- 张晓燕;杨子银;冯康;张志榜;李鹏成;霍乃蕊;贺俊平;
应用杆状病毒真核表达系统体外表达并通过Ni柱亲和纯化猪繁殖与呼吸综合征病毒(porcine reproductive and respiratory syndrome virus, PRRSV)全长NSP9蛋白(NSP9编码PRRSV RNA依赖的RNA聚合酶，RdRp),然后用其免疫BALB/c小鼠。取免疫后小鼠脾细胞与骨髓瘤SP20细胞进行融合，通过间接ELISA方法筛选抗体阳性杂交瘤细胞，经过筛选和亚克隆，获得1株阳性杂交瘤细胞株，制备腹水并进行效价测定，最后应用免疫印迹(Western blot)、间接免疫荧光(IFA)和免疫共沉淀(Co-IP)试验验证其反应性、特异性及应用性能。结果显示，成功获得可溶性全长NSP9蛋白；并得到1株能稳定分泌抗NSP9单克隆抗体的细胞株，命名为3F6;所制备的腹水效价可达到1∶1 280 000;经鉴定该抗体重链属于Ig-1型，轻链为κ链，仅特异性识别PRRSVⅡ型毒株。Western blot、IFA和Co-IP试验结果显示，该抗体具有良好的反应性、特异性和应用性能。结果表明，成功制备了PRRSV NSP9单克隆抗体，为PRRSV特异性检测、免疫学血清诊断试剂的研发及研究PRRSV RdRp决定的病毒复制功能奠定了重要的基础。
2026年01期 v.46;No.349 1-7页 [查看摘要][在线阅读][下载 1446K] [下载次数：215 ] |[网刊下载次数：0 ] |[引用频次：0 ] |[阅读次数：78 ] - 张恩;郁达义;孙清;葛菲菲;李瑞航;孙涛;
基于转化相关重组(transformation-associated recombination, TAR)技术，通过将绿色荧光蛋白(green fluorescent protein, GFP)标记基因插入到猪传染性胃肠炎病毒(transmissible gastroenteritis virus, TGEV)的ORF3基因位点，成功构建了TGEV黑龙江流行株的感染性cDNA克隆。将感染性克隆转染到猪睾丸细胞(swine testis cells, ST)后，可以高效拯救重组病毒rTGEV-GFP。体外生长特性、复制动力学等试验确定拯救出病毒的生物学特性和复制等特性与亲本毒株无显著差异(P>0.05)。此外，借助拯救重组病毒表达的GFP报告基因，确定了瑞德西韦抗TGEV效力，其IC_(50)可达(1.230±0.010)μmol/L。综上，本试验利用TAR技术构建了TGEV基因组感染性克隆，显示出该技术可高效和准确地用于大基因组RNA病毒的cDNA片段组装，并可以很好地用于替代体外连接、靶向RNA重组技术、细菌人工染色体(bacterial artificial chromosome, BAC)等传统技术；获得表达GFP报告基因的重组病毒将为深入探讨TGEV致病机制、研制药物、进行中和抗体评价及新型疫苗开发提供可视化平台。
2026年01期 v.46;No.349 8-17页 [查看摘要][在线阅读][下载 1741K] [下载次数：70 ] |[网刊下载次数：0 ] |[引用频次：0 ] |[阅读次数：30 ] - 祁娜;格格日乐;汪静;任冠屹;李宝慧;包福祥;
从内蒙古自治区呼和浩特市某牛场采集病例的鼻拭子样品，经处理后接种至MDBK细胞，进行病毒分离鉴定并对分离的牛病毒性腹泻病毒(bovine viral diarrhea virus, BVDV)进行5′-UTR和E2基因的克隆和遗传进化分析。结果显示，鼻拭子病料检测为BVDV阳性，接种MDBK细胞后能致细胞出现明显病变；全基因组序列比对结果显示，该分离株与GenBank上公布的BVDV(BJ1308)同源性为98.289%;基因遗传进化分析显示，该分离株为BVDV-1d基因型，将其命名为BVDV-1d-NMG;本研究分离的BVDV毒株与标准毒株的分子生物学特征和理化特性等一致，与标准毒株的抗原性相同，可导致犊牛产生典型临床症状。试验结果为内蒙古地区BVD疫苗毒株的选用、研发及BVD防控提供了参考。
2026年01期 v.46;No.349 18-25+98页 [查看摘要][在线阅读][下载 2880K] [下载次数：202 ] |[网刊下载次数：0 ] |[引用频次：0 ] |[阅读次数：17 ] - 丁方舟;叶伟成;华炯钢;陈柳;霍苏馨;朱寅初;倪征;付媛;刘士哲;李鑫基;张存;王晓杜;云涛;
利用Red/ET同源重组技术将禽腺病毒4型(fowl adenovirus serotype 4,FAdV-4)纤突蛋白基因Fiber1和Fiber2插入火鸡疱疹病毒(herpesvirus of turkeys, HVT)-BAC载体的UL53-UL54基因间区，构建含CMV、PEC、RSV及gC启动子的8种重组质粒(如pHVT-CMV-Fiber1/2、pHVT-gC-Fiber1/2),转染鸡胚成纤维细胞(chicken embryo fibroblasts, CEF)拯救重组病毒。通过Western blot和间接免疫荧光(indirect immunofluorescence, IFA)检测蛋白表达，绘制病毒生长曲线评估增殖能力，并对1日龄SPF雏鸡进行免疫攻毒试验，采用ELISA和qPCR分析抗体水平及泄殖腔排毒量。结果显示，CMV启动子驱动的重组病毒(rHVT-CMV-Fiber1/2)在CEF中高效表达目标蛋白(Fiber1:60 kDa, Fiber2:65 kDa);免疫后，高剂量组(1×10~5 TCID_(50))抗体水平于4周达峰值D_(450)值为0.23±0.02,高于其他启动子；攻毒后，rHVT-CMV-Fiber1组泄殖腔病毒载量较对照组降低2.5个数量级(10~(3.2)拷贝/μL比较10~(5.7)拷贝/μL,P<0.000 1)。UL53-UL54位点的外源基因插入未显著影响病毒复制(P>0.05)。CMV启动子驱动的HVT载体疫苗可高效表达FAdV-4抗原并诱导强效免疫应答，显著抑制病毒排出。
2026年01期 v.46;No.349 26-36页 [查看摘要][在线阅读][下载 2307K] [下载次数：67 ] |[网刊下载次数：0 ] |[引用频次：0 ] |[阅读次数：10 ] - 谢紫云;杨雨川;张鹤腾;杨志华;雷白时;赵款;张云航;袁万哲;张武超;
以本实验室重组构建的猪伪狂犬病病毒(recombinant porcine pseudorabies virus, rPRV) gE~-/gI~-/US9~-/US2~-四基因缺失病毒为基础，利用CRISPR/Cas9基因编辑和同源重组技术进一步将其TK基因缺失，构建和拯救不携带外源标记基因的TK、gE、gI、US9和US2五基因缺失病毒，经有限稀释法纯化和PCR鉴定正确后，命名为rPRV TK~-/gE~-/gI~-/US9~-/US2~-;随后，在体外测定病毒的生物学特性，并在小鼠体内对五基因缺失病毒进行安全性与免疫原性评价。体外试验结果显示，拯救的rPRV TK~-/gE~-/gI~-/US9~-/US2~-五基因缺失病毒在荧光显微镜下未观察到绿色荧光，而带EGFP标签的rPRV TK~-/gE~-/gI~-/US9~-/US2~--EGFP重组病毒可观察到绿色荧光；rPRV TK~-/gE~-/gI~-/US9~-/US2~-五基因缺失病毒具有与四基因缺失病毒及野生型病毒相似的病毒滴度和生长动力学曲线，但其在细胞上形成的蚀斑直径较小。动物试验结果显示，rPRV TK~-/gE~-/gI~-/US9~-/US2~-五基因缺失病毒对小鼠的半数致死量(median lethal dose, LD_(50))大于10~(6 )TCID_(50)(50%tissue culture infectious dose,半数组织培养物感染量),是野生型病毒的1 000倍以上，且其安全性显著优于四基因缺失病毒，并可诱导产生较高水平的gB抗体和中和抗体。结果表明，本试验制备了PRV变异株TK、gE、gI、US9和US2五基因缺失病毒，且其具有较高的安全性和免疫原性，为研制PRV基因缺失弱毒活疫苗奠定基础，同时也为快速操作其他疱疹病毒的基因组提供技术参考。
2026年01期 v.46;No.349 37-46页 [查看摘要][在线阅读][下载 2128K] [下载次数：89 ] |[网刊下载次数：0 ] |[引用频次：0 ] |[阅读次数：11 ] - 赵梦茹;冯旭东;陶禹;于子肖;郑瀚;孙艺熙;张立武;赵光伟;
应用临床阳性样本进行鸭甲型肝炎病毒血清3型(duck hepatitis A virus type 3,DHAV-3)毒株的分离，并利用RT-PCR方法对分离毒株的基因组进行扩增、序列比对分析确定其遗传进化关系。分离毒株分别感染无母源抗体鸭胚，通过测定ELD_(50)比较毒株对鸭胚的致病力；将毒力最强和最弱毒株分别感染5日龄健康雏鸭，记录发病及死亡情况，对雏鸭心脏、肝脏和脾脏组织进行石蜡切片制作，HE染色后观察组织病理变化，分析其对雏鸭的致病性。应用无母源抗体鸭胚自山东菏泽和河北石家庄4个规模化养殖场中成功分离到4株DHAV-3病毒，分别将其命名为HZ-1、HZ-2、HZ-3和HB-1株。序列测定结果显示，分离毒株的全基因组长分别为7 787、7 786、7 785、7 788 bp; G+C含量分别为42.25%、42.15%、42.11%和42.15%。系统进化树分析结果显示，4株DHAV-3病毒与我国山东、安徽、江苏和四川地区毒株的亲缘关系最近，与越南、韩国和黑龙江地区毒株亲缘关系相对较远。鸭胚致病性试验结果显示，HZ-1、HZ-2、HZ-3和HB-1株的半数胚致死量(egg lethal dose, ELD_(50))分别为10~(-7.0)/0.2 mL、10~(-7.2)/0.2 mL、10~(-6.3)/0.2 mL和10~(-7.5)/0.2 mL,均属于高致病性毒株。将HB-1株和HZ-1株分别腹腔接种健康雏鸭，观察期内2组雏鸭的病死率均为20%,RT-PCR检测感染率为100%;病理组织学观察显示，肝细胞肿胀、脂肪变性，脾脏出血、坏死，伴有炎症细胞浸润，心脏出血、充血，局部坏死，并伴有炎症细胞浸润。该结果为了解我国DHAV-3田间毒株的分子特征和致病性及开发相关诊断试剂、疫苗和卵黄抗体等生物制品奠定了基础。
2026年01期 v.46;No.349 47-54+69页 [查看摘要][在线阅读][下载 2290K] [下载次数：58 ] |[网刊下载次数：0 ] |[引用频次：0 ] |[阅读次数：13 ] - 石华辉;王泺丹;彭林莉;李阁;高继业;李继祥;
利用鸡肝癌细胞从河南省某养鹅场病死鹅的肝组织样本中分离到1株鹅腺病毒(HN306/2023株),并对其进行了系统进化、基因重组及前体蛋白酶切信号的分析，同时调查了该病毒感染在我国鹅群中的流行情况。透射电镜观察显示，病毒粒子直径约80 nm、无囊膜、呈二十面体；序列测定与分析确定该病毒基因组全长42 203 bp, G+C含量为55%,两端各有55 bp的ITR区，有50个开放阅读框，存在1个重组位点，前体蛋白的酶切信号与禽腺病毒一致；以DNA聚合酶和纤突蛋白进行的系统进化分析显示，该病毒与鸭腺病毒4型处于同一分支，但相似性低，系统进化距离较远，超过新种分类阈值；通过特异性PCR检测发现，该病毒在我国主要养鹅地区临床病料样本中的阳性率达14.6%(32/219)。结果表明，我国鹅群中存在一种新型鹅腺病毒(鹅腺病毒6型)感染。
2026年01期 v.46;No.349 55-62页 [查看摘要][在线阅读][下载 1855K] [下载次数：61 ] |[网刊下载次数：0 ] |[引用频次：0 ] |[阅读次数：17 ] - 郭美君;章国永;秦山;陈旭;周兴东;董婉玉;周莹珊;宋厚辉;杜静;王晓杜;
针对鸽痘病毒(pigeonpox virus, PGPV)保守区域4b基因(GenBank登录号：ON375849)设计特异性引物和探针，以重组阳性质粒为模版，通过反应条件的优化，建立可检测PGPV核酸的TaqMan荧光定量PCR检测方法。结果显示：PGPV阳性质粒在3×10~8～3×10~1拷贝/μL浓度范围内，标准曲线(Y=-3.85X+44.98,R~2=0.993 3)显示拷贝数与其Ct值之间具有良好线性关系；建立的方法与10种禽类常见病毒无交叉反应，能有效区分FPV和PGPV混合感染；敏感性试验结果显示，该方法对PGPV阳性质粒最低检测限为25拷贝/μL,比常规PCR敏感1 000倍；重复性试验结果显示，组内和组间变异系数均低于2.92%;在符合性试验中，该方法检出结果与真实值的符合率为100%,高于其他检测方法(普通PCR为85.71%,多重PCR为71.40%)。以建立方法检测临床样本67份，结果显示56份样本为阴性，11份样本为阳性。结果表明，本研究所建立的检测方法具有特异性好、灵敏度高、可定量检测等优点，适合临床检测，为PGPV的流行病学调查、监测及防控提供技术支撑。
2026年01期 v.46;No.349 63-69页 [查看摘要][在线阅读][下载 1654K] [下载次数：107 ] |[网刊下载次数：0 ] |[引用频次：0 ] |[阅读次数：10 ] - 徐引弟;王治方;蔡旭旺;徐晓娟;张青娴;张立宪;焦文强;朱文豪;李海利;游一;张家庆;雷亚楠;
对2015―2024年采自河南省1 680个规模化猪场的2 860份病料进行细菌分离鉴定、血清型鉴定、耐药性检测、耐药基因扩增、毒力试验和毒力基因的检测。结果显示，共分离鉴定出2 932株致病性细菌，其中格拉瑟菌(Glaesserella parasuis,GPS)873株，流行血清型以5型、4型、13型为主，其次为7型、2型，主要血清型为5型。GPS临床分离株对头孢噻呋均有良好的敏感性(100%),对氟苯尼考、氧氟沙星、阿奇霉素、大观霉素、强力霉素有较好的敏感性，对庆大霉素、卡那霉素、磺胺类有较强的抗性；GPS以sul2基因检出率最高，其次为aadA1、aadB。GPS同一血清型不同毒株毒力有差异，血清5型毒株毒力最强，其次13型稍强，2型和4型毒力中等，7型低毒力或无毒力。GPS血清型与毒力基因有一定的相关性，同一血清型不同毒株毒力基因有差异，强毒株所含毒力基因多于毒力低毒株，血清5型含毒力基因最多，低毒力毒株含有毒力基因相对少。结果表明，河南省规模化猪场发病猪群GPS感染严重且复杂，GPS存在严重的多重耐药现象，毒力及毒力基因分布复杂，这为格拉瑟病的流行病学及科学防控提供了科学依据。
2026年01期 v.46;No.349 70-77+107页 [查看摘要][在线阅读][下载 1443K] [下载次数：25 ] |[网刊下载次数：0 ] |[引用频次：0 ] |[阅读次数：12 ] - 叶子俊;王枞嵘;颜权辉;李尉晖;叶明俊;李秋燕;曹胜波;
通过蔗糖密度梯度离心纯化猫支原体(Mycoplasma felis,M.felis),灭活后作为包被抗原，初步建立M.felis ELISA抗体检测方法。结果显示，该方法最佳抗原包被质量浓度为1 mg/L,2%BSA封闭45 min,血清最佳稀释度1:128,血清最佳孵育时间45 min,二抗最佳稀释度1∶5 000,二抗最佳孵育时间45 min, cut-off值为D_(450)值=0.352;特异性试验证实该方法与猫疱疹病毒等其他猫常见病原的抗体无交叉反应；阴阳性血清的组内和组间变异系数均小于7%,具有良好的重复性；用该方法对209份临床样品检测，结果显示该方法与代谢抑制法(metabolic inhibition test, MIT)对比阳性符合率达92.59%。
2026年01期 v.46;No.349 78-83页 [查看摘要][在线阅读][下载 1493K] [下载次数：131 ] |[网刊下载次数：0 ] |[引用频次：0 ] |[阅读次数：7 ]
- 韩琳;于苗苗;杜山;刘凯;卢爱桃;马天文;高瑞峰;张志恒;
选用7日龄SD大鼠和PC12细胞分别建立丙泊酚(propofol, PPF)的体内外神经损伤模型。通过L-硒代蛋氨酸和RSL3靶向调控GPX4活性，采用尼氏染色观察海马组织结构变化，ELISA检测IL-1β、IL-6、IL-10和IL-18表达；Western blot分析NLRP3、Caspase-1和GSDMD-NT蛋白水平。结果显示，PPF暴露使发育期大鼠海马组织出现形态学损伤，L-硒代蛋氨酸可激活GPX4减轻神经损伤，下调NLRP3、Caspase-1和GSDMD-NT蛋白水平及促炎细胞因子的含量，上调抗炎细胞因子IL-10的水平；而抑制GPX4表达则显著加重丙泊酚诱导的神经损伤。此外，GPX4通过限制ROS水平抑制NLRP3/Caspase-1通路激活。结果表明，PPF诱导的发育期神经损伤与GPX4/NLRP3通路的失调密切相关。
2026年01期 v.46;No.349 99-107页 [查看摘要][在线阅读][下载 2248K] [下载次数：56 ] |[网刊下载次数：0 ] |[引用频次：0 ] |[阅读次数：9 ] - 李静静;陈皆银;王喆;许礼冬;林雪儿;徐加利;宋厚辉;程昌勇;夏菁;
利用定点突变技术构建DsbA P37F38二硫键形成蛋白DsbA关键活性基序CPFC中2个半胱氨酸(Cys)中间氨基酸P37F38位点突变蛋白原核表达株，通过酶促动力学曲线检测DsbA蛋白还原酶活性；利用Overlap PCR及同源重组策略构建单增李斯特菌dsbA P37F38位点突变菌株，通过生长曲线试验检测DsbA关键活性基序中P37F38位点对单增李斯特菌抗氧化应激能力的影响。利用RT-qPCR探究dsbA缺失后其余含有CXXC位点的基因以及应激转录调控基因sigB转录水平变化，检测dsbA缺失对其转录水平的影响；通过Western blot试验检测dsbA缺失对SigB蛋白表达的影响。结果显示，P37F38是二硫键形成蛋白DsbA酶活功能表达的关键氨基酸位点，该位点突变后能够显著降低DsbA蛋白对氧化型谷胱甘肽(GSSG)还原酶活性(P<0.001);P37F38位点突变菌株在肼(diamide)应激条件下的生长能力显著增强(P<0.001);同时，ΔdsbA菌株中SigB的表达水平显著低于野生株(P<0.001)。综上，本研究证实DsbA的P37F38氨基酸位点能够显著地影响DsbA对不同底物的还原酶活性以及细菌对肼应激的耐受性，DsbA缺失造成SigB表达量减少进而减弱单增李斯特菌在氧化应激压力下的生长；并进一步解析了单增李斯特菌硫氧还蛋白关键氨基酸位点及其生物学功能，为单增李斯特菌的防控及抗感染治疗提供更多潜在靶标。
2026年01期 v.46;No.349 108-116页 [查看摘要][在线阅读][下载 1864K] [下载次数：29 ] |[网刊下载次数：0 ] |[引用频次：0 ] |[阅读次数：5 ] - 桑琴嘉;杨立锋;任耿佳;宋厚辉;程昌勇;陈绵绵;江玲丽;
首先，通过结晶紫染色、BCA蛋白质量浓度测定及最小抑菌浓度(minimal inhibit concentration, MIC)试验分别研究了信息素脂蛋白PplA对生物被膜形成、胞外蛋白含量及耐药性的影响，结果显示PplA对单增李斯特菌生物被膜形成及胞外蛋白含量有抑制作用，与β-内酰胺类抗生素的耐受有关。然后，将单增李斯特菌(Listeria monocytogenes,L.monocytogenes)野生株EGD-e和pplA缺失株在37℃体外培养后进行转录组测序，并利用相关软件以log_2(fold change, FC)绝对值>1为标准筛选差异表达基因，对差异基因进行GO注释及富集分析和KEGG注释及富集分析。最后，利用qRT-PCR对富集到的有关群体感应基因转录组数据的准确性进行验证，结果显示在转录组的测序结果中共筛选出显著差异基因653个，与EGD-e相比，pplA缺失株转录组中存在显著上调基因414个，显著下调基因239个；GO及KEGG分析的结果显示PplA参与L.monocytogenes的多种途径，其中包含群体感应相关基因18个，分别为lmo0135、lmo0136、lmo0137、lmo0152、lmo0539、lmo1295、lmo1527、lmo1529、lmo1803、lmo2192、lmo2193、lmo2194、lmo2195、lmo2196、lmo2434、secY、ffh和lmo2854,并且qRT-PCR检测这18个基因转录水平与转录组中的数据趋势一致。
2026年01期 v.46;No.349 117-125+143页 [查看摘要][在线阅读][下载 2303K] [下载次数：35 ] |[网刊下载次数：0 ] |[引用频次：0 ] |[阅读次数：2 ] - 郭薇;杨紫倩;陈绍红;刘铀;
用Western blot分别检测小反刍兽疫病毒(peste des petits ruminants virus, PPRV)感染山羊肾细胞(LDG-2)12、24、36 h后葡萄糖转运蛋白(glucose transporter, GLUT)、糖酵解相关的己糖激酶(hexokinase, HK)、乳酸脱氢酶(lactate dehydrogenase, LDH)、丙酮酸脱氢酶E1亚基β(pyruvate dehydrogenase E1 subunit beta, PDHβ)、丙酮酸脱氢酶激酶(pyruvate dehydrogenase kinase 1,PDK1)和病毒核衣壳蛋白(PPRV-N)表达水平；用分光光度法分别检测PPRV感染细胞内葡萄糖、乳酸和ATP含量变化；用GLUT1特异性抑制剂BAY-876、2-脱氧葡萄糖(2-DG)和草氨酸钠(sodium oxalate, SO)分别处理PPRV感染细胞，观察抑制GLUT、HK和LDH活性对糖酵解途径和PPRV复制的影响。结果显示，PPRV感染细胞GLUT1、GLUT2、HK1和LDHA表达水平显著升高(P<0.05或P<0.01);胞内葡萄糖、乳酸和ATP含量显著升高(P<0.05或P<0.01)。同时，PDHβ表达水平显著下调(P<0.01),PDK1表达水平显著上调(P<0.01)。经抑制剂BAY-876和SO处理的PPRV感染细胞中乳酸含量显著降低(P<0.05或P<0.01),PPRV-N蛋白表达水平显著下调(P<0.01);而在2-DG处理的PPRV感染细胞中，乳酸含量显著降低(P<0.01),PPRV-N蛋白表达水平显著升高(P<0.01)。结果表明，PPRV感染能显著增强LDG-2细胞葡萄糖摄取和糖酵解，促进病毒复制；用BAY-876、SO抑制葡萄糖转运和糖酵解可显著抑制PPRV在LDG-2细胞的复制，为深入了解PPRV的致病机制及开发针对糖酵解途径的抗病毒药物提供了科学依据。
2026年01期 v.46;No.349 126-133+143页 [查看摘要][在线阅读][下载 2120K] [下载次数：37 ] |[网刊下载次数：0 ] |[引用频次：0 ] |[阅读次数：7 ] - 周淳桢;李青昊;Hamza Imtiaz;谭勋;
将40只2周龄AA肉鸡随机分为4组，每组10只，其中肺动脉高压(pulmonary arterial hypertension, PAH)与PAH+雷帕霉素(rapamycin, RAPA)组采用环境低温诱导PAH模型，诱病后第2周开始，PAH+RAPA组经腹腔注射自噬激活剂RAPA(0.5 mg/kg,每2 d注射1次),PAH组注射相同剂量的PBS,直至试验结束。另外2组正常饲养，对照组(CTL)组注射PBS,RAPA组注射RAPA。试验于第5周龄结束。采集血清，检测丙二醛(malondialdehyde, MDA)和超氧化物歧化酶(superoxide dismutase, SOD)水平以表征氧化应激；采集肺组织，检测炎症因子、自噬和铁死亡标志蛋白表达。体外培养内皮祖细胞(endothelial progenitor cells, EPCs),观察RAPA处理对剪切应力诱导的EPCs脂质过氧化反应和自噬的影响。结果显示，RAPA处理阻止PAH发生，伴有血清MDA水平下降、肺组织自噬流增强、铁死亡标志蛋白GPX4和FTH1升高，HO-1下降。体外研究结果显示，RAPA可通过促进自噬而减轻氧化应激诱导的铁死亡。结果表明，RAPA可通过促进自噬和抑制铁死亡而防治肉鸡PAH。
2026年01期 v.46;No.349 134-143页 [查看摘要][在线阅读][下载 2214K] [下载次数：41 ] |[网刊下载次数：0 ] |[引用频次：0 ] |[阅读次数：7 ]
- 房嘉园;张丽波;郑硕;吕秦川;苏桐;张洵铭;肖兴玉;李一;李常红;郝林琳;
以184头中国荷斯坦奶牛为试验对象，经PCR扩增、测序对比筛选单核苷酸多态性(single nucleotide polymorphisms, SNPs)位点，并与泌乳性状进行关联分型，进一步进行连锁不平衡及单倍型分析；生物信息学筛选靶向3′UTR区域SNPs位点的候选miRNAs,并预测候选miRNAs与该位点突变形成的2种基因型的mRNA靶向序列结合的最小自由能及二级结构，检测胰岛素样生长因子1(insulin-like growth factor 1,IGF-1) mRNA及蛋白质表达量，评估miRNA对牛乳腺上皮细胞脂滴数量及甘油三酯的含量的影响，进一步检测泌乳相关基因mRNA表达量，双荧光素酶报告试验探究miR-325-3p与IGF-1基因靶向关系及对不同基因型3′UTR沉默效率。结果显示，中国荷斯坦奶牛群体中共鉴定出7个IGF-1基因SNP位点，其中位于3′UTR的g.58240 G>A(c.756 G>A)对乳脂率和产奶量存在显著影响；生物信息学筛选到2种候选miRNAs(miR-325-3p及Y-74),其中miR-325-3p与靶向mRNA序列结合更加稳定；miR-325-3p-mimics组中ACSS1基因mRNA水平表达量较miR-325-3p-NC组显著下降(P<0.05),并且细胞内脂滴数量及甘油三酯含量均降低；miR-325-3p能够通过靶向IGF-1基因3′UTR,并且miR-325-3p对IGF-1基因沉默效率可能受IGF-1 c.756 G>A影响，进而影响IGF-1表达。本试验为解析IGF-1基因对泌乳性状的影响，以及IGF-1基因对牛分子育种的作用奠定了基础。
2026年01期 v.46;No.349 156-165+174页 [查看摘要][在线阅读][下载 2096K] [下载次数：122 ] |[网刊下载次数：0 ] |[引用频次：0 ] |[阅读次数：8 ] - 冀中豪;袁宝;任文陟;陈健;
24只SPF级雄性ICR小鼠随机分为对照组、模型组和褪黑素干预组，每组8只。使用转棒式睡眠剥夺仪建立慢性睡眠剥夺(sleep deprivation, SD)小鼠模型，每天剥夺睡眠20 h,持续28 d,期间褪黑素组每天灌胃补充褪黑素(20 mg/kg);收集血清、结肠和睾丸组织，ELISA测定激素(睾酮、LH和FSH)、促炎因子(TNF-α,IL-1β和IL-6)和氧化应激相关因子(MDA、SOD和T-AOC)的含量；HE染色观察睾丸病理改变；蛋白免疫印迹(Western blot, WB)分析睾丸组织中紧密连接蛋白的表达情况；16S rRNA测序分析肠道微生物群组成。结果显示，与模型组相比，褪黑素干预后，血清睾酮水平和抗氧化因子(SOD和T-AOC)的含量显著升高(P<0.05),促炎细胞因子(TNF-α,IL-1β和IL-6)、丙二醛MDA、血清LH和FSH的含量显著降低(P<0.05),睾丸中紧密连接蛋白(ZO-1和Claudin 1)的表达量显著升高(P<0.05);组织学分析结果显示，褪黑素干预恢复了因睡眠剥夺受损的睾丸结构，并增加了细胞数量；此外，褪黑素干预能够重塑SD导致的肠道微生物群紊乱。结果表明，褪黑素能够有效改善SD导致的睾丸损伤，其机制可能与重塑肠道微生物群、修复血睾屏障、抑制炎症和抗氧化作用有关。
2026年01期 v.46;No.349 166-174页 [查看摘要][在线阅读][下载 2269K] [下载次数：108 ] |[网刊下载次数：0 ] |[引用频次：0 ] |[阅读次数：9 ] - 丁畅;岳顺利;李佳轩;范涵琪;周佳勃;
通过在冷冻保存液与解冻液中添加不同终浓度的甲磺酸去铁胺(deferoxamine mesylate, DFO)检测冻融猪精子的活力、顶体完整性、质膜完整性、抗氧化水平、铁离子水平、线粒体功能及体外受精能力。结果显示，400μmol/L DFO能有效螯合精液中的铁离子，维持铁稳态，降低活性氧(reactive oxygen species, ROS)和丙二醛(malondialdehyde, MDA)水平，提高超氧化物歧化酶(superoxide dismutase, SOD)和谷胱甘肽过氧化物酶4(glutathione peroxidase 4,GPX4)活性，增强线粒体膜电位，从而显著提升冻融精子的活力、质膜完整性及顶体完整性，并提高体外受精率、卵裂率和囊胚率。结果表明，铁死亡是猪精子冷冻损伤的重要机制，并且DFO可通过“铁螯合-抗氧化-线粒体保护”机制有效抑制铁死亡，为优化猪精液冷冻保存技术提供了新策略。
2026年01期 v.46;No.349 175-180页 [查看摘要][在线阅读][下载 1290K] [下载次数：31 ] |[网刊下载次数：0 ] |[引用频次：0 ] |[阅读次数：6 ]
- 胡雯雯;汤德元;曾智勇;王彬;周敏;毛茵茗;周飘;何松;张力;高邡鑫;
流行性乙型脑炎病毒(Japanese encephalitis virus, JEV)是一种蚊媒性人兽共患病病原体，感染引起的日本乙型脑炎(Japanese encephalitis, JE)简称乙型脑炎或乙脑，在世界范围内传播，尤其是亚洲国家。JEV的致病机制主要是感染中枢神经系统，诱发以神经元死亡为特征的脑组织疾病，如病毒性脑炎、脑膜炎、脊髓炎，严重威胁着世界的公共卫生安全。迄今为止，越来越多的研究表明，JEV感染诱导的细胞凋亡是JE发病的重要原因，且诱导机制复杂多样，给JE的防控工作带来巨大挑战。因此，对近年来JEV感染诱导细胞凋亡的各种机制进行综述，以期为阐明JEV的致病机制，找到新的抗病毒靶点提供参考。
2026年01期 v.46;No.349 181-190页 [查看摘要][在线阅读][下载 1298K] [下载次数：90 ] |[网刊下载次数：0 ] |[引用频次：0 ] |[阅读次数：14 ] - 吴龙建;余杨慧;韩一欣;宋厚辉;黄蓓;杨杨;
三结构域(tripartite motif, TRIM)蛋白家族是一类具有E3泛素连接酶活性的蛋白，在宿主免疫应答中发挥重要作用。近年来，越来越多的研究结果表明，TRIM蛋白家族成员在多种细菌感染中具有调控作用，其主要通过介导自噬、炎症反应以及泛素化修饰等机制，影响宿主的抗菌免疫能力。通过系统总结不同TRIM蛋白在细菌感染过程中的具体功能及其分子机制，并探讨其作为潜在抗感染靶点的应用前景，可为抗感染免疫治疗的精准化与个性化发展提供新思路。
2026年01期 v.46;No.349 191-199页 [查看摘要][在线阅读][下载 1727K] [下载次数：67 ] |[网刊下载次数：0 ] |[引用频次：0 ] |[阅读次数：7 ] - 王蕾;王思睿;孙树民;毕峻龙;
多糖是食药用真菌的重要活性生物大分子，具有免疫调节、抗病毒、抗菌等多种活性功能。作为免疫调节剂的食药用真菌多糖，具有生物可降解性、安全性、低毒性、没有依赖性、容易获取等优点。食药用真菌多糖通过干扰病毒的生命周期来实现抗病毒作用，通过促进肠道有益菌、抑制有害菌来调节机体免疫力。通过综述食药用真菌多糖的结构特性和对多种病原微生物的调控作用，期待能为更好地利用食药用真菌多糖的活性成分及减少抗生素的滥用提供理论参考。
2026年01期 v.46;No.349 200-206+214页 [查看摘要][在线阅读][下载 1252K] [下载次数：406 ] |[网刊下载次数：0 ] |[引用频次：0 ] |[阅读次数：9 ] - 张大妹;余远迪;高广亮;杨柳;李绍梅;郑华;付利芝;沈克飞;许国洋;
猪肠道冠状病毒(swine enteric coronavirus, SeCoV)是引起猪病毒性腹泻病的主要病原。SeCoV包括猪流行性腹泻病毒(porcine epidemic diarrhea virus, PEDV)、猪传染性胃肠炎病毒(transmissible gastroenteritis virus, TGEV)、猪δ冠状病毒(porcine deltacoronavirus, PDCoV)和猪急性腹泻综合征冠状病毒(swine acute diarrhea syndrome coronavirus, SADS-CoV)。感染SeCoV仔猪发病的临床症状为腹泻、呕吐、脱水和体质量减轻，该类病可造成仔猪大规模死亡，给养猪业造成巨大经济损失。胰酶可在SeCoV的体外分离培养中发挥关键作用，其使用质量浓度和作用方式多样，主要影响病毒的感染与复制阶段。综述胰酶作用机制、使用浓度、添加阶段以及胰酶处理后病毒增殖效果，可为SeCoV体外有效分离、增殖效率提升和胰酶影响病毒增殖作用机制的进一步研究提供参考。
2026年01期 v.46;No.349 207-214页 [查看摘要][在线阅读][下载 1467K] [下载次数：44 ] |[网刊下载次数：0 ] |[引用频次：0 ] |[阅读次数：6 ] - 宋明强;谢留威;李宝安;赵健黎;徐超;
运动性疲劳是高强度或持续性任务中工作犬面临的关键生理挑战，其核心机制涉及能量代谢失衡、氧化应激损伤、神经递质紊乱及炎症反应，严重影响任务效能与健康福利。中草药活性成分凭借多靶点调节和低毒性的优势，在抗疲劳领域展现出显著潜力。多糖类(如人参多糖、枸杞多糖)通过激活AMPK/PGC-1α、Nrf2/HO-1等信号通路，改善糖原储备与线粒体功能，增强抗氧化能力；黄酮类化合物(如红参皂苷、淫羊藿苷)经AMPK/SIRT1通路修复骨骼肌线粒体结构，抑制NF-κB介导的炎症反应；生物碱类(如石斛生物碱、乌拉尔甘草生物碱)通过促进神经营养因子表达、抑制神经胶质细胞活化，维持中枢神经系统兴奋性；复方制剂(如黄芪-丹参配伍)的协同效应可同时调节能量代谢、微循环及肠道菌群，彰显多成分整合干预优势。然而，当前研究在成分剂量优化、复方协同机制及制剂生物利用度等方面仍存不足。通过对抗疲劳作用中草药活性成分的系统综述，以期未来聚焦人参多糖、红参皂苷、黄芩黄酮、石斛生物碱等典型成分的精准应用，结合中医理论解析复方配伍靶点，开发耐酸缓释制剂并开展长期安全性的评价，为工作犬抗疲劳功能制剂的研发提供理论依据，推动中草药在运动医学领域的创新应用。
2026年01期 v.46;No.349 215-222页 [查看摘要][在线阅读][下载 1241K] [下载次数：74 ] |[网刊下载次数：0 ] |[引用频次：0 ] |[阅读次数：15 ] - 彭磊;易康乐;杨青;野宏涵;罗阳;高帅;李剑波;孙鏖;彭华;李嘉炜;贾博;胡仁科;
镉是一种毒性较大的重金属，广泛存在于自然界中，可通过多种途径侵入并蓄积在动物机体内，并通过氧化应激、线粒体损伤、细胞自噬、炎症反应、铁死亡等多重机制对机体造成多系统毒性损伤。对近年来镉对动物身体机能损伤及其作用机制的相关研究报道进行归纳整理，旨在为进一步完善镉的毒性机制及对镉暴露的防治提供参考。
2026年01期 v.46;No.349 223-230页 [查看摘要][在线阅读][下载 1254K] [下载次数：57 ] |[网刊下载次数：0 ] |[引用频次：0 ] |[阅读次数：19 ] 下载本期数据