- 王丹;张恒杰;田宇阳;侯晓涵;陈泽奥;胡莹;张文超;任建乐;王颖;赵宇军;张鼎;杨勃;田文霞;牛胜;
通过构建过表达人、猪、犬、猫4个物种氨肽酶N(APN)的仓鼠肾成纤维细胞系(BHK-21)稳转细胞系，并初步评估这些细胞系对猪德尔塔冠状病毒(PDCoV)和猪传染性胃肠炎病毒(TGEV)的易感性，建立探究受体为APN的不同冠状病毒跨物种传播风险的通用方法。通过PCR扩增实验室保存的4种动物pEGFP-C1-APN(人、猪、犬、猫)质粒的APN目的序列，将其序列加入Flag标签后，通过同源重组连接克隆至pcDNA4.0载体。将测序验证的重组质粒转染BHK-21细胞，经Zeocin筛选及两轮有限稀释法，获得稳定表达不同物种APN的BHK-21细胞系。通过间接免疫荧光试验鉴定构建的BHK-21细胞系，并检测这4种细胞系对PDCoV和TGEV的易感情况。结果显示，成功构建人、猪、犬、猫4个物种BHK-21-APN稳转细胞系。病毒感染试验结果显示，PDCoV可通过人、猪、犬APN侵染细胞，而猫APN不介导PDCoV入侵细胞；TGEV可通过猪、犬、猫APN侵染细胞，而人APN不介导TGEV入侵细胞。结果表明，构建表达不同物种APN的稳转细胞系可用于评估不同冠状病毒的跨种感染风险；揭示了PDCoV具有跨种感染人和犬、TGEV具有跨种感染犬和猫的潜在风险，并为未来建立更为全面的不同动物APN稳转细胞系以评估这2种病毒的潜在宿主谱及冠状病毒“人病兽防”防控策略提供依据。
2025年10期 v.45;No.346 2095-2101页 [查看摘要][在线阅读][下载 372K] [下载次数：33 ] |[网刊下载次数：0 ] |[引用频次：0 ] |[阅读次数：37 ] - 蓝靖;罗瑞;黄若嘉;陆战豪;孙元;王涛;杨玉莹;仇华吉;
MGF300-4L蛋白已被证实是非洲猪瘟病毒(African swine fever virus, ASFV)的一个毒力相关因子，其作用机制是通过分子伴侣介导的自噬降解IKKβ并且增加IκBα的稳定性，从而抑制NF-κB信号通路调控的IL-1β和TNF-α的产生。为了筛选与MGF300-4L相互作用的宿主蛋白，本研究将MGF300-4L的真核表达质粒转染至PK-15细胞，利用免疫沉淀-质谱分析(immunoprecipitation-mass spectrometry, IP-MS)的方法筛选与MGF300-4L相互作用的宿主蛋白，并进行GO和KEGG通路富集分析；进一步通过分子对接分析、免疫共沉淀和激光共聚焦试验验证与MGF300-4L相互作用的宿主蛋白。IP-MS结果表明，有145个宿主蛋白可能与MGF300-4L存在相互作用。GO和KEGG通路富集分析显示，这145个宿主蛋白主要参与代谢过程、细胞过程以及先天免疫反应过程。通过分子对接预测、免疫共沉淀及激光共聚焦试验证实了MGF300-4L与STAT1的相互作用。本研究为深入理解MGF300-4L与宿主蛋白的相互作用提供了重要线索和靶点。
2025年10期 v.45;No.346 2102-2109页 [查看摘要][在线阅读][下载 697K] [下载次数：281 ] |[网刊下载次数：0 ] |[引用频次：0 ] |[阅读次数：38 ] - 贾思齐;刘蓉蓉;柴迎锦;韩馨馨;魏铭清;吴婷婷;丁颖;陈少秀;邓兴梅;张辉;
环状RNA(circRNA)作为一种非编码RNA,调控多种生物学功能。为探究在天然宿主猪肠上皮细胞中circRNA对猪流行性腹泻病毒(PEDV)复制的影响，本研究筛选PEDV感染非洲绿猴肾细胞(Vero-E6细胞)差异表达circRNAs,生物信息学软件分析比对，筛选出1条差异表达猪源环状RNA ssc＿circ＿PIK3C2A,分析其二级结构，PCR鉴定ssc＿circ＿PIK3C2A环状结构，建立PEDV侵染猪肠上皮细胞(IPEC-J2)细胞细胞模型，TCID_(50)试验验证PEDV病毒滴度；qRT-PCR检测circ＿PIK3C2A在IPEC-J2中的表达量；IPEC-J2中转染ssc＿circ＿PIK3C2A过表达载体，qRT-PCR检测PEDV在IPEC-J2细胞中N基因表达量差异。结果显示，ssc＿circ＿PIK3C2A是具有典型环状结构的猪源环状RNA,PEDV侵染IPEC-J2细胞48 h后，PEDV的病毒滴度为10~(-6)/mL,ssc＿circ＿PIK3C2A在感染6 h时表达量升高且差异极显著(P<0.01),随着侵染时间延长其表达量逐渐下降，24 h表达量最低，且不存在时间依赖性变化；IPEC-J2细胞中过表达circ＿PIK3C2A,PEDV N基因表达量显著下降(P<0.01)。结果表明，PEDV感染IPEC-J2细胞，猪源环状RNA circ＿PIK3C2A表达量降低，PEDV在IPEC-J2复制明显增加，本研究为今后深入研究环状RNA对PEDV复制及其在宿主细胞生理活动中的机制提供依据。
2025年10期 v.45;No.346 2110-2117页 [查看摘要][在线阅读][下载 560K] [下载次数：214 ] |[网刊下载次数：0 ] |[引用频次：0 ] |[阅读次数：15 ] - 焦显芹;王涛;田润博;马世杰;闫志浩;陈红英;
为研发同时预防和控制猪圆环病毒2d基因型(PCV2d)和猪伪狂犬病病毒(PRV)的疫苗，将PCV2d ORF2基因克隆到含有绿色荧光蛋白(EGFP)基因的PRV转移质粒pG中BamHⅠ位点，获得重组质粒pG-PCV2d-EGFP。运用转染试剂ZLip2000将其与PRV变异株3基因缺失毒株gE~-/g~-/TK~-PRV NY DNA转入ST细胞中，经绿色荧光蚀斑纯化，得到表达EGFP的重组病毒rPRV-PCV2d-EGFP。采用CRISPR/Cas9基因双敲除质粒敲除重组病毒中EGFP基因，经蚀斑纯化，拯救出不表达EGFP的重组病毒rPRV-PCV2d。重组病毒rPRV-PCV2d与亲本株gE~-/g~-/TK~-PRV NY具有相近的遗传稳定性，且能够表达PCV2d衣壳(Cap)蛋白。在6周龄小鼠免疫试验中，与商品化PCV2灭活疫苗相比，rPRV-PCV2d刺激小鼠机体诱导了更高的PCV2特异性抗体，且用PCV2d强毒株攻毒后，rPRV-PCV2d显著降低了小鼠心脏、肝脏、脾脏等组织中PCV2d载量。此外，rPRV-PCV2d在小鼠体内激发PRV特异性免疫应答，并能阻止PRV强毒对小鼠的侵袭。表明rPRV-PCV2d具有良好的免疫原性。
2025年10期 v.45;No.346 2118-2125页 [查看摘要][在线阅读][下载 584K] [下载次数：47 ] |[网刊下载次数：0 ] |[引用频次：0 ] |[阅读次数：13 ] - 邱祥琦;孙景玉;何建航;杨星;杨秀文;庄国庆;孙爱军;
RNA结合基序蛋白8A(RNA binding motif protein 8A,RBM8A)是一种RNA结合蛋白，主要参与翻译、细胞周期调控等。此外RBM8A还是外显子连接复合体(exon-junction complex, EJC)的核心因子，在细胞中大量表达尤其是在癌症细胞中异常表达并存在于细胞质和细胞核。研究表明RBM8A在某些病毒复制过程中起关键调控作用如黄病毒科病毒，RBM8A是否参与猪伪狂犬病病毒(pseudorabies virus, PRV)的复制尚未见报道，为探究RBM8A蛋白对PRV复制的影响，设计并构建真核表达质粒pCAGGS-HA-RBM8A,并同时构建sh-RBM8A,通过过表达和抑制RBM8A、qRT-PCR、Western blot检测RBM8A对PRV复制的影响，同时构建PRV-gB标准质粒绘制PRV增殖标准曲线，过表达和抑制RBM8A后，提取DNA,通过qRT-PCR计算病毒拷贝数，进一步检测RBM8A对PRV复制的影响。结果显示，过表达RBM8A能够抑制PRV的复制，同时降低病毒拷贝数，过表达shRBM8A促进PRV的复制，同时提高病毒拷贝数。结果表明，RBM8A蛋白具有抑制PRV复制的作用，本研究为RBM8A的功能挖掘提供参考，为探索抗PRV复制机制奠定了基础。
2025年10期 v.45;No.346 2126-2132页 [查看摘要][在线阅读][下载 442K] [下载次数：21 ] |[网刊下载次数：0 ] |[引用频次：0 ] |[阅读次数：18 ] - 张瀚文;高亚茹;王泱;宋亚鹏;高文明;刘琳;曹晓阳;刘静瑞;李新生;
为分离鉴定鸡传染性支气管炎病毒(infectious bronchitis virus, IBV)并分析其遗传变异情况及致病性，本研究于2023年从河南省某地区疑似鸡传染性支气管炎(infectious bronchitis, IB)感染的病料中分离到2株病毒分离株，命名为CK/CH/HN/SQ202301(简称C2023-1)和CK/CH/HN/SQ202302(简称C2023-2)。进一步研究发现2株分离株分别属于GⅠ-13型和GⅥ型；S蛋白裂解位点均为RRSRR;糖基化位点预测显示2株分离株分别有18和12个N-糖基化位点，均无O-糖基化位点；重组分析显示C2023-1为重组毒株。2株分离株分别感染1日龄SPF雏鸡鉴定其致病性，结果显示，C2023-1株感染能引起雏鸡精神消沉、摇头等临床症状及死亡，病死率为37.5%;C2023-2株感染后未出现临床症状及死亡；病毒载量检测结果显示，2株分离株均持续排毒至第10天，在肾脏、气管和法氏囊中具有较强的复制能力。结果表明，2株分离株基因型不同，故基因组遗传特性及致病性存在较大差异。本研究不仅提供了针对IB的流行病学新数据，有助于深入理解IBV的流行特点和防控难点，并通过分析IBV的变异机制和生物信息，为IBV的生物信息数据增添了宝贵的信息资源。
2025年10期 v.45;No.346 2133-2141+2155页 [查看摘要][在线阅读][下载 800K] [下载次数：46 ] |[网刊下载次数：0 ] |[引用频次：0 ] |[阅读次数：15 ] - 王志仙;巩晓研;李婉梅;凌珏怡;蒋志伟;张伟;殷健;李玉峰;朱国强;王建业;
为了深入研究重组型番鸭细小病毒(recombinant Muscovy duck parvovirus, rMDPV)对雏番鸭毒力增强的机制，本研究采用基因克隆技术，将rMDPV ZW株全基因组克隆入载体质粒pBluescriptⅡ(SK),构建感染性质粒pZW,并在VP3基因内部引入单个碱基突变以区分于亲本株。质粒-脂质体复合物转染于11日龄番鸭胚的绒毛尿囊膜，拯救出携带遗传标记的感染性病毒rZW。rZW与亲本病毒在番鸭胚上表现出相近的半数致死量(ELD_(50))和增殖曲线。3日龄雏番鸭的感染试验表明，rZW及其亲本株的致死率均为100%,剖检显示rZW感染组死亡鸭的肠道可以形成特征性的栓塞。ZW株感染性克隆的构建为深入探索rMDPV的致病机制奠定了基础。
2025年10期 v.45;No.346 2142-2147页 [查看摘要][在线阅读][下载 360K] [下载次数：19 ] |[网刊下载次数：0 ] |[引用频次：0 ] |[阅读次数：8 ] - 段姝宇;郭东升;林子誉;王爱夺;王佳音;宗宪春;李金蔓;王建忠;
鸽圆环病毒(pigeon circovirus, PiCV)在全球广泛流行，是引发幼鸽综合征(YPDS)的主要病原，导致严重的免疫抑制和高病死率。由于PiCV无法进行细胞培养，传统疫苗的开发严重受限，至今尚无有效疫苗。为研发新型PiCV DNA疫苗，本研究克隆了不含核定位信号(NLS)的ΔCap基因，并在其C端融合新城疫病毒(NDV)F蛋白跨膜区和胞内区(ΔCap-TMCT),分别构建了胞内表达型候选DNA疫苗pCAGG-ΔCap和细胞表面表达型候选疫苗pCAGG-ΔCapt。通过间接免疫荧光和Western blot鉴定，证实2种重组质粒在DF1细胞中均可成功表达。进一步免疫小鼠，通过ELISA、流式细胞术和ELISpot检测发现，与pCAGG-ΔCap相比，pCAGG-ΔCapt能显著诱导机体产生更高水平的特异性IgG抗体、T细胞应答和细胞因子分泌，表明将ΔCap-TMCT融合蛋白定位于细胞表面能有效提高其免疫原性，具有作为PiCV DNA疫苗的开发潜力。本研究为PiCV DNA疫苗的设计与研发提供了新的策略和理论依据。
2025年10期 v.45;No.346 2148-2155页 [查看摘要][在线阅读][下载 612K] [下载次数：34 ] |[网刊下载次数：0 ] |[引用频次：0 ] |[阅读次数：18 ] - 朋璐;张娇;韩未尧;张秋红;罗侦;洪勃;刘志昌;周锐;宋云峰;黎璐;
近年来胸膜肺炎放线杆菌(APP)引起的猪传染性胸膜肺炎在我国规模化猪场流行率显著升高，对新流行的菌株进行分离鉴定和生物学特性检测有重要的临床意义。本研究从湖北地区某些疑似暴发猪传染性胸膜肺炎的猪场肺脏病料中分离了4株疑似APP菌株(命名为XB2T-56、JMTLP-443、YD-THB-755、SYZJ-291),对其进行了PCR扩增、多重PCR血清分型等鉴定，检测了分离株的生长能力、溶血活性、生物被膜形成能力等生物学特性，通过药敏试验分析了菌株的耐药情况，并对其中1株菌(XB2T-56)进行了小鼠和仔猪毒力评价。PCR鉴定结果显示，4株临床分离株均为APP血清15型菌株，这4株菌生长速度慢于1型标准菌株，溶血活性较弱，但能形成较强的生物被膜。这些菌株均对头孢氨苄、泰乐菌素、磺胺二甲嘧啶、多西环素敏感性较低，而对头孢噻呋、恩诺沙星敏感。小鼠和仔猪感染试验结果显示，分离株XB2T-56具有较强的毒力，人工鼻内感染引起仔猪急性死亡，肺部呈典型的胸膜肺炎症状，并且能够从病变处分离到感染的血清15型菌株。结果表明，APP血清15型菌株具有较强的毒力，为APP的临床流行特征提供了依据。
2025年10期 v.45;No.346 2156-2162+2230页 [查看摘要][在线阅读][下载 468K] [下载次数：63 ] |[网刊下载次数：0 ] |[引用频次：0 ] |[阅读次数：7 ] - 吴敬泽;杨效林;龚鹏飞;郭莉莉;于嘉辉;毛伟;张双翼;刘博;
为探究PGD_2/DP_1受体途径对大肠杆菌(Escherichia coli,E.coli)诱导奶牛巨噬细胞中细胞因子和损伤相关因子表达的影响，通过建立E.coli诱导奶牛骨髓源巨噬细胞体外模型，检测DP_1受体激动剂对E.coli诱导奶牛骨髓源巨噬细胞中吞噬杀伤能力、损伤相关因子(HMGB-1和HABP-2)mRNA的表达、促炎细胞因子(TNF-α、IL-1β)的分泌、信号通路(MAPK、NF-κB)激活的影响。结果显示，与E.coli感染组相比，DP_1受体激动剂处理组(BW-245C+E.coli组和15d-PGJ2+E.coli组)的吞噬杀伤能力增强(P<0.01);与空白对照组相比，加入E.coli菌液后，HMGB-1和HABP-2 mRNA的表达处于较高水平(P<0.001),促炎细胞因子(TNF-α、IL-1β)的分泌量显著升高，与E.coli感染组相比，BW-245C+E.coli组和15d-PGJ2+E.coli组HMGB-1和HABP-2 mRNA的表达显著降低(P<0.001)、促炎细胞因子(TNF-α、IL-1β)的分泌显著下降(P<0.001)、信号通路(MAPK、NF-κB)的蛋白表达显著下调(P<0.001)。结果表明，DP_1受体激动剂在E.coli诱导奶牛骨髓源巨噬细胞炎性反应过程中具有抑制炎性反应的作用。
2025年10期 v.45;No.346 2163-2169页 [查看摘要][在线阅读][下载 577K] [下载次数：9 ] |[网刊下载次数：0 ] |[引用频次：0 ] |[阅读次数：6 ] - 高姣姣;和晓兰;郑楠;徐晓炜;邵伟;赵艳坤;
探究奶牛源链球菌庆大霉素异质性耐药的流行情况及可能机制。收集奶牛源生乳中分离的39株链球菌，通过微量肉汤稀释法测定庆大霉素等药物对分离菌的最低抑菌浓度(minimum inhibitory concentration, MIC),采用K-B纸片扩散法、菌落谱型分析(population analysis profile, PAP)以及耐药稳定性试验探究链球菌的异质性耐药特征，基于全基因组测序和重测序分析异质性耐药产生的机制。结果显示，K-B纸片扩散法筛出7株疑似异质性耐药菌株，占比17.95%(7/39)。PAP分析显示，3株链球菌L147、L108和L174异质性耐药菌株的MIC与最高非抑菌浓度(maximum noninhibitory concentration, MNIC)比值大于8,且耐药亚群的发生频率范围为1.38×10~(-5)～8.18×10~(-5),大于1×10~(-7),确证为庆大霉素异质性耐药菌株。耐药稳定性试验结果显示，3株链球菌的耐药亚群均不能稳定遗传。全基因组测序结果显示，与参考基因组相比氨基糖苷类抗生素的核糖体靶基因rsmA、rsmB和rsmE存在基因突变，这可能导致链球菌对庆大霉素产生异质性耐药。结果表明，奶牛源中链球菌对庆大霉素发生异质性耐药的现象较高，因此在使用庆大霉素进行临床治疗时应更加注意异质性耐药的发生。
2025年10期 v.45;No.346 2170-2178页 [查看摘要][在线阅读][下载 428K] [下载次数：26 ] |[网刊下载次数：0 ] |[引用频次：0 ] |[阅读次数：8 ] - 赵亚楠;杨丹丹;张玉蝶;郭巾玲;刘冬禹;殷玉和;吴丛梅;
设计合成长效猫ω干扰素融合蛋白并验证其生物功能。根据NCBI猫血清白蛋白及猫ω干扰素序列优化，并构建重组质粒pET-30a(+)-FSA-FeIFNω,将其转化至大肠杆菌BL21(DE3)感受态细胞，IPTG诱导重组蛋白FSA-FeIFNω表达，对表达的包涵体蛋白进行Western blot鉴定，Ni-NTA亲和层析法对复性产物进行纯化，BCA法对纯化后透析、浓缩蛋白浓度进行测定，微量细胞病变抑制法在CRFK/VSV系统下对重组蛋白抗病毒活性进行检测，50%小鼠血浆法检测其体外半衰期，MTT法检测肿瘤细胞增殖抑制活性，小鼠黑色素瘤模型检测抗肿瘤活性。结果显示，成功构建pET-30a(+)-FeIFNω和pET-30a(+)-FSA-FeIFNω表达载体，并在大肠杆菌中获得87 kDa重组FSA-FeIFNω蛋白，纯化后蛋白纯度可达95%,质量浓度为1 g/L,融合表达干扰素生物学活性为2.56×10~6 IU/mg,血浆半衰期明显延长(>24 h),对小鼠黑色素瘤细胞B16-F10半数抑制浓度(IC_(50))为56.01 mg/L。FSA-FeIFNω组明显抑制肿瘤生长，治疗效果优于对照组及其他试验组。本研究所获得的重组FSA-FeIFNω蛋白具有长效作用且具有较好的生物活性。
2025年10期 v.45;No.346 2179-2186页 [查看摘要][在线阅读][下载 364K] [下载次数：33 ] |[网刊下载次数：0 ] |[引用频次：0 ] |[阅读次数：8 ]
- 王瑶;康龙滨;吴仁杰;陈秋勇;王隆柏;白丁平;周伦江;车勇良;
为了解羊源沙门菌基因组特征，本研究应用细菌分离鉴定、生化鉴定、致病性试验、全基因组测序及BLAST比对、整合性接合元件(ICE)ICEfinder筛选和EasyFig比较、质粒Brig比较等方法对沙门菌的基因组特征进行了分析。结果显示，从病羊鼻拭子中分离出1株两端钝圆、散在或成对存在的革兰阴性无芽孢杆菌，其在TSA绵羊血琼脂培养基上呈现灰白色、表面光滑、边缘整齐的圆形小菌落；在XLT-4琼脂培养基上呈现表面光滑的白色圆形菌落。该菌16S rRNA鉴定及生化鉴定为沙门菌。该菌引起豚鼠肠道出血，并致其在48 h内死亡，具有很强的致病性。全基因组序列比对显示该菌与沙门菌diarizonae亚种61:k:1,5,(7)血清型具有高度的同源性。ICE筛选比对结果显示，该菌含有一种新的ICE,这种ICE具有基本遗传结构，分别包含整合剪切模块、移动加工模块、接合对形成模块和调节模块，且含有同一整合酶的不同菌种ICE均具有同一反向重复序列和插入位点tRNA~(Phe)。质粒同源比对显示沙门菌diarizonae亚种61:k:1,5,(7)血清型不同菌株质粒序列也具有高度同源性，该菌质粒与其他沙门菌菌株和大肠杆菌菌株质粒序列的同源性却仅有50%。结果表明，该分离菌株为沙门菌diarizonae亚种61:k:1,5,(7)血清型菌株，该菌株含有一种新的ICE,还含有一种质粒。该研究进一步丰富了沙门菌的分子流行病学，为该菌感染的防治提供了理论依据。
2025年10期 v.45;No.346 2187-2195页 [查看摘要][在线阅读][下载 728K] [下载次数：59 ] |[网刊下载次数：0 ] |[引用频次：0 ] |[阅读次数：10 ] - 赵鹏飞;吴忧;焦陇玲;周明;李永健;张润泽;齐亚银;任静静;
为研究粪肠球菌致羔羊脑膜炎的致病机理，并从circRNA水平解释脑膜炎的发病机制。本试验将致羔羊脑膜炎粪肠球菌(命名为XJ6)回归宿主构建羔羊脑组织损伤模型，然后挑选4个时间段(24、48、60、72 h)的羔羊脑组织进行全基因组转录测序。根据转录组学测序结果，对差异circRNA进行初步筛选，并通过实时荧光定量对转录组学数据的准确性进行验证。结果显示，成功构建了粪肠球菌感染羔羊脑组织损伤模型，GO富集分析结果显示最显著的10个细胞组分，10个生物学进程，10个分子功能。KEGG通路富集结果显示，差异circRNA所靶向的基因主要集中在于调节神经细胞的信号通路上，MAPK信号通路、Rap1信号通路、VDEF信号通路、Apelin信号通路、血管平滑肌收缩以及癌症的发生等信号通路。通过实时荧光定量验证的差异circRNA与转录组学结果完全一致。其中差异分析中的novel＿circ＿0004872是作为改变羔羊血脑屏障通透性的候选circRNA,为探究circRNA对血脑屏障的调节提供了理论参考。
2025年10期 v.45;No.346 2196-2205页 [查看摘要][在线阅读][下载 616K] [下载次数：451 ] |[网刊下载次数：0 ] |[引用频次：0 ] |[阅读次数：15 ] - 谢海萍;李泽伟;陈逸飞;石火英;
旨在了解扬州地区禽源产气荚膜梭菌的流行特性和生物学特性。从不同市场采集的200份肠道样本(鸡源90份、鸭源110份),采用分离培养、形态学观察、染色镜检、生化试验等方法进行细菌分离鉴定，采用K-B纸片法进行药敏试验，PCR检测分离菌的主要毒素并进行分型。根据来源、分型以及耐药性结果选出5株进行多位点序列分型分析，并对不同来源的分离株构建了基于α毒素基因序列的系统进化树。经过形态学和分子生物学鉴定，共分离到61株产气荚膜梭菌，分离率为30.5%,均为A型。药敏结果显示，分离株对阿米卡星的耐药率最高，四环素、复方新诺明的耐药率次之，对头孢曲松、青霉素、阿莫西林和亚胺培南均较敏感。多重耐药情况严重，每个市场均出现了对6种或更多的抗生素耐药的菌株。经多位点序列分析共发现5种不同的ST型(STs),分别为ST833、ST834、ST363、ST835、ST837,除ST363外，其余均为新的ST型。ST363的信息显示与临床分离的人源产气荚膜梭菌一致，因此需要加大关注由产气荚膜梭菌所引起的人畜共感染。5个分离株的α毒素基因在进化树中位于4个不同的分支，显示其遗传多样性，而同一来源不同种源的分离株位于同一分支，说明其有更近的进化关系。结果表明，江苏省扬州地区禽源产气荚膜梭菌的流行主要以A型为主，耐药情况严重，且存在多重耐药。本研究为产气荚膜梭菌流行病学的研究和防控提供了科学依据。
2025年10期 v.45;No.346 2206-2212+2221页 [查看摘要][在线阅读][下载 373K] [下载次数：29 ] |[网刊下载次数：0 ] |[引用频次：0 ] |[阅读次数：7 ] - 刘潇雨;刘国华;刘磊;王爱兵;程天印;段德勇;
阿坝革蜱是仅分布于我国青海、甘肃等省份的蜱种，其可携带伯氏疏螺旋体、梨形虫等病原体，危害较大。但目前针对该蜱种的形态学描述与图像资料仍不够详尽，COX1、ITS2等分子标记的相关数据仍缺失。从甘肃省甘南藏族自治州迭部县牦牛体表采集蜱样本，使用体视显微镜超景深系统对蜱各部位形态学特征进行观察；同时，提取蜱体壁总DNA,设计COX1、ITS2基因引物，PCR扩增后测序，并将测序结果与GenBank中相关序列进行同源性比对，构建系统发育树，为准确鉴定该蜱种提供依据。结果显示，雌蜱呈亚圆形；假头基矩形；孔区卵圆形；基突短而圆钝；须肢粗短，前端略微尖出；盾板略呈圆形，珐琅彩在中部靠后色彩稍浅；颈沟短小且深凹；缘垛明显；气门板逗点形，后缘微弯；生殖孔有翼状突；肛门位于腹正中后1/4处，有半圆形肛沟环绕。雄蜱略呈长卵圆形；假头基无孔区；除基突外珐琅彩覆盖全部表面；生殖孔与基节Ⅱ相对，无翼状突；肛沟较深；基节Ⅳ外距较窄长；其余外表特征均与雌蜱相似。将该蜱种COX1、ITS2基因序列进行比对分析与构建系统发育树后发现阿坝革蜱与草原革蜱、边缘革蜱较其他革蜱种亲缘关系较近。结果表明，阿坝革蜱具有独特的形态学和分子标记特征，综合两者将较易快速、精准鉴定该蜱种。
2025年10期 v.45;No.346 2213-2221页 [查看摘要][在线阅读][下载 874K] [下载次数：14 ] |[网刊下载次数：0 ] |[引用频次：0 ] |[阅读次数：5 ]
- 牟航;付豪;周杰;王舒博;张景媛;马乐弟;张锦;魏述永;
替加环素(tigecycline, TGC)是近年创制的广谱高效的甘氨酰环类四环素，可规避传统四环素的耐药机制，被广泛应用于复杂的皮肤和腹腔感染；但近年来其耐药问题已经出现，耐药机制尚不完全明确。本研究体外诱导弗氏柠檬酸杆菌(ATCC-43864)对TGC耐药，测定诱导前后菌株生长曲线、运动能力、多药敏感性变化及超微结构等表型变化；采用全基因组测序、转录组测序并进行相关验证分析诱导前后菌株基因组及转录组耐药相关基因变化；采用外排泵抑制及Red同源重组分析外排泵、lon缺失、rpsM突变对细菌TGC抗性的影响。结果显示，获得稳定耐药株CF-T-32,其MIC升高32倍，细胞壁和细胞膜之间的周质空间增大，生长能力及运动能力下降，对多西环素、庆大霉素、环丙沙星等28种抗菌药敏感性无显著变化；诱导前后菌株基因组分基本一致，无外源质粒的干扰，但rpsM和lon检测验证到2个错义突变，转录组测序及q-PCR验证发现外排泵AcrAB-TolC中编码基因acrA和acrB显著上调，结合位点相关蛋白编码基因rpsM、rpsJ、rpsC显著下调；外排泵抑制及Red同源重组结果表明，结合位点相关基因rpsM C287T错义突变所致Pro96Leu改变及表达下调可能是导致诱导株TGC抗性的主要因素。
2025年10期 v.45;No.346 2222-2230页 [查看摘要][在线阅读][下载 608K] [下载次数：19 ] |[网刊下载次数：0 ] |[引用频次：0 ] |[阅读次数：7 ] - 肖杏瑶;黄涛;陈莉;龙小川;吴谣;闵夏钰;罗灿;欧进;温鑫;
探讨玉米赤霉烯酮(zearalenone, ZEA)对黄体化颗粒细胞存活和功能的影响，并研究了活化转录因子6(activating transcription factor 6,ATF6)在调控ZEA导致的黄体化颗粒细胞凋亡及功能异常中的作用。利用体外建立的小鼠卵泡颗粒细胞黄体化模型，检测ZEA处理后黄体化颗粒细胞凋亡、激素分泌和相关蛋白的表达，并通过siRNA干扰ATF6的表达，进一步证明ATF6在调控ZEA致小鼠黄体化颗粒细胞损伤中的作用。结果显示，ZEA对黄体化颗粒细胞活力及雌二醇(E_2)、孕酮(P_4)的分泌呈剂量依赖性抑制。低(20μmol/L)、高浓度(40μmol/L)组ZEA处理24 h, p-IRE1、ATF6、StAR的表达均显著升高(P<0.05);GRP78在低浓度处理时无明显变化(P>0.05),高浓度处理时显著升高(P<0.05);ATF4、p-EIF2α在低浓度处理时无明显变化(P>0.05),高浓度处理时显著降低(P<0.05);HSD3B2、CYP19A1在低、高浓度处理时均显著降低(P<0.05)。处理48 h时，ATF6、GRP78在低、高浓度处理时均显著升高(P<0.05);p-IRE1在低浓度处理时显著降低(P<0.05),高浓度处理时无明显变化(P>0.05);ATF4、p-EIF2α、HSD3B2、CYP19A1在低、高浓度处理时均显著降低(P<0.05);StAR在低、高浓度处理时均显著升高(P<0.05)。干扰ATF6的表达能显著降低低浓度组诱导的凋亡(P<0.05),并提高低、高浓度组的激素分泌(P<0.05)。结果表明，ZEA可致黄体化颗粒细胞损伤并激活ATF6信号通路，干扰ATF6可缓解低浓度ZEA诱导的凋亡与激素分泌障碍，但对高浓度ZEA所致损伤作用有限。
2025年10期 v.45;No.346 2231-2238页 [查看摘要][在线阅读][下载 704K] [下载次数：25 ] |[网刊下载次数：0 ] |[引用频次：0 ] |[阅读次数：4 ] - 啜亚南;沈佳雪;要玮玉;王霄;包永占;唐金绪;史万玉;
为探究茵陈水提液对脂多糖(LPS)联合D-半乳氨基糖胺(D-GalN)致小鼠肝脏损伤的缓解作用，通过腹腔注射LPS及D-GalN建立小鼠肝损伤模型，并灌服生理盐水、联苯双酯及不同浓度的茵陈水提液进行分组饲喂。通过计算小鼠肝脏指数，观察病理组织切片，检测小鼠血清中谷丙转氨酶(ALT)、谷草转氨酶(AST)、炎症细胞因子、氧化应激指标、肝药酶代谢水平以及IL-17/TNF通路的表达，探究茵陈水提液缓解小鼠肝脏损伤的作用与机制。结果显示，模型组小鼠肝脏指数显著升高，血清中的ALT、AST水平极显著升高，肝脏组织中IL-1β、IL-8以及TNF-α含量极显著升高，IL-4含量极显著降低，谷胱甘肽过氧化物酶(GSH-Px)、过氧化氢酶(CAT)以及超氧化物歧化酶(SOD)水平极显著降低，活性氧(ROS)及丙二醛(MDA)水平极显著升高，CYP2E1和CYP1A2的蛋白含量及mRNA的表达均极显著上调，TNF、TNFR1、IL-17A、ACT1、IL-6 mRNA的表达水平均极显著上调。结果表明，茵陈水提液对LPS联合D-GalN对小鼠造成的肝损伤有一定的缓解作用。其作用机制包括降低肝药酶代谢水平，缓解氧化应激反应，抑制IL-17/TNF通路的表达以及下调小鼠炎症因子水平。
2025年10期 v.45;No.346 2239-2245+2263页 [查看摘要][在线阅读][下载 889K] [下载次数：29 ] |[网刊下载次数：0 ] |[引用频次：0 ] |[阅读次数：9 ] - 梁慧美;潘嘉睿;林雪儿;赵敏怡;曾欢;陈宇强;宋厚辉;王巍;赵菁华;
针对纳米塑料(NP)和微塑料(MP)是否通过调控细胞自噬损伤动物的神经系统和空间记忆能力进行研究。试验分为对照组、聚苯乙烯纳米塑料组(PS-NP组，0.1μm)和聚苯乙烯微塑料组(PS-MP组，1μm),每组20只小鼠。每天对小鼠灌胃0.5 mL的PS-NP和PS-MP,连续35 d,随后将小鼠断颈处死，取大脑进行检测分析。结果显示，不同直径的PS-NP和PS-MP都对小鼠的大脑产生了不同程度的损伤。在新物体识别、巴恩斯迷宫和Y型迷宫空间记忆行为学检测中，与对照组相比，PS-NP组和PS-MP组的小鼠空间记忆能力显著降低。HE染色结果发现，PS-NP组和PS-MP组小鼠神经元细胞出现固缩，细胞体积变小，染色加深。尼氏小体数目减少，出现溶解和消失。RT-PCR和Western blot结果显示，与对照组相比，灌胃PS-NP和PS-MP的小鼠谷氨酸受体NR1、NR2A和NR2B表达增加，自噬相关蛋白Parkin、LC3B、Beclin1表达受到抑制。研究表明，NP和MP通过抑制细胞自噬通路兴奋小鼠的谷氨酸受体，损伤空间记忆能力。
2025年10期 v.45;No.346 2246-2255页 [查看摘要][在线阅读][下载 782K] [下载次数：22 ] |[网刊下载次数：0 ] |[引用频次：0 ] |[阅读次数：5 ] - 迟志端;王家庆;孟克巴依尔;朱莉仙;艾尔青萨仁高娃;其其格;范瑞文;何牧仁;
胰岛素样生长因子(IGF-1)参与哺乳动物的生长发育，但在皮肤中皮脂腺排泄、B16细胞增殖和迁移的作用尚未见报道。本研究旨在通过检测IGF-1在动物皮肤中的表达而揭示其功能。采用纳米抗体筛选和纯化方法，获得IGF-1纳米抗体(IGF-1-VHH);以IGF-1-VHH为一抗，用Western blot和免疫组织化学检测IGF-1在牛皮肤和羊驼痤疮中的表达，将IGF-1-VHH添加入黑色素瘤B16细胞培养基中，并使用CCK-8和划痕愈合法分别检测IGF-1-VHH对B16细胞增殖和迁移的影响及其可能的分子机制。结果显示，所获得的IGF-1-VHH可应用于免疫组织化学和Western blot检测方法中，在牛皮脂腺和羊驼痤疮中均有较强的IGF-1阳性表达信号。IGF-1-VHH与细胞中IGF-1相结合，通过调控RAS、ERK、RAF的表达对B16细胞的增殖和迁移具有一定的抑制作用。结果表明，IGF-1可能参与动物皮肤中皮脂的分泌和排泄。IGF-1-VHH通过结合IGF-1抑制B16细胞的增殖和迁移，为保证皮肤正常生理功能以及黑色素瘤的临床诊疗提供了理论依据。
2025年10期 v.45;No.346 2256-2263页 [查看摘要][在线阅读][下载 657K] [下载次数：11 ] |[网刊下载次数：0 ] |[引用频次：0 ] |[阅读次数：6 ]