- 郭春红;李金斗;丁佳欣;冯嘉轩;陈凯楠;姜峰;丁壮;
基于昆虫杆状病毒表达系统和新城疫病毒样颗粒载体平台，采用间接免疫荧光、Western blot和透射电镜等方式，构建一种表面展示NDV HN蛋白、FAdV4 Fiber-2蛋白、FAdV-8a Fiber蛋白和FAdV-8b Fiber蛋白的二联三价嵌合型病毒样颗粒(ND-FAdV-4/8a/8b cVLPs)。结果显示，成功构建了表达FAdV-8a Fiber和FAdV-8b Fiber蛋白的重组杆状病毒rBV-c8aFiber和rBV-c8bFiber。此外，ND-FAdV-4/8a/8b cVLPs各组分蛋白均正确表达，是一种约100 nm、具备囊膜和纤突的纳米颗粒，为新城疫、禽腺病毒病的防控提供了一种安全的病毒样颗粒新型疫苗候选株。
2024年10期 v.44;No.334 2087-2093+2115页 [查看摘要][在线阅读][下载 8964K] [下载次数：153 ] |[网刊下载次数：0 ] |[引用频次：0 ] |[阅读次数：52 ] - 李树稳;杨晓柯;管翔雨;张广柱;黄淑坚;李永锋;仇华吉;
通过同源重组构建pHCLV-p54感染性克隆，将其转染至SK6细胞盲传拯救出重组病毒rHCLV-p54,并测定其在体外的遗传稳定性、生长曲线，同时免疫家兔评价其免疫效果。结果显示，E183L基因能够在重组病毒中稳定遗传，但是插入的外源基因影响C株的复制；家兔免疫试验结果显示，重组病毒rHCLV-p54能够诱导家兔产生抗ASFV的特异性抗体。结果表明，表达非洲猪瘟病毒(African swine fever virus, ASFV)p54蛋白的重组病毒rHCLV-p54具有良好的免疫原性，有望作为候选疫苗进一步评价。
2024年10期 v.44;No.334 2094-2100+2122页 [查看摘要][在线阅读][下载 381K] [下载次数：80 ] |[网刊下载次数：0 ] |[引用频次：0 ] |[阅读次数：30 ] - 梁志博;张中旺;张莉萍;于瑞明;潘丽;王永录;曾巧英;刘新生;
采集了我国甘肃省民勤县某养殖场疑似猪流行性腹泻发病猪的粪便和肠道内容物，通过RT-PCR方法对疑似阳性病料进行检测后，利用Vero细胞对其进行体外分离培养，对成功分离的病毒进行实验室鉴定，对其全基因组序列进行遗传进化分析，并通过动物回归试验对其致病力进行评价。结果显示，该猪流行性腹泻病毒(porcine epidemic diarrhea virus, PEDV)阳性病料处理液接种Vero细胞盲传至第4代时可观察到典型的合胞体病变现象，第6代病毒滴度达到10~(-4.75 )TCID_(50)/mL;电镜观察可以看到直径约为100 nm、圆形、表面有明显囊膜和纤突的PEDV样病毒粒子；全基因组测序分析表明该毒株全长28 085 bp,与经典毒株CV777代表的G1亚型毒株亲缘关系较远(同源性为96.6%),与G2b型毒株BJ-2011-1、IA1、USA/Colorado/2013和WELL同源性较高(为98.6%),表明该毒株属于G2b型流行毒株。动物回归试验结果显示，5日龄的仔猪在攻毒后12 h即出现呕吐、急性水样腹泻、消瘦和精神沉郁等临床症状，于24 h内症状加重而死亡，剖检后可以观察到感染仔猪的胃部肿胀，小肠高度臌气、肠壁薄而透明，内部还有未消化完的乳汁凝块。结果表明，本试验成功分离鉴定到1株PEDV G2b型流行毒株，并对其全基因组序列和致病性进行了分析，为今后针对PEDV基因功能、致病机制的研究及疫苗的开发提供了研究材料。
2024年10期 v.44;No.334 2101-2109+2233页 [查看摘要][在线阅读][下载 16943K] [下载次数：153 ] |[网刊下载次数：0 ] |[引用频次：0 ] |[阅读次数：20 ] - 李宇;石磊;时国强;张莹露;董振国;
基于环介导等温扩增技术(loop-mediated isothermal amplification, LAMP)和荧光定量PCR技术建立一种猪伪狂犬病病毒(pseudorabies virus, PRV)LAMP-Taqman快速检测体系。针对PRV保守序列设计LAMP引物组，并将环引物修饰荧光基团和淬灭基团作为Taqman探针，以实际阳性样本和重组质粒为模板，测试体系组分添加量、特异性、灵敏度和重复性；同时，使用市售恒温检测试剂盒平行测试38份实际样本，验证LAMP-Taqman检测体系的实际检测效果。结果显示，各组分最佳终浓度为：PRV-FIP/BIP 0.8μmol/L,Bst DNA聚合酶0.7 U/μL,TaqDNA聚合酶0.24 U/μL,dNTPs 1.6 mmol/L,MgSO_4 7.2 mmol/L;体系特异性好，不与其他病毒样本产生交叉反应，梯度样本的线性相关系数(R~2)为0.995,重复性测试的变异系数小于3.000%,最低检出限可达2.81×10~2拷贝/μL;对实际样本的测试结果与市售恒温荧光法检测试剂完全一致。结果表明，基于LAMP-Taqman方法建立的PRV检测体系特异灵敏、稳定准确，是一种适用于猪群PRV精准检测的可靠技术方法。
2024年10期 v.44;No.334 2110-2115页 [查看摘要][在线阅读][下载 5247K] [下载次数：80 ] |[网刊下载次数：0 ] |[引用频次：0 ] |[阅读次数：15 ] - 刘一宁;喻晓航;郑金;杨振宇;谢诗晴;林美婷;梁彤彤;罗烨;余兴龙;
以哺乳动物细胞HEK-293F表达猪伪狂犬病病毒(pseudorabies virus, PRV)gD重组蛋白作为包被抗原，采用棋盘滴定法优化确定出间接法gD-ELISA(gD-iELISA)各项技术参数；用gD-iELISA检测211份临床猪血清的抗体水平并分析与中和抗体水平的一致关系。结果显示，抗原包被质量浓度为0.90 mg/L;待检血清1∶100稀释，37℃孵育30 min;山羊抗猪IgG-HRP抗体1∶55 000稀释，37℃孵育30 min; TMB底物37℃显色20 min。gD-iELISA能检出1∶6 400稀释的PRV阳性血清；用gD-iELISA检测CSFV、PRRSV、PCV-2、PEDV和FMDV阳性血清其结果均呈阴性，该方法与以上阳性血清不存在交叉反应；gD-iELISA与商品试剂盒阴阳性血清的符合率为95.26%,批内和批间变异系数均低于10%。相关性分析表明，gD抗体水平与中和抗体效价的相关系数(r)显著大于gB抗体水平的相关性，并且gD抗体水平与中和抗体效价有很好的线性关系。结果表明，gD-iELISA比gB-iELISA更适用于PRV的疫苗免疫评估。因此，该方法在PRV的免疫防控中将会有很好的应用前景。
2024年10期 v.44;No.334 2116-2122页 [查看摘要][在线阅读][下载 449K] [下载次数：295 ] |[网刊下载次数：0 ] |[引用频次：0 ] |[阅读次数：16 ] - 胡卉琪;崔续媛;闫乃天;郑学博;张福慧;胡俊英;王新平;
应用CRISPR/Cas9技术构建NMGCF-19ΔompA菌株，并应用小鼠模型确定ompA基因在NMGCF-19菌株感染小鼠中的作用及其机制。结果显示，与野生型菌株比较，ompA基因敲除菌株感染小鼠的海马体神经元细胞坏死明显降低，且不呈局灶性；同时，脑组织中菌体检出量明显减少，紧密连接蛋白ZO-1和Occludin的mRNA水平和蛋白表达水平均明显提高。结果表明，ompA基因敲除后NMGCF-19菌株其致病性降低，该毒力基因ompA在NMGCF-19侵袭小鼠血脑屏障的过程中发挥重要作用。
2024年10期 v.44;No.334 2123-2129页 [查看摘要][在线阅读][下载 4265K] [下载次数：365 ] |[网刊下载次数：0 ] |[引用频次：0 ] |[阅读次数：14 ] - 陈雅静;于婧;杨劲宇;张文公;吴玉;刘凇昊;杨静;李小兵;江康峰;
通过将昆明市某动物园1例因呕吐、口鼻流食糜、腹部鼓胀死亡滇金丝猴的胃脏、空肠、直肠组织样品的病原进行分离纯化，利用生化鉴定、PCR鉴定、药敏试验、致病性试验、血清型鉴定及对分离菌进行耐药基因和毒力基因分析，对病原种类和生物学特性进行研究。结果显示，从胃脏、空肠和直肠中分离鉴定到的病原为大肠杆菌，血清型均为O127,属于肠致病性大肠杆菌，且均对头孢西丁耐药，对庆大霉素、加替沙星和环丙沙星敏感。3株致病菌均携带blaTEM、blaCTX-M 2种耐药基因以及opmA、opmC 2种毒力基因。本试验结果为大肠杆菌致滇金丝猴肠炎的防治提供了一定的参考和数据支持。
2024年10期 v.44;No.334 2130-2135+2265页 [查看摘要][在线阅读][下载 425K] [下载次数：100 ] |[网刊下载次数：0 ] |[引用频次：0 ] |[阅读次数：18 ] - 程雨;谢坤;姜艳平;崔文;李佳璇;王晓娜;乔薪瑗;唐丽杰;李一经;王丽;
利用MRS-CaCO_(3 )固体平板培养法从兔肠道内容物中分离并培养乳酸菌，通过形态学观察、革兰染色、生理生化特征观察、16S rDNA序列分析和ERIC-PCR分析进行鉴定，对符合乳酸菌特性的菌株进行生物学特性、抗逆性能、体外黏附性能、体内定植能力以及安全性等方面的研究。结果显示，共分离得到4株兔源罗伊乳杆菌；4株兔源罗伊乳杆菌均具有乳酸菌的典型生物学特征，对胃肠道内常见的病原菌具有一定的抑制作用，其发挥抑菌作用的主要物质为细菌素；对氯霉素、利福平及红霉素较敏感，对胃肠道环境以及高温具有一定的耐受能力；可在家兔体内成功定植且安全。本试验为开发预防和治疗兔肠道疾病的乳酸菌制剂奠定了基础。
2024年10期 v.44;No.334 2136-2144+2293页 [查看摘要][在线阅读][下载 14959K] [下载次数：341 ] |[网刊下载次数：0 ] |[引用频次：0 ] |[阅读次数：13 ] - 李真亚;赵晓康;杨红玉;李允;孔嫄嫄;李泳;贾荣玲;
从河南省南阳市多家猪场无菌采集40份疑似猪肺炎支原体(Mycoplasma hyopneumoniae,Mhp)发病猪的肺脏和气管组织，通过病原分离培养、菌落观察、PCR鉴定并测序，共分离到6株Mhp。各分离株在固体培养基上呈现出圆形、边缘整齐、似露滴样中央有颗粒且隆起的菌落形态。PCR可以扩增到各个分离株P36目的基因条带，扩增产物测序后与NCBI中登录的ATCC 25934参考株(J株)P36基因序列比对，其同源性为99%以上。CCU试验测定TH-1株的生长滴度可达10~(11) CCU/mL,具有较高的生长滴度。选择TH-1株进行体外高温(40℃)连续传代获取不同代次的传代株(P50、P100、P150)。其中，TH-1 P150代株在40℃生长温度下仍具有较高的生长滴度(10~(10) CCU/mL)。将TH-1 P1、P50、P100、P150经气管注射感染25日龄断奶仔猪，毒力评估结果显示：P1代感染组有4头猪肺脏(4/5)出现典型“肉样或虾肉样”病变，肺脏HE病理切片出现严重的单核细胞、淋巴细胞的浸润，气管扫描切片显示纤毛出现杂乱、缠绕、变短脱落病理变化；P150代感染组没有出现典型Mhp特征性病变，肺脏HE和气管扫描切片也没有出现微观病理变化，这表明TH-1是1株强毒力菌株，而对其经过不断的体外传代，其毒力不断下降，TH-1 P150株是1株低毒力菌株。TH-1 P150作为弱毒疫苗株具有较好的免疫原性，其免疫攻毒后的平均肺炎病变减少率为83.3%。结果表明，本试验采用体外高温连续传代的方法，获得了1株生长滴度高的低毒力菌株(TH-1 P150),且其免疫原性较好，为进一步Mhp弱毒疫苗研发奠定了基础。
2024年10期 v.44;No.334 2145-2152+2242页 [查看摘要][在线阅读][下载 4812K] [下载次数：50 ] |[网刊下载次数：0 ] |[引用频次：0 ] |[阅读次数：9 ]
- 王斯琦;周佩瑶;牟泉宙;宛麟;李鑫丽;李杨;何兴丽;王昭元;王梓;高梓强;赵志辉;沈冰蕾;
采用脂磷壁酸(lipophosphatidic acid, LTA)刺激Mac-T细胞，通过Western blot检测核因子κB(NF-κB)和促分裂原活化蛋白激酶(mitogen-activated protein kinase, MAPK)信号通路关键蛋白的表达水平和磷酸化水平，以及上游的关键作用因子TLR4和MyD88蛋白表达水平；EDU法检测细胞增殖水平；流式细胞术检测细胞凋亡情况。结果显示，激活G蛋白偶联受体120(G protein-coupled receptors 120,GPR120)能显著降低Mac-T细胞中LTA诱导NF-κB(P65和IκBα)(P<0.01)和MAPK(JNK、ERK、p38)(P<0.01)的磷酸化水平；抑制GPR120能够上调Mac-T细胞中LTA诱导NF-κB(P65和IκBα)(P<0.01)和MAPK(JNK、ERK、p38)(P<0.01)的磷酸化水平；激活GPR120可以极显著的缓解由LTA诱导的TLR4和MyD88的上调(P<0.01);抑制GPR120会显著加剧由LTA诱导的TLR4和MyD88的上调(P<0.05);LTA刺激会导致Mac-T细胞增殖水平呈减弱趋势，凋亡率显著增高，而激活GPR120基因可极显著增加细胞活性(P<0.01),促进细胞增殖，显著减少细胞凋亡(P<0.05)从而缓解了由LTA对Mac-T细胞的损伤；LTA刺激可使细胞凋亡率极显著增加(P<0.01),激活GPR120基因则可极显著(P<0.01)的逆转LTA所诱导的Mac-T细胞的凋亡率的提高；而抑制GPR120基因后可增强LTA对细胞凋亡的促进作用(P<0.05),表明激活GPR120基因可以减弱由LTA诱导的炎性Mac-T细胞导致的凋亡率增加。结果表明，GPR120可通过介导TLR4和MyD88表达抑制NF-κB/MAPK炎症通路活化调控炎症并能够促进细胞增殖。
2024年10期 v.44;No.334 2165-2171页 [查看摘要][在线阅读][下载 7629K] [下载次数：22 ] |[网刊下载次数：0 ] |[引用频次：0 ] |[阅读次数：10 ] - 逯璐;都书钰;杨赫;许秋实;徐闯;
检测健康奶牛及酮病奶牛脂肪组织中调节脂合成相关分子乙酰CoA羧化酶-1(ACC1)、磷酸化转录调节因子-α(CEBPα)、二酰基甘油酰基转移酶2(DGAT2)、固醇调节元件结合蛋白1(SREBP1)和过氧化物酶体增殖物激活受体-γ(PPARγ)和脂解相关分子脂滴包被蛋白-1(PLIN1)、甘油三酯脂酶(ATGL)、激素敏感性脂肪酶(HSL)、p-HSL的蛋白表达以及目的蛋白溶酶体酸性脂肪酶(lysosomal acid lipase, LAL)的表达；研究体外培养原代牛脂肪细胞过表达LAL,并添加异丙肾上腺素(ISO)构建脂肪细胞脂解模型，采用Western blot检测脂肪细胞中脂合成及脂解相关蛋白表达的情况。结果显示，与健康奶牛相比，酮病奶牛脂肪组织中的LAL表达量显著低于健康奶牛(P<0.01)。临床型酮病奶牛脂肪组织中脂合成相关蛋白ACC1、CEBPα、DGAT2、SREBP1、PPARγ的蛋白表达水平显著降低，而脂解相关蛋白PLIN1、ATGL、p-HSL的蛋白表达及磷酸化水平显著升高，结果表明酮病奶牛脂肪组织脂质合成作用被抑制，脂解作用增强。体外试验结果显示，ISO可下调脂合成相关分子的蛋白表达水平，也会上调脂解相关分子的蛋白表达及磷酸化水平。过表达LAL的奶牛脂肪细胞基础脂合成和ISO诱导下的脂合成蛋白的含量显著升高，而基础脂解和ISO诱导的脂解蛋白含量显著降低。体外试验结果表明，LAL在奶牛脂肪细胞中能抑制脂肪细胞的脂分解，并促进脂肪细胞的脂合成。
2024年10期 v.44;No.334 2172-2178页 [查看摘要][在线阅读][下载 1869K] [下载次数：48 ] |[网刊下载次数：0 ] |[引用频次：0 ] |[阅读次数：13 ] - 陈宣旭;蒋欣怡;彭靖皓;李靖;苗丰帅;赵志辉;于海滨;赖伟中;姜平;林紫薇;
采用PCR产物直接测序法检测四川牦牛过氧化物酶增殖激活受体γ辅激活因子-1β(peroxisome proliferator-activated receptor gamma, coactivator 1 beta, PPARGC1B)基因SNP位点，同时通过PCR扩增和测序获得四川牦牛PPARGC1B基因编码区，并对编码蛋白和mRNA二级结构进行了生物信息学预测分析。结果显示，本试验通过四川牦牛PPARGC1B基因的单核苷酸多态性检测结果，筛选出E9-189 A→C、E9-387 G→A、E9-542 C→T和E9-554 T→C共4个外显子SNP突变位点，其中E9-387 G→A和E9-554 T→C位点与四川牦牛肉品质性状中的剪切力和背膘厚具有显著相关性；对4个突变位点的生物信息学分析结果显示，PPARGC1B蛋白属于酸性、不稳定、非跨膜和非分泌型亲水蛋白，有卷曲螺旋结构，不存在信号肽和跨膜区域，主要在细胞核中发挥生物学作用，有106个磷酸化位点和1个糖基化位点，1个保守结构RRM结构，二级结构主要α-螺旋和无规则卷曲为主；PPARGC1B基因突变前后蛋白结构未发生变化，mRNA二级结构出现了显著差异。结果表明，PPARGC1B基因SNP位点可作为影响四川牦牛肉品质性状的分子标记，并应用于肉牛的标记辅助选择，同时对PPARGC1B基因相关SNP位点的生物信息学分析也为深入探讨该基因的生物学功能奠定基础。
2024年10期 v.44;No.334 2179-2189页 [查看摘要][在线阅读][下载 13765K] [下载次数：63 ] |[网刊下载次数：0 ] |[引用频次：0 ] |[阅读次数：6 ] - 杨童;范云珲;郑晰丹;逯璐;王卓;李晴;杨程;徐闯;许秋实;陈媛媛;
运用CCK-8法检测不同浓度CoCl_2(0、50、100、200、300、400μmol/L)及其不同处理时间(0、6、12、24、48 h)对脂肪细胞活力的影响，并选择最适宜的处理条件；采用Western blot方法检测不同浓度CoCl_2(0、50、100、200、400μmol/L)对脂肪细胞低氧及其下游关键分子蛋白表达的影响。结果显示，CoCl_2处理组浓度越高，脂肪细胞活力越低，其中300、400μmol/L处理组细胞活力显著下降(P<0.01),200μmol/L处理组细胞活力最高。与对照组相比，200μmol/L CoCl_2处理组低氧及其下游信号通路关键分子：缺氧诱导因子1-α(hypoxia inducible factor 1-alpha, HIF-1α)、葡萄糖转运蛋白4(recombinant glucose transporter 4,GLUT4)、血管内皮生长因子受体1(vascular endothelial growth factor receptor 1,FLT-1)、脯氨酰羟化酶2(proline hydroxylase2,PHD2)和血管内皮生长因子(vascular endothelial growth factor, VEGF)的蛋白表达水平显著上调(P<0.01)。与对照组相比，200μmol/L CoCl_2处理组中脂解代谢关键酶脂肪甘油三酯脂肪酶(adipose triglyceride lipase, ATGL)、围脂滴蛋白1(perilipin 1,PLIN1)、蛋白激酶A(protein kinase A,PKA)和300、400μmol/L处理组中激素敏感性甘油三酯脂肪酶(hormone-sensitive lipase, HSL)磷酸化的水平高于其他各组(P<0.01)。200μmol/L处理组CoCl_2介导的缺氧上调了胞内磷脂酰肌醇激酶(phosphatidylinositol 3-kinase, PI3K)的蛋白表达和蛋白激酶B(protein kinase B,Akt)的磷酸化水平。结果表明，添加200μmol/L CoCl_2能够促进原代牛脂肪细胞缺氧相关蛋白和脂解代谢酶及胰岛素相关信号蛋白的表达。
2024年10期 v.44;No.334 2190-2196页 [查看摘要][在线阅读][下载 2203K] [下载次数：23 ] |[网刊下载次数：0 ] |[引用频次：0 ] |[阅读次数：7 ] - 吴文义;胡雪岩;张云天;张志龙;李倩楠;金钺;杨明凡;张红英;
通过Western blot、ELISA方法检测板蓝根多糖(Radix isatidis polysaccharide, IRPS)对猪繁殖与呼吸综合征病毒(porcine reproductive and respiratory syndrome virus, PRRSV)感染的3D4/21/CD163细胞TLR3/TRIF天然免疫途径和Ⅰ型干扰素分泌的影响，并使用TLR3激动剂Poly(I:C)处理进一步验证IRPS对PRRSV感染引起的免疫抑制的影响。结果显示，PRRSV感染18、24 h时TLR3、TRIF、IRF3、IRF7蛋白水平及Ⅰ型干扰素分泌均显著下调，同时IRPS对这一过程具有显著的抑制作用；TLR3激动剂Poly(I:C)能够缓解PRRSV感染引起的TRIF、IRF3、IRF7蛋白水平下调和IRF3、IRF7磷酸化水平降低，且IRPS与Poly(I:C)具有协同作用。结果表明，IRPS能够通过TLR3/TRIF途径缓解PRRSV感染引起的免疫抑制。
2024年10期 v.44;No.334 2197-2203页 [查看摘要][在线阅读][下载 5297K] [下载次数：62 ] |[网刊下载次数：0 ] |[引用频次：0 ] |[阅读次数：11 ] - 孙甜甜;穆芸;邝永胜;袁书艺;陈绍红;郭富城;刘铀;
采用MTT试验、间接免疫荧光试验(IFA)和实时荧光定量PCR(qRT-PCR)观察小反刍兽疫病毒(peste des petits ruminants virus, PPRV)在山羊肾细胞(LDG-2)的增殖，采用Western blot和qRT-PCR观察PPRV感染对TLR2、MyD88、NF-κB信号通路相关因子及其下游炎症因子表达水平的影响。结果显示，PPRV感染后36 h,细胞存活率显著降低并产生明显细胞病变，PPRV-N基因mRNA表达水平显著上调；PPRV感染细胞中TLR2、MyD88、p-p65、p-IκBα表达水平、p-p65/p65和p-IκBα/IκBα比值以及下游炎症因子TNFα、IL-1β、IL-4和IL-10的mRNA表达水平均显著升高。用C29阻断PPRV诱导的TLR2激活，PPRV感染细胞中PPRV-N的mRNA、TLR2、MyD88、p-p65、p-IκBα表达水平及p-p65/p65和p-IκBα/IκBα比值、下游炎症因子IL-1β和IL-4的mRNA表达水平均显著降低。结果表明，PPRV感染可激活TLR2/MyD88/NF-κBα信号通路，促进病毒的复制和扩散；阻断PPRV诱导的TLR2激活，可抑制MyD88/NF-κB信号通路和病毒复制。
2024年10期 v.44;No.334 2204-2212+2308页 [查看摘要][在线阅读][下载 4906K] [下载次数：40 ] |[网刊下载次数：0 ] |[引用频次：0 ] |[阅读次数：8 ] - 赵琪;霍雨柔;张剑旭;徐诗瑶;张嘉斌;李波;王禹霏;杨玉洁;顾海泉;王凯;李乾学;
以二甲基亚砜和1,2-丙二醇为溶剂制备阿苯达唑亚砜(albendazole sulfoxide, ABZSO)、伊维菌素(ivermectin, IVM)复方浇泼剂；采用中心复合设计响应面法优化浇泼剂的处方；利用Franz扩散池法考察浇泼剂体外透皮性能；采用高效液相色谱法测定2种药物的渗透量。结果显示，浇泼剂的最佳配方为IVM 0.5%、ABZSO 5%、二甲基亚砜52%、丙二醇39%,余量添加无水乙醇至100%。IVM累计渗透量最高分别可达20.78μg/cm~2,ABZSO累计渗透量最高分别可达249.02μg/cm~2。2种药物的体外释放模型符合一级动力学方程。1～100 mg/L ABZSO、IVM与峰面积呈良好的线性关系；2种药物的含量测定方法的精密度、稳定性RSD<2%。结果表明，ABZSO复方浇泼剂的制作工艺简单，稳定性良好，易于浇泼；所建立的高效液相色谱法操作简便，准确性高，可用于浇泼剂中ABZSO和IVM的含量测定。
2024年10期 v.44;No.334 2213-2220页 [查看摘要][在线阅读][下载 3774K] [下载次数：36 ] |[网刊下载次数：0 ] |[引用频次：0 ] |[阅读次数：10 ] - 张俊秋;陈雨;修子清;MUSA Mgeni;蒋小雨;吕景智;孙雅望;
选用35日龄、体质量(1.22±0.08) kg的伊拉兔120只，根据双因素设计随机地分为4组：C组(基础饲粮)、D组(基础饲粮+0.5%蒲公英提取物)、A组(基础饲粮+0.5%木通提取物)、DA组(基础饲粮+0.5%蒲公英提取物+0.5%木通提取物),其中，C组为对照组，其余3组为试验组，每组10个重复。预饲期1周，试验期4周。试验结束后采集血清、肝脏组织、空肠和回肠黏膜样本，并测定各项指标。结果显示：(1)在试验期第1周，C组仔兔的平均日增重显著低于D组和A组(P<0.05),料重比显著高于D组和A组(P<0.05)。(2)木通提取物极显著降低了肝脏和血清中的活性氧(reactive oxygen species, ROS)含量(P<0.01),蒲公英提取物极显著降低了血清ROS含量(P<0.01),且分别在肝脏和血清中存在显著和极显著交互作用；木通和蒲公英提取物能有效降低组织和血清中氧化损伤标志物含量，但增加了肝脏组织中丙二醛(malondialehyde, MDA)的含量。(3)木通提取物显著提高了血清中谷胱甘肽过氧化物酶(glutathione peroxidase, GSH-Px)活性和总抗氧能力(total antioxidant capability, T-AOC)(P<0.01),并极显著降低了肝脏中的T-AOC(P<0.01),显著降低空肠和肝脏中超氧化物歧化酶的活性(P<0.05);蒲公英提取物显著提高血清中T-AOC和空肠中GSH-Px活性(P<0.05);木通和蒲公英提取物对血清中的过氧化物酶具有显著互作效应(P<0.05)。(4)木通提取物显著和极显著的降低了Kelch样结合蛋白1(Kelch-like ECH-associated protein 1,Keap1)和NAD (P) H醌氧化还原酶1 (NAD(P)H:quinone oxidoreductase 1,NQO1)基因在空肠的表达量；木通和蒲公英提取物对回肠NQO1、血红素加氧酶1和超氧化物歧化酶2有显著互作效应(P<0.05),对Keap1有极显著互作效应(P<0.01);木通提取物显著降低NQO1基因在肝脏组织表达量(P<0.05)。结果表明，蒲公英和木通提取物能够减少体内ROS含量并缓解氧化损伤，并通过Nrf2-Keap1信号通路调节抗氧化基因表达和抗氧化物酶活性来维持肠道氧化还原稳态，缓解肠道氧化应激。
2024年10期 v.44;No.334 2221-2233页 [查看摘要][在线阅读][下载 4828K] [下载次数：75 ] |[网刊下载次数：0 ] |[引用频次：0 ] |[阅读次数：18 ]
- 王卓;方欣馨;李贺翔;许秋实;徐闯;
本试验分为体内试验和体外试验两部分。体内试验选取健康和酮病奶牛各10头，采集脂肪组织。ELISA结果显示，与健康奶牛相比，临床酮病奶牛脂肪组织中丙二醛(malonaldehyde, MDA)含量和活性氧(reactive oxygen species, ROS)活性较高，谷胱甘肽过氧化物酶(glutathione peroxidase, GSH-Px)和超氧化物歧化酶(superoxide dismutase, SOD)活性较低。Western blot结果显示，与健康组相比，酮病组脂肪组织中TIGAR蛋白表达水平显著上升，Nrf2-HMOX1信号通路蛋白表达水平显著上调，氧化应激相关指标SOD1、过氧化氢酶(catalase, CAT)和谷胱甘肽-S-转移酶(glutathione S-transferase, GST)的蛋白质水平显著上升。体内试验结果表明，酮病奶牛体内脂肪组织发生氧化应激。体外试验在分离培养牛原代脂肪细胞的基础上，分别通过腺病毒沉默或过表达TIGAR以及体外采用添加H_2O_2作用2 h,构建牛脂肪细胞氧化应激模型，来检测TP53诱导细胞凋亡调节因子(TP53 induces glycolysis and apoptosis factors, TIGAR)对牛脂肪细胞氧化应激的影响。Western blot结果显示，与对照组相比，H_2O_2组表现为氧化应激增强，核相关因子2(nuclear correlation factor 2,Nrf2)通路中Nrf2及血红素加氧酶1(hemeoxygenase-1,HMOX1)表达降低，相关氧化应激蛋白表达量降低；与H_2O_2组相比，过表达TIGAR加H_2O_2组Nrf2-HMOX1的蛋白表达水平上调，相关氧化应激蛋白SOD1、CAT和GST表达量上升。体外试验结果表明，过表达TIGAR缓解H_2O_2诱导的脂肪细胞氧化应激。与H_2O_2组相比，沉默TIGAR加H_2O_2组，Nrf2-HMOX1信号通路及氧化应激相关蛋白SOD1、CAT和GST的蛋白表达下调。结果表明，沉默TIGAR加剧H_2O_2给脂肪细胞带来的氧化应激。
2024年10期 v.44;No.334 2234-2242页 [查看摘要][在线阅读][下载 2175K] [下载次数：36 ] |[网刊下载次数：0 ] |[引用频次：0 ] |[阅读次数：8 ] - 刘睿宁;张剑柄;张慧忠;王涵;郝普国;郭宇;王宇;赵红霞;
将50只8周龄雄性高脂血症SD大鼠随机分为5组，每组10只。按蓝刺头黄酮(total flavonoids from echinops latifolius tausch, TFET)剂量，分别设高剂量组(200 mg/kg)、中剂量组(100 mg/kg)、低剂量组(50 mg/kg)、阳性对照组(辛伐他汀20 mg/kg)和模型组(灌胃蒸馏水0.8 mL/d,并给予给予高脂鼠粮),连续给药45 d。另取10只8周龄健康雄性SD大鼠作为空白对照组，灌胃蒸馏水0.8 mL/d,同时给予普通鼠粮。试验过程中，模型组、阳性对照组、TFET各剂量组大鼠给予高脂鼠粮，对照组大鼠给予普通鼠粮。对各组大鼠分别连续45 d灌服相应浓度的TFET、辛伐他汀和蒸馏水，并检测大鼠相关血脂生化指标、抗氧化指标和PPARα通路相关基因表达量。结果显示，高剂量TFET能极显著降低TC、TG、LDL-C含量，并极显著提高HDL-C含量；中剂量TFET能极显著降低TC、TG含量，显著降低LDL-C含量；低剂量TFET能显著降低TC、LDL-C含量。高、中、低剂量TFET均能极显著降低提高SOD活性；高、中剂量TFET能极显著降低MDA含量；高剂量TFET能极显著提高T-AOC活性。高剂量的TFET能极显著提高大鼠肝脏中PPARα、CYP7A1、CPT-1基因表达量；中剂量的TFET能显著提高CYP7A1、CPT-1基因表达量，能显著提高PPARα基因的表达量；低剂量的TFET能极显著提高CYP7A1基因表达量，显著提高CPT-1基因表达量。结果表明，TFET对高脂血症大鼠具有抗氧化和降血脂的作用，其机制可能与通过激活PPARα及其下游相关基因促进脂肪酸β氧化有关。
2024年10期 v.44;No.334 2243-2250页 [查看摘要][在线阅读][下载 5712K] [下载次数：115 ] |[网刊下载次数：0 ] |[引用频次：0 ] |[阅读次数：8 ] - 杨英;刘鑫煜;赵非凡;郭文瑞;高瑞峰;
分离并体外培养奶牛子宫内膜组织，用1.0 mg/L脂多糖(lipopolysaccharide, LPS)刺激1 h后与诃子鞣酸(Chebulagic acid, CA)(12.5、25.0、50.0、100.0 mg/L)共培养，然后收集不同处理组的奶牛子宫内膜组织进行试验。应用ELISA和实时荧光定量PCR法检测TNF-α、IL-6、IL-1β的蛋白分泌水平和基因表达水平；HE染色观察奶牛子宫内膜组织损伤程度；应用免疫荧光技术鉴定高迁移率蛋白-1(high mobility grope boxprotein 1,HMGB-1)、透明质酸酶结合蛋白-2(hyaluronidase binding protein 2,HABP-2)的表达；Western blot检测ERK、p65和IκBα的磷酸化表达水平。结果显示，经CA处理LPS诱导的奶牛子宫内膜组织炎症反应模型后，TNF-α在6、24 h和IL-6在6、12、24 h的蛋白分泌水平显著下降，IL-1β和IL-6在6、9、12 h和TNF-α在6 h的基因表达水平均显著下调；HE染色切片发现，LPS+CA组相比LPS组均有所改善，上皮细胞脱落程度减轻，腺体和血管结构较为完整，炎性细胞浸润程度降低，无明显的坏死或出血；LPS+CA组也显著下调了HMGB-1和HABP-2的表达；LPS+CA组的ERK、IκBα和p65的磷酸化水平显著降低。结果表明，CA能够通过抑制LPS诱导的奶牛子宫内膜组织炎症反应中MAPK和NF-κB通路的激活，下调其奶牛子宫组织中炎症因子的表达水平从而减轻LPS诱导的奶牛子宫内膜组织炎症反应。由此推断，CA可能是一种潜在的奶牛子宫内膜炎的治疗药物，值得进一步的研究和开发。
2024年10期 v.44;No.334 2251-2259页 [查看摘要][在线阅读][下载 9008K] [下载次数：81 ] |[网刊下载次数：0 ] |[引用频次：0 ] |[阅读次数：13 ]