗体产生情况和PRRSV特异性淋巴细胞增殖情况。结果显示,姜黄素并不能降低PRRSV感染引起的直肠温度升高,于攻毒后21 d,姜黄素可显著降低病毒血症水平。而且,姜黄素不能诱导PRRSV特异性抗体的显著升高,但可诱导PRRSV特异性的淋巴细胞增殖。结果表明,姜黄素对PRRSV在仔猪体内的感染具有一定的抑制作用,但仍需进一步提高治疗效果。

    2020年12期 v.40;No.288 2281-2285页 [查看摘要][在线阅读][下载 909K]
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  • 2018―2019年河南地区猪繁殖与呼吸综合征病毒分子流行病学调查

    赵小月;张格;汪悦;刘红英;陈宇;赵军;王川庆;陈陆;李永涛;

    为了解华中地区猪繁殖与呼吸综合征病毒(PRRSV)的流行特点及变异规律,本研究对2018―2019年采自河南18个地市94个猪场的414份猪肺脏、脾脏和淋巴结等样品进行PRRSV RT-PCR检测,并将阳性样品进行ORF5和NSP2基因扩增和序列测定以及遗传进化分析。结果显示,414份病料中共检测出PRRSV阳性样品106份,阳性率为25.48%,其中,豫北地区检出率较高,且2018年11月至2019年2月阳性率明显增加;从阳性样品中扩增得到83个ORF5和31个NSP2基因序列;遗传进化分析表明,检出的PRRSV阳性样品中74株PRRSV属于类NADC30毒株,6株与华南地区主要流行毒株类QYYZ毒株高度相似,2株与商品化活疫苗基因序列高度同源;氨基酸序列比对发现,所检出毒株之间氨基酸同源性差异较大,10株毒株GP5序列在高变区存在插入或缺失,29个NSP2序列存在131位不连续氨基酸缺失,1个NSP2序列与高致病性PRRS疫苗毒株JXA1 NSP2存在相同缺失,1株与经典疫苗毒株RespPRRS MLV完全同源。结果表明,2018―2019年河南地区PRRSV以类NADC30毒株为优势毒株,且NSP2和ORF5基因进一步发生较大变异;同时华南地区主要流行毒株类QYYZ毒株在河南开始增多以及个别活疫苗的使用导致PRRSV的流行趋势更加复杂。因此,加强对PRRSV的流行及遗传变异的持续监测尤为重要,本研究可为PRRS临床诊断、防控以及疫苗研发提供有效的科学依据。

    2020年12期 v.40;No.288 2286-2292页 [查看摘要][在线阅读][下载 1692K]
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  • 牛膝多糖对猪瘟疫苗免疫仔猪的猪瘟抗体效价及血常规指标的影响

    杨媚;杨泰;陈凤鸣;马杰;陈清华;

    旨在研究牛膝多糖(ABP)对猪瘟疫苗免疫仔猪猪瘟抗体效价及血常规指标的影响。选用25日龄健康杜长大三元杂交断奶仔猪40头,随机分为4组,每组10头。28日龄时,仔猪颈部肌肉注射猪瘟疫苗1.0 mL。仔猪免疫前3 d和免疫后3 d,3个试验组分别灌胃高(ABPH)、中(ABPM)、低(ABPL)剂量牛膝多糖(5 000,3 000,1 000 mg/头~(-1)·d~(-1)),对照组(C)灌胃双蒸水。各组分别于免疫后0,7,14,21,28 d随机抽取5头仔猪采血,测定猪瘟抗体效价和血常规指标。结果显示:免疫后7,14,21 d,添加ABP的试验组抗体效价显著高于对照组(P<0.05),其中ABPM的抗体效价最高;免疫后14,21 d,ABPH、ABPM组白细胞数显著高于C组和ABPL组(P<0.05),且ABPH、ABPM组间无显著性差异(P>0.05);免疫后28 d,ABPM组的白细胞数量显著高于C、ABPH、ABPL组(P<0.05);免疫后7 d,ABPH组的淋巴细胞比例显著高于ABPL、C组(P<0.05),ABPH组与ABPM组间无显著性差异(P>0.05),其中ABPH组的淋巴细胞比例最高;免疫后14,21 d,ABPH、ABPL组显著高于C组(P<0.05),ABPH、ABPL组与ABPM组间无显著性差异(P>0.05),其中ABPL组的淋巴细胞比例最高。结果表明,牛膝多糖能提高猪瘟疫苗免疫仔猪的抗体效价,提高其血清白细胞数和淋巴细胞比例,进而增强猪瘟疫苗的免疫效果,其中每头3 000 mg/d的剂量效果最佳。

    2020年12期 v.40;No.288 2293-2297页 [查看摘要][在线阅读][下载 853K]
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  • 表面展示基因Ⅶ型新城疫病毒F蛋白胞外区细菌样颗粒的构建与鉴定

    赵建伟;姜昊妍;杨锐;张舒博;王建忠;王春凤;

    为了构建及鉴定表面展示新城疫病毒F蛋白胞外区细菌样颗粒。首先应用RT-RCR和PCR技术分别扩增F蛋白胞外区编码基因片段和乳酸乳球菌肽聚糖锚钩蛋白(protein anchor,PA)基因片段,通过融合技术将F蛋白胞外区编码基因与PA基因融合,然后利用pET-30a(+)质粒构建重组原核表达质粒,将其转化大肠杆菌BL-21(DE3),进行诱导表达,获得目的蛋白;用热酸处理乳酸乳球菌获得裸露的细菌样颗粒(BLPs),通过透射电镜进行鉴定;最后将复性后的F-PA蛋白与BLPs颗粒结合,经过SDS-PAGE、Western blot、细菌间接免疫荧光进行结合鉴定,并分析其结合效果灰度值判断其结合效率。结果显示,目的蛋白均能正确表达,成功制备出裸露的BLPs,目的蛋白复性后可与BLPs进行结合,其结合效率为1 U的BLPs与130μg的F-PA蛋白结合。成功构建出表面展示基因Ⅶ新城疫病毒F蛋白胞外区BLPs,为后续研究新城疫亚单位黏膜疫苗奠定了基础。

    2020年12期 v.40;No.288 2298-2304页 [查看摘要][在线阅读][下载 1389K]
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  • 应用多重Digoxigenin标记探针在核酸斑点杂交检测中识别Ⅰ群禽腺病毒的感染

    侯力丹;张亚文;苏奇;刘丹;毛娅卿;王嘉;黄小洁;赵鹏;李俊平;杨汉春;

    禽腺病毒(fowl adenovirus,FAdV)是鸡群中常见的免疫抑制性病毒,其中Ⅰ群FAdV有12个血清型(FAdV1-8a,8b-FAdV11),这为Ⅰ群FAdV检测带来了挑战。为开发一种可以同时检测Ⅰ群FAdV的Digoxigenin标记核酸探针或者其组合,本研究针对Ⅰ群FAdV的hexon基因保守区域设计引物,分别以12个血清型的Ⅰ群FAdV参考毒株DNA为模板合成了12种Digoxigenin标记核酸探针,并将这12种核酸探针及其组合形成的多重探针共13种探针分别与同一杂交膜上的12种不同血清型Ⅰ群FAdV参考毒株的毒株核酸进行杂交,观察各探针或其组合能够识别的最大限度。结果显示,12种血清型对应的单一核酸探针能检测和识别的病毒类型及其灵敏度差异较大,而多重探针组合PM可以同时检测出所有12种血清型毒株并体现出最高灵敏度的优势。本研究建立了应用多重Digoxigenin标记探针组合在核酸斑点杂交检测中识别Ⅰ群FAdV核酸的新方法,为解决类似病毒高通量检测提供了新的思路。

    2020年12期 v.40;No.288 2305-2310页 [查看摘要][在线阅读][下载 678K]
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  • 禽呼吸道7种病毒多重连接探针扩增检测技术的建立与应用

    周莹珊;陈琳;周柯;王雨萌;邵春艳;杨永春;黄保续;王晓杜;宋厚辉;

    建立了一种多重连接探针扩增技术(MLPA),能快速区分临床上引起禽呼吸道疾病的7种病原,即禽流感病毒(AIV)H9亚型、AIV H5亚型、AIVH7亚型、新城疫病毒(NDV)、禽偏肺病毒(aMPV)、禽传染性支气管炎病毒(IBV)和禽传染性喉气管炎病毒(ILTV)。对扩增产物进行毛细管电泳分析,结果显示,该方法对不同病原核酸的最低检测极限可以达到5.3×10~0~1.40×10~2拷贝/反应,特异性好,探针之间无交叉反应。应用MLPA方法对122份临床样品进行检测,并与国家或行业标准进行比较,结果显示AIV H7亚型、NDV、aMPV、IBV、ILTV的特异性和敏感性均达到100%。结果与国家或行业标准PCR方法的检测结果一致性高,且克服了国家或行业标准PCR方法无法进行多重检测的缺点。该方法最多可同时检测40多种病原,对于复杂症候群的快速和高通量检测具有重要临床意义,可推广到其他多重病毒的检测中,显示出广阔的应用前景。

    2020年12期 v.40;No.288 2311-2315+2319页 [查看摘要][在线阅读][下载 1209K]
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  • 轮状病毒为主的混合感染性犊牛腹泻病的诊断

    彭清洁;刘心;晁金;杨莉;陈鸣;薛凯丽;张淏云;朱杰;朱小洁;陈颖钰;胡长敏;陈曦;郭爱珍;

    犊牛腹泻是危害犊牛健康的重要疾病之一,可由多种病原引起。2019年3-4月份,内蒙古某规模化牛场28.5%(100/350)的犊牛发生严重腹泻。发病后该场兽医利用土霉素、氟尼辛葡甲胺注射液、樟脑磺酸钠、碳酸氢钠进行治疗,病情稳定一段时间后复发。经研究室临床诊断和实验室检测,最终确诊该场犊牛腹泻的主要病原为牛轮状病毒,同时伴有多种其他病毒和大肠杆菌的混合感染。本研究就该病例进行了诊断报告,以及为临床犊牛腹泻的防控提供病例参考和技术资料。

    2020年12期 v.40;No.288 2316-2319页 [查看摘要][在线阅读][下载 1095K]
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  • 猪链球菌2型通过诱导IFN-γ促进脑微血管内皮细胞自噬破坏血脑屏障完整性

    刘嘉楠;贾丽;姜合祥;吴桐;李扬;雷连成;

    猪链球菌2型(Streptococcus suis type 2,SS2)是一种能够引起猪和人类脑膜炎的人畜共患病原菌,其破坏血脑屏障(BBB)的免疫学致病机制仍知之甚少。本研究通过构建仔猪脑组织切片感染模型和原代猪脑微血管内皮细胞和星形胶质细胞(PBMEC/AC)共培养BBB感染模型,探讨SS2感染对BBB通透性的影响。结果显示,脑组织切片和双细胞共培养BBB模型感染SS2后,IFN-γ均显著高表达。在组织切片培养液添加IFN-γ,可见脑组织出现自噬;在双细胞共培养BBB模型中添加IFN-γ后发现跨内皮电阻(TEER)值显著降低,表明BBB通透性降低,IFN-γ破坏了BBB完整性。进一步研究发现,IFN-γ能够促进PBMEC高表达自噬信号分子ULK1、Beclin1、LC3-I和LC3-II,诱导PBMECs的自噬。添加精氨酸可以降低IFN-γ诱导的自噬并恢复BBB细胞模型的致密性。研究表明,IFN-γ可能通过诱导PBMEC自噬破坏BBB的完整性,增强屏障的通透性,从而促进细菌进入脑组织。本研究从免疫学角度为SS2脑膜炎的发生提供了新机制。

    2020年12期 v.40;No.288 2320-2326页 [查看摘要][在线阅读][下载 1549K]
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  • 猪链球菌流行优势菌株的调查及耐药性

    王治方;白红杰;徐引弟;朱文豪;张青娴;焦文强;李海利;许峰;王克领;张彬;娄治国;

    为了调查研究河南省规模化猪场猪链球菌流行优势菌株及其耐药性情况,本试验采集临床疑似猪链球菌病例病料95份,通过细菌分离、纯化鉴定及血清型鉴定,共获得68株猪链球菌,其中猪链球菌血清2型为48株占70%,血清9型15株占22%,血清2型和9型为当前河南流行优势菌株。通过对猪链球菌胞外因子epf基因、溶菌酶释放蛋白mrp基因和溶血素sly基因3个主要毒力基因检测,共检测出5种毒力基因类型,其中以epf~+/mrp~-/sly~+类型(25株)为主,其次是epf~-/mrp~-/sly~-类型(20株)、epf~+/mrp~+/sly~+类型(18株)。药敏试验结果显示,68株猪链球菌除对头孢噻呋、头孢他啶、阿莫西林和氨苄西林敏感性较好外,对其他5类13种抗菌药物均高度耐药,且存在严重的多重耐药现象。通过24种耐药基因检测,共检测出12种耐药基因,其中氨基糖苷类耐药基因aphA1、四环素类耐药基因tet(B)和喹诺酮类耐药基因gyrA、parC的检出率分别高达86%,89%,63%,58%。以上结果为猪场临床防控猪链球菌病选药、用药以及选择相应的血清型疫苗等方面提供参考依据。

    2020年12期 v.40;No.288 2327-2332页 [查看摘要][在线阅读][下载 1327K]
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  • 火鸡组织滴虫不同地区分离株的致病性比较

    禚振男;孔令明;郭平;曲昌宝;王子静;刘丹丹;陶建平;许金俊;

    为比较不同地区火鸡组织滴虫分离株的致病力是否存在差异,对2株火鸡组织滴虫虫株JSYZ-A和JSYZ-B通过人工感染试验进行了毒力评价。结果表明,感染后15 d苏禽黄羽肉鸡泄殖腔感染虫体10~5个/只,感染后15 d扑杀时发病率、病死率、增重、肝脏和盲肠病变计分等致病力评价指标2株虫体间存在差异:JSYZ-A株导致的发病率和病死率相比JSYZ-B株更为严重;与未感染对照组相比,2株虫株感染后均严重影响增重,其中JSYZ-A株对增重的影响稍大于JSYZ-B株,但2株间差异不显著(P>0.05);JSYZ-A株导致的肝脏和盲肠病变计分均比JSYZ-B株严重,其中肝脏病变计分存在显著性差异(P<0.05),盲肠病变计分差异不显著。不同地区火鸡组织滴虫分离株的致病力存在差异,筛选出的强毒株可用于致弱活疫苗的研制或虫体致病机理的研究。

    2020年12期 v.40;No.288 2333-2336页 [查看摘要][在线阅读][下载 1218K]
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  • 内蒙古额济纳旗亚洲璃眼蜱的鉴定及其基因多态性分析

    王云冲;黄天鹏;格日勒图;

    为了确定内蒙古额济纳旗边境地区蜱虫种类以及其保守基因16S rRNA是否具有基因多态性。本试验选取该地区3个代表性采样点,收集双峰驼的体表寄生蜱虫383只。通过传统形态学方法,保守基因16S rRNA和线粒体细胞色素C氧化酶亚基Ⅰ(COⅠ)基因PCR序列扩增、测序、系统发育进化树分析进行蜱虫种类鉴定。通过Genetyx-Version 6软件对每个采样点随机选取的10个样本进行16S rRNA序列基因多态性分析。结果显示:本试验所采集的蜱虫形态均符合亚洲璃眼蜱的典型形态特征;经16S rRNA基因和COⅠ基因的序列绘制出的系统发育进化树结果显示该蜱与我国新疆地区的亚洲璃眼蜱在同一个进化分支上,并能够很好的聚类;在蜱虫的16S rRNA基因多态性的结果中发现,只有3个序列与其他的27个序列表现出不同程度的基因多态性,说明亚洲璃眼蜱中存在基因多态性的变化。这为以后蜱虫的鉴定以及探究基因多态性方面提供参考。

    2020年12期 v.40;No.288 2337-2341+2373页 [查看摘要][在线阅读][下载 2569K]
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人兽共患病

  • 羊源肺炎克雷伯菌间接免疫荧光检测方法的建立

    陈瑞昶;牛祥云;黄金;苗永强;胡莉萍;朱瑞良;

    将羊肺脏中分离鉴定后的肺炎克雷伯菌制成菌体免疫抗原,免疫健康家兔后获得兔抗羊源肺炎克雷伯菌多克隆抗体。依据此多克隆抗体建立检测肺炎克雷伯菌的间接免疫荧光检测方法,并对检测条件进行了筛选和优化。结果表明,多克隆抗体稀释度为1∶80,FITC标记羊抗兔IgG稀释度为1∶400,孵育时间为30 min时,羊源肺炎克雷伯菌的特异性黄绿色荧光最清晰,非特异性荧光最弱。并通过临床检测证明该方法具有简便、特异性高的优点,为羊源肺炎克雷伯菌的流行病学、血清学调查和临床诊断奠定基础。

    2020年12期 v.40;No.288 2342-2347页 [查看摘要][在线阅读][下载 1686K]
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  • 陕西部分地区规模化猪场仔猪隐孢子虫的感染状况分析

    姚倩;王俊伟;王莎莎;李蕴慧;赵姗姗;宋军科;赵光辉;

    为了解陕西省规模化猪场仔猪隐孢子虫的感染情况,本研究采集了陕西省周至、岐山、勉县、临潼、榆阳5个地区规模化养猪场的375份仔猪新鲜粪便样品(包括断奶前仔猪155份和断奶后仔猪220份),利用基于18S rRNA基因位点的分子生物学技术对其感染率和种类分布情况进行了研究。结果显示,本研究中仔猪隐孢子虫的总感染率为26.9%(101/375),断奶后仔猪的感染率(36.4%,80/220)极显著(P<0.001)高于断奶前仔猪(13.5%,21/155);进一步研究发现,所调查的5个地区仔猪的感染率差异极显著(P<0.001),其中周至仔猪隐孢子虫感染率最高(57.1%,56/98),其次为榆阳(33.3%,25/75)和临潼(24.2%,15/62),而岐山(4.3%,3/70)和勉县(2.9%,2/70)的隐孢子虫感染率较低;种系发育分析发现,本研究中所调查仔猪存在3种人兽共患隐孢子虫种类,包括种母猪隐孢子虫(Cryptosporidium scrofarum)、猪隐孢子虫(C.suis)和微小隐孢子虫(C.parvum),其中C.scrofarum为优势种,广泛存在于所调查的各个地区和年龄段的仔猪。结果表明,隐孢子虫在所调查地区的断奶前后仔猪中广泛存在,本研究为这些地区乃至其他地区仔猪隐孢子虫病的防控提供了基础数据。

    2020年12期 v.40;No.288 2348-2352页 [查看摘要][在线阅读][下载 1452K]
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基础兽医学

  • 运输应激对山羊免疫器官的病理损伤及热休克蛋白表达的影响

    郑文亚;彭瑞妮;刘犇;张雯苑;梅婷;章志涛;李国生;邹剑伟;崔燕;

    本试验旨在研究运输应激对山羊免疫器官的病理损伤及热休克蛋白表达的影响。选取12只体质量相近的健康公山羊为实验动物,随机分为3组,对照组、运输应激2 h组和运输应激6 h组,以速度35~45 km/h模拟公路运输。运输结束后,立即采集所有山羊淋巴结和脾脏,应用HE染色、醋酸铀-枸橼酸铅染色、免疫组织化学和Western blot等方法,分析运输应激山羊淋巴结和脾脏的病理变化及HSP27、HSP70和HSP90等3种热休克蛋白的表达情况。光镜观察显示,运输应激2 h组山羊淋巴结和脾脏均出现急性病理变化,淋巴小结和脾小结增生明显,淋巴结的髓索变粗,髓窦中有淡红色红染物质,脾脏红髓的红细胞急剧增多;运输应激6 h组淋巴细胞胞核出现核碎片,脾脏红髓的红细胞比2 h组有所减少。电镜观察发现,淋巴结和脾脏的淋巴细胞病变明显,发生凋亡或坏死。免疫组化显示,在淋巴结和脾脏中,HSP27主要分布在弥散淋巴组织,HSP70和HSP90主要分布在淋巴小结或脾小结。Western blot结果显示,与对照组相比,运输应激2 h组与6 h组淋巴结和脾脏中HSP90表达量分别显著和极显著升高(P<0.05,P<0.01),运输应激2 h组脾脏HSP27和淋巴结HSP70的表达量都显著升高(P<0.05);与对照组相比,运输应激2 h组和6 h组脾脏HSP70表达量分别下降(P>0.05)和极显著下降(P<0.01)。运输应激对山羊淋巴结和脾脏造成一定的病理损伤,3种热休克蛋白在淋巴结和脾脏都有表达,运输前后和不同运输时间3种热休克蛋白表达量发生了变化。

    2020年12期 v.40;No.288 2353-2361页 [查看摘要][在线阅读][下载 3345K]
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  • 哺乳仔猪自然感染猪流行性腹泻病毒病例的病理形态学观察

    王金坡;崔亮亮;孙秀秀;王璐梦;刘晓丽;胡薛英;谷长勤;张万坡;程国富;

    为观察自然状态下猪流行性腹泻病毒(porcine epidemic diarrhea virus,PEDV)感染哺乳仔猪的病理变化,以某猪场7头确定为PEDV感染的哺乳仔猪为研究对象,观察其临床症状、剖检变化、组织病理学变化、亚细胞水平结构变化及病毒的组织分布情况。结果显示,感染仔猪消瘦、呕吐、水样腹泻。剖检发现,小肠鼓气,肠壁变薄;胃内有未消化的乳凝块;肠系膜淋巴结充血肿胀。组织病理学结果显示,肠组织普遍出现绒毛萎缩变短;肠系膜淋巴结和脾中淋巴细胞减少;心肌局灶性坏死等。亚细胞结构观察发现,空肠黏膜上皮微绒毛稀疏,上皮细胞胞质空泡化,内质网缢断,线粒体肿胀变圆,并可见散在的冠状病毒粒子。免疫组化结果显示,除直肠外,肠道黏膜上皮细胞胞质中均发现阳性信号,偶尔在肠腺细胞胞质内亦可见到。结果表明,在PEDV自然感染条件下,哺乳仔猪组织器官出现了典型的病理变化,与人工感染相比,致病机理与发病规律大致相同,也存在一定的差别。

    2020年12期 v.40;No.288 2362-2367页 [查看摘要][在线阅读][下载 2621K]
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  • 牦牛肾内动脉分支的铸型观察

    王亚丽;崔燕;

    运用ABS(丙烯腈-丁二烯-苯乙烯)铸型技术,对20个牦牛肾经肾动脉灌注,观察牦牛肾内动脉分支和分布特点。根据牦牛肾外观形态和肾内动脉的血管分布,将牦牛肾分为前、中、后3部分,中部又分为中外部和中内部。结果显示,牦牛肾动脉为1条,在肾门前后分成前干和后干。前干的血管分支分布于肾前部和中外部,后干的分布于后部和中内部。右肾前干分出3条段动脉,从前向后依次为顶段、上段和中外段动脉;后干分出2条,从前向后依次为中内段和下段动脉。通常左肾的前干和后干均各自分出背段和腹段动脉。各段动脉之间未见吻合支。

    2020年12期 v.40;No.288 2368-2373页 [查看摘要][在线阅读][下载 1984K]
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  • 不同运动对伊犁马血气指标的影响

    王建文;姚新奎;李林玲;孔麒森;任万路;王川坤;闫睛;孟军;

    为探讨不同运动对伊犁马血气指标的影响,试验选取伊犁马母马31匹,其中参加1 km速歩赛9匹,参加1 km速度赛12匹,参加12 km速度赛10匹,分别组织测试赛,在测试赛前和测试赛后即刻采集静脉血液样本,通过i-STAT血气分析仪测定马匹血气指标。结果显示:1 km速步赛后即刻伊犁马颈静脉血中pH值和剩余碱浓度极显著低于运动前(P<0.01),HCO_3~-浓度和TCO_2显著低于运动前(P<0.05),Hct和Hb浓度显著高于运动前(P<0.05);1 km速度赛后即刻伊犁马颈静脉血中pH值、HCO_3~-、剩余碱、Ca~(2+)浓度、PCO_2和TCO_2均极显著低于运动前(P<0.01),PO_2、Hct、Glu和Hb浓度极显著高于运动前(P<0.01);12 km速度赛后即刻伊犁马颈静脉血中HCO_3~-和剩余碱、Ca~(2+)浓度、PCO_2和TCO_2均极显著低于运动前(P<0.01),Hct和Glu浓度均极显著高于运动前(P<0.01)。由此可见,应加强对运动马的调教训练,提高马匹的运动适应性,降低马匹运动过程中机体损伤风险,提高马匹运动性能。

    2020年12期 v.40;No.288 2374-2379页 [查看摘要][在线阅读][下载 1598K]
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  • 丁酸钠对IPI-2I细胞中pIgR表达的影响

    巩宇红;金鑫鑫;袁勃雨;王玮;

    丁酸钠已被证实能够改善肠黏膜免疫功能,提高机体IgA分泌,但其机制尚不明确。本试验以猪回肠上皮细胞IPI-2I为细胞模型,利用2.0 mmol/L丁酸钠对IPI-2I细胞进行处理,通过荧光定量PCR、免疫蛋白印迹和信号通路阻断技术,观察丁酸钠对IPI-2I细胞pIgR表达的影响,并探讨其参与调控的信号通路。结果表明,2.0%mmol/L丁酸钠可通过激活IPI-2I细胞内GPR109A受体和ERK1/2信号通路进而增加pIgR的表达。

    2020年12期 v.40;No.288 2380-2385页 [查看摘要][在线阅读][下载 2065K]
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  • 月桂酸对青春期小鼠乳腺上皮细胞增殖和乳腺发育的影响

    王佳鑫;曹宇;李雯;葛玉松;付守鹏;柳巨雄;

    为了探讨月桂酸对青春期小鼠乳腺发育的影响,本研究用不同浓度的月桂酸刺激mMECs 1 d,通过Western blot、CCK8和流式细胞仪等方法检测月桂酸对mMECs增殖的影响。对产后4周小鼠饮用含0.00%,0.05%,0.10%和1.00%月桂酸的饮用水4周,分别检测乳腺中乳导管及终末端数量,并检测乳腺中增殖相关蛋白的表达情况。结果表明,100μmol/L月桂酸能显著促进mMECs的增殖,可显著增加mMECs中Cyclin D1/D3和PCNA的表达量,以及mMECs的S期数量,而U0126可逆转月桂酸对mMECs的增殖作用。体内试验结果显示,饮用水中含0.05%的月桂酸显著促进了乳腺中乳导管和终末端数量,显著增加青春期乳腺中CyclinD1/D3和PCNA的表达量。以上结果表明,饮用水中含0.05%的月桂酸能显著促进青春期小鼠乳腺的发育。

    2020年12期 v.40;No.288 2386-2391页 [查看摘要][在线阅读][下载 2189K]
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  • 黄芪总黄酮体外抗炎作用及对MAPKs信号通路的调控

    周鸿缘;张贤;王萌;葛冰洁;王政;李海涛;张雪梅;

    以LPS诱导的小鼠腹腔巨噬细胞RAW264.7为模型,探讨黄芪总黄酮(TFA)的体外抗炎作用及其机制。MTT法测定TFA对RAW264.7细胞的毒性;在安全浓度下设立TFA低、中、高剂量组以及空白组和模型组,Griess法检测细胞上清液炎性介质NO的分泌量,ELISA法测定细胞上清液炎性介质PGE_2和炎性因子IL-1β、IL-6、TNF-α和IFN-γ的含量,RT-PCR法测定细胞iNOS和COX-2 mRNA的含量,Western blot法测定iNOS和COX-2蛋白表达情况,同时分析MAPKs信号通路的关键蛋白p38、ERK1/2和JNK磷酸化水平的变化规律。结果显示,TFA可呈剂量依赖性的抑制LPS诱导所致RAW264.7细胞NO、PGE_2、IL-1β、IL-6、TNF-α和IFN-γ的过度分泌,下调iNOS和COX-2 mRNA及其蛋白的表达,抑制MAPKs信号通路关键蛋白p38和JNK的过度磷酸化。结果表明,TFA可通过调控RAW264.7细胞MAPKs相关通路以及iNOS和COX-2表达,进而抑制炎性介质NO、PGE_2和炎性因子IL-1β、IL-6、TNF-α、IFN-γ生成,发挥其体外抗炎的作用。

    2020年12期 v.40;No.288 2392-2397页 [查看摘要][在线阅读][下载 2039K]
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  • 小鼠脂肪沉积过程中定量PCR内参基因的筛选

    华永琳;熊燕;张静;郭玉;秦文昌;熊显荣;字向东;殷实;李键;

    通过筛选小鼠不同类型脂肪组织及脂肪细胞诱导分化过程中的最佳内参基因,为研究小鼠脂肪沉积过程中基因相对定量表达水平提供依据。首先利用荧光定量PCR技术检测9个候选内参基因在脂肪组织及脂肪细胞诱导分化过程中的表达并构建标准曲线,然后通过RefFinder程序评估内参基因的稳定性并确定最稳定的内参基因,最后以筛选的稳定内参基因进行不同类型脂肪组织组蛋白去甲基化酶KDM2A的相对定量表达,并与KDM2A的绝对定量结果比较,评价筛选内参基因的定量效果。结果显示,RPL13a和18S rRNA分别是小鼠脂肪组织和脂肪细胞中表达最稳定的内参基因,而ACTB不适合作为小鼠脂肪沉积过程中的内参基因。采用RPL13a作为内参基因的KDM2A相对定量结果显示,KDM2A在附睾脂肪组织(eWAT)具有较高的表达量,棕色脂肪组织(BAT)次之,与KDM2A在不同类型脂肪组织的绝对定量结果一致。因此,RPL13a和18S rRNA可作为小鼠脂肪组织及脂肪细胞基因相对定量的最适内参基因。

    2020年12期 v.40;No.288 2398-2404页 [查看摘要][在线阅读][下载 2140K]
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临床兽医学

  • ADSC-CM干预对小型猪肝损伤模型中内质网应激的影响

    刘笑凝;焦智慧;马亚军;张千振;徐嘉元;朴晨曦;张建涛;王洪斌;

    为探究在小型猪肝脏缺血再灌注(ischemia reperfusion,I/R)合并部分肝切除损伤模型中,脂肪间充质干细胞条件培养液(adipose tissue-derived mesenchymal stem cell condition medium,ADSC-CM)干预对内质网应激(endoplasmic reticulum stress,ERS)的影响,试验选取24头20~30 kg的4~6月龄健康巴马香猪,随机分为模型组、基础培养基对照组(DMEM组)、脂肪间充质干细胞条件培养液组(ADSC-CM组)和脂肪间充质干细胞组(ADSCs组),每组6头。各组均在腹腔镜下进行右半肝缺血60 min合并左半肝切除手术,术后即刻4组分别于肝脏局部注射等量的生理盐水、DMEM培养基、ADSC-CM和ADSCs。各组于术前、术后1,3和7 d经腹腔镜采取肝脏组织,进行HE染色检测,并对肝脏内质网应激相关通路关键因子的基因水平表达进行检测。肝脏组织病理检测结果显示,与术前相比,4组术后1 d的肝脏组织损伤均较严重,其中ADSC-CM组和ADSCs组肝脏组织病理变化较模型组和DMEM组轻微。基因表达水平检测结果与HE结果一致,术后1 d,ADSC-CM组和ADSCs组的GRP78、ATF6、PERK、IRE1、ATF4和CHOP等ERS相关通路蛋白的mRNA表达水平均显著低于模型组和DMEM组。结果表明,肝脏I/R损伤引起的肝细胞过度的ERS可能是导致该手术模型中肝脏损伤的重要原因,而ADSC-CM能通过抑制过度的ERS减轻缺血再灌注后的肝损伤。

    2020年12期 v.40;No.288 2405-2412页 [查看摘要][在线阅读][下载 2059K]
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  • 金黄色葡萄球菌侵染对奶牛乳腺上皮细胞Nrf2和NF-κB信号通路转导的影响

    王建强;李俊;马晓敏;崔璐莹;孟霞;李建基;王亨;

    金黄色葡萄球菌(S.aureus)是奶牛乳腺炎的主要致病菌之一,严重影响奶牛的生理健康和生产性能。本试验使用S.aureus侵染奶牛乳腺上皮细胞(BMECs),观察S.aureus侵袭对BMECs的NF-κB和Nrf2信号通路转导,及炎性因子TNF-α、IL-1β和IL-8表达的影响。采用S.aureus按MOI=1∶1侵染BMECs,在不同的时间点分别使用荧光定量PCR检测Nrf2通路关键基因Nrf2、Keap1、NQO-1与炎性因子TNF-α、IL-1β、IL-8的mRNA表达水平;Western blot检测Nrf2和NF-κB信号通路关键蛋白Nrf2、p65、P-p65、IκBα、P-IκBα的表达。结果显示:Nrf2和NQO-1基因mRNA表达量在感染后2,4 h显著或极显著升高(P<0.05或P<0.01),且Nrf2在感染后6,8 h时极显著下降(P<0.01);Keap1基因mRNA表达量在感染后2,4 h时显著或极显著下降(P<0.05或P<0.01),且在感染后8 h时显著升高(P<0.05)。炎性因子TNF-α、IL-1β和IL-8基因mRNA表达在感染后1,2,3,4,6,8 h时均显著或极显著升高(P<0.05或P<0.01)。Western blot结果显示:Nrf2蛋白表达量在感染后2 h时显著升高(P<0.05),且在感染后6,8 h时显著或极显著下降(P<0.05或P<0.01);p65蛋白磷酸化水平在感染后0.5,1,2,3,4,5,6 h时显著或极显著升高(P<0.05或P<0.01);IκBα蛋白磷酸化水平在感染后1,2,3,4 h时显著或极显著升高(P<0.05或P<0.01)。结果表明,S.aureus侵染BMECs后,通过激活Nrf2和NF-κB信号通路,促进炎性细胞因子表达,参与S.aureus侵袭BMECs的进程,为金黄色葡萄球菌性乳腺炎的防治提供新的思路。

    2020年12期 v.40;No.288 2413-2418+2424页 [查看摘要][在线阅读][下载 2052K]
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  • 不同育肥阶段荷斯坦阉牛亚急性瘤胃酸中毒(SARA)发病情况及相关指标分析

    卜也;王建发;孙芳;连帅;赵晓川;武瑞;

    为调查黑龙江某肉牛育肥场荷斯坦阉牛育肥前期、中期和后期3个不同育肥阶段亚急性瘤胃酸中毒(SARA)的发病情况及相关辅助检测指标的变化。选用6月龄荷斯坦阉牛30头,测定3个育肥阶段荷斯坦阉牛瘤胃液pH值及血清中谷氨酰转肽酶(GGT)、丙氨酸氨基转移酶(ALT)、天门冬氨酸转移酶(AST)、碱性磷酸酶(ALP)、总蛋白(TP)、白蛋白(ALB)、球蛋白(GLO)、甘油三酯(TG)、胆固醇(TC),并计算各阶段平均日增重(ADG)。结果显示,荷斯坦阉牛育肥前期、中期、后期轻度SARA的发病率分别为50%,40%和20%,中度SARA发病率分别为20%,40%和80%。育肥后期荷斯坦阉牛肝功指标GGT活性极显著高于前期和中期(P<0.01);3个阶段荷斯坦阉牛肝功ALT活性依次升高,且组间差异极显著(P<0.01);育肥后期荷斯坦阉牛肝功AST活性显著高于前期和中期(P<0.05);育肥中期和后期荷斯坦阉牛血清ALB含量显著低于前期(P<0.05);育肥后期血清GLO含量极显著高于前期和中期(P<0.01)。育肥后期荷斯坦阉牛能量代谢指标血清TG含量极显著高于中期(P<0.01),显著高于前期(P<0.05);育肥后期荷斯坦阉牛能量代谢指标血清TC含量极显著高于前期和中期(P<0.01)。结果表明,3个阶段荷斯坦阉牛均存在患SARA风险,育肥后期SARA病情加深,肝功指标、血清蛋白和血脂水平也会发生明显变化;患SARA严重的荷斯坦阉牛可能会降低增重水平。因此,牛场应提高对SARA的关注,根据不同育肥阶段指标变化合理搭配饲粮,做好瘤胃保健工作,防止继发其他疾病,实现肉牛产业提质增效。

    2020年12期 v.40;No.288 2419-2424页 [查看摘要][在线阅读][下载 1765K]
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动物科学

  • 饲喂大豆异黄酮对荷斯坦犊牛免疫及抗氧化性能的影响

    肖凡;李建洲;李明;余雄;邵伟;

    为探究饲喂不同浓度大豆异黄酮(soy isoflavone,SIF)对荷斯坦犊牛免疫及抗氧化性能的影响,试验采用单因素随机分组设计将40头体况良好、体质量相近的(30±10)日龄荷斯坦犊牛分为4组:CON组及TGⅠ、Ⅱ、Ⅲ组,分别补饲0,100,300,600 mg/d大豆异黄酮。预试阶段7 d及正试阶段60 d。于正试阶段0,30,60 d采集犊牛血清,试验结束后利用酶联免疫法测定血清免疫及抗氧化相关指标。结果表明,饲喂大豆异黄酮可显著提高荷斯坦犊牛血清IgA、IgG、IgM、IFN-γ、IL-1β和IL-4水平,降低血清TNF-α含量;饲喂大豆异黄酮可显著提高荷斯坦犊牛血清GSH-Px、T-AOC和SOD活性,降低血清MDA含量。综上所述可得结论:饲喂大豆异黄酮有提高荷斯坦犊牛免疫性能和抗氧化性能的作用,且饲喂剂量600 mg/d饲喂时间30 d即可达到显著效果。

    2020年12期 v.40;No.288 2425-2432页 [查看摘要][在线阅读][下载 2632K]
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  • 中国荷斯坦奶牛angptl5基因多态性及其与乳品质性状的相关分析

    潘子意;靳子康;高振;刘娟;Shaokat Ali;姜平;赵志辉;

    本试验以中国荷斯坦奶牛为研究对象,旨在通过筛选血管生成素样蛋白5(angptl5)基因的突变位点,获得影响中国荷斯坦奶牛乳品质性状的潜在遗传标记。PCR扩增angptl5基因的目的片段,通过直接测序的方法检测目的基因片段的单核苷酸多态性,使用SPSS 23.0软件分析其与中国荷斯坦奶牛乳品质性状的相关关系。结果发现,angptl5基因内含子中存在1个突变位点,在检测群体中该I1-1776 G>A突变位点存在AA、AG、GG 3种基因型,通过基因多态性分析,发现I1-1776 G>A位点基因杂合度(H)和多态信息含量(PIC)均处于0.25~0.50之间,χ~2=1.85,P>0.05,说明I1-1776 G>A位点在中国荷斯坦奶牛群体中处于哈代温伯格平衡状态(P>0.05)。其中AA基因型个体的尿素氮显著高于AG、GG型(P<0.05),而与产奶量、乳蛋白、乳糖、脂肪以及干物质含量均无显著相关性(P>0.05)。研究结果可为未来研究奶牛angptl5基因生物学功能和优质奶牛选育提供分子理论依据。

    2020年12期 v.40;No.288 2433-2437页 [查看摘要][在线阅读][下载 687K]
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  • 精胺在猪精液液态保存过程中的作用

    王婧然;郭海涛;孙良振;金小虎;石学颖;林敬轶;岳顺利;周佳勃;

    目前液态保存精液的人工授精技术被猪场广泛采用,因此廉价有效的保存液对生猪生产十分重要。本研究的目的是探究精胺对液态保存猪精子质量的影响。主要检测了精子的活力、质膜完整性、顶体完整性、活性氧含量、线粒体膜电位、细胞凋亡水平和体外受精能力。结果显示,精液保存液中添加精胺有助于提高猪精子保存质量,同时发现精胺可以减少活性氧的过多产生和抑制精子凋亡。此外,本研究发现精胺能够提高精子受精能力和囊胚发育能力。结果表明,在精液保存液中添加适当浓度的精胺有助于改善在液态保存的猪精子的质量。

    2020年12期 v.40;No.288 2438-2443页 [查看摘要][在线阅读][下载 786K]
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  • 2次克隆转基因山羊的重构胚发育分析

    宋绍征;陆睿;张婷;潘生强;成勇;周鸣鸣;

    为了提高体细胞核移植生产转基因克隆山羊的效率,本研究针对2次克隆转基因山羊的重构胚发育情况进行了比较分析。首先,剖宫产从35日龄奶山羊胎儿中分离培养原代胎儿成纤维细胞,分别电转染BLYZ和Blac乳腺特异性表达载体,500mg/L G418筛选、PCR检测以获得转基因细胞株。然后,以此转基因细胞株作为供核细胞用于山羊体细胞核移植。最后,剖宫产获取转基因胎儿克隆细胞系,以此作为供核细胞进行2次克隆生产转基因山羊,并比较分析重构胚发育情况。结果显示:共获得74株LYZ转基因细胞,62株hα-LA转基因细胞;通过第1轮体细胞核移植后,BLYZ和Blac载体的重构卵融合率分别为79.4%(235/296),77.0%(221/287),2~4细胞发育率分别为35.7%(84/235)和33.0%(73/221),移植受体妊娠率分别为38.5%(5/13)和36.4%(4/11);2次克隆后,BLYZ和Blac载体的重构卵融合率分别为90.1%(118/131),87.6%(127/145),2~4细胞发育率分别为66.9%(79/118)和68.5%(87/127),移植受体妊娠率分别为58.3%(7/12)和61.5%(8/13)。以上结果表明,2次克隆的转基因山羊重构胚融合率、发育率和移植受体妊娠率均明显高于传统的体细胞核移植,这为今后高效生产转基因山羊和转基因动物的遗传育种奠定基础。

    2020年12期 v.40;No.288 2444-2450页 [查看摘要][在线阅读][下载 1203K]
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  • miR-709靶向调控IGF1基因的表达

    李常红;赵寒冬;程云云;郝林琳;滕肇慧;

    在动物生长调控过程中,IGF1是发挥关键作用的垂体-IGF1-靶器官生长轴上最重要的因子之一。IGF1的表达与动物出生前后的生长均密切相关。miRNAs是一类非编码单链RNA,通过碱基互补配对的方式与靶基因的3′UTR区部分或完全互补,降解靶基因的转录产物或者抑制转录产物的翻译,从而起到转录后调控靶基因表达的作用。本试验以在大鼠垂体中高表达的miR-709为研究对象,通过生物信息学分析、双荧光素酶报告系统鉴定确定IGF1为其直接靶基因,然后进一步采用qRT-PCR及Western blot技术检测miR-709对IGF1表达量的影响。结果显示,miR-709显著抑制IGF1在RNA及蛋白质水平的表达,表明miR-709可通过直接靶向IGF1基因抑制其表达。本试验将为miR-709调控动物生长研究领域提供数据。

    2020年12期 v.40;No.288 2451-2456+2471页 [查看摘要][在线阅读][下载 1530K]
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综述

  • 我国非洲猪瘟时空特征及影响因素

    陈志杰;王新生;汪权方;

    我国非洲猪瘟自发生以来,已扩散到全国31省、直辖市、自治区,给国内经济造成重大损失。为研究我国疫情现状及趋势,分别采用GIS分析和熵权灰色关联度分析方法对全国疫情时空特征以及疫情发病率、死亡率的影响因素进行分析。研究表明:我国疫情总体扩散趋势为东北-西南方向,疫情分布重心不断向西南偏移。疫情分布在空间和时间上均有明显的聚集性。空间上,疫情总体集中分布在我国东部地区,由我国生猪养殖格局决定,呈现4个聚集区;时间上,疫情集中发生于10-12月份,其他月份持续发生,且西南聚集区成为我国目前疫情持续时间最长、高频发、高风险区域。海拔与疫情发病率、死亡率的熵权关联度最大,是地理因素中重要的影响因素,生猪养殖规模对发病率的影响仅次于海拔因素。

    2020年12期 v.40;No.288 2457-2464页 [查看摘要][在线阅读][下载 1698K]
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  • 绵羊弓形虫病垂直传播研究进展

    姜楠;杨玉荣;

    弓形虫是机会性致病寄生原虫,能感染所有温血动物和人类,引起生育障碍和神经系统疾病。弓形虫病是绵羊流产的主要原因之一,其主要感染途径是采食含有弓形虫卵囊的水、饲草的水平传播和妊娠期母羊的先天性垂直传播。关于绵羊弓形虫病垂直传播的流行特征和传播机制了解尚少,本研究就绵羊弓形虫病的先天性垂直传播流行特点、感染形式、致病特点、诊断以及防控进行综述,为了解绵羊弓形虫病的垂直传播情况和有效防控弓形虫对绵羊生殖健康的影响提供指导,也为评估人类弓形虫病风险因素提供参考依据。

    2020年12期 v.40;No.288 2465-2471页 [查看摘要][在线阅读][下载 1252K]
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简讯