- 崔帅;王洋;陈世钰;蒋亚君;房立春;庞忠宝;郭晓宇;贾红;朱鸿飞;
为从宿主细胞角度探究非洲猪瘟病毒(African swine fever virus, ASFV)衣壳蛋白M1249L的功能，本研究以M1249L蛋白为研究对象，构建诱饵质粒(pGBKT7-M1249L),利用原代猪骨髓巨噬细胞(bone marrow-derived macrophages, BMDMs)酵母双杂交cDNA文库，通过回转验证、序列比对，最终筛选获得包括IL-1β、CTSB和DNAJA3在内的20个候选互作蛋白，并进一步通过免疫共沉淀验证。GO和KEGG富集分析显示这些宿主蛋白参与代谢过程、生物调节、细胞通讯及应激反应等生物过程，并涉及Toll样受体信号通路(Toll-like receptor signaling pathway)和NOD样受体信号通路(NOD-like receptor signaling pathway)等多条信号通路。本研究为进一步阐明ASFV M1249L在病毒感染及免疫调控中的作用机制奠定了基础。
2025年11期 v.45;No.347 2301-2308页 [查看摘要][在线阅读][下载 1688K] [下载次数：144 ] |[网刊下载次数：0 ] |[引用频次：0 ] |[阅读次数：16 ] - 李红欢;王泽轩;乔彦杰;李益涛;刘紫威;马忠臣;刘才冬;崔耀成;王震;王月丽;易继海;陈创夫;
通过体外同源重组构建猪繁殖与呼吸综合征病毒(porcine reproductive and respiratory syndrome virus, PRRSV)NADC30-like GP3重组腺病毒载体疫苗，以探究其小鼠水平的免疫效果评价。以5型腺病毒为载体，制备表达PRRSV GP3蛋白的重组腺病毒，通过荧光观察、PCR和Western blot法对重组腺病毒进行体外鉴定。将重组腺病毒免疫小鼠，采用间接ELISA和ELISpot等方法检测重组腺病毒诱导的体液免疫和细胞免疫反应。经酶切、PCR、荧光和Western blot鉴定，表明重组腺病毒rAdGP3构建和包装成功。免疫小鼠后，能产生特异性抗体和中和抗体，表明重组腺病毒能产生较强的体液免疫。ELISpot和淋巴细胞增殖试验显示重组腺病毒疫苗能刺激机体分泌IFN-γ特异性T淋巴细胞数量和诱导机体淋巴细胞增殖，表明重组腺病毒能增强机体细胞免疫应答水平。本研究成功构建了rAdGP3重组腺病毒，且在小鼠水平上具有良好的免疫原性，为PRRSV新型疫苗的研发提供了参考。
2025年11期 v.45;No.347 2309-2317页 [查看摘要][在线阅读][下载 2117K] [下载次数：22 ] |[网刊下载次数：0 ] |[引用频次：0 ] |[阅读次数：11 ] - 喻蓓蕾;邹亚文;何庆;李丹彤;蒋一凡;王智勇;袁倩;杨毅;王乃东;
猪流行性腹泻病毒(PEDV)表面刺突蛋白(spike protein, S)的受体结合区(RBD)是介导病毒入侵宿主细胞的关键结构域，也是诱导机体产生中和抗体的关键靶点。为制备可用于PEDV RBD生物学功能研究及新型诊治方法开发的抗体，本研究以Sf9昆虫细胞表达的重组RBD蛋白为抗原，免疫BALB/c小鼠制备单克隆抗体，采用间接ELISA方法筛选阳性杂交瘤细胞株，并对单抗进行反应活性鉴定。ELISA、Western blot和间接免疫荧光试验(IFA)结果表明，筛选得到的3株单克隆抗体(3E5、4F9和5A5)与病毒和RBD蛋白具有良好的反应性。抗体亚型鉴定结果表明，单抗3E5和4F9为IgG1型，单抗5A5为IgM型。体外中和试验进一步发现，单抗3E5具有病毒中和活性。本研究成功制备了3株PEDV RBD蛋白的单克隆抗体，为RBD蛋白的生物学功能研究、PEDV血清学检测和疫苗研制提供新的抗体工具。
2025年11期 v.45;No.347 2318-2324页 [查看摘要][在线阅读][下载 2341K] [下载次数：35 ] |[网刊下载次数：0 ] |[引用频次：0 ] |[阅读次数：14 ] - 李春林;沙洲;崔进;郑辉;南福龙;董雅琴;魏荣;武瑞;尼博;
为建立一种快速鉴别传染性胃肠炎病毒(transmissible gastroenteritis virus, TGEV)、猪流行性腹泻病毒(porcine epidemic diarrhea virus, PEDV)、猪德尔塔冠状病毒(porcine deltacorona virus, PDCoV)和猪轮状病毒A (porcine rotavirus type A,PoRVA)的四重实时荧光定量RT-PCR方法，本研究从NCBI数据库中分别下载我国流行的PEDV(77株)、TGEV(63株)和PDCoV(19株)的全长序列与85段PoRVA的VP6基因序列并进行同源性分析，基于相对保守序列设计引物和探针。通过筛选最适引物和探针，并对其反应条件和体系进行优化，确定方法的特异性、灵敏度及重复性，同时使用建立的方法对临床样品进行了检测。结果显示，该方法扩增效率高，C_t值与模板数量呈线性相关，R~2大于0.99;特异性强，对非洲猪瘟病毒(African swine fever, ASFV)、猪圆环病毒2型(porcine circovirus type 2,PCV2)、猪繁殖与呼吸综合征病毒(porcine reproductive and respiratory syndrome virus, PRRSV)、猪瘟病毒(classical swine fever virus, CSFV)和伪狂犬病病毒(pseudorabies virus, PRV)等主要猪群病原的核酸无检出；敏感性强，针对TGEV、PEDV、PDCoV和PoRVA的检测极限分别为10、20、20和50拷贝/μL;重复性好，组内和组间重复性检测变异系数均<1%。用建立的方法对109份腹泻样品进行检测，与行业标准检测结果进行比较，符合率为100%,具有较高的实用性。本研究建立的一种鉴别猪病毒性腹泻病原的四重实时荧光定量RT-PCR方法，具有灵敏度高、特异性强、重复性和稳定性好等优点，适用于病毒诊断和批量临床样品检测，为疾病防控、流行病学调查提供了技术支撑。
2025年11期 v.45;No.347 2325-2333+2342页 [查看摘要][在线阅读][下载 2553K] [下载次数：16 ] |[网刊下载次数：0 ] |[引用频次：0 ] |[阅读次数：4 ] - 黄恩福;辜千浪;柳玉新;陈君;宋德平;黄江南;谭佳;张帆帆;
为了解江西新型鹅星状病毒(goose astrovirus, GoAstV)的遗传变异情况及全基因组特征，本研究从典型雏鹅痛风病例样本成功分离到1株GoAstV,命名为JXNC1(GenBank登录号：PV524668),并对分离毒株进行全基因组测序和遗传特征分析。结果显示，JXNC1毒株可在LMH细胞上稳定传代，并可导致LMH细胞发生轻微的细胞病变。序列测定与分析显示该毒株基因组全长为7 173 bp,其亲缘关系与GZ2301(PP966939)参考毒株最近，属于GoAstV-Ⅱ基因型。JXNC1毒株与22株GoAstV-Ⅱ参考毒株全基因组核苷酸相似性为98.1%～98.8%,ORF2基因氨基酸相似性为97.6%～99.6%。同时分析结果显示，该毒株突变主要发生在ORF2基因，存在13个氨基酸位点突变，其中T630I为独特突变。动物回归试验显示，接种JXNC1毒株可致雏鹅脏器发生尿酸盐沉积，肝脏肝窦淤血扩张，部分肝细胞小灶性坏死；肾脏组织肾小管扩张，肾间质结缔组织增生。本研究成果为精准防控该病奠定了理论基础。
2025年11期 v.45;No.347 2334-2342页 [查看摘要][在线阅读][下载 2609K] [下载次数：31 ] |[网刊下载次数：0 ] |[引用频次：0 ] |[阅读次数：13 ] - 朱长城;郝世泽;马芊玥;李佳璇;姜艳平;崔文;乔薪瑗;
本研究旨在制备牛病毒性腹泻病毒(BVDV)高亲和性单克隆抗体(mAb),并建立一种双抗体夹心ELISA检测方法。采用差速超速离心法浓缩纯化病毒，免疫BALB/c小鼠，取脾细胞与SP2/0细胞融合制备杂交瘤细胞，有限稀释法进行亚克隆，通过间接ELISA方法筛选阳性杂交瘤细胞株。应用制备的单抗4D11作为捕获抗体，HRP标记的单抗3F3作为检测抗体，建立检测BVDV的双抗体夹心ELISA方法。ELISA叠加试验和单克隆抗体可变区基因序列测定结果表明，2株单抗识别不同的抗原表位。特异性试验表明，2株单抗均能特异性识别BVDV,而不与其他牛腹泻病毒发生交叉反应。间接免疫荧光试验和Western blot试验结果显示，单抗与病毒具有良好的反应性。本研究建立的双抗体夹心ELISA检测方法具有良好的特异性；敏感性试验显示，该方法最低可检测3.1×10~4 TCID_(50)的病毒量；重复性试验表明，批间变异系数为2.47%～7.44%,批内变异系数为1.71%～9.89%,显示重复性良好。该方法的建立可为BVDV快速诊断及防控提供有效的技术手段。
2025年11期 v.45;No.347 2343-2350页 [查看摘要][在线阅读][下载 1595K] [下载次数：37 ] |[网刊下载次数：0 ] |[引用频次：0 ] |[阅读次数：12 ] - 陈璐;朱明慧;刘玉峰;刘朔;陈雨腾;王海鸣;蒋文明;王静静;刘华雷;李阳;于晓慧;
为了解我国野生鸟类中禽副黏病毒(avian paramyxovirus, APMV)的流行现状及生物学特性，2023年在宁夏等8个省(自治区)共采集野鸟粪便样品1 384份，通过病毒分离和RT-PCR方法检测APMV感染情况，对阳性样品进行F基因序列扩增和遗传进化分析。结果显示：在1 384份野鸟粪便样品中共鉴定分离出10株APMV,个体阳性率为0.72%,其中4株为APMV-1,与美国鹅源APMV-1毒株在同一分支，同源性为93%～97.3%;3株为APMV-4,与俄罗斯鸭源APMV-4毒株和俄罗斯针尾鸭APMV-4毒株在同一分支，同源性为99.1%～99.5%;3株为APMV-6,与俄罗斯赤膀鸭APMV-6毒株在同一分支，同源性为98.7%～99.20%。4株代表性毒株对1日龄雏鸡脑内接种致病指数(ICPI)为0～0.48,对鸡表现为低致病力。上述结果进一步丰富了野鸟APMV的流行病学信息与生物学特性，为该病毒导致疾病的预警和科学防控提供了参考。
2025年11期 v.45;No.347 2351-2357页 [查看摘要][在线阅读][下载 2099K] [下载次数：5 ] |[网刊下载次数：0 ] |[引用频次：0 ] |[阅读次数：5 ] - 赵健成;黄令;徐丽华;袁秀芳;余斌;苏菲;叶十一;孙洪超;张晖;李军星;
副猪格拉瑟菌能引发猪Gl?sser’s病，但该菌的致病机制尚不完全明确。RuvB蛋白是AAA+超家族成员之一，副猪格拉瑟菌的RuvB基因对其毒力的影响尚不明确。本研究利用血清13型副猪格拉瑟菌ZJ1208和自杀质粒介导的自然转化方法构建了RuvB基因缺失菌株，并命名为ΔRuvB。通过生长速率、菌落形态和菌体染色、透射电镜观察、渗透压耐受、高温耐受、热休克、紫外抗性、荚膜多糖浓度测定、血清杀菌、小鼠模型毒力试验研究了RuvB基因缺失对ZJ1208菌株生物学特性的影响。结果显示，ΔRuvB的生长速度与亲本菌株无明显差异，透射电镜显示菌体长度明显增加，但ΔRuvB菌体表面OMV数量并未明显增多。此外，ΔRuvB的荚膜多糖形成能力和血清抗性显著下降，对紫外线和高温的耐受性降低，对渗透压和氧化应激的抗性显著降低。小鼠攻毒试验中，ΔRuvB与亲本菌株ZJ1208相比致死率降低20个百分点，表明ΔRuvB毒力有所减弱。结果表明，RuvB基因对副猪格拉瑟菌的环境适应能力有重要影响。
2025年11期 v.45;No.347 2358-2364页 [查看摘要][在线阅读][下载 1649K] [下载次数：9 ] |[网刊下载次数：0 ] |[引用频次：0 ] |[阅读次数：4 ] - 刘冰;刘广源;高楠楠;丁召亮;于杰;魏传禄;李海静;王华;董世山;董建宝;
马腺疫是规模化养驴场最主要的高发疫病之一，严重影响着我国驴产业的健康发展，疫苗接种是该病防制的有效途径，而我国目前尚没有该病的驴源菌株弱毒疫苗。本研究旨在为马腺疫弱毒疫苗的研发提供侯选菌株。本研究以驴源马链球菌马亚种(Streptococcus equi subspecies.equi,S.equi)野毒株为研究对象，利用同源重组基因敲除技术，将编码5-烯醇丙酮酰莽草酸-3-磷酸合成酶的aroA基因以及编码链球菌溶血素S毒素原的sagA基因进行人工敲除，获得双基因缺失菌株并对其毒力及部分生物学特性进行分析。本研究成功获得了S.equi双基因缺失菌株ΔsagA/aroA,其溶血性消失，连续培养60代后仍保持良好的遗传稳定性。电镜观察等分析发现其菌体形态与野毒株基本一致，生长速度显著慢于野毒株(P<0.000 1)。使用野毒株最小完全致死量的攻毒剂量1×10~5 CFU/0.2 mL进行毒力测定试验，结果证明双基因缺失株毒力下降明显。使用1×10~4 CFU/0.2 mL剂量的双基因缺失株进行免疫接种试验，ELISA抗体分析结果显示，接种后7 d抗体上升明显，在14和21 d时达到较高水平，试验组抗体水平显著高于对照组(P<0.000 1)。本研究证实马链球菌马亚种双基因缺失菌株ΔsagA/aroA可作为马腺疫弱毒疫苗研发的侯选菌株开展进一步研究。
2025年11期 v.45;No.347 2365-2371页 [查看摘要][在线阅读][下载 1466K] [下载次数：227 ] |[网刊下载次数：0 ] |[引用频次：0 ] |[阅读次数：2 ] - 柴以乐;王荟杰;韩建;顾知之;王伟;曹胜男;
黄盖鲽(Pseudopleuronectes yokohamae)是我国北方重要的海水经济鱼类，在养殖过程中易受到各种病原的侵袭。为探究迟缓爱德华菌对黄盖鲽的毒力作用及miRNA在黄盖鲽与迟缓爱德华菌互作中的作用机制，本研究对迟缓爱德华菌感染前后黄盖鲽幼鱼不同组织进行病理学分析，利用Illumina高通量测序技术对肝脏和肾脏中差异表达miRNA进行筛选、鉴定和功能分析。结果显示，感染迟缓爱德华菌后黄盖鲽鱼体出现破溃出血现象，肝脏和肾脏明显肿大，腹腔内出现腹水；显微观察发现感染后黄盖鲽肝细胞肿胀、空泡化，可见少许血细胞浸润，肾小体肿胀，有细胞裂解现象；miRNA测序分析结果显示，感染迟缓爱德华菌后黄盖鲽肝脏组织中显著上调的miRNA为24个、显著下调的miRNA为45个，肾组织中显著上调的miRNA为6个、显著下调的miRNA为58个；功能富集分析结果表明，差异表达miRNA在Toll和IMD信号通路、HIF-1信号通路、Rap1信号通路、MAPK信号通路和Apelin信号通路中富集显著，推测这些差异表达miRNA在黄盖鲽与迟缓爱德华菌互作过程中参与了宿主自身的物质代谢、病原体识别及免疫应答反应。本研究可为解析黄盖鲽细菌性疾病的发生及抗病机制提供基础依据。
2025年11期 v.45;No.347 2372-2379页 [查看摘要][在线阅读][下载 2496K] [下载次数：4 ] |[网刊下载次数：0 ] |[引用频次：0 ] |[阅读次数：5 ] - 贾琪;王丽;王寒竹;宋晶晶;孙婧;李辉;李峰;韩开顺;冯志新;李书光;
为建立一种可同时检测猪鼻支原体(Mhr)和猪肺炎支原体(Mhp)的操作简单、特异灵敏且适用于现场快速检测的诊断方法，以Mhr p37和Mhp p36基因序列为靶基因设计特异性引物和探针，通过筛选引物和探针、优化引物配比，建立双重LFD-RPA快速检测方法，并通过灵敏度、特异性、重复性和临床样本检测试验评价其检测效果。结果显示，建立的双重LFD-RPA检测方法在39℃下反应15 min即可完成扩增，其最佳引物配比为1.6∶0.8,最低检出限分别可达3.63、3.60拷贝/μL;重复性稳定；与巴氏杆菌、波氏杆菌、副猪嗜血杆菌、猪胸膜肺炎放线杆菌、大肠杆菌之间无交叉反应。本试验成功建立了一种双重LFD-RPA检测方法，该方法可同时检测Mhr和Mhp,且操作简单、特异灵敏，无需依赖专业设备，适用于开展Mhr和Mhp的现场快速诊断。
2025年11期 v.45;No.347 2380-2386页 [查看摘要][在线阅读][下载 1466K] [下载次数：21 ] |[网刊下载次数：0 ] |[引用频次：0 ] |[阅读次数：3 ] - 李亚欢;李超凡;陈梦阁;李新;王晓岑;张旭;宫鹏涛;张楠;李建华;
制备可表达斯氏艾美耳球虫天冬氨酸蛋白酶(aspartic protease, ASP)的重组腺相关病毒(rAAV9-ZsGreen1-EsASP),并探究其体外活性。通过PCR扩增EsASP基因，利用同源重组法将重组腺相关病毒载体pAAV-IRES-ZsGreen1与EsASP基因相结合，构建pAAV-ZsGreen1-EsASP表达质粒；采用脂质体转染法将pAAV-ZsGreen1-EsASP表达质粒、pHelper和pAAV-RC9质粒共转染至HEK-293T细胞中，包装并生产出能够表达EsASP蛋白的重组腺相关病毒rAAV9-ZsGreen1-EsASP;利用氯仿处理-PEG/NaCl沉淀-氯仿抽提法纯化rAAV9-ZsGreen1-EsASP,通过银染法鉴定病毒纯度，TEM观察病毒形态，qPCR法检测病毒滴度；进一步将纯化的重组病毒感染HEK-293T细胞，通过观察绿色荧光蛋白ZsGreen1和Western blot法检测EsASP的表达情况。结果显示双酶切及DNA测序证明EsASP基因已成功构建到pAAV-IRES-ZsGreen1表达质粒中，HEK-293T细胞表达绿色荧光蛋白提示共转染成功，细胞蛋白制样Western blot结果显示EsASP蛋白成功表达；纯化的重组病毒衣壳蛋白呈现3条清晰条带(VP1-3);rAAV9-ZsGreen1-EsASP大小均一，20 nm左右且滴度高于1.0×10~(12) vg/mL;重组病毒感染HEK-293T细胞后观察到绿色荧光蛋白表达，Western blot检测到EsASP的表达。结果表明成功获得了较高纯度且具有体外感染活性的rAAV9-ZsGreen1-EsASP,为研制新型斯氏艾美耳球虫病疫苗提供物质基础。
2025年11期 v.45;No.347 2387-2393页 [查看摘要][在线阅读][下载 1743K] [下载次数：87 ] |[网刊下载次数：0 ] |[引用频次：0 ] |[阅读次数：3 ] - 范文雨;顾兰英;张秦川;李世义;张彦兵;孙延鸣;
热休克因子1(HSF1)是细胞应激反应和蛋白质稳态维持中的核心转录因子，广泛参与细胞生长、分化、代谢等生物学过程。本研究旨在通过生物信息学分析和免疫学等技术，设计绵羊HSF1蛋白抗原肽并制备多克隆抗体，并验证其在绵羊肺和睾丸组织中的应用效果。首先，通过生物信息学手段对绵羊HSF1基因进行了序列、结构及进化分析，预测了关键的抗原表位。然后，选择适合的多肽片段进行合成，加入弗氏完全佐剂或不完全佐剂佐剂乳化并免疫新西兰兔。通过间接ELISA、Western blot以及免疫组化(IHC)试验验证该抗体的特异性与有效性。结果显示，HSF1蛋白长度564 aa,相对分子质量60.76 kDa,理论等电点pI为5.32,具有亲水性，不稳定。系统发育树结果表明HSF1在牛科多数成员以及人、小鼠、大鼠等物种中高度保守，但存在局部位点的差异，其中绵羊HSF1与山羊亲缘关系最近，其次是加拿大盘羊和鬣羚。绵羊HSF1磷酸化位点总体趋向于中间及C端密集分布，与人HSF1预测结果整体基本一致，局部的分布存在一定差异。制备的多克隆抗体在识别绵羊HSF1蛋白方面效价超过1∶8 000,Western blot试验验证条带清晰，分子量大小相符，表明获得的多克隆抗体具有良好的特异性；且在绵羊肺组织和睾丸组织中能够检测到HSF1的表达与特异性分布。此研究成功制备基于绵羊HSF1抗原肽的HSF1多克隆抗体，首次检测了盘羊杂交羊睾丸和肺组织HSF1免疫组化分布，为进一步探讨HSF1在盘羊杂交羊机体中的生理作用和在应激反应、疾病防治中的潜在应用提供了重要工具。
2025年11期 v.45;No.347 2394-2404页 [查看摘要][在线阅读][下载 4041K] [下载次数：25 ] |[网刊下载次数：0 ] |[引用频次：0 ] |[阅读次数：1 ]
- 杨悦;李铭;王静怡;张惠晶;黄庆年;宋世豪;徐闯;
采用体外细胞培养，探讨了香芹酚对脂多糖诱导的奶牛乳腺上皮细胞炎症反应及内质网应激的调控作用。通过Western blot技术对比分析健康与患病乳腺组织，发现乳腺炎样本中NF-κB通路相关蛋白和内质网应激标志蛋白表达水平显著升高(P<0.05)。设置空白对照组和不同浓度香芹酚组(50、100、250、500、750、1 000μmol/L),培养24 h后采用CCK-8法检测细胞增殖情况。使用LPS(10 mg/L)刺激MAC-T细胞(奶牛乳腺上皮细胞系)12 h构建炎症模型，测定炎症相关基因IL-6、IL-1β及TNFα的转录水平，IL-6、IL-1β和TNFα的mRNA表达水平。将MAC-T细胞分为低、中、高剂量香芹酚预处理组，分别用不同浓度香芹酚预处理12 h,随后加入LPS刺激12 h。运用分子对接方法分析香芹酚与内质网应激关键蛋白GRP78的相互作用。随后通过实时荧光定量PCR(qPCR)分析炎性因子(如IL-6、IL-1β、TNFα)mRNA表达情况，同时使用Western blot分析NF-κB通路蛋白(p-IκB、p NF-κB p65)和内质网应激相关蛋白(如p-PERK、p-IRE1α、ATF6、GRP78、CHOP)的表达水平。Western blot和qPCR结果表明，香芹酚确可通过抑制NF-κB信号通路和内质网应激，缓解了LPS诱导的炎症反应和细胞损伤。
2025年11期 v.45;No.347 2447-2456页 [查看摘要][在线阅读][下载 1913K] [下载次数：15 ] |[网刊下载次数：0 ] |[引用频次：0 ] |[阅读次数：4 ] - 陈诗璠;范维;张博;王炎;唐修凯;王唯;张新玉;孙福亮;
基于网络药理学、分子对接及试验验证探讨黄芩苷(baicalin, BC)对肺炎克雷伯菌(Klebsiella pneumoniae, KP)感染导致肾损伤的治疗效果和作用机制。通过体外试验测定BC对KP的抑菌活性；建立小鼠肾损伤模型，通过眼观和病理组织学检查初步验证治疗效果；采用ELISA方法检测TNF-α、IL-10、IL-1β 3种促炎因子；利用网络药理学技术，通过PubChem、TCMSP、STRING、Cytoscape、AutoDocks等数据库和软件进行分析，构建PPI网络以及进行GO功能和KEGG富集分析；利用分子对接技术，评估药物与核心靶点的结合活性，推测药物作用信号通路。结果表明：在体外试验中，2 048 mg/L BC对KP有较好的抑菌效果；肉眼观察及病理组织学结果显示BC对KP感染造成的肾损伤治疗效果明显；相比于感染组，BC治疗组的促炎因子TNF-α、IL-10、IL-1β含量均显著下降(P≤0.05)。通过网络药理学筛选出24个核心靶点，11条作用通路，BC与所获取的核心靶点TP53、PTGS2、MAPK1、MAPK8、TNF、BCL2和IGF1分子对接稳定，推测BC可能通过PI3K-Akt、MAPK、HIF-1、NF-kappa B等信号通路发挥抗菌、抗炎作用。本研究为进一步研究BC对肾损伤的作用机制奠定了基础。
2025年11期 v.45;No.347 2457-2465页 [查看摘要][在线阅读][下载 3203K] [下载次数：28 ] |[网刊下载次数：0 ] |[引用频次：0 ] |[阅读次数：4 ] - 叶彦;张玉珠;杜崇涛;谢光洪;郑慧华;
犬乳腺肿瘤(CMT)是母犬癌症相关死亡的最常见疾病因素之一，因其高复发性和转移性导致传统手术疗法面临挑战。天然化合物橄榄苦苷Ole与多种现象，如寿命延长、降低疾病发病率和死亡率密切相关，然而其对CMT的影响尚不清楚。因此，本研究开展了以下试验以探究Ole是否对犬乳腺肿瘤的发展产生影响：利用划痕试验、流式细胞术、RT-qPCR和蛋白免疫印迹等技术，检测不同浓度的Ole对CHMm细胞的活力、迁移能力、凋亡及相应蛋白Bax和BCL-2的表达水平和肿瘤相关基因mRNA的表达等情况的影响，同时探究其作用机制。结果显示，将Ole作用CMT细胞CHMm后，其激活了PI3K/AKT信号通路，诱导了相关蛋白的磷酸化，显著抑制了p-PI3K和p-AKT蛋白的表达水平。同时，Ole显著抑制了CMT细胞的存活、迁移和增殖能力。此外，与细胞凋亡密切相关的蛋白Bax和BCL-2的表达以及一些与肿瘤相关的基因mRNA的表达均受到了显著的调控，表明Ole介导PI3K/AKT信号通路有效诱导了CMT细胞的凋亡。这一研究提示Ole有望成为治疗乳腺癌的关键药物，同时为开发出针对CMT的有效治疗方法提供了关键的靶点。
2025年11期 v.45;No.347 2466-2473页 [查看摘要][在线阅读][下载 1802K] [下载次数：504 ] |[网刊下载次数：0 ] |[引用频次：0 ] |[阅读次数：4 ] - 安天慧;刘鸿霖;王海妍;程佳鑫;王俊淇;夏成;徐闯;陈媛媛;
旨在探讨高脂饮食诱导的肥胖与常见霉菌毒素黄曲霉毒素B1(aflatoxin B1,AFB1)联合作用对肝脏氧化应激及炎症反应的影响机制。将36只体质量相近的4周龄SD大鼠随机分成4组，每组9只，分别为：空白对照组(基础日粮)、AFB1组(0.4 mg/kg AFB1+基础日粮)、HFD组(高脂日粮)、HFD+AFB1组(高脂日粮+0.4 mg/kg AFB1)。通过苏木精-伊红(HE)染色和油红O染色观察组织病理学变化及脂肪沉积情况；通过试剂盒检测氧化应激因子和炎症相关因子的含量；并利用Western blot检测Nrf2-Keap1信号通路相关因子的蛋白相对表达水平。HE染色结果显示，AFB1组肝细胞广泛性水样变性，细胞核萎缩破裂，炎症细胞浸润，成纤维组织增生。HFD组出现肝细胞脂肪变性，胞浆出现脂滴浸润，门管区可见肝纤维化，纤维化区域肝细胞坏死，并伴随炎症细胞浸润，出现脂褐素颗粒。而HFD作用于AFB1组时，肝脏组织间质及间隙异常的状态进一步加剧，出现了大量的脂滴。油红O染色结果显示，HFD组的肝组织可见大量颜色较深的红色脂滴，呈条索状融合。AFB1组大鼠的肝组织内也能观察到红色脂滴，但数量和程度都明显少于HFD组。HFD+AFB1组大鼠的肝组织红色脂滴的数量和程度都分别高于AFB1组和HFD组；HFD通过升高ROS、MDA水平和降低抗氧化应激因子CAT、SOD、Nrf2、HO-1、NQO1、GCLC的表达加重了AFB1诱导的氧化应激。此外，HFD与AFB1的联合作用进一步显著提升了体内炎症因子IL-2、IL-6、TNF-α、IL-1β水平。综上所述，HFD处理通过Nrf2-keap1信号通路显著加剧了AFB1诱导的大鼠肝脏氧化应激和炎症反应。
2025年11期 v.45;No.347 2474-2480+2517页 [查看摘要][在线阅读][下载 2512K] [下载次数：21 ] |[网刊下载次数：0 ] |[引用频次：0 ] |[阅读次数：3 ] - 许杰;江康峰;胡元;王奎;赵依一;田艳;张馨元;潘秉海;周青青;李小兵;
脂肪肝是围产期奶牛常见的营养代谢病，以血液中非酯化脂肪酸(NEFA)含量升高、脂代谢紊乱为特征。高浓度的NEFA会损伤线粒体，促进活性氧(ROS)的释放。同时，蓄积在肝细胞中的脂质发生脂质过氧化，产生ROS等自由基，导致肝脏发生氧化应激。当细胞内ROS水平升高时，硫氧还蛋白互作蛋白(TXNIP)会激活核苷酸结合寡聚化结构样蛋白3(NLRP3)炎性小体，而氧化应激可以调节细胞焦亡状态，但尚不清楚肝细胞氧化应激产生的ROS能否通过TXNIP/NLRP3通路介导细胞焦亡引发奶牛肝损伤。本研究采集健康奶牛和脂肪肝奶牛肝脏组织样品，并使用NEFA构建脂肪肝细胞模型，通过试剂盒检测甘油三酯(TG)含量和氧化应激相关指标；通过Western blot检测NLRP3炎性小体激活、NF-κB炎性通路及细胞焦亡相关蛋白的表达水平；通过荧光定量PCR检测炎性因子mRNA的相对表达水平。结果显示，与健康(对照)组相比，脂肪肝组织和脂肪肝细胞模型的TG含量显著升高(P<0.05);SOD、GSH-Px活性显著降低(P<0.05);TXNIP、NLRP3、GSDMD-N、Caspase-1蛋白表达水平显著上调(P<0.05),结果表明，发生脂肪肝时NLRP3炎性小体激活并引发细胞焦亡。使用NEFA和抗氧化剂(NAC)构建脂肪肝细胞抗氧化模型，结果显示，与脂肪肝细胞模型相比，肝细胞内ROS含量显著降低，肝细胞氧化应激、NLRP3炎性小体激活与细胞焦亡均有所缓解。综上所述，本研究发现奶牛发生脂肪肝时，肝脏发生氧化应激产生的ROS可以通过TXNIP/NLRP3通路介导细胞焦亡，引发脂肪肝奶牛肝损伤。
2025年11期 v.45;No.347 2481-2489页 [查看摘要][在线阅读][下载 2175K] [下载次数：9 ] |[网刊下载次数：0 ] |[引用频次：0 ] |[阅读次数：2 ] - 崔甜甜;肖肖;吴超;胡雅诗;张玲玲;杨彩梅;
为探究腺苷蛋氨酸(S-Adenosylmethionine, SAM)对四氯化碳(CCl_4)诱导小鼠肝损伤的影响，本试验将60只C57BL/6小鼠随机分为CON组、CCl_4组、低剂量组(CCl_4+SAM-L,50 mg/kg SAM)、中剂量组(CCl_4+SAM-M,100 mg/kg)和高剂量组(CCl_4+SAM-M,200 mg/kg)。除CON组之外，其他各组小鼠腹腔注射CCl_4(10 mL/kg, 0.2%),CON组小鼠注射等体积橄榄油，每周3次，连续注射4周，建立小鼠肝损伤模型。同时低、中、高剂量组组小鼠灌胃100μL相应剂量的SAM,CON组和CCl_4组灌胃等体积PBS,连续灌胃4周。结果表明，CCl_4促进肝脏纤维化，提高血清ALT、AST和TBIL水平(P<0.05),灌胃不同剂量SAM均显著缓解肝脏纤维化损伤，降低血清ALT、AST和TBIL水平(P<0.05)。与CON组相比，CCl_4显著降低肝脏T-AOC、SOD、CAT和GSH-Px水平(P<0.05),提高MDA水平(P<0.05);与CCl_4组相比，CCl_4+SAM组小鼠肝脏T-AOC、SOD、CAT和GSH-Px水平显著提高(P<0.05),MDA水平显著降低(P<0.05)。与CON组相比，CCl_4组小鼠肝脏IL-6、IL-1β和TNF-α水平显著提高(P<0.05);与CCl_4组相比，不同剂量SAM均能显著降低小鼠肝脏IL-6、IL-1β和TNF-α水平(P<0.05)。与CON组相比，CCl_4组小鼠肝脏Nrf2、NQO-1和HO-1基因表达降低(P>0.05),Keap1基因表达显著提高(P>0.05);与CCl_4组相比，中、高剂量SAM显著提高小鼠肝脏Nrf2、NQO-1和HO-1基因表达(P<0.05),降低Keap1基因表达(P>0.05)。与CON组相比，CCl_4组小鼠盲肠中乙酸、丙酸、丁酸含量显著降低(P<0.05);与CCl_4组相比，高剂量SAM组小鼠丙酸和丁酸含量显著提高(P<0.05)。微生物分析发现，CCl_4显著降低阿克曼菌属(Akkermansia)和普雷沃菌属(Prevotellaceae＿NK3B31＿group)相对丰度(P<0.05),改变肠道微生物组成。以上结果表明，SAM在一定程度上调节Nrf2抗氧化信号通路的基因表达，增加肠道SCFAs含量，调节肠道微生物结构，进而缓解CCl_4引起的肝损伤、氧化应激和炎症反应。本试验为SAM用于治疗和缓解药物性肝损伤提供了参考和理论依据。
2025年11期 v.45;No.347 2490-2499页 [查看摘要][在线阅读][下载 2770K] [下载次数：32 ] |[网刊下载次数：0 ] |[引用频次：0 ] |[阅读次数：3 ] - 陈明珍;丁如欣;万志影;葛延松;郑家三;
急性胰腺炎(acute pancreatitis, AP)是犬常见的严重消化系统疾病，其高复发率和并发症对犬的健康构成严重影响。本研究的目的是探究脂肪干细胞(adipose derived stem cells, ADSCs)调控CHOP/Bcl-2通路缓解犬急性胰腺损伤的机制。比格犬20只，随机分为假手术(Sham)组、AP模型(AP)组、ADSCs治疗(ADSCs)组和条件培养基治疗(CM)组，AP、ADSCs和CM组经胰胆管注射胰蛋白酶和牛磺胆酸钠混合溶液建立AP模型，ADSCs组于术后立即静脉注射犬ADSCs和CM制剂，术后24 h采集胰腺组织，通过病理组织学、透射电镜、免疫印迹、荧光定量、免疫荧光、TUNEL法检测CHOP/Bcl-2通路的变化。结果显示，AP引起胰腺组织明显的间质水肿、出血、炎性细胞浸润，细胞染色质固缩、内质网肿胀，GRP78、CHOP表达升高，Bcl-2表达下调，BAX、JNK、Caspase-3和Caspase-12表达升高，细胞凋亡率增加，ADSCs和CM治疗都能够减轻胰腺组织病理损伤，CHOP以及细胞凋亡相关标志物表达下调，抗凋亡蛋白Bcl-2表达上调，细胞凋亡率降低。本研究结果表明，ADSCs通过调控CHOP/Bcl-2通路，缓解胰蛋白酶和牛磺胆酸钠诱导的犬急性胰腺损伤。靶向调控CHOP转录活性可能为AP提供一种新的治疗方案。
2025年11期 v.45;No.347 2500-2506页 [查看摘要][在线阅读][下载 2206K] [下载次数：11 ] |[网刊下载次数：0 ] |[引用频次：0 ] |[阅读次数：3 ] - 唐继鹏;韩盛宇;贾枭晨;邵广;徐闯;夏成;
本次调查旨在探究规模化牧场奶牛低钙血症发生状况及其与生产性能、疾病和淘汰的关系。为此，我们选择了全国81家规模化牧场，对其奶牛的泌乳性能、繁殖性能、疾病状况、淘汰情况进行了问卷调查，并运用SPSS软件对牧场生产数据进行了统计分析。调查结果显示，不同牧场奶牛低钙血症的发病率存在显著差异。亚临床型低钙血症的发病率约为临床型的2倍，且约30%的牧场低钙血症发病率处于较高水平。低钙血症对牧场奶牛泌乳性能无明显影响，但发病率高会降低受胎率，增加隐性乳房炎、酮病和常见内科病的发病率，增加全年死淘率和成母牛死淘率。此外，临床、亚临床和总体的低钙血症发病率对繁殖、疾病如乳房炎、酮病等疾病的发生率的影响存在差异，其中临床型低钙血症的危害更为严重。综上所述，低钙血症仍是我国规模化牧场奶牛健康和生产性能的重要威胁因素之一。对于发病率较高的牧场，建议开展奶牛分娩前后血钙的定期监测，并深入调查相关致病因素，从而为完善低钙血症的预防措施、降低疾病发生率、提高繁殖效率和减少淘汰率提供科学依据。
2025年11期 v.45;No.347 2507-2517页 [查看摘要][在线阅读][下载 1299K] [下载次数：12 ] |[网刊下载次数：0 ] |[引用频次：0 ] |[阅读次数：4 ]
- 刘倩;陈润秋;吴梦;葛良鹏;
非洲猪瘟(African swine fever, ASF)是由非洲猪瘟病毒(African swine fever virus, ASFV)引起猪的一种高致死率的传染病，其感染和免疫逃逸机制复杂，全球范围内缺少该病的特效药物和安全有效的疫苗产品。因此，准确、快速检测该病至关重要。本文从核酸检测技术和免疫学检测技术等2个方面综述国内外ASFV检测技术的研究进展，以期为不同环境条件下开展ASFV检测工作提供一定的诊断思路和技术支持。
2025年11期 v.45;No.347 2518-2524页 [查看摘要][在线阅读][下载 1244K] [下载次数：50 ] |[网刊下载次数：0 ] |[引用频次：0 ] |[阅读次数：15 ] - 杨强;李永锋;宋鑫;仇华吉;孙元;
无针注射是一种新兴的疫苗递送技术，其通过高压射流将疫苗递送至皮内或皮下组织。近年来，该技术在医学与兽医学领域的应用取得了显著进展。与有针注射相比，疫苗无针注射的核心优势主要体现在：接种效率显著提升，特别适用于大规模疫苗接种；减少动物应激；提高接种舒适度；更有效地诱导免疫应答；规避针头污染风险，降低感染率。然而，无针注射也面临着一些挑战，例如设备成本较高、操作复杂以及市场认可度有待提高等问题。未来的研究方向应聚焦于新型疫苗、新型佐剂的研发以及无针注射器的设计与优化，以提高其在不同群体中的普适性和安全性。综上所述，无针注射通过提升接种舒适度与免疫效能，为疫苗递送系统革新提供了重要解决方案，并为其产业化发展提供理论依据和技术路线参考。
2025年11期 v.45;No.347 2525-2534页 [查看摘要][在线阅读][下载 1592K] [下载次数：21 ] |[网刊下载次数：0 ] |[引用频次：0 ] |[阅读次数：2 ] - 孔翠滢;黄钊;张桂红;周沛;
非洲猪瘟(African swine fever, ASF)是由非洲猪瘟病毒(African swine fever virus, ASFV)引起的高致死性、出血性烈性传染病。2018年，ASF传入我国并蔓延，给我国养猪业带来了巨大经济损失。ASFV是非洲猪瘟病毒科(Asfarviridae),非洲猪瘟病毒属(Asfivirus)的唯一成员，其基因组大小介于170～190 kbp之间，病毒粒子结构复杂。现有研究发现，ASFV具有复杂的逃逸宿主免疫系统策略，特别是通过不同机制调控宿主干扰素(Interferon, IFN)信号通路的不同节点，实现病毒的持续感染。本文将对ASFV蛋白调控Ⅰ型、Ⅱ型以及Ⅲ型干扰素信号通路的相关研究进行综述，不仅有助于揭示ASFV的致病机制，也为疫苗，特别是基因缺失疫苗的研发提供了重要理论依据。
2025年11期 v.45;No.347 2535-2547页 [查看摘要][在线阅读][下载 1848K] [下载次数：14 ] |[网刊下载次数：0 ] |[引用频次：0 ] |[阅读次数：2 ] - 张亚萍;张聪聪;陈功;侯玲玲;许静漪;方钱海;黄越川;李斌;李敏;徐青;王雅春;
奶业是全球农业的重要组成部分，对食品安全和经济发展至关重要，我国高原地区的奶业在满足居民营养需求、推动农牧民增收和促进区域经济发展方面发挥着重要作用。然而，高原低氧、低气压和恶劣气候条件给奶牛的生存和健康带来了巨大挑战。本文综述了高原环境下奶牛生理特征、代谢表现、生产性能和健康状况的变化，为奶牛高原适应性表型的鉴定提供了思路，阐述了与这些性状变化相关的遗传和表观遗传机制，展望了奶牛高原适应性研究的方向和策略，以期为高原地区奶牛品种改良和选育奠定理论基础。
2025年11期 v.45;No.347 2548-2556页 [查看摘要][在线阅读][下载 1800K] [下载次数：13 ] |[网刊下载次数：0 ] |[引用频次：0 ] |[阅读次数：6 ] - 胡楠;孙艺熙;杨晓伟;
PI3K/Akt信号通路作为细胞内重要的调控网络，广泛参与细胞存活、增殖、代谢及免疫调节等生理过程。当前研究已从基础分子机制解析拓展到宿主-病原体互作调控网络的新阶段，重点揭示病原体通过劫持或抑制该通路以逃避宿主免疫清除的分子策略，以及探索开发靶向该通路的特异性抗感染疗法。现通过介绍PI3K/Akt的组成及其通路激活过程，归纳总结其在细菌性病原体感染过程中介导免疫防御、免疫逃逸及宿主组织损伤的具体机制，同时探讨该通路作为抗感染治疗靶点的潜在价值，旨在为深入理解细菌性感染的发病机制及开发靶向宿主PI3K/Akt通路的非抗生素疗法提供理论参考。
2025年11期 v.45;No.347 2557-2568页 [查看摘要][在线阅读][下载 2260K] [下载次数：357 ] |[网刊下载次数：0 ] |[引用频次：0 ] |[阅读次数：3 ] - 熊秋婷;闫智豪;曹雪峰;方仁东;刘明远;胡晓祥;
病原微生物是引起人兽共患传染病的直接原因，其中大部分对畜牧养殖业危害严重，不仅会造成动物的大量死亡及畜产品的损失，而且对人类健康构成重大威胁。CRISPR/Cas系统因具有独特的反式切割活性而广泛应用于病原微生物核酸检测领域，研究人员利用纳米材料良好的光学特性将其与CRISPR/Cas系统结合开发出了许多可视化生物传感器，不仅能够增强信号输出，同时也能大幅减少检测时间及检测成本。本文分别围绕近年来与CRISPR/Cas系统结合应用较为广泛的氧化石墨烯、金纳米颗粒、MoS_2纳米片、金属有机框架、量子点等5种纳米材料展开介绍，综述了其各自的物理特性以及在CRISPR/Cas检测病原微生物中的具体研究内容，同时对不同检测方法间的优缺点进行简要概括，最后，对纳米材料在CRISPR/Cas检测系统中的应用前景进行展望，以期为促进病原微生物分子诊断的发展提供参考依据。
2025年11期 v.45;No.347 2569-2578页 [查看摘要][在线阅读][下载 1314K] [下载次数：44 ] |[网刊下载次数：0 ] |[引用频次：0 ] |[阅读次数：10 ] 下载本期数据