- 王静;李怡;钟意;李青阳;张兴翠;宋振辉;
为探究猪流行性腹泻病毒(PEDV)-LJX毒株对人小肠上皮细胞(FHs 74 Int)的易感性，本研究以FHs 74 Int细胞为模型，首先通过RT-qPCR和Western blot检测PEDV-LJX感染后对常见人冠状病毒受体ACE2、APN、DPP4表达的影响及抗体阻断法确定阻断ACE2、APN、DPP4和唾液酸后对PEDV复制的影响，同时结合蛋白组学分析并验证ROCK2对PEDV复制的影响。结果显示，PEDV-LJX感染FHs 74 Int后，对ACE2、APN、DPP4基因及蛋白表达无显著影响；抗体阻断ACE2、APN、DPP4后PEDV N基因拷贝数无显著变化，但是唾液酸酶预处理后，PEDV N基因拷贝数显著升高。感染PEDV-LJX后ROCK2基因和蛋白水平表达量显著升高，与蛋白组学结果一致；干扰ROCK2后PEDV N基因拷贝数及蛋白表达量显著降低。结果表明，ACE2、DPP4、APN及唾液酸并非PEDV-LJX感染FHs 74 Int细胞的受体，唾液酸可以抑制PEDV复制，ROCK2可以促进PEDV复制。
2026年03期 v.46;No.351 469-477页 [查看摘要][在线阅读][下载 1990K] [下载次数：1 ] |[网刊下载次数：0 ] |[引用频次：0 ] |[阅读次数：7 ] - 马永玲;刘可易;李国艳;贾濠键;张康;陈国昌;王新东;陈廷豪;张琬琳;朱莹;韦祖樟;
为探究欧洲型猪繁殖与呼吸综合征病毒(PRRSV-1)在我国的流行特征与遗传进化规律，本研究对2023年广西某猪场疑似PRRS临床样本进行RT-PCR检测。筛选出PRRSV-1阳性样品，经接种猪肺泡巨噬细胞，成功分离获得1株PRRSV-1毒株(命名为GXGG20230626)。对该毒株全基因组进行扩增、克隆与序列比较分析，结果显示，该毒株全基因组长度为14 964 nt(不包括polyA尾),与PRRSV-1经典毒株(Lelystad virus)以及泰国分离株01CB1的核苷酸序列相似性分别为89.9%和89.8%。值得注意的是，GXGG20230626 nsp2蛋白存在独特的缺失模式(281～300 aa和323～340 aa),其GP5蛋白中和表位也与我国PRRSV-1主流亚群不同。结合国内外PRRSV参考毒株序列进行遗传进化分析比较系统进化分析显示，GXGG20220626属于PRRSV-1亚型1毒株，独立于我国现有PRRSV-1流行毒株，形成了新的进化亚群。重组分析结果显示该毒株为非重组病毒。结果表明，我国存在PRRSV-1新型独立进化亚群，揭示了PRRSV-1在我国的持续进化动态，为PRRSV的分子流行病学监测和疫苗研发提供了理论依据。
2026年03期 v.46;No.351 478-485页 [查看摘要][在线阅读][下载 3393K] [下载次数：2 ] |[网刊下载次数：0 ] |[引用频次：0 ] |[阅读次数：2 ] - 李佳琪;屈豫欣;于少雄;李素;仇华吉;
采用同源重组技术构建了非洲猪瘟病毒(African swine fever virus, ASFV)MGF110-3L基因缺失(ASFV-△MGF110-3L)重组病毒，通过检测该重组病毒在原代猪肺泡巨噬细胞(porcine alveolar macrophages, PAMs)中的复制水平，探究其在ASFV复制周期中的功能。结果显示，MGF110-3L基因缺失重组病毒的复制动力学与其亲本病毒ASFV-WT无差异，表明缺失MGF110-3L基因不影响病毒复制。进一步将ASFV-WT和ASFV-△MGF110-3L分别感染PAMs,并于感染后4、12、20 h收集样品，进行转录组测序(RNA-seq),发现缺失MGF110-3L显著促进IFN-β、CCL2、CCL4等细胞因子基因的转录；KEGG通路分析显示，与ASFV-WT感染组相比，ASFV-△MGF110-3L感染组中差异表达基因主要与细胞因子-细胞因子受体之间的相互作用相关。本研究通过构建ASFV-△MGF110-3L缺失毒，并对其与野毒进行转录组分析发现，MGF110-3L基因作为ASFV的复制非必需基因具有拮抗细胞因子表达的功能，结果不仅为阐明MGF110的生物学功能提供科学数据，还为深入揭示ASFV拮抗宿主细胞天然免疫反应的分子机制提供了参考。
2026年03期 v.46;No.351 486-493+507页 [查看摘要][在线阅读][下载 2834K] [下载次数：1 ] |[网刊下载次数：0 ] |[引用频次：0 ] |[阅读次数：3 ] - 樊高成;付艳慧;杨玉莹;罗玉子;仇华吉;
为评估不同消毒剂对非洲猪瘟病毒(African swine fever virus, ASFV)核酸的降解能力，本研究依据农业农村部印发的《非洲猪瘟疫情应急实施方案(第6版)》及《关于在非洲猪瘟防控工作中做好消毒剂选择工作的通知》,选取氢氧化钠、过硫酸氢钾复合盐、戊二醛、聚维酮碘、三氯异氰尿酸钠这5类猪场常用消毒剂开展研究。通过荧光定量PCR(quantitative PCR,qPCR)方法评价上述5类消毒剂对不同滴度ASFV(10~(5.5)、10~(3.5)、10~(1.5) TCID_(50)/mL)核酸的降解效果，进一步测试了消毒剂在不同浓度(1、5、10倍推荐浓度)、作用时间(1、2.5、5 h)、温度(4、25、37℃)及模拟有机物污染(0.3%、3%牛血清白蛋白(bovine albumin, BSA))条件下对10~(3.5) TCID_(50)/mL ASFV核酸的降解效果。结果显示，在推荐浓度下，仅氢氧化钠(1∶100稀释)和过硫酸氢钾复合盐(1∶200稀释)在25℃、模拟有机物污染(0.3%BSA)情况下作用1 h可完全降解10~(1.5) TCID_(50)/mL ASFV的核酸(无扩增信号);当消毒剂浓度提升至5倍或10倍推荐浓度时，过硫酸氢钾复合盐(1∶40与1∶20稀释)和三氯异氰尿酸钠(1∶120与1∶60稀释)在上述条件下可完全降解10~(3.5) TCID_(50)/mL ASFV的核酸(无扩增信号)。此外，无论提高消毒剂作用温度、延长作用时间或改变模拟有机物污染度，相较于其他4种消毒剂，氢氧化钠对ASFV核酸的降解效果最强(Ct值的增幅均高于其他4种消毒剂)。结果表明，相较于戊二醛和聚维酮碘，氢氧化钠(≥1∶100稀释)、高浓度的过硫酸氢钾复合盐(≥1∶40稀释)和三氯异氰尿酸钠(≥1∶120稀释)对ASFV核酸的降解效果最佳，推荐作为qPCR评估消毒效果的核心消毒剂。本研究为非洲猪瘟防控实践中的分析消毒效果提供了技术参考。
2026年03期 v.46;No.351 494-499页 [查看摘要][在线阅读][下载 1177K] [下载次数：2 ] |[网刊下载次数：0 ] |[引用频次：0 ] |[阅读次数：3 ] - 高婕棋;李绍梅;付文贵;赵自亮;刘明妮;牟豪;郑华;张邑帆;白运川;吕林丹;杨柳;宋振辉;
为建立可同步快速检测猪轮状病毒(PoRV)与猪流行性腹泻病毒(PEDV)的双重实时荧光重组酶介导等温扩增方法(RF-RAA),选取PoRV的NSP4基因及PEDV的M基因保守区域为检测靶标，构建串联重组质粒pUC57-NSP4-M,并设计合成特异性引物和探针。通过实时检测荧光信号，优化反应条件，建立双重RF-RAA检测方法，并对其特异性、敏感性及重复性进行系统评价。进一步应用该方法对临床腹泻样品进行检测，并与国家标准RT-PCR方法(GB/T 36871-2018)进行比较，分析两者检测结果的符合率。结果显示，成功建立了双重RF-RAA检测方法，在42℃恒温条件下反应20 min即可完成检测。敏感性试验结果表明，该方法对PoRV和PEDV检测限均达到10~1拷贝/μL;特异性结果显示，该方法与猪传染性胃肠炎病毒(TGEV)、猪德尔塔冠状病毒(PDCoV)及猪伪狂犬病病毒(PRV)等常见猪腹泻病原体核酸检测无交叉反应。利用所建立的双重RF-RAA与国家标准RT-PCR方法分别检测140份猪粪便样品，2种方法检出的PoRV阳性率均为13.57%(19/140),PEDV阳性率为10.71%(15/140),PoRV/PEDV混合感染阳性率为33.57%(47/140),且所有阳性样本检测结果100%符合。结果表明，本研究成功建立了灵敏、特异和快速的双重RF-RAA检测方法，为临床上PoRV与PEDV混合感染的检测提供了技术支撑。
2026年03期 v.46;No.351 500-507页 [查看摘要][在线阅读][下载 1784K] [下载次数：5 ] |[网刊下载次数：0 ] |[引用频次：0 ] |[阅读次数：1 ] - 李佳美;杨雪宸;许明月;尹雯静;杨国宇;郑悦亭;张维;
旨在表达并纯化猪圆环病毒3型(porcine circovirus 3,PCV3)的衣壳(capsid)蛋白，并评价其作为免疫原免疫小鼠后的免疫效果。采用大肠杆菌(E.coli)表达可溶性MBP-PCV3 Cap融合蛋白与SUMO-PCV3 Cap融合蛋白，经分别纯化后，以MBP-PCV3 Cap融合蛋白制备疫苗并免疫小鼠，随后开展免疫学评价。结果显示，成功表达并纯化出了可溶性MBP-PCV3 Cap与SUMO-PCV3 Cap蛋白。免疫学评价分析表明该蛋白能使小鼠产生较高水平的特异性抗体(IgG)与IL-4、IFN-γ细胞因子，并且能刺激小鼠脾细胞增殖。结果表明，本研究制备的PCV3疫苗可有效诱导小鼠产生特异性体液和细胞免疫反应，证实了该疫苗具有较强的免疫原性，为PCV3的防控提供了新的候选策略。
2026年03期 v.46;No.351 508-513+545页 [查看摘要][在线阅读][下载 1393K] [下载次数：8 ] |[网刊下载次数：0 ] |[引用频次：0 ] |[阅读次数：4 ] - 杨柳菲;曹馨月;杨钦;李世玲;杨梦晗;马世杰;王平利;陈红英;
为实现牛病毒性腹泻病毒(BVDV)与牛肠道病毒(BEV)的同步检测，靶向BVDV和BEV 5′-UTR序列保守区域，分别设计1对引物，建立针对BVDV与BEV的SYBR GreenⅠ双重qPCR检测方法。结果显示，该方法可特异性检出BVDV和BEV,两者熔解峰所对应的Tm值分别为87、82℃,而对其他常见牛病原体无特定熔解峰。BVDV和BEV的最低检测值分别为81.3、81.7拷贝/μL;批内及批间的相对标准偏差均被有效控制在2%的限定水平。运用建立的SYBR GreenⅠ双重qPCR检测方法对2023—2024年采自河南、山东以及四川等地牛场的44份粪便样品进行检测，BVDV和BEV的检出率分别为75.00%(33/44)和77.27%(34/44),两者共感染检出率为50%(22/44)。该方法为BVDV和BEV同步检测提供了一种快速、灵敏且特异的解决方案。
2026年03期 v.46;No.351 514-519页 [查看摘要][在线阅读][下载 1701K] [下载次数：4 ] |[网刊下载次数：0 ] |[引用频次：0 ] |[阅读次数：3 ] - 焦迪;王瑞;贾皓;张晓倩;崔强;王海艳;陈林军;延涵;罗晓平;李军燕;赵治国;
为了对牛腹泻病进行快速鉴别诊断，本研究根据牛病毒性腹泻病毒1型(BVDV-1)的5′-UTR基因、牛肠道病毒(BEV)的5′-UTR基因、牛轮状病毒A型(BRV-A)的VP6基因、牛冠状病毒(BCoV)的N基因保守区，设计了特异性引物与探针，通过优化建立了同时检测BVDV-1、BEV、BRV-A和BCoV的四重TaqMan荧光定量RT-PCR方法。结果显示，该方法具有较强的特异性；BVDV-1、BEV、BRV-A的最低检测限均可达到10~1拷贝/μL,BCoV的最低检测限为10~2拷贝/μL;批内及批间变异系数均小于1%,表明该方法重复性好；运用该方法和PCR检测方法对采自内蒙古呼伦贝尔市、通辽市的121份牛粪便样品进行检测，结果显示，BVDV-1、BEV、BRV-A、BCoV的检出率分别为6.61%、39.66%、9.91%、10.74%,检出率均高于PCR检测方法，且上述4个病原的符合率分别为99.17%、95.86%、98.34%、98.34%。结果表明，建立的四重TaqMan荧光定量RT-PCR方法可以用于牛腹泻病原BVDV-1、BEV、BRV-A、BCoV高通量一站式诊断。
2026年03期 v.46;No.351 520-527页 [查看摘要][在线阅读][下载 1902K] [下载次数：4 ] |[网刊下载次数：0 ] |[引用频次：0 ] |[阅读次数：3 ] - 陈珊;项安琪;王静;王爽;陈斐;周彬;邵春艳;姜胜;宋厚辉;宋泉江;
从疑似牛病毒性腹泻病毒(BVDV)感染的牛血清样本中分离出1株病毒，并以间接免疫荧光试验(IFA)和序列测定及比对分析等方法对该毒株进行鉴定。结果显示，该毒株为非致细胞病变(NCP)型BVDV,命名为ZJ-S01。序列测定及分析显示，该毒株的完整基因组长为12 280个核苷酸，编码3 897个氨基酸；遗传进化分析显示，ZJ-S01与美国分离株890(登录号：U18059.1)亲缘关系最近，为2a亚型BVDV;E2蛋白氨基酸序列比对分析显示，与同亚型参考毒株相比，ZJ-S01株存在6个突变位点，且在第8位和第139位发生了氨基酸极性的转变。本研究首次从浙江地区牛群中分离到NCP型BVDV-2a毒株，为牛病毒性腹泻(BVD)的防控奠定了基础。
2026年03期 v.46;No.351 528-535页 [查看摘要][在线阅读][下载 2456K] [下载次数：3 ] |[网刊下载次数：0 ] |[引用频次：0 ] |[阅读次数：3 ] - 冯越;叶玲玲;武毓姝;董志鹏;卢鹏阳;高鸿博;王铁成;夏咸柱;李东旭;高玉伟;孙伟洋;闫芳;
为建立H5N6冷适应疫苗候选株FS17的高效培养及纯化工艺体系，以血凝效价和病毒半数组织感染剂量(TCID_(50))为指标，对疫苗株在MDCK悬浮细胞上培养的细胞感染复数(MOI)、细胞接种密度(CCI)、TPCK胰酶终浓度及收获时间进行优化；进而评估不同终浓度的核酸酶反应不同时间对DNA的消化能力，筛选出聚醚砜膜、再生纤维素复合膜和Omega膜的病毒浓缩性能与最佳孔径，探索了以复合填料Capto Core 700柱层析纯化时平衡缓冲液的盐离子浓度及Capto Q柱层析纯化时平衡缓冲液与洗脱缓冲液的浓度梯度。结果显示，确定最优培养条件为MOI 0.001,CCI 4.0×10~6个/mL,TPCK胰酶3 mg/L,收毒时间84 h;建立的纯化工艺为：采用15 U/mL核酸酶处理6 h去除宿主DNA,300 kDa再生纤维素复合膜超滤浓缩，依次经Capto Core 700(平衡缓冲液为0.02 mol/L PB)和Capto Q(平衡缓冲液为0.01 mol/L PB,洗脱缓冲液为0.01 mol/L PB+0.65 mol/L NaCl)两步层析进行纯化。最终获得高纯度疫苗原液，为减毒流感疫苗的规模化生产提供了关键技术参数。
2026年03期 v.46;No.351 536-545页 [查看摘要][在线阅读][下载 1411K] [下载次数：280 ] |[网刊下载次数：0 ] |[引用频次：0 ] |[阅读次数：3 ] - 尹文巧;谢芝勋;张艳芳;范晴;谢志勤;罗思思;谢丽基;李孟;吴嫒琼;李小凤;
旨在开发一种特异性快速检测C型禽偏肺病毒(avian metapneumovirus type C,aMPV/C)的方法。基于aMPV/C-M保守基因设计特异性靶向引物和探针，筛选最佳引物，优化检测体系探针浓度和反应温度，建立aMPV/C荧光探针型逆转录环介导等温扩增(RT-LAMP)检测方法，评估其敏感性、特异性和重复性，并用于临床样品检测。结果显示，建立的荧光探针型RT-LAMP方法只特异性检测出aMPV/C,与禽流感病毒、传染性喉气管炎病毒、新城疫病毒、鸡毒支原体等14种常见的禽类病原体无交叉反应，最低检测限为12拷贝/μL,与浊度法RT-LAMP敏感性相当，显著高于RT-PCR敏感性，批内和批间重复变异系数均小于3%。临床样本验证结果显示，用3种方法检测139份临床样品，荧光RT-LAMP与浊度法RT-LAMP阳性检出率均为17.30%,比RT-PCR检出率高。结果表明，本研究建立的荧光探针型RT-LAMP检测方法具有良好的特异性、敏感性和重复性，适用于临床样品的aMPV/C快速检测。
2026年03期 v.46;No.351 546-554页 [查看摘要][在线阅读][下载 1890K] [下载次数：181 ] |[网刊下载次数：0 ] |[引用频次：0 ] |[阅读次数：1 ] - 相梦佳;刘俊杰;杨盼盼;朱玉涛;邱路遥;乔麒龙;丛雁方;李岩;李星雨;杨东东;卜德新;张伯顺;韩成昊;于春梅;魏波;王增;李建丽;王白玉;赵军;
旨在研发能同时防控我国流行的禽腺病毒4型(FAdV-4)和FAdV-11感染的高效二联疫苗，本研究利用FAdV-4中国流行株的反向遗传技术平台，将FAdV-4的Fiber-1基因替换为FAdV-11中国流行株FJSW/2021的Fiber基因，构建嵌合表达FAdV-11 Fiber的重组病毒rFAdV-4-Fiber/11。对重组病毒rFAdV-4-Fiber/11进行PCR、Western blot和间接免疫荧光试验鉴定。结果显示，FAdV-4的Fiber-1基因被成功替换为FAdV-11的Fiber基因，且FAdV-11的Fiber蛋白可以稳定嵌合表达，重组病毒的遗传稳定性良好，具有与亲本毒株相似的高滴度生长特性以及复制动态。结果表明，本研究构建的重组病毒将为研发同时防控FAdV-4导致的HHS和FAdV-11导致的IBH的多联候选疫苗提供新思路。
2026年03期 v.46;No.351 555-561页 [查看摘要][在线阅读][下载 1471K] [下载次数：1 ] |[网刊下载次数：0 ] |[引用频次：0 ] |[阅读次数：3 ] - 高天琦;黄京山;李佳;仇华吉;吴红霞;孙元;
从发酵饲料中分离乳酸菌，鉴定益生特性和抗伪狂犬病病毒的活性，旨在揭示益生菌是否具有广谱的抗病毒特性。从发酵饲料中筛选出4株特征明显的乳酸菌，其中FR-1和FR-2株具有良好的耐酸、耐胆盐特性，并在高温条件下仍有较高存活率。此外，FR-1株对肠道常见致病菌株(大肠埃希菌、鼠伤寒沙门菌、金黄色葡萄球菌)也展现出良好的抑菌能力；通过形态学鉴定、革兰染色及16S rDNA基因序列比对，证实该菌为乳酸片球菌。研究表明，FR-1株培养液上清在浓度为10~(7.0) CFU/mL时，体外可以杀灭10~(3.0) TCID_(50)的伪狂犬病病毒；FR-1株在小鼠体内的安全性已得到充分验证。本研究为益生菌在抗病毒领域的应用提供了依据。
2026年03期 v.46;No.351 562-568页 [查看摘要][在线阅读][下载 1622K] [下载次数：2 ] |[网刊下载次数：0 ] |[引用频次：0 ] |[阅读次数：3 ] - 李富祥;高华峰;赵文华;宋建领;
为分离山羊源羚羊链球菌(Streptococcus rupicaprae,S.rupicaprae)并分析其生物学特性，从云南省患呼吸系统疾病山羊肺脏中分离到2株链球菌样细菌YN240867和YN240868,采用生化鉴定、兰氏抗原分群、16S rRNA基因序列相似性分析及遗传进化分析对分离菌进行鉴定，并分析其致病性、药物敏感性及耐药基因的生物学特性。生化鉴定结果显示，2株分离菌的大部分生化特性与S.rupicaprae模式菌株CCUG 59652~T相同。兰氏抗原分群结果显示，2株分离菌和S.rupicaprae CCUG 59652~T均只含有兰氏D群抗原。16S rRNA基因序列BLAST比对结果显示，2株分离菌与S.rupicaprae CCUG 59652~T的基因序列相似性最高均为99.1%,与其他细菌参考株基因序列相似性≤96.8%。16S rRNA基因遗传进化分析结果显示，2株分离菌在进化树中与S.rupicaprae CCUG 59652~T形成同一个进化分支。基于上述鉴定结果，2株分离菌均鉴定为S.rupicaprae。致病性试验结果显示，2株分离菌对小鼠具有较强的致病性。药敏试验结果显示，2株分离菌均对β-内酰胺类的青霉素、氨苄西林、头孢唑林、头孢曲松和头孢呋辛、氨基糖苷类的庆大霉素、喹诺酮类的氧氟沙星以及酰胺醇类的氟苯尼考敏感；对氨基糖苷类的链霉素和大环内酯类的红霉素耐药。7类23种耐药基因PCR检测结果显示，2株分离菌均只携带大环内酯类耐药基因ermB和四环素类耐药基因tetM。本研究首次报道山羊S.rupicaprae感染和山羊源S.rupicaprae的分离鉴定结果，并且2株S.rupicaprae分离菌对小鼠具有较强致病性，推测S.rupicaprae为山羊的一种新病原。本研究对山羊S.rupicaprae感染的治疗和预防提供了基础数据。
2026年03期 v.46;No.351 569-575页 [查看摘要][在线阅读][下载 1503K] [下载次数：0 ] |[网刊下载次数：0 ] |[引用频次：0 ] |[阅读次数：3 ] - 马成宇;兰瑞君;李炎夫;郝陆瑶;马园;王瑞;
为探究细胞色素P450酶系(CYPs)基因与捻转血矛线虫多重耐药性之间的关系。首先通过幼虫发育抑制试验，评估了5株捻转血矛线虫对阿苯达唑(ALB)、伊维菌素(IVM)和左旋咪唑(LEV)的耐药性。随后，将这些虫株的第3期幼虫(L3)各分为7组，包括1个对照组和6个试验组，试验组分别用3种药物的高、低浓度处理。在27℃条件下孵育0、12、24 h后，用生理盐水溶液漂洗L3幼虫，并将其保存于-80℃。之后利用TRIzol试剂提取总RNA,进行反转录和实时荧光定量PCR,分析HCOI01928800a、HCOI01928800b、HCOI100383700、HCOI100383400和HCOI01579500基因的表达水平。结果表明，在幼虫发育抑制试验中，Hc-S株对ALB、LEV和IVM均无耐药性。其他4株捻转血矛线虫的EC_(50)值较Hc-S株显著提高。在荧光定量PCR试验中，高度耐药与中度耐药虫株相较于敏感虫株，HCOI100383400基因表达水平显著上调，而HCOI01579500基因在所有耐药虫株中表达水平显著下调。此外，这5种CYPs基因表达水平被药物诱导的变化不显著。说明HCOI100383400和HCOI01579500基因表达的变化可能是虫体长期接触驱虫剂的结果，且虫体多重耐药性可能与HCOI100383400基因相关。
2026年03期 v.46;No.351 576-587+596页 [查看摘要][在线阅读][下载 3586K] [下载次数：2 ] |[网刊下载次数：0 ] |[引用频次：0 ] |[阅读次数：1 ] - 孙雪;吴天乐;胡紫茵;李斌玉;李芳;毕师诚;周荣琼;
为探讨柔嫩艾美耳球虫(Eimeria tenella)14-3-3蛋白的定位及其与佐剂配伍的免疫保护效果，通过构建重组质粒pCold TF/Et14-3-3,经原核表达后制备兔抗Et14-3-3多克隆抗体；采用qRT-PCR分析Et14-3-3在第2代裂殖子(MZ)、未孢子化卵囊(UO)、孢子化卵囊(SO)和子孢子(SZ)的转录水平，并通过间接免疫荧光组织化学(IFA)分析Et14-3-3蛋白的组织定位和亚细胞定位；利用150μg Et14-3-3蛋白与人参皂甙、IL-2、黄芪多糖、铝胶佐剂和弗氏佐剂等配伍免疫雏鸡，同时设置未免疫攻虫组(PC)和未免疫未攻虫组(NC)为对照，以平均增重、相对增重率、卵囊产量、病变记分、抗球虫指数(ACI)和IgG抗体水平等指标，综合评价Et14-3-3蛋白的免疫保护性。结果显示，Et14-3-3蛋白大小约为85 kDa,主要以可溶性形式表达；能被鸡抗E.tenella阳性血清特异性识别。IFA结果显示Et14-3-3主要定位于MZ的胞质和细胞表面以及SZ的顶端，且MZ中mRNA转录水平显著高于SZ(P<0.000 1)。Et14-3-3蛋白与5个佐剂配伍的IgG抗体水平均呈上升趋势；其中铝胶佐剂组的ACI最高，为168.8,卵囊产量和病变记分显著降低，平均增重和相对增重率显著增加(P<0.05)。结果表明，Et14-3-3蛋白与虫体宿主识别和入侵有关，与铝胶佐剂配伍的免疫保护效果为中效，对E.tenella感染具有一定的免疫保护力。
2026年03期 v.46;No.351 588-596页 [查看摘要][在线阅读][下载 1783K] [下载次数：3 ] |[网刊下载次数：0 ] |[引用频次：0 ] |[阅读次数：0 ]
- 陆萌萌;张明慧;陈亚丹;周佳懿;杨章平;孙雨佳;
旨在系统解析奶牛乳腺组织在金黄色葡萄球菌(Staphylococcus aureus,SA)和无乳链球菌(S.agalactiae,SC)感染前后长链非编码RNA(long non-coding RNA,lncRNA)的差异表达谱及其分子调控机制。选取健康荷斯坦奶牛建立NC对照组、SA感染组及SC感染组，通过组织病理学确认乳腺炎模型后，采集3组乳腺组织样本进行转录组测序。筛选出试验组发生差异表达的lncRNAs,经qRT-PCR验证筛选出3个差异表达的lncRNAs,通过RACE技术成功克隆出全长序列并开展系统性分子特征分析，进一步利用RNAhybrid预测互作miRNAs构建lncRNAs作为ceRNA的调控网络，后续使用Targetscan预测miRNAs的靶基因，采用GO和KEGG数据库对预测得到的靶基因进行功能注释和通路分析。结果显示，这3个lncRNAs显著富集于PI3K-Akt信号通路、mTOR信号通路、MAPK等炎症相关信号通路，推断这3个lncRNAs可能对奶牛患乳腺炎相关过程具有重要的调控作用。本研究揭示了乳腺炎相关lncRNAs的分子特征及病原特异性感染调控差异，为解析乳腺炎表观遗传机制提供新依据，也为开发lncRNA标记物早期诊断技术奠定理论基础。
2026年03期 v.46;No.351 621-632页 [查看摘要][在线阅读][下载 2417K] [下载次数：4 ] |[网刊下载次数：0 ] |[引用频次：0 ] |[阅读次数：2 ] - 马俊岩;郝健翔;张敏爱;张进;张希春;陈书明;
评估护胃崩解片对酒精性胃黏膜损伤的预防作用及机制，为动物胃病防治提供新策略。试验设计采用均匀设计法，建立乙醇诱导SD大鼠胃黏膜损伤模型，利用组织病理学、ELISA和RT-PCR技术评估其对黏膜损伤的修复作用及潜在分子机制，并通过熵权法和结构方程模型解析护胃崩解片中的多组分协同效应，确定其最佳配伍配比。结果显示，护胃崩解片在预防给药下，可以显著降低胃黏膜损伤指数及病理评分，提升黏膜保护因子前列腺素E2(PGE2)、一氧化氮(NO)、内皮型一氧化氮合酶(eNOS)含量(P<0.05),抑制环氧化酶-2(COX-2)表达和促炎因子IL-6、TNF-α、IL-1β的产生(P<0.05),并抑制PI3K/AKT/NF-κB通路的过度激活(P<0.05);优化后的护胃崩解片配比为：白术18 g、干姜6 g、甘草12 g、连翘6 g、半夏8.5 g。结果表明，护胃崩解片促进胃黏膜保护因子PGE2和NO的生成，显著降低促炎因子IL-6、TNF-α和IL-1β的表达，抑制PI3K/AKT/NF-κB通路的激活，从而实现胃黏膜损伤的有效预防。
2026年03期 v.46;No.351 633-643页 [查看摘要][在线阅读][下载 2817K] [下载次数：3 ] |[网刊下载次数：0 ] |[引用频次：0 ] |[阅读次数：2 ] - 陈尧;高玺宇;颜傲寒;孙悦;李心怡;付守鹏;何得伟;张昊龙;
帕金森病(Parkinson??s disease, PD)是一种常见的神经退行性疾病，其临床上主要表现为运动障碍。神经炎症在PD发病机制中起着重要作用。甜菊苷(Stevioside, Ste)是一种食品来源的天然化合物，已被报道具有广泛的抗炎、抗氧化作用。然而，其在PD中的作用尚未见报道。本研究通过行为学试验、免疫组化、Western blot和荧光定量等方法探究了Ste在鱼藤酮(Rotenone, ROT)诱导的PD长爪沙鼠模型中对运动行为、神经损伤、小胶质细胞活化和神经炎症的影响。结果显示，Ste能够改善PD长爪沙鼠运动功能障碍、多巴胺能神经元变性和抑制神经炎症，提示其具有成为PD治疗药物的潜力。
2026年03期 v.46;No.351 644-649+664页 [查看摘要][在线阅读][下载 2359K] [下载次数：118 ] |[网刊下载次数：0 ] |[引用频次：0 ] |[阅读次数：1 ] - 张曼;孙娟;高婉婷;薛明明;张丽;李秀青;张哲玮;金鑫;
为探究黄曲霉毒素B1(aflatoxin B1,AFB1)对小鼠肠黏膜屏障功能的影响。本研究选用4周龄KM小鼠为实验动物，随机分为5组：空白对照组(不做任何处理)、二甲基亚砜(DMSO)组(1%DMSO灌胃)及AFB1低、中、高剂量处理组(分别按0.1、0.5、1.0 mg/kg体质量灌胃AFB1)。连续灌胃7 d后，监测小鼠体质量变化；采用HE染色技术观察肠道组织形态结构完整性；通过免疫荧光法检测紧密连接蛋白、黏蛋白及炎症因子、氧化相关因子的表达情况。结果显示，小鼠日增重随着AFB1浓度和灌胃天数的增加呈现下降趋势，且AFB1高剂量组第4天开始与对照组相比呈显著性差异(P<0.05);HE染色结果显示，随着AFB1浓度的增加，小鼠空肠组织损伤逐渐加重，表现为肠壁变薄、肠绒毛高度与隐窝深度之比降低和相对绒毛数减少等变化；免疫荧光结果显示，AFB1灌胃组空肠内紧密连接蛋白ZO-1、Claudin-3、Occludin及黏蛋白MUC2表达均显著低于空白对照组(P<0.05),炎症相关因子IL-1β、IL-6和TNF-α的表达水平显著上调(P<0.05),但IL-8表达显著降低(P<0.05),氧化相关因子SOD2和Nrf2的表达均显著上调(P<0.05),但Keap1的表达显著下调(P<0.05),而Nrf2/Keap1的比值显著升高(P<0.05)。结果表明，AFB1可通过破坏肠道组织结构的完整性，增加炎症和氧化反应的发生，从而破坏肠道黏膜屏障功能。
2026年03期 v.46;No.351 650-657页 [查看摘要][在线阅读][下载 2769K] [下载次数：4 ] |[网刊下载次数：0 ] |[引用频次：0 ] |[阅读次数：1 ]