- 温升辉;邵军军;高闪电;彭德财;常惠芸;丁嘉烽;刘伟;师铭咸;
非洲猪瘟(African swine fever, ASF)是由非洲猪瘟病毒(African swine fever virus, ASFV)感染引起猪的一种急性、热性、高致死性疾病。鉴于当前尚缺乏商业化的疫苗,并且近年来ASFV不断演变,中等毒力基因Ⅱ型毒株的涌现以及基因Ⅰ型弱毒株的传入,导致猪仅出现了持续性和慢性感染的状况。因此,对ASFV的特异性抗体检测变得势在必行。本研究利用p30单克隆抗体建立了一种检测ASFV p30抗体的竞争化学发光法——p30-cCLIA。通过检测背景清晰的阴阳性血清,确定该方法的Cut-off值为50%时,诊断敏感性(Dsn)和诊断特异性(Dsp)均为100%。在最佳反应条件下筛选出适用于p30单抗16-5E7E8-HRP的酶标稳定剂。此外,本研究建立的p30-cCLIA方法的灵敏度比商品化阻断ELISA试剂盒更高(1∶2 048 vs 1∶512),并具有良好的重复性。通过检测其他病毒感染猪阳性血清,结果表明与这些血清无交叉反应性。该方法的建立为ASF早期诊断提供了有力工具。
2025年01期 v.45;No.337 1-7页 [查看摘要][在线阅读][下载 1435K] [下载次数:124 ] |[网刊下载次数:0 ] |[引用频次:0 ] |[阅读次数:9 ] - 李德龙;周建方;余远迪;付利芝;杨柳;蒋婧;范泓灵;谭宇航;王昕;孙悦茵;
霍乱毒素B亚基(cholera toxin B subunit, CTB)可增强抗原呈递并促进T细胞增殖、B细胞分化和B细胞同种型转换;土拨鼠肝炎病毒转录后调控元件(woodchuck hepatitis virus post transcriptional regulatory element, WPRE)可通过优化RNA多聚腺苷酸化、出核和/或翻译增强基因表达效率。为构建嵌合CTB和WPRE的猪流行性腹泻病毒样颗粒(VLPs)并评价其免疫原性,本研究以GⅡ型PEDV S基因为基础,添加几种可以提高蛋白表达量和增强免疫效果的元件,命名该基因为TSCW,将TSCW经公司合成后克隆至pET32a(+),双酶切并胶回收后克隆至pFastBac1,构建重组质粒pFastBac-TSCW,进一步转化DH10Bac感受态细胞以获得重组杆粒Bacmid-TSCW,用Bacmid-TSCW转染sf9细胞获得重组杆状病毒BV-TSCW,将BV-TSCW与BV-M共感染sf9细胞获得病毒样颗粒VLP-TSCW,用其免疫小鼠评价其免疫原性。结果显示,成功构建重组质粒pFastBac-TSCW;PCR鉴定结果表明,重组杆粒Bacmid-TSCW构建成功;重组杆状病毒转染sf9细胞后可出现明显细胞病变;PCR和Western blot结果显示,重组杆状病毒可稳定存在于sf9细胞中,且目的蛋白也能稳定表达;电镜结果显示,BV-TSCW和BV-M成功组装成病毒样颗粒VLP-TSCW;ELISA结果表明,VLP-TSCW可诱导小鼠产生较高水平的特异性抗体。本研究结果将为后续继续开展PEDV VLPs亚单位疫苗优化、设计和研发奠定基础。
2025年01期 v.45;No.337 8-15页 [查看摘要][在线阅读][下载 1715K] [下载次数:142 ] |[网刊下载次数:0 ] |[引用频次:0 ] |[阅读次数:11 ] - 庞燕丽;覃建光;刘沐阳;任同伟;刘嘉琪;周玲杉;陈樱;欧阳康;黄伟坚;韦祖樟;
为制备猪繁殖与呼吸综合征病毒(porcine reproductive and respiratory syndrome virus, PRRSV)N蛋白的单克隆抗体,用原核表达系统表达并纯化后的2型PRRSV毒株的N蛋白免疫BALB/c小鼠,利用杂交瘤技术将小鼠脾细胞与骨髓瘤细胞融合,通过间接ELISA和间接免疫荧光(IFA)对杂交瘤细胞进行鉴定,使用有限稀释法对阳性杂交瘤细胞进行亚克隆筛选。结果显示,成功获得1株单克隆抗体细胞株4A7。Western blot和IFA结果表明,该单克隆抗体能够准确识别1型和2型PRRSV的N蛋白。同时,通过原核表达系统对N蛋白基因进行截短表达,利用Western blot试验筛选出4A7识别的B细胞抗原表位的氨基酸序列为~(51)EKPHF~(55)。在不同毒株的N蛋白基因序列中对该表位的氨基酸进行比对,发现单克隆抗体4A7识别的抗原表位~(51)EKPHF~(55)与1型PRRSV毒株中3个亚型、2型PRRSV毒株中9个谱系的序列无氨基酸差异,具有较高的保守性。研究结果为研发PRRSV诊断试剂盒和新型疫苗奠定了理论基础。
2025年01期 v.45;No.337 16-21+45页 [查看摘要][在线阅读][下载 1509K] [下载次数:233 ] |[网刊下载次数:0 ] |[引用频次:2 ] |[阅读次数:6 ] - 甘诗琪;魏千禾;倪语晨;倪健波;赵秀玲;董婉玉;周莹珊;王晓杜;
针对A型塞内卡病毒(Senecavirus A,SVA)、口蹄疫病毒(foot-and-mouth disease virus, FMDV)和猪捷申病毒(porcine teschovirus, PTV)核酸的保守区域,设计了用于构建TaqMan荧光定量PCR体系的引物和探针。以含有这3种病毒核酸保守序列的重组阳性质粒标准品为模板,建立了3重TaqMan荧光定量PCR方法,并对该体系进行了优化,确定了该方法的特异性、重复性、灵敏性及标准曲线,同时建立了混合感染模型。此外,利用所构建的3重TaqMan荧光定量PCR方法对临床样品进行了检测。结果显示,该方法能够特异性检测SVA、FMDV和PTV 3种病毒,与其他病原体无交叉反应;检测SVA、FMDV和PTV的最低浓度均可达到1×10~1拷贝/μL;组间和组内变异系数均小于5%;在126份样品中未检出这3种病毒。上述结果表明,该方法具有较强的特异性、高灵敏性和良好的稳定性,可用于临床检测。
2025年01期 v.45;No.337 22-29页 [查看摘要][在线阅读][下载 2102K] [下载次数:193 ] |[网刊下载次数:0 ] |[引用频次:2 ] |[阅读次数:8 ] - 董奕彤;王晓萌;岳凤娇;王淑杰;王春生;
利用量子点单病毒示踪技术探究水貂肠炎病毒(mink enteritis virus, MEV)在细胞内的感染过程,为MEV的抗病毒治疗提供了潜在靶点。本研究通过生物素-链霉亲和素系统对MEV进行了量子点标记,经TCID_(50)滴度测定和电镜表征后用于感染猫肾细胞(CRFK)。CRFK细胞膜经DiO染色后用量子点标记的MEV进行侵染,利用活细胞工作站系统GE Dleta vision观测病毒进入细胞膜的过程;对CRFK细胞转染pEGFP-Rab5和pEGFP-Rab7载体来标记早期内体和晚期内体,当细胞感染量子点标记的MEV后观测MEV病毒粒子与早期内体和晚期内体的相互作用。为了进一步验证内体与病毒感染的关系,利用氯喹(chloroquine, CQ)和NH_4Cl两种内体酸性抑制剂来抑制内体的酸性环境,对加入抑制剂的感染后的细胞提取细胞内总RNA和蛋白,通过qPCR及Western blot检测细胞内MEV的含量;MEV在胞内的转运与细胞骨架相关,为了探究MEV转运与哪种细胞骨架相关,对CRFK细胞分别转染GFP-lifeact和EGFP-MAP4质粒,经GE Dleta vision观测MEV与细胞骨架的关系。选择微管抑制剂Nocodazole和微丝抑制CytoD剂对感染MEV的CRFK细胞提取细胞内RNA及总蛋白,通过qPCR及Western blot检测细胞内MEV的含量。活细胞成像显示MEV首先附着在细胞膜上,并通过内吞作用进入细胞;成像结果显示MEV与Rab5和Rab7在宿主细胞中共定位,用内体酸化抑制剂NH_4Cl或CQ预处理宿主细胞后,病毒感染被抑制,表明MEV感染需要内体的酸性环境;活细胞图像显示量子点(QD)-MEV沿着微管运动,使用微管抑制剂Nocodazole抑制了病毒感染,而微丝抑制剂CytoD的加入对感染没有影响。研究结果表明,MEV是通过内吞作用进入CRFK细胞膜,随后进入早期内体及晚期内体,在细胞内的转运过程依赖于微管。
2025年01期 v.45;No.337 30-38页 [查看摘要][在线阅读][下载 1709K] [下载次数:68 ] |[网刊下载次数:0 ] |[引用频次:0 ] |[阅读次数:3 ] - 赵岩;任美奕;仝静迪;苏娅澜;宋德源;姜国均;程佳;高健;刘明超;
诺卡菌(Nocardia)是一种革兰阳性菌,能感染奶牛乳腺引起乳房炎,导致奶牛乳腺组织出现化脓性肉芽肿病变等临床症状。为建立一种快速而准确的牛源诺卡菌检测方法,通过对NCBI上已登记的诺卡菌16S rRNA基因序列进行比对,筛选出一段保守序列,并针对该序列设计了1对引物及TaqMan荧光定量探针。经过验证,结果显示本研究建立的TanMan荧光定量PCR检测方法的Ct值与重组质粒在1×10~(10)~1×10~2拷贝/μL范围内具有良好的线性关系,其回归方程为y=-3.536x+43.78,相关系数R~2=0.997 5,斜率为-3.536,扩增效率(E)=91%,且满足90%<E<110%的标准,特异性强,与其他病原之间无交叉反应。标准曲线的灵敏度较高,最低检测拷贝数为1×10~2拷贝/μL,灵敏度是普通PCR方法的100倍,且标准曲线具有良好的重复性,组内和组间的变异系数均小于2%。使用该方法检测了234份乳房炎奶样和80份牧场环境样本,阳性检出率为27.07%,而普通PCR方法的阳性检出率为19.43%,因此,该方法比普通PCR方法更灵敏。本试验建立的荧光定量PCR检测方法为牛源诺卡菌的临床检测提供了有效的工具。
2025年01期 v.45;No.337 39-45页 [查看摘要][在线阅读][下载 1467K] [下载次数:119 ] |[网刊下载次数:0 ] |[引用频次:0 ] |[阅读次数:6 ] - 李雨琪;康娅莉;卓钰槟;黄玲珊;丘淑琪;薛羽希;吴晓萍;范思思;廖玉婷;林伟业;陈婵;林开雄;陈腾腾;林锡潘;范克伟;
为明确引起福建省梅花山华南虎繁育研究所1只华南虎幼虎死亡的病原,本试验无菌采集了该死亡华南虎的肝脏、脾脏、肺脏等组织样品进行病原菌的分离培养。通过形态观察、生化特性鉴定及管家基因gyrB序列分析对分离菌进行鉴定,并对其进行毒力基因检测、动物致病试验及药物敏感性试验。结果成功从死亡华南虎的气管中分离到1株致病性嗜水气单胞菌,命名为FJ/Tiger-201809。该分离菌与11株气单胞菌的gyrB核苷酸序列同源性为91.2%~99.1%,其中与嗜水气单胞菌(AF208251.1)的同源性最高,达到99.1%;遗传进化分析显示,该分离菌FJ/Tiger-201809与其他嗜水气单胞菌参考菌株处于同一进化分支,亲缘关系较近。小鼠致病性试验发现,用该菌株人工感染小鼠可导致多个器官出现不同程度的病变,半数致死量(LD_(50))为1×10~(7.8) CFU/mL。毒力基因检测结果显示,分离菌FJ/Tiger-201809携带有aer和act两种毒力基因;药物敏感性试验结果显示,分离菌FJ/Tiger-201809对18种常用抗菌药物中的恩诺沙星、氨苄西林2种药物高度敏感,对青霉素G、多西环素相对敏感,对其余14种抗菌药物均表现出耐药性。综上,本试验从死亡华南虎气管中分离鉴定到1株呈现多重耐药且致病性较强的华南虎源嗜水气单胞菌,为华南虎细菌性疾病的防控提供了重要的参考依据。
2025年01期 v.45;No.337 46-52+58页 [查看摘要][在线阅读][下载 1982K] [下载次数:297 ] |[网刊下载次数:0 ] |[引用频次:0 ] |[阅读次数:3 ] - 蒋嵘;李乐天;崔春梅;李昌;
为探索宿主限制因子(host restriction factors, HRFs)在抗病毒基因药物研发中的应用效果,本研究基于“病毒感染共有通路”及“宿主固有免疫HRFs”,将3种抗病毒HRFs,即胆固醇-25-羟化酶(cholesterol 25-hydroxylase, CH25H)、干扰素诱导跨膜蛋白3(interferon-induced transmembrane protein, IFITM3)、干扰素刺激基因15(interferon-stimulated gene 15,ISG15),利用pCK载体进行融合表达,构建抗病毒基因药物。将这3种HRFs的基因编码序列通过裂解肽编码序列连接,构建了融合表达基因序列CH25H-IFITM3-ISG15(CⅡ)。随后,通过PCR扩增CⅡ序列,并将其连接至pCK表达载体上,经转化、鉴定和提取重组质粒,获得了基于DNA表达系统的候选生物药物,命名为pCK-CⅡ。然后,将重组质粒转染至HEK 293T细胞中,通过Western blot成功检测到3种抗病毒蛋白的表达。为明确pCK-CⅡ在细胞水平上的抗病毒作用,将pCK-CⅡ分别转染至HEK 293细胞和BHK-21细胞,24 h后,在BHK-21细胞上接种表达绿色荧光蛋白的水泡性口炎病毒(vesicular stomatitis virus expressing green fluorescent protein, VSV-GFP),12 h后在荧光显微镜下观察并进行流式细胞术检测;在HEK 293细胞上接种H3N2亚型流感病毒,12 h后利用Western blot检测H3N2亚型流感病毒核蛋白的表达。结果显示,瞬时转染pCK-CⅡ质粒能显著降低感染细胞的荧光水平和感染细胞中H3N2亚型流感病毒核蛋白的表达。以上结果表明,在细胞水平上,pCK-CⅡ对VSV-GFP和H3N2亚型流感病毒的感染具有抑制作用。
2025年01期 v.45;No.337 53-58页 [查看摘要][在线阅读][下载 1314K] [下载次数:57 ] |[网刊下载次数:0 ] |[引用频次:0 ] |[阅读次数:3 ]
- 莫佳荣;陆伟峰;张偌益;林惠莹;曾春丽;林福;李健;
将处于对数生长期的猪小肠上皮细胞(IPEC-J2)分为空白组(K组)、H_2O_2组(S组)和白屈菜碱(chelidonine)组(L组),每组设3个重复样本。L组给予含2.5 mg/L白屈菜碱进行预处理,24 h后,S组和L组给予含1 mg/L的完全培养基,培养12 h后,提取各组细胞的总RNA,构建测序文库,并对组装数据进行功能注释、差异基因分析以及GO和KEGG富集分析。采用qPCR法验证关键差异基因的表达情况,ELISA法检测白屈菜碱对IPEC-J2细胞通透性的影响。结果显示,测序数据的质控合格,样本间相关性良好。GO功能注释结果表明,白屈菜碱的干预作用主要涉及细胞氧化应激反应、有丝分裂周期G2/M转变调控等生物学过程,与跨膜转运活性等分子功能密切相关。KEGG富集分析结果显示,IPEC-J2细胞经H_2O_2处理后,差异表达基因(DEGs)主要富集于p53信号通路、补血和凝血级联反应、FoxO信号通路等多种信号通路,而白屈菜碱预处理后,DEGs主要富集在TNF信号通路、突触囊泡循环、IL-17信号通路等炎症相关信号通路。qPCR验证结果与测序结果一致。白屈菜碱还能显著抑制LDH释放、升高GLN含量、降低DOA含量。结果表明,白屈菜碱可以通过调控TNF信号通路等炎症相关通路,降低细胞通透性,缓解H_2O_2诱导的IPEC-J2细胞炎症损伤。
2025年01期 v.45;No.337 74-83+106页 [查看摘要][在线阅读][下载 2937K] [下载次数:222 ] |[网刊下载次数:0 ] |[引用频次:0 ] |[阅读次数:4 ] - 刘威辰;高正婕;李秋叶;龚玲;罗萍;王水莲;
旨在探究RFRP-3对小鼠卵泡发育和类固醇激素合成的影响。本试验将40只6周龄KM雌鼠分为4组,分别为0(对照组)、100、500、2 000 ng/d组,每日腹腔注射对应剂量RFRP-3,试验期共7 d。通过测量卵巢湿质量,计算并统计各组卵巢系数;通过HE染色,分析不同浓度RFRP-3对小鼠卵泡发育的影响;通过Western blot检测小鼠卵巢内细胞凋亡、类固醇合成酶和卵母细胞分泌因子的蛋白表达;通过放射免疫法检测小鼠血清中孕酮(P_4)和雌二醇(E_2)的浓度。结果表明,与对照组相比,各试验组小鼠体质量没有显著差异;500和2 000 ng/d处理组卵巢系数与对照组相比极显著下降(P<0.01);与对照组相比,500和2 000 ng/d处理组次级卵泡和窦卵泡数极显著下降(P<0.01),闭锁卵泡数极显著升高(P<0.01);500和2 000 ng/d处理组Bax和Caspase3蛋白表达与对照组相比显著升高(P<0.05),Bcl-2蛋白表达对照组相比极显著下降(P<0.01);与对照组相比,500和2 000 ng/d处理组3βHSD、StAR、CYP11a1、CYP17a1蛋白表达极显著降低(P<0.01);与对照组相比,500 ng/d处理组E_2浓度显著下降(P<0.05),2 000 ng/d处理组E_2浓度极显著下降(P<0.01),各试验组P_4浓度没有显著变化;500和2 000 ng/d处理组BMP15和GDF9的基因与蛋白表达与对照组相比均显著下降(P<0.05)。综上,RFRP-3可通过调控小鼠卵巢内凋亡因子、卵母细胞分泌因子和类固醇合成酶的表达,从而抑制小鼠卵泡发育和类固醇激素的分泌。本试验为RFRP-3对哺乳动物卵泡发育和类固醇激素合成的调控机理提供了理论依据。
2025年01期 v.45;No.337 84-90页 [查看摘要][在线阅读][下载 1873K] [下载次数:159 ] |[网刊下载次数:0 ] |[引用频次:0 ] |[阅读次数:3 ] - 杨文哲;赵彤;潘飞龙;王锦浩;陈芳芳;邵雯琪;王诗睿;赵树臣;刘克祥;赵立佳;
旨在探讨膳食补充剂辅酶Q10(CoQ10)是否通过自噬途径缓解双酚A(BPA)暴露诱导的小鼠睾丸间质细胞株(TM3)损伤。利用不同浓度的BPA处理TM3细胞24 h后,采用CCK8法检测细胞活力。随后,将TM3细胞分为5组,分别为CON组、BPA组、Torin2组、CQ组和BPA+CoQ10组,每组设有3个重复。使用倒置光学显微镜观察TM3细胞的状态。通过Western blot检测各组中p62和LC3-Ⅰ/Ⅱ蛋白的相对表达水平,利用MDC细胞自噬染色法检测TM3细胞自噬水平,RT-qPCR检测Atg7、Beclin1、p62和Atg5基因的mRNA表达水平,流式细胞仪检测TM3细胞的凋亡率。结果显示,与0μmol/L BPA处理组相比,60μmol/L BPA处理24 h后,TM3细胞活力极显著下降(P<0.01)。与CON组相比,BPA处理组TM3细胞数量明显减少;自噬相关蛋白(p62、LC3-Ⅱ)的表达量极显著升高(P<0.01),与CQ组相当;MDC荧光强度极显著增强(P<0.01);自噬相关基因(Atg7、Beclin1、p62、Atg5)的mRNA表达水平极显著升高(P<0.01);细胞凋亡率极显著升高(P<0.01)。与BPA组相比,BPA+CoQ10处理组TM3细胞自噬相关基因Atg7和Beclin1 mRNA表达水平显著降低(P<0.05),p62和Atg5 mRNA表达水平极显著降低(P<0.01);自噬相关蛋白p62的表达量极显著下降(P<0.01),LC3-Ⅱ的表达量显著降低(P<0.05);MDC荧光强度显著下降(P<0.05);细胞凋亡率极显著下降低(P<0.01)。结果表明,CoQ10可通过改善BPA引起的TM3细胞自噬通量异常,从而减少细胞凋亡。
2025年01期 v.45;No.337 91-99页 [查看摘要][在线阅读][下载 1668K] [下载次数:143 ] |[网刊下载次数:0 ] |[引用频次:0 ] |[阅读次数:3 ] - 董俊升;王梓;李汉卿;郑芳玲;张敏;郭龙;刘康军;崔璐莹;王亨;李建基;
通过脂多糖(LPS)处理原代奶牛子宫内膜基质细胞(bovine endometrial stromal cells, BESCs),利用流式细胞术检测细胞凋亡率,利用CCK-法检测细胞活性,利用细胞划痕实验观察细胞迁移能力,利用荧光定量PCR法检测结缔组织生长因子(CTGF)、转化生长因子-β3(TGF-β3)和血管内皮生长因子(VEGF)mRNA的表达情况,利用Western blot技术检测PI3K/AKT和Wnt/β-catenin信号通路关键蛋白的表达情况,探讨了LPS诱导BESCs发生炎性反应时对其修复方面的影响。结果显示,LPS处理BESCs后,细胞活性明显降低(P<0.01);细胞迁移能力明显下降(P<0.05);BESCs凋亡率明显升高(P<0.01);CTGF和TGF-β3 mRNA表达量明显下降(P<0.01),但VEGF mRNA表达量上升(P<0.01);PI3K、AKT和GSK-3β蛋白磷酸化水平下降(P<0.05),c-Myc和Cyclin-D1蛋白表达量下降(P<0.01)。结果表明,LPS可抑制BESCs增殖,促进细胞凋亡,这可能与LPS抑制PI3K/AKT和Wnt/β-catenin信号通路的激活有关。
2025年01期 v.45;No.337 100-106页 [查看摘要][在线阅读][下载 1432K] [下载次数:201 ] |[网刊下载次数:0 ] |[引用频次:0 ] |[阅读次数:4 ] - 龚鹏飞;杨效林;郭莉莉;王钰;吴敬泽;张双翼;刘博;毛伟;曹金山;
为了研究前列腺素D_2(prostaglandin D_2,PGD_2)对大肠杆菌诱导的奶牛骨髓源巨噬细胞的影响,以体外培养的奶牛骨髓源巨噬细胞为研究对象,分析内源性和外源性PGD_2对大肠杆菌诱导的巨噬细胞促炎性细胞因子(IL-1β、IL-6和TNF-α)的分泌和吞噬杀伤功能的影响。结果显示,由大肠杆菌诱导的巨噬细胞中PGD_2的合成依赖于天然模式识别受体TLR2、TLR4和NLRP3。抑制内源性PGD_2能够下调大肠杆菌诱导的巨噬细胞中促炎性细胞因子(IL-1β、IL-6和TNF-α)的分泌(P<0.001),并可以在一定程度上增强巨噬细胞的杀伤功能(P<0.01)。此外,外源性PGD_2能够上调大肠杆菌刺激后巨噬细胞中促炎性细胞因子(IL-1β、IL-6和TNF-α)的分泌(P<0.01),一定浓度范围内的外源性PGD_2能够减弱巨噬细胞的杀伤功能(P<0.01)。结果表明,PGD_2对大肠杆菌诱导的巨噬细胞细胞因子的分泌和吞噬杀伤功能均具有一定的影响。
2025年01期 v.45;No.337 107-114页 [查看摘要][在线阅读][下载 1601K] [下载次数:95 ] |[网刊下载次数:0 ] |[引用频次:0 ] |[阅读次数:3 ] - 王晨浩;姚雪原;李柏余;张巧玲;岳占碰;杨占清;郭斌;
为了研究玉米赤霉烯酮(zearalenone, ZEA)对梅花鹿鹿茸软骨细胞增殖与凋亡的影响,本试验体外分离了鹿茸软骨细胞,并在培养过程中添加50μmol/L ZEA进行24h诱导。利用流式细胞术检测细胞增殖、细胞周期、细胞凋亡、线粒体膜电位和细胞内活性氧(reactive oxygen species, ROS)水平。同时,通过荧光定量PCR测定肥大软骨细胞标志基因Col X、Runx2、Alpl以及凋亡相关基因Casp-3、Bax、Bcl-2的表达变化,并检测谷胱甘肽还原酶(glutathione reductase, GR)和氧化应激标志物丙二醇(malondialdehyde, MDA)水平。结果显示,ZEA作用于鹿茸软骨细胞24 h后,细胞增殖活性明显抑制,G0/G1期细胞数量显著增加,而S期细胞数量显著减少;肥大软骨细胞标志基因Col X、Runx2和Alpl的表达量显著升高;细胞凋亡率明显增加,促凋亡基因Casp-3和Bax的表达量升高,而抑凋亡基因Bcl-2的表达量降低;鹿茸软骨细胞的ROS水平上升,MDA含量增加,GR活性降低;线粒体膜电位下调。以上结果表明,ZEA可能通过调节细胞的氧化应激反应和凋亡相关基因的表达,抑制鹿茸软骨细胞的增殖,并促进其凋亡。
2025年01期 v.45;No.337 115-120+128页 [查看摘要][在线阅读][下载 1896K] [下载次数:114 ] |[网刊下载次数:0 ] |[引用频次:1 ] |[阅读次数:3 ]