简讯

  • 《Animals and Zoonoses》诚邀您赐稿

    <正>《Animals and Zoonoses》是一本国际同行评审的、由爱思唯尔提供完全开放存取出版的专业性英文学术期刊(ISSN 2950-2489),由吉林大学主办,现为季刊,主编为我国著名的人兽共患病学专家中国工程院院士金宁一研究员和国际著名的动物传染病及预防兽医学专家中国科学院院士陈化兰研究员。学报现已成功入选“中国科技期刊卓越行动计划高起点新刊项目”,被CAS、Scopus等数据库收录,并于2025年正式线上线下出版,国内外公开发行。

    2026年02期 v.46;No.350 228页 [查看摘要][在线阅读][下载 662K]
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研究论文_预防兽医学

  • 猪圆环病毒2型对仔猪回肠菌群的影响

    周晓甜;张亚楠;任静;王飞燕;岳怀宁;袁晨;李潭清;宋勤叶;

    腹泻是猪圆环病毒2型(PCV2)引起的常见症状,为了探究PCV2对仔猪肠道菌群的影响,本研究将6头PCV2抗原和抗体双阴性的断奶仔猪随机分为感染组和对照组,每组3头。感染组仔猪经鼻腔感染10~(6.1) TCID_(50)的PCV2d HBDX2018株,对照组以同种方式接种等体积的细胞维持液。感染后7 d无菌采集各组仔猪的回肠,通过16S rRNA测序,分析各组仔猪回肠的菌群丰度、多样性、群落组成及细菌种类差异。与对照组相比,PCV2感染猪的回肠菌群丰度和构成发生了变化,菌群多样性显著降低,丰富度显著升高。PCV2感染引起仔猪回肠中的梭状芽孢杆菌、木糖葡萄球菌、猪链球菌等致病菌含量显著升高,而猪回肠罗姆布茨菌、苏黎世杆菌、约氏乳杆菌等有益菌含量显著降低。结果表明,PCV2影响仔猪肠道菌群的丰度和构成,导致仔猪回肠菌群失调,部分有益菌减少,有害菌增多。为进一步探索PCV2的致病机制,开发靶向调控肠道菌群的防控技术提供了参考。

    2026年02期 v.46;No.350 231-240页 [查看摘要][在线阅读][下载 2029K]
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  • 猪流行性腹泻病毒ZY株的分离鉴定及致病性

    张帆;周弇扬;陈文镜;陈恒;颜焰;周继勇;顾金燕;

    猪流行性腹泻(porcine epidemic diarrhea, PED)在我国猪场持续流行,防控形势严峻。本研究采用Vero CCL-81细胞,从2023年贵州遵义1处发生腹泻疫情的猪场中分离获得1株猪流行性腹泻病毒(PEDV)毒株,命名为PEDV-ZY。系统发育分析显示,该毒株属于当前流行的G2c亚型。体外复制试验表明,PEDV-ZY在感染Vero CCL-81细胞48 h后病毒滴度达到峰值,为10~(4.5) TCID_(50)/mL。致病性试验结果显示,5日龄仔猪感染该毒株后12 h即出现水样腹泻,感染36 h时鼻拭子和肛拭子中病毒载量分别达10~(6.90±0.26)和10~(9.86±0.90)拷贝/mL。剖检可见肠壁变薄、肠腔扩张并充盈黄色稀薄内容物,所有肠段均可检测到病毒核酸,其中空肠载量最高,达10~(10.43±0.86)拷贝/0.1 g。HE染色显示,空肠和回肠绒毛出现严重空泡化及萎缩脱落,伴有大量炎性细胞浸润;免疫组化结果提示,病毒抗原在空肠和回肠中显著表达。本研究成功分离并鉴定了1株高致病性G2c亚型PEDV毒株,为深入研究其致病机制及PED防控技术提供了重要基础。

    2026年02期 v.46;No.350 241-249页 [查看摘要][在线阅读][下载 2013K]
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  • 浙南地区PEDV流行病学调查及病毒演变分析

    邓玲聪;李笨;郭俊廷;董雨;郝嘉翼;罗嘉艺;方晨曦;刘宇航;王茂鹏;李昌;

    为了解浙江南部地区猪流行性腹泻(porcine epidemic diarrhea, PED)的流行情况及其分子特征,本研究收集了2023—2024年浙江南部4个地区共计90份腹泻样本,进行了猪流行性腹泻病毒(PEDV)流行病学检查,并测定了1株强阳性毒株的病毒全基因组序列、分析其基因组和遗传进化特征及其基因重组事件;同时,预测了PEDV S蛋白糖基化和棕榈酰化位点及分子建模。结果显示,PEDV在浙江地区的阳性率为50%左右。所测序的PEDV ZJLS2023株为GⅡa型毒株,与GⅡa型毒株基因同源性在98%以上。基因重组事件分析结果显示,PEDV ZJLS2023株可能由AH2012和SC2021毒株重组进化而来,在12 537~27 339 nt基因范围内广泛发生重组事件。N链糖基化预测结果显示,ZJLS2023株具有特定的糖基化位点NTTI,并且S蛋白分子建模结果进一步揭示,ZLJS2023毒株在中和表位区域存在多个氨基酸突变位点S525C、N527K、D533N、F539L、N566K和D608E。综上所述,本研究揭示了浙江地区PEDV的流行现状和病毒遗传进化特征,为浙江地区的PEDV防控提供了参考依据。

    2026年02期 v.46;No.350 250-257页 [查看摘要][在线阅读][下载 2198K]
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  • 非洲猪瘟病毒在MA-104细胞上的传代驯化

    殷磊;戈胜强;左媛媛;苏荣杰;初薛霏;李金明;李桂梅;王志亮;

    非洲猪瘟(African swine fever, ASF)是一种高度接触性、出血性的猪病毒性传染病,病死率高达100%,在全球范围内已造成巨大的经济损失。为评估非洲猪瘟病毒(African swine fever virus,ASFV)在传代细胞系中的适应性培养潜力,本研究通过在猪肺泡巨噬细胞(porcine alveolar macrophages, PAMs)和非洲绿猴胚胎肾上皮细胞系(African green monkey embryonic kidney epithelial cell, MA-104)中连续传代ASFV(ASFV-CN2018株),驯化出1株可在MA-104细胞上连续传代的ASFV(CN2018/MA104/ΔRVR株),经全基因组测序比对,发现该毒株在基因组右侧3′端出现了3个基因(MGF100-3L、I7L、I8L)缺失。经特异性qPCR方法检测,发现病毒在MA-104细胞上传至第22代时由混合毒(ASFV-CN2018和CN2018/MA104/ΔRVR)变为纯毒(CN2018/MA104/ΔRVR)。该研究结果对探索ASFV在传代细胞系的驯化途径提供了一定参考。

    2026年02期 v.46;No.350 258-262页 [查看摘要][在线阅读][下载 1227K]
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  • 传染性支气管炎病毒疫苗株4/91反向遗传系统的建立与表达传染性喉气管炎病毒gD蛋白的重组IBV 4/91株的构建与鉴定

    李岩;乔麒龙;李星雨;刘俊杰;杨盼盼;相梦佳;朱玉涛;邱路遥;杨东东;丛雁方;卜德新;张伯顺;韩成昊;于春梅;魏波;王增;李建丽;王白玉;赵军;

    为了研制防控鸡传染性支气管炎病毒(IBV)和鸡传染性喉气管炎病毒(ILTV)混合感染的二联弱毒活疫苗,本研究构建了IBV疫苗株4/91的反向遗传系统。利用反转录PCR扩增涵盖IBV 4/91株基因组的9个相互重叠的片段,将扩增的9个片段与带有IBV基因组两端同源臂、巨细胞病毒(CMV)启动子、丁型肝炎病毒核酶序列(HdvRz)和牛生长激素(BGH)多聚A(polyA)等序列元件的细菌人工染色体(BAC)载体通过环形聚合酶延伸反应组装成含有IBV全长基因组cDNA的感染性克隆pBAC-4/91。为了验证所建立的反向遗传平台的功能,将带有IBV N基因转录调控序列(TRS)的绿色荧光蛋白ZsGreen基因插入到pBAC-4/91中病毒基因组中N基因下游,获得重组感染性克隆pBAC-4/91-ZsGreen。将pBAC-4/91-ZsGreen与表达IBV N蛋白的辅助质粒pCI-neo-N共转染BHK-21细胞,拯救出表达绿色荧光蛋白的重组病毒rIBV-4/91-ZsGreen。病毒拯救结果显示IBV 4/91疫苗株的反向遗传技术平台被成功建立。在此基础上,将pBAC-4/91-ZsGreen中的ZsGreen基因替换为ILTV的糖蛋白D(gD)基因,构建表达ILTV gD基因的重组IBV 4/91株,rIBV-4/91-gD/ILTV。PCR检测结果显示ILTV gD基因可以在重组病毒基因组中稳定存在,Western blot显示重组rIBV-4/91-gD/ILTV可以稳定表达gD蛋白,表明重组病毒具有良好的遗传稳定性。病毒在鸡胚中的复制动态显示,rIBV-4/91-gD/ILTV与亲本IBV毒株具有相似的复制能力。本研究构建的重组病毒rIBV-4/91-gD/ILTV为研发防控鸡传染性支气管炎和传染性喉气管炎的二联活疫苗奠定了基础。

    2026年02期 v.46;No.350 263-270页 [查看摘要][在线阅读][下载 1423K]
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  • 1株泰和乌鸡源J亚群禽白血病病毒的全基因组序列与致病性分析

    胡洁;王军;代雪艳;符雪珍;常宇昕;赵伟;汪世清;米玉玲;廖敏;

    为明确泰和乌鸡种鸡场外源性禽白血病病毒(ALV)的感染现状及其优势亚群的基因组序列及致病性特征,本研究通过ELISA检测血液样品中ALV p27抗原,并进行了病毒分离与鉴定。结果得到1株ALV(TH240808-1)。ELISA检测结果显示,调研种鸡群的外源性ALV阳性率为11.5%,提示该场存在ALV感染,同时,发现该鸡场存在J、K亚群共感染,并且J亚群是主要流行的亚群。env序列分析表明TH240808-1属于J亚群,与J亚群参考株核苷酸一致性为89.9%~95.6%。基因组分析显示,该毒株具有典型复制C型反转录病毒结构,基因组全长为7 652 bp,含完整gag(2 106 bp)、pol(2 622 bp)和env(1 734 bp)开放阅读框,两侧为325 bp长末端重复序列(LTRs)。进一步分析发现,该毒株3′UTR存在205 bp连续缺失,U3区调控元件完全保守,且与蛋鸡源J亚群毒株具有相似突变位点。通过卵黄囊接种7日龄SPF鸡胚构建垂直感染模型,证实该毒株有致病性:感染胚孵化率显著降低,且呈现肝脏多灶性坏死及胚胎发育异常,免疫组化试验证实肝脏病毒增殖,3日龄雏鸡体质量差异极显著(P<0.01),胸腺和法氏囊指数分别于第2周(P<0.01)、第3周(P<0.05)显著下降。本研究首次报道泰和乌鸡源ALV-J的全基因组结构及其致病性,为了解ALV-J在中国的流行及其致病性提供了参考数据。

    2026年02期 v.46;No.350 271-282页 [查看摘要][在线阅读][下载 3415K]
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  • 禽呼肠孤病毒和血清4型禽腺病毒二重微滴式数字PCR检测方法的建立

    万丽军;曾婷婷;王粲;覃俊江;牙侯勋;任红玉;王盛;陈作鑫;罗思思;李孟;谢芝勋;严明;谢丽基;

    为了建立禽呼肠孤病毒(ARV)和血清4型禽腺病毒(FAdV-4)二重微滴式数字PCR(ddPCR)检测方法,本试验根据ARV S1133毒株S1基因序列和FAdV-4 GX2019-010的hexon基因序列保守区设计特异性引物和探针。通过筛选引物和优化反应条件后,建立了二重ddPCR定量检测ARV和FAdV-4的方法,并对建立方法的灵敏度、重复性和特异性进行了测试。结果显示:在引物与探针浓度为2∶1的情况下,筛选得到ARV-JC-F1/ARV-JC-R1、FAdV-4-JC-F1/FAdV-4-JC-R1的反应更好;最佳退火温度为59℃;最低能检测到的ARV和FAdV-4标准品质粒DNA浓度分别为32.67、5.27拷贝/μL;对连续稀释的ARV和FAdV-4标准品质粒DNA检测结果的变异系数均小于15%,同时检测其他多种禽类病毒,均为阴性;以建立的ARV和FAdV-4二重ddPCR和实时荧光PCR同时检测10份临床样品,结果显示一致。结果表明,本研究建立的二重ddPCR方法可定量检测ARV及FAdV-4,具有灵敏度高、重复性好、特异性强等特点,为绝对定量检测ARV及FAdV-4提供了有效的检测技术手段。

    2026年02期 v.46;No.350 283-289页 [查看摘要][在线阅读][下载 1689K]
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  • IBV河北流行株WQ2的遗传进化和致病性分析

    王转转;赵鸿洁;刘一宁;魏子博;冯雨婷;李书光;陈丽;张志强;吴同垒;贾青辉;

    为探究河北地区鸡传染性支气管炎病毒(IBV)流行株WQ2的致病性与遗传进化特征,采用雏鸡攻毒试验评估WQ2株的致病性,观察攻毒后雏鸡的临床症状及病死率,并通过RT-PCR检测病死鸡器官的病毒载量。同时,对WQ2株进行全基因组测序,利用生物信息学方法分析其基因组特征,并与32株参考毒株及疫苗株进行比对,鉴定其进化关系及潜在重组事件。攻毒试验显示,WQ2株感染雏鸡5 d后即可诱发典型呼吸道症状,病死鸡器官RT-PCR检测均为阳性,发病率达100%,表明该毒株具有较强致病力。全基因组测序结果显示,IBV WQ2基因组全长27 241bp,编码14 268个氨基酸。与LX4型毒株相似性在87.8%~90.6%之间,属于同一群。进一步分析发现,IBV WQ2株存在2个重组事件,重组断点位于3 418~3 507 bp和5 863~5 903 bp,提示该毒株可能由LX4型不同毒株重组变异而来。上述结果表明,WQ2株对雏鸡具有高度致病性,其基因组特征表明该毒株可能通过重组进化产生。该研究为IBV的分子溯源分析及疫苗选择策略提供了重要依据。

    2026年02期 v.46;No.350 290-296页 [查看摘要][在线阅读][下载 1278K]
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  • 2022—2024年贵州省阿卡斑病毒分子流行病学调查及羊源毒株的分离与鉴定

    尚佳富;左妤祺;皮思宇;李双乐;刘霞;倪兴维;徐婷婷;周学慧;刘言言;杨晓伟;赵光伟;

    为了解贵州省阿卡斑病毒(Akabane virus, AKAV)的分子流行特征,本研究对2022-2024年间贵州7个市(州)122个养殖场共2 510份牛、羊临床样本进行采集,通过荧光定量PCR方法对其进行AKAV检测,阳性样本测定其S片段和部分M片段序列,分别构建系统进化树,解析其在本地区的优势基因型,部分阳性样本利用牛肾细胞(MDBK细胞)进行毒株分离,通过电镜观察、全基因组测序和理化特性分析对分离毒株进行鉴定。结果发现,共有14个养殖场的111份样本为阳性,场点阳性率和个体阳性率分别为11.48%(14/122)和4.42%(111/2 510),规模化养殖场的场点阳性率为21.67%(13/60),显著高于散养户(1.61%,1/62),牛、羊2种动物的阳性率分别为3.65%(73/1999)和7.44%(38/511),季节性统计显示阳性样本均出现在春、夏两季,秋、冬季节均为阴性;测定38份AKAV阳性样本(18份羊源、20份牛源)的S和M片段,系统进化树分析显示其与基因Ⅱ型毒株位于同一分支,遗传进化关系最为接近,均属于基因Ⅱ型毒株;经MDBK细胞传代培养,自山羊抗凝血中成功分离到1株AKAV毒株,病毒粒子球状,有囊膜,直径约100 nm,对酸、热敏感,对碱不敏感,能凝集鹅红细胞,全基因组同源性比对分析显示该毒株与基因Ⅱ型的JaLAB39和TJ2016最为相似(99.8%以上),将其命名为GZTS-1株(中国典型培养物保藏中心保藏编号CCTCC NO:V202458)。本试验首次对贵州省AKAV的分子流行特征进行系统调查与分析,其结果可为AKAV的防控策略提供参考,对疫苗、诊断产品的开发以及致病机制的深入研究奠定基础。

    2026年02期 v.46;No.350 297-310页 [查看摘要][在线阅读][下载 2319K]
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  • 鸭腺病毒3型感染LMH细胞的生物学特性及其早期免疫应答

    阳佩;王子月;朱春华;程龙飞;万春和;傅光华;陈珍;陈翠腾;梁齐章;黄小红;黄瑜;

    鸭腺病毒3型(duck adenovirus type 3,DAdV-3)属于腺病毒科禽腺病毒属的成员,对鸭致病性强,病死率为35%~43%,近年来DAdV-3发病率越来越高,给我国水禽养殖业带来了巨大的经济损失。目前关于DAdV-3感染和发病的分子机制仍不清楚,且DAdV-3感染宿主早期免疫应答研究较少。本研究建立了DAdV-3感染LMH鸡肝癌(leghorn male hepatocellular, LMH)细胞的模型及其早期免疫应答。结果表明,该DAdV-3能在LMH细胞上稳定增殖传代,且DAdV-3感染LMH细胞后出现典型的细胞病变,测得其病毒滴度TCID_(50)为3.16×10~(-5)/mL,并且该病毒在感染LMH细胞96 h出现复制高峰。DAdV-3感染LMH细胞后病毒颗粒在细胞核中呈晶格状排列,且在胞质中观察到有包裹病毒颗粒的自噬小体囊泡样结构。进一步通过qRT-PCR法检测病毒感染LMH细胞后早期细胞因子的表达,并分析其动态变化,结果显示炎症细胞因子IL-1β、IL-8、TNF-α表达显著上调,Ⅰ型干扰素IFN-α、IFN-β表达下调。本研究初步阐明了DAdV-3感染LMH细胞的生物学特性及其早期免疫应答,为进一步深入解析DAdV-3感染宿主细胞的免疫反应机制提供科学参考。

    2026年02期 v.46;No.350 311-318页 [查看摘要][在线阅读][下载 1938K]
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  • 1株猪源肠出血性大肠杆菌O157:H7菌株的比较基因组学分析及O毒力岛基因检测

    周艳;万启旸;沈元朝;李俊;朱树娇;张辉;包红朵;王冉;

    为分析1株猪源肠出血性大肠杆菌O157:H7菌株EO157-1在种内的基因组差异和O毒力岛(OIs)基因,本试验以从养猪场分离得到的肠出血性大肠杆菌O157:H7菌株EO157-1基因组为研究对象,结合NCBI公开的14株大肠杆菌基因组序列进行比较基因组学分析,解析不同肠出血性大肠杆菌O157:H7基因组差异;采用PCR方法检测EO157-1的O毒力岛基因OI-36(nleB2、nleC、nleD和nleH1-1)和OI-122(nleB、nleE、ent/espL2、Z4321、Z4326、Z4332和Z4333)。结果显示,15株大肠杆菌共鉴定出6 519个直系同源基因家族,包含80 333个基因,EO157-1特有基因家族数量为74个,包含76个基因。对EO157-1特有基因家族分别进行GO和KEGG数据库富集聚类分析,结果分别会有20个和13个类别,所含基因数量最多的类别分别包括[4Fe-4S]簇结合活性和各种环境下的微生物代谢。选取4个菌株EO157-1、USDA5095、EDL933和86-24的基因家族聚类并绘制韦恩图,EO157-1的特有基因家族数量为118个,对4个菌株的共有基因和特有基因家族分别进行GO和KEGG数据库富集聚类,表明共有基因家族均为20个类别,所含基因数量最多的类别分别包括ATP结合和次级代谢产物的生物合成;4个菌株的特有基因家族分别20个和13个类别,所含基因数量最多的类别分别包括菌毛组装和各种环境下的微生物代谢。对菌株EO157-1、EDL933和USDA5095基因组进行Mauve共线性分析表明,EO157-1与EDL933基因组的共线性区域较高。基于OIs的遗传进化树分析表明15个菌株分为11个分支。EO157-1为单独的一个分支;PCR检测结果证实菌株EO157-1含有OI-36(nleB2、nleC、nleD和nleH1-1)和OI-122(nleB、nleE、ent/espL2、Z4321、Z4326、Z4332和Z4333)基因。本研究通过比较基因组学揭示EO157-1在种内的基因组差异,鉴定含有OIs毒力基因,为研究肠出血性大肠杆菌O157:H7的致病机制奠定了基础。

    2026年02期 v.46;No.350 319-327页 [查看摘要][在线阅读][下载 2211K]
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  • 1株牛肺炎源副乳房链球菌的分离鉴定及全基因组测序分析

    付嘉璐;桑伟沦;王鹏澌;杨淑华;李鹏;

    从辽宁沈阳地区发生肺炎的病死牛肺脏组织中分离得到1株优势菌株,通过对菌株进行形态学观察、生化试验、PCR鉴定、16S rRNA序列分析及动物回归试验,确定分离菌株为副乳房链球菌。药敏试验结果显示其对青霉素、头孢噻肟、诺氟沙星、恩诺沙星敏感,对链霉素、磺胺异噁唑耐药;生化试验结果表明该菌株可发酵D-甘露醇、D-葡萄糖、麦芽糖、D-山梨醇、蔗糖和乳糖,不可发酵用L-阿拉伯糖和枸橼酸盐;全基因组测序结果显示分离菌株副乳房链球菌的全基因总长为1 201 025 899 bp, C+G的含量为35.06%,预测含有2 520个编码基因,11种耐药基因,495种毒力因子。本研究成果可为充分了解辽宁地区牛群中副乳房链球菌的流行情况和制定防控措施提供理论依据。

    2026年02期 v.46;No.350 328-337页 [查看摘要][在线阅读][下载 2857K]
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  • 沙门菌RPA-LFD快速检测方法的建立与应用

    廖怡雯;叶景芬;武绍碧;杨婉;罗雪;吴文飞;杨琦;

    将重组酶聚合扩增(recombinase polymerase amplification, RPA)技术与胶体金侧向流试纸条技术(lateral flow dipstick, LFD)结合,建立一种快速、高特异性和高灵敏度的沙门菌检测方法。以沙门菌ttrRSBCA基因为靶标,通过引物设计、反应条件优化来建立Salmonella-RPA-LFD检测方法,评估其特异性、灵敏度等性能,并对17份鸡泄殖腔拭子进行验证。结果显示:Salmonella-RPA-LFD方法在35℃20 min内即可完成检测;与大肠杆菌、肺炎克雷伯菌等7种常见病原菌没有交叉反应,且能检测出不同血清型的沙门菌;其灵敏度可达10~0拷贝/μL,RPA-LFD阳性率与国家标准文件方法的结果一致。结果表明,建立的Salmonella-RPA-LFD方法特异性强、灵敏度高,可快速、准确地检测沙门菌。

    2026年02期 v.46;No.350 338-343页 [查看摘要][在线阅读][下载 1354K]
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  • 华南虎源粪肠球菌的分离鉴定及其生物学特性

    许静茹;陈腾腾;邓莹滋;范思思;丘淑琪;廖玉婷;林伟业;李雪瑾;肖晓子亿;林锡潘;闫娜娜;林开雄;范克伟;

    为探明1例福建梅花山华南虎繁育研究所华南虎腹泻病因,采集发病华南虎肛拭子进行细菌分离纯化,通过形态学观察和分子生物学进行细菌种类鉴定,并对该分离菌进行毒力基因和耐药基因检测、小鼠致病性试验及药敏试验。结果显示,从发病华南虎肛拭子中分离到1株优势菌,在血平板呈灰白色、微微隆起的菌落;LB琼脂培养基上呈表面光滑、湿润、边缘整齐的乳白色菌落;革兰染色后镜检可见单个或成双的卵圆形球菌,将该分离菌命名为Tiger21836F。16S rRNA核苷酸序列比对结果显示,该分离菌与其他14株参考菌株16S rRNA的核苷酸序列同源性为81.4%~99.8%。毒力基因及耐药基因检测结果显示,该分离菌携带有1种毒力基因cylA及6种耐药基因ermB、sul2、floR、blaOXA、blaPSE和qnrD。小鼠致病性试验表明,该分离菌有较强致病力,造成死亡小鼠肝脏、脾脏、肺脏、肾脏、胸腺、肠道严重的病理损害。药敏试验结果表明,17种常用抗菌药物中分离菌仅对链霉素敏感,对氯霉素等4种抗菌药物中度敏感,对四环素等12种抗菌药物均表现耐药。本研究从腹泻华南虎肛拭子中分离到1株具有较强致病力并表现多重耐药的粪肠球菌,为华南虎等野生动物的细菌性疾病的防控提供了重要的理论依据。

    2026年02期 v.46;No.350 344-351页 [查看摘要][在线阅读][下载 1596K]
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研究论文_人兽共患病

  • 多杀性巴氏杆菌yfeA基因在其致病性及冷应激耐受性中的作用

    刘心语;吕荣华;邱羊羊;赵光夫;何芳;彭远义;李能章;

    多杀性巴氏杆菌(Pm)是一种重要的人畜共患性病原。本研究通过同源重组基因缺失方法,探讨yfeA基因在Pm致病性及低温耐受性等方面的作用。结果显示,yfeA基因缺失可导致Pm菌株的致病性显著下调,其对铁的摄取能力、荚膜产生量及生长速率均显著低于野生株。此外,yfeA基因的缺失显著增强了菌株对头孢类、氨基糖苷类、新霉素、四环素类和大环内酯类等抗生素的敏感性。进一步研究发现,yfeA基因可通过调节冷应激相关蛋白CspD基因及其转录调控蛋白Rho基因的表达,增强Pm菌株对低温环境的适应性,yfeA基因的缺失使菌株在低温条件下的存活率更低。本研究揭示了yfeA基因通过整合铁代谢、荚膜合成与冷应激通路协同调控Pm的致病性与环境适应性,为靶向干预Pm感染及耐药性防控提供了靶点与理论依据。

    2026年02期 v.46;No.350 352-358页 [查看摘要][在线阅读][下载 2001K]
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  • 牛种布鲁菌S19疫苗株鉴别PCR检测方法的建立及应用

    吕皓晴;罗意;袁律峰;储岳峰;许健;

    本研究建立1种能够快速鉴别牛种布鲁菌S19株的方法,并初步评价其应用价值。通过基因组共线性分析,鉴定牛种布鲁菌S19与A19基因组特异性区间,设计特异性引物。筛选出1对S19株PCR检测引物,建立了S19疫苗株鉴别诊断PCR检测方法,对该方法进行优化后,进行特异性、灵敏度试验以及临床样本检测。结果表明,利用筛选出的最适引物建立了S19疫苗株鉴别诊断PCR检测方法,能特异性扩增出2个目的条带:S19(249 bp)、A19(954 bp),探索出最佳延伸时间和退火温度分别为20 s和60℃;对布鲁菌标准株及疫苗株DNA样品(S2308、M28、M5、M5-90、M5-90Δbp26、Rev.1、S2)也能进行区分;与其他病原(牛结核分枝杆菌、多杀性巴氏杆菌、金黄色葡萄球菌、沙门菌、牛支原体、大肠埃希菌、小肠结肠耶尔森菌)无交叉反应;对构建的阳性标准质粒的最低检测拷贝数S19为10~1拷贝/μL、A19为10~2拷贝/μL;46份布鲁菌临床样品经检测均符合预期。本研究建立的鉴别PCR方法可用于布鲁菌S19感染的快速鉴别诊断及流行病学调查,具有临床便捷、快速诊断的特点。

    2026年02期 v.46;No.350 359-365页 [查看摘要][在线阅读][下载 1484K]
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研究论文_基础兽医学

  • 利用CRISPR/Cas9技术构建表达神经生长因子的BoHV-1重组病毒

    其根;刘春羽;张杨;蔺冰冰;赵洪哲;刘闯;邹健;王凤雪;温永俊;

    为探究利用CRISPR/Cas9基因编辑系统构建重组病毒BoHV-1ΔgE/NGF mCherry~+的可行性和重组病毒的生长特性及蛋白表达情况,本研究基于生物信息学分析预测并优化NGF蛋白序列后,采用酶切连接法将其与BoHV-1的左右同源臂片段连接,构建供体质粒pCDNA3.1-LgE-NGF-mCherry-RgE。将该质粒与CRISPR/Cas9切割质粒pX459 EGFP sgRNA1和pX459 EGFP sgRNA2共转染至Vero E6细胞,并感染BoHV-1ΔgE/EGFP~+,通过倒置荧光显微镜筛选获得重组病毒BoHV-1ΔgE/NGF mCherry~+。同时,以PCR和RT-PCR方法验证基因整合与转录情况,利用蚀斑克隆和病毒滴定法分析病毒增殖特性,并采用Western blot检测蛋白表达水平。结果显示,利用CRISPR/Cas9基因编辑技术,成功将NGF-mCherry片段插入BoHV-1 gE基因位点,进一步对拯救出的重组病毒BoHV-1ΔgE/NGF mCherry~+鉴定,结果显示整合到重组病毒BoHV-1ΔgE/NGF mCherry~+中的NGF基因能够转录与表达出大小为37 kDa目的条带,该重组病毒与BoHV-1ΔgE/EGFP~+的病毒滴度相近,但蚀斑形态存在差异,病毒复制能力无显著性差异。上述结果为BoHV-1作为神经退行性疾病治疗的病毒递送工具奠定了基础。

    2026年02期 v.46;No.350 366-375页 [查看摘要][在线阅读][下载 1979K]
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  • RNA结合蛋白TDP-43与IBV N蛋白互作并促进病毒复制

    代雪艳;胡洁;符雪珍;常宇昕;赵伟;廖敏;

    为探究宿主蛋白TDP-43在禽传染性支气管炎病毒(infectious bronchitis virus, IBV)复制中的作用,本研究通过免疫共沉淀和免疫荧光试验,首次证实IBV N蛋白与RNA结合蛋白TDP-43存在相互作用。进一步结构域分析发现,TDP-43羧基端(C-terminal)的甘氨酸富集区是其与N蛋白结合的关键功能域;过表达TDP-43促进IBV mRNA的转录水平和蛋白表达量,而通过shRNA慢病毒介导的TDP-43敲低试验发现,其抑制病毒复制;RNA免疫沉淀试验证进一步证实TDP-43能够显著富集IBV mRNA。本研究首次阐明IBV通过劫持宿主TDP-43蛋白,借助其与病毒N蛋白的互作及对病毒mRNA的富集,构建有利于病毒复制的微环境,进而促进自身复制,为深入理解冠状病毒的宿主适应机制及宿主抗病毒靶点的筛选提供了新视角。

    2026年02期 v.46;No.350 376-384页 [查看摘要][在线阅读][下载 1795K]
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  • 猪源清道夫受体A6的原核表达和单克隆抗体的制备

    张曼曼;何佳依;余群;董雅静;钱莺娟;陈欢;郑龙三;

    清道夫受体A6(MARCO)是清道夫受体A类家族成员,主要表达于巨噬细胞表面,在机体抵御病原体入侵的免疫防御机制中具有重要作用。为了制备针对猪源MARCO蛋白的单克隆抗体,本研究以NCBI数据库中猪MARCO蛋白基因序列(GenBank:NM_001256366.1)为参考,构建原核表达质粒pET-28a-MARCOΔTM。通过Rosetta表达系统表达重组蛋白MARCOΔTM,纯化后免疫BALB/c小鼠。利用细胞融合技术制备杂交瘤细胞,间接ELISA筛选阳性克隆。结果显示,本研究成功表达了可溶性MARCOΔTM蛋白,并获得了4株能稳定分泌抗MARCO单克隆抗体的杂交瘤细胞。其中,1H7、2H11和9A12的重链为IgG1,8E8的重链为IgG3,4株抗体的轻链均为Kappa。Western blot结果表明,所获得的单克隆抗体能够特异性识别外源性和内源性表达的MARCO蛋白。间接免疫荧光(IFA)检测结果显示,4株单克隆抗体均能与过表达的MARCO蛋白发生特异性结合,产生绿色荧光信号。免疫共沉淀(IP)试验进一步证实,单克隆抗体8E8和1H7能够有效富集过表达的MARCO蛋白。本研究制备的抗体为深入探究猪MARCO蛋白的生物学功能及其在免疫防御中的作用机制提供了重要的生物材料和研究工具。

    2026年02期 v.46;No.350 385-393页 [查看摘要][在线阅读][下载 1779K]
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  • 鼠源甘露糖受体CTLD 4-5结构域蛋白的原核表达及多克隆抗体制备

    宁鹏;刘书嘉;焦鑫宇;李丽敏;

    为表达鼠源甘露糖受体(MR)胞外结构域CTLD 4-5蛋白,制备多克隆抗体,本研究使用BALB/c小鼠腹腔巨噬细胞中扩增MR CTLD 4-5基因,并构建至pET-30a(+)载体,转化至BL21(DE3)感受态后进行蛋白表达;将纯化后的MR CTLD 4-5蛋白免疫獭兔,制备多克隆抗体。试验结果表明,MR CTLD 4-5蛋白可成功在原核表达系统中表达,并在16℃、150 r/min、IPTG浓度为0.5 mmol/L、诱导表达时间12 h时,表达量最高;Western blot结果显示,制备的兔源多克隆抗体可与CTLD 4-5蛋白出现特异性条带,且稀释度可达1∶100 000。IFA试验表明,该多克隆抗体能够与小鼠腹腔巨噬细胞反应,出现绿色荧光信号,且与猪肺泡巨噬细胞(PAM)存在交叉反应。综上所述,本研究成功表达出MR CTLD 4-5蛋白,制备的兔源多克隆抗体与MR CTLD 4-5蛋白发生特异性反应,并且识别小鼠腹腔巨噬细胞及PAM细胞表面的MR,为MR在免疫细胞中的功能研究奠定了基础。

    2026年02期 v.46;No.350 394-401页 [查看摘要][在线阅读][下载 1956K]
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研究论文_临床兽医学

  • 5种植物源黄酮类化合物对大肠杆菌性肠炎的治疗作用

    李卓;司晓慧;孙志刚;王婧;董虹;刘均;李复煌;刘晓晔;

    首先建立小鼠大肠杆菌性肠炎模型,选取包含酚羟基和/或异戊二烯基功能团的5种黄酮类化合物进行治疗;通过检测小鼠体质量变化、疾病活动指数、结肠长度等观测黄酮类化合物的治疗效果,采取组织染色和炎性因子检测等方法评估黄酮类化合物抗细菌性炎症的药效。结果显示,5种黄酮类化合物中槲皮素效果最好,可以有效地降低小鼠的病死率,改善体质量下降和DAI评分升高的症状。同时,有效缓解结肠长度缩短的病理变化,减少小鼠结肠组织中炎症细胞的数量,减轻结肠组织病理损伤程度。进一步通过ELISA检测小鼠血清中炎性因子的变化,发现槲皮素能显著抑制由大肠杆菌诱导的IL-1β、IL-6、IL-8以及TNF-α炎性因子的释放。结果表明,植物源黄酮类化合物对治疗大肠杆菌性肠炎有良好的治疗效果,有望为临床挖掘抗细菌性炎症药物提供用药方案。

    2026年02期 v.46;No.350 402-411页 [查看摘要][在线阅读][下载 2327K]
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  • m6A去甲基化酶FTO通过调控SREBP-1/FAS途径促进BVDV复制

    梁雨欣;刘珊珊;徐茂桢;张泽财;刘宇;周玉龙;朱战波;

    为了探究m6A去甲基化酶FTO对牛病毒性腹泻病毒(bovine viral diarrhea virus, BVDV)复制的影响,本研究通过构建敲低及过表达FTO的牛鼻甲骨(BT)细胞模型,感染BVDV NADL株,利用qRT-PCR、Western blot和ELISA检测脂肪酸合成途径关键调控因子SREBP-1及下游关键酶FASN的表达、游离脂肪酸(FFAs)及甘油三酯(TG)的合成以及BVDV复制情况。结果显示,敲低FTO抑制FAS途径的调控因子SREBP-1和关键酶FASN的表达,同时FFAs和TG的含量显著减少,并抑制了BVDV复制;相反,过表达FTO则促进了脂肪酸合成,从而促进BVDV复制。结果表明,FTO通过表观遗传调控SREBP-1/FAS通路驱动宿主脂肪酸合成,为BVDV复制提供必需脂质成分和能量,为开发靶向宿主脂代谢的抗病毒策略提供了理论依据。

    2026年02期 v.46;No.350 412-417页 [查看摘要][在线阅读][下载 1395K]
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  • 人参皂苷Rd对大鼠穿透性角膜移植生长愈合的影响

    申梦婷;张玉珠;谢光洪;

    本研究旨在探讨人参皂苷Rd对大鼠同种异体穿透性角膜移植术后免疫排斥及愈合的调控作用。通过建立SD大鼠角膜移植模型,将52只大鼠分为自体移植对照组(A组)、模型组(B组)、人参皂苷Rd低/中/高剂量组(C/D/E组)及环孢素A阳性对照组(F组),术后评估角膜排斥指数(RI)、IL-10与TGF-β1分泌水平及CD4~+CD25~+调节性T细胞(Treg)比例。结果显示,与模型组相比,人参皂苷Rd各剂量组(尤其高剂量E组)显著降低RI(P<0.000 1),减轻角膜混浊、水肿及新生血管生成,并促进术后21 d角膜透明性恢复。ELISA检测结果表明,人参皂苷Rd显著提升血清IL-10和TGF-β1水平(P<0.001),流式细胞术证实其可增加脾脏和外周血Treg比例(E组升高最显著,P<0.001)。H&E染色结果显示,人参皂苷Rd治疗组角膜基质水肿及炎性浸润明显减轻。结果表明,人参皂苷Rd通过上调抗炎因子及促进Treg增殖,有效抑制免疫排斥反应,增强免疫耐受性,其作用呈剂量依赖性,且高剂量效果与环孢素A相当。本研究为人参皂苷Rd作为新型免疫调节剂在角膜移植中的应用提供了试验依据。

    2026年02期 v.46;No.350 418-425页 [查看摘要][在线阅读][下载 1948K]
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  • 金银花提取物调控PI3K/AKT/mTOR通路抑制犬乳腺肿瘤细胞活性及机制

    孙真真;张玉珠;赵艺鸿;谢光洪;郑慧华;

    旨在探讨金银花提取物对犬乳腺肿瘤细胞的抗肿瘤活性及其潜在机制,首先通过CCK-8法评估其对正常细胞(犬乳腺上皮细胞PETCC3059、小鼠乳腺上皮细胞EpH4-Ev)及肿瘤细胞(CHMm、CHMp)的毒性差异。结果显示,正常细胞在0~20 g/L质量浓度下未表现毒性,PETCC3059和EpH4-Ev分别在40及60 g/L时活性受抑;而肿瘤细胞CHMm和CHMp在5.0及2.5 g/L时即出现显著抑制(P<0.05),且CHMm敏感性更高,故选择其进行后续试验。通过划痕试验发现,5.0 g/L金银花提取物显著抑制CHMm细胞迁移,24 h后迁移率由对照组的66.33%降至13.71%(P<0.001)。Western blot检测表明,金银花提取物以剂量依赖性方式抑制PI3K/AKT/mTOR通路活化。流式细胞术证实,2.5和5.0 g/L处理组细胞凋亡率显著升高,且p38 MAPK磷酸化水平与凋亡趋势一致,呈现剂量依赖性上调。综上,金银花提取物通过抑制PI3K/AKT/mTOR通路活化和激活p38 MAPK信号,选择性抑制犬乳腺肿瘤细胞增殖、迁移并诱导凋亡,而对正常细胞毒性较低,本研究为开发新型抗肿瘤药物提供了试验依据。

    2026年02期 v.46;No.350 426-432页 [查看摘要][在线阅读][下载 1975K]
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  • 葛根芩连汤调控砷暴露小鼠肠黏膜损伤的网络药理学分析及试验验证

    李雪华;徐加加;崔金忠;胡晨松;廖翔;张艳芳;陈磊山;

    基于网络药理学分析及动物试验验证探究葛根芩连汤(GeGen QinLian decoction, GQD)缓解砷暴露小鼠肠黏膜损伤的作用机制。通过DisGeNET、OMIM数据库获取砷暴露诱导肠黏膜损伤相关疾病靶点,运用TCMSP数据库获取葛根芩连汤有效靶点;并借助STRING数据库和Cytoscape软件将疾病和药物交集靶点绘制蛋白质-蛋白质相互作用(PPI)网络图并筛选出核心靶点;借助Metascape在线分析平台进行GO和KEGG富集分析、使用分子对接技术探究主要成分与核心靶点间的结合活性;并通过建立砷暴露小鼠模型进行体内试验验证。网络药理学和分子对接结果显示,葛根芩连汤主要通过调节AKT丝氨酸/苏氨酸激酶1(AKT serine/threonine kinase 1,AKT1)、肿瘤蛋白p53(tumor protein 53,TP53)、丝裂原活化蛋白激酶3(mitogen-activated protein kinase 3,MAPK3)的表达调控肠黏膜损伤;动物试验结果显示,与对照组相比,As组的AKT1、MAPK3、TP53 mRNA表达均显著升高(P<0.05,P<0.01);而As+GQD组MAPK3、TP53的表达量均显著低于砷暴露组(P<0.05,P<0.01)。HE病理结果显示,对照组肠绒毛结构清晰,黏膜上皮完整,固有层内肠腺呈直管状,排列紧密;As组肠道黏膜上皮灶性排列不规则,偶见细胞坏死,出现大量的炎性细胞;而As+GQD组黏膜上皮排列较规则,细胞坏死消失,炎性细胞数量减少。结果表明,葛根芩连汤对砷暴露导致的小鼠肠黏膜损伤有良好的缓解作用,其机制可能与抑制MAPK3、TP53等相关基因的表达有关。

    2026年02期 v.46;No.350 433-441页 [查看摘要][在线阅读][下载 2523K]
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研究论文_动物科学

  • 酵母细胞壁多糖对四川白鹅血清生化指标、肠道形态、肠道屏障和肠道菌群的影响

    谢雨霏;张梦瑶;李锡锋;桂福星;邹涛;仲崇华;程国强;毕师诚;曹立亭;

    旨在探究酵母细胞壁多糖(YP)对四川白鹅血清生化指标、肠道形态、肠道屏障以及盲肠微生物群的影响。80只1日龄健康雏鹅,适应性饲养5 d后随机分为2组,即空白对照(CON)组和YP组,每组4个重复,每个重复10只。CON组饲喂基础饲粮,YP组在基础饲粮的基础上添加0.1%YP,正式试验期40 d。使用试剂盒检测血清生化指标,HE染色观察十二指肠、空肠和回肠肠道形态,联合16S rRNA高通量测序与Pearson相关性分析,阐明肠道菌群与血清生化之间的相关性。结果显示,与CON组相比,饲粮中添加0.1%YP可提高四川白鹅血清AST、TP、ALB和GLB含量,极显著增加空肠VH(P<0.01),显著增加回肠CD和VH/CD以及十二指肠VH/CD(P<0.05),显著增加空肠中Cluadin、Occuldin和ZO-1等基因mRNA表达水平(P<0.05);此外,肠道p_Bacteroidota和p_Proteobacteria的相对表达丰度增加,f__Peptostreptococcaceae和g__Romboutsia的相对表达丰度显著减低(P<0.05),p__Firmicutes、f__Erysipelotrichaceae和g__Turicibacter的相对表达丰度降低。结果表明,饲料中添加0.1%YP可改善四川白鹅肠道形态,增强空肠黏膜屏障功能,提高有益菌丰度的同时降低有害菌丰度,维持肠道菌群稳定,进而抑制肠道炎症,调控脂质与蛋白质的分泌、吸收和代谢,增强肠道抗损伤能力。

    2026年02期 v.46;No.350 442-450页 [查看摘要][在线阅读][下载 2088K]
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综述

  • 冠状病毒与自噬的“攻防战”:交互机制及对病毒复制的调控研究

    栾润新;商译元;陈铭杰;李森岳;王攀林;宋丹;张亚南;李向臣;武永淑;

    近年来,冠状病毒(coronaviruses, CoVs)对人类及动物健康造成严重威胁。严重急性呼吸综合征冠状病毒2型(severe acute respiratory syndrome coronavirus-2,SARS-CoV-2)大流行导致人类大量感染、死亡及全球性公共卫生问题;动物领域中,猪流行性腹泻病毒(porcine epidemic diarrhea virus, PEDV)、猪急性腹泻综合征冠状病毒(SADS-CoV)等严重影响畜牧业,致动物生长繁殖障碍及死亡,造成巨大的经济损失。自噬作为真核细胞中高度保守的分解代谢过程,在抵御病毒入侵时能够通过降解病毒颗粒或成分发挥抗病毒作用。然而,在长期共同进化过程中,病毒已发展出多种策略来干扰或逃避自噬过程,甚至在某些情况下利用自噬逆转这一宿主防御机制,形成复杂的分子博弈。本文综述了CoVs与自噬相互作用的分子机制及其对病毒复制的影响。研究表明,CoVs通过调控能量感知通路、炎症相关通路和内质网应激通路诱导或抑制自噬,从而改变宿主细胞环境;还可以通过调控自噬体的形成与成熟,构建有利于病毒复制与免疫逃逸的微环境;此外宿主通过自噬选择性降解病毒成分或维持细胞内稳态间接抑制病毒复制。这些发现揭示了CoVs与自噬相互作用的复杂机制,为开发靶向自噬的抗病毒策略提供了理论依据。

    2026年02期 v.46;No.350 451-459页 [查看摘要][在线阅读][下载 1226K]
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  • 乙型脑炎病毒结构蛋白和非结构蛋白调控宿主先天免疫的研究进展

    胡雯雯;汤德元;曾智勇;王彬;周敏;毛茵茗;周飘;何松;张力;高邡鑫;

    乙型脑炎病毒(Japanese encephalitis virus, JEV)是一种蚊媒性人兽共患病病原体,感染引起的日本乙型脑炎(JE),简称乙型脑炎或乙脑,在世界范围内流行,给全球的公共卫生安全及农业发展构成巨大威胁。目前,JE尚无特效治疗方法或药物,接种疫苗是最佳的防控措施,然而现有疫苗具有一定局限性,导致JE很难根除。众多研究表明JEV编码蛋白能够调控宿主先天免疫反应,引发宿主免疫抑制,并且调控机制复杂多样,导致JE防控成为一大难点。因此,本文就近年JEV结构蛋白和非结构蛋白调控宿主先天免疫的各种机制进行综述,以期为阐明JEV的致病机制及JE的防控提供参考。

    2026年02期 v.46;No.350 460-468页 [查看摘要][在线阅读][下载 1189K]
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