预防兽医学

  • 非洲猪瘟病毒MGF110-5-6L基因功能分析

    张柯慧;葛海亮;于少雄;李连峰;李素;仇华吉;

    非洲猪瘟(African swine fever, ASF)是由非洲猪瘟病毒(African swine fever virus, ASFV)感染猪只引起的一种高度接触性传染病,最急性型致死率可高达100%。ASFV结构非常复杂,编码超过160多种蛋白质,其中多基因家族(multigene families, MGFs)蛋白包括MGF100、MGF110、MGF300、MGF360和MGF505/530等,且MGF360和MGF505可抑制宿主干扰素(interferon, IFN)的产生以及影响ASFV的致病性。但关于MGF110家族相关基因的功能尚无报道,因此本研究选取了MGF110家族中MGF110-5-6L基因进行了相关功能的探究。应用同源重组技术构建了MGF110-5-6L基因缺失的突变体病毒(ASFV-ΔMGF110-5-6L),通过检测该突变体病毒在原代猪肺泡巨噬细胞(porcine alveolar macrophages, PAMs)中的复制水平来探究其在ASFV复制周期中的功能,结果表明,其复制动力学曲线与亲本病毒ASFV HLJ/2018(ASFV-WT)一致,说明缺失MGF110-5-6L基因不影响ASFV在PAMs中的复制。为了探究MGF110-5-6L蛋白在ASFV复制周期中的生物学功能,将ASFV-WT和ASFV-ΔMGF110-5-6L分别感染PAMs,在感染后4,12,20 h收集样品,进行转录组测序。结果显示,与ASFV-WT感染组相比,ASFV-ΔMGF110-5-6L感染组中差异表达基因主要为和IL-17信号通路、肿瘤坏死因子(TNF)信号通路以及细胞因子与细胞因子受体之间的相互作用相关。本研究构建了ASFV MGF110-5-6L基因缺失毒株,并通过转录组测序发现,MGF110-5-6L基因作为ASFV复制非必需基因具有拮抗细胞因子表达的功能,不仅为探究MGF110家族成员的生物学功能提供科学数据,还为深入揭示ASFV拮抗宿主细胞天然免疫反应的分子机制提供参考。

    2023年07期 v.43;No.319 1357-1365页 [查看摘要][在线阅读][下载 4692K]
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  • 猪繁殖与呼吸综合征类NADC30 PRRSV荧光定量RT-PCR检测方法的建立及应用

    魏春华;卢贵平;徐叶;刘辰;杨圆;何乐;戴爱玲;杨小燕;刘建奎;

    为快速检测美洲型猪繁殖与呼吸综合征病毒(PRRSV-2)并从中鉴别诊断NADC30-like PRRSV,根据PRRSV-2的ORF6基因及类NADC30的2个靶点Nsp9和ORF5基因片段分别设计3对特异性引物和探针,建立了一种三重荧光定量RT-PCR检测方法。结果显示,Ct值与标准品在1×10~9~1×10~1拷贝/μL范围内存在良好的线性关系,R~2均>0.990,最低检测浓度为10拷贝/μL;该方法特异性强,与其他基因亚型的PRRSV和其他主要猪源病毒无交叉反应;重复性分析结果显示,组内、组间变异系数均小于1%,呈现出良好重复性。应用建立的三重荧光定量RT-PCR检测方法对116份NADC30-like PRRSV样品进行检测,符合率为98.28%,对458份临床样品进行检测,2对引物单独使用时对NADC30-like PRRSV的检出率分别为36.03%(165/458)和32.3%(148/458),而2对引物同时使用时,NADC30-like PRRSV的检出率明显提高,为44.5%(204/458)。因此,本研究建立的三重荧光定量RT-PCR检测方法可用于PRRSV-2检测,可快速区分出NADC30-like PRRSV,可为PRRSV的防控提供技术支持。

    2023年07期 v.43;No.319 1366-1372页 [查看摘要][在线阅读][下载 3381K]
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  • 蓝舌病病毒NS4蛋白亚细胞定位对Ⅰ型干扰素应答的影响

    马鲜平;罗世美;蔡旭研;唐艺匀;陈畅昶;刘祎毅;杨义彬;卓晓静;张金阳;易华山;

    在前期仙台病毒诱导干扰素通路基因表达的研究基础上,通过免疫荧光及激光共聚焦显微镜观察,分析蓝舌病病毒(bluetongue virus, BTV)NS4蛋白在仙台病毒诱导下表达及亚细胞定位特征;通过双荧光素酶报告系统和ELISA方法分析NS4蛋白对Ⅰ型IFN-β启动子活性的影响,Western blot分析对NS4 IFN通路中MDA5、TRAF6和ISG15蛋白表达的影响。免疫荧光共聚焦显微镜观察及Western blot结果显示,发现在仙台病毒诱导下在HEK-293T细胞内转染pcDNA3.1-NS4-eGFP重组质粒48 h时发现强的绿色荧光信号,至72 h时绿色荧光信号主要集聚于细胞核内;Western blot分析结果显示在转染后的24,48及72h NS4蛋白的表达量呈时间依赖性上调表达,且在48和72 h抽提的细胞核蛋白中检测到大量的NS4重组蛋白;双荧光素酶报告系统试验显示NS4能显著抑制IFN-β启动子活性,ELISA结果显示NS4能显著抑制IFN-β蛋白的表达;Western blot分析干扰素信号通路MDA5、TRAF6及ISG15蛋白的表达,结果显示,NS4蛋白表达可下调SeV诱导的IFN信号通路中TRAF6、ISG15蛋白表达;灰度分析显示NS4表达极显著下调ISG15的表达。结果表明BTV NS4重组蛋白呈明显的核内定位特征,具有拮抗Ⅰ型IFN应答功能,为进一步研究BTV NS4蛋白拮抗宿主天然免疫应答的分子机制研究提供参考。

    2023年07期 v.43;No.319 1373-1380页 [查看摘要][在线阅读][下载 1538K]
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  • 表达H9N2 AIV双脯氨酸突变HA蛋白的基因Ⅶ型重组NDV的构建及鉴定

    谢文婷;徐婷;杨洁;陈瑞爱;

    构建表达H9N2亚型禽流感病毒(H9N2 subtype avian influenzavirus, H9N2 AIV)双脯氨酸突变的HA蛋白的基因Ⅶ型重组新城疫病毒(Newcastle disease virus, NDV),为NDV和H9N2 AIV新型二联疫苗的研发提供前期基础。通过对H9N2亚型AIV的HA基因进行分析,将其编码区第403位氨基酸由I突变为P以及第411位氨基酸由V突变为P,并利用反向遗传操作系统,将突变前与双脯氨酸突变的HA插入到基因Ⅶ型NDV病毒弱毒株rDHN3-mF基因组P基因与M基因之间的非编码区,经病毒拯救后获得重组病毒(rDHN3mF-HA/HA-2P)。通过Western blot试验证明重组病毒rDHN3mF-HA-2P可在DF1细胞内表达特异性HA蛋白,且与rDHN3mF-HA相比,经双脯氨酸突变后的HA蛋白表达水平更高。重组病毒rDHN3mF-HA-2P可以在鸡胚中稳定传代,与亲本毒株具有相似的复制特性,保留了rDHN3-mF株在鸡胚中高滴度复制、低致病性等生物学特性。本试验成功构建表达H9N2亚型AIV的双脯氨酸突变HA基因的重组病毒rDHN3mF-HA-2P,将为研发同时防控H9N2亚型AIV毒株和基因Ⅶ型NDV感染的新型高效、廉价多联疫苗奠定基础。

    2023年07期 v.43;No.319 1381-1387页 [查看摘要][在线阅读][下载 1433K]
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  • “新流腺”三联嵌合型病毒样颗粒疫苗的免疫效果评价

    冯嘉轩;李金斗;丁佳欣;陈凯楠;陈铭桦;邵亚男;郭春红;邹映雪;丁壮;

    为了评价“新流腺”三联嵌合型病毒样颗粒(ND-AI-FAdV4 cVLPs)的免疫保护效果,本试验将其定量免疫至7日龄SPF雏鸡中,通过血凝抑制试验、ELISA和淋巴细胞增殖检测ND-AI-FAdV4 cVLPs诱导的体液及细胞免疫,并进行攻毒试验评价ND-AI-FAdV4 cVLPs的攻毒保护能力。结果显示,ND-AI-FAdV4 cVLPs可诱导机体产生与NDV弱毒疫苗和AIV灭活疫苗相当的HI抗体效价及针对FAdV4 Fiber2蛋白的高水平特异性抗体,NDV、AIV和FAdV4灭活病毒的分别刺激可诱导ND-AI-FAdV4 cVLPs免疫组脾脏淋巴细胞发生活化及增殖;ND-AI-FAdV4 cVLPs免疫后可提供针对NDV强毒株NA-1株、AIV H9N2株及FAdV4强毒株攻击的有效保护,降低了病毒感染所造成的病理损伤,且缩短了体内病毒载量及体外排毒时间。本研究为ND-AI-FAdV4 cVLPs疫苗的应用奠定了基础,同时也为新城疫、禽流感和禽腺病毒病多联新型疫苗的研发提供了参考。

    2023年07期 v.43;No.319 1388-1394页 [查看摘要][在线阅读][下载 421K]
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  • H9N2亚型禽流感嵌合病毒样颗粒的免疫效果

    孙艺学;丛彦龙;李佳新;刘立军;

    病毒样颗粒(virus-like particles, VLPs)是近年来病毒性疫苗研制领域的热点之一。本研究对前期所构建的2种展示H9N2亚型禽流感病毒h9.4.2.5分支HA蛋白的VLPs,即VLP-M1和VLP-Gag的免疫效果进行了比较。结果显示,这2种VLPs均可以刺激商品肉鸡产生体液免疫和细胞免疫应答。在免疫剂量相同时,以小鼠白血病病毒Gag蛋白作为骨架制备的VLP-Gag的免疫保护效果优于VLP-M1,表明该嵌合型VLPs的构建策略具有广阔的研究前景,不仅能够为开发区分感染和免疫动物的标记疫苗提供技术支撑,而且也可以为响应我国绿色、安全、环保的养殖模式做技术储备。

    2023年07期 v.43;No.319 1395-1401页 [查看摘要][在线阅读][下载 2316K]
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  • 禽呼肠孤病毒分子信标LAMP检测方法的建立

    任红玉;谢芝勋;华俊;王盛;万丽军;谢丽基;谢志勤;黄娇玲;张艳芳;曾婷婷;罗思思;

    为了建立一种快速鉴别诊断禽呼肠孤病毒(avian reovirus, ARV)的分子信标环介导等温扩增(LAMP)检测方法,根据ARV S1基因序列的高保守区域设计1套LAMP引物,并取F1c和B1c之间的序列设计分子信标(在5′端标记Cy5荧光基团,3′端标记BHQ-3淬灭基团),通过实时浊度仪,并对反应体系和反应条件进行优化,试验结果通过多通道荧光成像仪进行观察,结果显示:ARV阳性样品在荧光成像仪下显示红色荧光,而其他几种病原样品无荧光显示,建立的ARV分子信标LAMP检测方法仅特异性扩增ARV,与其他几种禽类常见疾病无交叉反应;对ARV的最低检测值为10拷贝/μL;在对22份临床样品的检测中,结果与荧光定量PCR的检测结果一致,将阳性产物进行测序鉴定均为ARV阳性样品。研究建立的ARV分子信标LAMP检测方法,结果可视化,整个试验流程无需开盖,能有效避免气溶胶污染,真正做到了特异性强、灵敏性好、准确性高,可应用于ARV的临床检测。

    2023年07期 v.43;No.319 1402-1407页 [查看摘要][在线阅读][下载 293K]
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  • 鹅星状病毒SD株的分离鉴定、全基因组分析及致病性研究

    赵光伟;邓昕竹;王艳;杨晓伟;张立武;程方俊;

    为了解鹅痛风病致病原鹅星状病毒的主要生物学特性,本试验对山东某养殖场临床典型症状雏鹅进行病毒的分离、鉴定、全基因组测序分析及致病性试验。将患病鹅肝、肾等组织病料研磨接种11日龄健康鹅胚,连续传代,收集尿囊液进行鹅星状病毒的RT-PCR鉴定,并利用电镜对病毒粒子的形态进行观察;利用分段扩增法对分离毒株的全基因组进行扩增测序,并与国内外不同宿主源的星状病毒进行同源性分析、绘制系统进化树;分离毒株经口接种1日龄健康雏鹅,通过观察动物的临床表现、检测血清中尿酸含量以及主要脏器的病理变化对分离毒株的致病性进行分析。结果鹅胚连续传代6次后出现规律性死亡,RT-PCR检测及测序确定其为鹅星状病毒,命名为SD株,电镜观察到直径约30 nm的球状病毒粒子,与星状病毒形态一致;全基因测序发现SD株全长7 128 nt(GenBank登录号:OM937013),具有星状病毒典型的基因组结构,同源性分析显示SD株与鹅源星状病毒同源性在61.2%~98.9%之间,其中与HN03株同源性最高为98.9%,与AHAU3株和AHAU5株同源性为98.7%,而与FLX株的同源性只有61.2%,与除鹅源外禽星状病毒同源性在52.9%~67.5%之间,其中与鸭星状病毒的同源性在61.0%~65.6%之间;系统进化树显示SD株与所有的鹅星状病毒都在禽属星状病毒分支上,且与鸭星状病毒和火鸡星状病毒同源关系较近;致病性试验显示SD株能够复制出典型的临床症状,感染组动物发病率100%,死亡率60%,雏鹅血清中尿酸含量显著高于阴性对照组,组织病理学观察发现病死雏鹅肝脏、肾脏和脾脏均有不同程度的损伤和变性,提示SD株应为高致病力毒株。本试验结果可为开发鹅星状病毒的特异性疫苗或精制卵黄抗体等生物制品奠定前期基础。

    2023年07期 v.43;No.319 1408-1415页 [查看摘要][在线阅读][下载 7165K]
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  • 绵羊KLRG1生物信息学分析及多克隆抗体的制备

    王宝山;刘丽萍;潘婧;姚万玲;刘转霞;王雯慧;张旺东;

    旨在分析绵羊KLRG1(killer cell lectin like receptor G1)的生物学特性并制备其多克隆抗体。利用多种生物信息学分析工具,挖掘绵羊KLRG1的生物学功能。构建pET-28a-KLRG1重组质粒,通过大肠杆菌DH5α感受态细胞表达重组蛋白并免疫家兔制备多克隆抗体,通过ELISA检测抗体的效价、Western blot鉴定抗体反应原性、免疫组织化学鉴定抗体特异性。结果显示,绵羊KLRG1与山羊的遗传距离最近,与小鼠遗传距离最远。绵羊KLRG1的CDS区全长336 bp,编码111个氨基酸,相对分子质量为12 709.69 u,属碱性亲水性蛋白,无跨膜结构与信号肽,主要存在于细胞质内;二级结构预测与三级结构模型预测结果一致;磷酸化为主要修饰方式,与CDH1、INPP5D、CDH3、PTPN11、FCER1A、MS4A2、LYN、SYK和IL7R蛋白之间存在相互作用;重组表达蛋白具有良好的免疫原性,其抗体效价为1∶128 000,且具有与重组蛋白特异性结合的能力,免疫组织化学染色表明抗体在1∶1 200时具有良好的特异反应性并能用于KLRG1的检测。提示绵羊KLRG1可通过磷酸化作用活化ITIM基序发挥以免疫抑制为核心的多种生物学功能,且该功能的发挥依赖其内环境如pH等的稳定;通过重组蛋白制备的多克隆抗体具有特异性识别表达KLRG1受体阳性细胞的能力。这为进一步研究KLRG1在绵羊免疫抑制效应中的作用机制提供了依据。

    2023年07期 v.43;No.319 1416-1423页 [查看摘要][在线阅读][下载 5516K]
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  • 小亚璃眼蜱FER1基因的克隆表达及抗蜱效果

    何文文;伍军;刘燕;李才善;甘露;郑会珍;史倩云;呼尔查;巴音查汗;

    为挖掘抗蜱候选疫苗抗原,对蜱虫进行安全有效的防控。本研究旨在对小亚璃眼蜱(Hyalomma anatolicum anatolicum)铁蛋白1(H.anatolicum ferritin1,HanFER1)基因进行生物信息学预测及分析,使用克隆技术和原核表达系统表达HanFER1,通过镍柱纯化法获取高纯度HanFER1,并对其进行模式动物免疫抗蜱试验。提取小亚璃眼蜱总RNA并反转录为cDNA,构建克隆载体pMD19-T-FER1和系统进化树,通过生物信息学分析其B细胞抗原性表位、跨膜区结构、亲疏水性、蛋白理化特性、信号肽和亚细胞定位;构建表达载体pET-28a-FER1,用His-Bind亲和层析柱获得纯化蛋白;使用rHanFER1免疫家兔,制备多克隆抗体,Western blot检测其免疫原性,用ELISA检测其抗体效价,待抗体效价升高后开展攻蜱试验。本试验中的小亚璃眼蜱FER1氨基酸序列与印度的小亚璃眼蜱(序列号:AFQ98383.1)为一支,且亲缘关系最近,相似达到约99%。B细胞线性抗原表位显示有较好的抗原性,该基因编码172个氨基酸,分子式为C_(878)H_(1 357)N_(237)O_(275)S_9,相对分子质量为19.92 ku。理论等电点(pI)为5.13,为酸性蛋白;HanFER1蛋白无跨膜区信号肽;抗原性很高,为亲水性蛋白,并且HanFER1主要存在于细胞质(56.5%),其余分布在细胞核(26.1%)、线粒体(13.0%)。使用克隆技术克隆出了HanFER1基因片段长度为509 bp,成功构建了原核表达载体pET-28a-Ha-FER1,并经His-Bind镍柱亲和层析获得纯化HanFER1蛋白,FER1蛋白大小为25 ku,并且蛋白在浓度为0.8 mmol/L、最适温度为37℃的条件下诱导7 h左右表达量最高。Western blot结果显示该蛋白具有一定的免疫原性。ELISA结果显示rHanFER1免疫家兔的抗体效价为1∶12 800,rHanFER1蛋白免疫后总的抗蜱效果为73.43%,对小亚璃眼蜱的平均饱血蜱重、平均卵重及平均卵孵化率的抑制率分别为11.7%,23.0%和55.0%。本研究通过生物信息学分析、重组蛋白表达、血清学试验及抗蜱试验,发现HanFER1具有抗蜱疫苗候选抗原潜力,为HanFER1的功能研究奠定了基础。

    2023年07期 v.43;No.319 1424-1433页 [查看摘要][在线阅读][下载 5274K]
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人兽共患病

  • 鼠伤寒沙门菌伴侣蛋白Hfq与oppA mRNA 5′ UTR结合位点的预测与验证分析

    张家莉;潘永;杨阳;令狐远凤;杨琦;

    OppA与鼠伤寒沙门菌氨基酸和肽的摄取有着重要的关系,oppA mRNA是已验证受Hfq伴侣蛋白依赖型小RNA GcvB转录后调控的靶标,GcvB与oppA mRNA的作用机制已经确认,但Hfq与oppA mRNA之间的互作机制尚未明确。为明确Hfq与oppA mRNA潜在的作用位点,分析Hfq与oppA mRNA (ARN)n基序的作用关系。本研究利用5′-RACE验证oppA mRNA转录起始位点和oppA mRNA 5′UTR,使用Mfold软件预测oppA mRNA部分序列的二级结构并根据(ARN)_n基序的特征筛查oppA mRNA 5′UTR的ARN基序,利用λ-Red同源重组技术构建oppA mRNA不同(ARN)n基序敲除和突变的lacZ基因融合菌株,通过qRT-PCR试验和β-半乳糖苷酶试验的检测oppA的转录水平和蛋白表达量的变化。经验证oppA mRNA 5′UTR长度为159 bp,在oppA mRNA 5′UTR中预测到2个Hfq结合偏好型基序ARN-1和ARN-2。对ARN-1和ARN-2基序分别或同时敲除或点突变,oppA mRNA的转录水平和蛋白水平的变化呈现相似的结果。与Western blot相比,oppA基因转录和蛋白水平总体呈下调趋势。综上所述,经预测的ARN-1和ARN-2基序与Hfq转录后负调控oppA mRNA的作用机制无明显的关联,推测其为oppA mRNA翻译所需元件。

    2023年07期 v.43;No.319 1434-1441+1449页 [查看摘要][在线阅读][下载 4349K]
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  • 沙门菌H:t抗原表位单克隆抗体的制备及初步应用

    尚月月;丁睿清;曹李妍;徐双媛;胡凌芸;宋丽;康喜龙;焦新安;孟闯;潘志明;

    山夫顿堡沙门菌、加利福尼亚沙门菌、奥拉宁堡沙门菌等含有H:t表位的血清型沙门菌具有较广泛的流行性和致病性,研制特异性识别H:t表位的单克隆抗体可为这些血清型沙门菌的快速、高效检测提供重要生物材料。本研究选用奥拉宁堡沙门菌鞭毛蛋白作为免疫原,通过经典B细胞杂交瘤技术筛选制备特异性识别沙门菌H:t抗原表位单克隆抗体,利用间接ELISA、Western blot方法对其亚型、效价、亲和力、特异性等生物学特性进行分析。结果显示,筛选获得2株单抗并命名为4H4和5G10,其亚型均为IgG1,其中4H4单抗的细胞培养上清效价达2.0×10~5,腹水效价达1.0×10~7,亲和力为2.04×10~(10) mol/L。Western blot分析显示4H4单抗与含H:t抗原表位的奥拉宁堡沙门菌、山夫顿堡沙门菌、加利福尼亚沙门菌特异性反应,而与不含H:t抗原表位的沙门菌和非沙门菌不反应。将该单抗用于鸡肉模拟污染样品中沙门菌的ELISA检测,能够检测出含H:t表位的血清型沙门菌,而不含H:t表位的沙门菌和非沙门菌均为阴性。本研究制备了沙门菌H:t抗原表位特异性单抗,可应用于ELISA检测含H:t表位的沙门菌造成的食品污染,为建立特定血清型沙门菌相关免疫学检测方法提供了重要材料基础。

    2023年07期 v.43;No.319 1442-1449页 [查看摘要][在线阅读][下载 1210K]
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基础兽医学

  • 番茄红素通过调控p-STAT3缓解慢性应激致大鼠脾脏损伤

    赵元;张久妍;张依萌;谭皓阳;杨天元;陈永平;范宏刚;

    旨在探究番茄红素(lycopene, LYC)对慢性应激大鼠脾脏损伤的保护作用。选用30只体质量为180~220 g的雄性Wistar大鼠,按照试验要求随机分为3组,每组10只,分别为空白对照组(C组)、慢性应激组(CS组)、LYC干预组(CS+LYC组),其中CS组和LYC组大鼠每日9:00-15:00束缚于大鼠固定器中6 h。所有大鼠在9:00-15:00禁食禁水,余下时间各组自由采食饮水,饲养时间为21 d。第22天进行旷场试验对大鼠进行行为学检测。之后剖取脾脏,HE染色观察脾脏病理变化,TUNEL染色检测脾脏凋亡,Western blot法检测大鼠脾脏Cleaved Caspase-3、p-STAT3及STAT3蛋白表达。结果表明,与C组相比,CS组大鼠探索行为下降,出现抑郁样行为,脾脏典型组织结构不完整、白髓萎缩,边缘区部分消失,TUNEL染色表明凋亡显著增高(P<0.01),Cleaved Caspase-3和P-STAT3相对表达量显著升高(P<0.01)。LYC组大鼠与CS组相比脾脏组织未见明显病变,结构清晰完整,TUNEL染色中凋亡显著下降(P<0.01),脾脏p-STAT3的表达量明显升高(P<0.01),而Cleaved caspase-3表达量显著降低了(P<0.01)。结果提示,番茄红素可以缓解慢性应激大鼠脾脏组织损伤。

    2023年07期 v.43;No.319 1450-1455页 [查看摘要][在线阅读][下载 4529K]
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  • ACAC通过mTOR信号通路抑制自噬诱导奶牛乳腺上皮细胞氧化应激

    高爽;宋倩;董昊;孙旭东;徐闯;

    旨在探究乙酰乙酸(acetoacetic acid, ACAC)是否通过抑制mTOR信号通路介导的自噬诱导奶牛乳腺上皮细胞发生氧化应激。用不同浓度的ACAC(0,0.6,1.2或1.8 mmol/L)处理奶牛乳腺上皮细胞系(MAC-T)24 h;用2.5μmol/L的雷帕霉素(rapamycin, RAPA)预处理MAC-T 24 h后加入1.2 mmol/L ACAC处理24 h。使用试剂盒检测活性氧(reactive oxygen species, ROS)含量及超氧化物歧化酶(superoxide dismutase, SOD)的活性,采用蛋白质免疫印迹法测定mTOR、p-mTOR、LC3-Ⅱ及p62的蛋白表达情况,通过q-PCR对自噬相关因子5(autophagy related 5 homolog, ATG5)和自噬相关因子7(autophagy related 7 homolog, ATG7)的基因表达水平进行定量分析。结果显示,与0 mmol/L ACAC组相比,不同浓度ACAC处理后,ROS的含量呈浓度依赖性升高,SOD的活性逐渐下降,p-mTOR/mTOR蛋白表达量显著升高,而ATG5、ATG7的基因表达水平显著降低。与ACAC+DMSO组相比,ACAC+RAPA组的p-mTOR/mTOR及p62蛋白表达量显著降低,而LC3-Ⅱ蛋白表达量显著升高,ATG5、ATG7的基因表达水平显著升高。此外,与ACAC+DMSO组相比,ACAC+RAPA组的ROS含量显著降低,SOD活性显著升高。结果表明,ACAC通过抑制mTOR信号通路介导的自噬诱导了奶牛乳腺上皮细胞氧化应激。因此,mTOR介导的自噬可能是缓解代谢应激导致奶牛乳腺上皮细胞氧化应激的防治靶点。

    2023年07期 v.43;No.319 1456-1462页 [查看摘要][在线阅读][下载 1298K]
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  • 长链脂酰辅酶A合成酶抑制剂Triacsin C作用下小鼠肝脏组织的转录组分析

    朱桓奕;吴迪;赵自亮;王俊;段司琛;杨晓伟;赵光伟;

    为深入了解长链脂酰辅酶A合成酶抑制剂Triacsin C对小鼠肝脏的影响,本试验将0.1 mL 80 mg/L Triacsin C灌服小鼠,连续3 d,同时设立阴性对照组(仅灌服无菌生理盐水),而后分别取小鼠肝脏组织进行高通量转录组测序,筛选表达差异基因,并利用荧光定量PCR方法对差异基因进行验证,进而利用GO和KEGG数据库对其进行注释和通路富集分析。结果显示,共筛选获得39个差异显著表达基因,与对照组相比有26个显著上调,13个显著下调,RT-qPCR方法随机验证6个基因的表达情况,均与转录组测序结果一致;GO分析显示,差异基因主要集中在长链脂肪酸分解、脂肪酸衍生物分解、甾醇代谢和脂质分解等生物过程中;KEGG分析显示差异基因在脂肪酸延伸、脂肪酸代谢、代谢途径、初级胆汁酸的生物合成以及泛酸和CoA生物合成等途径最为富集,在脂肪酸延伸过程中显著上调的主要是Acot家族基因,显著下调主要是Elovl家族基因;而在脂肪酸降解过程中显著上调的主要是Acaa家族基因。综上,本试验结果对深入了解Triacsin C的作用机制及药物靶点的筛选具有重要价值,为兽用药物开发奠定了前期基础。

    2023年07期 v.43;No.319 1463-1470页 [查看摘要][在线阅读][下载 3636K]
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  • 绵羊TGF-β1在临床型乳腺炎乳腺组织中的表达

    马克岩;尹德恩;马友记;

    转化生长因子β1受体(transforming growth factor-β 1,TGF-β1)是CD14单核细胞中的生存因子,当TGF-β1缺失时CD14单核细胞迅速执行凋亡程序。然而,目前有关TGF-β1基因在绵羊乳腺炎发生过程中的调控机制尚不清楚。为研究TGF-β1基因在患临床型乳房炎绵羊乳腺组织中的表达差异,本试验使用NCBI网站已公布的绵羊TGF-β1基因CDS序列,运用生物信息学分析方法对该基因生物学特征进行预测。通过qRT-PCR、Western blot检测健康和临床型乳腺炎绵羊乳腺组织中TGF-β1 mRNA及蛋白的表达,并使用免疫组织化学染色确定该蛋白在绵羊乳腺组织内分布情况。生物信息学分析结果表明,绵羊TGF-β1蛋白为疏水性不稳定蛋白,属于分泌蛋白,不同物种间保守性较高。qRT-PCR与蛋白免疫印迹结果显示,在健康和临床型乳腺炎乳腺组织中均存在TGF-β1基因的表达,且TGF-β1 mRNA与蛋白相对表达量均极显著(P<0.01)高于健康组。免疫组织化学结果显示,TGF-β1蛋白在临床型乳腺炎乳腺组织中均强烈表达于基质细胞和乳腺上皮细胞。由此推测可能是由于TGF-β1基因表达上调,导致患临床型乳腺炎乳腺组织中基质细胞与乳腺上皮细胞中炎症反应加剧。这为进一步研究TGF-β1基因在绵羊乳腺炎发病机制中的调控作用提供基础信息。

    2023年07期 v.43;No.319 1471-1477页 [查看摘要][在线阅读][下载 4078K]
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  • 干扰CIDEA基因抑制牦牛皮下脂肪细胞的脂滴积累

    何婉婷;李昕邈;央金卓玛;郑豫;虎翰卓;霍文韬;熊燕;

    旨在明确CIDEA基因在牦牛皮下脂肪细胞中的表达模式,并阐明其对皮下脂肪细胞脂滴积累的影响,为进一步研究CIDEA基因对牦牛皮下脂肪细胞脂代谢作用机制提供基础数据。本研究以金川牦牛为试验对象,使用siRNA介导的干扰技术作用于CIDEA基因后,检测其干扰效率;通过观察皮下脂肪细胞的脂滴积累和检测脂代谢相关基因表达,明确该基因对皮下脂肪细胞脂滴积聚的影响。结果表明,干扰牦牛CIDEA基因后其脂滴的积聚显著降低,油红O染料萃取后的D值显著下降,且干扰后脂代谢相关基因C/EBPα、FAS均显著下调,ATGL表达水平显著上调,表明CIDEA基因参与牦牛脂肪组织沉积与代谢。

    2023年07期 v.43;No.319 1478-1483页 [查看摘要][在线阅读][下载 1557K]
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临床兽医学

  • 不同程度霉变饲料对肉兔肾脏功能的影响

    窦萌萌;张璐;王新芳;张迪;包永占;陈宝江;史万玉;

    旨在探讨不同程度霉变饲料对肉兔肾脏的损伤作用。将80只30日龄的新西兰肉兔,随机分为4组,每组20只。空白组饲喂基础日粮,试验组饲料中正常玉米用不同比例的霉变玉米代替,低剂量组(5%霉变玉米+10%正常玉米),中剂量组(10%霉变玉米+5%正常玉米),高剂量组(15%霉变玉米+0%正常玉米)。试验前ELISA法检测饲料中AFB_1、ZEN、DON含量。饲喂21 d后,心脏采血、随取肾脏。HE染色观察肾组织病理学变化;ELISA法检测肾组织中TNF-α、IL-6、IL-8、IL-1β水平;生化试剂盒检测血清中BUN、Cr、UA以及肾组织中MDA、NO、T-AOC、CAT、GSH-Px含量;qPCR检测TLR4、MyD88、NF-κB、TNF-α、IL-6、IL-1βmRNA相对表达量。结果显示,空白组与低剂量组霉菌毒素未超标,中剂量组AFB_1超标,高剂量组AFB_1、ZEN超标。与空白组相比,中、高剂量组肾指数显著降低(P<0.05);中、高剂量组血清中BUN、UA、Cr及肾组织中TNF-α、IL-6、IL-1β、IL-8、MDA、NO含量显著升高(P<0.05);中、高剂量组肾组织中CAT、GSH-Px、T-AOC含量显著降低(P<0.05);除中剂量组MyD88 mRNA相对表达量无显著升高(P>0.05)外,中、高剂量组肾组织中TLR4、NF-κB、TNF-α、IL-6、IL-1βmRNA水平显著升高(P<0.05)。结果表明,肉兔采食霉变饲料会引起肾脏氧化损伤,并能加速炎症因子的释放。

    2023年07期 v.43;No.319 1484-1490页 [查看摘要][在线阅读][下载 2598K]
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  • PTGER2激活对奶牛子宫内膜组织中生长因子表达的影响

    冯爽;赵佳敏;巩志国;刘博;张双翼;

    为了探索并分析用布他前列素(butaprost)激活前列腺素E_2(PGE_2)受体2(PTGER2)后对奶牛子宫内膜组织中参与组织修复过程的生长因子表达的影响,本试验分离并体外培养了奶牛子宫内膜组织,用不同终浓度(10~(-9)~10~(-5)mol/L)的PTGER2激动剂布他前列素处理,分别在相应处理后的时间点(2,4,8,12,18,24,36或48 h)提取组织mRNA和总蛋白,通过实时荧光定量PCR和Westernblot分析奶牛子宫内膜组织中结缔组织生长因子(connective tissue growth factor, CTGF)、成纤维细胞生长因子-2(fibroblast growth factor 2,FGF-2)、转化生长因子-β1(transforming growth factor β1,TGF-β1)、血管内皮生长因子A(vascular endothelial growth factor A,VEGFA)、增殖细胞核抗原(proliferating cell nuclear antigen, PCNA)、细胞角蛋白18(cytokeratin 18,CK-18)和成纤维细胞特异蛋白1(fibroblast-specific protein 1,FSP-1)的表达情况。结果表明,终浓度为10~(-7)mol/L的布他前列素可在不同处理时间点诱导奶牛子宫内膜组织中CTGF、FGF-2、TGF-β1和VEGFA mRNA和蛋白的表达量显著升高(P<0.05)。此外,在使用布他前列素激活PTGER2后,奶牛子宫内膜组织中PCNA、CK-18和FSP-1表达水平也出现显著上调(P<0.05),说明PTGER2的激活可能诱导组织中上皮细胞和成纤维细胞的增殖。上述结果说明,PTGER2的激活可能对奶牛子宫内膜组织的修复具有一定促进作用。

    2023年07期 v.43;No.319 1491-1496+1505页 [查看摘要][在线阅读][下载 1968K]
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  • 益母草碱对小鼠产后子宫复旧不全子宫Bax、Bcl-2表达的影响

    王风华;贾倩倩;武文英;胡映红;尹雪婷;陈建国;

    奶牛产后子宫内膜炎可导致子宫复旧延迟,从而导致繁殖性能下降。试验旨在探讨益母草碱对产后子宫复旧不全的影响以及细胞凋亡相关基因及蛋白的表达情况,为益母草碱治疗母畜产后子宫复旧不全提供新的思路和理论支持。研究通过对60只产后小鼠子宫灌注LPS建立子宫复旧不全模型,并分别给予不同浓度的益母草碱(0.5,1.5,4.5 mg/kg)处理1或3 d。病理切片发现,LPS能导致子宫内膜上皮的延迟更新、子宫腺扩张,影响血流状态等,出现一定程度的子宫复旧不全;益母草碱治疗后,充血、出血减轻,炎性细胞浸润减少,且呈剂量依赖性。Real-time PCR法检测细胞凋亡相关基因Bax和Bcl-2的表达,研究发现模型组Bax表达上升,益母草碱处理后表达下降,且呈剂量依赖性;模型组Bcl-2表达下降,益母草碱处理后表达上升。免疫印迹检测相关蛋白表达水平变化,发现模型组Bax表达增加、Bcl-2表达减少,益母草碱处理后Bax表达减少,Bcl-2表达增加。结果表明,益母草碱通过对Bax、Bcl-2的调控,抑制子宫内膜细胞的凋亡,促进产后子宫复旧。

    2023年07期 v.43;No.319 1497-1505页 [查看摘要][在线阅读][下载 6167K]
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  • 奶牛子宫内膜上皮细胞α7nAChR 经由JAK2/STAT3信号通路抑制炎性反应机制

    李微微;高瑞峰;张剑柄;陈灰;贺鹏飞;

    旨在探究BEEC α7nAChR经由JAK2/STAT3信号通路调控炎症反应机制。应用间接免疫荧光技术鉴定BEEC α7nAChR的表达;α7nAChR非特异激动剂烟碱、特异激动剂PUN282987及特异性抑制剂MLA预处理BEEC后使用终浓度0.1 mg/L LPS刺激BEEC,ELISA检测IL-6、IL-8、IL-10分泌水平;Western blot检测α7nAChR、JAK2、P-JAK2、STAT3和P-STAT3的表达水平。PUN282987及烟碱显著抑制IL-6、IL-8的分泌,促进IL-10的分泌,MLA可拮抗上述效应;PUN282987显著上调STAT3磷酸化水平,α7nAChR表达水平与STAT3磷酸化水平则呈负相关,烟碱显著抑制STAT3磷酸化,α7nAChR表达水平与STAT3磷酸化水平呈正相关;α7nAChR激动剂对JAK2磷酸化水平无显著影响。结果表明:激活BEEC α7nAChR通过调控STAT3磷酸化、抑制促炎细胞因子分泌和促进抗炎因子分泌进而抑制炎症反应,BEEC α7nAChR是防治奶牛子宫内膜炎潜在靶点。研究表明PUN282987与烟碱调控STAT3磷酸化及α7nAChR表达均存在药理学差异,而在其他有关BEEC或α7nAChR的研究中暂未见报道。

    2023年07期 v.43;No.319 1506-1512页 [查看摘要][在线阅读][下载 1659K]
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动物科学

  • 精液生产中温度管理对猪精子质量的影响

    李军伟;黄古月;赵文明;朱家桥;鞠辉明;王帅彪;戴久丽;贾慧言;陈淑芳;刘宗平;

    为研究精液生产中温度管理对猪精子质量的影响及机制,将采集后的猪精液样品等分成3份并分别于17℃(对照组)、22℃(公猪站实验室温度)和37℃(用于稀释液预温的水浴锅温度)下保存24 h。在0,6,18和24 h分别取样检测猪精子活率、活力、精子质膜和顶体膜完整性、细胞内ROS水平及精子凋亡率。在保存24 h后取样检测精子p-AMPKα、LKB-1、CaMKKβ、Bax、Bcl-2、Hsp70和Hsp90蛋白表达量。结果表明,与17℃相比,22℃下保存精子活率和活力在24 h后显著下降(P<0.05)。与17℃和22℃相比,37℃下保存精子各质量参数均显著下降(P<0.05)且出现质量损伤的时间更早,细胞内ROS水平显著升高(P<0.01),保存18 h后精子早期凋亡水平显著降低(P<0.05)而晚期凋亡水平显著升高(P<0.05)。与17℃和37℃相比,22℃保存24 h后精子p-AMPKα水平显著升高(P<0.05)。与17℃和22℃相比,37℃保存24 h后AMPK上游激酶LKB-1和CaMKKβ的表达量显著降低(P<0.05),凋亡蛋白Bcl-2、Bax和Caspase-3及热休克蛋白Hsp70表达量显著下降(P<0.05)。综合以上结果,精液生产过程中17~22℃下保存不会显著影响猪精子质量,精子通过LKB-1途径激活AMPK调节凋亡和热休克蛋白的表达来应答温度的升高。37℃下保存促进了精子早期凋亡向晚期凋亡的转化,破坏了精子的调节机制,不利于精子的存活。

    2023年07期 v.43;No.319 1513-1519页 [查看摘要][在线阅读][下载 2334K]
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  • 褪黑素对奶山羊精液低温冷藏的影响

    曹旭阳;黄敏;杨汉文;陈彦至;马宏伟;康健;张涌;权富生;

    低温贮藏过程中会产生活性氧,损害精子特性和受精能力。褪黑素是一种强抗氧化剂,在稀释液中加入一定浓度的褪黑素可以保护精子免受活性氧的损害。因此,本试验评估了在稀释液中添加褪黑激素是否能改善奶山羊精子在4℃冷藏期间的质量。在稀释液中加入不同浓度的褪黑激素(0,0.05,0.10,0.20,0.40 mmol/L),分析各组精子活力、顶体状态、质膜完整性、线粒体活性等精子质量的差异。同时,研究在稀释液中加入褪黑激素是否能增强精子冷藏(4℃)后体外受精胚胎发育的潜力。结果表明,贮藏96 h后,0.05和0.10 mmol/L组精子活力率、顶体完整性率、线粒体活性和质膜完整性率均显著高于对照组(P<0.05),其中0.10 mmol/L组效果最好。0.40 mmol/L组效果最差,不利于精子保存。体外受精试验发现,与对照组相比,褪黑激素处理组的卵裂率和囊胚率明显提高。结果表明,0.10 mmol/L褪黑素的添加提高了精子质量,有利于4℃条件下奶山羊精液的保存。

    2023年07期 v.43;No.319 1520-1527页 [查看摘要][在线阅读][下载 754K]
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  • 运输应激对后备种公猪生理生化指标及炎症相关基因表达的影响

    罗宗刚;朱宝中;杨瑰桃;陈红跃;王金勇;王玲;

    为研究长途运输对后备种公猪生理生化指标及炎症相关基因mRNA表达的影响,本试验选择10头10月龄的长白后备种公猪运输6 h,分别在运输前、运输结束及运输后72 h进行生理指标测定及采集血液进行生化指标的测定,同时对血清中炎症相关基因mRNA的表达量进行分析。结果显示,在运输结束时后备种公猪的直肠温度和呼吸频率极显著高于运输前及运输后72 h(P<0.01),长途运输引起血清中白细胞数量显著升高(P<0.05),其中淋巴细胞和嗜酸性粒细胞数在运输结束时较运输前增加(P<0.05),运输后72 h嗜酸性粒细胞和嗜碱性粒细胞数目及百分比与运输前差异显著(P<0.05),单核细胞数在运输结束时显著低于运输后72 h(P<0.05),运输结束时中性粒细胞百分比升高(P<0.05)。与运输前相比,运输结束时及运输后72 h血清中GSH-Px含量显著升高(P<0.05),SOD、MDA、T-AOC和COR含量运输结束时显著高于运输后72 h(P<0.05);运输对血清中IL-2含量无显著性影响(P>0.05)。血清中IKKα、P50基因表达量在运输结束时和运输后72 h显著降低(P<0.05),TNF-a基因表达量在运输结束时高于运输前(P<0.05),运输对P65、IL-6基因表达量无显著性影响,IL-10基因表达量在运输结束时显著低于运输前和运输后72 h (P<0.05)。结果表明,长距离运输诱发后备种公猪的应激反应,使其生理状态、机体代谢及免疫系统受到一定程度的损伤,导致炎症发生。

    2023年07期 v.43;No.319 1528-1534页 [查看摘要][在线阅读][下载 973K]
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  • 中药复方对黄羽肉鸡生长性能、器官指数和空肠菌群的影响

    刘梦杰;丁倚晴;李越;周静;林瑾;李树鹏;练家乐;吕伟杰;郭世宁;

    旨在研究中药复方(苦参、百草霜、伏龙肝)对黄羽肉鸡生长性能、器官指数及生长过程中空肠微生物菌群变化的影响。选取1日龄快大型黄羽肉鸡180只,按体质量(BW)随机分为2个组,每组6个重复,每个重复15羽,对照组(CON组)饲喂基础日粮,试验组(CHM组)在基础日粮中添加中药复方(1 g/kg),试验期42 d。采集1,14,28和42日龄肉鸡组织器官和空肠内容物,计算器官指数,分析空肠微生物菌群多样性的变化及其代谢途径差异性。结果表明:CHM组显著提高29~42日龄和1~42日龄肉鸡的BW、平均日增质量(ADG),显著降低F/G(P<0.05)。CHM组显著提高14 d肉鸡肝脏和肾脏指数,28 d胸腺指数以及28和42 d法氏囊指数(P<0.05)。CHM组在14 d的Chao 1、Observed species和Shannon指数显著高于CON组(P<0.05)。CHM组在14 d对软壁菌门(Tenericutes)、在42 d对拟杆菌门(Bacteroidetes)和蓝细菌门(Cyanobacteria)的丰度显著升高,在14 d对糖杆菌门(TM7)丰度显著降低(P<0.05)。CHM组在14 d肠杆菌(Enterococcus)丰度显著降低,在28 d梭菌科梭菌属(Clostridiaceae_Clostridium)的丰度显著升高(P<0.05)。CHM组显著促进次生代谢物的生物合成(类黄酮生物合成)、氨基酸代谢(丙氨酸、天冬氨酸和谷氨酸代谢的生物合成)和消化系统(蛋白质消化和吸收)途径的富集(P<0.05)。综上,中药复方可以提高肉鸡的生长性能,降低料肉比以及提高器官指数,同时能改变早期空肠微生物菌群的多样性和丰富度,并在营养物质的代谢中发挥作用。

    2023年07期 v.43;No.319 1535-1543页 [查看摘要][在线阅读][下载 5913K]
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  • 日粮补充包被丁酸钠和VD_3对肉鸡脂代谢和抗氧化能力的影响

    郜航;赵兴凯;郭以哲;周振雷;

    旨在研究包被丁酸钠(CSB)和维生素D_3(VD_3)对肉鸡脂代谢和抗氧化能力的影响。采用2×2双因子试验设计,在基础日粮中设2个CSB添加水平(0和1 g/kg)和2个VD_3添加水平(3 000和5 000 IU/kg)。试验选用1日龄AA肉鸡192只,随机分为4组,分别为对照组(Con):基础日粮(含3 000 IU/kg VD_3);VD3组:基础日粮+额外2 000 IU/kg VD_3;CSB组:基础日粮+1 g/kg CSB;VD_3+CSB组:基础日粮+额外2 000 IU/kg VD_3+1 g/kg CSB。每组6个重复,每个重复8只鸡,试验期42 d。添加CSB显著降低腹脂率和总胆固醇(TC),显著升高高密度脂蛋白胆固醇(HDL-C)和血清总抗氧化能力(T-AOC)(P<0.05)。额外补充CSB和VD_3都能显著降低丙二醛(MDA)(P<0.05),但两者联合补充对MDA无显著性交互作用(P>0.05);添加CSB能够显著降低肝脏中FAS mRNA的表达量、显著提升CPT1α和SOD的mRNA表达量(P<0.05);联合添加CSB和VD_3对肝脏中脂质合成基因ACC的mRNA表达量有交互作用,相比CON和VD_3组,CSB和VD_3+CSB组的ACC mRNA表达水平显著降低(P<0.05)。日粮中添加CSB和VD_3能改善肉鸡脂代谢和提高抗氧化能力。

    2023年07期 v.43;No.319 1544-1550页 [查看摘要][在线阅读][下载 633K]
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  • 雷州黑鸭BRD4基因遗传多态性及其与产蛋性能的相关性分析

    吴昊宸;陆惠娴;于海滨;吴炯文;苏瑛;姜平;赵志辉;

    为探讨雷州黑鸭含溴结构域4蛋白(bromodomain containing 4,BRD4)基因的单核苷酸多态性与雷州黑鸭产蛋性能的关系,本试验以雷州黑鸭为研究对象,采用PCR扩增技术获得BRD4基因目的片段,通过直接测序检测BRD4基因单核苷酸多态位点(singlenucleotide polymorphisms, SNP),再使用HaploView 4.2软件对多个SNPs进行连锁不平衡分析获得单倍型,并分析BRD4基因的单倍型与雷州黑鸭产蛋性能的关联性。结果显示,在雷州黑鸭BRD4基因中发现4个突变位点,分别是I8-1897 T>A、I8-1936 A>C、I8-2046 C>T和I8-2109 T>C。其中,I8-1897 T>A位点的AA基因型个体的开产体质量显著低于TA基因型个体(P<0.05);I8-2046 C>T位点的CC基因型个体的开产体质量显著低于CT基因型个体(P<0.05);I8-2109 T>C的TT基因型个体在300天的产蛋数显著高与CC基因型个体(P<0.05);连锁分析发现,所有单倍型均与雷州黑鸭产蛋性能无显著差异(P>0.05)。结果表明,BRD4基因的I8-2109 T>C位点可作为雷州黑鸭繁殖性能的重要遗传标记。

    2023年07期 v.43;No.319 1551-1557页 [查看摘要][在线阅读][下载 1693K]
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  • NGF基因在黔北麻羊卵巢颗粒细胞及组织的表达分析

    陈祥;敖叶;李诚兰;赵佳福;周志楠;韦仕南;

    旨在验证NGF基因在转录组测序中单羔组对多羔组上调的结果,并探究NGF基因对黔北麻羊产羔性状的影响。选取健康、体质量45 kg、4岁左右的单、多羔黔北麻羊母羊为研究对象,采用qPCR法检测NGF基因在单、多羔组黔北麻羊母羊不同组织的表达水平,构建pEGFP-N3-NGF重组质粒,利用脂质体转染法转染pEGFP-N3-NGF重组质粒进入卵巢颗粒细胞,分为超表达NGF试验组和pEGFP-N3空载体对照组,通过检测培养基中雌二醇、孕酮的浓度,及对卵巢颗粒细胞增殖、凋亡、NGF、GnRHR、FSHR、BMP4、TIMP3基因mRNA表达的影响,来探究NGF基因对卵巢颗粒细胞的影响。结果表明,NGF基因在黔北麻羊各组织中均有表达,组间比较可知,卵巢和输卵管在多羔组表达极显著高于单羔组(P<0.01)。成功将pEGFP-N3-NGF重组质粒转染进入卵巢颗粒细胞,在12 h对E2的分泌具有显著促进作用(P<0.05),而对P4的分泌在12,24 h具有显著抑制作用(P<0.05),对卵巢颗粒细胞增殖在24,48 h具有极显著抑制作用(P<0.01),对卵巢颗粒细胞的凋亡具有促进作用。而对繁殖相关基因GnRHR、FSHR、BMP4、TIMP3 mRNA的表达有极显著促进作用(P<0.01)。综上表明,NGF基因可提高E2的分泌,抑制P4的分泌,有助于黔北麻羊发情及妊娠的维持,抑制细胞增殖,促进细胞凋亡,也极显著促进繁殖相关基因mRNA的表达,而这些繁殖相关基因都能够调控卵泡数、卵泡的发育与形成以及排卵,因此,NGF基因能够促进这些基因表达,进而促进卵泡的发育、形成及排卵,提高山羊的产羔力,这为产羔性状相关基因的研究提供了理论基础,初步认为NGF基因可作为探究影响山羊产羔性状的候选基因。

    2023年07期 v.43;No.319 1558-1566页 [查看摘要][在线阅读][下载 4013K]
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  • 犬细小病毒疫苗的研究进展

    李昀真;胡博;李虹晔;许丽文;张成琪;代昕宇;白雪;

    犬细小病毒(canine parvovirus, CPV)是引起的犬腹泻是导致犬类死亡的高度接触性传染病病原之一。针对这种疫病目前最为有效的防控方法就是疫苗接种,然而由于多种因素的影响如病毒变异、母源抗体干扰等因素导致的免疫后感染发生率仍然较高。目前已应用的传统疫苗如灭活疫苗或弱毒疫苗具有其不足之处,开发新型疫苗提高免疫效力是较为有效的防控措施。因此,现从细小病毒灭活疫苗、减毒活疫苗、基因工程亚单位疫苗及核酸疫苗等角度介绍CPV疫苗的研究进展,为细小病毒防控产品的研制提供借鉴。

    2023年07期 v.43;No.319 1567-1573页 [查看摘要][在线阅读][下载 202K]
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  • 病毒宏基因组学及其在动物病毒鉴定中的应用

    李玉铎;赵建军;邵西群;

    病毒宏基因组学(viral metagenomics, VM)是一种以待测样本中存在的病毒群体为研究对象,基于高通量基因测序技术来研究样本中病毒组构成的技术。相对于一代测序技术,高通量测序技术具备通量高、速度快、对未知病毒具有良好检出性等优势。因此,VM对研究环境中病毒多样性、快速检测已知和未知病毒、实时监测特定病毒动态变化等具有重要意义。近年来,VM技术已应用到动物传染病防控等多个领域,包括动物神经系统、呼吸道系统和肠道组织中病毒组检测与分析,针对新发传染病病原高精度识别等。本文从病毒宏基因组学的技术发展、原理以及在动物病毒鉴定中的应用等进行了综述。

    2023年07期 v.43;No.319 1574-1581页 [查看摘要][在线阅读][下载 1328K]
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  • TatD-like DNase在人畜共患寄生虫与病原细菌中的研究进展

    范芮铭;张义伟;冯颖;陈冉;桑晓宇;姜宁;

    TatD-like DNase是广泛存在于生物界的一种可以参与细胞凋亡、DNA修复、生物膜成熟等过程的蛋白,该蛋白首先在细菌中发现,而后研究人员发现该蛋白可以降解中性粒细胞胞外诱捕网(NETs)结构从而引发疟原虫对机体的免疫逃避,而且TatD-like DNase有抑制疟原虫发育的作用。在锥虫入侵宿主的研究中,研究人员发现该蛋白同样可以破坏NETs结构。在人畜共患病原细菌的研究中发现,TatD-like DNase有很强的金属离子依赖性,从而增强分解DNA的能力。本文就该蛋白的研究进展进行综述。

    2023年07期 v.43;No.319 1582-1586页 [查看摘要][在线阅读][下载 163K]
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