- 徐磊;曾亮明;张体银;刘毅发;杨慧;余勋信;林秋敏;刘小龙;傅光华;白泉阳;黄瑜;张渊魁;
为了解福建省猪源牛病毒性腹泻病毒(BVDV)流行与分布情况及对猪瘟病毒(CSFV)抗体的影响,分别采用已有ELISA方法和间接血凝试验(IHA)对福建省9个地市293个猪场的16 537份临床样品进行猪源BVDV抗体和CSFV IHA抗体效价(log_2x)进行检测,并对其中400份样品采用已有RT-PCR方法开展猪源BVDV病原检测及测序。结果显示16 537临床样品、293个猪场和9个地市的BVDV抗体阳性率分别为35.6%(5 891/16 537),89.4%(262/293)和100.0%(9/9),其中母猪和疑似猪瘟猪的BVDV抗体阳性率分别显著高于仔猪和临床健康猪(P<0.05);BVDV抗体阴性猪的CSFV IHA抗体效价与阳性率均显著高于BVDV抗体阳性猪(P<0.05);CSFV IHA抗体效价在6～11猪群的BVDV抗体多为阴性,占比95.9%(8 479/8 842);BVDV抗体阳性猪群的CSFV IHA抗体效价普遍较低(≤4),占比88.7%(5 224/5 891);且CSFV IHA抗体与BVDV抗体呈负相关(r=-0.819,P<0.05);BVDV病原阳性率为15.3%(61/400),其中抗体~-/抗原~-占45.0%(180/400),抗体~+/抗原~-占39.8%(159/400)、抗体~-/抗原~+占12.0%(48/400),抗体~+/抗原~+占3.2%(13/400)。结果表明,福建省猪源BVDV感染情况较普遍并对CSFV抗体存在抑制作用,母猪与疑似猪瘟猪为BVDV感染的高流行群体,对抗体~-/抗原~+持续感染猪应予以重视。
2021年06期 v.41;No.294 1031-1037+1059页 [查看摘要][在线阅读][下载 1143K] [下载次数：150 ] |[网刊下载次数：0 ] |[引用频次：3 ] |[阅读次数：0 ] - 张伟;张子荣;杨力伟;王世银;刘晓娜;张力;王忠山;
为了深入了解猪繁殖与呼吸障碍综合征病毒(PRRSV)感染状态与血清中抗体水平的关联性,本研究选择新疆北疆地区3个PRRSV防控方法不同的规模化猪场,使用ELISA和qRT-PCR对各个阶段猪群血清中PRRSV抗体水平和抗原阳性率进行了为期2年的持续监测,并通过ORF5基因测序对其中2个猪场PRRSV流行毒株进行了初步确定。结果表明,在猪群整体生产性能处于较高水平时,免疫PRRSV MLV猪场种猪群抗体阳性率应≥90.0%,S/P值离散度≤40.0%,S/P值≥2.5比例为0;商品猪群抗体阳性率应≥85.0%,S/P值离散度≤50.0%,S/P值≥2.5比例<5.0%,不同时期抗体S/P值平均值应在0.4～2.5且保持相对稳定。PRRSV自然感染的猪场,待猪群生产性能稳定后,PRRSV抗体阳性率、S/P值平均值以及S/P值≥2.5的样本数量应呈逐步下降趋势。PRRSV抗体S/P值在0.4～2.5的血清样本,使用qRT-PCR均未检测到PRRSV抗原;S/P值在2.6～3.0的血清样本,PRRSV抗原阳性率为15.0%～54.0%,而S/P>3.1的血清样本,PRRSV抗原阳性率为78.0%～100.0%。调查猪场感染PRRSV毒株为JXA1和CH-1a毒株。本研究为猪场科学解读PRRSV抗体ELISA检测结果,评估猪群PRRSV稳定状态,进而合理制定PRRSV防控策略提供依据。
2021年06期 v.41;No.294 1038-1046页 [查看摘要][在线阅读][下载 1304K] [下载次数：257 ] |[网刊下载次数：0 ] |[引用频次：5 ] |[阅读次数：0 ] - 于桐;南福龙;王政;于成东;孟媛;李亭玉;蔡锦顺;鲁会军;金宁一;
为探究新城疫病毒(Newcastle disease virus, NDV)的V蛋白拮抗宿主干扰素(interferon, IFN)信号通路对先天性免疫的影响,本试验测定了低毒力LaSota株插入BC株V蛋白的重组病毒rL-BC的毒力和感染后4,8,12 h的感染效率,病毒感染后上清的IFN-β生成情况和P-STAT1、MDA5蛋白的表达水平,并检测感染后DF1、A549细胞先天性免疫分子的转录水平。结果显示,重组病毒的颅内致病指数(intracerebral pathogenicity index, ICPI)升高,不同时间的感染效率均高于亲本毒。此外,V蛋白的插入使上清中IFN-β生成量降低,P-STAT1和MDA5蛋白的表达水平下降,LGP2、TLR3等多种模式识别受体及ISG15、IFN-α等IFN通路相关分子的转录水平下降。以上均表明NDV的V蛋白通过抑制先天性免疫反应从而提高病毒毒力。
2021年06期 v.41;No.294 1047-1052页 [查看摘要][在线阅读][下载 2387K] [下载次数：115 ] |[网刊下载次数：0 ] |[引用频次：0 ] |[阅读次数：0 ] - 张余蓬;邓华英;李前勇;张德志;朱瑞;
第1批240只7日龄青脚麻鸡随机分为6组,Ⅰ组为空白对照,Ⅱ组为疫苗对照,Ⅱ、Ⅵ组在14,28日龄接种新城疫弱毒疫苗,Ⅲ～Ⅵ组于每次免疫前连续皮下注射当归内酯3 d,剂量分别为10,20,40,80 mg/kg,Ⅰ、Ⅱ组注射等量生理盐水。各组分别于免疫前和免疫后7,14,21,28,35 d采集心血,检测血清新城疫抗体效价,并测定免疫器官指数。第2批120只7日龄青脚麻鸡随机分为4组,Ⅶ组为空白对照,Ⅷ组为疫苗对照,Ⅷ～Ⅹ组于14,28日龄接种新城疫弱毒疫苗,Ⅸ组在免疫前连续3 d皮下注射当归内酯20 mg/kg,Ⅹ组在免疫前连续5 d注射当归内酯20 mg/kg,Ⅶ、Ⅷ组注射等量生理盐水。各组于免疫前和免疫后7,14,21,28,35 d采集心血,测定血液中T淋巴细胞亚群数量,并进行脾脏淋巴细胞增殖试验及细胞因子测定。结果显示,疫苗免疫后7,21 d,Ⅳ组新城疫抗体效价显著高于Ⅱ组(P<0.05),免疫后7 d法氏囊指数Ⅳ组显著高于Ⅱ组(P<0.05);注射20 mg/kg当归内酯可提高鸡新城疫免疫抗体效价和法氏囊指数。Ⅹ组T、B淋巴细胞增殖显著高于Ⅶ、Ⅷ组(P<0.05),Ⅸ、Ⅹ组CD_4~+及CD_4~+/CD_8~+比值显著高于Ⅶ～Ⅷ组(P<0.05),且Ⅹ组显著高于Ⅸ组(P<0.05);免疫后21,28 d,Ⅸ组IL-2 mRNA表达量显著高于Ⅷ～Ⅹ组(P<0.01);结果表明,20 mg/kg当归内酯连续注射5 d,可促进鸡T、B淋巴细胞增殖,提高CD_4~+及CD_4~+/CD_8~+的比值,上调IL-2 mRNA表达量。
2021年06期 v.41;No.294 1053-1059页 [查看摘要][在线阅读][下载 1335K] [下载次数：349 ] |[网刊下载次数：0 ] |[引用频次：10 ] |[阅读次数：0 ] - 李国生;彭瑞妮;郑文亚;刘犇;
为探讨单核增生李斯特菌(Listeria monocytogenes, LM)侵入山羊(Capra hircus)中枢神经系统的组织定位及其对脑源性神经营养因子(brain derived neurotrophic factor, BDNF)表达的影响,本试验选取3只已确诊感染李斯特菌的发病山羊(感染组)和3只正常山羊(对照组),取其大脑、小脑、中脑、脑桥和脊髓,通过姬姆萨染色定位李斯特菌,免疫组织化学定位李斯特菌菌体蛋白在中枢神经系统的分布情况,运用免疫组织化学和蛋白质印迹技术分析BDNF在中枢神经系统的表达情况。感染组姬姆萨染色结果显示,李斯特菌在大脑和小脑主要分布于皮质部,在中脑主要分布于胶质细胞、中性粒细胞和淋巴细胞及其周边组织,在脑桥主要分布于中间神经元和中性粒细胞,在脊髓则仅分布于中央管室管膜上皮。感染组李斯特菌菌体蛋白表达定位与李斯特菌定位基本一致,对照组不表达。免疫组织化学显示BDNF在感染组大脑、小脑和中脑呈阳性表达,在脑桥呈弱阳性表达,脊髓不表达;对照组大脑和中脑表达弱于感染组,小脑、脑桥和脊髓未见表达。蛋白质印迹结果显示,与对照组相比,感染组山羊大脑和脑桥BDNF表达量极显著升高(P<0.01),小脑、中脑和脊髓BDNF表达量显著升高(P<0.05)。综上,李斯特菌主要侵入山羊大脑和小脑皮质部、中脑和脑桥炎性细胞及脊髓中央管,山羊感染李斯特菌后BDNF的表达增强,BDNF对李斯特菌在中枢神经系统的损伤可能发挥一定的神经保护作用。
2021年06期 v.41;No.294 1060-1066+1073页 [查看摘要][在线阅读][下载 16859K] [下载次数：86 ] |[网刊下载次数：0 ] |[引用频次：3 ] |[阅读次数：0 ] - 宋军;吕观新;王晗晟;刘梦;王建发;孙东波;武瑞;
无乳链球菌是奶牛乳腺炎最主要的致病菌之一,严重影响奶牛养殖业的发展。本研究旨在揭示血根碱对无乳链球菌(Streptococcus agalactiate)的抗菌机理,为中草药单体抑菌产品的开发提供理论依据。通过最小抑菌浓度和抑菌曲线分析了血根碱对无乳链球菌的抑菌活性,并检测无乳链球菌胞外D_(260)和D_(280)及荧光染料PI摄取能力,胞外乳酸脱氢酶(LDH)活性,评价细胞膜完整性、通透性;通过扫描电镜和透射电镜观察血根碱对无乳链球菌细胞形态和超微结构的影响,从而探究血根碱对无乳链球菌的抑菌机理。结果表明,血根碱对无乳链球菌的最小抑菌质量浓度为9 mg/L,亚抑菌质量浓度能够显著抑制无乳链球菌生长;血根碱处理的无乳链球菌细胞外D_(260)和D_(280)显著高于对照组,能显著引起PI流入细胞内;胞外LDH活性随血根碱作用时间的延长快速的增加,3 h达到一个相对稳定的状态。经血根碱处理后,扫描电镜和透射电镜下无乳链球菌表面塌陷、皱缩,胞壁破裂,内容物泄漏等。血根碱可以通过破坏细胞膜完整性和渗透性,从而导致细胞破裂、胞内物质发生轻微泄漏,达到抑菌作用。
2021年06期 v.41;No.294 1067-1073页 [查看摘要][在线阅读][下载 1913K] [下载次数：496 ] |[网刊下载次数：0 ] |[引用频次：14 ] |[阅读次数：0 ]
- 柳方远;印春生;李双星;单虎;才学鹏;刘业兵;
为建立犬弓形虫抗体间接ELISA(iELISA)诊断方法,本研究对弓形虫TgCyP基因进行重组表达,纯化获取重组蛋白并进行Western blot检测,方阵滴定法确定纯化好的重组蛋白抗原最佳包被质量浓度和血清稀释度,优化包被条件、酶标二抗稀释度、封闭液和封闭时间等,建立犬弓形虫抗体iELISA诊断方法,并对建立的iELISA检测方法进行重复性、敏感性、特异性试验和临床检测。结果显示,抗原最佳包被质量浓度为1 mg/L,最佳包被条件为4℃包被过夜,最佳封闭条件为5%脱脂奶粉37℃作用2 h。待检血清以1∶200稀释后37℃作用60 min效果最佳,酶标二抗以1∶4 000稀释后37℃孵育60 min效果最佳。临界值为0.298,待检血清D_(450 nm)值>0.298则确定为阳性。重复性试验中变异系数均低于10%,具有良好的稳定性;与CPIV、RABV、CDV、CPV、CAV阳性血清均无交叉反应,具有良好的特异性;将犬弓形虫阳性血清稀释至1∶6 400仍显示为阳性,敏感性好。应用建立的iELISA和金标准MAT对226份犬的临床血清进行检测,阳性率分别为24.34%和29.64%,两者符合率达94.70%。本试验建立了一种快速有效的诊断犬弓形虫抗体的iELISA方法,为犬感染弓形虫病的检测奠定基础。
2021年06期 v.41;No.294 1074-1079+1093页 [查看摘要][在线阅读][下载 512K] [下载次数：354 ] |[网刊下载次数：0 ] |[引用频次：2 ] |[阅读次数：0 ] - 庄浩瀚;潘灵韬;姚晨倩;陈学秋;阳毅敏;赵明秀;林蜜;杨怡;杜爱芳;
重组抗体相较于多克隆抗体和杂交瘤单克隆抗体具有更好的稳定性和特异性,本研究以弓形虫表面抗原1(surface antigen 1,SAG1)为靶标制备了重组抗体。将弓形虫SAG1(45～198 aa)的基因序列被克隆到pET-32a原核表达质粒,转化大肠杆菌BL21感受态细胞后获得弓形虫SAG1(45～198 aa)重组蛋白。重组蛋白经镍柱纯化后通过皮下注射免疫BALB/c小鼠,取免疫后小鼠的脾脏细胞与小鼠骨髓瘤细胞SP2/0融合,制备SAG1单克隆杂交瘤。通过兼并引物克隆杂交瘤抗体的重链和轻链序列得到重组抗体表达质粒,将重组抗体表达质粒转染HEK293T细胞获得重组抗体。通过pET-32a和pCMV-EGFP质粒表达SAG1多肽片段鉴定重组抗体识别的SAG1抗原表位。结果显示,免疫印迹和免疫荧光试验确定SAG1重组抗体的特异性,SAG1重组蛋白的抗原表位序列为SAG1(84～90 aa)。本研究展示了一种简便的重组抗体制备过程,可为其他蛋白的抗体制备提供借鉴,制备的重组抗体具有详细抗原表位信息,有望成为弓形虫诊断的工具抗体。
2021年06期 v.41;No.294 1080-1085+1104页 [查看摘要][在线阅读][下载 1389K] [下载次数：518 ] |[网刊下载次数：0 ] |[引用频次：8 ] |[阅读次数：0 ] - 高明星;张金花;刘泽霖;周静静;胡薛英;张万坡;程国富;谷长勤;
为探究乙型脑炎病毒对小鼠脑组织损伤相关基因的变化,本试验采用P3株乙脑病毒感染6周龄BALB/c鼠,取对照小鼠和病毒感染后发病小鼠的脑组织,筛选差异表达基因,并用GO和KEGG数据库进行分析。组织病理学观察见神经元变性坏死,血管周炎性细胞增多及胶质细胞增生;免疫组织化学染色显示大脑皮层神经元细胞内JEV抗原阳性信号显著;脑组织提取RNA后,使用Illumina HiSeq~(TM)平台进行测序,筛选出1 940个差异表达基因,其中表达上调基因1 813个,下调基因127个。GO富集分析显示,差异基因大多与免疫、炎症的调控等途径有关。KEGG富集分析发现,参与免疫过程的差异基因数量最多且富集最显著。显著富集途径有JAK-STAT信号通路、Toll样受体信号通路、NF-κB信号通路、细胞因子-细胞因子受体相互作用和TNF信号通路。选取8个差异基因,采用qRT-PCR进行验证,证实和转录组分析结果一致。本研究获得的小鼠感染乙脑病毒后脑的转录组数据,将有助于进一步研究乙脑的发病机制。
2021年06期 v.41;No.294 1086-1093页 [查看摘要][在线阅读][下载 3699K] [下载次数：345 ] |[网刊下载次数：0 ] |[引用频次：2 ] |[阅读次数：0 ] - 吴桐;孙莹莹;刘洪涛;雷连成;
猪链球菌2型(Streptococcus suis serotype 2,SS2)属革兰阳性菌,是一种常见猪共生菌,在特殊情况下会成为入侵病原菌感染仔猪,导致仔猪的脑膜炎、败血症、心内膜炎、关节炎和肺炎等。由于仔猪感染模型成本高、病理特征差别大、试验条件要求高以及猪源免疫细胞鉴别抗体非常少,限制了对SS2的免疫学致病机制的深入研究。本研究以ICR小鼠为对象,通过腹腔注射方式分别感染脑膜炎型和非脑膜炎型SS2,从临床症状、细菌定植、免疫学指标、组织病理学变化等方面全面比较,评价脑膜炎小鼠的发病特征。结果显示,与非脑膜炎型SS2感染的小鼠相比,感染脑膜炎型SS2的小鼠呈现明显的运动失调、转圈、头颈扭转等神经症状;脑组织病变明显,且有细菌定殖;血清中IL-6、IL-8、IL-17在感染后表达水平明显升高,且脑膜炎型SS2感染组显著高于非脑膜炎型SS2感染组;脑膜炎型SS2感染小鼠脑组织中高水平的髓过氧化物酶(myeloperoxidase, MPO)与IL-6,反映了脑部中性粒细胞的大量浸润和剧烈的炎症反应。结果表明,ICR小鼠可以用于SS2引起的脑膜炎研究,IL-6在外周血和脑组织中的表达具有一致性,可作为成功感染的评价指标。
2021年06期 v.41;No.294 1094-1104页 [查看摘要][在线阅读][下载 3008K] [下载次数：469 ] |[网刊下载次数：0 ] |[引用频次：2 ] |[阅读次数：0 ] - 钟昊然;王培莉;陈艳飞;孟霞;朱国强;李建基;崔璐莹;董俊升;王亨;
为研究禽致病性大肠杆菌(APEC)六型分泌系统(typeⅥsecretion system, T6SS)clpV基因对Ⅰ型菌毛表达的影响,本研究利用Red同源重组系统构建了禽致病性大肠杆菌clpV基因缺失株TW-XM△clpV。将clpV基因克隆到表达载体pBR322中,构建相应回补株TW-XMC△clpV。通过PCR特异性检测和基因测序,验证上述突变株均构建成功,且能稳定遗传。利用荧光定量PCR检测野生株、clpV缺失株和回补株中Ⅰ型菌毛9个主要基因的mRNA相对表达量。结果显示:与野生株相比,缺失株中fimC、fimF、fimG、fimI的mRNA相对表达量显著下降,fimB、fimD、fimE极显著下降,fimA与fimH则无统计学意义;而回补株各基因的mRNA相对表达量均得到了恢复。本研究表明clpV基因缺失影响了Ⅰ型菌毛的表达。本研究有助于了解T6SS与Ⅰ型菌毛合成的关系,为进一步研究APEC的致病机理奠定基础。
2021年06期 v.41;No.294 1105-1110页 [查看摘要][在线阅读][下载 718K] [下载次数：266 ] |[网刊下载次数：0 ] |[引用频次：1 ] |[阅读次数：1 ]
- 张正荣;郭晨瑶;陈诗胜;赵亚男;任建鸾;汤芳;薛峰;戴建君;
牛奶中血清淀粉样蛋白A(MAA)是表征奶牛乳腺炎的重要生物标志物,本研究构建了携带MAA基因的重组原核表达质粒pET28a-SUMO-MAA,采用大肠杆菌BL21(DE3)作为表达菌株,IPTG诱导表达,获得可溶性重组蛋白SUMO-MAA,用特异性SUMO酶切除重组蛋白上的SUMO标签后通过亲和层析纯化获得MAA。用纯化后的MAA免疫BALB/c小鼠,制备抗MAA的单克隆抗体并测定其效价和特异性。结果显示,本研究成功表达可溶性MAA蛋白,大小约为17 kDa,筛选出2株单抗均可与MAA蛋白反应,效价分别为1∶25 600,1∶51 200。试验为后续开发牛奶中血清淀粉样蛋白的检测方法以及奶牛乳腺炎的诊断研究奠定重要基础。
2021年06期 v.41;No.294 1111-1117页 [查看摘要][在线阅读][下载 1825K] [下载次数：336 ] |[网刊下载次数：0 ] |[引用频次：1 ] |[阅读次数：0 ] - 李瑞萍;刘长国;张硕;董丽艳;王秋霞;徐时湘;李国勤;田勇;柴一秋;刘素贞;卢立志;
为探讨蝉花多糖对肉鸡生长性能、抗氧化能力和肠道菌群的影响,试验选取270只1日龄雁荡麻鸡,公母各半,随机分为6组,每组3个重复,每个重复15只。在11～17日龄和25～31日龄,A组(非免疫)和B组(免疫)灌服生理盐水,C组灌服杆菌肽锌(50 mg/kg),D～F组分别灌服蝉花多糖25,50,100 mg/kg、1次/d、0.5 mL/次,试验期42 d。结果显示,E组28日龄体质量显著高于A～C组(P<0.05),42日龄体质量显著高于B、C组(P<0.05);E组8～28日龄平均日增体质量(ADG)显著高于B、C组(P<0.05),料重比(F/G)显著优于A～C组(P<0.05);29～42日龄E、F组ADG显著高于C组(P<0.05),D组F/G显著低于C组(P<0.05);E组全期ADG高于其余各组且显著高于B组(P<0.05),D、F组全期F/G显著低于C组(P<0.05);D、E组血清中T-AOC、SOD含量显著高于A、C组(P<0.05),GSH-Px含量显著高于A～C组(P<0.05);E、F组的α、β多样性,Shannon指数较B、C组降低,表明蝉花多糖对雁荡麻鸡肠道菌群有一定影响;在属水平上,E、F组拟杆菌属较B、C组有增加,E组粪杆菌属较C组有增加;Lefse分析在E组中富集的菌群有拟杆菌属(Bacteroides)、拟杆菌科(Bacteroidaceae)、梭菌属(Fusobacterium),F组富集的菌群有巨单胞菌属(Megamonas)、Negativicutes纲、Selenomonadales目、韦荣菌科(Veillonellaceae);通过KEGG代谢通路途径差异分析,E组中的免疫系统、环境适应等通路,F组中核苷酸代谢、消化系统通路均与C组存在显著性差异。由此可见,蝉花多糖能提高雁荡麻鸡体质量、平均日增体质量,降低料重比,并提高雁荡麻鸡血清抗氧化水平,在一定程度上能影响鸡肠道微生物菌群多样性。本试验条件下,蝉花多糖灌服剂量为50 mg/kg时效果较佳。
2021年06期 v.41;No.294 1118-1126页 [查看摘要][在线阅读][下载 2949K] [下载次数：690 ] |[网刊下载次数：0 ] |[引用频次：17 ] |[阅读次数：0 ] - 崔宇擎;卢春雨;刘依山;靳国忠;郭艺伟;史万玉;包永占;张晓东;
本试验研究了饲粮中分别添加0(MC),250(MD),500(MZ),750 g/t(MG)中药复合小肽(compound small peptide of chinese medicine, CSPCM)对爱拔益佳肉鸡小肠形态和盲肠菌群的影响,并与现有饲料添加剂酶制剂(MM)和微生态制剂(MS)的效果进行对比。结果显示,在饲粮中添加500,750 g/t中药复合小肽能够增加十二指肠和空肠绒毛长度和绒毛长度与隐窝深度比值(P<0.05)。在饲粮中添加750 g/t中药复合小肽能提高可操作分类单元数(operational taxonomic units, OTUs)(P<0.05)。MD组的盲肠粪杆菌属(Faecalibacterium)含量显著低于MC组(P<0.05);MD、MZ、MG、MS和MM组的盲肠乳酸杆菌属(Lactobacillus)含量高于MC组(P>0.05)。在MG组中具有丰度差异的微生物类群是β-变形菌门(Betaproteobacteria)、黄杆菌纲(Flavobacteriia)、伯克霍尔德菌目(Burkholderiales)、黄杆菌目(Flavobacteriales)和黄杆菌科(Flavobacteriaceae)。在MM组中具有丰度差异的微生物类群是艰难杆菌科(Mogibacteriaceae)。21日龄各组体质量无显著性差异;42日龄MD组的体质量显著高于MC和MS组(P<0.05),MZ和MG组的体质量显著高于MC、MM和MS组(P<0.05)。结果表明,在饲料中添加中、高剂量的CSPCM可提高十二指肠和空肠的绒毛长度、绒毛长度与隐窝深度比值和盲肠内有益菌含量。低剂量的CSPCM可增加盲肠内拟杆菌门菌群丰度。在饲料中添加CSPCM能够改善盲肠菌群。在饲料中添加750 g/t CSPCM对促进肉鸡小肠发育从而达到提高生产性能的效果是最好的,并且效果优于微生态制剂和酶制剂。
2021年06期 v.41;No.294 1127-1134页 [查看摘要][在线阅读][下载 11061K] [下载次数：526 ] |[网刊下载次数：0 ] |[引用频次：14 ] |[阅读次数：0 ] - 郑谋凤;余紫薇;马田宁;祝徐航;姜胜;宋泉江;周彬;李鼎;顾垚;王晓杜;宋厚辉;邵春艳;
为研究日粮中不同水平的高羊毛氨酸硒(SeHLan)对幼龄比格犬抗氧化指标和机体免疫应答的影响,本试验选用25只3月龄比格犬,随机分为空白组、疫苗组和3个SeHLan添加组,SeHLan添加组在接种狂犬病疫苗的同时,分别在基础日粮中添加不同剂量的SeHLan(0.35,1.00,2.00 mg/kg),并分别在接种狂犬病疫苗后0,3,7,14,21,28,35 d采集血清,测定犬血清硒含量、GSH-Px和SOD活力、MDA含量以及狂犬病抗体IgG滴度。结果显示:SeHLan添加组的GSH-Px、SOD活性显著高于同期空白组和疫苗组(P<0.05),MDA含量均极显著低于同期空白组和疫苗组(P<0.01);SeHLan添加组(1.00 mg/kg)狂犬病抗体IgG水平显著高于疫苗组(P<0.05)。因此,日粮中添加1.00 mg/kg的SeHLan可提高幼龄比格犬抗氧化能力与狂犬病疫苗免疫效果,本研究为SeHLan的临床应用提供数据支持。
2021年06期 v.41;No.294 1135-1139+1153页 [查看摘要][在线阅读][下载 586K] [下载次数：101 ] |[网刊下载次数：0 ] |[引用频次：1 ] |[阅读次数：0 ] - 陈奕静;戴鹏秀;张露文;李佳锴;张翊华;
为了建立永生化的犬骨髓间充质干细胞(cBMSCs)株,为其在基础研究方面的应用创造方便快捷的途径,本试验将构建好的pLOX-Ttag-iresTK慢病毒载体包装后感染cBMSCs,连续培养传至50代,通过细胞形态观察、细胞计数、RT-qPCR基因表达分析、Western blot、流式细胞术以及三系分化鉴定永生化cBMSCs。结果显示,永生化cBMSCs形态呈长梭状,生长曲线呈"S"型,且相对于野生型增殖较快,可成功表达SV40T;具有BMSCs特异性表面标志,并可诱导分化为成骨细胞、成软骨细胞和成脂肪细胞。因此,可以通过SV40来建立永生化细胞株,所得到的SV40-cBMSCs有较为良好的生长状态,其符合永生化细胞特征,为后续cBMSCs在试验研究方面的运用奠定基础。
2021年06期 v.41;No.294 1140-1145页 [查看摘要][在线阅读][下载 2268K] [下载次数：284 ] |[网刊下载次数：0 ] |[引用频次：3 ] |[阅读次数：0 ] - 向蓉;舒柄垚;高原;李亚晖;魏光伟;唐兴刚;郭伟干;罗胜军;
为了解牡荆提取物的主要化学成分及其体外抗氧化能力,运用超高效液相色谱-串联质谱(ultra performance liquid chromatography/tandem mass spectrometry, UPLC-MS)技术对牡荆醇提物和水提物进行分析,并对2种提取物进行1,1-二苯基-2-三硝基苯肼(1,1-diphenyl-2-picrylhydrazyl,DPPH)自由基清除能力评价。一级质谱数据显示在醇提物和水提物中共检测出77种化合物的信息,其中水提物和醇提物共有的化合物有44种,醇提物独有的22种,水提物独有的11种;结合二级质谱数据共确定了其中22种化合物的结构信息(醇提物21种,水提物19种),其中黄酮类化合物11种,酚酸类化合物8种,环烯醚萜类3种。DPPH自由基清除能力显示牡荆水提物强于牡荆醇提物,水提物IC_(50)值为生药质量浓度0.860 g/L。结果表明,牡荆含有丰富的化学成分,其水提物和醇提物均具有一定的抗氧化能力,可进一步进行体内试验,为在养殖业中进一步开发利用提供理论数据。
2021年06期 v.41;No.294 1146-1153页 [查看摘要][在线阅读][下载 1030K] [下载次数：410 ] |[网刊下载次数：0 ] |[引用频次：10 ] |[阅读次数：0 ]
- 李善政;叶幼荣;张笑冰;常振宇;
为研究低剂量多巴胺对藏鸡肾脏钠氯共转运体(NCC)穿梭的调节,本试验选取28日龄健康藏鸡50只,随机分为2组,试验组藏鸡静脉持续注射低剂量左旋多巴胺4 h(2～5μg·kg~(-1)·min~(-1)),对照组藏鸡静脉注射0.9%生理盐水,检测2组鸡只的平均动脉压(mPAP)和血清生化指标,并采用免疫组化、Western blot和RT-qPCR技术检测肾脏远曲小管NCC蛋白的表达以及mRNA的水平变化。结果表明,与对照组藏鸡相比,试验组藏鸡mPAP、肌酐(Cre)、尿素氮(BUN)和NCC mRNA的水平均未发生显著性变化(P>0.05),但NCC蛋白的表达水平在远曲小管上皮细胞胞膜上显著降低,胞质上显著升高(P<0.05)。由此推测低剂量多巴胺在不影响血压和肾小球滤过率的前提下,主要通过调控细胞膜NCC蛋白的瞬时穿梭引起利钠利尿作用机制。
2021年06期 v.41;No.294 1154-1158页 [查看摘要][在线阅读][下载 1421K] [下载次数：82 ] |[网刊下载次数：0 ] |[引用频次：1 ] |[阅读次数：0 ] - 王忠清;杨显朝;刘娟;
为探究不同党参炮制四君子汤(SJZD)对脾虚家兔治疗作用及机理,将50只健康家兔随机分为对照组、模型组、SJZD-Ⅰ组、SJZD-Ⅱ组和SJZD-Ⅲ组,每组10只;除对照组外,其余各组家兔用灌胃厚朴三物汤加饥饱失常法造脾虚模型。SJZD-Ⅰ、SJZD-Ⅱ和SJZD-Ⅲ组脾虚家兔分别用含党参、米党参和蜜党参的四君子汤治疗,采用ELISA法测定家兔血清中胃肠激素(GAS、MTL)、IL-2、IL-4、IFN-γ、cAMP和cGMP水平。结果显示,SJZD-Ⅰ、SJZD-Ⅱ和SJZD-Ⅲ组脾虚家兔的治愈率分别达到80%,80%和90%。与对照组相比,模型组家兔血清中GAS、MTL水平显著降低(P<0.05),IL-2、IFN-γ、cAMP水平及cAMP/cGMP比值极显著降低(P<0.01),IL-4水平显著升高(P<0.05),cGMP水平极显著升高(P<0.01)。与模型组相比,SJZD-Ⅰ、SJZD-Ⅱ、SJZD-Ⅲ组家兔血清中GAS水平显著升高(P<0.05),MTL、IL-2、IFN-γ、cAMP水平及cAMP/cGMP比值极显著升高(P<0.01),IL-4和cGMP水平有降低的趋势;其中SJZD-Ⅱ组家兔血清中IL-4和cGMP水平显著或极显著降低(P<0.05或P<0.01),SJZD-Ⅲ组家兔血清中cGMP水平显著降低(P<0.05)。综上所述,不同党参炮制四君子汤均能有效治疗家兔脾虚证,可能与调节胃肠激素(GAS、MTL)、免疫因子(IL-2、IFN-γ、IL-4)及cAMP/cGMP分泌紊乱有关。
2021年06期 v.41;No.294 1159-1164+1171页 [查看摘要][在线阅读][下载 1601K] [下载次数：310 ] |[网刊下载次数：0 ] |[引用频次：3 ] |[阅读次数：1 ]
- 崔建鑫;杨艳阳;乔娜;张卓炜;邓纪昌;黄坤玄;杨帆;李英;唐兆新;
本研究旨在探究高胎龄母猪妊娠后期饲粮缺钙和/或添加25-羟维生素D_3(25(OH)D_3)后对母猪和初生仔猪血清激素及抗氧化水平的影响。选用遗传背景相似的7胎龄母猪40头,妊娠85 d时,按照饲粮中钙含量及是否添加25(OH)D_3随机分为4组(对照组、低钙组、25(OH)D_3组、低钙+25(OH)D_3组),每组10个重复。母猪分别在妊娠85和114 d采集血液,仔猪于出生当天采集血液。结果表明:1)母猪及初生仔猪25(OH)D_3组血清中促红细胞生成素(EPO)含量显著高于对照组(P<0.05),同时低钙+25(OH)D_3组仔猪血清EPO含量显著低于低钙组和25(OH)D_3组(P<0.05)。2)低钙组母猪血清中甲状旁腺素(PTH)含量显著高于25(OH)D_3组和低钙+25(OH)D_3组(P<0.05),低钙组、25(OH)D_3组和低钙+25(OH)D_3组仔猪血清中PTH激素含量均显著高于对照组(P<0.05)。3)母猪血清皮质醇(Cor)在低钙+25(OH)D_3组含量最高,并显著高于25(OH)D_3组(P<0.05),仔猪Cor含量在25(OH)D_3组显著低于其他3个试验组(P<0.05)。4)25(OH)D_3组和低钙+25(OH)D_3组母猪和仔猪血清中的SOD、CAT活力显著高于对照组和低钙组(P<0.05)。5)母猪血清中,25(OH)D_3组和低钙+25(OH)D_3组的GSH-Px水平显著高于对照组和缺钙组。6)25(OH)D_3组和低钙组母猪血清中ROS水平显著低于对照组。综上所述,在攻胎饲粮中添加25(OH)D_3可以改善母猪和初生仔猪激素和抗氧化水平,有利于母猪产后恢复以及初生仔猪的生长发育。
2021年06期 v.41;No.294 1165-1171页 [查看摘要][在线阅读][下载 170K] [下载次数：126 ] |[网刊下载次数：0 ] |[引用频次：0 ] |[阅读次数：0 ] - 韩宇;张蒙;段佳慧;张学明;李子义;唐博;
5-羟色胺(5-hydroxytryptamine, 5-HT)是一种神经递质,广泛分布于哺乳动物的雌性生殖组织中,在细胞增殖、分化、卵母细胞成熟和胚胎发育等过程中起着至关重要的作用,但5-HT对猪胚胎发育的影响尚不清楚。本试验以猪孤雌激活胚胎为研究对象,利用荧光定量PCR、免疫荧光染色等技术,探讨5-HT对胚胎发育的影响。结果表明,5-HT处理可显著抑制猪孤雌胚胎的卵裂率及囊胚率,增加囊胚细胞凋亡数量,促进促凋亡基因BAX的表达,并影响H3K4me2及H3K4me3的表达。此外,5-HT处理可导致猪孤雌胚胎多能性基因NANOG显著下调,而SOX2显著上调。综上所述,5-HT在表观遗传水平可改变组蛋白甲基化,进而调控基因表达来影响猪孤雌胚胎发育。
2021年06期 v.41;No.294 1172-1178+1186页 [查看摘要][在线阅读][下载 4700K] [下载次数：137 ] |[网刊下载次数：0 ] |[引用频次：1 ] |[阅读次数：2 ] - 郭盼盼;闫妍;张军芳;金鑫;李香子;严昌国;尹云厚;
本试验旨在研究胰岛素和PPARγ激动因子对延边黄牛前脂肪细胞脂质代谢的影响。利用胶原酶消化法在无菌条件下分离获得延边黄牛原代脂肪细胞并进行体外培养,试验分为对照组(10 mg/L胰岛素)、IC组(10 mg/L胰岛素+10 mg/L环格列酮),IO组(10 mg/L胰岛素+100μmol/L油酸)和ICO组(10 mg/L胰岛素+10 mg/L环格列酮+100μmol/L油酸),通过油红O染色法、甘油三酯含量测定及实时荧光定量RT-PCR等方法检测诱导分化处理96 h后,脂滴生成情况以及对脂肪细胞分化相关的主要标志基因PPARγ、SCD、LPL、SREBP1和C/EBPβmRNA表达的影响。油红O染色和甘油三酯测定结果显示,各试验组均可促进脂滴的形成和甘油三酯的积累,且相比于对照组和IC组,添加胰岛素和油酸的处理可更有效地促进延边黄牛前脂肪细胞脂滴的形成和甘油三酯含量的积累。实时荧光定量PCR结果显示,胰岛素与环格列酮和油酸共处理可提高PPARγ、SCD、LPL和C/EBPβ的表达量,胰岛素与油酸共处理在提高PPARγ、 C/EBPβ和SREBP1基因mRNA表达量的同时,降低了SCD和LPL基因mRNA的表达,胰岛素与环格列酮共处理均显著提高了各基因mRNA的表达量(P<0.05)。试验结果为研究胰岛素、环格列酮和油酸三者互作效果在调节脂肪生成中的功能和分子机制提供了依据。
2021年06期 v.41;No.294 1179-1186页 [查看摘要][在线阅读][下载 3553K] [下载次数：135 ] |[网刊下载次数：0 ] |[引用频次：0 ] |[阅读次数：0 ] - 孟金柱;吴震洋;安清明;赵园园;
旨在探究牛卵巢大黄体细胞(LLCs)和颗粒细胞(GCs)之间的差异表达基因,筛选颗粒细胞黄体化密切相关的基因。在GEO数据库获得GSE83524芯片数据,通过R软件limma包中的DESeq2来筛选牛优势卵泡GCs和卵巢黄体LLCs中的差异表达基因;通过DAVID软件对获得的差异表达基因进行GO分析和KEGG信号通路分析;使用String软件构建差异表达基因之间的蛋白互作网络(PPI);将互作数据导入Cytoscape软件对差异表达基因进行可视化分析,同时利用软件自带Cyto-Hubba插件的MCC算法筛选连通度最大的前10位的关键基因;最后通过实时荧光定量PCR对筛选出的与GCs增殖及其黄体化相关基因进行验证。通过R软件limma包中的DESeq2分析后,在2种细胞中共获得242个差异表达基因,其中上调表达基因156个,下调表达基因86个;GO功能富集分析显示,生物学过程占46.97%,细胞组分占31.82%,分子功能占21.21%;KEGG共发现16条通路,其中FOXO信号通路与GCs的增殖、卵泡的发育、闭锁和黄体化密切相关。PPI网络互作分析,筛选出了10个连通度最大的关键基因;实时荧光定量PCR结果表明,PRLR、SPARCL1、INHA、GREB1、CYP19A1在LLCs和GCs中的表达趋势与GEO芯片数据结果一致,且PRLR在LLCs中的表达量极显著地高于GCs(P<0.01),SPARCL1在LLCs中的表达量显著高于GCs(P<0.05);GREB1、CYP19A1在GCs中的表达量极显著地高于LLCs(P<0.01),INHA在GCs中的表达量显著高于LLCs(P<0.05)。本研究推测这些基因在牛卵巢中对GCs黄体化起重要作用,为深入研究细胞特异性及GCs细胞向LLCs的分化机制奠定基础。
2021年06期 v.41;No.294 1187-1194页 [查看摘要][在线阅读][下载 5805K] [下载次数：233 ] |[网刊下载次数：0 ] |[引用频次：1 ] |[阅读次数：0 ]
- 朱文倩;张学明;
附睾是连接睾丸与输精管的高度卷曲管道,是精子成熟和储存的场所。睾丸输出的精子需在附睾中进行一系列形态结构和功能的变化,获得运动和受精的能力。附睾内精子成熟是高度程序化的过程,既有精子自身发育程序的继续作用,也受附睾中各因素的调控。因此,附睾结构及其功能研究在雄性生殖生物学中具有越来越重要的地位。现阐述附睾结构及其功能的最新研究进展,以提升人们对附睾精子成熟的认识,并对附睾源性雄性不育的诊断、治疗和生殖调控提供参考。
2021年06期 v.41;No.294 1195-1199+1209页 [查看摘要][在线阅读][下载 323K] [下载次数：457 ] |[网刊下载次数：0 ] |[引用频次：8 ] |[阅读次数：0 ] - 张慧;曹胜亮;刘思当;
近年来,慢病毒载体系统(lentivirus vector system)研究发展迅速,作为基因改造的有效手段在生命科学领域中得到广泛运用。该系统携带基因片段大,整合效率高,能够感染多种分裂期与非分裂期的细胞,实现基因在宿主体内的长期稳定表达。现就慢病毒载体系统的基本结构、发展历程以及临床应用等方面的研究情况进行综述,介绍该系统目前的发展和应用现状。
2021年06期 v.41;No.294 1200-1203+1218页 [查看摘要][在线阅读][下载 130K] [下载次数：1274 ] |[网刊下载次数：0 ] |[引用频次：20 ] |[阅读次数：1 ] - 胡志刚;曹俊婷;张建勤;张慧林;刘小林;
家养动物肌肉生长速度、肌肉产量和肉品质量直接决定着经济效益,因此骨骼肌发育的研究在畜牧业生产中很重要。miRNA是一类参与转录后基因沉默的非编码RNA,目前已证实miRNA在包括肌生成、胚胎肌肉生长和肥大等骨骼肌发育过程中具有重要作用。近些年来在畜禽等家养动物肌肉中,越来越多未知的miRNA及其下游靶基因被发现并鉴定,同时它们具体的调控机制和相关信号通路也逐渐被确定。现对miRNA在畜禽等家养动物肌肉生长发育中的作用进行了综述,为研究miRNA的相关功能及提高畜禽产肉量和肉品质提供参考。
2021年06期 v.41;No.294 1204-1209页 [查看摘要][在线阅读][下载 147K] [下载次数：564 ] |[网刊下载次数：0 ] |[引用频次：3 ] |[阅读次数：0 ] - 尹媛媛;何芳;赵光夫;李攀;李能章;彭远义;
多杀性巴氏杆菌是一种宿主嗜性广泛的人兽共患病原菌,常导致动物呼吸系统疾病、出血性败血症、人的蜂窝织炎和皮肤脓肿。拟对目前已被广泛研究和新发现的多杀性巴氏杆菌毒力因子做一综述,具体包括脂多糖(lipopolysaccharide, LPS)、荚膜(capsula)、外膜蛋白(outer membrane proteins, OMPs)、三聚体自转运蛋白、多杀性巴氏杆菌毒素(Pasteurella multocida toxin, PMT)、黏附相关因子、Ⅳ型菌毛(PtfA)、丝状血球凝集素蛋白(PfhB)、蛋白酶及其他,以期为多杀性巴氏杆菌致病机制及新型疫苗的研究提供参考。
2021年06期 v.41;No.294 1210-1218页 [查看摘要][在线阅读][下载 1842K] [下载次数：1303 ] |[网刊下载次数：0 ] |[引用频次：26 ] |[阅读次数：0 ] - 蓝莹;陈绵绵;程昌勇;宋厚辉;
单核细胞增多性李斯特菌(Listeria monocytogenes)是一种革兰阳性病原菌,是食源性李斯特菌病的病原体,在免疫力低下的人和动物中能够引起高死亡率。该菌致病的关键是其能在非吞噬细胞发生内化作用并在其中存活。内化素家族蛋白(internalins)在单增李斯特菌感染过程中起着至关重要的作用,该族蛋白是一组以N端有保守亮氨酸重复区(LRR)和信号肽为特征的蛋白。过去几十年里,内化素家族蛋白促进单增李斯特菌细胞侵袭和感染的分子基础已逐步阐明:细胞壁锚定内化素,如InlA和InlB,决定了单增李斯特菌黏附侵袭的建立;而分泌型内化素,如InlC,能够帮助单增李斯特菌在细胞间迁移,并逃避宿主的先天免疫。本综述中,总结了内化素蛋白促进单增李斯特菌感染的结构基础和生物学功能,这将有利于我们更好地理解食源性细菌胞内感染时内化素家族蛋白致病性的深层机制。
2021年06期 v.41;No.294 1219-1228页 [查看摘要][在线阅读][下载 1412K] [下载次数：368 ] |[网刊下载次数：0 ] |[引用频次：8 ] |[阅读次数：0 ] 下载本期数据